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Caracterização de isolados e reação de Capsicum spp. ao Cucumber mosaic virus (CMV)

Dias, Paulo Rogério Parente [UNESP] 09 November 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-11-09Bitstream added on 2014-06-13T19:05:02Z : No. of bitstreams: 1 dias_prp_dr_botfca.pdf: 1303201 bytes, checksum: ff13b531a76b1d9405f4151a52ea6f09 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Cucumber mosaic virus (CMV), uma espécie do gênero Cucumovirus, é um dos mais importantes vírus que infecta pimentão, causando prejuízos consideráveis na produção em todo o mundo. Quando da infecção precoce, em geral, ambas a qualidade e a quantidade de frutos produzidos são afetados. O vírus apresenta inúmeras estirpes capazes de infectar pimentão, diferindo na expressão dos sintomas. CMV pode infectar mais de 865 espécies de plantas, incluindo ervas daninhas, sendo transmitido por diversas espécies de afídeos de maneira não circulativa. Inseticidas são ineficazes para prevenir a disseminação da doença em virtude da forma de transmissão do vetor. No presente trabalho, verificou-se que o CMV foi o principal vírus identificado em campo. Vinte e três isolados de Capsicum spp. foram purificados biologicamente e caracterizados através de análises sorológica, biológica e molecular. Todos os 23 isolados da coleção foram classificados no subgrupo I do CMV, induzindo mosaico sistêmico, redução do desenvolvimento vegetativo e deformação foliar em Nicotiana glutinosa e Nicotiana tabacum 'Havana 425', diferindo apenas na intensidade de sintomas. Somente 8 isolados foram capazes de causar mosaico em Vigna unguiculata. Amplificação combinada com clivagem pela enzima Msp I foi eficiente para distinguir os subgrupos do CMV, resultando em banda de 500 pb somente para a amostra-controle do CMV II, dando origem a 3 fragmentos com 190, 150 e 120 pb, enquanto todos os outros isolados permaneceram com 488 pb e sem clivagem, correspondendo ao CMV-I. Não foi detectado RNA satélite em nenhum isolado do campo. A reação ao CMV de cultivares e híbridos comerciais de pimentão é desconhecida, mas tudo indica serem susceptíveis... . / Cucumber mosaic virus (CMV), a species of the genus Cucumovirus, is one of the most important virus that infect pepper, causing notable losses in pepper production worldwide. With early infection, in general, both quality and quantity of fruit produced will be affected. The virus exists as a number of strains capable of infecting pepper, differing in symptom expression. CMV can infect more than 865 plant species including many weed species and it is transmitted by many aphid species in a non-circulative manner, meaning that insecticides cannot prevent the spread of this disease. At this work, the CMV was the main virus identified in the field. Twenty-three CMV isolates from Capsicum spp. were biologically purified and characterized for serological, biological and molecular analysis. All 23 isolates from collection were found to belong to subgroup I. All isolates caused systemic mosaic, reduction of vegetative development and deformation in the leaf in N. glutinosa and N. tabacum 'Havana 425', differing in symptom intensity. Only 8 isolates were able to cause systemic mosaic in V. unguiculata. Amplification combined with Msp I cleavage was efficient to distinguish the CMV subgroups. This process resulted in a 500 pb for the CMV II control only, giving origin to three fragment with 190, 150 and 120pb, while all other isolates remained uncleaved with 488 pb, corresponding to the CMV-I isolates. It was not detect RNA satellite in a field isolates. Pepper comercial cultivars and hybrids reaction to CMV is unknowledge, but it seems to be susceptible. The identification of cultivated varieties or wild relatives of pepper that are better able to fend off attack by viral pathogens such as CMV is a critical first step towards developing resistant commercial varieties.
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Murcha-de-curtobacterium do feijoeiro: ocorrência em Santa Catarina, comportamento de genótipos e efeito de nitrogênio e potássio

Theodoro, Gustavo de Faria [UNESP] 25 November 2004 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-11-25Bitstream added on 2014-06-13T19:05:03Z : No. of bitstreams: 1 theodoro_gf_dr_botfca.pdf: 486962 bytes, checksum: 133c964b71961b171a0d897af6f2f21e (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Este trabalho visou avaliar a ocorrência da bactéria Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens em lavouras de feijoeiro localizadas em alguns municípios do Estado de Santa Catarina nas safras 2002/03 e 2003/04; a reação de genótipos de feijoeiro à murcha-de-curtobacterium; e o efeito de doses de nitrogênio (N) e potássio (K) sobre a severidade da doença, peso da matéria seca e o conteúdo de diversos nutrientes na parte aérea das cultivares IAC Carioca Pyatã, IPR 88 - Uirapuru e SCS 202 - Guará. Foram coletadas plantas com sintoma de murcha em lavouras de feijoeiro em 12 municípios. Posteriormente, procedeu-se ao isolamento, à purificação e à caracterização da bactéria e aos testes de patogenicidade. Aos 10 dias após a semeadura, plântulas de 24 genótipos de feijoeiro, conduzidas em casa-de-vegetação, foram inoculadas com o isolado FJ 36. A severidade da murcha-de-curtobacterium foi avaliada, a cada cinco dias, até aos 25 dias após a inoculação. Tanto no experimento que avaliou o efeito do N (uréia) quanto do K (cloreto de potássio) na severidade da doença, empregou-se a dose recomendada pela análise de solo e variações de 25 e 50 % abaixo e acima da mesma. Foi coletada a parte aérea das plantas antes e após as adubações, aos 25 DAS, para se aferir o peso da matéria seca e o conteúdo de N, fósforo (P), K, cálcio (Ca) e magnésio (Mg). Constatou-se que C. f. pv. flaccumfaciens esteve presente em plantas cultivadas nos municípios de Campos Novos, Faxinal dos Guedes, Guatambu, Ipuaçu, Ponte Serrada e Tigrinhos. Dos genótipos avaliados, somente as cultivares IAC Carioca Akytã, IAC Carioca Aruã e IAC Carioca Pyatã, considerados como padrões de resistência à doença, apresentaram-se com as menores notas de severidade média e valores de área abaixo da curva do progresso da murcha-de-curtobacterium (AACPMC)... . / This work aimed evaluate the occurrence of the bacteria Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens in common bean fields of Santa Catarina State, during the harvest of 2002/03 and 2003/04; the reaction of bean genotypes to the bacterial wilt; and the effect of nitrogen (N) and potassium (K) levels on the severity of the disease, the weight of the dry mass and the content of nutrients I nthe aerial part of the cultivars IAC Carioca Pyatã, IPR 88 - Uirapuru and SCS 202 - Guará cultivars. Plants with symptoms of wilt were collected in bean fields of 12 cities. It was made the isolation, purification and cultural characterization of the bacteria and the procedures to fulfill the Kochþs postulates. The inoculation with the strain FJ 36 was done in the 10th day after the sow of 24 common bean genotypes, under greenhouse conditions. The bacterial wilt severity was evaluated, in each five days, until the 25th day after inoculation. It was adopted as treatments the recommended level of N (urea) and K (potassium chloride), by the soil analysis, as well levels 25% and 50% under and below it. The aerial part of the plants was collected before and after the fertilizations, to determine the weight of the dry mass and the content of N, phosphorus (P), K, calcium (Ca) and magnesium (Mg). Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens was detected in plants cultivated in Campos Novos, Faxinal dos Guedes, Guatambu, Ipuaçu, Ponte Serrada and Tigrinhos. Regarding the evaluated genotypes, only the cultivars IAC Carioca Akytã, IAC Carioca Aruã e IAC Carioca Pyatã, considered as patterns of resistance, had the lower values of average severity and area under the bacterial wilt progress curve (AUBWPC). However, although to have been considered susceptible, the cultivars SCS 202 - Guará and IPR Graúna showed relatively low values of AUBWPC... (Complete abstract, click electronic address below).
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Seleção fenotípica e identificação de snps em regiões genômicas ligados a resistência à ferrugem em Eucalyptus grandis / Phenotypic selection and identification of snps in genomic regions associated with resistance to rust in Eucalyptus grandis

Pereira, Gleice Viviane Nunes [UNESP] 26 March 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:53Z : No. of bitstreams: 1 000844642.pdf: 1476912 bytes, checksum: 23696bd53d8521611ee359e3a454c41b (MD5) / Amplamente disseminada pelo Brasil, causando enormes prejuízos em viveiros e plantios comerciais, a ferrugem do eucalipto, incitada por Puccinia psidii, é atualmente umas das principais doenças da cultura do eucalipto. A busca por progênies resistentes é facilitada quando existem informações a respeito do controle genético da resistência e estratégias de seleção, como a seleção assistida por marcadores moleculares. Assim, objetivou-se estimar parâmetros genéticos, avaliar o ganho genético por meio da seleção para resistência parcial à ferrugem causada por P. psidii em progênies F1 de Eucalyptus grandis, bem como a identificação de SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) nos genes quitinase e 1,3 β-glucanase relacionados à resistência. O trabalho foi dividido em dois capítulos. O primeiro capítulo foi realizado no município de Itararé-SP, onde foram instalados dois experimentos com 88 progênies F1 de Eucalyptus grandis. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições, sendo cinco plantas por parcela, totalizando 1760 plantas por campo experimental. Aos 30 dias após o plantio, foi realizada a primeira avaliação quanto à ocorrência da ferrugem, mediante a escala de notas. Foram realizadas quatro avaliações mensais no período de setembro a dezembro de 2014. As estimativas dos componentes de variância e parâmetros genéticos foram obtidas pelo método REML/BLUP, empregando-se o programa genético-estatístico SELEGEN-REML/BLUP. Os parâmetros genéticos encontrados demonstraram pouca variabilidade genética e alta resistência à ferrugem. Os ganhos de seleção foram satisfatórios para essa fase da seleção. O segundo capítulo foi realizado no Laboratório de Biotecnologia e Genética Molecular, pertencente ao Departamento de Genética do Instituto de Biociências, da UNESP, câmpus de Botucatu ... / Widely disseminated in Brazil, causing huge losses in nurseries and commercial plantations, eucalyptus rust, incited by Puccinia psidii, is currently one of the main diseases of eucalyptus plantation. The search for resistant progenies is facilitated when information regarding the genetic control of resistance and selection trategies as an assisted selection by molecular markers are available. This study objective was to estimate genetic parameters, assess the genetic gain by selection for partial resistance to rust caused by P. psidii in Eucalyptus grandis of F1 progenies, as well as identification of SNPs (single nucleotide polymorphisms) in genes chitinase and β-1,3-glucanase related to resistance. This study was divided into two chapters. The first chapter was conducted in the city of Itararé-SP, which were installed two experiments with 88 F1 progenies of Eucalyptus grandis. The experimental design utilized was a randomized complete block design with four replications and five plants per plot, totaling 1760 plants per experimental field. At 30 days after planting was carried out the first assessment regarding the occurrence of rust, by the rating scale. Four monthly evaluations were carried out from September to December ...
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Resistência de genótipos de Cucurbita spp. à Bemisia tabaci biótipo B (Hemiptera: aleyrodidae) e interação com extratos vegetais /

Zaché, Ronelza Rodrigues da Costa, 1977- January 2012 (has links)
Resumo: O manejo de Bemisia tabaci biótipo B tem se tornado um desafio aos agricultores, uma vez que este inseto apresenta elevada capacidade em desenvolver resistência a todas as classes de inseticidas. Na busca por táticas alternativas e menos agressivas para o manejo das moscas-brancas, o uso de genótipos resistentes e a utilização de extratos de vegetais com atividades inseticida e/ou insetistática, têm revelado resultados promissores no combate à B. tabaci biótipo B. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a resistência de genótipos de aboboreiras (Cucurbita spp.) frente a B. tabaci biótipo B, estudar os tipos de resistência envolvidos e avaliar a possível interação no uso desses materiais com extratos aquosos provenientes de espécies da família Meliaceae. Realizou-se também análise bioquímica para confirmação da resistência de alguns genótipos. Para a instalação dos bioensaios, foi mantida uma criação de B. tabaci biótipo B em casa de vegetação. Vinte genótipos de Cucurbita spp. („Alicia AF 9354‟, „Aline AF 9353‟, „Golden Delight‟, „Nova Caravela‟, „Menina Morena‟, „Novita‟, „AF- 6741‟, „Atlas‟, „Bárbara 305‟, „Menina Brasileira‟, „Caserta‟, „Itapuã 301‟, „Tâmara‟, „Samira‟, „Canhão Seca Gigante‟, „Exposição‟, „Novita Plus‟, „Daiane‟, „Formosa‟, „Sandy‟) foram avaliados em ensaios (atratividade, oviposição com e sem chance de escolha, preferência alimentar e antibiose), sob condições de laboratório e casa de vegetação. A atratividade (adultos/cm2) foi avaliada 12, 24, 48 e 72 horas após a liberação. Após a última contagem, foram coletadas folhas para a contagem do número de ovos (com chance de escolha). As... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The management de Bemisia tabaci biotype B has become a challenge to agriculturalists, since this insect presents an elevated capacity to develop resistance to all classes of insecticides. In the search for less aggressive alternative tactics to control whiteflies, both resistant genotypes and vegetal extracts with insecticidal and / or insectistatic activities have revealed promising results for combating B. tabaci biotype B. Thus the present work aimed to evaluate the resistance of squash genotypes (Cucurbita spp.) challenged with B. tabaci biotype B, to study the types of resistance involved and to evaluate possible interactions in the use of these materials with aqueous extracts from species of the family Meliaceae. Biochemical analysis was also performed to confirm the resistance of some genotypes. To install bioassays, a creation of B. tabaci biotype B was maintained in a greenhouse. Twenty genotypes of Cucurbita spp. („Alicia AF 9354‟, „Aline AF 9353‟, „Golden Delight‟, „Nova Caravela‟, „Menina Morena‟, „Novita‟, „AF- 6741‟, „Atlas‟, „Bárbara 305‟, „Menina Brasileira‟, „Caserta‟, „Itapuã 301‟, „Tâmara‟, „Samira‟, „Canhão Seca Gigante‟, „Exposição‟, „Novita Plus‟, „Daiane‟, „Formosa‟, „Sandy‟) were evaluated in assays (attractiveness, oviposition, with and without free choice, feeding preference and antibiosis), under greenhouse and laboratory conditions. Attractiveness (adults/cm2) was evaluated 12, 24, 48 and 72 hours after release. After the final count, leaves were collected to enumerate the number of eggs (with free choice). Areas of leaves were measured to obtain the number of eggs/cm2 and the number of adults/ cm2. An oviposition preference assay was also performed without free choice. Antibiosis assays evaluated... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Edson Luiz Lopes Baldin / Coorientador: Carlos Frederico Wilcken / Banca: Paulo Cesar Bogorni / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: André Luiz Lourenção / Banca: Geraldo Andrade Carvalho / Doutor
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Variabilidade genética em progênies de meios-irmãos de eucalyptus dunnii maiden para resistência a ferrugem (Puccinia psidii winter) em diferentes ambientes /

Pinto, Cleber da Silva, 1982- January 2010 (has links)
Resumo: A ferrugem causada pelo fungo Puccinia psidii Winter é uma das doenças mais limitantes no estabelecimento de novos plantios e na condução de brotações de algumas espécies e procedências de Eucalyptus. O método de controle mais eficiente é o plantio de populações de Eucalyptus resistentes à doença. O presente trabalho tem como objetivo estudar a variabilidade genética em progênies de Eucalyptus dunnii Maiden para resistência à ferrugem causada pelo fungo Puccinia psidii Winter. Foram instalados dois testes de progênies de Eucalyptus dunnii no campo, em áreas com histórico de observação de ocorrência da ferrugem pertencentes à empresa Suzano Papel e Celulose, plantados em espaçamento 3x2m, e um teste de progênies em ambiente controlado (câmara de inoculação), conduzido no Departamento de Produção Vegetal. Os experimentos foram instalados em blocos casualizados, o primeiro com 60 progênies, na região de Itapetininga/SP, o outro com 48 progênies de Eucalyptus dunnii, ambos com oito plantas por parcela e repetidos em seis blocos. Foram feitas medições de altura de planta, avaliação da severidade de ataque do fungo. A estimativa da variabilidade genética foi determinada utilizando o programa computacional SELEGEN. As progênies de Eucalyptus dunnii apresentaram uma boa variabilidade genética para resistência a ferrugem e altura das plantas; não houve correlação entre progênies atacada e redução no crescimento em altura / Abstract: Rust caused by Puccnia psidii Winter fungus is a limiting factor to establish new plantings and to conduct sprouting of some Eucalyptus species and its origin. The more efficient control method is Eucalytpus population planting resistant to the disease. This work has as an objective to study the genetic viability in Eucalyptus dunnii Maiden progenies resistant to Rust caused by Puccinia psidii Winter. It was installed two Eucalyptus dunnii progenies tests in the field, at Suzano Paper and Cellulose Company areas where rust was observed in the past, spacing 3x2m, and one progeny test in controlled environment (inoculation chamber), conducted at Plant Production Department. Both were installed in randomized blocks, the first with 60 progenies, in Itapetininga/SP Region, and the other with 48 progenies of Eucalytpus dunnii. Both with eight plants per plot and repeated in six blocks. The high of the plants were measured and evaluated the fungus attack. Genetic variability estimates was determinate thought SELEGEN (a computer program). The Eucalyptus dunnii progenies presented a good genetic variability for rust resistance and plants high; there was no correlation between infected progenies and decrease in high development / Orientador: Edson Seizo Mori / Coorientador: Edson Luiz Furtado / Banca: Celso Luiz Marino / Banca: Léo Zimback / Mestre
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Seleção fenotípica e identificação de snps em regiões genômicas ligados a resistência à ferrugem em Eucalyptus grandis /

Pereira, Gleice Viviane Nunes. January 2015 (has links)
Orientador: Edson Luiz Furtado / Coorientadora: Celso Luis Marino / Banca: Marcia Regina Costa / Banca: Quelmo Silva de Novaes / Banca: Adriana Zanin Kronka / Banca: Ana Carolina Firmino / Resumo: Amplamente disseminada pelo Brasil, causando enormes prejuízos em viveiros e plantios comerciais, a ferrugem do eucalipto, incitada por Puccinia psidii, é atualmente umas das principais doenças da cultura do eucalipto. A busca por progênies resistentes é facilitada quando existem informações a respeito do controle genético da resistência e estratégias de seleção, como a seleção assistida por marcadores moleculares. Assim, objetivou-se estimar parâmetros genéticos, avaliar o ganho genético por meio da seleção para resistência parcial à ferrugem causada por P. psidii em progênies F1 de Eucalyptus grandis, bem como a identificação de SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) nos genes quitinase e 1,3 β-glucanase relacionados à resistência. O trabalho foi dividido em dois capítulos. O primeiro capítulo foi realizado no município de Itararé-SP, onde foram instalados dois experimentos com 88 progênies F1 de Eucalyptus grandis. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições, sendo cinco plantas por parcela, totalizando 1760 plantas por campo experimental. Aos 30 dias após o plantio, foi realizada a primeira avaliação quanto à ocorrência da ferrugem, mediante a escala de notas. Foram realizadas quatro avaliações mensais no período de setembro a dezembro de 2014. As estimativas dos componentes de variância e parâmetros genéticos foram obtidas pelo método REML/BLUP, empregando-se o programa genético-estatístico SELEGEN-REML/BLUP. Os parâmetros genéticos encontrados demonstraram pouca variabilidade genética e alta resistência à ferrugem. Os ganhos de seleção foram satisfatórios para essa fase da seleção. O segundo capítulo foi realizado no Laboratório de Biotecnologia e Genética Molecular, pertencente ao Departamento de Genética do Instituto de Biociências, da UNESP, câmpus de Botucatu ... / Abstract: Widely disseminated in Brazil, causing huge losses in nurseries and commercial plantations, eucalyptus rust, incited by Puccinia psidii, is currently one of the main diseases of eucalyptus plantation. The search for resistant progenies is facilitated when information regarding the genetic control of resistance and selection trategies as an assisted selection by molecular markers are available. This study objective was to estimate genetic parameters, assess the genetic gain by selection for partial resistance to rust caused by P. psidii in Eucalyptus grandis of F1 progenies, as well as identification of SNPs (single nucleotide polymorphisms) in genes chitinase and β-1,3-glucanase related to resistance. This study was divided into two chapters. The first chapter was conducted in the city of Itararé-SP, which were installed two experiments with 88 F1 progenies of Eucalyptus grandis. The experimental design utilized was a randomized complete block design with four replications and five plants per plot, totaling 1760 plants per experimental field. At 30 days after planting was carried out the first assessment regarding the occurrence of rust, by the rating scale. Four monthly evaluations were carried out from September to December ... / Doutor
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Transformação genética de Citrus sinensis (L.) Osbeck para resistência a Candidatus Liberibacter ssp / Genetic transformation of Citrus sinensis (L) Osbeck for resistance to Candidatus Liberibacter spp

Eveline Carla da Rocha Tavano 19 February 2013 (has links)
A doença Huanglongbing (HLB) associada a bactéria Candidatus Liberibacter spp., que coloniza os vasos do floema, é considerada uma das mais graves doenças de citros. Uma importante estratégia para o controle desta doença consiste na produção de plantas transgênicas, expressando genes que codificam peptídeos antibacterianos especificamente no local de colonização do patógeno. O objetivo deste trabalho foi obter plantas transgênicas de laranja doce, expressando o gene que codifica o peptídeo antibacteriano atacina A (attA) dirigido por promotores específicos para a expressão gênica no floema. O trabalho foi iniciado com a elaboração de construções gênicas contendo o gene attA (associado ou não ao peptídeo sinal), sob o controle dos promotores AtSuc2 (transportador de sacarose), AtPP2 (proteína de floema 2), clonados de Arabidopsis thaliana, ou CsPP2 (proteína de floema 2), clonado de Citrus sinensis. Os experimentos de transformação genética foram realizados com C. sinensis cv. \'Hamlin\', \'Valência\', \'Pêra\' e \'Natal\', via Agrobacterium tumefaciens, utilizando-se segmento de epicótilo como explante. A identificação de plantas transgênicas foi realizada por meio da análise de PCR. Plantas PCR+ foram aclimatizadas e transferidas para casa-de-vegetação específica para o cultivo de plantas transgênicas. Análises de Southern e Northern blot foram realizadas em plantas aclimatizadas, confirmando-se a integração e transcrição do gene attA, respectivamente. A expressão do gene attA também foi confirmada pela análise de RT-qPCR. Plantas de laranja \'Hamlin\' contendo o gene attA (associado ou não ao peptídeo sinal), sob o controle dos promotores AtSuc2 ou AtPP2 foram propagadas por enxertia, para futura avaliação da resistência a Candidatus Liberibacter asiaticus / Huanglongbing (HLB) associated to Candidatus Liberibacter spp., which colonizes the phloem, is considered one of the most serious diseases of citrus. One important strategy to control this disease consists of producing transgenic plants expressing, in the bacteria colonization tissue, genes encoding antibacterial peptides. The objective of this work was to produce transgenic sweet orange plants expressing genes encoding the antibacterial peptide attacin A (attA) driven by phoem-specific promoters. The work started with the development of the gene constructs, containing the attacin A gene (with or without signal peptide) controlled by either sucrose transporter gene (AtSuc2) or phloem protein 2 gene promoters (AtPP2) from Arabidopsis thaliana, or phloem protein 2 gene promotor (CsPP2) from Citrus sinensis. The genetic transformation of C. sinensis \'Hamlin\', \'Valencia\', \'Pera\' and \'Natal\' cultivars was done via Agrobacterium tumefaciens. Epicotyls segments collected from in vitro germinated seedlings were used as explants. Transgenic plants were identified by PCR analyses. PCR positive plants were acclimatized and transferred to specific greenhouse. Integration and transcription of the attA gene was confirmed in acclimatized transgenic plants by Southern and Northern blot analysis, respectively. The attA gene expression was validated by RT-qPCR analysis. \'Hamlin\' transgenic cultivars containing the AtSuc2 or AtPP2 promoters controlling the expression of attA (with or without signal peptide) were propagated by grafting, for future evaluation of Candidatus Liberibacter asiaticus resistance
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Influência do período de molhamento, temperatura e concentração de inóculo de Pyricularia grisea na ocorrência da brusone em plântulas de trigo / Influence of period of foliar wetness, temperature and concentration of Pyricularia grisea on the occurrence of blast in wheat seedlings

Storani, Waleska Del Pietro 26 June 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-06-02T18:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5478.pdf: 1057989 bytes, checksum: fd5f9b601fb9dcd1e824044cd0b9b00b (MD5) Previous issue date: 2013-06-26 / Financiadora de Estudos e Projetos / Blast disease, caused by Magnaporthe grisea (anamorph Pyricularia grisea), is one of the main diseases of wheat and is disseminated throughout main producing states of the Country. It has been causing significant yield loss and is a limiting factor for the crop s expansion in central Brazil where the weather is highly favorable. The use of resistant cultivars can be influenced by weather conditions and concentration of inoculum. Chapter 1 of the present dissertation describes the influence of period of foliar wetness on the occurrence of blast in wheat seedlings in two experiments. The first one employed cultivars BH1146 (resistant) and BR40 (susceptible) inoculated with the Pyricularia isolate PR06- 03. In the second assay, the cultivars were BR18 (resistant) and Anahuac (susceptible) inoculated with the fungal isolate PR01-23. Five treatments were the period of wetness (6, 10, 14, 18 and 24h) in ten replications. Analysis was performed using a completely randomized design with a factorial plan of the treatments (five foliar wetness periods and 2 cultivars). Results showed that the minimum period needed for the development of the disease was 10 hours when inoculated with the isolate PR06-03. The longer the foliar wetness period the higher the incidence and severity of the disease regardless the resistance of cultivars. Chapter 2 aimed to determine the influence of the weather and concentration of P. grisea on the incidence and severity of blast. The experiment used totally randomized design with a factorial plan of the treatments: four concentrations (10³, 104, 105, 106 spores/ml) and two cultivars, ten repetitions. The wheat cultivars were BR18 (resistant) and Anahuac (susceptible) which were inoculated with 50ml of P. grisea suspension (isolate PR06-03) at the concentrations 10³, 104, 105, 106 spores/ml. The seedlings were submitted to temperatures of 22ºC and 28ºC for 18 hours of foliar wetness. The results showed that at 22ºC higher disease severity occurred on susceptible cultivar whereas the disease was the same for both cultivars at 28ºC. The resistant cultivar reacted like a susceptible when submitted to high temperature and high concentration of pathogen. / A brusone é uma das principais doenças do trigo e está disseminada nos principais estados produtores do país, causando danos significativos e sendo fator limitante para a expansão da cultura no Brasil central, principalmente por ser uma doença altamente influenciada pelo clima. Seu controle através de cultivares resistentes pode ser influenciado pelas condições climáticas e pela concentração de inóculo na lavoura. O Capítulo 1 desta dissertação descreve a influência do período de molhamento foliar na ocorrência da brusone, em plântulas de trigo, em dois experimentos. O primeiro com o isolado do fungo Pyricularia grisea (PR01-23) e duas cultivares de trigo no estádio de plântula, com reação diferenciada ao isolado (Anahuac suscetível e BR18 resistente) e o segundo com o isolado do fungo (PR06-03) e duas cultivares de trigo no estádio de plântula (BR40 suscetível e BH1146 resistente). Foram empregadas dez repetições de cinco tratamentos com os diferentes períodos de molhamento foliar (6, 10, 14, 18 e 24h). Avaliou-se a incidência e a severidade da brusone em porcentagem. A análise foi feita através de um delineamento estatístico inteiramente casualizado, com um esquema fatorial dos tratamentos (cinco períodos de molhamento e duas cultivares). Os resultados mostraram que o tempo mínimo requerido para o aparecimento da doença nas plântulas foi de 10 horas, quando inoculadas com o isolado PR01-23 e de 14 horas, quando inoculadas com o isolado PR06-03. Quanto maior o período de molhamento foliar, maior a incidência e a severidade da doença, independente da resistência da cultivar. O Capítulo 2 teve como objetivo determinar a influência da temperatura e concentração de inóculo de Pyricularia grisea na incidência e na severidade da brusone. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com um esquema fatorial dos tratamentos: quatro concentrações de inóculo (10³, 104, 105 e 106 esporos/mL) e duas cultivares, dez repetições. Utilizou-se duas cultivares de trigo no estádio de plântula (BR18 resistente e Anahuac suscetível) que foram inoculadas com 50 mL de suspensão de P. grisea (isolado PR06-03) nas concentrações 10³, 104, 105 e 106 esporos/mL. As plantas foram submetidas às temperaturas de 22ºC e 28ºC por 18 horas de molhamento foliar. Avaliou-se a incidência e a severidade da brusone em porcentagem. Os resultados obtidos mostraram que à 22ºC a severidade foi maior na cultivar suscetível e igual para as cultivares a 28ºC. A cultivar resistente se comportou de forma semelhante a suscetível, quando submetida à alta temperatura e altas concentrações de inóculo.
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Avaliação da diversidade genética e da resistência a mancha foliar da gala em acessos de macieira do banco ativo de germoplasma da E.E.Epagri/Caçador / Evaluation of genetic diversity and resistance to leaf spot Gala in apple tree accesses the Active Germoplasm bank in E. E. Epagri / Caçador

Furlan, Carla Regina Costa 27 June 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:44:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGPV08MA071.pdf: 1225933 bytes, checksum: cac05331f9f8408e3041c9d8b75dd641 (MD5) Previous issue date: 2008-06-27 / In this work were used 3 isolates of C. gloeosporioides from different apple producer places, and 245 access belong to the Active Germoplasm Banc Apple Tree Estação Experimental da EPAGRI de Caçador, Santa Catarina . Among the tested access, 185 were resistant and 32 susceptible. From those susceptible, there was not difference in the severity degree of the MFG attack. The data obtained in this study can help in the choice of resistant access, what could be used like parentage in the genetic breeding programs of the apple tree, in order to obtain the resistance to this pathogen.The genetic diversity characterization of the access by means of molecular marker studies, has been used like an important tool to maximize the maintenance work of the germoplasm banks. In this way, the objective of this study was characterize genetically the active germoplasm bank of the apple tree making use of 12 primers of SSR. The analysis of genetic diversity was realized through the DNA extraction of the 169 access, using young leafs. The extraction protocol used was the CTAB, and the estimation of the DNA concentration was done in agarose gel 0,8% coloured with bromide ethidium (0,3 μg/ml), with DNA Fago Lambda (20, 50, 100 e 200 ng/μl) like pattern. A total of 197 alleles were encountered, and the medium number of alleles by locus of SSR was 16,4. The medium heterozigosity expectation was 84%, and the revealed polimorphism by number of the alleles by locus had a high percentage (82%). The genetic similarity analysis showed two distinct groups. The gotten results had demonstrated the existence of high genetic variability in the bank of germoplasma of apple trees, salient for the raised number of alelos for I lease and high level of heterozigosidade. This knowledge will contribute with the improvement in the efficiency of the identification of combinations that will serve of base for the genetic improvement of the apple tree / No presente trabalho foram utilizados 245 genótipos pertencentes ao Banco de Germoplasma de macieira BGM, da Epagri / Estação Experimental de Caçador - EECd, SC. Para identificar os genótipos portadores de resistência à mancha foliar de glomerela - MFG, doença essa causada principalmente pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides. Os genótipos foram inoculados com 3 isolados de C. gloeosporioides provenientes de diferentes regiões produtoras de maçã. Entre os genótipos testados, 187 (76,3%) manifestaram resistência e 58 (23,7%) manifestaram suscetibilidade à MFG. Entre as cultivares suscetíveis, não houve diferença no grau de severidade de ataque da MFG. Os resultados obtidos neste estudo têm, dentre outras, a finalidade de subsidiar os programas de melhoramento genético da macieira na seleção de parentais, objetivando a incorporação de resistência genética à MFG nas futuras novas cultivares. Para caracterizar os genótipos do Banco de Germoplasma de macieiras foram utilizados 12 primers de SSR. A análise de diversidade genética foi realizada através da extração do DNA de 169 genótipos, utilizando-se folhas jovens. O método de extração utilizado foi CTAB e a estimativa da concentração de DNA extraído foi feita em gel de agarose 0,8% com brometo de etídeo (0,3 μg/ml), tendo como padrão DNA Fago Lambda (20, 50, 100 e 200 ng/μl). Foi obtido um total de 197 alelos, sendo que o número médio de alelos por loco SSR foi de 16,4. A expectativa média de heterozigosidade foi de 84%, o polimorfismo revelado pelo número de alelos por loco teve uma percentagem alta de 82%. Pela análise de similaridade genética foram observados dois grupos. Os resultados obtidos demonstraram a existência de alta variabilidade genética no banco de germoplasma de macieiras, ressaltado pelo elevado número de alelos por loco e alto nível de heterozigosidade. Esse conhecimento contribuirá com a melhora na eficiência da identificação de combinações que servirão de base para o melhoramento genético da macieira
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Murcha-de-curtobacterium do feijoeiro : ocorrência em Santa Catarina, comportamento de genótipos e efeito de nitrogênio e potássio /

Theodoro, Gustavo de Faria. January 2004 (has links)
Orientador: Antonio Carlos Maringoni / Banca: Antonio Carlos Maringoni / Banca: Roberto Lyra Villas Boas / Banca: Julio Rodrigues Neto / Banca: Silvania Furlan de Oliveira / Banca: Ivan Paulo Bedendo / Resumo: Este trabalho visou avaliar a ocorrência da bactéria Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens em lavouras de feijoeiro localizadas em alguns municípios do Estado de Santa Catarina nas safras 2002/03 e 2003/04; a reação de genótipos de feijoeiro à murcha-de-curtobacterium; e o efeito de doses de nitrogênio (N) e potássio (K) sobre a severidade da doença, peso da matéria seca e o conteúdo de diversos nutrientes na parte aérea das cultivares IAC Carioca Pyatã, IPR 88 - Uirapuru e SCS 202 - Guará. Foram coletadas plantas com sintoma de murcha em lavouras de feijoeiro em 12 municípios. Posteriormente, procedeu-se ao isolamento, à purificação e à caracterização da bactéria e aos testes de patogenicidade. Aos 10 dias após a semeadura, plântulas de 24 genótipos de feijoeiro, conduzidas em casa-de-vegetação, foram inoculadas com o isolado FJ 36. A severidade da murcha-de-curtobacterium foi avaliada, a cada cinco dias, até aos 25 dias após a inoculação. Tanto no experimento que avaliou o efeito do N (uréia) quanto do K (cloreto de potássio) na severidade da doença, empregou-se a dose recomendada pela análise de solo e variações de 25 e 50 % abaixo e acima da mesma. Foi coletada a parte aérea das plantas antes e após as adubações, aos 25 DAS, para se aferir o peso da matéria seca e o conteúdo de N, fósforo (P), K, cálcio (Ca) e magnésio (Mg). Constatou-se que C. f. pv. flaccumfaciens esteve presente em plantas cultivadas nos municípios de Campos Novos, Faxinal dos Guedes, Guatambu, Ipuaçu, Ponte Serrada e Tigrinhos. Dos genótipos avaliados, somente as cultivares IAC Carioca Akytã, IAC Carioca Aruã e IAC Carioca Pyatã, considerados como padrões de resistência à doença, apresentaram-se com as menores notas de severidade média e valores de área abaixo da curva do progresso da murcha-de-curtobacterium (AACPMC)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: This work aimed evaluate the occurrence of the bacteria Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens in common bean fields of Santa Catarina State, during the harvest of 2002/03 and 2003/04; the reaction of bean genotypes to the bacterial wilt; and the effect of nitrogen (N) and potassium (K) levels on the severity of the disease, the weight of the dry mass and the content of nutrients I nthe aerial part of the cultivars IAC Carioca Pyatã, IPR 88 - Uirapuru and SCS 202 - Guará cultivars. Plants with symptoms of wilt were collected in bean fields of 12 cities. It was made the isolation, purification and cultural characterization of the bacteria and the procedures to fulfill the Kochþs postulates. The inoculation with the strain FJ 36 was done in the 10th day after the sow of 24 common bean genotypes, under greenhouse conditions. The bacterial wilt severity was evaluated, in each five days, until the 25th day after inoculation. It was adopted as treatments the recommended level of N (urea) and K (potassium chloride), by the soil analysis, as well levels 25% and 50% under and below it. The aerial part of the plants was collected before and after the fertilizations, to determine the weight of the dry mass and the content of N, phosphorus (P), K, calcium (Ca) and magnesium (Mg). Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens was detected in plants cultivated in Campos Novos, Faxinal dos Guedes, Guatambu, Ipuaçu, Ponte Serrada and Tigrinhos. Regarding the evaluated genotypes, only the cultivars IAC Carioca Akytã, IAC Carioca Aruã e IAC Carioca Pyatã, considered as patterns of resistance, had the lower values of average severity and area under the bacterial wilt progress curve (AUBWPC). However, although to have been considered susceptible, the cultivars SCS 202 - Guará and IPR Graúna showed relatively low values of AUBWPC... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

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