O objetivo primordial da Radioterapia é fornecer ao tumor uma dose de radiação suficientemente alta e uniformemente distribuída, de forma a poupar os tecidos adjacentes saudáveis dos efeitos ela radiação. Alcançar esse objetivo em sua plenitude é muito difícil devido à vários fatores, como por exemplo uma determinação eficiente do volume a ser tratado (através ela aquisição ele imagens tomográficas ela localização elo tumor no corpo) e também a realização eficaz da distribuição da. dose de radiação (que deve ser tridimensionalmente uniforme e alta o suficiente para erradicar a doença). Atualmente, a técnica de intensidade modulada do feixe (IMRT) usada na Radioterapia Convencional desempenha um avanço importante para o tratamento de tumores situados perto de estruturas anatômicas complexas, como é o caso dos tumores de próstata e de cabeça e pescoço. Essa moderna técnica conformacional já é aplicada nos tratamentos de tumores em vários hospitais nacionais, e citamos, como exemplo, o Hospital Sírio e Libanês, em São Paulo. No entanto, em países como os Estados Unidos, a Alemanha e o Japão, a radioterapia com partículas pesadas carregadas, como prótons c íons de carbono, tem sido desenvolvida há vários anos e demonstra sucesso absoluto no tratamento localizado ele tumores devido a deposição de energia característica dos feixes hadrônicos. A Hadronterapia, modalidade de tratamento ainda desconhecida no Brasil, é o objeto desse trabalho. Nele apresentamos a física básica envolvida no fenômeno da perda de energia dos projéteis, revisamos a dedução da conhecida fórmula ele Bethe-Bloch e, utilizando uma aproximação semi-clássica para obtenção da seção de choque da reação, obtemos os efeitos de uma interação nuclear considerada como uma perturbação à interação coulombiana dominante. Aplicamos também o modelo estatístico de Goldhaber para o cálculo dos efeitos da fragmentação nuclear induzida pelo projétil e, partindo de conceitos utilizados em astrofísica., calculamos a taxa de reação para estimar, quantitativamente, a influência da temperatura. na região do tumor neste processo. / The aim of radiation therapy is to deliver the dose as high and as uniform as possible to diseased tissue sparing all the other parts, that is healthy and critical tissues, without causing unwanted and unnecessary side effects for the patient. Difficults to achieve this goal start with the determination of the three­ dimensional volumes of interest and end up in realizing a three-dimensional uniform and maximal as possible, the dose distribution. The technique of intensity-modulated radiotherapy (IMRT) as form of conformation in conventional radiation therapy is a real revolution. On the other hand, the use of therapeutic charged particles, as protons and carbon íons, is the technology of the actual future which is really the challenge in conformation of dose to targets, thanks to energy deposition characteristics of hadronic beams. The aim of this work is to review the basic physics concerning the treatment of localized tumors with charged particles by applying a semi-classical approach to obtain a dispersion in the equation of energy loss, originally derived by Hans Bethe and Felix Bloch. On a second moment we use statistical methods (Goldhaber statistic model) to estimate the energy of fragment after nuclear fragmentation processes and, in addition, we obtain a expression for the nuclear reaction rate to introduce how the temperature on tumor region would affect it.

Durante ou após o tratamento, quimio ou radioterápico, o cirurgião-dentista deve atuar na prevenção e no tratamento das sequelas e lesões bucais que possam ocorrer. A laserterapia possui um papel fundamental e inovador considerando-se algumas repercussões bucais decorrentes da radioterapia (RT) e da quimioterapia (QT) especialmente quanto a mucosite bucal e a xerostomia. Foi realizado um levantamento dos prontuários de pacientes sob tratamento de neoplasias na região da cabeça e pescoço que foram submetidos à laserterapia de baixa potência no Laboratório Especial de Laser em Odontologia (LELO) da FOUSP, com objetivo de verificar a adequação e efetividade do protocolo terapêutico, estabelecido para os pacientes na prevenção e no tratamento da mucosite oral pós radio e/ou quimioterapia. Examinados cem prontuários de pacientes submetidos a protocolo de laserterapia de baixa potência (LBP) diodo InGaAlP com 660 nm, 40 mW, 6 J/cm2 em um tempo de 6 segundos por ponto em 49 pontos para o tratamento e/ou prevenção das principais manifestações bucais relacionadas a RT (concomitante ou não com cirurgia e/ou QT), atendidos no período de 2007 a 2010. Não foram incluídos os prontuários que não descreviam a periodicidade das aplicações para prevenção e/ou tratamento com LBP, a evolução clínica do paciente frente à laserterapia, dados daqueles pacientes que estavam em tratamento e relacionados a neoplasias outras que não na região de cabeça e pescoço. Foram incluídos na análise os seguintes dados para o levantamento: gênero do paciente, idade, hábitos nocivos (tabagismo, etilismo), frequência e hábitos de higiene bucal, diagnóstico e região da neoplasia, estadiamento TNM, dose total da RT recebida, outros tratamentos relacionados (cirurgia e/ou quimioterapia), queixa principal odontológica/estomatológica. O diagnóstico da mucosite seguiu os Critérios de Toxicidade Comum do Instituto Nacional de Câncer para escala de mucosite oral radio-induzida. Foram colhidos dados quanto ao protocolo de laserterapia de baixa potência utilizados para os casos de mucosite quanto ao período do tratamento, número total de sessões de laserterapia, a frequência das aplicações e desfecho clínico: expresso pelo paciente e/ou avaliação pelo clínico assistente. Os dados obtidos foram apresentados de forma descritiva, em percentuais e médias. Foram selecionados sessenta e três prontuários referentes a neoplasias na região da cabeça e pescoço. O total de prontuários válidos foi dividido em dois grupos: prevenção (n=21) e tratamento (n=42). No grupo de prevenção foram considerados aqueles relativos às aplicações antes da primeira manifestação da mucosite oral. No grupo tratamento consideraram-se aqueles com descrição de aplicações de laser em lesões de mucosite oral. O protocolo utilizado foi capaz de reduzir as lesões e diminuir as manifestações clínicas da mucosite oral em todos os pacientes tratados. A extensão do tempo de tratamento está na dependência de fatores locais como a presença de infecção, nível de higiene bucal bem como a de fatores sistêmicos como o estado nutricional, os hábitos nocivos como tabagismo e etilismo e outras comorbidades como o diabetes. / During or after chemo or radiotherapy, the dentist should play an important role in the prevention and treatment of oral lesions and sequelae that can occur. Laser therapy has some innovative impact especially for therapeutic of oral mucositis and xerostomia. We conducted a survey of archives, of patients after treatment of malignancies in the head and neck who underwent low level laser therapy in the Special Laboratory of Laser in Dentistry (LELO) at Dental School of University of São Paulo in order to verify the suitability of therapeutic protocol for patients in the prevention and treatment of oral mucositis after radiotherapy. One hundred registers of patients undergoing protocol of low level laser (LLL) InGaAlP diode with 660 nm, 40 mW, 6 J/cm2 at a time 6 seconds per point at 49 points for the treatment or prevention of oral mucositis manifestations related to RT (concomitant or not with surgery and/or QT). Records that did not describe timing of applications of LLL for prevention and/or treatment and lack of clinical course of the patient toward lasertherapy were not included on the evaluation. The analysis included: patient gender, age, smoking habits, alcohol use, frequency and oral hygiene practice, diagnosis and region of the tumor, TNM stage, total dose of RT received, other related treatments: surgery and chemotherapy, the primary oral complaint. Diagnosis of mucositis followed the Common Toxicity Criteria of the National Cancer Institute for the level of oral mucositis radio induced. It was collected data from the protocol of low level laser therapy used in cases of mucositis the period of the total number of treatment sessions laser therapy, the frequency of applications, clinical outcome, expressed by the patient and / or evaluation by the clinical assistant. The data were presented descriptively in percentages and averages. We selected sixty-three records relating to neoplasms in the head and neck. The total number of valid records was divided into two groups: prevention (n= 21) and treatment (n= 42). In the prevention group it was considered those related to applications before the first manifestation of oral mucositis. In the treatment group it was considered those with a description of laser applications in presented oral mucositis lesions. The protocol used was able to reduce injuries and lessen the clinical manifestations of oral mucositis in all patients treated. Treatments time length was dependent on local factors such as presence of infection, level of oral hygiene as well as systemic factors such as nutritional status, harmful habits like smoking and alcoholism and other disease as diabetes.

Las investigaciones en relación al fraccionamiento de la dosis y la administración de varias sesiones diarias, iniciadas de forma totalmente empírica por H. Coutard en 1919 (Regato, 1987), han alcanzado a partir del final de los años 60 (Abbatucci, 1968; Montague, 1968) y, gracias a la aportación de la Radiobiología, carácter científico, consolidando uno de los caminos de actualidad en Radioterapia Clínica. El doble mecanismo de acción del multlfraccionamiento, por un lado, como agente de sincronización al acumular a las células tumorales en “G2”, donde no pueden dividirse; y por otro lado, como agente terapéutico al actuar sobre células sincronizadas en M, preservando de lesiones irreparables a los tejidos normales y ocasionando una redistribución máxima de células tumorales, ha permitido depositar en esta estrategia de tratamiento radioterápico fundadas esperanzas de lograr mejorar los resultados en cierto tipo de tumores y determinadas localizaciones. En la esfera de las neoplasias de O.R.L, sobre todo en las fases mas avanzadas de la enfermedad, los resultados obtenidos con las estrategias clásicas de tratamiento son más bien mediocres (Fletcher, 1975), lo cual las convierte en un grupo de elección para ensayar los fraccionamientos no convencionales (Bernier, 1986). La aparición más temprana de las reacciones agudas, el acortamiento de su duración y la disminución del número de días de tratamiento, permite augurar una menor Incidencia de complicaciones y una respuesta inicial espectacular, que redundará en una mayor confianza y colaboración de los pacientes. Para enfocar adecuadamente el desarrollo de la presente tesis doctoral, parece oportuno efectuar inicialmente una breve revisión histórica tanto de la terapéutica radiológica como de la dosimetría, haciendo especial hincapié en aquellos acontecimientos que han puesto de manifiesto la importancia del factor tiempo en Radioterapia Clínica. La redacción escueta ordenada por años permite ponderar y remarcar los hechos narrados sin alargar demasiado la introducción de la cuestión fundamental a analizar. Posteriormente, se plantea una revisión de la problemática actual sobre la que fundamentamos el manejo de estrategias de multifraccionamiento, indicando las bases teóricas que permiten su utilización en clínica. En éste punto conviene introducir dos premisas que se utilizarán a lo largo de la presente tesis y que han de permitir aclarar conceptos a veces un tanto confusos en la bibliografía consultada: por un lado, es necesario definir el concepto de sesión como aquella acción mediante la cual se administra la irradiación en un determinado tiempo y utilizando todas las puertas de acceso de la misma, previstas teóricamente; por otro lado, equiparamos el concepto de fraccionamiento de la dosis a su administración mediante sesiones de igual duración repartidas a lo largo de un periodo de tiempo previamente determinado. Por último, se expone la experiencia clínica obtenida del tratamiento mediante una estrategia multifraccionada de un grupo de pacientes afectos de neoplasias localmente avanzadas de la esfera O.R.L, confirmando mediante la discusión y las conclusiones, la conveniencia de profundizar en el desarrollo del binomio dosis-tiempo en Radioterapia Clínica. Nuestra impresión, en relación a las estrategias convencionales anteriormente utilizadas en el Servicio de Radioterapia del Hospital Clínico y Provincial de Barcelona, para el tratamiento de las neoplasias loco-regionalmente avanzadas de la esfera O.R.L, es que el multifraccionamlento aumenta la probabilidad de control de estas neoplasias, con un aumento remarcable pero controlable de la toxicidad aguda y un ligero aumento tolerable de la toxicidad tardía. Las diferencias significativas encontradas en diversos parámetros deben enmarcarse dentro de las limitaciones propias de la estadística aplicada a una muestra pequeña, aunque corroboran los hallazgos publicados en la bibIiografía internacional. Nos encontramos pues ante una estrategia de tratamiento radioterápico válida, y que nos estimula para continuar buscando un camino que mejore la calidad de vida de nuestros pacientes. / Radiobiological considerations establish the use of non usual techniques in Radiotherapy treatments, in patients with Head and Neck neoplasms where the special economical and working characteristics allow develop a new perspective in Oncological Radiotherapy. The aim of this work was: I) A bibliographic research of the Radiotherapic basis, Dosimetric aspects and Radiobiological studies, to measure the influence of multiple fractions per day in Radiotherapic treatments. 2) To compare the results of three a day fractions versus conventional fractionation in patients with Head and Neck neoplasms. 3) Evaluation and analysis of toxicity, survival and response depending of the different treatment schedule. The results and conclusions of this study were analysed, deducing that the survival and response with respect to fractionation schedule were significant, being more elevated In patients treated with three a day fractionation.

El objetivo de este estudio es la calibración de diodos, para ser utilizados en dosimetria in vivo en haces de fotones de alta energía, en diversas situaciones, la mayoría de ellas no descritas en la literatura: En primer lugar se calibra un conjunto de diodos para determinar la dosis entrada y salida en la técnica específica de ICT (capítulo 3). Se hace especial hincapié en la calibración de los diodos detrás de protecciones a pulmón de transmisión parcial. En el capítulo 4 se desarrolla un algoritmo de cálculo para calcular las dosis a plano medio a partir de las dosis in vivo en ICT. Se presentan resultados en una serie de pacientes. Se comprueba la aplicabilidad de este algoritmo en presencia de heterogeneidades (pulmón) y detrás de protecciones de transmisión parcial. Se compara este algoritmo con el algoritmo propuesto por Rizzoti et alt. [41]. La calibración de diodos para altas energías de RX en técnicas estándar de tratamiento se trata en los capítulos 5 y 6. En el capítulo 5 se comparan dos tipos de diodos diseñados para trabajar con RX de 16-25 MV. En el capítulo 6 se amplía esta comparación a 4 tipos de diodos comercializados y también se presenta la calibración de un diodo para trabajar con haces de RX de energías comprendidas entre 4-8 MV. Este capítulo corresponde a la recopilación de la experiencia del Hospital de la Santa Creu i Sant Pau en la calibración de diodos para medir la dosis in vivo a la entrada en técnicas estándar así como en la implementación de la dosimetría in vivo en la rutina clínica. Esta recopilación hace inevitable que se repitan, aunque con más detalle, algunos de los procedimientos de calibración citados en capítulos anteriores. Ha sido también objetivo del capítulo 5 matizar una tesis propuesta por G. Rikner y E. Russell [11, 13, 14, 16] que hace referencia a la inferioridad desde el punto de vista dosimétrico de los diodos tipo n, en un nuevo diodo n comercializado por Pecitron en 1997.

Los factores de pronóstico en los tumores uterinos con patrón sarcomatoso (TUPS) no han estado bien establecidos con la excepción del estadio. Asimismo, la radioterapia (RDT) de modo complementario a la cirugía no han sido un tratamiento consensuado. Con la hipótesis de que no se conoce con la suficiente precisión la influencia de los factores de pronóstico en la supervivencia global específica (SGE), supervivencia libre de enfermedad (SLE), supervivencia libre de recidiva local (SLRL) y supervivencia libre de metástasis (SLM), se ha estudiado la influencia de los diferentes factores de pronóstico en las diferentes supervivencias. Dicho estudio se ha efectuado estratificando a las pacientes por estadios. Así mismo, se ha evaluando el impacto de la radioterapia y se ha efectuado el estudio comparativo de los factores de pronóstico en estos tumores con los del cáncer de cérvix y el de endometrio. Material y métodos: 60 pacientes diagnosticadas y tratadas por TUPS entre 1975 y 1999 en el Hosp. Clínic de Barcelona. Factores de pronóstico estudiados: edad, tipo histológico, índice mitótico, invasión miometrial (IM), invasión vasculolinfática (IVL), necrosis, uni/multicentricidad, tamaño tumoral y la radioterapia. Análisis estadístico: Método actuarial de Kaplan y Maier, test de Log-rank y modelo de riesgo proporcional de Cox. Estudio de los factores pronósticos en la literatura: 21 publicaciones en TUPS entre 1966 y 2001, así como las publicaciones sobre factores de pronóstico en los últimos 10 años para el cáncer de cérvix y el de endometrio. Resultados: 1) En el análisis multivariado se evidenció: en estadios tempranos la influencia de la IVL y el tamaño tumoral mayor a 8 cm. en la SGE, de la invasión miometrial > 50% en la SLE y SLRL, y de la IVL en la SLM. En los estadios avanzados solo se constató la influencia del tipo histológico leiomiosarcoma en la SGE, lo cual pudo ser debido a una mayor incidencia de factores de mal pronóstico en los estadios avanzados. 2) No se evidenció impacto de la RDT en ninguna de las supervivencias; sin embargo, hubo una mayor incidencia de IM e IM > 50% entre las pacientes que recibieron RDT. El 100% de las pacientes con tamaños tumorales < 8 cm. con estadio temprano y tipo histológico carcinosarcoma estaban vivas si habían recibido RDT. 3) Los tumores uterinos con patrón sarcomatoso tienen un comportamiento más parecido al cáncer de endometrio que al cáncer de cérvix en cuanto a la relevancia de los diferentes factores de pronóstico. La IM > 50%, tamaño tumoral > 8 cm., IVL, Indice mitótico y tipo histológico deben de considerarse factores de mal pronóstico en los TUPS; el que tiene más relevancia en la literatura es la invasión miometrial.Conclusiones: El estadio es el factor pronóstico más importante en los TUPS. Al estratificar a las pacientes por estadios la IVL, la IM > 50% y el tamaño tumoral han sido los factores con impacto en los estadios tempranos. Todas las pacientes con IVL fallecieron con metástasis. Podría existir un beneficio de la irradiación en aquellos tumores < 8cm, carcinosarcomas e IM > 50%. En estadios avanzados influyo el tipo leiomiosarcoma. La mayor agresividad de los estadios avanzados podría justificarse por una mayor incidencia de factores de mal pronóstico en comparación con los tempranos, lo que además puede explicar la ausencia de efecto de la irradiación. / Prognostic factors in uterine tumours with a sarcomatous component (UTSC) have not being well stablished with the exception of the stage. Moreover, there is not agreement between authors on the value of complementary radiotherapy to the surgery.The present study was performed with the hypothesis that there is not a precise knowledge of the influence of the different prognostic factors on the specific overall survival (OS), disease-free survival (DFS), local relapse-free survival (LRFS) and distant metastasis-free survival (DMFS). The study of the influence of the different prognostic factors in the different survivals was performed stratifying patients by stage. The impact of irradiation (RDT) was also analyzed and a comparative study of the literature on prognostic factors between cervical and endometrial cancer, and uterine tumours with a sarcomatous component was performed.Matherial and methods: Sixty patients diagnosed and treated at Clinic Hospital of Barcelona. Prognostic factors studied: age, pathologic type, mitotic index, myometrial invasion (MI), vascular and lymphatic space invasion (VLSI), necrosis, unicentricity / multicentriciy, tumoral size and radiotherapy. Statistics: Kaplan and Maier actuarial method, Log-rank method and Cox model of proportional risk. The study of prognostic factors in the literature was done using 21 publications in uterine sarcomas between 1966 and 2001 having more than 45 patients, and those articles on prognostic factors for cervical and endometrial cancer in the last 10 years.Results: 1) Multivariate analysis. In early stages, VLSI and tumor size > 8 cm. had impact on OS, MI > 50% on DFS and LRFS and VSLI on DMFS. Advanced stages: leiomyosarcoma type was the only prognostic factor with impact on OS; a higher incidence of other prognostic factors in advanced stages could have been the responsible. 2) RDT had no impact on the different survival results; nevertheless, there were a higher incidence of MI and MI > 50% in the radiotherapy group. The 100% of the patients having tumoral size < 8 cm., early stages and carcinosarcoma type, were alive if they had received irradiation. 3) In terms of prognostic factors, endometrial carcinoma and uterine tumors with a sarcomatous component have a more similar behaviour in comparison to cervical cáncer. MI> 50%, tumoral size, VLSI, mitotic index and pathologic type should be considered as prognostic factors in uterine sarcomas; the most relevant in the litherature is MI.Conclusions: The most important prognostic factor in uterine sarcomas is the stage. When patients were stratified by stages VLSI, MI>50% and tumoral size > 8 cm. were prognostic factors with impact in early stages. All the patients having VLSI died by distant metastasis. A benefit of irradiation could be found in tumors >8 cm., MI > 50% and carcinosarcoma type. In advanced stages leiomyosarcoma type had impact on survival. The more aggresive behaviour in advanced stages could be explained by a higher incidence of bad prognostic factors in comparison to early stages.

El objetivo de este trabajo es estudiar las alteraciones que las radiacionesionizantes producen sobre las glándulas salivales accesorias labiales. Ennuestro estudio se seleccionaron sujetos diagnosticados de un tumor malignode cabeza y cuello que iban a recibir radioterapia dentro de su tratamiento,incluyendo los labios dentro del campo de irradiación. Se evaluó la secreciónsalival y las alteraciones morfológicas de las glándulas en el momento deldiagnóstico y a los tres meses de finalizar el tratamiento radioterápico.Se incluyeron en el estudio 17 sujetos. Antes de la radioterapia lasecreción salival media fue de 0,21 ml/m; en cuatro de los sujetos existía atrofiaglandular leve antes de dicho tratamiento. En la segunda fase del estudio lasecreción media fue de 0,05 ml/min y en todos los pacientes se observó atrofiaglandular (en 7 sujetos leve, en 7 moderada y en los 3 restantes severa).Los pacientes que reciben tratamiento radioterápico incluyendo los labios enel campo de irradiación presentan disminución de la secreción salival, que semanifiesta como xerostomía. Las alteraciones morfológicas se describen comoaparición de atrofia glandular, resultado de cambios en acinos (que disminuyenen número), conductos (que aparecen dilatados), y tejido conectivoperiglandular (el cual es sustituido por tejido fibroadiposo). / A study is made of the alterations induced by ionizing radiation upon theaccessory salivary glands of the lips in a series of 17 patients with malignanthead and neck tumors programmed for radiotherapy encompassing the regionof the lips.Salivary secretion was evaluated, along with the morphological alterations ofthe glands at the time of diagnosis and three months after the completion ofradiotherapy.Prior to radiotherapy, mean salivary secretion was 0.21 ml/min., and fourpatients had mild gland atrophy. Three months after radiotherapy, meansalivary secretion decreased to 0.05 ml/min., and all patients showed glandatrophy (mild in 7, moderate in 7 and severe in 3 cases).Patients subjected to radiotherapy encompassing the lips within theirradiated field show diminished salivary flow, manifesting as xerostomia. Theassociated morphological changes comprise gland atrophy, with a reduction inthe number of acini, duct dilatation, and fibroadipose replacement of theperiglandular connective tissue.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000439149-Texto+Completo-0.pdf: 1490829 bytes, checksum: bd616615ee5265db0a960d6f77c8581d (MD5) Previous issue date: 2012 / Glioblastoma multiforme (GMB) is the most malignant and common type of all astrocytic tumours. Current standard treatment for GBM patients involves maximum surgical resection of the tumour, followed by radiotherapy and chemotherapy, usually containing the alkylating agent Temozolomide (TMZ). Despite this aggressive combination therapy, the survival rate of GBM patients is still low. This work consisted in investigating the cytotoxic effects of Akt-inhibition by MK-2206 with irradiation (RT) and TMZ on in vitro human malignant glioma. Seven malignant glioma cell lines were cultured and tested for clonogenic survival, invasion inhibition, tumour spheroid growth and proliferation. The Akt-inhibitor MK-2206 and TMZ were added at different time treatments and in varying doses. Cultures were irradiated with single dose and with fractionated γ-irradiation. Cellular modulation of Akt and p-Akt were assessed by Western blot analysis. MK-2206 reduced the levels of phospho- Akt key protein in the PI3Kinase-Akt pathway, decreased cell survival, and inhibited invasion, proliferation and cell growth. The combination of MK-2206 and RT lead to enhanced inhibition of cell proliferation and invasion, which is not observed with RT alone. The radioenhancing effect of MK-2206 was most striking in inhibition of spheroid volume growth by fractionated RT; the radiosensitizing effect of MK-2206 was stronger than that of TMZ. MK-2206 enhanced the in vitro effects of RT and TMZ in terms of decreased cell survival, invasion, proliferation and growth in malignant glioma. Effects could be ascribed to inhibition of PI3K-Akt pathway. / O Glioblastoma multiforme (GBM) é o tipo mais maligno e mais comum de todos tumores astrocíticos. O tratamento atual para pacientes de GBM envolve máxima remoção cirúrgica, seguida de radio e quimioterapia, normalmente com o agente alquilante Temozolamida (TMZ). Apesar da agressividade da terapia combinada, o tempo de sobrevivência dos pacientes ainda é baixo. Este trabalho procurou investigar os efeitos citotóxicos do inibidor de Akt MK-2206 em combinação com irradiação (RT) e TMZ em um painel de células de gliomas humanos. Sete linhagens de glioma foram cultivadas e testadas em ensaio de sobrevivência clonogênica, inibição de invasão, e modelos de proliferação e crescimento de volume em esferóides. O inibidor MK-2206 e TMZ foram adicionados em diferentes tempos de tratamento e diferentes doses. As culturas foram irradiadas com doses únicas ou em terapias fracionadas com irradiação γ. A modulação celular de Akt e fosfo-Akt foi checada via Western Blot. O composto MK-2206 reduziu a fosforilação da proteína chave Akt na via PI3K, diminuindo a sobrevivência celular e inibindo invasão, proliferação e crescimento celular. A combinação de MK-2206 com RT levou a uma maior inibição de invasão e proliferação, o que não é observado somente com a RT. O efeito radiosensível de MK-2206 foi ainda maior na inibição do volume dos esferóides em terapia combinada com RT fracionada, sendo ainda maior do que o efeito combinado com TMZ. MK-2206 aumentou os efeitos in vitro de RT e TMZ em termos de redução de sobrevivência celular, invasão, proliferação e crescimento celular em gliomas malignos. Os efeitos podem ser atribuídos a inibição da via PI3KAkt.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000438124-Texto+Completo-0.pdf: 1241897 bytes, checksum: 68c450ddba15c588f04067f7bd75dae9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive tumor of the CNS and most deadly primary tumors. Despite the malignant gliomas are generally treated with radiotherapy, often they exhibit a significant radioresistance that limits the treatment success. It can be postulated that molecular changes commonly observed in these tumors contribute to this resistance. The nucleotide ATP is an important signaling molecule in CNS and it is a selective P2X7 purinergic receptor (P2X7R) ligand at high concentrations. Some studies have reported that P2X7R is responsible for ATP-induced cell death in various cell types, but some human glioma cells were resistant to death induced by ATP. In addition to ATP resistance, patients with GBM develop spontaneous antitumor immune responses. These studies show the requirement for an exogenous induction of the immune system to generate an antitumor response. IL-17 is a pro-inflammatory cytokine and its role in cancer is already unknown. Herein, we first aimed to characterize a radiosensitive human glioma cell line for sensitivity to ATP and to investigate whether activation of the P2X7R could be involved in the death of this cell line. Furthermore, aimed to elucidate the IL-17 receptor susceptibility to irradiation, as well as, elucidate the effect of IL-17 and a possible interaction between this cytokine and P2X7R in human glioma cells. The human glioma cell lines U-138 MG and U-251 MG were resistant to death when treated with either ATP (5 mM) or BzATP (100 μM), a selective P2X7R agonist, whereas in the radiosensitive M059J glioma cell line, the high ATP (5 mM) or BzATP (100 μM), significantly diminished the cell viability (32. 4% ± 4. 1 and 24. 6% ± 4. 0, respectively).The M059J lineage expresses significantly higher P2X7R levels when compared to the U-138 MG and U-251 cell lines (0. 40 ± 0. 00; 0. 28 ± 0. 01 and 0. 31 ± 0. 01, respectively) and irradiation upregulated P2X7R expression in all lineages. Additionally, the selective P2X7R antagonist A740003 (10 µM) significantly decreased the cell death caused by irradiation. We provided novel evidence indicating that M059J human glioma cell line is ATP-P2X7R sensitive, pointing out the relevance of the purinergic P2X7R in glioma radiosensitivity. The IL-17 receptor was significantly more expressed after irradiation (2 Gy), showing a possible participation of the IL-17/R on the irradiation susceptibility. The treatment with IL-17 (10 ng/ml) diminished approximately 62% the human glioma cell lines viability. Other preliminary result showed that the P2X7R antagonist was able to partially reverse the toxicity caused by IL-17 in these cell lines. Our data show an antitumor role of this cytokine and corroborate to the idea of a possible interaction between IL-17/P2X7R. This work prospects for studies to be conducted to better understanding the action of IL-17 in gliomas and interaction IL-17/P2X7R. / O glioblastoma multiforma (GBM) é considerado o mais agressivo tumor do sistema nervoso central (SNC), e o mais letal entre os tumores primários. Apesar dos gliomas malignos serem geralmente tratados com radioterapia, muitas vezes estes exibem uma significativa radioresistência que limita o sucesso do tratamento. Pode-se postular que mudanças moleculares comuns observadas nestes tumores contribuem para essa resistência. O nucleotídeo ATP é uma importante molécula de sinalização no SNC e um ligante seletivo do receptor purinérgico P2X7 (P2X7R) em altas concentrações. Estudos mostram que o P2X7R é responsável pela morte induzida pelo ATP em vários tipos de células, porém, algumas células de glioma humano mostram-se resistentes à morte induzida pelo ATP. Além da resistência ao ATP, pacientes com GBM espontaneamente desenvolvem resistência a respostas imunes antitumorais. Estudos levantam a necessidade de uma indução exógena do sistema imunológico a fim de gerar uma resposta antitumoral. A IL-17 é um citocina pró-inflamatória e seu papel no câncer ainda é desconhecido. O presente trabalho primeiramente objetivou caracterizar uma linhagem de glioma humano radiossensível quanto à sensibilidade ao ATP e investigar se a ativação do P2X7R poderia estar envolvida na morte destas células. Além disso, visou elucidar a susceptibilidade do receptor da IL-17 à radioterapia, bem como, o efeito da IL-17 e uma possível interação entre esta citocina e o P2X7R em células de glioma humano. As linhagens celulares de glioma humano U-138 MG e U-251 MG mostraram-se resistentes à morte, quando tratadas com ATP (5 mM) ou BzATP (100 µM), agonista seletivo do P2X7R. Na linhagem de glioma radiossensível M059J, o tratamento com alta concentração de ATP (5 mM) ou com BzATP (100 µM), diminuiram significativamente a viabilidade celular (32,4% ± 4,1 e 24,6 ± 4,0%, respectivamente).A linhagem M059J expressou níveis significativamente maiores do P2X7R quando comparada com as linhagens celulares U-138 MG e U-251 MG (0. 40 ± 0. 00; 0. 28 ± 0. 01 e 0. 31 ± 0. 01, respectivamente) e a irradiação aumentou a expressão do P2X7R em todas linhagens. Além disso, o antagonista seletivo do P2X7R, A740003 (10 μM), diminuiu significativamente a morte celular causada pela irradiação. Nesta primeira parte do trabalho, fornecemos novas evidências indicando que a linhagem de glioma humano M059J é sensível ao ATP-P2X7R, apontando a relevância do P2X7R na radiossensibilidade do glioma. Na segunda parte deste trabalho, observou-se que o receptor da IL-17 foi significativamente mais expresso após a irradiação (2 Gy) mostrando uma possível participação da via IL-17/R na susceptibilidade à irradiação. O tratamento com a IL-17 (10 ng/ml) diminuiu em aproximadamente 62% a viablidade de linhagens celulares U-138 MG e M059J de glioma humano. Outros resultados preliminares mostraram que o antagonista do P2X7R foi capaz de reverter parcialmente a toxicidade causada pela IL-17 nestas linhagens. Nossos dados demonstram um papel antitumoral desta citocina e corroboram com a idéia de uma possível interação entre a IL-17/P2X7R. Este trabalho deixa perspectivas de estudos a serem realizados para melhor compreender a ação da IL-17 nos gliomas e a interação IL-17/P2X7R.

No presente trabalho foi estudada a resposta de diodos epitaxiais (EPI) e fusão zonal (FZ) como dosímetros on-line em tratamentos radioterápicos com feixe de fótons na faixa de megavoltagem (diodo tipo EPI)e ortovoltagem (diodos tipo EPI e FZ). Para serem usados como dosímetros os diodos foram encapsulados em sondas de polimetilmetacrilato preto (PMMA). Para as medidas da fotocorrente os dispositivos foram conectados a um eletrômetro Keithley&reg; 6517B no modo fotovoltaico. As irradiações foram feitas com feixes de fótons de 6 e 18 MV (acelerador Siemens Primus&reg;),6 e 15 MV (acelerador Novalis TX&reg;) e 10, 25, 30 e 50 kV de um equipamento de Radiação X Pantak/Seifert. Nas medidas com o acelerador Siemens Primus&reg; os diodos foram posicionados entre placas de PMMA a uma profundidade de 10,0 cm e com o acelerador Novalis TX&reg; mantidos entre placas de água sólida a uma profundidade de 5cm. Em ambos os casos, os diodos foram centralizados em campos de radiação de 10 × 10 cm2, com distância fonte superfície (DFS) mantida fixa em 100 cm. Para as medidas com os feixes de fótons deortovoltagem os diodos foram posicionados a 50 cm do tubo em um campo de radiação circular de 8 cm de diâmetro. A linearidade com a taxa de dose foi avaliada para as energias de 6 e 15MV do acelerador Novalis TX&reg; variando-se a taxa de dose de 100 a 600 unidades monitoras por minuto e para o feixe de 50 kV variando-se a corrente do tubo de 2 a 20 mA. Todos os dispositivos apresentaram respostas lineares com a taxa de dose e dentro das incertezas, independência da carga com a mesma. Os sinais de corrente mostraram boa repetibilidade, caracterizada por coeficientes de variação em corrente (CV) inferiores a 1,14%(megavoltagem) e 0,15%(ortovoltagem) e em carga menores que 1,84% (megavoltagem) e 1,67% (ortovoltagem). Foram obtidas curvas dose-resposta lineares com coeficientes de correlação linear melhores que 0,9999 para todos os diodos. / In the current work it was studied the performance of epitaxial (EPI) and float zone (FZ) silicon diodes as on-line dosimeters for megavoltage (EPI diode) and orthovoltage (EPI and FZ diode) photon beam radiotherapy. In order to be used as dosimeters the diodes were enclosed in black polymethylmethacrylate (PMMA) probes. The devices were then connected, on photovoltaic mode, to an electrometer Keithley&reg; 6517B to allow measurements of the photocurrent. The irradiations were performed with 6 and 18 MV photon beams (Siemens Primus&reg; linear accelerator), 6 and 15 MV (Novalis TX&reg;) and 10, 25, 30 and 50 kV of a Pantak / Seifert X ray radiation device. During the measurements with the Siemens Primus&reg; the diodes were held between PMMA plates placed at 10.0 cm depth. When using Novalis TX&reg; the devices were held between solid water plates placed at 50 cm depth. In both casesthe diodes were centered in a radiation field of 10 x 10 cm2, with the source-to-surface distance (SSD) kept at 100 cm. In measurements with orthovoltage photon beams the diodes were placed 50.0 cm from the tube in a radiation field of 8 cm diameter. The dose-rate dependency was studied for 6 and 15 MV (varying the dose-rate from 100 to 600 monitor units per minute) and for the 50 kV beam by varying the current tube from 2 to 20 mA. All devices showed linear response with dose rate and, within uncertainties the charge collected is independent of dose rate. The current signals induced showed good instantaneous repeatability of the diodes, characterized by coefficients of variation of current (CV) smaller than 1.14% (megavoltage beams) and 0.15% for orthovoltage beams and coefficients of variation of charge (CV) smaller than 1.84% (megavoltage beams) and 1.67% (orthovoltage beams). The doseresponse curves were quite linear with linear correlation coefficients better than 0.9999 for all diodes.

Orientador: Júlio Sérgio Marchini / Banca: Aureluce Demonte / Banca: Karina Pfrimer / Resumo: Um dos tratamentos mais utilizados no câncer é a radioterapia. Esta, ao lado dos benefícios inerentes da terapia pode cursar com efeitos colaterais indesejados. Um destes efeitos diz respeito ao comprometimento do estado nutricional, tanto devido a doença em si, como da radioterapia. Conseqüentemente, a subnutrição destes pacientes é multifatorial e potencializa a morbi-mortalidade. No entanto, não há um consenso sobre o dano e nem sobre a sua relação temporal com intensidade, freqüência e estado nutricional. Objetivo: Avaliar prospectivamente a evolução do estado nutricional, do gasto energético e dos níveis corporais dos minerais, zinco, ferro, cálcio, magnésio e estrôncio antes e após a radioterapia em pacientes portadores de câncer de cabeça e pescoço. Métodos: Foram monitorados, utilizando as técnicas espectrofotométricas os minerais, zinco, ferro, cálcio, magnésio e estrôncio (plasmático, eritrocitário e urinário). Os pacientes foram avaliados quanto a ingestão dietética (questionário de freqüência do consumo alimentar), estimou-se a massa corpórea (antropometria e bioimpedância) e o gasto energético (calorimetria indireta). Resultados: Não foi verificada diferença significativa nos valores dos minerais (plasmático, eritrocitário e urinário), no gasto energético de repouso, na ingestão de macronutrientes e dos minerais analisados. Foram observadas alterações nas medidas antropométricas com valor significativo da porcentagem de gordura corporal, no volume expirado de gás carbono, na oxidação de carboidratos e no quociente respiratório. Conclusão: Apesar das alterações corporais ocorridas, são necessários mais estudos para limitar as variações corporais e bioquímicas dos pacientes com câncer de cabeça e pescoço submetidos à radioterapia e encontrar observações estatísticas mais definidas / Abstract: One of the most used treatments for cancer is radiation therapy. This, along with the inherent benefits of therapy may be associated with unwanted side effects. One of these effects with respect to impairment of nutritional status, both because the disease itself, such as radiotherapy. Consequently, the malnutrition of these patients is multifactorial and enhances the morbidity and mortality. However, there is no consensus about the damage and not on its temporal relation to intensity, frequency and nutritional status. Objective: To evaluate prospectively the evolution of nutritional status, energy expenditure and body levels of minerals, zinc, iron, calcium, strontium and magnesium before and after radiotherapy in patients with head and neck cancer. Methods: We monitored using the spectrophotometric techniques minerals, zinc, iron, calcium, magnesium and strontium (plasma, erythrocyte and urinary). Patients were assessed for dietary intake (food frequency questionnaire of food consumption), we estimated body mass (anthropometry and bioimpedance) and energy expenditure (indirect calorimetry). Results: There was no significant difference in the values of minerals (plasma, erythrocyte and urinary) in resting energy expenditure, intake of nutrients and minerals analyzed. Have been changes in anthropometric measures with a significant value of the percentage of body fat, the volume of gas exhaled carbon in carbohydrate oxidation and respiratory quotient. Conclusion: Although the body changes that occur, more studies are needed to limit the variation in physical and biochemical characteristics of patients with head and neck cancer undergoing radiotherapy and find more definite statistical observations / Mestre