Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T20:01:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Molina_RosanaMara_M.pdf: 4754222 bytes, checksum: 3779fdcee94bc5b1512119ee03263569 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O diagnóstico da infecção pelo HIV é usualmente estabelecido por ensaios sorológicos, que identificam anticorpos específicos contra o HIV. Entretanto, o recém-nato pode receber os anticorpos matemos da classe IgG, durante a gestação, no momento do parto, ou após o nascimento e com isso apresentar resultados falsos positivos até cerca de 18 meses de vida. Há vários outros métodos para o diagnóstico do HIV -1 em crianças, mas o que está sendo indicado atualmente é a reação em cadeia da polimerase (PCR) , por ser um método rápido, de alta sensibilidade e especificidade, que podem ser potencializadas com a realização de uma segunda reação de amplificação (''Nested-PCR''). A PCR detecta fragmentos-alvo do genoma viral. Com base na necessidade de um diagnóstico precoce do HIV-1, o presente trabalho teve como objetivo a padronização da técnica da ''Nested-PCR'', com utilização de "primers" que flanqueiam 4 regiões virais conservadas do HIV -1 (genes gag, env - 2 regiões e pol), para detecção do HIV-I, e aplicação do método em 41 crianças (com no mínimo 2 e no máximo 4 coletas de amostragem de sangue periférico) em seguimento no Hospital de Clínicas da UNICAMP, com suspeita de infecção. Os dados permitiram um estudo comparativo entre o diagnóstico feito pela ''Nested-PCR'' com os resultados obtidos pelo método soro lógico imunoenzimático ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), apesar das crianças apresentarem idade inferior a 18 meses, não tendo portanto o ELISA como teste padrão-ouro. Com base nos resultados da ''Nested-PCR'' foi calculada uma proporção de crianças infectadas pelo HIV que estão em seguimento no ambulatório de Imunodeficiência Pediátrica e que foram incluídas neste trabalho. Foi analisada também, a influência do uso da zidovudina (AZT), do tipo de parto (cesárea ou normal) e do aleitamento materno, já que esses fatores são influentes para o aumento da transmissão perinatal do HIV -1. Os resultados positivos obtidos pela ''Nested-PCR'' para a l' coleta de sangue periférico das crianças em estudo foi de 26,32%; para a 1a coleta, manteve-se o mesmo valor, e para a 3a coleta, 26,67%. Os resultados positivos pelo ELISA, para as 1a, 2a e 3a coletas foram respectivamente 86,84%; 78,95% e 56,67%. A proporção de crianças infectadas pelo HIV na população estudada foi de 29,3%. A análise da relação do uso profilático do AZT no período gestacional apresentou um "p", (obtido pelo teste de Fisher), de 0,05 para as (1a e 2a coletas e 0,014 para a 3a coleta; esses resultados sugerem que houve significância entre o uso do AZT (por parte materna) e a redução da transmissão vertical do HIV-l. Em relação ao aleitamento materno, os valores de "p" foram: 0,006 (1a e 2a coletas) e 0,016 ( 3a coleta) sugerindo também, associação com a redução da transmissão vertical do HIV-1, nesta população. A análise das crianças as quais as mães fizeram uso dos fatores associados à redução da infecção pelo HIV via perinatal (uso do AZT durante a gestação; parto do tipo cesárea e não aleitamento materno) mostrou um percentual de 20% de positividade à infecção pelo HIV-1 pela "Nested-PCR"; já nas crianças nascidas de mães que não fizeram uso de tais fatores, esse percentual elevou-se para 75%. Os resultados obtidos pela "Nested-PCR" foram confirmados em algumas amostras, através da hibridação e do método de seqüenciamento direto de seqüências gênicas do HIV -1. Os resultados obtidos neste estudo sugeriram que a "Nested-PCR" foi um método rápido e precoce para o diagnóstico da infecção pelo HIV -1 via perinatal. A utilização dos fatores associados à redução da infecção pelo HIV via perinatal indicadas às gestantes infectadas sugeriram influência na redução da transmissão perinatal do vírus na população estudada. / Abstract: The diagnosis of the HIV infection is usually set by serologic assays that identify specific antibodies against the HIY. However, the newborn can get the IgG c1ass maternal antibodies, during the pregnancy, at the delivery time, or after berth, and thus, can present false-positive results up to about 18 months old. There are several other methods to the diagnosis of the HIV -1 in children, but, nowadays, PCR (polymerase chain reaction) is the one that is being suggested because it is a quick method with high sensitivity and specificity that can be risen by performing a 2nd amplification reaction (Nested PCR). The PCR detects target fragments ofthe viral genome. Based on the necessity of an early diagnosis ofthe HIV-1, the present study had as goal the standardization of the Nested-PCR technique with the utilization of the primers that flank 4 preserved viral areas of the HIV -1 (gens gag, env - 2 areas and paI) to the detection of the HIV -1 and the application of the method in 41 infants (with at least 2 collects and at most 4 collects of the peripheral blood sample) followed at Hospital de Clínicas da UNICAMP, with suspicion of infection. The data allowed a comparative study between the diagnosis made by the ''Nested-PCR'' and the diagnosis obtained trom the serologic immune enzymatic method, ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), in spite ofthe children had been under 18 months old, they did not have the ELISA as a gold-standard test. Based on the results of the Nested PCR, a rate of the HIV infected children who are being followed at the ambulatory de Immunodeficiency Pediatric and that were inc1uded in this work was evaluated. The influence of the use of Zidovudine (AZT), the type of the delivery (caesarian or normal), and the maternal breastfeeding were also analyzed since these factors are known to be influent to augment the HIV -1 perinatal transmission. The positive results acquired by the Nested-PCR to the 1st peripheral blood collect of the children under study were 26,32%; to the 2nd collect, the same value was maintained, and to the 3rd collect, 26,67%. The positive results by ELISA, to the 1st, 2nd, and 3rd collects, were 86,84%, 78,95%, and 56,67% respectively. The rate of the HIV infected children in the studied population was 29,3%. The analyzes of the association of the prophylactic use of AZT during the pregnancy period presented 0,05% 'p' (obtained by the Fisher's test) to the 1st and 2nd collects, and 0,014 to the 3rd collect. These results suggest that there was significance between the use of AZT (on the mother' s side) and a reduction of the HIV -1 vertical transmission. Regarding the maternal breastfeeding the values of 'p' were: 0,006 (1st and 2nd collects) and 0,016 (3rd collect), also suggesting association with the reduction of the HIV-1 vertical transmission in this population. The analysis from children whose mothers made use ofthe factors related to the reduction ofthe HIV infection via perinatal (use of AZT, during the pregnancy; cesarian delivery, and non maternal breastfeeding), showed a 20% percentage ofthe positiveness to the HIV-1 infection by Nested-PCR; yet in the children bom from mothers that did not made any use of such factors, this percentage increased to 75%. The results obtained by the "Nested-PCR" were confirmed in some of the samples, through the hybridization and the direct sequencing method of the HIV-1 genetics sequences. The results obtained in this study suggest that the Nested-PCR is really an early and quick method to the diagnosis to the HIV -1 infection via perinatal. The use of the factors related to the reduction of the perinatal HIV infection indicated to the infected pregnants suggested the influence in the reduction of the perinatal transmission of the virus in the studied population. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientadores: Fernando Lopes Gonçales Junior, Neiva Sellan Lopes Gonçales / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:42:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_Claudiada_M.pdf: 5366361 bytes, checksum: e07618e3f3502fa067dd078ba533e4fd (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A infecção pelo VHB em pacientes que não apresentam o antígeno de superficie do vírus da hepatite B (HBsAg) detectável pelos métodos usuais, é denominada de infecção oculta. Sua prevalência e significado clínico, não estão ainda, completamente esclarecidos. A proposta deste estudo foi o de investigar: a) a presença de infecção oculta pelo VHB em pacientes com infecção crônica pelo VHC; b) correlacionar a presença do DNA do VHB com fatores de riscos para aquisição da HVB e HVC ; c) correlacionar a presença do DNA do VHB com as alterações histológicas e hepáticas nos pacientes co- infectados pelo VHC e com a resposta ao tratamento da hepatite C. Foi utilizada a Reação em Cadeia da Polimerase para pesquisar o DNA do VHB em amostras de soro de 256 indivíduosHBsAg negativo e anti-HBc positivo: 150 eram doadores de sangue (100 eram anti-HBc isolado e 50 eram anti-HBc / anti-HBs positivo) e 106 eram pacientes com infecção crônica pelo vírus da hepatite C (HCV) (50 eram anti-HBc isolado e 56 eram anti-HBc / anti-HBs positivo). A prevalência da infecção oculta pelo VHB variou de 4% (6/150) nos doadores de sangue a 24% (12/50) nos pacientes com infecção crônica pelo VHC (anti-HBs negativo). A prevalência da infecção oculta pelo VHB em todos os pacientes co-infectados com o YHC foi de 14.2% (15/106). Foi observado que nos pacientes com infecção oculta pelo VHB, o anticorpo contra o antígeno de superficie do VHB (anti-HBs) não foi capaz de proteger os pacientes co-infectados pelo VHC (5,4, 3/56). Não houve correlação entre os diferentes genótipos do VHC e a presença de infecção oculta pelo VHB nem com o grau histológico de lesão hepática. A infecção oculta pelo VHB não influenciou na resposta ao interferon em pacientes com infecção crônica pelo VHC / Abstract: HBV infections in patients who lack levels of hepatitis B surface antigen (HBsAg) are called occult infections. Their prevalence and clinical significance are not yet fully understood. The purpose of this study was to investigate: a) the prevalence ofHBV occult infection in patients with chronic HCV infection; b) to correlate the presence ofHBV DNA with risk factor to acquire HBV and HCV infection; c) to correlate the presence of HBV DNA in serum with histopathologic al terations and the response to interferon therapy in patients with chronic HCV infection. We used the polymerase chain reaction to search for HBV DNA in serum samples from 256 HBsAg negative and anti-HBc positives subjects: 150 were blood donors (100 were anti-HBc alone and 50 were anti-HBc / anti-HBs positive), 106 were patients with chronic hepatitis C virus (HCV) infection (50 were anti-HBc alone and 56 were anti-HBc / anti-HBs positive). The prevalence of HBV occult infection ranged from 4% (6/150) in blood donors to 24% (12/50) in patients with chronic HCV infection anti-HBc / anti-HBs negative. The prevalence of HBV occult in the totality of patients co-Ínfected with HCV was 14.2% (15/106). It was observed that in our patients with HBV occult infection the antibodies to anti-HBs was not able to protect the patients co-Ínfected with HCV (5.4, 3/56). There was not correlation between different genotypes and the presence HBV occult infection neither with the lesion histological grade. The HBV occult infection did not influence in the response to interferon therapy in the patients with chronic HCV infection / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Luiz Carlos Dias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-04T16:13:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romano_SimoneBachiegaShimokomaki_M.pdf: 6513527 bytes, checksum: 3e66324da1965328c143b436304f47a5 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado / Físico-Química / Mestre em Química

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:15:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9252_1.pdf: 3386538 bytes, checksum: 0726d46e56ae70d920d73bf135e33163 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O estudo de reações organometálicas ganhou novo impulso, a partir da década de 1980, com a descoberta de que algumas dessas reações mediadas por metais poderiam ser realizadas na presença de água. A partir de então, a reação de Barbier tem sido uma das mais estudadas com diversos metais, destacando-se o, índio, zinco e estanho. Neste trabalho, a alilação e crotilação em reações de Barbier foram investigadas em meio aquoso com alguns aldeídos, destacando-se os benzaldeídos hidroxilados e metoxilados na presença de estanho metálico. Em uma primeira etapa do estudo, os melhores resultados obtidos corresponderam às reações realizadas em solução de K2HPO4 e 24 horas de reação. Os metoxibenzaldeídos (anisaldeídos) apresentaram rendimentos geralmente maiores que os correspondentes benzaldeídos hidroxilados, e em muitos casos, superiores a alguns exemplos encontrados na literatura, seja em meio aquoso, seja em meio anidro. O produto observado na reação de crotilação é exclusivamente o regioisômero γ, sendo a melhor diastereosseletividade de 70:30 syn/anti obtida com o 2-hidroxibenzaldeído. Testes envolvendo iniciadores e inibidores radicalares indicaram que a reação mediada por estanho em meio básico não deve proceder por um mecanismo radicalar ou ânion-radicalar, mas passando por um mecanismo envolvendo um intermediário organometálico de alilestanho. Posteriormente, novos estudos mostraram que a reações de alilação e crotilação poderiam ser realizadas em tempos muito menores quando realizadas em solução aquosa ácida. A maioria dos aldeídos aromáticos testados apresentaram excelentes rendimentos em 15 minutos de reação em solução aquosa de HCl, enquanto os aldeídos alifáticos levaram tempos um pouco maiores que variavam de 30 a 60 minutos. Esses aldeídos, em geral, necessitavam de maiores excessos de haleto e soluções ácidas mais concentradas. Nestas reações mais rápidas, com exceção do 4-metoxi-benzaldeído, todas as reações apresentaram uma diastereosseletividade que variou de 60:40 até 75:25 syn/anti, sendo que os melhores resultados foram observados com o 2-hidroxibenzaldeído e o 2-metoxi-benzaldeído. Para 2-metoxi-benzaldeído foi observado uma diminuição da diastereosseletividade com o tempo reacional, indicando um processo de equilibração entre os isômeros, que poderia ser explicado neste caso por uma solvólise. As reações de brometo de alila e estanho metálico na ausência de aldeído, monitoradas por RMN 1H, indicaram a formação de espécies organoestanho tanto em meio básico quanto em meio ácido. Nesses estudos observou-se que em meio básico uma única espécie, o tetraalilestanho, era formada nos diferentes intervalos de tempo analisados e, em meio ácido, duas espécies eram observadas, o tetraalilestanho e o trialilestanho. No entanto a formação dessas espécies era mais rápida em meio ácido do que em água, o que pode explicar o aumento da velocidade da reação de alilação. Para estender a metodologia da reação de Barbier mediado por estanho para outros substratos eletrofílicos, deu-se início a um estudo de reações de alquilação com nitrobenzeno. Apesar de estarem ainda no início, os resultados são promissores, mostrando alquilação e alilação em moderados e bons resultados em dimetilsulfóxido, bem como a formação de azocompostos

Submitted by Danielle Karla Martins Silva (danielle.martins@ufpe.br) on 2015-03-03T13:54:44Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Anderson de Brito Ribeiro-BIBLIO.pdf: 745652 bytes, checksum: 296869e06fee7c05ccd1ee3170cb59bd (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-03T13:54:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Anderson de Brito Ribeiro-BIBLIO.pdf: 745652 bytes, checksum: 296869e06fee7c05ccd1ee3170cb59bd (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012 / FACEPE ; INCT-TA ; CNPq / O metal cobre está entre os modelos químicos do Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia - Toxicologia Aquática do CNPq (INCT-TA). É um elemento de significativa relevância ambiental, especialmente por contaminar ambientes aquáticos na forma solúvel catiônica Cu+2, pelo escoamento e/ou lixiviação dos processos de mineração, seu uso na agricultura, pintura de embarcações e geração de esgotos domésticos e industriais. Seus principais sítios de ação tóxica são o sistema sensorial olfatório e as brânquias, ambos em contato direto com a água. Este trabalho objetivou avaliar os efeitos de concentrações subletais do cobre em juvenis do peixe estuarino Poecilia vivipara através da análise de respostas de defesa contra predadores nos peixes expostos. Estas respostas baseiam-se em reações de alarme ao extrato de pele da mesma espécie, avaliadas pela presença de estresse natatório, paralisia natatória e agrupamento de indivíduos. Também foram analisados os comportamentos relacionados à natação e alimentação, sendo quantificado o comportamento natatório espontâneo, a capacidade de nadar contra corrente de água em velocidades crescentes, e a eficiência na captura de presas. As presas utilizadas foram náuplios de Artemia sp., quantificados previamente para cada peixe. A resposta de alarme avaliada pela frequência de ocorrência de estresse natatório nos indivíduos de P. vivipara diminuiu com a exposição ao cobre nas concentrações de 5, 20, 40 e 100 μg.L-1, com uma concentração de efeito observado (CEO) de 5 μg.L-1. A velocidade de natação espontânea diminuiu nas concentrações 100 (CEO), 200 e 400 μg.L-1 de cobre, tendo sido detectada uma hipoatividade dos indivíduos relativa aos controles. Uma redução da resistência natatória foi observada após exposição ao cobre nas concentrações de 20 (CEO), 40 e 100 μg.L-1. Foi detectado um decréscimo no número de náuplios capturados pelos peixes expostos ao cobre nas concentrações de 20 (CEO), 40 e 100 μg.L-1. Conclui-se que a exposição a concentrações subletais de cobre na faixa de 5 a 100 μg.L-1 causa alterações no comportamento dos juvenis de P. vivipara relativos ao sistema olfatório, a habilidade natatória e a capacidade de captura de presas. Alterações na reação de alarme, que simulam defesa a um ataque de predador, foram afetadas com maior intensidade com base na frequência de estresse natatório em todas as concentrações de cobre, sendo o parâmetro mais sensível. Estes efeitos comportamentais mal-adaptativos sugerem que possa ter havido modificações nos epitélios olfatórios e branquial ocasionado pelo cobre, que podem comprometer a sobrevivência e crescimento dos indivíduos.

Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T19:10:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcon_GlauciaEliseteBarbosa_M.pdf: 14060176 bytes, checksum: af649901dd029fcd8904eaa52639abe2 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi é endêmica na América Latina, onde estima-se que 16 a 18 milhões de pessoas estejam cronicamente infectadas. A tripanosomíase americana é caracterizada por uma fase aguda, com elevado número de parasitas no sangue, detectados através de métodos parasitológicos; e uma fase crônica, onde os parasitas são pouco detectados no sangue periférico, o que toma o diagnóstico dificilneste estágio. Testes sorológicos para o diagnóstico da doença de Chagas são sensíveis, mas sua especificidade é insatisfatória. Por outro lado, a detecção direta do parasita no sangue, como o xenodiagnóstico e a hemocultura, são altamente específicos, mas apresentam baixa sensibilidade. Testes moleculares como a PCR (Reação em Cadeia da Polimerase), que amplifica seqüências repetitivas do cinetoplasto do T cruzi (k DNA) e DNA nuclear têm sido propostos como uma boa alternativa para a detecção de fragmentos do T cruzi no sangue humano. O presente estudo tem como principal objetivo testar o diagnóstico pela PCR em pacientes chagásicos crônicos e pacientes com sorologia duvidosa para a doença de Chagas atendidos no GEDoCh (Grupo de Estudos em Doença de Chagas) / HC / UNICAMP. O DNA extraído do sangue periférico dos pacientes foi amplificado pela PCR utilizando-se oligonucleotídeos do k DNA e DNA nuclear. Fragmentos de 330 pares de base e de 149 pares de base, amplificadospela PCR e PCR dupla a partir dessas regiões, foram detectados em pacientes chagásicos crônicos. Os resultados obtidos foram comparados com a sorologia e xenodiagnóstico, realizados a partir de técnicas já padronizadas. Entre os pacientes com sorologia negativa, não houve amplificação de DN positiva para a doença de Chagas, 43 apresentaram PCR dupla positiva. Dos 28 pacientes com sorologia duvidosa, 11 apresentaram PCR dupla positiva, dos quais um apresenta xenodiagnóstico negativo. Nossos resultados sugerem que a PCR dupla por nós padronizada, pode ser complementar a sorologia para o diagnóstico da doença de Chagas e contribui para o esclarecimento de casos com sorologia duvidosa / Abstract: Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, is an important endemic illness in Latin America, where an estimated 16 to 18 million persons are chronically infected. The trypanosomiasis involves a characteristic acute phase with high levels of parasites in the bloodstream, allowing a diagnosis by parasitological methods, and a chronic phase in which parasites are not detectable in blood smears, makingthe diagnosis difficult at this stage. Serological tests for T. cruzi detection in blood are sensitive, but their specificity is generally unsatisfactory. On the other hand, direct detection of parasites in blood, either by xenodiagnosis or hemoculture, is highly specific but of low sensitivity. Molecular assays such as the Polymerase Chain Reaction (PCR), which amplify certain repetitive sequences of trypanosome kinetoplast DNA (kDNA), and DNA nuclear have been proposed as good altemative tools for detection of T. cruzi in human blood. The present study aimed to test PCR diagnosis in chagasic chronic patients and doubtful serological patients attended in GEDoCh (Grupo de Estudos em Doença de Chagas)/UNICAMP. The DNA prepared ITompatient's blood was amplified by the PCR using primers of the kinetoplast minicircles and DNA nuclear. A 330 bp and 149 bp Tagmentsoriginating ITomkinetoplast DNA and DNA nuclear was specifically detected in chronic chagasic. The results of these tests were compared with serological diagnosis performed using standard techniques and xenodiagnosis. We found that seven of the serologically negative individuaIs don't give specific amplification product, whereas 43 out of 53 patients previously serodiagnosed as chagasic were positive using the Nested - PCR (DNA nuclear) method. In addition, twelve of twenty-eight patients with doubtful serologic results were confirmed as positive by PCR. That two was negative xenadiagnosis. Our results suggest that the Nested - PCR may be a toei complementary to serology in the diagnosis af Chagas disease, and that it is available for parasite detection in patients with chronic disease and patients with doubtful serologic / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Yoko Bomura Rosato / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:16:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_Henrique_M.pdf: 2280796 bytes, checksum: 82e25720ea1b009fc1162dcc445725a2 (MD5) Previous issue date: 1988 / Mestrado

Orientador: Clarice Weis Arns / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T20:36:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dani_MariaAngelaGomesdeCastro_M.pdf: 3584513 bytes, checksum: 44f0c60386e93a6a79298e7ba5df2fba (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Pneumovírus aviário (PVA) causa infecção aguda no trato respiratório em perus (rinotraqueítedos perus) e galinhas (síndrome da cabeça inchada) com início abrupto e disseminação rápida. Neste estudo, foi padronizada a reação de RT-PCR quimioluminescente para detecção de um transcrito do gene F do PVA em dois isolados europeus e dois isolados brasileiros. Foram realizadas PCRs de diluição limitante utilizando-se RT-PCR quimioluminescente e "nested PCR" (nPCR) para a comparação quanto à sensibilidade e especificidade entre as metodologias na detecção de PVA. A sensibilidade e especificidade da RT-PCR quimioluminescente foram semelhantes às da nPCR e 100 vezes mais sensível que uma única PCR. O seqüênciamento dos produtos de 175 pb do gene F revelaram 100% de homologia com seqüências depositadas no banco de dados. Em seguida foi realizada a caracterização dos isolados brasileiros através de RT-PCR, análise com enzimas de restrição e seqüênciamento automático de um fragmento do gene G. Os produtos de 600 pb correspondentes aos primeiros 600 nucleotídeos do gene G dos isolados SHS BR 119 e SHS BR 121 revelaram 99% de similaridade com 3 isolados do subgrupo A e 87% de similaridade com isolados do subgrupo B depositadas no banco de dados / Abstract: Avian Pneumovirus (APV) causes an acute respiratory tract infection both in turkeys (turkey rhinotracheitis) and chicken (swollen head syndrome) with sudden onset and rapid spread through the flocks. In this study, immunochemiluminescent Southern blot RT-PCR assay was employed to detect a F gene transcript of the avian pneumovirus (APV) in two European turkey isolates and two Brazilian chicken isolates. Limiting dilution PCR was performed to compare the sensitivity of immunochemiluminescent Southern blot assay and nested PCR (nPCR) assay. The sensitivity and specificity of immunochemiluminescent Southem blot RT-PCR assay were comparable to that of nPCR, and at least 100 fold more sensitive than a single PCR amplification. Sequence analysis of the 175 bp product ofthe F gene revealed 100% identity with earlier reported PVA sequences. We characterized the Brazilian isolates using restriction analysis and sequencing of a 600 bp fragment of the G gene and conclude that the isolates belong to the APV subgroup A / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Kenneth Elmer Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-20T15:42:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pires_EmersonLuis_M.pdf: 3268280 bytes, checksum: 3d4d2d932ef0ee18c77c02cf6ce96c63 (MD5) Previous issue date: 1995 / Mestrado

Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2017-07-10T18:32:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertação_JM_Marin.pdf: 8178373 bytes, checksum: f54920c574e580233e6d0f22302111e3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-10T18:32:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertação_JM_Marin.pdf: 8178373 bytes, checksum: f54920c574e580233e6d0f22302111e3 (MD5) Previous issue date: 2016-03-10 / FACEPE / Rare earth chromites exhibit a diversity of interesting chemical and physical properties depending on the rare earth ion. EuCrO3 shows a weak spontaneous magnetic moment below a Néel temperature of 181 K; attributed to a slight canting of the Cr3+ magnetic moments that are otherwise antiferromagnetically aligned. We have synthesized chromites by using a combustion reaction method applying urea as fuel. X-ray diffraction (XRD), Fourier transformed Infrared Spectroscopy (FT-IR), Scanning and Transmission Electron Microscopy (SEM and TEM), Thermogravimetric analysis and differential scanning calorimetry (TGA-DSC) were used to study the samples. The magnetization was measured by using a vibrating sample magnetometer (VSM) and a Physical Properties Measurement System (PPMS) at a wide range of temperature (5 K to 300 K). Rietveld analysis of the XRD data yielded to an orthorhombic structure (Pnma) for EuCrO3, with an average crystallite size about 65 nm. Then, EuCrO3 was doped with iron forming a mixed chromite Eu1−xFexCrO3 (0 ≤ x ≤ 1.0). The presence of iron proved to be a source of microstrain in the system, due to the substitution of Eu3+ ions by Fe3+ in the perovskite structure. In fact, single phase EuCrO3 is paramagnetic at room temperature. However, above x>0.2, an enhance in the exchange interaction among the magnetic ions. The magnetic properties of Eu1−xFexCrO3 is accounted for by taking into consideration the lattice distortion introduced by the iron substitution in the EuCrO3 perovskite structure mainly due to the large difference in the ionic radius of Eu3+ and Fe3+ and in their magnetic moments. One of the most important contributions of our work has been focus on the relation between the bond angle of Cr3+-O2−-Cr3+ and the Néel temperature. This angle is responsible for the weak magnetic behavior of the rare earth chromites. We have found that as a product of the induced stress the Néel temperature is modified, so does the bonding angle. This behavior has been also found analyzing the shift towards higher values of the Hopkinson peak. To conclude, a termal treatment at 800°C for the Eu1−xFexCrO3 made at different times, shown a reduction in the microstrain of the system accompanied by an inhibition of the ferromagnetic-like character of the as-prepared samples. / As cromitas, à base de terras raras, exibem várias propriedades químicas e físicas interessantes dependendo do íon de terra rara. EuCrO3 mostra um momento magnético espontâneo fraco abaixo da temperatura de Néel (181 K); atribuída a uma ligeira inclinação dos momentos magnéticos do Cr3+ que são, de outra forma, antiferromagneticamente alinhados. Sintetizamos cromita de európio utilizando a técnica de reação por combustão. Difração de raiosX (XRD), espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR), microscopia electrónica de varredura e de transmissão (SEM e TEM), análises térmicas como termogravimetria e a calorimetria diferencial de varredura (TGA-DSC) foram utilizados para estudar nossas amostras. A magnetização foi medida usando um magnetómetro de amostra vibrante (VSM) e um PPMS (Physical Properties Measurement System) numa vasta região de temperatura (5 K até 300 K). O analises Rietveld dos difratogramas de XRD mostrou uma estrutura ortorrômbica (Pnma) para o EuCrO3, com um tamanho médio de cristalito de 65 nm. Depois, o sistema foi dopado com ferro formando cromitas mistas do tipo Eu1−xFex CrO3 (0≤ x ≤ 1,0). A presença de Fe provou ser uma fonte de “micro-strain” no sistema, devido à substituição dos íons de Eu3+ por aqueles de Fe3+. Na realidade, a fase pura de EuCrO3 é paramagnética à temperatura ambiente. No entanto, acima de x > 0,2, uma melhora na interação de troca entre os íons magnéticos é encontrada. As propriedades magnéticas de Eu1−xFexCrO3 são contabilizadas tendo em conta a distorção da estrutura introduzida pela substituição de ferro, principalmente devido à diferença no raio iónico de Eu3+ e Fe 3+ e dos seus momentos magnéticos. A relação entre o ângulo de ligação de Cr3+-O2−-Cr3+ (responsável pelo magnétismo fraco das cromitas de terras raras em baixa temperatura) e seu efeito na temperatura de Néel é estudada. Verificou-se que como produto do “strain” induzido, a temperatura de Néel é modificada e o mesmo acontece com o ângulo de ligação. Esse comportamento foi também encontrado analisando a mudança para valores mais elevados no pico de Hopkinson. Para concluir, um tratamento térmico feito a 800 °C para Eu1−xFexCrO3 durante tempos diferentes, mostraram que existe uma redução no “micro-strain” do sistema acompanhado por uma inibição do caráter ferromagnético das amostras (x > 0,2).