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Caracterização de frações antigênicas de Leishmania braziliensis e avaliação da resposta imune em pacientes com Leishmaniose Tegumentar

Carvalho, Josiane Silva Martins January 2004 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-08-29T13:16:30Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Josiane Silva Martins Carvalho.pdf: 768971 bytes, checksum: 1b2302804a368fa23b8330cae55b6d4a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-29T13:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Josiane Silva Martins Carvalho.pdf: 768971 bytes, checksum: 1b2302804a368fa23b8330cae55b6d4a (MD5) / Leishmania braziliensis é um dos principais causadores da leishmaniose tegumentar americana (LTA), doença endêmica na região de Corte de Pedra - Bahia, Brasil e em aproximadamente 88 países em todo o mundo, com maior concentração em áreas tropicais e subtropicais. Diversos estudos foram realizados empregando antígeno solúvel de leishmania (SLA), porém poucos relatam sobre antígenos de L. braziliensis, nativos ou recombinantes. São descritos na literatura antígenos de elevado peso molecular, o lipofosfoglicano (LPG) de membrana, moléculas de 72, 63, 46, 30, 20 e 11 KDa, além de histonas e heat-shock proteins (HSP). O presente trabalho teve como objetivos fracionar SLA de promastigotas de L. braziliensis e caracterizar as respostas imunológicas humoral e celular induzidas. Foram utilizados promastigotas cultivados em meio Schneider. O extrato total após sonicação, foi submetido à cromatografia em coluna de Bio-Gel P-60 e as frações obtidas foram analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% e revelado com nitrato de prata. A reatividade humoral foi determinada por immunoblotting empregando plasma de pacientes com leishmaniose cutânea. A partir dos resultados obtidos, foram selecionadas duas fracões: F-VI: 64 KDa e F-V: 64, 47, 32 e 19 KDa, com as quais foi realizado o estudo da resposta celular. A medida da produção de citocinas (IFN-, TNF- e IL-10) por células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de 15 pacientes com leishmaniose cutânea (LC) e 5 pacientes com leishmaniose mucosa (LM) foi determinada pelo método de ELISA. Foram obtidos os seguintes resultados: para LC: IFN-: 180,0233,2 pg/mL (F-VI) e 611,6 603,4 pg/mL (F-V) (p=0,0164); TNF-: 793,9555,6pg/mL (F-VI) e 780,3739,7 pg/mL (F-V) (p>0,05) e IL-10: 54,663,5 pg/mL (F-VI) e 35,938,8 pg/mL (F-V) (p>0,05). Para os pacientes com LM: IFN-: 69,2  64,9 pg/mL (F-VI) e 389,0612,6 pg/mL (F-V) (p>0,05); TNF-: 583,1637,4 pg/mL (F-VI) e 552,2589,2 pg/mL (F-V) (p>0,05) e IL-10: 22,324,0 pg/mL (F-VI) e 30,950,6 pg/mL (F-V) (p>0,05). CMSP de pacientes com LC foram estimuladas a produzir altos níveis de IFN- e TNF- e baixos níveis de IL-10, especialmente pela FÇ-V. Nas CMSP dos pacientes com LM, houve alta produção das citocinas de resposta Th1, porém sem diferença estatisticamente significativa, além de uma discreta produção de IL-10. A avaliação da correlação mostrou que nas CMSP dos pacientes LM estimuladas pela FÇ-V, o IFN- produzido favoreceu significativamente a produção de TNF- (p=0,037). A reação sorológica revelou que apenas os plasmas dos pacientes com LC reconheceram as moléculas de 64, 32 e, mais fracamente, 19 KDa. Esses dados sugerem uma provável participação ativa destas moléculas na indução da resposta à leishmaniose e que, em LM a associação destes antígenos pode contribuir para o aumento da lesão, enquanto que nos pacientes LC esta associação pode ter um efeito imunoprotetor.
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Identifica??o e quantifica??o de hem?citos de f?meas ingurgitadas de Boophilus microplus inoculados com fungos Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Penicillium corylophilum e Fusarium oxysporum. / Identification and quantification of hemocytes obtained from engorged females of Boophilus microplus (Canestrini, 1887) (Acari: Ixodidae) inoculated with Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Penicillium corylophilum and Fusarium oxysporum

Silva, Sandra Borges da 24 February 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006-Sandra Borges da Silva.pdf: 1572214 bytes, checksum: 1980363c45abbde9170747be40d0635f (MD5) Previous issue date: 2006-02-24 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Biological control of the tick Boophilus microplus with Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana has been evaluated by several researchers. The selection of specimens resistant to chemical products is a mechanism used by arthropods for survival and maintenance in the environment. It is already known how fungi penetrate the host and their pathogenic potential at different phases of their biological cycle, however, ticks immune response against these agents need more detailed studies. The present work had as objectives: to identify and quantify the cellular types involved in the cellular response of B. microplus inoculated with entomopathogenic (M. anisopliae and B. bassiana) and non-entomopathogenic fungi (Penicillium corylophilum and Fusarium oxysporum). In this study 60 engorged females of B. microplus were used, representing six treatment groups with 10 specimens each. Ticks were inoculated with aqueous suspension of conidia. There were two control groups: in the first one ticks were inoculated with Tween 80 0,1% aqueous solution (negative control), in the second one ticks were not inoculated (testimony group). Fungi suspension or Tween 80 solution were applied in the back part of the idiosoma of the tick. The hemolinfa samples were collected during the whole period of life of the specimens, beginning 24 hours after inoculation. The haemolymph samples were fixed in methanol and stained with Giemsa. In all studied periods, cells like pro-hemocytes, plasmatocytes, granulocytes, spherulocytes and oenocytoids were observed in the specimens of all groups. Prohemocytes, plasmatocytes and spherulocytes were the most numerous cells observed in the hemolinfa. Hemocytes were absent in the group inoculated with B. bassiana 72 hours after inoculation. After this period, specimens inoculated with entomopathogenic fungi were dead. The absence of cells suggests the immune-suppressor effect of the fungi on this tick species. It was not observed when ticks were treated with M. anisopliae due to accentuated mortality caused by this fungus species. The nonentomopathogenic fungi did not affect the life cycle of this tick, being quickly eliminated of the organism. It was suggested based on the absence of conidia during sampling. / O controle biol?gico do carrapato Boophilus microplus com a utiliza??o de Metarhizium anisopliae e Beauveria bassiana tem sido avaliado por diversos pesquisadores. A sele??o de cepas resistentes ? um mecanismo adotado pelos artr?podes para sobreviv?ncia da esp?cie e sua manuten??o no ambiente. Apesar de estar esclarecida a forma como o fungo penetra no hospedeiro e comprovada sua patogenicidade sobre diferentes fases de seu ciclo biol?gico, a sua resposta imune frente a estes agentes agressores necessita de maiores estudos. O presente trabalho teve como objetivo: identificar e quantificar os tipos celulares envolvidos na resposta imune celular de B. microplus inoculados com fungos entomopatog?nicos n?o entomopatog?nicos. Na experimenta??o foram utilizados 60 f?meas ingurgitadas de Boophilus microplus, representando seis tratamentos cada um contendo 10 esp?cimes. Para os grupos inoculados com fungos entomopatog?nicos foi utilizada a suspens?o aquosa dos fungos Metarhizium anisopliae (isolado Ma 959) e Beauveria bassiana (isolado Bb 986). Nos tratamentos com fungos n?o entomopatog?nicos, Penicillium corylophilum e Fusarium oxysporum, foram formados ainda um grupo testemunha (n?o recebeu inocula??o) e um grupo inoculado com solu??o de tween 80 a 0,1% em ?gua destilada est?ril, considerado controle negativo. Nos grupos dos tratamentos com suspens?o f?ngica ou solu??o a inocula??o foi feita na regi?o posterior do idiossoma do carrapato. As coletas de hemolinfa foram realizadas durante todo o per?odo de vida dos esp?cimes, tendo inicio 24 horas ap?s inocula??o. As amostras de hemolinfa foram fixadas com metanol e coradas com Giemsa. Em todos os per?odos estudados, tanto nos esp?cimes inoculados com fungos como nos controles, foram observados pr?-hem?citos, plasmat?citos, granul?citos, esferul?citos e oenocit?ides. Pr?-hem?citos, plasmat?citos e esferul?citos foram ?s c?lulas mais numerosas na hemolinfa. Foi observada a aus?ncia de hem?citos no grupo inoculado com B. bassiana 72 horas ap?s a inocula??o, como tamb?m a morte dos esp?cimes inoculados com fungos entomopatog?nicos a partir deste per?odo. A aus?ncia de c?lulas evid?ncia o efeito imunossupressor do fungo sobre os carrapatos estudados. Caracter?stica n?o observada para Metarhizium anisopliae, mesmo tendo provocado acentuada mortalidade dos carrapatos. Os fungos n?o entomopatog?nicos n?o afetaram de forma significativa o ciclo de vida destes carrapatos, sendo rapidamente eliminados do organismo.
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Avaliação do perfil da resposta celular observado em indivíduos da espécie Cebus apella expostos ao carcinógeno N-Metil-N-nitrosuréia (mnu) e tratados com o modificador da resposta imune canova®

FEIO, Danielle Cristinne Azevedo 19 April 2011 (has links)
Submitted by Hellen Luz (hellencrisluz@gmail.com) on 2017-09-19T18:15:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_. AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) / Rejected by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br), reason: Aguardar as orientações on 2017-10-10T16:49:34Z (GMT) / Submitted by Hellen Luz (hellencrisluz@gmail.com) on 2017-10-17T17:49:25Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-11-23T12:26:19Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-23T12:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AvaliacaoPerfilResposta.pdf: 1216290 bytes, checksum: aa6914fe760a75138524f60de03a8baa (MD5) Previous issue date: 2011-04-19 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Modificador da Resposta Imune Canova® (CA) é um medicamento homeopático indicado para pacientes com sistema imune deprimido, uma vez que este medicamento parece aumentar a imunidade inata e induzir uma resposta imune contra várias e severas condições patológicas, incluindo as neoplasias. Esse aumento da imunidade inata é devido a sua atuação na proliferação e na diferenciação de células hematopoéticas e na indução a diferenciação mononuclear em células da medula óssea. O composto químico N-Metil N-Nitrosuréia (MNU) é um poderoso agente carcinogênico alquilante capaz de ocasionar mutações pontuais, aberrações cromossômicas ou ainda metilação do DNA, que induzem o desequilíbrio no sistema de defesa da célula e, assim, interrompendo mecanismos relacionados a metabolismo celular. Este composto tem sido amplamente utilizado na indução de tumores de fins experimentais. Objetivo do presente trabalho é avaliar o padrão de resposta celular hematopoiética em primatas da espécie Cebus apella expostos ao carcinógeno N-Metil-N-Nitrosuréia (MNU) e submetidos ao tratamento com o Modificador da Resposta Imune Canova®, através da análise de parâmetros hematológicos, bioquímicos, imunes e do ciclo celular. Foram utilizados 13 (treze) animais adultos, da espécie Cebus apella divididos em cinco grupos principais: o controle (negativo e positivo) e o experimental (composto por três subgrupos). O primeiro grupo experimental recebeu o MNU durante trinta e cinco dias, o segundo recebeu o tratamento com o Canova durante três dias, e o terceiro recebeu o MNU durante 35 dias e ao final desse período recebeu tratamento com o Canova durante três dias. A avaliação da reposta celular imune foi através de imunufenotipagem (CD4, CD8, CD3, T, B, NK) e do hemograma completo, a função hepática e renal através análise bioquímica (ALT, AST, GGT, ureia e creatinina) e a avaliação da cinética do ciclo celular por citometria de fluxo. Na análise dos parâmetros hematológicos os valores de hematócrito, hemácias e hemoglobina dos grupos controle positivo apresentaram-se significativamente menores, quando comparados aos grupos controle negativo, demonstrando um quadro de anemia, já o aumento de células da linhagem branca nesses grupos provavelmente é devido à resposta inflamatória do animal frente ao provável processo neoplásico. O aumento dos leucócitos também foi observado nos grupos experimentais tratados com o CA, fato este explicado pela ação do medicamento, que atua como um modificador da resposta imune. Apesar de já ter sido relatado que CA pode atuar aumentando o número de neutrófilos, no presente estudo não observamos esta ação do medicamento, provavelmente pelo curto período de tempo do tratamento. Os monócitos apresentaram-se diminuído no grupo tratado com o MNU e aumentado nos grupos que receberam CA provavelmente pelo medicamento atuar na ativação de macrófagos via estimulação da de monócitos. Na análise bioquímica, a uréia e a creatinina apresentaram-se alteradas nos grupos que receberam o MNU de forma aguda, estas alterações, bem como as encontradas na análise de enzimas hepáticas, podem ser associadas com os sintomas típicos da intoxicação por drogas carcinogênicas. Na análise da cinética do ciclo celular os animais tratados com CA, houve um aumento significativo de células nas fases G0-G1 bem como a porcentagem de células em estágio de proliferação celular (fases G2-M). Concluímos que CA minimizou a toxicidade do MNU em certos parâmetros hematológicos e bioquímicos, podemos observar a sua habilidade parcialmente modificadora da resposta imune, por aumentar a contagem de leucócitos, porém sem alterar o padrão de marcadores imunológicos. Desta forma CA então é capaz de restaurar alguns componentes do sistema hematopoiético, e pode atuar como adjuvante em tratamentos de quimioterapia. / The Immune response modifier Canova® (CA) is a homeopathic drug indicated for patients with a depressed immune system, once this medicine appears to increase the innate immunity and induce an immune response against multiple and severe pathological conditions, including Neoplasms. This increase of innate immunity is due to its involvement in the proliferation and differentiation of hematopoietic cells and mononuclear differentiation induction in bone marrow cells. The chemical compound N-Methyl-N-Nitrosourea (MNU) is a alkylating agent powerful carcinogenic able to cause mutations, chromosomal aberrations and DNA methylation, that induce the imbalance in the defense system of the cell and thus stop mechanisms related to cellular metabolism. This compound has been widely used in the induction of experimental tumors. The goal of this work is to assess the pattern of hematopoietic cell response in Cebus apella primate species exposed to carcinogenic N-Methyl-N-Nitrosourea (MNU) and subjected to the treatment with the Immune response modifier Canova®, through the analysis of biochemical, haematological, immune and cell cycle. We had used 13 (thirteen) adult animals of the species Cebus apella divided into five main groups: the control (negative and positive) and experimental (composed of three subgroups). The first experimental group received the MNU during thirty-five days, the second received treatment with Canova during three days, and the third received the MNU during 35 days and the end of this period received treatment with Canova during three days. Evaluation of cellular immune response was through immunophenotyping (CD3, CD4, CD8, T, B, NK) and complete blood count, liver and kidney function through biochemical analysis (ALT, AST, GGT, urea and creatinine) and kinetic evaluation of cell cycle by flow cytometry. Analysis of haematological values of hemoglobin, hematocrit and red blood cells of positive control groups performed significantly lower when compared to the negative control groups, demonstrating an anemia, while the increased white lineage cells in these groups is probably due to the animal's inflammatory response to neoplastic process. The increase of leukocytes has also been observed in experimental groups treated with the CA, a fact explained by the action of this drug, which acts as a modifier of immune response. Although it has been reported that CA can act by increasing the number of neutrophils, in this study we did not observe this action of the medicinal product, probably by the short time of treatment. Monocytes were decreased in the group treated with MNU and risen in groups that received CA probably by drug act in the activation of macrophages via stimulation of monocytes. In biochemical analysis, urea and creatinine were changed in the groups that received the MNU acutely, these changes, as well as those found in the analysis of liver enzymes, can be associated with typical symptoms of poisoning by carcinogenic drugs. Analysis of cell cycle kinetics of animals treated with CA, there had been a significant increase in cell G0-G1 as well as the percentage of cells in cellular proliferation stage (stageG2-M). We found that CA had minimized the toxicity of the MNU in certain haematological and biochemical, we had observed their partially skill to modify immune response, as improve white blood cell count, but without changing the pattern of immunological markers. Then CA is able to restore some hematopoietic system components and can act as an adjuvant in chemotherapy treatments.
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Papel da resposta imune celular da obesidade na progressão do carcinoma mamário experimental

Evangelista, Gabriela Coeli Menezes 01 March 2018 (has links)
Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-08-16T11:58:32Z No. of bitstreams: 1 gabrielacoelimenezesevangelista.pdf: 2720259 bytes, checksum: e0fbd85772c3ba4fa8fdd3c1ee5c09b0 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-16T11:59:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gabrielacoelimenezesevangelista.pdf: 2720259 bytes, checksum: e0fbd85772c3ba4fa8fdd3c1ee5c09b0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-16T11:59:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gabrielacoelimenezesevangelista.pdf: 2720259 bytes, checksum: e0fbd85772c3ba4fa8fdd3c1ee5c09b0 (MD5) Previous issue date: 2018-02-15 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Atualmente a obesidade é um problema de saúde pública, que afetar todas as idades, classes sociais e regiões do planeta. Segundo dados da OMS de 2016, 13% da população adulta é considerada obesa. No Brasil 12,4% dos homens e 16,9% das mulheres acima de 18 anos foram considerados obesos, em 2011, pelo Ministério da Saúde. O câncer de mama é o único câncer diagnosticado em todas as regiões do planeta e, segundo a Sociedade Americana de Câncer, em 2012, o câncer de mama foi responsável por 25% dos novos casos e matou mais de meio milhão de mulheres. As brasileiras também sofrem com o tumor de mama que é o mais diagnosticado no Brasil, segundo dados de 2016 do INCA. A obesidade duplica a chance de desenvolver câncer de mama e isso está relacionado à inflamação crônica de baixo grau instaurada pelo acúmulo de gordura que recruta células inflamatórias secretoras de citocinas, quimiocinas e fatores de crescimento, aumentando a inflamação. Nesse contexto as células mamárias malignas se apropriam dessa inflamação e seus mediadores para promover sua sobrevivência, proliferação, disseminação e metástase. Para identificarmos o papel da obesidade no tumor mamário, utilizamos o modelo experimental de câncer de mama murino 4T1 em animais Balb/c fêmeas alimentadas por 16 semanas com dieta padrão ou dieta hiperlipídica (60% das quilocalorias são lipídeos). Cada animal foi pesado semanalmente e o consumo médio diario de ração foi calculado. Ao final das 16 semanas mais os 21 dias de injeção do tumor, os animais foram eutanasiados para a quantificação do peso das gorduras perigonadais e retroperitoniais e remoção dos linfonodos inguinais drenantes do tumor para realização da citometria de fluxo. Os resultados indicaram que os animais alimentados com HFD, ganharam mais peso mesmo consumindo menos ração em relação, aos animais alimentados com dieta padrão. Esse ganho de peso refletiu em uma maior adiposidade nos obesos, devido ao maior peso das gorduras perigonadais e retroperitoniais. Além disso, os animais obesos apresentaram um maior Índide de Lee em relação aos controles. Nosso trabalho indicou uma queda generalizada da resposta imune contra tumor, pois observamos uma diminuição no número de células totais dos linfonodos drenantes do tumor, refletindo num menor número de células dendríticas e macrófagos, que apresentaram menor ativação com baixas expressões dos co-estimuladores CD80 e CD86; e numa redução da resposta adaptativa, tanto no número de células efetoras como linfócitos auxiliares e citotóxicos quanto no número de células reguladoras como os linfócitos Breg e Treg. Além disso, também observamos um desbalanço entre a citocina inflamatória IFN-γ e a citocina anti-inflamatória IL-10, produzidas por linfócitos CD4+ e CD8+. Em conjunto, nossos dados nos permitem concluir que a obesidade afeta diretamente o sistema imune através da diminuição da resposta celular contra o tumor como um todo, essa regulação pode ser devido a modulação da hematopoiese e indução de células MDSC. / Nowadays the obesity is a public health issue capable to affect all ages, social classes, and regions of the globe. According to data from Word Health Organization in 2014, 13% of the adult population is considered obese. In Brazil the number are also startling: in the adult population 12.4% of the men and 16.9% of women already was considered obese in 2011 by Ministry of Healthy. Breast cancer is the only one diagnosed in all regions of the planet and, according to American Society of Cancer, in 2012 this type of cancer was responsible for 25% of the new cases and killed more than half millions of women. The Brazilian women undergo by breast cancer, which is the most commonly diagnosed among Brazilian women, according data from Nacional Institute of Cancer in 2015. Is certain that the obesity duplicates the chances to develop breast cancer and it is correlated to the low grade chronic inflammation established by the fat accumulation which recruit inflammatory cells that secrete cytokine, chemokines, and growth factors, increasing the inflammation. In this context the malignant mammalian cells get hold of this inflammation and its mediators to promote its own survival, proliferation, dissemination, and metastasis. To identify the role of the obesity in malignant breast tumor, we utilized in this project the experimental murine model of breast cancer 4T1 in animals Balb/c females feed for 16 weeks with the pattern diet or high-fat diet which 60% of kilocalories coming from lipids. Each animal was weekly weighed and the individual average intake was calculated. At the end of the 16 weeks more 21 tumor days after injection, the animals were euthanized for removal of the perigonadal and retroperitoneal fat-pad and also for the removal of the draining inguinal lymph nodes of the tumor to flow cytometry analysis. The results indicate that the animals feed with HFD, had weight gain even eating less than the animals feed by control diet. This gain reflected in a major adiposity in obese animals due to higher weight of the perigonadal and retroperitoneal fat-pad. Moreover, the obese animals had a higher Lee Index on comparison of the controls animals. Our work indicated a general decrease in the immune response against the tumor because was observed a decay of the number of the total cells of the tumor lymph nodes drainage, which reflected a low number of macrophages and dendritic cells, which also presents a lower activation with low expression of co-stimulators CD80 and CD86; and a decrease in the number of cells from adaptive response effector and in regulator cells like lymphocytes Breg and Treg. In addition, was also observed an unbalancing between the inflammatory cytokine IFNv and the anti-inflammatory cytokine IL-10, produced by lymphocytes CD4+ and CD8+. Together, this data allowed us to conclude that the obesity directly affect the immune system through the reduction of the cellular response against the tumor, this setting can be due to modulation of hematopoiesis and induction of MDSC.
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Avaliação do potencial anti-inflamatório do soro de leite caprino na colite experimental e na resposta celular

Araújo, Daline Fernandes de Souza 12 August 2016 (has links)
Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-09-06T13:04:43Z No. of bitstreams: 1 arquivoptotal.pdf: 2877352 bytes, checksum: 9e31e912377c0a68df303843bc0368bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-06T13:04:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivoptotal.pdf: 2877352 bytes, checksum: 9e31e912377c0a68df303843bc0368bc (MD5) Previous issue date: 2016-08-12 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Inflammatory Bowel Disease (IBD) is characterized as an uncontrolled chronic inflammation of the intestinal mucosa and mainly includes two pathologies: Crohn's disease and ulcerative colitis. Accordingly, the local immune system remains compromised and the intestine intensely inflamed, due to an inability of decreasing inflammatory responses. Complementary and alternative medicines have been of great interest for the treatment of IBD, with the aim to improve the side effects of commonly used drugs. Goat whey present oligosaccharides and conjugated linoleic acid with different functional properties, but also an effect on intestinal incipient modulation. This thesis was divided into two studies: the first being goat whey ability in preventing intestinal inflammation in an inflammation model induced by acetic acid in rats, evaluated by comparing it with a standard sulfasalazine medicine used in the treatment of DII; in the second study, the anti-inflammatory effect of the whey colitis model induced by 2,4-dinitrobenzenesulfonic acid in mice. In the first, the pre-treatment with goat whey (1, 2 and 4 g. Kg-1) and sulfasalazine (250 mg. Kg-1) improved the inflammatory markers (myeloperoxidase, leukotriene B4 and pro-inflammatory cytokines) and oxidative stress (total content of glutathione and malondialdehyde) in colonic tissue of rats. Histological and immunohistochemical evaluation of colonic tissue showed cytoarchitecture preservation and reduction in COX-2 expression, respectively, as well as iNOS and MMP-9 in conjunction with an increase in SOCs-1 expression. The results suggest that goat whey exerted a preventive effect against intestinal damage induced by acetic acid, showing similar efficacy to sulfasalazine, and thus is a potential treatment for human inflammatory bowel disease. In the second model, we used the best dose of the first to conduct different analyses. In the second model with a different inducing agent of IBD was used to dose goat whey that Showed better results in improving of intestinal inflammation the previous study. This study, there was also an improvement of intestinal damage in the group of animals, confirmed by evaluating colonic inflammation and colonic gene expression of pro-inflammatory markers IL-6, IL-1β, IL-17,TNF-α, iNOS, ICAM- 1, MMP-9, regulators of intestinal epithelial integrity (MUC-2, MUC-3, occludin and ZO-1) and supressor of cytokine signaling (SOCS-1). The anti-inflammatory properties of the goat whey were demonstrated by an in vitro study on murine macrofhages line Raw 264 and CMT-93 cells derived from murine rectum carcinoma which promoted a significant reduction in nitric oxide production and IL-6. Thus, goat whey shown as an innovative product in the prevention and control of intestinal inflammation in murine models. / A Doença Inflamatória Intestinal (DII), caracterizada por apresentar uma inflamação crônica não controlada na mucosa intestinal, engloba, principalmente, duas patologias: a Colite Ulcerativa e a Doença de Crohn. Nestas, o sistema imunológico local permanece cronicamente ativado e o intestino intensamente inflamado, devido a uma incapacidade do organismo para a diminuição das respostas inflamatórias. Terapias alternativas e complementares tem sido de grande interesse para o tratamento das DII, com o objetivo de melhorar os efeitos secundários dos fármacos comumente utilizados. O soro de leite caprino apresenta na sua composição oligossacarídeos e ácido linoleico conjugado com propriedades funcionais, mas ainda insipiente como efeito na modulação intestinal. A presente tese foi dividida em dois estudos: no primeiro, foi avaliada a capacidade do soro de leite de cabra em prevenir a inflamação intestinal no modelo de inflamação induzida por ácido acético em ratos, comparando com um fármaco padrão, a sulfassalazina utilizada no tratamento da DII; no segundo, foi estudado o efeito anti-inflamatório do soro de leite no modelo de colite induzido por ácido 2,4-dinitrobenzeno sulfônico em camundongos. O pré-tratamento com soro de leite caprino (1, 2 e 4 g. Kg-1) e sulfassalazina (250 mg. Kg-1) melhorou os marcadores inflamatórios (mieloperoxidase, leucotrieno B4 e citocinas pró-inflamatórias) e de estresse oxidativo (conteúdo total de glutationa e malondialdeido) no tecido colônico dos animais. A avaliação histológica e imunohistoquímica do tecido colônico revelaram, respectivamente, uma preservação da citoarquitetura e redução na expressão de COX-2, iNOS e MMP-9, em conjunto com um aumento da expressão de SOCs-1. Os resultados sugerem que o soro caprino exerceu um efeito preventivo contra o dano intestinal induzida por ácido acético, mostrando uma eficácia semelhante à mostrada por sulfassalazina, sendo, portanto, um potencial tratamento para a doença inflamatória intestinal humana. No segundo modelo, com diferente agente indutor da DII, utilizou-se a dose de soro de leite caprino que mostrou melhor resultado na melhora da inflamação do estudo anterior. Neste estudo, também houve uma melhora do dano intestinal no grupo dos animais, confirmado pela avaliação do processo inflamatório colônico, e expressão gênica do cólon dos marcadores pró-inflamatórios IL-6, IL-1β, IL-17, TNF-α, iNOS, ICAM- 1, MMP-9, reguladores da integridade intestinal epitelial (MUC-2 e MUC-3, ocludina e ZO-1) e supressor de sinalização de citocinas (SOCS-1). As propriedades anti-inflamatórias do soro foram evidenciadas no estudo in vitro em células Raw 264 de macrófagos de murinos e CMT-93 derivada de células de carcinoma retal de murinos, em que promoveu uma redução significativa da produção de óxido nítrico e IL-6. Dessa forma, o soro de leite caprino, mostra-se como um produto inovador na prevenção e controle inflamação intestinal em modelos murinos.

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