Orientador: Valéria Cristina Sandrim / Resumo: A pré-eclâmpsia é uma das principais causas de mortalidade e morbidade entre as gestantes no Brasil e em vários países. A fisiopatologia desta doença é complexa e envolve vários processos. Um desses relaciona-se a um status oxidativo, onde há prevalência de produção de radicais livres e/ou redução da atividade antioxidante. Recentemente, vem sendo explorado como terapia em várias doenças o antioxidante resveratrol, presente em grandes quantidades principalmente nas uvas vermelhas. O resveratrol, além de sequestrar espécies reativas de oxigênio e possuir outros mecanismos de ação, atua ativando o fator de transcrição Nrf2 (nuclear factor, erythroid 2-like 2), responsável pela transcrição de diversos genes que promovem a proteção celular através da codificação de enzimas antioxidantes, como a hemeoxigenase (HO-1). Logo, o objetivo desse estudo foi verificar os efeitos do resveratrol sob a via de ativação do Nrf2 e seus genes alvos em modelo in vitro de pré-eclâmpsia. Esse modelo consiste na incubação de plasma/soro de pacientes pré-eclâmpticas em células endoteliais a fim de se mimetizar a disfunção endotelial característica dessa síndrome. Além disso, foi feito um estudo clínico piloto em que gestantes pré-eclâmpticas beberam suco de uva de forma aguda e tiveram o soro coletado após 1 hora da ingestão para incubação nas células endoteliais. Concluímos que há um potencial de uso do resveratrol na prevenção e tratamento da pré-eclâmpsia. Considerando ainda o uso do suco de uva a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Preeclampsia is one of the main causes of mortality and morbidity among pregnant women in Brazil and in several countries. The pathophysiology of this disease is complex and involves several processes. One of these is related to an oxidative status, where there is a prevalence of free radical production and /or reduced antioxidant activity. Recently, the antioxidant resveratrol present in large quantities mainly in red grapes, has been explored as potential therapy in several diseases. Resveratrol, in addition of reactive oxygen species scavenging and acting on other mechanisms of action, acts by activating the transcription factor Nrf2 (nuclear factor, erythroid 2-like 2), responsible for the transcription of several genes that promote cell protection through the coding of antioxidant enzymes, such as heme oxygenase-1 (HO-1). Therefore, the aim of this study was to verify the effects of resveratrol on Nrf2 activation and its target genes in an in vitro model of preeclampsia. This model consists of the incubation of plasma/serum from pre-eclamptic patients in endothelial cells in order to mimic the endothelial dysfunction characteristic of this syndrome. In addition, a pilot clinical study was carried out in which pre-eclamptic pregnant women drank grape juice acutely and had the serum collected after 1 hour of ingestion for incubation in endothelial cells. We conclude that there is a potential use of resveratrol in the prevention and management of preeclampsia. Especially th... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gestação que se caracteriza por um estado de má adaptação da tolerância imunológica, identificado por estresse oxidativo e ativação anormal do sistema imune inato. No plasma de gestantes portadoras de PE encontram-se níveis elevados de estruturas moleculares associadas ao estresse e morte celular, denominados padrões moleculares associados ao dano (DAMPs) tais como ácido úrico, que parecem contribuir para a patogênese dessa doença. As DAMPs podem ativar monócitos desviando-os para perfil proinflamatório M1. O desbalanço pró e anti-inflamatório na PE pode ser regulado através da administração de flavonóides com propriedades anti-inflamatórias como a silibinina. O presente trabalho tem por objetivo avaliar o efeito imunomodulador da silibinina sobre a expressão de marcadores de ativação e a via de sinalização do fator de transcrição nuclear NF-κB em monócitos de gestantes portadoras de PE. Monócitos de gestantes pré-eclâmpticas foram cultivados na presença ou ausência de silibinina e, a expressão de moléculas de superfície TLR4, CD64, CD163 e CD14, bem como dos fatores de transcrição IκB-α e NF-κBp65 intracelulares foi analisada por citometria de fluxo. A concentração das citocinas IL-6 e IL-8 no sobrenadante de cultura de monócitos foi determinada por cytometric bead array (CBA) e de IL-1β, IL-10, TNF-α, IL-12p70, IL-23 e TGF-β pela técnica de ELISA. Os resultados foram analisados por meio de testes paramétricos com nível de si... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Mulheres com risco de falência ovariana prematura, assim como aquelas diagnosticadas com câncer que desejam preservar sua fertilidade, têm como opção a criopreservação do tecido ovariano. Esse tecido seria destinado, dependendo do caso, ao reimplante posterior ou para o cultivo in vitro de folículos ovarianos isolados do tecido criopreservado. Nesse contexto, os folículos primordiais são uma população importante tanto por serem mais resistentes ao processo de criopreservação, como por representarem cerca de 90% da população total folicular. Porém o uso destes folículos para procedimentos de Reprodução Assistida ainda é bastante limitado, pois os mecanismos responsáveis pelo seu processo de ativação ainda não são completamente conhecidos. A via de sinalização fosfatidilinositol 3- quinase (PI3K) foi recentemente identificada como determinante para o controle da ativação dos folículos primordiais. Portanto o objetivo deste estudo foi identificar e localizar os fatores componentes da via: supressores (FOXO3a e PTEN) e ativadores (Akt e Phospho-Akt). O que ofereceria uma valiosa ferramenta para elucidar os mecanismos envolvidos na ativação do pool de reserva folicular e permitiria o desenvolvimento de sistemas de cultivo folicular que atuassem diretamente nestes mecanismos. Sendo assim, foi realizado um estudo transversal com amostras de tecido ovariano humano, que foram submetidas à reação imunohistoquímica dos fatores previamente citados. Foram incluídas na casuística 40 pacientes, com idade média de 27,7 anos ± 7,26. Foi realizada uma análise comparativa da expressão dessas proteínas entre os folículos primordiais e primários. Foi encontrada diferença significativa para a proteína Akt, (p<0,05) em que os folículos primordiais (oócito e células da granulosa) manifestaram mais expressão da proteína Akt em comparação aos folículos primários. Também foi encontrada diferença significativa para a proteína phospho-Akt, porém apenas nas células da granulosa, em que houve maior expressão em folículos primordiais comparados aos primários. Enquanto ambos os estágios tiveram marcação negativa para o PTEN e FOXO3a na maioria dos folículos analisados. Sendo assim, neste estudo não foi possível identificar dentre as proteínas escolhidas uma que tivesse expressão claramente característica de uma ou de outra fase folicular, não sendo possível inferir que a atividade de qualquer uma das proteínas fosse estritamente ligada à ativação dos folículo primordiais. / Women at risk of premature ovarian failure, as well as those diagnosed with cancer who wish to preserve their fertility, have, as option, the ovarian tissue cryopreservation. This tissue would be destined, depending on the case, to posterior reimplantation, or for the in vitro culture of ovarian follicles isolated from the cryopreserved tissue. In this context, primordial follicles are an important population of cells. As they are more resistant to the cryopreservation process and they represent about 90% of the whole follicular population. However, the use of these follicles for Assisted Reproduction procedures is still quite limited, since the mechanisms responsible for its activation process are not fully understood. The phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) signaling pathway has recently been identified as determinant for the control of primordial follicle activation. Therefore, the aim of this study was to identify and localize the components of this pathway: suppressors (FOXO3a and PTEN) and activators (Akt and phospho-Akt). This would offer a valuable tool to elucidate the mechanisms involved in the activation of the follicular reserve pool and would allow the development of in vitro culture protocols that would act directly in these mechanisms. Thus, a cross-sectional study with samples of human ovarian tissue was performed. These samples were submitted to the immunohistochemical reaction of the previously mentioned factors. Forty patients were included in the study, with a mean age of 27.7 ± 7.26. A comparative analysis of the expression of these proteins was performed between primordial and primary follicles. A significant difference was found for the Akt protein (p<0.05) in which the primordial follicles (oocyte and granulosa cells) showed more Akt expression than primary follicles. Another significant difference was found for the phosphor-Akt protein, but only for the granulosa cells, where there was a greater expression in primordial follicles compared to the primary ones. While both stages were negatively stained for PTEN and FOXO3a in most of the follicles analyzed. Thus, in this study it was not possible to identify among the selected proteins one that had clearly characteristic expression of one or the other follicular phase, and it was not possible to infer that the activity of any of the proteins was strictly linked to the activation of the primordial follicles.

Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Coorientador: Leandro Gustavo de Oliveira / Banca: Alessandra Pontillo / Banca: Francisco Lázaro Pereira de Souza / Resumo: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gravidez, caracterizada por hipertensão arterial e proteinúria, identificadas após a 20a semana de gestação. Essa patologia está associada com hiperuricemia, valores séricos elevados de citocinas inflamatórias, ativação de leucócitos e estresse oxidativo. Cristais de ácido úrico podem ativar um complexo intracelular denominado inflamassoma, uma estrutura multi-proteica importante para o processamento e liberação das citocinas inflamatórias interleucina-1 beta (IL-1β) e IL-18. Este estudo investigou, em gestantes portadoras de PE, o estado de ativação de monócitos, tanto endógeno como estimulado por urato monossódico (MSU), por meio da expressão gênica dos inflamassomas NLRP1 e NLRP3, bem como a associação destes complexos com a expressão de citocinas inflamatórias por estas células. Monócitos foram obtidos do sangue periférico de 23 gestantes pré-eclâmpticas e 23 gestantes normotensas (GN) no terceiro trimestre de gestação e de 23 mulheres saudáveis, não grávidas (MNG) e cultivados na presença ou ausência de 50 μg/mL de MSU por 18 h. A presença do inflamassoma foi avaliada por meio da expressão gênica de NLRP1, NLRP3, caspase-1, IL-1β, IL-18 e TNF-α por RT-qPCR em células não estimuladas (expressão endógena) ou após estímulo com MSU (expressão estimulada). A concentração das citocinas foi avaliada pelo método de ELISA. Os resultados foram analisados por meio de testes não-paramétricos com nível de significância de 5%. Em gestantes pré-eclâmpticas, a expressão gênica de NLRP1, NLRP3, caspase-1, IL-1β e TNF-α em monócitos estimulados ou não com MSU, foi significativamente maior do que nos grupos GN e MNG. Além disso, observou-se maior expressão endógena de IL-18 em gestantes com PE em comparação às gestantes normotensas, enquanto a expressão estimulada da citocina foi maior no grupo PE em relação aos grupos GN e... / Abstract: Preeclampsia (PE) is a specific syndrome of pregnancy, characterized by hypertension and proteinuria, identified after the 20th week of pregnancy. This pathology is associated with hyperuricemia, elevated serum levels of inflammatory cytokines, leukocyte activation and oxidative stress. Uric acid crystals may activate an intracellular complex called inflammasome, a multi-protein structure which is important for processing and release of inflammatory cytokines such as interleukin-1 beta (IL-1β) and IL-18. This study investigated, in pregnant women with PE, the state of monocyte activation both endogenous and stimulated with monosodium urate (MSU), by gene expression of NLRP1 and NLRP3 inflammassomes as well as their association with inflammatory cytokines expression by these cells. Monocytes were obtained from peripheral blood of 23 preeclamptic pregnant women, 23 normotensive pregnant women (NT) in the third trimester of pregnancy and 23 healthy non-pregnant women (NP), and cultured in the presence or absence of 50 μg/mL of MSU for 18 h. Inflammasome activation was evaluated by the gene expression of NLRP1, NLRP3, caspase-1, IL-1β, IL-18 and TNF-α by RT-qPCR in unstimulated monocytes (endogenous expression), or after cell stimulation with MSU (stimulated expression). The concentration of cytokines was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results were analyzed using non-parametric tests at 5% significance level. In preeclamptic pregnant women, gene expression of NLRP1, NLRP3, caspase-1, IL-1β and TNF-α by monocytes, stimulated or not with MSU, was significantly higher than in NT and NP groups. In addition, there was a higher endogenous expression of IL-18 in pregnant women with PE compared with NT pregnant women, while the stimulated cytokine expression was higher in the PE group than in the other two groups studied. Stimulation of monocytes from preeclamptic and non-pregnant women with MSU induced increased ... / Mestre

Orientador: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Banca: Rosa Beatriz Amorim / Banca: Artur Udeslmann / Banca: Sanderland José Tavares Gurgel / Resumo: A pré-eclâmpsia é uma doença multissistêmica que afeta, entre outros órgãos, placenta e rim. Objetivo: Utilizando vários biomarcadores, avaliar a função renal e a integridade tubular após cesariana em gestantes pré-eclâmpticas leves submetidas à anestesia subaracnoidea. Métodos: Este estudo coorte prospectivo analisou a função renal e a integridade tubular de 72 gestantes com hipertensão gestacional ou crônica, com e sem pré-eclâmpsia leve, após cesariana sob anestesia subaracnoidea, tendo como marcadores do ritmo de filtração glomerular (RFG) a cistatina C e a creatinina plasmáticas, e da integridade tubular a fosfatase alcalina (FA), γ-glutamiltransferase (γ-GT) e lipocalina associada à gelatinase neutrofílica (NGAL) urinárias, antes da cesariana (T1) e 48h após (T2), distribuídas nos grupos: pré-eclâmpsia leve (P), n= 27; hipertensão arterial crônica e pré-eclâmpsia leve sobreposta (PH), n=16; hipertensão arterial (H, grupo controle), n=29. Resultados: O RFG pela cistatina C aumentou entre T1 e T2 de todos os grupos. O RFG pela creatinina diminuíu significativamente em todos os grupos. Os valores de NGAL aumentaram de T1 para T2 em todos os grupos, e os das enzimas FA e γ-GT diminuíram significativamente em T2 dos grupos P e H. Conclusões: Para o período pós-operatório de cesariana de gestante com pré-eclâmpsia leve, a cistatina C e o NGAL não se mostraram biomarcadores livres de viés para o estudo da função renal. O RFG medido pela creatinina mostrou leve diminuição, compatível com o estresse do período perioperatório. Houve diminuição das enzimas da borda em escova nas gestantes hipertensas e naquelas com pré-eclâmpsia / Abstract: Preeclampsia is a multisystemic disease that affects, among other organs, placenta and kidney. Objective: Using multiple biomarkers, assess renal function and tubular integrity after cesarean section in mild preeclamptic patients undergoing subarachnoid anesthesia. Methods: This prospective cohort study examined renal function and tubular integrity of 72 pregnant patients with gestational or chronic hypertension, with and without mild preeclampsia, after cesarean section under subarachnoid anesthesia, having as markers of glomerular filtration rate (GFR) cystatin C and creatinine plasmatic, and of tubular integrity, alkaline phosphatase (AP), γ-glutamyl transpeptidase (γ-GT) and neutrophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) urinary, before cesarean section (T1) and 48 h after (T2), distributed among groups: mild preeclampsia (P, case group), n = 27; chronic hypertension and mild preeclampsia superimposed (PH, case group), n = 16; hypertension (H, control group), n = 29. Results: The GFR by cystatin C increased between T1 and T2 for all groups while the GFR by creatinine was significantly decreased in all groups. The values of NGAL increased from T1 to T2 in all groups, and the FA and γ-GT enzymes decreased significantly in T2 of the groups P and H. Conclusions: For the postoperative period of cesarean section of pregnant patients with mild preeclampsia, cystatin C and NGAL were biomarkers not free of bias for the study of renal function. The GFR measured by creatinine showed a slight decrease, consistent with the stress of the perioperative period. There was a reduction of brush border enzymes in hypertensive pregnant patients and in those with pre-eclampsia / Doutor

Orientador: José Carlos Peraçoli / Banca: Roberto Antonio de Araújo Costa / Banca: Claudia Garcia Magalhães / Banca: Alberto Moreno Zaconeta / Banca: Roseli Mieko Yamamoto Nomura / Resumo: Introdução: A pré-eclâmpsia contribui consideravelmente para o aumento da morbimortalidade materna e perinatal. Pode ser classificada em precoce e tardia, de acordo com a época de seu aparecimento. O Doppler da artéria oftálmica é um método objetivo que pode facilitar o diagnóstico da hipertensão durante a gestação, identificando suas diferentes formas de manifestação. Objetivo: Diferenciar, por meio do Doppler da artéria oftálmica, o padrão hemodinâmico da artéria oftálmica das gestantes portadoras de pré-eclâmpsia precoce daquelas portadoras de pré-eclâmpsia tardia. Metodologia: Estudo transversal de 67 gestantes com pré-eclâmpsia precoce e 93 gestantes com pré-eclâmpsia tardia realizado no terceiro trimestre de gestação. Todas as gestantes realizaram Doppler da artéria oftálmica direita, que avaliou os seguintes parâmetros, para quantificação da onda de velocidade de fluxo: índice de resistência (IR), índice de pulsatilidade (IP), pico de velocidade sistólica (PVS), pico de velocidade diastólica (PVD), velocidade diastólica final (VDF) e razão entre picos de velocidade (RPV). Os resultados foram submetidos à análise estatística, considerando-se significativos quando p<0,05. Resultados: As médias dos índices dopplervelocimétricos das gestantes com pré-eclâmpsia precoce e pré-eclâmpsia tardia foram respectivamente: IR= 0,7 ± 0,1; 0,7 ± 0,1, IP= 1,3 ± 0,4; 1,4 ± 1,1, PVS: 33,2 ± 8,2; 34,3 ± 10,0, PVD: 26,5 ± 8,1; 25,5 ± 9,4, VDF: 11,2 ± 3,8; 11,7 ± 4,6 e RPV: 0,8 ± 0,2; 0,7 ± 0,2. A razão de pico de velocidade foi significativamente maior nas gestantes com pré-eclâmpsia precoce. Não houve diferença significativa em relação aos valores de índice de resistência, índice de pulsatilidade, pico de velocidade sistólica, pico de velocidade diastólica e velocidade diastólica final. Conclusão: O Doppler da artéria oftálmica é um exame que pode ser usado na avaliação de... / Abstract: Introduction: Preeclampsia contributes considerably to increased maternal and perinatal morbidity and mortality. This disease can be classified into early and late onset preeclampsia, according to the timing of their clinical manifestations appearance. The ophthalmic artery Doppler is an objective method that can facilitate the diagnosis of hypertension during pregnancy, identifying its different manifestations. Objective: Differentiate through the Doppler of the ophthalmic artery the hemodynamic pattern of the ophthalmic artery of early and late onset preeclampsia. Methods: Cross-sectional study of 67 pregnant women with early preeclampsia and 93 pregnant women with late preeclampsia performed in the third trimester of pregnancy. All women had performed the right ophthalmic artery Doppler that evaluated the following parameters for the quantification wave flow rate: resistance index (RI), pulsatility index (PI), peak systolic velocity (PSV), peak diastolic velocity (PVD), end-diastolic velocity (EDV) and peak velocity ratio (RPV). The results were subjected to statistical analysis, considering significant when p <0.05. Results: The mean Doppler indices of early and late onset preeclampsia were: RI = 0.7 ± 0.1 vs 0.7 ± 0.1, IP= 1.3 ± 0.4 vs 1.4 ± 1.1, PVS: 33.2 ± 8.2 vs 34.3 ± 10.0, PVD: 26.5 ± 8.1 vs 25.5 ± 9.4, VDF: 11.2 ± 3.8 vs 11.7 ± 4.6 and RPV: 0.8 ± 0.2 vs 0.7 ± 0.2. The speed of peak ratio was significantly higher in patients with early preeclampsia. There was no significant difference in terms of resistance index values, pulsatility index, peak systolic velocity, peak diastolic velocity and end diastolic velocity. Conclusion: The Doppler of the ophthalmic artery is a test that can be used in the evaluation of pregnant women with preeclampsia, showing difference in quantitative indices such as peak velocity ratio when comparing women with early and late onset preeclampsia / Doutor

Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome clinicamente identificada por hipertensão arterial e proteinúria e está associada à produção excessiva de citocinas proinflamatórias, deficiência na produção de citocinas reguladoras e aumento nos níveis séricos de anticorpos antifosfolípides (aPLs) em pacientes com PE grave. Os aPLs são uma família de autoanticorpos que reagem com proteínas ligantes de fosfolipídios, sendo seu principal alvo a beta-2 glicoproteina I (β2GPI). Estes anticorpos são responsáveis por inibir a diferenciação do sinciciotrofoblasto e restringir a migração trofoblástica, resultando em remodelação anormal das arteríolas espiraladas, alteração característica da PE. O inflamassoma é um complexo proteico que promove a secreção das citocinas proinflamatórias interleucina-1 beta (IL-1β) e interleucina 18 (IL-18) e, também a secreção da proteína “high-mobility group box 1” (HMGB1) após ativação por patógenos e/ou produtos endógenos associados ao dano celular. A autofagia é uma via de degradação celular ou de eliminação de organelas e proteínas através de processos lisossomais que são importantes para a manutenção da homeostase celular, promovendo a sobrevivência das células em resposta ao estresse. O presente trabalho teve como objetivos: 1. Investigar as proteinas relacionadas ao inflamassoma e à autofagia em placenta de gestantes portadoras de pré-eclâmpsia e de normotensas; 2. Avaliar a relação existente entre inflamassoma e autofagia em células de trofoblasto extravil... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Preeclampsia (PE) is a syndrome clinically identified by hypertension and proteinuria and is associated with excessive production of proinflammatory cytokines, deficiency in the production of regulatory cytokines, and increased serum levels of antiphospholipid antibodies (aPLs) in patients with severe forms of PE. aPLs are a family of autoantibodies that react with phospholipid binding proteins, which the main target is beta 2 glycoprotein-I (β2GPI). These antibodies are responsible for inhibiting the differentiation of syncytiotrophoblast and restrict trophoblast migration, resulting in abnormal remodeling of the spiral arterioles, characteristic alteration in PE. The inflammasome is a protein complex that promotes the secretion of the proinflammatory cytokines interleukin-1 beta (IL-1β) and interleukin 18 (IL-18), and also the secretion of high-mobility group box 1 (HMGB1) protein after activation by pathogens and/or endogenous products associated with cellular damage. Autophagy is a pathway of cell degradation or elimination of organelles and proteins by lysosomal processes that are important for the maintenance of cellular homeostasis by promoting the survival of cells in response to stress. The objectives of the present study are: 1. To investigate the proteins related to inflammasome and autophagy in placenta from pregnant women with PE and from normotensive control; 2. To evaluate the relationship between inflammasome and autophagy in human extravillous trophoblast cel... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: André Sampaio Pupo / Resumo: A Pré-eclâmpsia (PE) é uma desordem hipertensiva gestacional, cuja fisiopatologia tem sido atribuída a forte resposta inflamatória, disfunção endotelial, agregação plaquetária e aumento da resistência vascular. Estudos com PE relatam inadequado aumento na ação de vários vasoconstritores, incluindo endotelina, adenosina, angiotensina II, e noradrenalina ocasionando aumento da pressão arterial. De fato, o sistema nervoso autonômo simpático através do neurotransmissor noradrenalina regula a pressão arterial mediante a ativação dos adrenoceptores-alfa-1 (ARs-alfa-1). No presente estudo, foi investigado através do uso de agonistas e antagonistas seletivos os subtipos de ARs-alfa1 envolvidos na contração da aorta abdominal de ratas prenhes submetidas à um modelo experimental de PE por redução da pressão de perfusão uterina (RUPP), e esses receptores foram comparados com aqueles envolvidos na contração da artéria de ratas virgens. Os resultados indicam que as contrações da artéria aorta abdominal de ratas virgens em resposta à noradrenalina resultam da ativação de AR-alfa-1A e AR-alfa-1D, mas que na artéria da fêmea há uma maior contribuição de AR-alfa-1A do que na respectiva artéria de machos. Além disso, a prenhez induziu plasticidade nos subtipos de ARs-alfa-1 envolvidos na contração da artéria aorta abdominal, uma vez que houve menor participação de AR-alfa-1A nas contrações de ratas prenhes do que aquela observada na artéria de ratas virgens. Por outro lado, na artéria aorta ab... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Preeclampsia (PE) is a gestational hypertensive disorder, for which the physiopathology has been attributed to an intense inflammatory response, endothelial disfunction, platelet aggregation and increased vascular resistance. Previous studies reported that in PE there is an inadequate increase in the action of several vasoconstrictors, including endothelin, adenosine, angiotensin II and noradrenaline. In fact, the sympathetic nervous system by releasing the neurotransmitter noradrenaline regulates the arterial pressure through activation of 1-adrenoceptors (1-ARs). The present study investigated the 1–ARs subtypes involved in the contractions of the abdominal aortae from pregnant rats submitted to an experimental model of PE, the reduced in uterine perfusion pressure (RUPP), compared these receptors with those involved in the contractions of abdominal aortae from non-pregnant (virgin) and pregnant female rats. The results indicate that there are both 1A–ARs and 1D– ARs in abdominal aortae from non pregnant females, but that the 1A–ARs is more important in the contraction of the female than in the contraction of the respective artery from male rats. Pregnancy induces plasticity in the 1 – ARs of the abdominal aortae, since there was a less significant participation of 1A-AR in the contraction of abdominal aortae from pregnant rats than in the artery of virgin females. In the other hand, selective agonists and antagonists presented complex behaviours in the abdominal ao... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Silméia Garcia Zanati Bazan / Resumo: Fundamento: A história de pré-eclâmpsia (PE) tem sido associada a doença cardiovascular em mulheres. Existem evidências de que alterações cardiovasculares decorrentes da PE podem permanecer mesmo após o término da gestação.Objetivos: 1-avaliar a frequência de fatores de risco cardiovascular em mulheres com história de PE há 12 meses e sua associação com hipertrofia miocárdica e espessura médio-intimal de carótidas (EMIC); 2-avaliar o efeito da hipertrofia miocárdica na função do ventrículo esquerdo e na capacidade funcional.Métodos: Estudo prospectivo transversal incluindo 118 pacientes consecutivas com história de PE há 12 meses. Foram efetuadas avaliações clínicas e laboratoriais, ecocardiograma, teste ergométrico e ultrassom de carótidas. A hipertrofia miocárdica (HVE) foi definida para massa miocárdica indexada ≥ 45 g/m2,7. Foram consideradas como EMIC aumentadas quando as medidas estivessem acima do percentil 75 para a faixa etária. Foram considerados os fatores de risco clássicos para doença cardiovascular e calculado o escore de risco cardiovascular global em 30 anos (RCVG_30). Os dados foram analisados por meio de regressão logística ou linear e coeficiente de correlação de Spearman. Nível de significância p<0,05.Resultados: A hipertensão arterial sistêmica (HAS) foi identificada em 52 pacientes (44%), sobrepeso/obesidade (Sob/obes) em 82 (69%), dislipidemia em 68 (57%) e síndrome metabólica em 47 pacientes (40%). Um total de 48 mulheres (41%) apresentaram RCVG_... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Background: A history of preeclampsia (PE) has been associated with cardiovascular disease in women. There is substantial evidence that cardiovascular alterations resulting from PE can persist even after termination of pregnancy.Objectives: 1-evaluate the frequency of cardiovascular risk factors in women with 12-month history of PE and their association with myocardial hypertrophy and carotid intima-media thickness (CIMT); 2-evaluate the effect of myocardial hypertrophy on left ventricular function and functional capacity.Methods: Transversal prospective study including 118 consecutive patients with 12-month PE history. Clinical and laboratory evaluations, echocardiogram, ergometric and carotid ultrasound were performed. Myocardial hypertrophy (LVH) was defined as indexed myocardial mass ≥ 45 g/m2,7. CMIT was considered elevated when the measures were above the 75th percentile for the age range. The classical risk factors for cardiovascular disease were considered, and the 30-year global cardiovascular risk score was calculated (GCVR_30). The data were analyzed by linear or logistic regression and Spearman’s correlation coefficient. Significance level p<0.05.Results: Systemic arterial hypertension (SAH) was identified in 52 patients (44%), overweight/obesity (OOB) in 82 (69%), dyslipidemia in 68 (57%) and metabolic syndrome in 47 patients (40%). A total of 48 women (41%) presented GCVR _30 greater than or equal to 10%, with these patients aged 34±5.4 years. LVH was pres... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Mulheres com risco de falência ovariana prematura, assim como aquelas diagnosticadas com câncer que desejam preservar sua fertilidade, têm como opção a criopreservação do tecido ovariano. Esse tecido seria destinado, dependendo do caso, ao reimplante posterior ou para o cultivo in vitro de folículos ovarianos isolados do tecido criopreservado. Nesse contexto, os folículos primordiais são uma população importante tanto por serem mais resistentes ao processo de criopreservação, como por representarem cerca de 90% da população total folicular. Porém o uso destes folículos para procedimentos de Reprodução Assistida ainda é bastante limitado, pois os mecanismos responsáveis pelo seu processo de ativação ainda não são completamente conhecidos. A via de sinalização fosfatidilinositol 3- quinase (PI3K) foi recentemente identificada como determinante para o controle da ativação dos folículos primordiais. Portanto o objetivo deste estudo foi identificar e localizar os fatores componentes da via: supressores (FOXO3a e PTEN) e ativadores (Akt e Phospho-Akt). O que ofereceria uma valiosa ferramenta para elucidar os mecanismos envolvidos na ativação do pool de reserva folicular e permitiria o desenvolvimento de sistemas de cultivo folicular que atuassem diretamente nestes mecanismos. Sendo assim, foi realizado um estudo transversal com amostras de tecido ovariano humano, que foram submetidas à reação imunohistoquímica dos fatores previamente citados. Foram incluídas na casuística 40 pacientes, com idade média de 27,7 anos ± 7,26. Foi realizada uma análise comparativa da expressão dessas proteínas entre os folículos primordiais e primários. Foi encontrada diferença significativa para a proteína Akt, (p<0,05) em que os folículos primordiais (oócito e células da granulosa) manifestaram mais expressão da proteína Akt em comparação aos folículos primários. Também foi encontrada diferença significativa para a proteína phospho-Akt, porém apenas nas células da granulosa, em que houve maior expressão em folículos primordiais comparados aos primários. Enquanto ambos os estágios tiveram marcação negativa para o PTEN e FOXO3a na maioria dos folículos analisados. Sendo assim, neste estudo não foi possível identificar dentre as proteínas escolhidas uma que tivesse expressão claramente característica de uma ou de outra fase folicular, não sendo possível inferir que a atividade de qualquer uma das proteínas fosse estritamente ligada à ativação dos folículo primordiais. / Women at risk of premature ovarian failure, as well as those diagnosed with cancer who wish to preserve their fertility, have, as option, the ovarian tissue cryopreservation. This tissue would be destined, depending on the case, to posterior reimplantation, or for the in vitro culture of ovarian follicles isolated from the cryopreserved tissue. In this context, primordial follicles are an important population of cells. As they are more resistant to the cryopreservation process and they represent about 90% of the whole follicular population. However, the use of these follicles for Assisted Reproduction procedures is still quite limited, since the mechanisms responsible for its activation process are not fully understood. The phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) signaling pathway has recently been identified as determinant for the control of primordial follicle activation. Therefore, the aim of this study was to identify and localize the components of this pathway: suppressors (FOXO3a and PTEN) and activators (Akt and phospho-Akt). This would offer a valuable tool to elucidate the mechanisms involved in the activation of the follicular reserve pool and would allow the development of in vitro culture protocols that would act directly in these mechanisms. Thus, a cross-sectional study with samples of human ovarian tissue was performed. These samples were submitted to the immunohistochemical reaction of the previously mentioned factors. Forty patients were included in the study, with a mean age of 27.7 ± 7.26. A comparative analysis of the expression of these proteins was performed between primordial and primary follicles. A significant difference was found for the Akt protein (p<0.05) in which the primordial follicles (oocyte and granulosa cells) showed more Akt expression than primary follicles. Another significant difference was found for the phosphor-Akt protein, but only for the granulosa cells, where there was a greater expression in primordial follicles compared to the primary ones. While both stages were negatively stained for PTEN and FOXO3a in most of the follicles analyzed. Thus, in this study it was not possible to identify among the selected proteins one that had clearly characteristic expression of one or the other follicular phase, and it was not possible to infer that the activity of any of the proteins was strictly linked to the activation of the primordial follicles.