Orientador: Jose Antonio Rocha Gontijo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T03:50:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bento_LedaMarciaAraujo_D.pdf: 18154421 bytes, checksum: cb3c676e5986d07c3462c4afdbcc4d15 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Estudos em animais demonstram que a acidose metabólica promove muitas mudanças morfológicas e bioquímicas nos rins, que estão intimamente associadas com a hipertrofia do órgão Confirmamos que a acidose metabólica crónica causada pela ingestão de cloreto de amónia (NH4Cl), promove a hipertrofia do órgão e também uma diminuição da reabsorção de água e sais pelos rins. Aventamos a hipótese que esses são processos que competem pela energia disponível pelas células tubulares Como a mitocòndria tem sido implicada em uma variedade de processos metabólicos, nós estudamos o comportamento das mitocôndrias isoladas de rins de ratos tratados com NH4Cl As mitocôndrias de rim de ratos (MRR) acidóticos apresentaram uma diminuição de aproximadamente 25% da eficiência da respiração, através do controle respiratório Usando o mesmo substrato (succinato), nós achamos a relação ADP/O significativamente menor nos animais acidóticos quando comparados aos controles Em concordância com esses resultados, o potencial transmembrana mitocondrial, apresentou o tempo de fosforilação aumentado nesses animais, determinado pelo método da safranina. Nenhuma diferença significativa foi observada no potencial em ambas as mitocôndrias. Interessantemente, na determinação do transporte de cálcio, verificamos uma captação inicial mais rápida e maior nas MRR acidóticos, quando comparadas aos controles, mantida equilibrada por mais tempo com a adição do inibidor do poro de transição de permeabilidade mitocondrial, a ciclosporina A (CsA). Não foi observada nenhuma diferença significativa na liberação do cálcio após adição de vermelho de Rutênio (RR) e cloreto de sódio (NaCl). Nós também analisamos todos esses parâmetros em mitocôndrias de fígado de rato, para saber se esse efeito da acidose é particular do rim, ou outros órgãos também apresentam. Não verificamos alterações nas funções mitocondriais, induzidas pela acidose. durante dois dias de tratamento com NH4Cl, nessas mitocôndrias Para sabermos se essas alterações nas mitocôndrias renais estariam relacionadas à proteína desacopladora (UCP), utilizamos em nossos experimentos de controle respiratório inibidores da atividade dessas proteínas CAT, GDP e BSA Observamos indiretamente que a UCP esta ativada nas MRR acidóticos, respondendo o desacoplamento observado na situação de acidose nessas mitocôndrias / Abstract: Studies in animals have shown that metabolic acidosis causes several morphologic and biochemical changes in kidney, which are ultimately associated with organ hypertrophy We have previously shown that chronic metabolic acidosis caused by feeding NH4Cl lead to nephron hypertrophy and to a decreased water-salt reabsortion by the kidneys Since mitochondria have been implicated in a variety of metabolic disorders, we examined energy linked functions in isolated mitochondria from rat kidneys with chronic metabolic acidosis induced by NH4Cl Mitochondria from acidotic rats presented resting respiration supported by succinate oxidation 25% slower when compared to control mitochondria Using the same substrate we found an ADP/O ratio of 1,4 in control and 1,1 in isolated mitochondria from acidotic rats. Accordingly, the transient decrease in ?? that occurs during ADP phosphorylation was much larger in mitochondria from acidotic rat kidneys as evidenced by the safranine method No significant difference in ?? could be detected in both types of mitochondria using this method. Interestingly, determination of Ca2+ transport showed a faster rate of initial Ca2+ up take by mitochondria from acidotics and a lower concentration of extramitochondrial Ca2+ under steady state conditions (Ca2+ set point) by these mitochondria compared to control mitochondria In contrast, no significant differences could be detected in rates of Na+ or ruthenium red induced Ca2+ efflux. The data provided evidence that: succinate oxidation is inhibited in mitochondria isolated from acidotic rats while the Ca2+ influx pathway is activated in these mitochondria / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Orientador: Marcelo Lopes de Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T03:07:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cotrim_CristianoAugustoCalderaro_M.pdf: 1654250 bytes, checksum: 1d22b5f31344acd1edcaf4646caac447 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Tratamento laparoscópico da linfocele pós-transplante renal. Introdução: O tratamento cirúrgico da linfocele sintomática pós-transplante renal consiste na criação de uma fenestração entre a cavidade abdominal e a linfocele para permitir a drenagem eficiente da linfa. Objetivo: Avaliar os resultados do tratamento cirúrgico laparoscópico da linfocele pós-transplante renal quanto ao índice de sucesso e recidiva. Pacientes e Métodos: Foram avaliados os dados de 25 pacientes que desenvolveram linfocele sintomática pós-transplante renal. Resultados: Entre 1996 e 2008, 991 pacientes foram transplantados na Universidade Estadual de Campinas, São Paulo, Brasil (523 doadores falecidos, 468 doadores vivos). Em 25 pacientes (2,52%) desenvolveu-se linfocele sintomática e a drenagem laparoscópica foi executada. As indicações para a drenagem cirúrgica incluíram disfunção do enxerto (84%), sintomas locais (16%) ou ambos (32%). A média de tempo de diagnóstico da linfocele após o transplante foi de 14,2±6 semanas. A média de internação foi de 1,5±0,2 dias. Dois pacientes (8%) desenvolveram complicações pós-operatórias (uma lesão ureteral e uma hérnia incisional) requerendo tratamento cirúrgico. Depois de uma média de seguimento de 36,2 meses, um paciente apresentou uma recorrência sintomática. Conclusão: A técnica laparoscópica foi efetiva para o tratamento da linfocele pós-transplante renal e pode ser considerada como método de escolha para o seu tratamento cirúrgico / Abstract: Laparoscopic treatment of lymphoceles after kidney transplantation Introduction: The surgical treatment of symptomatic lymphocele after kidney transplantation consists in the creation of a fenestration between the lymphocele and the abdominal cavity to allow efficient drainage of lymph. Objective: To evaluate the results of laparoscopic surgical treatment of lymphocele after kidney transplantation considering the rate of success and recurrence. Materials and Methods: The records of 25 patients who underwent surgical treatment for a symptomatic lymphocele following kidney transplantation were retrospectively reviewed. Results: Between 1996 and 2008, 991 patients received a kidney transplant at the Campinas State University, São Paulo, Brazil (523 cadaveric, 468 living). In 25 patients (2.52%) a symptomatic lymphocele developed and laparoscopic drainage was completed. The indications for surgical drainage were graft dysfunction (84%), local symptoms (16%) or both (32%). The mean time to surgical therapy was 14.2 weeks. Mean hospital stay was 1.5±0.2 days. The average time of appearance of lymphocele after transplantation was 14.2 ± 6 weeks. Postoperative complications occurred in only two patients (8%) (one ureteral injure and one incisional hernia) and required reoperation. After a mean follow up of 36.2 months, 1 patient had a symptomatic recurrence. Conclusions: Laparoscopic technique is effective and can be considered the method of choice to treat lymphocele following kidney transplantation / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

Foram realizadas mensurações dos rins direito e esquerdo, bem como, de carcaças de bovinos Nelore, inteiros e castrados. As médias gerais dos grupos e os respectivos desvio padrão para as mensurações renais foram: comprimento do rim direito 16,85 &plusmn; 1,10 cm; comprimento do rim esquerdo 16,20 &plusmn; 1,15 cm. As larguras dos rins direito e esquerdo apresentaram médias e desvio padrão iguais a 9,20 &plusmn; 0,80 cm e 9,35 &plusmn; 0,90 cm, respectivamente. Para a variável peso dos rins direito e esquerdo, as médias e desvio padrão foram, respectivamente, de 347,90 Kg &plusmn; 32,55 Kg e 343,25 Kg &plusmn; 32,20 Kg. O número de lobos observados nos rins direito e esquerdo obtiveram médias e desvio padrão de 16,30 &plusmn; 4,50 e 15,90 &plusmn; 3,90, respectivamente. Para as variáveis de carcaça dos grupos envolvidos as médias e respectivos desvios padrão foram: para peso das hemicarcaças direita e esquerda 137,00 &plusmn; 8,00 e 141,10 &plusmn; 8,00 Kg; peso total da carcaça 278,10 &plusmn; 15,90 Kg; rendimento de carcaça 55,80 &plusmn; 1,30%; espessura de gordura 6,30 &plusmn; 2,6 cm; comprimento de carcaça 1,28 &plusmn; 0,03 m. Para comparação das diferentes mensurações, os animais foram divididos em dois grupos (inteiros e castrados). Diferenças significativas (P < 0,01) foram observadas para quase todas as variáveis de carcaça exceto para comprimento da mesma. Para as variáveis de rim, resultados significativos foram observados para largura de rim direito (P < 0,01), peso de rim direito, peso de rim esquerdo e peso total dos rins (P < 0,05). As estimativas de correlações entre todas as características foram de baixa magnitude, indicando ausência de associação entre as diferentes medidas. / Measurement of the right and left kidneys were accomplished, non castrated and castrated carcasses of bovine Nelore. The averages managed of the groups and the respective deviation pattern for the renal measurement were: length of the right kidney 16.85 ± 1.10 cm, respectively; length of the left kidney 16.20 ± 1.15 cm. The widths of the kidneys right and left presented averages and standard deviation to 9.20 ± 0.80 cm and 9.35 ± 0.90 cm, respectively. For the variable weight of the kidneys right and left, the averages and standard deviation were, respectively, of 347.90 Kg ± 32.55 Kg and 343.25 Kg ± 32.20 Kg. The number of lobes observed in the kidneys right and left obtained averages and standard deviation of 16.30 ± 4.50 and 15.90 ± 3.90, respectively. The averages and respective deviation pattern of variables of the involved groups for carcass were: for weight of right and left hemicarcass 137.00 ± 8.00 and 141.10 ± 8.00 Kg total weight of the carcass 278.10 ± 15.90 Kg; carcass exploitation 55.80 ± 1.30%; fat thickness 6.30 ± 2.6 cm, carcass length 1.28 ± 0.03 m. For comparison of the different measurement, the animals were divided in two groups (non castrated and castrated). Significant differences (P <0,01) were observed for almost all the carcass variables except for length. For kidney variables, significant results were observed for width of right kidney (P <0,01), weight of right kidney, weight of left kidney and total weight of kidneys (P <0,05). The estimates of correlations among all the characteristics were of low magnitude, indicating association absence among the different measures.

A isquemia e reperfusão (IR) é a principal causa de insuficiência renal aguda. Evidências mostram a participação de linfócitos T e células dendríticas (DC) na lesão por IR. Entretanto, os mecanismos envolvidos não estão claros. A enzima heme oxigenase (HO)-1 está relacionada à diminuição de respostas inflamatórias. Neste trabalho, investigamos a participação de linfócitos T CD4+ e DC na proteção da lesão por IR induzida pela HO-1. Injetamos em camundongos um indutor de HO-1 (Hemin), e realizamos a IR. Avaliamos a lesão pela uréia e creatinina no soro, a expressão de citocinas por RT-PCR, nível de proteínas por bioplex e perfil celular por FACS. Observamos que a HO-1 protegeu da lesão por IR. A diminuição de INFg com a HO-1 sugeriu uma menor ativação de linfócitos T. No entanto, a transferência de células CD4+ tratadas com Hemin não apresentou diferença. Vimos que a HO-1 alterou o fenótipo das DC após IR e suprimiu a produção de TNFa pelas mesmas. Concluímos que a proteção pela HO-1 é capaz de modular a resposta inflamatória de DC, diminuindo o TNFa. / The ischemia and reperfusion (IR) is the main acute kidney injury. Evidences have shown the role of CD4+ T cells and dendritic cells (DC) in the IR injury. However, the mechanisms involved in the participation of these cells are not clear. The heme oxygenase (HO)-1 enzyme is associated to decrease in inflammatory responses. In this work, we investigated the role of CD4+ T cells and DC in renal injury protection induced by HO-1. We injected in mice a HO-1 inducer (Hemin), and we did the IR. Renal injury was evaluated by serum levels of urea and creatinine, cytokines expression by RT-PCR, proteins level by bioplex and cell profile by FACS. We observed that HO-1 lead to IR injury protection. The IFNg decrease with HO-1 suggested less T cells activation. However, transfer of hemin treated CD4+ cells did not differ from the other group. We observed that HO-1 altered DC phenotype after IR and suppressed TNFa production by these cells. We concluded that the protection by HO-1is able to modulate DC inflammatory response, diminishing TNFa.

A lesão renal induzida pela I/R é a principal causa de IRA nos rins nativos e nos rins transplantados e estudos enfatizam a participação de células inflamatórias na sua patogênese, através da caracterização de lesão endotelial, infiltração leucocitária e a geração de mediadores inflamatórios pelas células epiteliais tubulares. Evidências recentes mostram que as células T CD4+ exercem um papel fundamental como mediadoras da agressão renal na I/R, ressaltando-se o envolvimento do paradigma Th1/Th2 como um possível mecanismo efetor. O presente estudo foi realizado com o objetivo de estudar a participação de algumas citocinas Th1 e Th2 no desenvolvimento da lesão de I/R renal. Para tanto, nós nos propusemos a desenvolver um modelo experimental de I/R renal em camundongos deficientes em IL-12, IFN-, e duplo deficientes em IFN- e IL-12 (representando defeito da via de ativação Th1), camundongos deficientes em IL-4 e IL-10 (representando defeito da via de ativação Th2) e duplo deficientes em IL-10 e IL-12, tendo como controles camundongos normais (selvagens). Todos os animais foram submetidos a uma lesão de I/R por ligadura reversível do pedículo renal por 45 minutos seguidos de 24 horas de reperfusão. Após a indução da isquemia, nós analisamos as alterações funcionais (creatinina e uréia por método bioquímico colorimétrico) e morfológicas renais (morfometria renal), além de investigar a expressão molecular de HO-1 (um gene de proteção tecidual), de t-bet (um transcrito envolvido na diferenciação Th1), de GATA-3 (um transcrito envolvido na diferenciação Th2), citocina pró-inflamatória IL-6 e de uma quimiocina pró-inflamatória MCP-1, visando caracterizar a influência da polarização Th1/Th2 da resposta imune na lesão renal induzida pela I/R. Nós mostramos que os camundongos deficientes em IL-4, IFN-, IL-10/IL-12 e IL-10 apresentaram uma disfunção renal importante, caracterizada por altos níveis séricos de creatinina e uréia e por um alto grau de agressão morfológica renal, avaliada pela percentagem de área de necrose tubular. Todos estes resultados foram significativamente mais acentuados que obtidos nos camundongos deficientes em IL-12 e IFN-/IL-12, sendo comparáveis aos animais selvagens. Por outro lado, a capacidade de reparação renal, medida pela percentagem de área de regeneração tubular, foi mais precoce nos camundongos deficientes em IFN-, quando comparada com os camundongos deficientes em IL-12 e IFN-/IL-12. A análise molecular quantitativa, utilizando-se o PCR em tempo real mostrou uma expressão significantimente maior de RNAm de HO-1, IL-6 MCP-1 e do fator transcricional pata Th2 (GATA-3) nos camundongos deficientes em IL-4, IFN-, IL-10/IL-12 e IL-10, em comparação com os camundongos deficientes em IL-12, IFN-/IL-12 que apresentaram baixa expressão do fator transcricional para Th1 (T-bet), em 24 horas após a I/R renal. Quando fomos fazer a transferência adotiva de médula óssea de animais deficientes em IL-12 e IL-4 para animais selvagens previamente com depleção subletal celular, esses animais vieram apresentar resultados semelhantes aos animais deficientes em IL-12 e IL-4, onde os animais selvagens reconstituídos com medula óssea dos animais IL-12 apresentaram menor níveis de uréia sérica e menor expressão de RNAm IL-6, enquanto que os animais selvagens recontituídos com medula óssea dos animais IL-4 apresentaram maior níveis de uréia sérica e maior expressão de RNAm IL-6, esses dados comprovam que realmente a citocina IL-12 parece ser a principal citocina envolvida no processo inflamatório desencadeado pela lesão de isquemia e reperfusão renal. Tais achados favorecem a hipótese dos efeitos deletérios das células com per_l Th1 e o papel protetor das células Th2 na lesão isquêmica renal. Estes novos episódios podem fornecer a base para uma melhor compreensão fisiopatológicos, bem como para o desenvolvimento de métodos preventivos e terapêuticos para a insuficiência renal aguda isquêmica. / Renal ischemia/reperfusion injury (I/R) is the major cause of acute renal failure (ARF) in the native as well as in the transplanted kidneys, with a complex pathogenesis that involves many components of inflammatory response such as leukocyte infiltration and generation of inflammatory mediators by tubular cells. Recent evidences show a critical role of the CD4+ T cell, with the Th1/Th2 paradigm as a possible ejectors mechanism. The present study has the objective to investigate the participation of some main Th1 and Th2 cytokines in the development of the renal of I/R. For that, we developed an experimental model of renal I/R in deficient in IL-12, IFN-, double deficient IFN- and IL-12 (representing defect of the pathway Th1), IL-4 and IL-10 (representing defect of the pathway Th2) and in double deficient IL-10 and IL-12 knockout mice, having wild-type mice as controls. All animals were submitted to renal I/R by reversible ligation of the renal pedicles for 45 minutes followed by 24 hours of reperfusion. After induction of the ischemia, we analyzed renal function and morphometric histological analyzes. Furthermore, we quantified the expression of HO-1 (cytoprotection gene), t-bet (transcription factor involved in the differentiation Th1), GATA-3 (transcription factor involved in the differentiation Th2), and cytokine pro-inflammatory IL-6 and chemokine pro-inflammatory MCP-1, aiming to characterize the influence of Th1/Th2 polarization in the immune response driven by the renal I/R. We showed that the IL-4, IFN-, IL-10 and IL-10/IL-12-de_cient mice presented an important kidney dysfunction, characterized by higher levels serum creatinine and tubular necrosis, being comparable to the wild-type animals. The molecular analyses, utilizing the real-time PCR, showed a significantly higher expression of HO-1, IL-6, MCP-1 and transcription factor involved in the differentiation Th2 (GATA-3) in the in IL-4, IFN-, IL-10 and IL-10/IL-12-defficient mice, in comparison with the in IL-12, IFN-/IL-12-de_cient mice showed lower expression transcription factor involved in the differentiation Th1 (T-bet) . Moreover, the renal dysfunction seen in Th2-de_cient mice was followed by a higher expression of IL-6. When we make the transfer adoptive of bone marrow of animals deficient in IL-12 and IL-4 to wild animals previously with sublethal cell depletion, these animals produce similar results to animals deficient in IL-12 and IL-4, where the animals reconstituted wild animals with bone marrow IL-12 showed lower levels of serum urea and lower expression mRNA of IL-6, while the wild animals reconstituted with bone marrow of animals IL-4 showed higher levels of serum urea and greater expression of mRNA IL-6. These data show that really the cytokine IL-12 appears to be the main cytokine involved in the inflammatory process triggered by the injury of ischemia and reperfusion kidney. Such _ndings favor the hypothesis of the deleterious effects of Th1 cells with prole and the protective role of Th2 cells in ischemic renal injury. These novel insights may provide basis for the better pathophysiological understanding, as well as for development of preventive and therapeutic methods for the ischemic acute renal failure.

A leptospirose é uma zoonose de importância mundial, causada por leptospiras patogênicas. Aproximadamente 5 a 10% das infecções humanas cursam com a forma grave. A Doença de Weil é a forma mais comum de doença grave e pode apresentarse com duas formas de evolução, aguda progressiva monofásica ou de curso prolongado. A doença grave se caracteriza por uma combinação de hemorragia, mais comumente pulmonar, icterícia e insuficiência renal, com letalidade de 5 a 15%. O rim é um órgão muito acometido na Leptospirose. Clinicamente o envolvimento renal ocorre de 16 a 40%, com manifestações peculiares como poliúria, hipocalemia, e perda de sódio. A disfunção tubular renal, é característica da leptospirose forma grave, com envolvimento dos transportadores renais de sódio ao longo do néfron, levando às manifestações observadas. A terapêutica antimicrobiana é recomendada na Leptospirose, porém com controvérsias à sua indicação após o quarto dia de doença. Quando da instalação da lesão não haveria benefícios com a utilização de antibióticos. O tratamento pode diminuir a morbidade e letalidade, assim como interferir no envolvimento renal e na expressão dos transportadores renais de sódio. A patogênese pode estar relacionada a efeitos diretos da leptospira ou a resposta inflamatória assim como o estresse oxidativo. A utilização de antioxidantes, pode ser considerada como terapia adjuvante. Nós avaliamos a expressão no túbulo proximal do trocador Na+-H+ (NHE3) e na porção espessa da medula ascendente o cotransportador Na+-K+-2Cl- (NKCC2), no modelo de hamster com as duas formas de evolução de doença grave, mimetizando a doença de humanos realizados em dois experimentos. Os experimentos envolveram animais infectados não tratados e tratados com ampicilina associado ou não ao antioxidante, N-acetilcisteína. A presença de antígenos de Leptospira e a expressão dos transportadores foram avaliadas por imunohistoquímica, e o ácido tiobarbitúrico, marcador de estresse oxidativo, (TBARS) foi quantificado.Hamsters infectados, apresentaram altas quantidades de antígenos nos tecidos-alvo, enquanto que a expressão de ambos os transportadores apresentou-se diminuída. O tratamento com ampicilina esteve associado com mínima detecção ou ausência de antígenos, restabelecimento da expressão dos transportadores nos respectivos locais e redução dos níveis de TBARS. O tratamento precoce e tardio com ampicilina restabeleceu os defeitos tubulares na leptospirose forma grave em ambos experimentos, sem benefícios com a utilização da N-acetilcisteína. / Leptospirosis is a zoonosis of worldwide distribution. About 5-10% of all human infections presents with severe forms. Weil\'s syndrome, the most common presentation of severe forms of leptospirosis, may courses either as a single monophasic disease or as a disease with prolonged course, characterized by a combination of hemorrhage, particularly in the lung, renal failure, and jaundice, with fatality rates ranging from 5 to 15%. The kidney is an important target organ in leptospiral infection. Clinically, renal involvement in leptospirosis occurs in 16% to 40% of cases and is unique because of the atypical presentation of polyuria, hypokalemia, and sodium wasting, suggestive of a special form of tubular dysfunction related to the major renal sodium transporters expressed along the nephron. A wide range of antimicrobial therapy for leptospirosis was described and benefits have been disputed for cases with more than four days of clinical disease, because after a threshold of leptospiremia, the delayed use of antibiotics is unlikely to reduce fatality. Antimicrobial therapy is thought to interfere on fatality, renal involvement, and renal sodium transporters expression during severe disease. The pathogenesis may be related to direct effects of leptospiral compounds or inflammatory response due to oxidative stress. Antioxidant could be considered for adjunctive therapy.We evaluated the expression of proximal tubule type 3 Na+/H+ exchanger (NHE3) and thick ascending limb Na+-K+-2Cl- cotransporter (NKCC2) in infected non treated and treated hamsters reproducing the two forms of clinical human presentations of Weil\'s syndrome divided in two experiments. Animals were treated or not with ampicillin and/or N-acetyl-cysteine (NAC). Leptospiral antigen/s and expression of renal transporters were evaluated by immunohistochemistry, and serum thiobarbituric acid (TBARS) was quantified. Infected hamsters had high amounts of detectable leptospiral antigen/s in target tissues while renal expression of NHE3 and NKCC2 decreased. Ampicillin treatment was associated with minimal or no detection of leptospiral antigens, normal expression of NHE3 and NKCC2 transporters, and reduced levels of TBARS. Early and late ampicillin treatment rescued tubular defects in leptospirosis severe disease in both experiments, and there was no evidence of benefit from antioxidant therapy.

O transplante de órgãos é hoje uma opção de tratamento de várias doenças terminais. Apesar de todos os progressos no campo do transplante, o principal problema enfrentado ainda é a rejeição. As principais moléculas responsáveis pela resposta alogeneica e subsequente rejeição ao enxerto, são os antígenos leucocitários humanos (HLA, do inglês Human Leucocyte Antigens). Porém, existem evidências que anticorpos dirigidos a antígenos não-HLA estão associados com rejeição de transplantes. Neste estudo, foi investigada a presença de anticorpos anti-célula endotelial (AACE) em 11 pacientes que perderam seus rins transplantados devido à rejeição humoral irreversível e em 2 com perda por trombose de veia renal. A ausência de anticorpos anti-HLA contra o doador foi verificada antes do transplante, da rejeição e antes e depois da transplantectomia, através da realização de provas cruzadas usando as técnicas mais sensíveis. Anticorpos não-HLA presentes em nove eluatos reagiram com EAHy.926. Eluatos positivos e negativos contra linhagem EAHy.926 foram testados contra cortes histológicos de 6 rins sadios para detecção de quais estruturas renais são reconhecidas por esses anticorpos. A reação foi avaliada pelo método de imunofluorescência indireta. Dos 13 eluatos testados, 4 (isotipo IgG) e 5 (isotipo IgM) reagiram com forte fluorescência nos glomérulos e endotélio arterial, mas não foi verificada reação na cápsula de Bowman e no epitélio tubular. Não foi observado polimorfismo na reatividade dos eluatos. Em onclusão, verificamos que os anticorpos não-HLA têm um importante papel na rejeição humoral. Estes estão reconhecendo antígenos de um sistema provavelmente não-polimórfico nas células de endoteliais presentes, principalmente, nos capilares glomerulares. / The transplant of organs is today an option of treatment to several terminal diseases. In spite of all the progress in the field of the transplants, the rejection remains a problem to be solved. The main target molecules for the allogenic response and subsequent allograft rejection are the human leukocyte antigens (HLA). However, there are growing evidences that non-HLA antibodies are associated with transplant rejection. In this study it was investigated the presence of anti-endothelial cell antibodies (AECA) in 11 patients who had early lost their transplanted kidney by irreversible humoral rejection and in 2 ones from renal venal thrombosis. The absence of anti-HLA antibodies against the donor was verified by the negativity of crossmatches performed using the most sensitive assays, at the transplant, at the rejection, and before and after the transplantectomy Antibodies from 9 eluates bound to EAHy.926. Positive and negatives eluates were tested against frozen sections from 6 normal kidneys in order to define the structures to which they were reactive. The reactivity was identified by indirect immunofluorescence method. From 13 eluates evaluated, 4 (isotipe IgG) and 5 (isotipe IgM) reacted to the glomerulus and renal arterial endothelium with intense fluorescence but they did not react to the Bowmans capsule and tubular epithelium. No polymorphism was observed in eluates reactivity. In conclusion, we have shown that non-HLA antibodies may represent a cause of the humoral rejection. These antibodies are probably recognizing antigens of a nonpolymorphic system in endothelial cells present, mainly, in the glomerular capillaries.

Foram utilizados 10 eqüinos clinicamente sadios, machos, adultos, de diferentes raças, pesando entre 350 e 450 Kg, escolhidos aleatoriamente e divididos em dois grupos: em cinco animais foi realizada biópsia renal guiada por laparoscopia com agulha descartável do tipo tru-cut, e nos outros cinco através de pinça de biópsia laparoscópica de 5mm. Os procedimentos foram efetuados com os animais em posição quadrupedal, mediante sedação e analgesia, e bloqueio anestésico local em 2 pontos no flanco esquerdo, sendo um para introdução do trocarte e óptica, e outro para introdução da agulha ou pinça. Parâmetros clínicos e laboratoriais foram avaliados dois dias antes do procedimento e acompanhados nas três semanas subseqüentes, permitindo determinar as alterações decorrentes. As técnicas foram comparadas quanto à segurança, qualidade, tempo de execução e significância da amostra colhida. Durante o acompanhamento pós-operatório dos animais, não houve variação clínica e laboratorial significativa em ambos os grupos, porém, a análise histológica dos fragmentos demonstrou uma maior porcentagem de biópsias adequadas no grupo em que foi utilizada pinça laparoscópica. / Ten healthy adult male horses, of different breeds, weighing between 350 and 450kg were randomly chosen and divided into two groups of five animais each: in one group, laparoscopic guided renal biopsy was pertormed using tru-cut needles and in the other group using 5mm forceps. Procedures were carried out with animais in quadrupedal position, under sedation and analgesia and local anesthetic nerve block was made in two points on the left flank: one for the introduction of the trocar and optical system and one for the introduction of the needle or forceps. Laboratory and clinical parameters were evaluated two days prior to the proceeding and followed up in the subsequent three weeks in order to verify the resulting alterations. The techniques were compared as regards safety, quality, time for execution and significance of the sample obtained. During the post-surgery follow-up period, no significant clinical and laboratory alterations were observed in either group, although the histological analysis of the fragments a higher percentage of adequate biopsies in the group where Laparoscopic forceps were used.

Atualmente, os primatas de pequeno e médio porte, em especial os sagüis, têm grande destaque em estudos experimentais, pois são usados frequentemente como modelo para estudos comparativos de várias doenças em humanos, entretanto vários aspectos básicos de sua anatomia ainda estão por serem estudados. Com esta motivação, rins de 20 Callithrix jacchus da colônia do DPZ (Centro de Primatas da Alemanha), foram utilizados para sua caracterização morfométrica macro e microscópica, onde os parâmetros relativos à mensuração anatômica, comprimento, altura, largura, peso e volume dos rins foram estabelecidos, bem como a quantificação de glomérulos e mensuração da área glomerular, com a finalidade de se comparar a influência de fatores como simetria bilateral, sexo, idade e condição sanitária, nestes parâmetros. Com base nos resultados concluiu-se que todos os parâmetros mensurados não são influenciados pelo sexo ou pela simetria. Os rins dos animais com alteração nos exames apresentaram maior tamanho (comprimento, altura e largura), peso e volume, e também, maior área glomerular que os rins dos animais sadios. Nos animais mais jovens, o número de glomérulos quantificados foi maior e a área glomerular média foi menor, que em animais mais velhos. / Currently, the primates of small and medium size, especially the marmosets, have great prominence in experimental studies, they are often used as a model for comparative studies of various diseases in humans, but several basic aspects of their anatomy are still being studied. With this motivation, the kidneys of 20 Callithrix jacchus in the colony of DPZ (German Primate Center), were used to characterize their macroscopic and microscopic morphometry, where the parameters for anatomical measurements, length, height, width, weight and volume of the kidneys were established, as well as quantification of glomeruli and measurement of glomerular area in order to compare the influence of factors such as bilateral symmetry, sex, age and health condition in these parameters. Based on the results concluded that all measured parameters are not affected by sex or by symmetry. The kidneys of animals with changes in the examinations of larger size (length, width and height), weight and volume, and also a greater area than the glomerular kidney of healthy animals. In younger animals, the number of glomeruli was higher and the mean glomerular area was smaller than in older animals.

Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-05T12:42:56Z No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Evandilson de Barros.pdf: 4780358 bytes, checksum: 698c6820897c9bb3109fbdd77be31f38 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T12:42:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Evandilson de Barros.pdf: 4780358 bytes, checksum: 698c6820897c9bb3109fbdd77be31f38 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-08-31 / Abordagem percutânea renal é uma alternativa cirúrgica que minimiza a morbidade de uma variedade de procedimentos envolvidos na intervenção aberta, que requerem incisão de camadas musculares, levando ao maior tempo de permanência hospitalar e dor pós-operatória. Objetivo: Avaliar a eficácia, praticidade e segurança do dilatador coaxial metálico, utilizando sistema acoplado agulha-dilatadores-bainha, na confecção de nefrostomias para nefrolitotomia percutânea. Métodos: Foi realizado um estudo experimental randomizado, constituído por 50 pacientes do Sistema Único de Saúde (SUS), atendidos no ambulatório de urologia do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco, portadores de nefrolitíase com indicação cirúrgica de nefrolitotomia percutânea. Cinquenta pacientes foram randomizados em dois grupos: grupo 1 (padrão): pacientes com prontuários que terminavam em números pares; e grupo 2 (experimental): pacientes nos quais os prontuários terminavam em número ímpar. Aqueles do grupo 1 foram submetidos a NLP pela técnica convencional, utilizando os dilatadores sequenciais de Amplatz, os do grupo 2 foram submetidos ao procedimento utilizando os dilatadores coaxiais acoplados. Foram analisados e comparados: o sexo, IMC, Hb pré e Ht pré; o tempo utilizado na confecção de nefrostomia – intervalo entre a punção da pelve renal e introdução do nefroscópio, confirmando acesso ao sistema coletor renal; e o tempo de sangramento com relação à Hb e Ht apresentado no pré-operatório imediato, 24h do procedimento e na alta hospitalar. Resultados: Não houve diferença estatisticamente significante entre os dois grupos com relação ao sexo, IMC, Hb pré e Ht pré, podem ser considerados homogêneos para essas características. Com relação ao tempo de dilatação existe diferença estatisticamente significante entre os grupos (p<0,05), o tempo de dilatação do grupo experimental foi muito inferior ao grupo padrão. Foi identificado uma lesão de sistema coletor no grupo 1. No grupo 2, dilatador experimental, não foram identificados complicações maiores. A presença desta única lesão não tem significado estatístico para o presente estudo. Conclusão: O conjunto dilatador coaxial acoplado para utilização em cirurgias percutâneas renais é um aparelho seguro, de fácil confecção e manuseio, apresenta índices de efetividade e complicações semelhantes aos utilizados comercialmente.