Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1528_1.pdf: 1161611 bytes, checksum: 12e71c30ae56df2b61b93c6449d634d6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os cromossomos de Ommexecha virens e Descampsacris serrulatum (Ommexechidae) foram analisados através de técnica convencional, impregnação com nitrato de prata (AgNO3), bandeamento C, fluorocromos base específicos e hibridização in situ fluorescente (FISH). As duas espécies mostraram número diplóide 2n=23,X0 nos machos e cromossomos acrocêntricos, exceto o par 1 que apresentou morfologia submetacêntrica. O cromossomo X possui morfologia diferente nas duas espécies, sendo acrocêntrico médio em O. virens e submetacêntrico grande em D. serrulatum. O bandeamento C revelou blocos de heterocromatina constitutiva (HC) em todos os cromossomos de D. serrulatum. A coloração CMA3/DA/DAPI, mostrou blocos de HC ricos em pares de base GC (CMA3 positivos) em alguns cromossomos do complemento das duas espécies. As regiões organizadoras de nucléolos (RONs) identificadas pelo AgNO3 foram localizadas em três bivalentes autossômicos de O. virens e quatro bivalentes de D. serrulatum. A técnica de FISH mostrou resultados coincidentes com o padrão de RONs ativas revelados pela coloração AgNO3 nas duas espécies. Esse trabalho apresenta os primeiros dados cromossômicos, obtidos por meio de técnicas citogenéticas diferenciais, em Ommexechidae, contribuindo para uma melhor caracterização da evolução cariotípica nessa família

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3669_1.pdf: 957629 bytes, checksum: e2326884e09fbf967320b6541313c77f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / A subfamília Melanoplinae constitui um grupo de gafanhotos com a maior diversidade cariotípica dentro de Acrididae. O objetivo principal deste trabalho foi estudar cromossomos meióticos dos melanoplíneos Baeacris punctulatus e Dichroplus fuscus através de diferentes técnicas citogenéticas. Baeacris punctulatus e D. fuscus apresentaram os cariótipos 2n=23,X0 e 2n=19,X0, respectivamente. Em D. fuscus, o bivalente P9 apresentou comportamento megamérico durante o ciclo meiótico. A localização da heterocromatina constitutiva (HC) foi preferencialmente pericentromérica, embora ocorram blocos adicionais nas duas espécies. A coloração CMA3/DA/DAPI evidenciou blocos CMA3 positivos, correspondendo a HC detectada pelo bandeamento C de todos os cromossomos, com exceção dos blocos terminais de alguns cromossomos nas duas espécies e de um bloco CMA3 positivo intersticial sem marcação para o bandeamento C em B. punctulatus. A coloração com DAPI foi uniforme em B. punctulatus, enquanto que em D. fuscus, os blocos CMA3 positivos foram DAPI negativos. A impregnação com AgNO3 e a FISH mostraram seis regiões organizadoras de nucléolos (RONs) em B. punctulatus e duas, em D. fuscus. Na primeira espécie foi observada expressiva variação na atividade das RONs. Os dados obtidos neste trabalho revelaram a existência de uma grande variabilidade cariotípica, tanto em relação ao número diplóide quanto aos padrões de localização e composição da HC e de distribuição das RONs, incluindo um padrão inédito para Acridoidea referente ao número e frequência de atividade das RONs

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3668_1.pdf: 885082 bytes, checksum: eca9e2966f38086b8e810f4c184dd8a3 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Análise cromossômica de Leptoglossus gonagra (2n=21=18A+2m+X0) e Pachylis aff pharaonis (2n=15=12A+2m+X0) revelou cromossomos holocêntricos que decrescem gradualmente de tamanho. Nas duas espécies, o cromossomo X mostrou tamanho médio e os cromossomos m correspondem aos menores elementos do cariótipo. As duas espécies mostraram a heterocromatina constitutiva (HC) nas regiões terminais de todos os cromossomos. Adicionalmente, P. aff pharaonis mostrou um bloco intersticial de HC no bivalente 2. A tríplice coloração CMA3/DA/DAPI revelou que nesta espécie todas as regiões de HC, exceto dos cromossomos m são CMA3 positivas. Em L. gonagra, a dupla coloração CMA3/DA revelou blocos CMA3 positivos restritos aos cromossomos m. Nas duas espécies, a coloração com DAPI foi neutra para todas as regiões cromossômicas e a impregnação com AgNO3 revelou RONs ativas em apenas um bivalente autossômico. Em L. gonagra a RON está localizada na região terminal dos cromossomos m e em P. aff pharaonis está associada a região terminal do bivalente 2. A RON desta espécie evidenciou o fenômeno denominado nucléolo semi-persistente, permitindo a visualização do remanescente nucleolar até a metáfase I. Os resultados obtidos pela FISH nas duas espécies analisadas mostraram padrões similares aqueles obtidos pela impregnação com AgNO3. Diferenças e similaridades cromossômicas encontradas nas espécies analisadas corroboram o status taxonômico das mesmas

Les méthodes de stérilisation à basse température prennent une importance croissante pour la décontamination de matériaux thermosensibles utilisés dans les appareils exposés aux risques microbiologiques tels que les endoscopes dans les hôpitaux, les emballages dans l'industrie agroalimentaire, ou les équipements soumis aux agents microbiologiques de guerre dans les zones de conflits. Les méthodes de stérilisation standards non-thermiques souffrent de limitations liées à leur toxicité, leurs coûts élevés, leurs faibles compatibilités avec les matériaux, et/ou leurs longs cycles de stérilisation (quelques heures). Une approche alternative consiste à utiliser des plasmas hors équilibre à pression atmosphérique produits par décharges électriques. Les plasmas permettent des cycles de stérilisation pluscourts car les surfaces traitées sont exposées à de nombreux agents biocides, notamment à du rayonnement, à des espèces réactives oxygénées et azotées (RONS), et à des espèces chargées. Cependant, à pression atmosphérique, le volume du plasma est généralement faible. Les traitements en post-décharge permettent d'augmenter la surface de traitement, tout en réduisant la dégradation du matériau par les espèces chargées. Dans la post-décharge, les principaux agents biocides sont les RONS. L'objectif de cette thèse est d'étudier la production et le transport des RONS générés par des décharges pulsées non-thermiques dans l'air et l'azote à pression atmosphérique au moyen de diagnositcs de spectroscopie d'absorption UV et mid-IR (QCLAS), de fluorescence / Low-temperature sterilization methods are of increasing importance for the decontamination of heat-sensitive materials in devices exposed to biohazards, such as endoscopes in hospitals, containers in the food industry, or contaminated equipment in areas exposed to war acts. Standard non-thermal sterilization methods suffer from limitations related to their toxicity, high cost, low material compatibility, and/or long sterilization cycles (several hours). An alternative approach consists in using atmospheric pressure nonequilibrium plasmas produced by electric discharges. Plasmas provide shorter sterilization cycles because they combine various biocidal agents including radiation,reactive oxygen and nitrogen species (RONS), and charged species. However, at atmospheric pressure the plasma volume is usually small. Post-discharge treatment allows to increase the treated surface area, and in addition to reduce surface degradation by charged species. In post-discharge treatment, the main biocidal agents are the RONS. The objective of this thesis is to study the production and transport of RONS generated by non-thermal pulsed discharges in nitrogen and air at atmospheric pressure by means of UV and mid-IR (QCLAS) absorption spectroscopy, planar laser induced fluorescence (PLIF), and absolute emission spectroscopy.

Yes / Age-related frailty is a significant health and social care burden, with limited treatment options. There is a lack of suitable cell culture model for screening large numbers of test compounds to identify those which promote healthy skeletal muscle function. This paper describes the characterization of reactive oxygen and nitrogen species (RONS) signalling changes in young and aged myoblasts and myotubes using C2C12 cells, and the application of aged cultures to assess the effect of dietary polyphenols on RONS signalling. Aged myoblasts and myotubes showed significantly increased reactive oxygen species (p < 0.01 and p < 0.001 respectively), nitric oxide (p < 0.05 for myoblasts and myotubes), and lipid peroxidation (p < 0.05 for myoblasts and myotubes). Nine polyphenols were assessed in aged myoblasts and myotubes using concentrations and incubation times consistent with known pharmacokinetic parameters for these compounds. Although several polyphenols were seen to reduce single markers of RONS signalling, only kaempferol and resveratrol significantly reduced multiple markers in both cell models. Modulation of enzymatic antioxidant activities was assessed as a possible mechanism of action, although superoxide dismutase and catalase activities were significantly reduced in aged (versus young) myotubes (p < 0.01 and p < 0.05 respectively), no effect of polyphenol treatment on these enzyme activities were observed. Overall, this research has shown the utility of the C2C12 model (myoblasts and myotubes) for screening compounds in aged muscle, and that resveratrol and kaempferol (using pharmacokinetically-informed exposures) can modulate RONS signalling in skeletal muscle cells after an acute exposure. / NH is supported by a University of Hull-funded PhD studentship.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LorenaCBL.pdf: 1131500 bytes, checksum: f844b916fb8784c601514bd7da1743b9 (MD5) Previous issue date: 2007-02-26 / The Tetraodontiformes order is composed for about 400 species of fish, distributed in ten families, with circuntropical distribution. The morphologic diversity of each family reflects in, part, the different levels of specialization. This group represents an ancestry after-Perciformes and constitutes the last branch of the diffusion of the Tele?steos, occupying a position of prominence. The phylogenetics relationships of the Tetraodontiformes exist diverse works examining and, in all, these families are recognized as groups brothers, being Diodontidae next to Tetraodontidae and Balistidae next to Monacanthidae. Although it possesss a representative number of species, the works involving of the families Balistidae and Monacanthidae are few exemplary, especially species of oceanic islands. In this work cytogenetic studies in five species had been analyzed Cantherhines macrocerus, Cantherhines pullus (Monacanthidae), Melichthys niger (Balistidae), Sphoeroides testud?neus (Tetraodontidae) and Chilomycterus antennatus (Diodontidae); through conventional coloration, Ag-NORs and C banding. Ahead of the different karyological trends of evolution presented by the Tetraodontiformes, the present work also searched to verify the relation existence enters the total size of the chromosomes with the amount of DNA in these groups of Tetraodontiformes. For such, they had been correlated the total size of the chromosomes of these species, with values of content of available DNA in literature. The cytogenetics analyses for the species C.macrocerusJ C.pullus (Monacanthidae) and M.niger (Balistidae), had disclosed 40 chromosomes, all acrocentrics. All possess only one pair of NORs and pericentromeric heterochromatin. For S.testud?neus the found dyploid number was equal 2n=46, with NF=78 (16m+18sm+8st+4a), while that for C.antennatus it possesss 2n=50, with NF=76 (4m+22st+24a). Both species possess simple NORs and pericentromeric heterochromatin blocks. In M.niger, the presence of positive marking (heterochromatin and NOR) in the secondary constriction in the second chromosomic pair suggesting the occurrence of a rearrangement, possibly a fusing involving these homologous ones, indicating that these events had been important for the establishment of the karyological history of this group. A maintenance of the chromosomic constancy found in the populations of C.macrocerus (Monacanthidae) and S.testudineus (Tetraodontidae) perhaps if must for the aiding of the gene flow through oceanic chains. These data contrast with the differentiated kinds of chromosomes of C.antennatus between the Northeast coast and Southeastern, suggesting that the ecological standards of each species, added to the conditions of the marine environment, can be responsible for the karyological delineation of each species. The found characteristics for the species C.macrocerus, C.pullus, M.niger, S.testudineus and C.antennatus add it the available data for other species of Tetraodontiformes. From the data gotten in the present study, it can be inferred that the DNA content possesss direct relation with the total length of the chromosomes / RESUMO A ordem Tetraodontiformes ? composta por cerca de 400 esp?cies de peixes, distribu?das em dez fam?lias, com distribui??o circuntropical. A diversidade morfol?gica de cada fam?lia reflete em, parte, os diferentes n?veis de especializa??o. Este grupo representa uma linhagem p?s-Perciformes e constitui o ?ltimo ramo da difus?o dos Tele?steos, ocupando uma posi??o filogen?tica de destaque. Nesta ordem encontram-se algumas das esp?cies de peixes mais conhecidas popularmente, os baiacus, fam?lias Diodontidae e Tetraodontidae; e os cangulos, fam?lias Balistidae e Monacanthidae. Existem diversos trabalhos examinando as rela??es filogen?ticas dos Tetraodontiformes e, em todos, estas fam?lias s?o reconhecidas como grupos irm?os, sendo Diodontidae mais pr?ximo de Tetraodontidae e Balistidae mais pr?ximo de Monacanthidae. Embora possua um n?mero representativo de esp?cies, s?o poucos os trabalhos citogen?ticos envolvendo exemplares das fam?lias Balistidae e Monacanthidae, especialmente esp?cies insulares. Neste trabalho foram analisadas citogeneticamente as esp?cies Cantherhines macrocerus, Cantherhines pullus (Monacanthidae), Melichthys niger (Balistidae), Sphoeroides testudineus (Tetraodontidae) e Chilomycterus antennatus (Diodontidae); atrav?s de colora??o convencional, Ag-RONs e bandamento C. Diante das diferentes tend?ncias de evolu??o cariot?picas apresentadas pelos Tetraodontiformes, o presente trabalho tamb?m buscou verificar a exist?ncia de rela??o entre o tamanho total dos cromossomos com a quantidade de DNA nestes grupos de Tetraodontiformes. Para tal, foram correlacionados o tamanho total do complemento hapl?ide destas esp?cies, com valores de conte?do de DNA dispon?veis na literatura. As an?lises citogen?ticas para as esp?cies C.macrocerus, C.pullus (Monacanthidae) e M.niger (Balistidae), revelaram um cari?tipo composto de 40 cromossomos, todos acroc?ntricos. Todas possuem apenas um par de RONs e heterocromatina pericentrom?rica. Para S.testudineus o n?mero dipl?ide encontrado foi igual a 2n=46, com NF=78 (16m+18sm+8st+4a), enquanto que para C.antennatus possui 2n=50, com NF=76 (4m+22st+24a). Ambas esp?cies possuem RONs simples e blocos heterocrom?ticos centrom?ricos. Em M. niger, a presen?a de marca??o positiva (heterocromatina e RON) na constri??o secund?ria no 2?par cromoss?mico em M. niger sugerindo a ocorr?ncia de um rearranjo, possivelmente uma fus?o envolvendo estes hom?logos, indicando que estes eventos foram importantes para o estabelecimento dos cari?tipos deste grupo.A manuten??o da const?ncia cariot?pica encontrada nas popula??es de C. macrocerus (Monacanthidae) e Sphoeroides testudineus (Tetraodontidae) talvez se deva pelo favorecimento do fluxo g?nico atrav?s das correntes oce?nicas. Estes dados contrastam com os cit?tipos diferenciados de C.antennatus entre a costa Nordeste e Sudeste, sugerindo que os padr?es ecol?gicos de cada esp?cie, somados ?s condi??es do meio ambiente marinho, possam ser respons?veis pela delinea??o cariot?opica de cada esp?cie. As caracter?sticas citogen?ticas encontradas para as esp?cies C.macrocerus, C.pullus, M.niger, S.testudineus e C.antennatus somam-se aos dados dispon?veis para outras esp?cies de Tetraodontiformes. A partir dos dados obtidos no presente estudo, pode-se inferir que o conte?do de DNA possui rela??o direta com o comprimento total do genoma

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-21Bitstream added on 2014-06-13T20:33:40Z : No. of bitstreams: 1 pires_wl_me_sjrp.pdf: 611018 bytes, checksum: 961d88c40b2d3d5b170049ad3384f050 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Os triatomíneos são vetores do protozoário Typanosoma cruzi, agente etiológico da moléstia de Chagas. Esses insetos são hematófagos e pertencem à ordem Heteroptera e à família Reduviidae. Disseminada por grandes extensões do Brasil e de outros países latinoamericanos, a doença de Chagas representa um grave e importante problema de saúde pública, caracterizando limitações e dificuldades aos tratamentos. Isso ocorre devido à precariedade apresentada pela vida dos contingentes humanos mais expostos à infecção. Atualmente, a parasitose tem grande participação entre as doenças cardíacas na América do Sul. Segundo a Organização Mundial de Saúde, estima-se que, até a década de 90, por volta de 20 milhões de indivíduos estavam infectados pelo Trypanosoma cruzi nas áreas endêmicas. Dados atuais revelam que o número de pessoas infectadas foi reduzido para 9,8 milhões graças à intensa erradicação desses insetos. No entanto, a vigilância deve continuar, pois é fundamental para se evitar novos casos. Citogeneticamente, o interesse sobre os triatomíneos está em seus cromossomos holocêntricos e no processo incomum da meiose, cuja segregação dos sexuais é pós-reducional. O número básico de cromossomos nos triatomíneos é de 2n=22. No presente trabalho foi analisado a espermatogênese de duas espécies do gênero Triatoma (Triatoma maculata e Triatoma pseudomaculata), com ênfase aos seguintes aspectos: fases da espermatogênese; estrutura cromatínica e dos cromossomos meióticos e acompanhamento do ciclo nucleolar. Essas espécies estão distribuídas principalmente nos estados do Nordeste brasileiro e são consideradas potencialmente vetores do T. cruzi. As espécies analisadas foram cedidas pelo insetário do Serviço Especial de Saúde de Araraquara (SESA), pertencente ao Departamento de Epidemiologia da Faculdade de Saúde Pública da USP. Os... / The triatomines are vectors of the protozoan Typanosoma cruzi, etiological agent of Chagas' disease. These insects are hematophages that belong to the order Heteroptera and to the family Reduviidae. Disseminated through large portions of Brazil and of other Latin American countries, Chagas' disease represents a grave and important public health problem, characterizing limitations and difficulties in treatments. This occurs due to the precariousness presented by life contingent to humans most exposed to the infection. Currently, parasitosis presents high participation among cardiac diseases in South America. According to the World Health Organization, it is estimated that, until the 1990s, approximately 20 million individuals were infected by Trypanosoma cruzi in endemic areas. Current data reveal that the number of persons infected was reduced to 9.8 million by virtue of intense eradiaction of these insects. Nevertheless, vigilance must continue, since it is fundamental to avoiding new cases. Cytogenetically, the interest in triatomines is in its holocentric chromosomes and in its uncommon meiosis process, whose sexual segregation is post-reductional. The basic number of chromosomes in triatomines is 2n=22. The present work analyzed the spermatogenesis of two species of the genus Triatoma (Triatoma maculata and Triatoma pseudomaculata), with emphasis on the following aspects: spermatogenesis phases; structure of chromatin and of meiotic chromosomes and accompaniment of the nucleolar cycle. These species are distributed principally in the states of northeastern Brazil and are considered potential vectors for T. cruzi. The species analyzed were supplied by the insectary of the Special Health Service of Araraquara (SESA), belonging to the Department of Epidemiology in the School of Public Health at USP. The organs studied were...(Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Os triatomíneos são insetos hematófagos de grande importância para a parasitologia humana, pois são transmissores do Trypanosoma cruzi, protozoário causador da doença de Chagas. Além de sua importância médico-sanitária, os triatomíneos destacam-se pela sua citogenética, pois possuem cromossomos holocêntricos e um modelo de meiose incomum, com meiose invertida para os cromossomos sexuais. Recentes pesquisas com marcadores moleculares em triatomíneos tentam compreender a ancestralidade do grupo. Uma das formas de se compreender a evolução entre espécies é a partir da análise de seqüências do DNA ribossômico (DNAr). Por pertencer a famílias multigênicas, cópias individuais do DNAr não acumulam mutações independentemente, resultando em pequena variação intra-específica e relevante diferenciação interespecífica. No presente trabalho foi realizado um estudo comparativo entre as espécies Triatoma maculata e Triatoma pseudomaculata, com base no uso das técnicas citogenéticas convencionais de orceína lacto-acética, impregnação por íons prata, bandamento-C, reação de Feulgen; da técnica de citogenética molecular de bandamento- C CMA/DAPI; e também por meio da análise da região ITS-1 do DNAr, com base no sequenciamento, com o objetivo de avaliar o grau de homologia entre as espécies estudadas. Os cariogramas das duas espécies indicaram dez pares de autossomos (um deles de tamanho maior) e um par de cromossomos sexuais (2n = 22). No ciclo meiótico foi possível observar a fragmentação da região nucleolar no final do estágio difuso. Corpúsculos nucleolares foram observados em alguns dos núcleos em metáfases meióticas de T. pseudomaculata, evidenciando a persistência nucleolar. A técnica de bandamento-C revelou que o cromossomo Y é heterocromático em ambas as espécies. O sequencimento da região ITS-1, indicou que as espécies apresenta... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The triatomines are hematophagous insects of great concern in public health because they are vectors of Trypanosoma cruzi, a protozoan that causes Chagas disease. Triatomines are also of great genetic interest, because that they present holocentric chromosomes and an unusual form of meiosis with post-reductional segregation of sex chromosomes. Recent studies based on molecular markers try to understand the evolutionary history of triatomines. To understand the evolution of a given species, ribosomal DNA (rDNA) analyses are frequently used, which can help to infer evolutionary relationships among species. Individual copies of rDNA do not accumulate mutations independently because they belong to multigene families, resulting in slight intraspecific and important interspecific variation. In this study, a comparative analysis was performed between the species Triatoma maculata and Triatoma pseudomaculata, based on the cytogenetic techniques of lacto-acetic orcein, silver ion impregnation, Cbanding, Feulgen reaction; and CMA/DAPI C-banding. We also compared the species by sequencing the ITS-1 rDNA internal transcribed region in order to evaluate the degree of homology among the studied species. The cariograms of the two species revealed ten autosomes and one pair of sexual chromosomes (2n= 22). In the meiotic cycle, nucleolar fragmentation during the final stages of meiotic prophase I was found. Nucleolar corpuscles were found in some meiotic metaphases of T. pseudomaculata, which is evidence of nucleolar persistence. The C-banding technique revealed that the Y chromosome is heterochromatic in both species. The ITS-1 rDNA sequences showed that the species presented a discharge proximity to each other, and had a high degree of homology (98.5%). The knowledge obtained in this study contributes to the understanding of the interrelation and distribution of those species, and offers... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Tercília Vilela de Azeredo Oliveira / Coorientador: Lilian Castiglioni / Banca: João Aristeu da Rosa / Banca: Carlos Roberto Ceron / Mestre

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:17:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao PPRN Mariane_ Gavazzoni 2016.pdf: 1443094 bytes, checksum: 5fe99142fa5f6e62c58e029f07ceeebb (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Astyanax is a polyphyletic taxon with richness of species and wide geographic distribution. Astyanax comprises species that are morphologically very similar with poorly detailed taxonomic delimitations, which makes it difficult to identify and to establish phylogenetic relationships. In order to provide data to contribute to cytogenetic, taxonomy and systematics of Astyanax, cytogenetics analyzes were carried out on ten Astyanax species from three river basins. Astyanax altiparanae and A. aff. fasciatus were collected on the Upper Paraná River basin; A. abramis and A. asuncionensis were collected on the Middle-low Paraná River basin; and A. cf. aramburui, A. eigenmanniorum, A. aff. fasciatus, A. jacuhiensis, A. aff. laticeps, A. cf. paris and Astyanax sp. were collected on the Upper-Middle Uruguai River basin. The results show interespecific variation in diploid number, 2n=46 chromosomes for A. cf. aramburui and A. aff. fasciatus, 2n=48 chromosomes for A. eigenmanniorum, and 2n=50 chromosomes for the remaining species. NORs (Ag-staining and 18S rDNA-FISH) showed species bearing single sites and species bearing multiple sites (up to 10 cistrons in Astyanax sp.), confirming the high variability reported for the genus. The species from A. bimaculatus complex (A. abramis, A. altiparanae, A. jacuhiensis e A. asuncionensis) showed single NORs, a plesiomorphic condition for the complex. FISH with 5S rDNA probes revealed a more conserved condition, with centromeric sites in at least one metacentric chromosome pair and one subtelocentric/acrocentric chromosome pair, however with interspecific variation, which proves it to be an important marker in the characterization and differentiation of these species. Heterochromatin distribution pattern was distinct for all species, except for A. cf. aramburui and A. aff. fasciatus (Ijuí River). This demonstrates that cytogenetic similarities may indicate closer relationship between each other than among to the other analyzed species; on the other hand, 5S rDNA genes showed to be important in differentiation of these cryptic species. The results reported the first cytogenetic data for A. cf. paris and reinforce their cytogenetic similarity with other congenus species, and we also report the occurrence of a Astyanax species that has not been taxonomically described yet. Thus, the results of this study provide data that assist taxonomy and systematic of Astyanax clade and Astyanax paris clade , reinforcing the need for extensive revisions, especially in A. bimaculatus and A. fasciatus complex, including markers such as 5S rRNA and heterochromatin distribution pattern, forthe better understanding of the phylogenetic relationships in Astyanax. / Astyanax é um taxon polifilético com grande riqueza de espécies e ampla distribuição geográfica. Compreende espécies com formas bastante semelhantes e delimitações taxonômicas pouco detalhadas que dificultam a identificação e o estabelecimento das relações filogenéticas. Com o objetivo de fornecer dados que contribuam com a citogenética, taxonomia e sistemática de Astyanax, foram realizadas análises citogenéticas em dez espécies de Astyanax de três bacias hidrográficas. Foram coletados exemplares de Astyanax altiparanae e A. aff. fasciatus na bacia do Alto rio Paraná; A. abramis e A. asuncionensis na bacia do Médio-Baixo rio Paraná; e A. cf. aramburui, A. eigenmanniorum, A. aff. fasciatus, A. jacuhiensis, A. aff. laticeps, A. cf. paris e Astyanax sp. na bacia do Alto-Médio rio Uruguai. Os resultados mostraram variação interespecífica no número diplóide, de 2n=46 cromossomos em A. cf. aramburui e A. aff. fasciatus, 2n=48 cromossomos em A. eigenmanniorum, e 2n=50 cromossomos nas demais espécies. As AgRONs, confirmadas pela 18S rDNA-FISH, evidenciaram espécies portando sítios simples e espécies portando sítios múltiplos (até 10 cístrons em Astyanax sp.), confirmando a alta variabilidade encontrada no gênero. Nas espécies do complexo A. bimaculatus (A. abramis, A. altiparanae, A. jacuhiensis e A. asuncionensis), foram evidenciadas RONs simples, característica plesiomórfica para o complexo. FISH com sonda de 5S rDNA evidenciou uma condição mais conservada, com cístrons centroméricos em pelo menos um par de cromossomos metacêntricos e em um par de cromossomos subtelocêntricos/acrocêntricos, porém com variação interespecífica, demostrando ser um importante marcador na caracterização e diferenciação destas espécies. O padrão de distribuição da heterocromatina mostrou-se distinto para as espécies, com exceção de A. cf. aramburui e A. aff. fasciatus (rio Ijuí), onde foi verificado semelhanças citogenéticas que podem indicar maior proximidade entre estas espécies quando comparadas com as demais analisadas, sendo que a distribuição dos genes 5S rDNA se mostrou importante na diferenciação destas espécies crípticas. Os resultados relatam os primeiros dados citogenéticos para A. cf. paris e reforçam sua semelhança citogenética com outras espécies congêneres, além de relatar a ocorrência de uma espécie de Astyanax ainda não descrita taxonomicamente. Em suma, os resultados do presente estudo fornecem dados que auxiliam na taxonomia e sistemática do clado Astyanax e clado Astyanax paris , reforçando a necessidade de revisões amplas, principalmente nos complexos A. bimaculatus e A. fasciatus que incluam marcadores como 5S rDNA e padrão de distribuição da heterocromatina, para melhor compreensão das relações filogenéticas em Astyanax.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-19Bitstream added on 2014-06-13T20:33:40Z : No. of bitstreams: 1 mendonca_pp_me_sjrp.pdf: 681812 bytes, checksum: d7353da4e0742a18d8d505b0587fda7b (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Os triatomíneos são insetos hematófagos de grande importância para a parasitologia humana, pois são transmissores do Trypanosoma cruzi, protozoário causador da doença de Chagas. Além de sua importância médico-sanitária, os triatomíneos destacam-se pela sua citogenética, pois possuem cromossomos holocêntricos e um modelo de meiose incomum, com meiose invertida para os cromossomos sexuais. Recentes pesquisas com marcadores moleculares em triatomíneos tentam compreender a ancestralidade do grupo. Uma das formas de se compreender a evolução entre espécies é a partir da análise de seqüências do DNA ribossômico (DNAr). Por pertencer a famílias multigênicas, cópias individuais do DNAr não acumulam mutações independentemente, resultando em pequena variação intra-específica e relevante diferenciação interespecífica. No presente trabalho foi realizado um estudo comparativo entre as espécies Triatoma maculata e Triatoma pseudomaculata, com base no uso das técnicas citogenéticas convencionais de orceína lacto-acética, impregnação por íons prata, bandamento-C, reação de Feulgen; da técnica de citogenética molecular de bandamento- C CMA/DAPI; e também por meio da análise da região ITS-1 do DNAr, com base no sequenciamento, com o objetivo de avaliar o grau de homologia entre as espécies estudadas. Os cariogramas das duas espécies indicaram dez pares de autossomos (um deles de tamanho maior) e um par de cromossomos sexuais (2n = 22). No ciclo meiótico foi possível observar a fragmentação da região nucleolar no final do estágio difuso. Corpúsculos nucleolares foram observados em alguns dos núcleos em metáfases meióticas de T. pseudomaculata, evidenciando a persistência nucleolar. A técnica de bandamento-C revelou que o cromossomo Y é heterocromático em ambas as espécies. O sequencimento da região ITS-1, indicou que as espécies apresenta... / The triatomines are hematophagous insects of great concern in public health because they are vectors of Trypanosoma cruzi, a protozoan that causes Chagas disease. Triatomines are also of great genetic interest, because that they present holocentric chromosomes and an unusual form of meiosis with post-reductional segregation of sex chromosomes. Recent studies based on molecular markers try to understand the evolutionary history of triatomines. To understand the evolution of a given species, ribosomal DNA (rDNA) analyses are frequently used, which can help to infer evolutionary relationships among species. Individual copies of rDNA do not accumulate mutations independently because they belong to multigene families, resulting in slight intraspecific and important interspecific variation. In this study, a comparative analysis was performed between the species Triatoma maculata and Triatoma pseudomaculata, based on the cytogenetic techniques of lacto-acetic orcein, silver ion impregnation, Cbanding, Feulgen reaction; and CMA/DAPI C-banding. We also compared the species by sequencing the ITS-1 rDNA internal transcribed region in order to evaluate the degree of homology among the studied species. The cariograms of the two species revealed ten autosomes and one pair of sexual chromosomes (2n= 22). In the meiotic cycle, nucleolar fragmentation during the final stages of meiotic prophase I was found. Nucleolar corpuscles were found in some meiotic metaphases of T. pseudomaculata, which is evidence of nucleolar persistence. The C-banding technique revealed that the Y chromosome is heterochromatic in both species. The ITS-1 rDNA sequences showed that the species presented a discharge proximity to each other, and had a high degree of homology (98.5%). The knowledge obtained in this study contributes to the understanding of the interrelation and distribution of those species, and offers... (Complete abstract click electronic access below)