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Caracterização fenotípica e molecular de amostras de Enterococcus isoladas em um hospital universitário da cidade do Rio de Janeiro / Phenotypic and molecular characterization of strains of Enterococcus isolated in a university hospital in the city of Rio de Janeiro

Rachel Leite Ribeiro 28 April 2018 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os enterococos estão amplamente distribuídos no ambiente. Nos seres humanos, compõem a microbiota do trato gastrintestinal, da cavidade oral e do trato geniturinário. Nas últimas décadas, esses microrganismos se tornaram importantes agentes etiológicos de infecções hospitalares. Uma característica marcante desses microrganismos é a resistência intrínseca a vários antimicrobianos utilizados habitualmente no tratamento de infecções, além de alguns fatores que tem sido relacionado à virulência de enterococos. Este estudo investigou a presença de enterococos em amostras de infecção e colonização de pacientes hospitalizados, profissionais de saúde, dietas hospitalares e manipuladores de alimentos. Foram analisadas 276 amostras de colonização, de quadros de infecção, dietas orais e manipuladores de alimento. Não foram recuperadas amostras dos profissionais de saúde. Todas as amostras foram submetidas a testes convencionais de caracterização do gênero e espécies. Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos foram empregados pelo método de disco difusão, além da CIM para vancomicina e teicoplanina. A produção de biofilme e a expressão da gelatinase também foram avaliadas. Os genes de resistência a gentamicina, estreptomicina e vancomicina e os genes de virulência cylA, esp e fsr foram pesquisados pela técnica de PCR. O polimorfismo genético foi determinado por PFGE. A espécie E. faecalis foi a prevalente nas amostras isoladas de colonização e infecção (42,2% e 81,9%, respectivamente). E. casseliflavus (58,9%) foi a mais freqüente dentre as amostras das dietas hospitalares e E. faecium (46,7%) de manipuladores. Dentre as amostras de colonização as maiores taxas de resistência foram observadas para eritromicina (76,3%) e ciprofloxacina (53,9%). Dentre as amostras de infecção, >70% foram resistentes a eritromicina, ciprofloxacina e tetraciclina. Resistência a níveis elevados de gentamcina (HLR-GE) e estreptomicina (HLR-ST) foi detectada em 24,6% e 20,4% das amostras, respectivamente, e todas foram portadoras dos respectivos genes. A maioria das amostras de colonização (52,6%) e infecção (55,7%) foram multirresistentes. A taxa para resistência a níveis elevados de vancomicina foi de 5,2% e todas eram portadoras do gene vanA. Em relação a formação de biofilme, 70,2% foram produtoras, com uma maior freqüência dentre as de infecção. A expressão de gelatinase foi detectada em 28,9% e 44,3% das amostras de colonização e infecção, respectivamente. Nenhuma das amostras isoladas das dietas hospitalares e de manipuladores expressou gelatinase. Nas amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium (n=109) 16,5%, 51,4% e 48,6% apresentaram produtos de amplificação referentes aos genes cylA, esp e fsr, respectivamente. A análise do polimorfismo genético revelou uma extensa diversidade dentre as amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium, não acarretando um perfil eletroforético prevalente. Entretanto, foi observado um perfil único dentre as amostras de E. gallinarum resistentes a vancomicina (vanA). Este estudo mostrou que amostras de enterococos isoladas de diferentes fontes, não só de quadros infecciosos, podem representar um risco para a população, apontando para uma maior reflexão quanto ao papel desses microrganismos nas infecções humanas, particularmente no ambiente hospitalar. / Enterococci are widespread in the nature. In humans, as in the other animals, gastrointestinal tract, the oral cavity and the genitourinary tract. In recent decades, these microorganisms have emerged as one important of the most pathogen associated with nosocomial infections. They shows intrinsic resistance to several antimicrobial commonly used for treatment of the infections. Several potential virulence factors have been identified in enterococci, but none has been established as having a major contribution to virulence in humans, as well as some factors that has been linked to the virulence of enterococci. We analyzed 276 isolates obtained from colonization, infection, hospital diets and food handlers. The isolates were identified by conventional physiological tests for characterization at genus and species level. Antimicrobial susceptibilities were determined by the disk diffusion test method. CIM to vancomycin and teicoplanin were avayable by E-test. The biofilm production and the expression of gelatinase were also evaluated. The genes for resistance to gentamicin, vancomycin, streptomycin resistance genes as code as determinants virulence cylA, esp and fsr were investigated by PCR. The genetic polymorphism was determined by PFGE. E. faecalis was prevalent species recovered from colonization and infection (42.2% and 81.9%, respectively). E. casseliflavus (58.9%) was frequent species among the hospital diets samples. On the other hand, E. faecium (46.7%) was prevalent in food handlers. Among the colonization isolates the highest rates of resistance were observed to erythromycin (76.3%) and ciprofloxacin (53.9%). Although, >70% of infection isolates were resistant to erythromycin, tetracycline and ciprofloxacin. High level resistance to gentamicin (HLR-GE) and streptomycin (HLR-ST) were detected in 24.6% and 20.4% of the samples, respectively, and these isolates harboured the genes aac(6)-Ie-aph(2)-Ia and aph(2)-Ic. Most strains of colonization (52.6%) and infection (55.7%) were multidrug resistant. High level resistance to vancomycin were detected in 5.2% of isolates harbouring vanA gene. 70.2% of the isolates were biofilm producers, were greater frequency among of infection. The expression of gelatinase was detected in 28.9% and 44.3% of colonization and infection isolates, respectively. None of the isolates recovered from the hospital diets and food handlers expressed gelatinase. In E. faecalis and E. faecium strains (n = 109) 16.5%, 51.4% and 48.6% showed amplification products related cylA, esp and fsr genes, respectively. The analysis of genetic polymorphism showed a wide diversity among the isolates belonging to the E. faecalis and E. faecium species. None prevalent profile was observed. The E. gallinarum vanc1/vanA isolates showed identical PFGE profiles. This study showed that enterococci strains isolated from diferents sources, also represents a potential risk for population, particularly those in hospital environment.
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Caracterização fenotípica e molecular de amostras de Enterococcus isoladas em um hospital universitário da cidade do Rio de Janeiro / Phenotypic and molecular characterization of strains of Enterococcus isolated in a university hospital in the city of Rio de Janeiro

Rachel Leite Ribeiro 28 April 2018 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os enterococos estão amplamente distribuídos no ambiente. Nos seres humanos, compõem a microbiota do trato gastrintestinal, da cavidade oral e do trato geniturinário. Nas últimas décadas, esses microrganismos se tornaram importantes agentes etiológicos de infecções hospitalares. Uma característica marcante desses microrganismos é a resistência intrínseca a vários antimicrobianos utilizados habitualmente no tratamento de infecções, além de alguns fatores que tem sido relacionado à virulência de enterococos. Este estudo investigou a presença de enterococos em amostras de infecção e colonização de pacientes hospitalizados, profissionais de saúde, dietas hospitalares e manipuladores de alimentos. Foram analisadas 276 amostras de colonização, de quadros de infecção, dietas orais e manipuladores de alimento. Não foram recuperadas amostras dos profissionais de saúde. Todas as amostras foram submetidas a testes convencionais de caracterização do gênero e espécies. Testes de susceptibilidade aos antimicrobianos foram empregados pelo método de disco difusão, além da CIM para vancomicina e teicoplanina. A produção de biofilme e a expressão da gelatinase também foram avaliadas. Os genes de resistência a gentamicina, estreptomicina e vancomicina e os genes de virulência cylA, esp e fsr foram pesquisados pela técnica de PCR. O polimorfismo genético foi determinado por PFGE. A espécie E. faecalis foi a prevalente nas amostras isoladas de colonização e infecção (42,2% e 81,9%, respectivamente). E. casseliflavus (58,9%) foi a mais freqüente dentre as amostras das dietas hospitalares e E. faecium (46,7%) de manipuladores. Dentre as amostras de colonização as maiores taxas de resistência foram observadas para eritromicina (76,3%) e ciprofloxacina (53,9%). Dentre as amostras de infecção, >70% foram resistentes a eritromicina, ciprofloxacina e tetraciclina. Resistência a níveis elevados de gentamcina (HLR-GE) e estreptomicina (HLR-ST) foi detectada em 24,6% e 20,4% das amostras, respectivamente, e todas foram portadoras dos respectivos genes. A maioria das amostras de colonização (52,6%) e infecção (55,7%) foram multirresistentes. A taxa para resistência a níveis elevados de vancomicina foi de 5,2% e todas eram portadoras do gene vanA. Em relação a formação de biofilme, 70,2% foram produtoras, com uma maior freqüência dentre as de infecção. A expressão de gelatinase foi detectada em 28,9% e 44,3% das amostras de colonização e infecção, respectivamente. Nenhuma das amostras isoladas das dietas hospitalares e de manipuladores expressou gelatinase. Nas amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium (n=109) 16,5%, 51,4% e 48,6% apresentaram produtos de amplificação referentes aos genes cylA, esp e fsr, respectivamente. A análise do polimorfismo genético revelou uma extensa diversidade dentre as amostras pertencentes as espécies E. faecalis e E. faecium, não acarretando um perfil eletroforético prevalente. Entretanto, foi observado um perfil único dentre as amostras de E. gallinarum resistentes a vancomicina (vanA). Este estudo mostrou que amostras de enterococos isoladas de diferentes fontes, não só de quadros infecciosos, podem representar um risco para a população, apontando para uma maior reflexão quanto ao papel desses microrganismos nas infecções humanas, particularmente no ambiente hospitalar. / Enterococci are widespread in the nature. In humans, as in the other animals, gastrointestinal tract, the oral cavity and the genitourinary tract. In recent decades, these microorganisms have emerged as one important of the most pathogen associated with nosocomial infections. They shows intrinsic resistance to several antimicrobial commonly used for treatment of the infections. Several potential virulence factors have been identified in enterococci, but none has been established as having a major contribution to virulence in humans, as well as some factors that has been linked to the virulence of enterococci. We analyzed 276 isolates obtained from colonization, infection, hospital diets and food handlers. The isolates were identified by conventional physiological tests for characterization at genus and species level. Antimicrobial susceptibilities were determined by the disk diffusion test method. CIM to vancomycin and teicoplanin were avayable by E-test. The biofilm production and the expression of gelatinase were also evaluated. The genes for resistance to gentamicin, vancomycin, streptomycin resistance genes as code as determinants virulence cylA, esp and fsr were investigated by PCR. The genetic polymorphism was determined by PFGE. E. faecalis was prevalent species recovered from colonization and infection (42.2% and 81.9%, respectively). E. casseliflavus (58.9%) was frequent species among the hospital diets samples. On the other hand, E. faecium (46.7%) was prevalent in food handlers. Among the colonization isolates the highest rates of resistance were observed to erythromycin (76.3%) and ciprofloxacin (53.9%). Although, >70% of infection isolates were resistant to erythromycin, tetracycline and ciprofloxacin. High level resistance to gentamicin (HLR-GE) and streptomycin (HLR-ST) were detected in 24.6% and 20.4% of the samples, respectively, and these isolates harboured the genes aac(6)-Ie-aph(2)-Ia and aph(2)-Ic. Most strains of colonization (52.6%) and infection (55.7%) were multidrug resistant. High level resistance to vancomycin were detected in 5.2% of isolates harbouring vanA gene. 70.2% of the isolates were biofilm producers, were greater frequency among of infection. The expression of gelatinase was detected in 28.9% and 44.3% of colonization and infection isolates, respectively. None of the isolates recovered from the hospital diets and food handlers expressed gelatinase. In E. faecalis and E. faecium strains (n = 109) 16.5%, 51.4% and 48.6% showed amplification products related cylA, esp and fsr genes, respectively. The analysis of genetic polymorphism showed a wide diversity among the isolates belonging to the E. faecalis and E. faecium species. None prevalent profile was observed. The E. gallinarum vanc1/vanA isolates showed identical PFGE profiles. This study showed that enterococci strains isolated from diferents sources, also represents a potential risk for population, particularly those in hospital environment.
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Avaliação da diversidade microbiana e do risco clínico-microbiológico de sistemas de biorreatores para produção de biogás e biofertilizante a partir de dejetos da pecuária leiteira

Resende, Juliana Alves 16 December 2013 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-02-15T10:47:06Z No. of bitstreams: 1 julianaalvesresende.pdf: 4187528 bytes, checksum: 3a29cc184829c26eb33ffecc869ae841 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-02-26T12:21:55Z (GMT) No. of bitstreams: 1 julianaalvesresende.pdf: 4187528 bytes, checksum: 3a29cc184829c26eb33ffecc869ae841 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-26T12:21:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 julianaalvesresende.pdf: 4187528 bytes, checksum: 3a29cc184829c26eb33ffecc869ae841 (MD5) Previous issue date: 2013-12-16 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Digestão anaeróbia é uma alternativa sustentável para utilização de dejetos animais como insumo energético. Neste contexto, a dinâmica da comunidade microbiana, inativação de patógenos ou mesmo disseminação de genes de resistência durante o processo de biodigestão se torna relevante. Este trabalho avaliou a diversidade taxonômica (domínios Bacteria e Archaea) e a persistência de grupos bacterianos de relevância e resistência a drogas antimicrobianas, em dois biodigestores contínuos de escala piloto operados a temperatura ambiente em duas estações, verão e inverno. O substrato era composto de fezes bovinas frescas diluídas com água de lavagem dos pisos (sólidos totais de 2 a 3%). Amostras do biogás foram coletadas para determinação dos teores de metano. Para análises físico-químicas dos afluentes (carregamento inicial) e efluentes, alíquotas foram coletadas ao longo de 60 dias de fermentação para análises de sólidos totais, voláteis e pH. Análises das comunidades microbianas foram realizadas por PCR quantitativo (qPCR), PCR-single strand conformation polymorphism (SSCP) e análise metagenômica. A densidade de diferentes grupos bacterianos foi realizada por contagem direta. Linhagens bacterianas foram identificadas bioquimicamente utilizando kits comerciais. A susceptibilidade a drogas foi determinada por diluição em ágar. Quantificação de genes que codificam resistência aos macrolídeos (ermB), aminoglicosídeos (aphA2) e beta-lactâmicos (blaTEM-1) foram observadas por qPCR. A taxonomia de bactérias clinicamente relevantes foi ainda avaliada, por similaridade, a partir de um banco de dados criado com 30 sequências de DNA codificadoras para o 16S rRNA de bactérias potencialmente patogênicas. Independente da estação, o processo de biodigestão apresentou desempenho semelhante, com taxas de rendimento médio e teores de metano, 59,2% no verão e 53,7% no inverno. A dinâmica e os valores médios do número de cópias do gene V3 Bacteria e Archaea também foram semelhantes. Ocorreram alterações na composição (filo e famílias) das comunidades microbianas entre as estações e estas mudanças não influenciaram na produção de metano. Provavelmente, ocorreu uma redundância de grupos capazes de realizar funções similares. Foram verificadas reduções significativas de grupos bacterianos de relevância clínico-microbiológica viáveis em ambas as estações. Apesar disso, bactérias multirresistentes foram detectadas tanto nos afluentes como nos efluentes. Cocos Gram-positivos (CGP), o grupo mais prevalente, foi resistente à penicilina e levofloxacino, enquanto resistência à ampicilina, ampicilina-sulbactam e cloranfenicol foi observado com maior frequência entre os bacilos Gram-negativos da família Enterobacteriaceae (ENT) e não fermentadores (BGN NF). Enterococcus spp. foram os CGP isolados com maior frequência e entre os BGN, Escherichia coli foi o mais abundante. Houve redução no número de cópias de todos os genes de resistência (ermB, aphA2 e blaTEM-1) durante o processo de biodigestão, porém mantidos níveis preocupantes nos efluentes. Taxonomia bacteriana avaliada por similaridade das sequências mostrou Clostridium spp., Acinetobacter e Strenotrophomonas como as bactérias mais identificadas. Apesar dos dados apresentados nesse estudo endossarem a digestão anaeróbia como solução importante para reciclagem e produção de energia, levanta preocupações sobre riscos de caráter sanitários durante o processo. Além disso, discussões a respeito do uso de antimicrobianos na pecuária leiteira são necessárias. / Anaerobic digestion is a sustainable alternative to using animal waste as an energy source. In this context, the dynamics of the microbial community, inactivation of pathogens or even spread of resistance genes during the process of digestion becomes relevant. This study evaluated the taxonomic diversity (Bacteria and Archaea domains) and the persistence of bacterial groups of relevance and resistance to antimicrobial drugs, analyzing two continuous pilot scale digesters operated at ambient temperature in two seasons, summer and winter. The substrate was composed fresh cow dung diluted with water for washing floors (total solids 2 to 3%). Biogas samples were collected to determine the levels of methane. For physico-chemical analysis of influent (initial load) and effluent, aliquots were collected during 60 days of fermentation for analyzes of total volatile solids and pH. Analyzes of microbial communities were performed by quantitative PCR (qPCR), PCR-single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis and metagenomics. The density of different bacterial groups was performed by direct counting. Bacterial strains were identified biochemically using commercial kits. The drug susceptibility was determined by the agar dilution method. Quantification of genes encoding resistance to macrolides (ermB), aminoglycosides (aphA2) and beta-lactams (blaTEM-1) were observed by qPCR. The taxonomy of clinically relevant bacteria was further evaluated by similarity from a database created with 30 DNA sequences coding for 16S rRNA of potentially pathogenic bacteria. Independent of season, the process of digestion showed similar performance, with rates average yield and percent methane, 59.2% in summer and 53.7% in winter. The dynamics and the average values of the number of copies of the gene V3 Bacteria and Archaea were also similar. Changes occurred in the composition (phylum and families) of the microbial communities between seasons and these changes did not influence the production of methane. Probably occurred a redundancy group able to perform similar functions. Significant reductions of bacterial groups of clinical and microbiological relevance viable in both seasons were observed. Despite this, multiresistant bacteria were detected in both the affluents and effluents. Gram-positive cocci (GPC), the most prevalent group was resistant to penicillin and levofloxacin, while ampicillin, ampicillin-sulbactam, chloramphenicol was observed more frequently among Gram-negative rods of the Enterobacteriaceae family (ENT) and not fermenters (NF GNR). Enterococcus spp. were most frequently GPC isolated and among the GNR, Escherichia coli was the most abundant. There was reduction in the number of copies of all the resistance genes (ermB, aphA2 and blaTEM-1) during the process of digestion, however, the effluent still showing concerning levels. Bacterial taxonomy evaluated by similarity of the sequences showed Clostridium spp., Acinetobacter and Strenotrophomonas were the bacteria more identified. In spite the data presented in this study showed anaerobic digestion as an important solution to recycling and energy production, raises concerns about health risks of character during the process. In addition, discussions regarding the use of antimicrobials in dairy farming are needed.
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Percepção dos trabalhadores de saúde sobre a exposição a micro-organismos multirresistentes / Perception of health workers about exposure to multidrug-resistant microorganisms

Silva, Ludimila Cristina Souza 09 December 2013 (has links)
Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-12-08T15:34:04Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ludimila Cristina Souza Silva - 2013.pdf: 4243225 bytes, checksum: 53237624d72058c3a60ec16adc7e23f3 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-12-08T15:34:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ludimila Cristina Souza Silva - 2013.pdf: 4243225 bytes, checksum: 53237624d72058c3a60ec16adc7e23f3 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-08T15:34:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ludimila Cristina Souza Silva - 2013.pdf: 4243225 bytes, checksum: 53237624d72058c3a60ec16adc7e23f3 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-12-09 / INTRODUCTION: Pediatric Intensive Care Unit ( UTIin ) is an unhealthy environment due to the performance of procedures and use of invasive devices , antimicrobial use, among others . This situation makes workers vulnerable to colonization by pathogens and potential backers health. Thus corroborate unconformities on the principles of patient safety and worker. OBJECTIVE: To analyze the perception of health workers related to occupational exposure by multiresistant microorganisms in a Pediatric Intensive Care Unit of an institution 's Health System of Goiania - Goias . METHODS: This was a descriptive, analytical research , qualitative in nature , performed in the Intensive Care Unit of an Institution of Child Health Health System in Goiânia -GO. The population consisted of 22 workers of the multidisciplinary health care team. Data collection occurred from June to August 2012, through interviews, individual, guided by a form previously analyzed by " expertise " consists of two parts. Objective questions were used to characterize the workers. Subjective divided into two parts, one for smoothing the knowledge about multidrug-resistant micro - organisms and risk / occupational exposure. And other two guiding, following the Critical Incident Technique (ICT). Data were organized and analyzed according to qualitative analysis of Bardin, Software Atlas ti and the four dimensions of the Health Belief Model proposed by Rosenstock. RESULTS: Regarding gender, all workers were women, aged 24 and 50, 11 (50.2%) were nurses. The training of 11 (50.2%) were graduate with training time ranging from 1 to 24 years. On the issue of qualification, 16 (72.7%) attended at least one training on biosafety and / or bacterial multidrug resistance to antimicrobial agents. Knowledge of these micro -organisms was reported by 14 (63.6%) workers. The Perceived Susceptibility category, according to the Health Belief Model proposed by Rosenstock, was endorsed by the "perceived risk of illness", "infection/contamination /colonization by micro -organisms "and" infection / cross contamination". Already Perceived Benefits were attributed to the "availability of Personal Protective Equipment", "continuing education", "proper physical structure","environmental hygiene","information","adequate human resources" and "ventilation in the room."The Perceived Barriers by "difficulty in preventing "and" lack of preventative measures." Situations involving occupational exposure to multidrug-resistant micro -organisms exposure yielded 41 critical incidents, of which 26 (63.4%) had negative polarity. These incidents were composed of 41 cases from which was obtained 59 behaviors. Of these, 35 (59.3%) was considered as positive analysis. When examined in the light of the consequences for workers, emerged 66 consequences, obtaining these, 35 (59.3%) with negative polarity. Content Analysis emerged from these incidents four categories: " Exhibition of professional", "Pro - activity for safety professional" , "organizational safety culture" and "behavioral influence “. It apprehends these categories that workers do not have clarity about behaviors insurance during the workday, evidenced by situations of risk of exposure to micro-organisms. CONCLUSION: It was demonstrated that health workers had not sensitized about job security . It is believed that this gap is due to the paucity of an organizational culture rooted in service, work process short of Brazilian guidelines . It is recommended to reevaluate human resources policy and investment in continuing education programs, aiming to promote and add value and knowledge to safe practice. / INTRODUÇÃO: A Unidade de Terapia Intensiva Infantil (UTIin) é um ambiente insalubre em virtude da realização de procedimentos e utilização de dispositivos invasivos, uso de antimicrobianos, dentre outros. Essa situação torna os trabalhadores de saúde vulneravéis à colonização e potenciais veiculadores de patógenos. Dessa forma, corroboram com inconformidades quanto aos princípios da segurança do paciente e trabalhador. OBJETIVO: Analisar a percepção de trabalhadores de saúde relacionada à exposição ocupacional por micro-organismos multirresistentes em uma Unidade de Terapia Intensiva Infantil de uma instituição do Sistema Único de Saúde de Goiânia-Goiás. METODOLOGIA: Trata-se de uma pesquisa descritiva, analítica, de natureza qualitativa, realizada na Unidade de Terapia Intensiva Infantil de uma Instituição de Saúde do Sistema Único de Saúde de Goiânia-GO. A população constitui-se de 22 trabalhadores da equipe multiprofissional de saúde. A coleta de dados ocorreu de junho a agosto de 2012, por meio de entrevistas, individuais, norteadas por um formulário previamente analisado por “expertises”, composto por duas partes. Questões objetivas foram utilizadas para caracterizar os trabalhadores. As subjetivas se dividiram em duas partes, uma para o nivelamento do conhecimento sobre micro-organismo multirresistente e risco/exposição ocupacional. E, outras duas norteadoras, seguindo a Técnica do Incidente Crítico (TIC). Os dados foram organizados e analisados segundo a Análise de Conteúdo Temática de Bardin, Software Atlas ti e as quatro dimensões do Modelo de Crenças em Saúde proposto por Rosenstock. RESULTADOS: Quanto ao gênero, todos os trabalhadores eram do sexo feminino, com idade entre 24 e 50 anos, 11(50,2%) eram enfermeiros. A formação profissional de 11 (50,2%) era pós-graduação, com tempo de formação variando entre 1 e 24 anos. No quesito qualificação, 16 (72,7%) participaram de, pelo menos, uma capacitação sobre biossegurança e/ou multirresistência bacteriana aos antimicrobianos. O conhecimento sobre esses micro-organismos foi referido por 14 (63,6%) dos trabalhadores. A categoria Susceptibilidade Percebida, segundo o Modelo de Crenças em Saúde proposto por Rosenstock, foi referendada pela “percepção dos riscos de adoecimento”, “infecção/contaminação/colonização por micro-organismos” e “infecção/contaminação cruzada”. Já os Benefícios Percebidos foram atribuídos à “disponibilidade de Equipamentos de Proteção Individual”, “educação continuada”, “estrutura física adequada”, “higienização do ambiente”, “informação”, “recursos humanos adequados” e “ventilação do ambiente”. As Barreiras Percebidas pela “dificuldade na prevenção” e “ausência de medidas de prevenção”. Das situações que envolveram exposição ocupacional a microorganismos multirresistentes, obtiveram-se 41 incidentes críticos, desses, 26 (63,4%) apresentaram polaridade negativa. Esses incidentes foram compostos por 41 situações, das quais obteve-se 59 comportamentos. Desses, 35 (59,3%) foi considerados a análise como positivos. Quando analisados sob o prisma das conseqüências para os trabalhadores, emergiram 66 consequências, obtendo-se dessas, 35 (59,3%) que apresentaram polaridade negativa. Da Análise de Conteúdo surgiram a partir desses incidentes quatro categorias: “Exposição do profissional”, “Pro-atividade para segurança do profissional”, “Cultura organizacional segurança” e “Influência comportamental”. Apreende-se dessas categorias que os trabalhadores não têm clareza sobre comportamentos de seguros durante a jornada laboral, evidenciados por situações de riscos de exposição aos micro-organismos. CONCLUSÃO: Evidenciou-se que os trabalhadores de saúde não se apresentaram sensibilizados sobre a segurança laboral. Acredita-se que essa lacuna seja em decorrência da incipiência de uma cultura organizacional arraigada no serviço, processo de trabalho aquém das diretrizes brasileiras. Recomenda-se reavaliar a política de recursos humanos e de investimentos em programas de educação permanente, objetivando promover e agregar valores e conhecimentos à práxis segura.

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