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Modelo experimental em ratos no reparo ósseo do fêmur utilizando células mononucleares no plasma rico em plaquetas

Kopschina, Márcia Illana January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422340-Texto+Completo-0.pdf: 14563536 bytes, checksum: b6883cbe3401270733359041afa6d671 (MD5) Previous issue date: 2010 / BACKGROUND: Mononuclear cells (MCs) from bone marrow have been used in various treatments of diseases in an attempt to regenerate tissues. The objective of this study was to evaluate the access and proliferation of mononuclear cells in a critical defect, with the addition of platelet-rich plasma (PRP) and / or TGF-β1 (transforming growth factor beta 1), and then to evaluate bone repair at defective sites on the femurs of rats. METHODS: We created a critical defect on the bilateral femurs of 33 Wistar- Kyoto rats. Mononuclear bone marrow cells, TGF-β and PRP were added to the lesion on the treated side and saline on the contralateral side. We determined the adhesion of mononuclear cells at the critical defect and bone repair. RESULTS: The presence and consequent access of mononuclear cells administered in the treated animals were shown by the PCR technique. Radiographic analysis showed closure of the lesion groups in MCs + TGF-β and MCs + PRP, however, we can not say whether the treatment was administered or by the bone regeneration, when analyzed at 6 and 10 weeks, there is seen not differ substantially between groups. CONCLUSIONS: a) Bone marrow mononuclear cells did not adhere at the critical defect created in the rat femur; b) It was not possible to assess the relative efficiency of the proposed treatments on bone healing, since no significant differences in the evaluation of groups. / INTRODUÇÂO: As células mononucleares (CMs) da medula óssea têm sido utilizadas em diversas patologias na tentativa de regeneração tecidual. O objetivo deste estudo foi avaliar a adesão de células mononucleares sobre um defeito crítico, com a adição do plasma rico em plaquetas (PRP) e/ou TGF-β1 (Fator de crescimento transformador Beta 1) e, por fim, verificar o reparo ósseo dos sítios defeituosos dos fêmures dos ratos. MÉTODOS: Foi criado um defeito crítico bilateral nos fêmures de 33 ratos Wistar-Kyoto. Células mononucleares da medula óssea, TGF-β e PRP foram adicionadas no lado tratado da lesão e soro fisiológico no lado contralateral. Avaliou-se a adesão de células mononucleares sobre o defeito crítico e o reparo ósseo. RESULTADOS: A presença e conseqüente adesão das células mononucleares administradas nos animais tratados não foram evidenciadas através de técnica de PCR. As análises radiográficas evidenciam fechamento da lesão nos grupos CMs +TGF-β e CMs + PRP, porém, não podemos afirmar se foi pelos tratamentos administrados ou pela própria regeneração óssea, quando analisadas em 6 e 10 semanas, haja visto não apresentarem diferenças significativas entre os grupos. CONCLUSÕES: a) as células mononucleares da medula óssea não aderiram ao defeito crítico criado no fêmur do rato; b) Não foi possível avaliar a eficiência relativa dos tratamentos propostos no reparo ósseo, uma vez que não houve diferenças significativas na avaliação dos grupos.
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Processo de reparo ósseo de cavidades cirúrgicas preenchidas ou não com osso autógeno e recobertas por membrana de matriz óssea homógena em diabéticos : análise histomorfométrica em tíbia de ratos /

Borrasca, Albanir Gabriel. January 2007 (has links)
Orientador: Osvaldo Magro Filho / Coorientador: Alessandra Marcondes Aranega / Banca: Michel Saad Neto / Banca: Edevaldo Tadeu Camarini / Resumo: Proposição: O objetivo deste trabalho foi avaliar, qualitativa e quantitativamente, o comportamento da membrana de matriz óssea homógena desmineralizada e conservada em glicerina no processo de reparo ósseo de cavidades cirúrgicas preenchidas com osso autógeno realizadas em tíbias de ratos diabeticos. Material e Métodos: Foram utilizados 40 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) machos, com aproximadamente 250 gramas divididos em dois grupos: o grupo I (Controle) recebeu injeção de tampão citrato, pela via endovenosa e o grupo II (Diabético) recebeu pela via intravenosa injeção de estreptozotocina dissolvida no tampão citrato para induzir o diabetes. Após controle glicêmico, anestesia, depilação e antissepsia foi realizada uma incisão longitudinal nas regiões antero-laterais de cada tibia. Após exposição das tíbias, duas cavidades cirúrgicas de 2mm de diâmetro foram preparadas com trefina em baixa-rotação refrigerada, uma no membro posterior direito e outra no membro posterior esquerdo, sendo a primeira preenchida com o osso autógeno particulado coletado durante a realização das duas cavidades e a segunda preenchida com coágulo sanguíneo e ambas recobertas pela membrana. Aos 10 e 30 dias pós-operatórios os animais foram eutanaziados e as peças obtidas foram processadas laboratorialmente para a realização de cortes semi-seriados com seis micrômetros de espessura e corados pela hematoxilina e eosina para análise histomorfométrica. Resultados e Conclusão: Concluiu-se que a reparação óssea foi maior com o emprego dos enxertos ósseos no grupo controle, embora as diferenças não foram estatisticamente significantes em nenhum período estudado e que, aos 30 dias, o processo de reparo das tíbias preenchidas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Purpose: The aim of this study was to evaluate histomorphometric the behavior of membrane of a demineralized homogenous bone matrix and preserved in glycerin in the process of bony repair of surgical cavities filled out with autogenous bone accomplished in tibias of diabetic rats. Materials and Methods: Forty male rats weighing approximately 250 g were selected and assigned to two groups, as follows. Group I (Control) received a citrate buffer injection intravenously while Group II (Diabetic) received an intravenous injection of streptozotocin dissolved in citrate buffer to induce diabetes. After glycemic control, anesthesia, shaving and antisepsis, a longitudinal incision was made in the anterolateral areas of each tibia. After exhibition of the tibias, two surgical cavities of 2mm of diameter were prepared with trefina in refrigerated low-rotation, one in the right posterior member, other in the left subsequent member, being the first filled out with particulate autogenous bone collected during the accomplishment of the two cavities and second filled out with sanguine coagulum and both covered with the membrane. Ten and thirty days postoperatively, the animals were euthanized and the anatomical pieces were submitted to routine laboratorial processing and serially sectioned to obtain 6-μm-thick sections, which were stained by hematoxylin and eosin for histomorphometric analysis. Results and Conclusions: We concluded in the ended of the bony repair was larger with the employment of the bone grafts in the group control, although the differences don't have statistics significance in any studied period and that to the 30 days, the process of repair of the tibias filled out by graft of the group control it was more favorable quality than of the tibias under the same treatment of the diabetic group although such differences have not been statistics significance and the membrane was biocompatible in all the analyzed groups. / Mestre
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Influência da massa molar na biocompatibilidade de membranas de quitosana em tecido subcutâneo de ratos / Influence of the molar mass on the biocompatibility of chitosan membranes in the subcutaneous tissue of rats

Ribeiro, José Carlos Viana 31 January 2017 (has links)
RIBEIRO, J. C. V. Influência da massa molar na biocompatibilidade de membranas de quitosana em tecido subcutâneo de ratos. 2017. 103 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-24T13:43:58Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_jcvribeiro.pdf: 5438414 bytes, checksum: 214a60843657630d29ec1cedae58c032 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-02-24T13:44:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_jcvribeiro.pdf: 5438414 bytes, checksum: 214a60843657630d29ec1cedae58c032 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-24T13:44:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_jcvribeiro.pdf: 5438414 bytes, checksum: 214a60843657630d29ec1cedae58c032 (MD5) Previous issue date: 2017-01-31 / Tissue engineering is based on the application of concepts from materials science and regenerative medicine with the aim of developing biomaterials capable of reconstructing or regenerating damaged tissue. In this context, chitosan (CS) has aroused a great deal of interest as one such biomaterial on account of its alleged properties of biocompatibility, bioactivity and the ease with which its chemical structure may be modified. CS is a naturally occurring polysaccharide obtained from chitin, an abundant and renewable source. It demonstrates great variability in terms of its main chemical characteristics, such as molar mass (MM) and the degree of deacetylation (DD), which may have an impact on its physical and biological properties. Numerous studies have investigated its use as a scaffold material in the regeneration of various types of tissue, including bone and periodontal tissues. However, few studies have related the possible influence of the MM of CS on its biocompatibility in vivo; this aspect still has not been clarified. The aim of the present study is to investigate the biocompatibility and bioactivity of CS membranes of different MM when implanted in the subcutaneous tissue of rats. CS membranes with a high molecular weight (HMW-CS) and low molecular weight (LMW-CS) were chemically characterized to determine their MM via gel permeation chromatography (GPC) and DD via potentiometric titration. Next, they were inserted into the subcutaneous conjunctive tissue in the backs of 24 animals and compared to a positive λ-carrageenan(Cg) control and a negative control. Biocompatibility was evaluated through histological analyses of the inflammatory leukocyte infiltrate, formation of granulation tissue and of fibrous conjunctive tissue, after 1, 7, 14 and 28 days. Bioactivity was investigated through immunohistochemical analyses carried out to identify the expression of the nuclear transcription factor NF-κΒ and the fibroblast growth factor FGF-2, which are proteins involved in the process of inflammation and tissue repair. The results showed that the chitosan membranes induced leukocyte infiltrate similar to the control after 7, 14 and 28 days, but lower than in the positive control. The LMW-CS induced a greater formation of granulation tissue and fibrous conjunctive tissue than HMW-CS, after 7 and 14 days, and than Cg after 7, 14 and 28 days, and showed inhibitory action on NF-κΒ at day 7. LMW-CS also showed a greater stimulatory effect than HMW-CS at day 1. The results suggest that LMW-CS induced a lower inflammatory response and promoted a faster regeneration of conjunctive tissue than HMW-CS, though both were found to be biocompatible. It may be concluded that MM influenced CS biocompatibility in vivo and this characteristic should be taken into consideration when developing and investigating CS-based scaffolds for tissue regeneration. The evaluated CS membranes presents a potential application for guided tissue regeneration. / A engenharia tecidual fundamenta-se na aplicação de conceitos da ciência dos materiais e da medicina regenerativa no intuito de desenvolver biomateriais capazes de reconstruir ou regenerar tecidos danificados. Neste sentido, a quitosana (QS) tem despertado grande interesse para regeneração tecidual, por suas alegadas propriedades de biocompatibilidade, bioatividade e facilidade de modificação de sua estrutura química. A QS é um polissacarídeo de origem natural, obtido a partir da quitina, uma fonte abundante e renovável. Apresenta grande variabilidade em suas principais características químicas como a massa molar (MM) e o grau de desacetilação (GD), que podem influenciar suas propriedades físicas e biológicas. Inúmeros estudos têm investigado seu uso como material de arcabouço (scaffold) na regeneração de diversos tipos de tecido, inclusive tecido ósseo e periodontal. No entanto, poucos estudos se referem à possível influência da MM da QS sobre sua biocompatibilidade in vivo, sendo este aspecto ainda não elucidado. O presente trabalho tem como objetivo investigar a biocompatibilidade e a bioatividade de membranas de QS de diferentes MMs quando implantadas no tecido subcutâneo de ratos. Membranas de QS de alto peso molecular (QS-APM) e baixo peso molecular (QS-BPM) foram caracterizadas quimicamente para determinar sua MM por cromatografia de permeação em gel (GPC) e seu GD por titulação potenciométrica. Em seguida, foram inseridas no tecido conjuntivo subcutâneo do dorso de 24 animais e comparadas com um controle positivo de carragenina-lambda (CG) e um controle negativo. A biocompatibilidade foi avaliada por análises histológicas do infiltrado inflamatório leucocitário, formação de tecido de granulação e formação de tecido conjuntivo fibroso após 1, 7, 14 e 28 dias. A bioatividade foi avaliada por análises imunohistoquímicas para identificar a expressão do fator de transcrição nuclear NF-κΒ e do fator de crescimento de fibroblastos FGF-2, que são proteínas envolvidas no processo de inflamação e reparo tecidual. Os resultados mostraram que as membranas de quitosana induziram infiltrado leucocitário semelhante ao controle após 7, 14 e 28 dias e inferior ao controle positivo. A QS-BPM induziu maior formação de tecido de granulação e tecido conjuntivo fibroso que a QS-APM aos 7 e 14 dias e que a CG aos 7, 14 e 28 dias e mostrou atividade inibitória sobre o NF-κΒ aos 7 dias. A QS-BPM ainda demonstrou maior atividade estimulatória sobre o FGF-2 que a QS-APM no primeiro dia. Os resultados sugerem que a QS-BPM induziu menor resposta inflamatória e favoreceu uma regeneração mais rápida do tecido conjuntivo que a QS-APM, embora ambas tenham se mostrado biocompatíveis. Pode-se concluir que a MM influenciou a biocompatibilidade e bioatividade da QS in vivo e essa característica deve ser considerada ao se desenvolver e investigar scaffolds à base de QS para regeneração tecidual. As membranas de quitosana avaliadas apresentam potencial de aplicação em regeneração tecidual guiada.
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Efeitos da laserterapia de λ660mm e λ830mm na cicatrização de feridas cirúrgicas: estudo histológico e imunocitoquímico

Soares, Estela January 2006 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2014-07-15T20:00:20Z No. of bitstreams: 1 Tese_ Odonto_Estela de Souza Soares.pdf: 816299 bytes, checksum: 4390c35cb72f75f81f9490d6cbce899d (MD5) / Approved for entry into archive by Flávia Ferreira (flaviaccf@yahoo.com.br) on 2014-07-18T17:02:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ Odonto_Estela de Souza Soares.pdf: 816299 bytes, checksum: 4390c35cb72f75f81f9490d6cbce899d (MD5) / Made available in DSpace on 2014-07-18T17:02:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ Odonto_Estela de Souza Soares.pdf: 816299 bytes, checksum: 4390c35cb72f75f81f9490d6cbce899d (MD5) / Os laseres têm sido usados em diversas especialidades médicas por mais de uma década. Um dos laseres mais usados na Odontologia é o laser do CO2, o qual tem uma excelente absorção em tecidos bucais, por isso é largamente utilizado em cirurgia de tecidos moles. Além dos laseres cirúrgicos, a laserterapia tem sido usada com sucesso em diversas circunstâncias como no combate a dores e em reparo de feridas. Neste estudo foram utilizados 54 ratos machos (Ratus norvegicus albinus, linhagem Wistar) com cerca de 8 semanas e pesando em média 250g, mantidos em ciclos de dia/noite de iluminação e temperatura ambiente. Os animais foram mantidos em caixas plásticas em grupos de três e alimentados com dieta padronizada, com água "ad libitum". Sob GA (hidrato de Cloral de 10%) foi realizada ferida padronizada no dorso dos animais previamente tricotomizados, utilizando bisturi convencional (grupos 1, 2 e 3) ou com o laser do CO2 Sharplan, 20C, 5W, RSP (grupos 4, 5, e 6). Os grupos 1 e 4 foram os controles, os grupos 2 e 5 foram tratados com a terapia a laser de λ660nm (20J/cm2, 30mW, diâmetro de 3mm) e os grupos 3 e 6 foram tratados com laserterapia de λ830nm (20J/cm2, 40mW, diâmetro de 3mm). A terapia do laser foi aplicada transcutanamente em quatro pontos em torno da ferida e começada imediatamente depois da cirurgia, repetida no dia seguinte e depois a cada 48h durante o tempo experimental (3, 8 ou 14 dias). Os animais foram sacrificados dentro dos princípios da bioética, com overdose do anestésico geral e os espécimes foram processados para exame histológico, corados em H&E, Picrosirius e imunomarcados com α-actina e Vimentina. A análise histológica foi baseada em diversos aspectos do processo de reparo como: reepitelização, formação de colágeno, edema, neovascularização, infiltrado inflamatório, presença do miofibroblastos e fibroblastos. Os resultados evidenciaram reparo mais precoce no grupo 2, bem como maior maturação da matriz colagênica e aceleração da resposta inflamatória foram vistos em todos os grupos irradiados quando comparado a seus controles. A imunomarcação evidenciou menor presença de miofibroblastos em feridas feitas com laser do CO2 quando comparado àquelas executadas com bisturi. O estudo concluiu que a laserterapia ofereceu um melhor padrão histológico de reparo, com uma formação mais avançada de colágeno, uma resposta inflamatória mais rápida e menor formação de edema, assim como menor contração e formação de cicatriz em feridas realizadas com laser de CO2.
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Análise do processo de reparo ósseo de cavidades cirúrgicas preenchidas com osso autógeno e recobertas por membrana de matriz óssea homógena e de politetrafluoretileno em ratos

Borrasca, Albanir Gabriel [UNESP] 12 August 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-12Bitstream added on 2014-06-13T19:47:14Z : No. of bitstreams: 1 borrasca_ag_dr_araca.pdf: 844710 bytes, checksum: d1c813312e1b09f119604bb41d9ee6ab (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Proposição: O objetivo deste trabalho foi avaliar, qualitativa e quantitativamente, o comportamento da membrana de matriz óssea homógena desmineralizada e conservada em glicerinae e membrana de Ptfe no processo de reparo ósseo de cavidades cirúrgicas preenchidas com osso autógeno realizadas em tíbias de ratos Material e Métodos: Foram utilizados 60 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) machos, com aproximadamente 250 gramas divididos em três grupos: o grupo I (Controle-sem membrana), grupo II (membrana homógena) e grupo III (membrana de ptfe). Após tricotomia, anestesia e antissepsia foi realizada uma incisão longitudinal nas regiões antero-laterais de cada tibia. Após exposição das tíbias, duas cavidades cirúrgicas de 2mm de diâmetro foram preparadas com trefina em baixa-rotação refrigerada, uma no membro posterior esquerdo e outra no membro posterior direito, sendo a primeira preenchida com o osso autógeno particulado coletado durante a realização das duas cavidades e recobertas pelas membranas utilizadas no estudo. Aos 10 e 60 dias pós-operatórios os animais foram eutanaziados e as peças obtidas foram processadas laboratorialmente para a realização de cortes semi-seriados com seis micrômetros de espessura e corados pela hematoxilina e eosina para análise histomorfométrica. Resultados e Conclusão: A membrana homógena mostrou-se biocompatível e cumpriu sua função e em termos de área óssea neoformada as membranas obtiveram desempenho semelhantes / Purpose: The aim of this study was to evaluate the behavior of membrane of a demineralized homogenous bone matrix and preserved in glycerin and the Ptfe membrane in the process of bony repair of surgical cavities filled out with autogenous bone accomplished in tibias rats. Materials and Methods: Sixty male rats weighing approximately 250 g were selected and assigned to two groups, as follows. Group I (without membrane), Group II (homogenous membrane) and Group III ( Ptfe membrane). After anesthesia, shaving and antisepsis, a longitudinal incision was made in the anterolateral areas of each tibia. After exhibition of the tibias, two surgical cavities of 2mm of diameter were prepared with trefina in refrigerated low-rotation, one in the left posterior member, other in the right subsequent member, being the first filled out with particulate autogenous bone collected during the accomplishment of the two cavities and covered with the membrane. Ten and sixty days postoperatively, the animals were euthanized and the anatomical pieces were submitted to routine laboratorial processing and serially sectioned to obtain 6-μm-thick sections, which were stained by hematoxylin and eosin for histomorphometric analysis. Results and Conclusions: The homogenous membrane proved to be biocompatible and fulfilled its function and in terms of bone area formation membranes had similar performance
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Uso do beta fosfato tricálcio em levantamento da membrana de seio maxilar: estudo histológico, histomorfométrico e imunoistoquímico em coelhos

Bermejo, Patrícia Rota [UNESP] 11 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-11Bitstream added on 2015-05-14T16:59:22Z : No. of bitstreams: 1 000826791.pdf: 813829 bytes, checksum: 02eaf6091878c0147989f6542fac4e44 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O beta fosfato tricálcio (β-TCP) é um biomaterial que possui excelente osteocondução, biocompatibilidade por ser química e cristalograficamente similar ao tecido ósseo humano, além de possuir rápida reabsorção o que diminui reações biológicas. O β-TCP vem sendo utilizado em cirurgias de enxertia óssea, principalmente em regiões superiores de maxila no intuito de favorecer a reabilitação protética com implantes. O objetivo desse trabalho foi avaliar a reparação tecidual de um biomaterial a base de beta fosfato tricálcio o β-TC em levantamento de membrana de seios maxilares de coelhos, através de análises histológica, histomorfométrica e imunoistoquimica. Vinte coelhos Albinus foram submetidos à cirurgia de elevação da membrana do seio maxilar bilateral, onde o seio maxilar do lado direito foi preenchido por coágulo e do lado esquerdo por β-TCP. Após períodos de 3, 7, 15 e 45 dias os animais sofreram eutanásia e tiveram sua maxila removida para processamento e análises histológica, histométrica e imunoistoquímica. Houve formação óssea para ambos os grupos somente a partir do período de 15 dias. Foi aplicado o teste estatístico de Tukey, e houve diferença estatística (p<0,01) entre o grupo controle e o grupo β-TCP. O melhor índice de formação óssea foi para o grupo β-TCP no perído 45 dias (0,0294 ± 33,011 %) em comparação ao grupo controle (1,824 ± 30,502%). Houve também diferença significativa dos grupos entre si, em relação aos períodos estudados. Sendo assim, comprovamos que o βTCP foi um substituto ósseo competente em relação à neoformação óssea e manutenção de área de defeitos clínicos, desejados para uma correta reabilitação oral / The beta tri calcium phosphate (β-TCP) is a biomaterial with excellent osteoconductive properties, biocompatibility by being chemically and crystallographically similar to the human bone tissue as well as having rapid reabsorption which reduces biological reactions. The β-TCP has been used in bone grafting surgery, especially in the upper regions of the maxilla in order to facilitate the prosthetic rehabilitation with implants. The aim of this study is to evaluate the healing of a biomaterial-based beta tri calcium phosphate, β-TC in sinus lifting of rabbits, using histological, histomorphometric and immunohistochemistry. Twenty Albinus rabbits underwent surgery to the bilateral maxillary sinus lift, where the right maxillary sinus was filled with blood clot and the left by β-TCP. After periods of 3, 7, 15 and 45 days the animals were euthanized and their jaw removed for processing and histological, immunohistochemistry and histometric analysis. There was bone formation for both groups only from the period of 15 days. The Tukey statistical test was applied, and there was statistical difference (p <0.01) between the control group and the β-TCP group. The best index of bone formation was for the β-TCP group in period prescribed 45 days (33,011 ± 0.0294%) compared to the control group (30.502 ± 1.824%). There were also significant differences among groups in relation to the studied periods. Thus, we proved that the βTCP was a competent bone substitute in relation to bone formation and maintenance area, allowed for proper oral rehabilitation clinical defects / FAPESP: 12/13812-0
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Análise histológica e histomorfométrica do processo de reparo de defeitos ósseos em ratos diabéticos preenchidos com osso autógeno e recobertos por membrana de matriz óssea homógena ou por membrana de politetrafluoretileno

Timóteo, Carlos Alberto [UNESP] 11 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-11. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:13Z : No. of bitstreams: 1 000829111.pdf: 1027511 bytes, checksum: 8d25ae03de16c73eaec7099bf3716117 (MD5) / Proposição: O objetivo deste trabalho foi analisar histologicamente e histomorfometricamente o processo de reparo de defeitos ósseos em ratos diabéticos preenchidos com osso autógeno e recoberto por membranas de matriz óssea homógena ou politetrafluoretileno expandido (PTFe). Materiais e métodos: Para a obtenção da membrana homógena foram utilizados 40 animais saudáveis, não incluídos no grupo experimental. No experimento foram utilizados 120 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) machos, com peso aproximado de 250 gramas, divididos em dois grupos: o grupo I (IC), sem alterações sistêmicas (Controle) recebeu injeção de tampão citrato a 0,01M, ph 4,5, pela via endovenosa e o grupo II (Diabético) ou IID recebeu pela mesma via de administração (veia peniana) injeção de estreptozotocina (Sigma-Aldrich) dissolvida em tampão citrato a 0,01M, ph 4,5, em uma concentração de 35mg/Kg. Após controle glicêmico os ratos sem alterações sistêmicas (grupo controle) e diabéticos foram subdivididos em três subgrupos de experimentos: SM - a cavidade cirúrgica da tíbia esquerda foi preenchida com enxertos ósseos autógenos, não sendo recoberta por membrana, MH - a cavidade também preenchida com enxertos ósseos foi recoberta por membrana homógena e MX - o recobrimento foi feito com membrana sintética de PTFe. Os animais foram eutanaziados aos 10 e 60 dias e as tíbias foram submetidas ao processamento laboratorial de rotina para análise histológica e histométrica. Resultados: Aos 10 dias não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os diabéticos e não-diabéticos que tiveram suas feridas recobertas ou não com as membranas. No entanto, nesse tempo, o tecido ósseo do grupo diabético apresentou-se qualitativamente pior se comparado ao do grupo controle. Aos 60 dias constatou-se atraso... / Purpose: To carry out histological and histomorphometric analysis of the bone repair process in diabetic rats filled with autogenous bone graft and covered with homogenous demineralized bone matrix membrane or expanded polytetrafluoroethylene membrane (e-PTF). Materials and Methods: In order to obtain the homogenous membrane, 40 healthy animals not included in the experimental group were used. In the experiment 120 male rats (Rattus norvegicus albinus, Wistar) weighing approximately 250g were divided into two groups. Group I (IC) had no systemic alterations (Control) and received an intravenous citrate buffer injection at 0.01 M, pH 4.5, while Group II (Diabetic) or IID received an intravenous injection of streptozotocin (Sigma-Aldrich) dissolved in citrate buffer at 0.01M, ph 4.5 in a concentration of 35 mg/kg. After glycemic control, the rats with no systemic alterations (Control group) and the diabetic rats were subdivided into three subgroups, as follows: SM - surgical cavity of left tibia was filled with autogenous bone grafting not covered by membrane; MH - bone grafting covered by homogenous membrane; and MX - bone grafting covered by expanded polytetrafluoroethylene membrane (e-PTFE). The animals were euthanized at 10 and 60 days and the tibiae were submitted to routine laboratorial processing for histological and histomorphometric analysis. Results: At 10 days, there were no statistically significant differences between diabetic and non-diabetic rats which had their wounds covered or not covered with the membranes. However, at 10 days the bone tissue of the diabetic group was qualitatively worse in comparison to that of the control group. At 60 days a delay was found in the bone repair process in wounds covered by membranes when compared to the group without membrane, regardless of the systemic state. At 60 days...
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Análise do processo de reparo ósseo de cavidades cirúrgicas preenchidas com osso autógeno e recobertas por membrana de matriz óssea homógena e de politetrafluoretileno em ratos /

Borrasca, Albanir Gabriel. January 2011 (has links)
Orientador: Osvaldo Magro Filho / Coorientador: Alessandra Marcondes Aranega / Banca: Edmur Aparecido Callestini / Banca: Eleonor Álvaro Garbin Júnior / Banca: Daniela Ponzoni / Banca: Celso Koogi Sonoda / Resumo: Proposição: O objetivo deste trabalho foi avaliar, qualitativa e quantitativamente, o comportamento da membrana de matriz óssea homógena desmineralizada e conservada em glicerinae e membrana de Ptfe no processo de reparo ósseo de cavidades cirúrgicas preenchidas com osso autógeno realizadas em tíbias de ratos Material e Métodos: Foram utilizados 60 ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) machos, com aproximadamente 250 gramas divididos em três grupos: o grupo I (Controle-sem membrana), grupo II (membrana homógena) e grupo III (membrana de ptfe). Após tricotomia, anestesia e antissepsia foi realizada uma incisão longitudinal nas regiões antero-laterais de cada tibia. Após exposição das tíbias, duas cavidades cirúrgicas de 2mm de diâmetro foram preparadas com trefina em baixa-rotação refrigerada, uma no membro posterior esquerdo e outra no membro posterior direito, sendo a primeira preenchida com o osso autógeno particulado coletado durante a realização das duas cavidades e recobertas pelas membranas utilizadas no estudo. Aos 10 e 60 dias pós-operatórios os animais foram eutanaziados e as peças obtidas foram processadas laboratorialmente para a realização de cortes semi-seriados com seis micrômetros de espessura e corados pela hematoxilina e eosina para análise histomorfométrica. Resultados e Conclusão: A membrana homógena mostrou-se biocompatível e cumpriu sua função e em termos de área óssea neoformada as membranas obtiveram desempenho semelhantes / Abstract: Purpose: The aim of this study was to evaluate the behavior of membrane of a demineralized homogenous bone matrix and preserved in glycerin and the Ptfe membrane in the process of bony repair of surgical cavities filled out with autogenous bone accomplished in tibias rats. Materials and Methods: Sixty male rats weighing approximately 250 g were selected and assigned to two groups, as follows. Group I (without membrane), Group II (homogenous membrane) and Group III ( Ptfe membrane). After anesthesia, shaving and antisepsis, a longitudinal incision was made in the anterolateral areas of each tibia. After exhibition of the tibias, two surgical cavities of 2mm of diameter were prepared with trefina in refrigerated low-rotation, one in the left posterior member, other in the right subsequent member, being the first filled out with particulate autogenous bone collected during the accomplishment of the two cavities and covered with the membrane. Ten and sixty days postoperatively, the animals were euthanized and the anatomical pieces were submitted to routine laboratorial processing and serially sectioned to obtain 6-μm-thick sections, which were stained by hematoxylin and eosin for histomorphometric analysis. Results and Conclusions: The homogenous membrane proved to be biocompatible and fulfilled its function and in terms of bone area formation membranes had similar performance / Doutor
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Avaliação histológica e histomorfométrica da regeneração óssea guiada sob membranas biológicas não reabsorvíveis em ratas osteoporóticas com e sem tratamento com ácido zoledrônico

Busetti, Juliano January 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2016-02-13T01:07:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000477249-Texto+Completo-0.pdf: 4728791 bytes, checksum: 9cc2c815f6f8eda49ba630d9796f6ea8 (MD5) Previous issue date: 2015 / Regeneration of lost tissues can be obtained in a predictable way by using the Guided Bone Regeneration (GBR) concept. The development of such concept is based on the observation that to regenerate a certain type of tissue, specific cells with the ability to reconstruct such kind of tissue must repopulate the wound. GBR was applied to heal different type of bone defects and the isolation of it by using resorbable and nonresorbable membranes resulted in a predictable healing through the formation of new bone. Nowadays the GBR concept is used for the treatment of multiple clinical situations in dentistry, even with dental implants. Osteoporosis is the most common chronic bone disease and may interfere in the healing of regenerative procedures. The increase in life expectancy results in a larger number of elderly patients referred for bone regeneration and dental implants. Osteoporosis is associated with aging, menopause and chronic use of some types of drugs. Regenerative protocols must be postulated taking into account this category of patients. Limited scientific evidence suggests that osteoporosis can negatively influence bone healing as well as the osseointegration of dental implants. In addition to disease, the use of drugs for its prevention and treatment may affect healing of GBR procedures. Bisphosphonates (BP) are the most frequently used drugs for treatment and prevention of osteoporosis. The drug acts mainly in the inhibition of bone resorption by its action on osteoclasts. Among the commercially prescribed BP, zoledronic acid (ZA) is known to be the most potent of all. In the first paper of this thesis osteoporosis was induced in rats and these animals were submitted to regenerative procedures comparing samples with and without osteoporosis as well as with and without the use of ZA. To assess GBR, critical size defects (CSD) were made in the animals’ calvarial bone. Microporous non-resorbable PTFE (polytetrafluorethylene) membranes were used to promote GBR in healthy, osteoporotic and osteoporotic animals treated with ZA. Forty-eight Wistar rats with 6 months of age were included in the study. Experimental osteoporosis was induced by ovariectomy (OVX) associated with hipocalcic diet in 32 animals. Sixteen OVX rats received a single dose of ZA (OZ) while the other 16 osteoporotic rats received no treatment (O). The remaining 16 animals were SHAM operated; the ovaries were exposed but not removed, being considered the control group (C). Six weeks after osteoporosis induction, each animal from the OZ group received a single dose of ZA. One week latter (7 weeks after baseline) two 5-mm CSD were performed bilaterally in the parietal bones and one of these defects was treated with two membranes, one located internally, in contact to the Dura, and the other was placed on top of the defect. GBR healing periods were 30 and 60 days for each group. Evaluation of new bone formation (NBF) was done by qualitative and quantitative histological analysis. Differences in means between groups (O, OZ and C), the use of membranes as well as the observation period (days 30 and 60) were analyzed by ANOVA for each variable. When a statistically significant difference was identified between the averages, the Bonferroni post hoc test was used. The results showed that treatment with ZA (p = 0. 001) and the use of membranes (p = 0. 000) significantly increased the amount of regenerated bone tissue and the presence of osteoporosis may have reduced NBF (p = 0. 028). / Regeneração de tecido ósseo perdido pode ser alcançada de forma previsível utilizando-se o conceito de Regeneração Óssea Guiada (ROG). O desenvolvimento deste conceito é baseado na observação de que para realizar a regeneração de um tipo de tecido, células específicas, com habilidade de regenerar este tecido especificamente, devem repopular a ferida. Quando ROG foi utilizada para regeneração de vários tipos de defeitos ósseos, o isolamento destes, com o uso de barreiras físicas reabsorvíveis e não reabsorvíveis, as membranas, resultou em uma cicatrização previsível através da formação de novo tecido ósseo. Atualmente, o príncípio de ROG é usado para o tratamento de várias situações clínicas na odontologia, com ou sem o uso associado de implantes dentários. Osteoporose é a doença óssea crônica mais prevalente e pode interferir na cicatrização de procedimentos regenerativos. O aumento na expectativa de vida da população resulta em um maior número de pacientes idosos indicados para regeneração óssea e implantes dentários. Considerando que a osteoporose está relacionada com fatores como idade, menopausa e uso crônico de alguns tipos de fármacos, a prevalência desta doença é alta. Protocolos regenerativos devem ser postulados levando-se em conta esta categoria de pacientes. Porém, limitada evidência científica sugere que osteoporose pode influenciar negativamente a cicatrização óssea assim como a osseointegração de implantes dentários. Somado à doença, o uso de drogas para prevenção e tratamento da osteoporose pode influenciar na cicatrização de procedimentos regenerativos. Bisfosfonatos (BF) são os fármacos mais utilizados para tratamento da osteoporose. A droga age na inibição da reabsorção óssea através da sua ação principalmente sobre os osteoclastos. Dentre os BF existentes comercialmente, o ácido zoledrônico (AZ) é reconhecidamente o mais potente de todos. Sendo assim, o primeiro artigo desta tese buscou criar condições de osteoporose em ratas e, nestes animais, procedimentos regenerativos foram feitos comparando amostras com e sem osteoporose assim como com e sem o uso de AZ. Para avaliar ROG, defeitos críticos (CSD) foram feitos na calvária dos animais. Membranas não reabsorvíveis microporosas de teflon foram utilizadas para ROG em animais saudáveis, osteoporóticos e osteoporóticos tratados com AZ. Quarenta e oito ratas Wistar, com 6 meses de idade, foram incluídas no estudo. Osteoporose experimental foi induzida através de ovariectomia (OVX) associada à dieta hipocálcica em 32 animais. Dezesseis ratos OVX receberam uma dose única de AZ (OZ) enquanto as outras 16 ratas osteoporóticas não receberam tratamento (O). Os demais 16 animais foram submetidos à cirurgia controle, onde os ovários não foram removidos, sendo considerado o grupo controle (C). Seis semanas após a indução da osteoporose, o grupo OZ recebeu uma dose única de AZ. Após mais uma semana (7 semanas após OVX), dois CSD de 5 mm foram feitos, bilateralmente, nos ossos parietais, sendo que um destes defeitos foi tratado com duas membranas, uma instalada internamente ao defeito, sobre a dura mater, e outra na porção externa. Os períodos de cicatrização de ROG foram de 30 e 60 dias para cada grupo. Avaliação da formação de tecido ósseo (NBF) foi feita através de análise histológica qualitativa e quantitativa. Diferenças entre as médias entre os grupos (O, OZ e C), o uso de membranas assim como o período de observação (30 e 60 dias) foram analisados através de ANOVA para cada variável. Quando uma diferença estatística era identificada entre as médias, o teste pós hoc Bonferroni foi utilizado. Os resultados mostraram que o tratamento com AZ (p=0,001) e o uso de membranas (p=0,000) aumentaram significativamente a quantidade de tecido ósseo regenerado e que a presença de osteoporose pode ter reduzido a formação de novo osso (p=0,028).
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Efeito do plasma rico em plaquetas e da fibrina rica em plaquetas na cicatrização de feridas cutâneas em ratos

Camargo, Fernanda Ferreira de January 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2013-11-12T11:38:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000452038-Texto+Completo-0.pdf: 5927941 bytes, checksum: d7c697db12eaa2a93c2f82acbfe45c20 (MD5) Previous issue date: 2013 / Objective: To evaluate the effect of platelet-rich plasma (PRP) and platelet-rich fibrin (PRF) on cutaneous wound healing in rats by comparing treated and control wounds. Material and Methods: Forty-eight Wistar rats were used in the study. Two wounds with 1-cm diameter, of total skin thickness, were excised from the back of the animals and treated with either PRP or PRF and saline (paired model). The wounds were evaluated immediately after the procedure and after 7 and 14 days using macroscopic (photographs) and microscopic (histology) methods. The photographs were used to measure the area of wounds in order to analyse wound contraction (morphometric analysis). The histological images permitted a count-analysis of collagen concentration (histomorphometric analysis) while the histological slides providet the description of the wounds’ characteristics. Results: Morphometric analysis revealed statistically significant time effect (P<0. 001) and treatment group effect (P=0. 022) over the observation period. The rate of wound contraction was higher in PRF-treated wounds than in PRP-treated wounds (P=0. 030). In the histomorphometric analysis, mean collagen concentration, on the images of the experimental groups, increased significantly (P<0. 001) from day 7 to day 14. There was wide variation in the percentage of collagen concentration: 129% in the PRF group vs. 22% in the PRP group; however, this difference did not achieve statistical significance (P=0. 380). Histology of the wounds suggested a more accelerated healing process in the PRF group vs. the PRP group, despite the lack of statistical significance in the characteristics analyzed. PRP-treated and PRF-treated groups were not statistically superior to their controls in any of the studied variables. Conclusion: The present results suggest that treatment with PRP and PRF were not more effective than saline for cutaneous wound healing in rats. However, PRF proved to be superior to PRP. / Objetivo: Avaliar o efeito do Plasma Rico em Plaquetas (PRP) e da Fibrina Rica em Plaquetas (PRF) na cicatrização de feridas cutâneas em ratos, comparando os tratamentos entre si e com seus respectivos grupos controle. Material e Métodos: Foram utilizados 48 ratos Wistar. Duas feridas de 1,0 cm de diâmetro, de espessura total da pele, foram excisadas do dorso dos animais e tratadas com PRP ou PRF e soro fisiológico (modelo emparelhado). As feridas foram avaliadas no pós-operatório imediato e depois de 7 e 14 dias, de forma macroscópica (fotografias) e microscópica (histologia). As fotografias forneceram medidas da área das feridas, possibilitando analisar sua contração (análise morfométrica). As imagens histológicas permitiram calcular a concentração de colágeno nas feridas (análise histomorfométrica) e as lâminas histológicas a descrever suas características. Resultados: Quanto à análise morfométrica, o efeito do tempo (P<0,001) e dos grupos (P=0,022), ao longo do período de observação, foi estatisticamente significativo. A taxa de contração das feridas tratadas com PRF foi maior do que as tratadas com PRP (P=0,030). Na análise histomorfométrica, a média da concentração de colágeno, nas imagens dos grupos experimentais, apresentou um aumento do 7º para o 14º dia, considerado significativo (P<0,001). Houve grande variação percentual na concentração de colágeno: 129% para a PRF contra 22% para o PRP, porém, sem significância estatística (P=0,380). A descrição histológica das feridas sugeriu que o grupo PRF apresentou maior aceleração do reparo quando comparado ao grupo PRP, apesar da ausência de significância estatística nas características avaliadas. Os grupos de tratamento PRP e PRF não foram estatisticamente superiores aos seus grupos controle nas variáveis estudadas. Conclusão: Os dados do presente estudo sugerem que o PRP e a PRF não apresentaram resultados mais eficazes do que o soro fisiológico na cicatrização de feridas cutâneas em ratos. No entanto, a PRF mostrou-se superior ao PRP.

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