Resumo

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-07-18T19:12:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO BBC Ficha Catalográfica (2).pdf: 840939 bytes, checksum: 6d2dc65dde65a9628f6f37027078a1bd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-18T19:12:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO BBC Ficha Catalográfica (2).pdf: 840939 bytes, checksum: 6d2dc65dde65a9628f6f37027078a1bd (MD5) Previous issue date: 2014-10-29 / FACEPE / O crescimento da expectativa de vida média da população mundial é um dos maiores desafios da saúde pública contemporânea e tem íntima relação com o aumento na prevalência de doenças neurodegenerativas. A doença de Parkinson (DP) é um distúrbio neurológico progressivo, ligado à degeneração de neurônios dopaminérgicos nigroestriatais, de causas multifatoriais. Os sintomas são relacionados principalmente às funções de coordenação motora e cognição. Evidências demonstram que alterações mitocondriais e elevados níveis de estresse oxidativo estão fortemente associados ao desenvolvimento da DP. No presente estudo, foi avaliado o efeito neuroprotetor do eugenol (EUG) sobre as alterações comportamentais e bioquímicas induzidas pela administração sistêmica de rotenona (modelo experimental da doença de Parkinson) em ratos Wistar. Inicialmente, foi avaliada a atividade antioxidante in vitro (AAIV) do EUG através do método de captura do radical livre DPPH. O ensaio de toxicidade aguda do EUG foi realizado conforme OECD 420 (2001). A avaliação comportamental, após indução da DP em ratos, foi feita através dos testes: Campo aberto (CA), Rota Rod (RR), Labirinto em cruz elevado (LCE) e Catalepsia (CP). Ao final dos testes comportamentais, foram mensurados os níveis séricos de corticosterona (NSC), através de ensaio imunoenzimático (ELISA). O EUG apresentou considerável AAIV (IC50= 32,189 μg/mL) comparado ao padrão BHT (IC50= 64,63 μg/mL). A dose letal mínima do EUG em camundongos foi superior a 2 g/kg. A administração subcutânea de rotenona (2,5 mg/kg por 5 dias) causou significativa perda de peso corporal, déficit motor (teste de RR), rigidez muscular e aumento do tempo de acinesia (teste de CP), elevação dos níveis de ansiedade (teste de CA) e comprometimento da memória (teste do LCE) comparado ao grupo controle (C). O pré-tratamento diário com EUG (37,5 mg/kg, v.o.), uma hora anterior à administração da toxina, promoveu menor perda de peso corporal, melhoramento no desempenho motor e cognitivo, bem como redução nos níveis de ansiedade, comparado ao controle negativo (N). Além disso, o grupo pré-tratado com EUG apresentou, de maneira geral, padrões comportamentais semelhantes, porém melhorados, em relação ao controle positivo (L), pré-tratados com levodopa (4 mg/kg, v.o.). A queda nos níveis de ansiedade foi reafirmada através dos resultados obtidos na análise bioquímica. Os NSCs do grupo N foram significativamente maiores comparados ao grupo C. Não houve diferença significativa nos NSCs entre os grupos C e pré-tratados com EUG; e ainda, foi observado menor NSC nos animais pré-tratados com EUG em relação ao grupo L. Os resultados sugerem potencial efeito neuroprotetor do EUG frente à toxicidade induzida pela rotenona. Esse efeito, provavelmente relacionado à presença das atividades antioxidante e ansiolítica do composto, apresenta o EUG como um agente promissor na terapêutica e/ou prevenção da DP. / The increase in average life expectancy of the world population is a great challenge of contemporary public health and it presents close relation to the increase in the prevalence of neurodegenerative diseases. Parkinson's disease (PD) is a progressive neurological disorder linked to degeneration of nigrostriatal dopaminergic neurons caused by multiple factors, and the symptoms are mainly related to the functions of coordination and cognition. Evidences have shown that mitochondrial alterations and elevated levels of oxidative stress are strongly associated to the development of PD. In the present study, it was evaluated the neuroprotective effect of eugenol (EUG) on behavioral and biochemical changes induced by systemic administration of rotenone (an experimental model of Parkinson's disease) in rats. Initially, we evaluated the in vitro antioxidant activity (IVAA) of EUG by the method of capturing the free radical DPPH. The acute toxicity of EUG was performed according to OECD 420 (2001). A behavioral evaluation after induction of PD in rats was assessed through the following tests: open field (OF), Rota Rod (RR), elevated plus maze (EPM) and catalepsy (CP). At the end of behavioral testing, the corticosterone serum levels (CSLs) were measured by immunoassay (ELISA). EUG showed considerable IVAA (IC50= 32,189 μg/mL) compared to the standard BHT (IC50= 64.63 μg/mL). The minimum lethal dose of EUG in mice was higher than 2 g/kg. The subcutaneous administration of rotenone (2.5 mg/kg for 5 days) caused significant weight loss, motor impairment (RR test), muscle stiffness and increased length of akinesia (CP test), elevated levels of anxiety (OF test) and memory impairment (EPM test) compared to the control group (C). Daily pretreatment with EUG (37.5 mg/kg, p.o.), one hour before administration of the toxin, promoted less weight loss, improvement in motor and cognitive performances, as well as a reduction in anxiety levels compared to the negative control (N). Moreover, the EUG pretreated group showed, in general, similar behavioral patterns, but improved relative to the positive control (levodopa 4 mg/kg, p.o.). The reduction in anxiety levels was reaffirmed by the results obtained in biochemical analysis. CSLs of the N group were significantly higher compared to the C group. In CSLs, there was no significant difference between EUG pretreated and C groups; and, less CSL was observed in EUG pretreated group compared to the L group. The results suggest potential neuroprotective effect of EUG against the rotenone-induced toxicity. This effect is probably related to the presence of antioxidant and anti-anxiety activities of the compound. Therefore, EUG may be a promissory drug for the treatment and/or prevention of PD.

Resumo: A doença de Parkinson idiopática (DP) é uma doença neurodegenerativa, que afeta aproximadamente 1% da população mundial acima de 55 anos, manifestando-se através de sinais motores e sintomas não-motores, como a depressão, decorrentes principalmente da neurodegeneração dos neurônios dopaminérgicos na substância negra pars compacta (SNpc). Dentre os possíveis mecanismos envolvidos nesta patologia, destacam-se a disfunção mitocondrial, neuroinflamação e o estresse oxidativo. Em nosso estudo foi avaliado o efeito do antiinflamatório não esteróide (AINE) ibuprofeno, um inibidor não seletivo da enzima ciclooxigenase, sobre o prejuízo motor e comportamento tipo-depressivo induzidos pela administração intraperitoneal de rotenona em ratos. Nossos resultados demonstram que a administração de rotenona (2,5 mg/kg, por 10 dias, i.p.), foi capaz de reduzir a imunoreatividade da enzima tirosina-hidroxilase na SNpc, enquanto que o pós-tratamento com ibuprofeno (15 mg/kg, por 22 dias, p.o.) bloqueou esta redução. Também demonstramos que a rotenona foi capaz de induzir déficit motor (hipolocomoção) e comportamento tipo-depressivo, sendo ambos revertidos pelo pós-tratamento com ibuprofeno. Além destes parâmetros, foi avaliado o estresse oxidativo induzido por esta toxina. A administração de rotenona promoveu depleção nos níveis de GSH na região do hipocampo, e também reduziu a atividade da catalase em ambas as regiões, hipocampo e estriado. O pós-tratamento com ibuprofeno bloqueou a depleção do GSH induzida pela rotenona, bem como, aumentou os níveis basais deste antioxidante na região do estriado. O ibuprofeno também restaurou a atividade da catalase. Assim, acreditamos que o efeito neuroprotetor do ibuprofeno contra a toxicidade induzida pela rotenona em nosso estudo seja decorrente de suas propriedades antioxidante e inibidora da COX.

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-12-29T19:00:45Z No. of bitstreams: 1 AndersonHenriqueFrancaFigueredoLeao_TESE.pdf: 9217812 bytes, checksum: cac2716089a2fdc3b21b756ad7ac5444 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-01-02T21:43:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AndersonHenriqueFrancaFigueredoLeao_TESE.pdf: 9217812 bytes, checksum: cac2716089a2fdc3b21b756ad7ac5444 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-02T21:43:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndersonHenriqueFrancaFigueredoLeao_TESE.pdf: 9217812 bytes, checksum: cac2716089a2fdc3b21b756ad7ac5444 (MD5) Previous issue date: 2016-05-06 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / A Doen?a de Parkinson (DP) ? um dist?rbio motor relacionado ao envelhecimento que atualmente acomete de 1-2% da popula??o mundial acima dos 60 anos. No Brasil, estima-se que esta acometa aproximadamente 600 mil indiv?duos, configurando-se como uma enfermidade de import?ncia para pa?ses em processo de incremento da expectativa de vida. A epidemiologia da DP revela fatores de risco intr?nsecos e extr?nsecos ao paciente que definem a chance de desenvolvimento do dist?rbio. Muta??es pontuais e polimorfismos com significado funcional s?o tidos como fatores gen?ticos predisponentes, enquanto a exposi??o a pesticidas e toxinas destacam-se como fatores ambientais. No entanto, poucos estudos em modelos animais focam em investigar a intera??o entre estes fatores. Isto pode ser alcan?ado comparando-se os efeitos de subst?ncias indutoras de parkinsonismo em linhagens de ratos com diferentes contextos gen?ticos. Recentemente, o tratamento repetido com baixas doses de reserpina - um inibidor irrevers?vel do transportador vesicular de monoaminas (VMAT2) - foi proposto como um modelo progressivo para a DP. Sob este regime de tratamento, roedores apresentam, de forma progressiva, comprometimento motor, cognitivo, e altera??es neuroqu?micas compat?veis com a fisiopatologia da DP. Em paralelo, comparados a ratos Wistar, animais da linhagem SHR (Spontaneously Hypertensive Rats) s?o resistentes ? indu??o da discinesia oral pelo tratamento agudo com reserpina. Em vista destes achados, n?s buscamos avaliar se ratos SHR seriam resistentes aos d?ficits motores e altera??es neuroqu?micas quando submetidos ao modelo progressivo para DP induzido por reserpina. Portanto, n?s submetemos ratos Wistar e SHR ao tratamento agudo (1 mg/kg) ou repetido (15 inje??es de 0,1 mg/kg, em dias alternados) com reserpina e investigamos a progress?o dos d?ficits motores nas tarefas de catalepsia em barra, discinesia oral, e atividade espont?nea em campo aberto. Observamos ent?o que, para ambos os regimes de tratamento, animais SHR se mostram resilientes ao preju?zo motor em todas as dimens?es motoras avaliadas. Ainda, estas diferen?as se manifestaram tanto na lat?ncia para o surgimento do comprometimento motor como para a magnitude deste. Estas altera??es foram ainda acompanhadas por decr?scimo na express?o da tirosina hidroxilase (TH) e incremento na express?o de ?-sinucle?na na via nigro-estriatal de ambas linhagens submetidas ao tratamento com reserpina. Estas altera??es neuroqu?micas resultantes do tratamento com reserpina tamb?m se refletiram nos n?veis de monoaminas - dopamina e serotonina - na via nigro-estriatal destes animais. De modo geral, como no comportamento motor, animais SHR apresentaram atraso para a deple??o de monoaminas e menor magnitude deste efeito. Em conclus?o, os resultados aqui apresentados claramente corroboram a resili?ncia de ratos SHR ao modelo progressivo da DP. Estes achados exp?em novos alvos potenciais para as diferen?as neuroqu?micas, moleculares e gen?ticas na linhagem SHR relevantes para o estudo da susceptibilidade ? DP. / Parkinson?s disease (PD) is an aging-related progressive neurodegenerative disorder characterized by motor and non-motor symptoms, which affects 1-2% of the world population above 60 years old. In Brazil, this approximately 600 thousand people live with this disorder. Thus, PD is an important burden to countries with increasing life expectancy. The epidemiology of PD highlight intrinsic and extrinsic risk factors that are stochastic to the development of the disorder. Predisposing genetic factors comprise punctual mutations and polymorphisms with functional significance, while exposition to toxins is emphasizedas environmental factors. Nevertheless, few animal studies focus on the investigation of the interaction between these factors. Such may be accomplished by comparing the effects of substances that cause parkinsonism on rat strains with different genetic backgrounds. Recently, the repeated treatment with a low-dose of reserpine ? an irreversible inhibitor of the vesicular monoamine transporter (VMAT2) ? was suggested as a progressive model of PD. Rats under this treatment regimen show progressive catalepsy behavior, oral dyskinesia and spontaneous motor activity decrement. In parallel, compared to Wistar rats, SHR (Spontaneously Hypertensive Rat) are resistant to acute reserpine-induced oral dyskinesia. In view of these findings, we aimed to assess whether SHR would be resistant to repeated reserpine-induced motor and neurochemical deficits when submitted to the progressive model of PD. Thus, we submitted Wistar and SHR rats to the acute (1 mg/kg) or repeated (0,1 mg/kg, 15x, every other day) treatment with reserpine and investigated the progression of motor deficits in the catalepsy bar, oral dyskinesia, and spontaneous activity on the open field. Our results revealed that, for both treatment regimens, SHR rats were resistant to the motor impairment for all motor parameters assessed. Moreover, these differences were detected for both the latency to instauration and the magnitude of the impairment. The alterations were concomitant to a decrement in the optical density of tyrosine hydroxylase and an increment in ?-synuclein immunostaining by immunohistochemistryin the nigro-striatal pathway of both strains submitted to reserpine treatment. These neurochemical alterations resulted from reserpine treatment also reflected in the levels of monoamines ? dopamine and serotonin ? in the nigro-striatal pathway of these animals. Altogether, similarly to the motor behavior, SHR rats displayed lower magnitude and a delay to monoamine depletion. In conclusion, the current results clearly evidence the resilience of SHR to the repeated low-dose reserpine protocol. These findings uncover new potential underlying neurochemical, molecular and genetic differences in the SHR strain relevant to the study of susceptibility to PD.

Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-11T14:49:23Z No. of bitstreams: 2 TESE Cybelle Façanha Barreto Medeiros Linard.pdf: 2166817 bytes, checksum: af13a7a07c81d5fdab1831019d105d01 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T14:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Cybelle Façanha Barreto Medeiros Linard.pdf: 2166817 bytes, checksum: af13a7a07c81d5fdab1831019d105d01 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-10-30 / FACEPE (Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco) CNPq (Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico) / O aumento da população idosa tem levado a uma crescente incidência de doenças neurodegenerativas em todo o mundo. O consumo de alimentos de origem vegetal e o uso das propriedades terapêuticas de muitas plantas destacam-se desde os primórdios da humanidade. Anacardium occidentale Linn, conhecido popularmente como cajueiro, é uma árvore nativa do Norte e Nordeste do Brasil. Seu pseudofruto possui elevado teor de vitamina A, do complexo B, C e compostos fenólicos. O ácido anacárdico, composto fenólico obtido a partir do Anacardium occidentale, possui propriedades terapêuticas tais como: antimicrobiana, gastroprotetora, anticarcinogênica e anti-inflamatória. Evidências in vitro e in vivo mostraram que tanto o Anacardium occidentale quanto o ácido anacárdico possuem baixa toxicidade e efeitos antioxidantes, sugerindo potencial uso terapêutico. Entretanto, nenhum desses estudos foi realizado para testar o efeito antioxidante da administração sistêmica do Anacardium occidentale e ácido anacárdico no sistema nervoso central em modelo experimental de doença de Parkinson. Neste estudo hipotetizamos que Anacardium occidentale e ácido anacárdico podem exercer neuroproteção no córtex cerebral e no sistema nigroestriatal contra o estresse oxidativo induzido pela rotenona. Ratos adultos foram tratados por via oral com extrato hidroetanólico de Anacardium occidentale (150 e 600 mg/kg), ácido anacárdico (1-100 mg/kg) ou veículo, 1 hora antes da administração de rotenona (3 mg/kg) por via subcutânea durante 5 dias consecutivos. O comportamento dos animais foi avaliado nos testes do campo aberto, rotarod, catatonia e labirinto em T. Os sinais de neurodegeneração na substância negra, lipoperoxidação no sistema nigroestriatal e córtex cerebral e dosagem da enzima superóxido dismutase total também foram avaliados. Os grupos tratados com Anacardium occidentale e ácido anacárdico melhoraram a neuromotricidade nos testes comportamentais e, nas doses de 150 e 600 mg/kg de Anacardium occidentale no córtex, diminuíram a lipoperoxidação, provocados pela rotenona, em 47 e 62%, respectivamente; no estriado, em 32 e 56%, respectivamente; e na substância negra, na dose de 600 mg/kg, em 76%. O aumento da atividade da enzima superóxido dismutase total foi detectada usando ácido anacárdico 25-100 mg/kg em todas as regiões analisadas. Este aumento variou de acordo com a região, correspondendo a cerca de 80% na substância negra, 53% no córtex cerebral e de 230% no corpo estriado. O ácido anacárdico também diminuiu sinais de neurodegeneração provocados pela rotenona na substância negra. A administração oral de Anacardium occidentale e ácido anacárdico impediram a neurotoxicidade induzida pela rotenona em ratos, em parte, devido à sua ação moduladora sobre a enzima superóxido dismutase total, reduzindo neurodegeneração no sistema nigroestriatal e no córtex cerebral.

PASTRE, Adriana Sereniki, também é conhecido(a) em citações bibliográficas por: SERENIKI, Adriana / Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-21T22:03:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Adriana Sereniki Pastre.pdf: 4931910 bytes, checksum: 39fcd86d9bae85e668589d4fd533d6ca (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-28T23:24:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Adriana Sereniki Pastre.pdf: 4931910 bytes, checksum: 39fcd86d9bae85e668589d4fd533d6ca (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T23:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Adriana Sereniki Pastre.pdf: 4931910 bytes, checksum: 39fcd86d9bae85e668589d4fd533d6ca (MD5) Previous issue date: 2016-09-14 / Nos últimos anos, o aumento da população de idosos tem levado ao aumento na incidência de doenças neurodegenerativas em todo o mundo. Este fato tem proporcionado um interesse cada vez maior nos estudos que visam novas estratégias para a prevenção e cura dessas doenças. Várias evidências têm demonstrado que elevados níveis de estresse oxidativo, alterações mitocondriais, neuroinflamação e apoptose estão fortemente associados ao desenvolvimento de muitas doenças típicas do envelhecimento como Alzheimer, Parkinson e Huntington. Entretanto, as bases moleculares que desencadeiam estas doenças, ainda não estão totalmente compreendidas. De uma maneira geral, os principais mecanismos envolvidos no processo de neurodegeneração estão relacionados à excitotoxicidade mediada por aminoácidos excitatórios; formação de agregados proteicos; alterações da função mitocondrial; aumento intraneuronal de cálcio, proteínas pró-apoptóticas e mutações no DNA mitocondrial; bem como inibição de determinados complexos da cadeia respiratória mitocondrial. Além disso, mecanismos neuroinflamatórios, com ativação de células da glia e liberação de mediadores pró-inflamatórios, estão diretamente ligados à degeneração e à morte neuronal. Considerando que Schinus terebinthifolius (Anacardiaceae), conhecida popularmente como aroeira, apresenta propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes, pareceu-nos atraente investigar se o extrato hidroalcoólico do caule dessa espécie possui efeito neuroprotetor nas alterações comportamentais e bioquímicas na doença de Parkinson (DP) experimental induzida por rotenona. Para tanto, cinco grupos (n=10/grupo) de ratos Wistar foram tratados por gavagem durante 7 dias consecutivos respectivamente com água + veículo do extrato (controle), água (rotenona) e doses crescentes de S. terebinthifolius (150, 300 e 600 mg/kg). Uma hora após o tratamento foi administrado rotenona (3 mg/kg, s.c.) a todos os grupos, exceto o grupo controle que recebeu o veículo (óleo de girassol 90%+10%DMSO). Decorridos 24h da administração de rotenona, foram realizadas avaliações comportamentais por meio dos testes de campo aberto, rotarod e testes de labirinto elevado-plus em ratos adultos Wistar. Também foram realizados testes in vitro e in vivo de atividade antioxidante pelo método de captura de radicais DPPH e peroxidação lipídica (TBARS), respectivamente. Os resultados mostram que a administração de rotenona (3 mg/kg, s.c.) produziu hipolocomoção, aumento da imobilidade, descoordenação muscular e déficit de memória, enquanto que a administração prévia do extrato de S. terebinthifolius impediu a rotenona de provocar comportamento disfuncional sobre a atividade locomotora, rotarod e retenção de memória. A análise bioquímica da substância nigra, striatum e córtex revelou que a rotenona aumentou significativamente a peroxidação lipídica, o que foi inibido pelo pré-tratamento com todas as doses de S. terebinthifolius. Dessa forma, conclui-se possível efeito neuroprotetor de S. terebinthifolius possivelmente mediada por meio da sua atividade antioxidante, indicando por sua vez um potencial benefício terapêutico desta espécie no tratamento da doença de Parkinson. / In recent years, the increase of the aging population has led to increased incidence of neurodegenerative diseases worldwide. This fact has given an increasing interest in studies aimed at new strategies for prevention and cure of these diseases. Several evidences have demonstrated that elevated levels of oxidative stress, mitochondrial changes, neuroinflammation and apoptosis is strongly associated with the development of many typical diseases of aging such as Alzheimer's, Parkinson's and Huntington's. However, the molecular basis that trigger these diseases are not yet fully understood. In general, the key mechanisms involved in the neurodegeneration process are related to excitotoxicity mediated by excitatory amino acids; formation of protein aggregates; changes in mitochondrial function; increase in intraneuronal calcium, proapoptotic proteins and mutations in mitochondrial DNA; and inhibition of certain complexes of the mitochondrial respiratory chain. Furthermore, neuroinflammatory mechanisms with glial cell activation and release of proinflammatory mediators are directly linked to degeneration and neuronal death. Whereas, Schinus terebinthifolius (Anacardiaceae), commonly known as aroeira, has anti-inflammatory and antioxidant properties, it seemed attractive to investigate whether the hydroalcoholic extract of the stem of this species has neuroprotective effect on the behavioral and biochemical changes in Parkinson's disease (PD) trial rotenone-induced. For this, five groups (n= 10/group) Wistar rats were treated by gavage for 7 consecutive days, respectively extract with water + vehicle (control), water (rotenone) and increasing doses of S. terebinthifolius (150, 300, and 600 mg/kg). One hour after treatment rotenone was administered (3 mg / kg, s.c.), all groups except control group received the vehicle (sunflower oil 90% + 10% DMSO). After 24 hours of rotenone management, behavioral assessments were conducted through the open field test, rotarod and elevated-plus maze tests in adult Wistar rats. They were also carried out in vitro and in vivo antioxidant activity by radical capture method DPPH and lipid peroxidation (TBARS), respectively. The results show that rotenone administration (3mg/kg, sc) produced hypolocomotion, increased immobility, muscle incoordination and memory deficit, whereas the prior administration of S. terebinthifolius extract prevented rotenone cause dysfunctional behavior on locomotor activity, rotarod and memory retention. Biochemical analysis of the substantia nigra, striatum and cortex revealed that rotenone significantly increased lipid peroxidation, which was inhibited by pre-treatment with all doses of S. terebinthifolius. Thus, it is concluded possible neuroprotective effect of S. terebinthifolius possibly mediated by its antioxidant activity, in turn indicating a potential therapeutic benefit of this species in the treatment of Parkinson's disease.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2012-04-09T22:31:59Z No. of bitstreams: 2 Tese_ModeloInVitroParkinsonismo.pdf: 1410946 bytes, checksum: 6c060f9f78f49f433c8060e15db57ef8 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos(edisangela@ufpa.br) on 2012-04-09T22:34:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese_ModeloInVitroParkinsonismo.pdf: 1410946 bytes, checksum: 6c060f9f78f49f433c8060e15db57ef8 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-09T22:34:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese_ModeloInVitroParkinsonismo.pdf: 1410946 bytes, checksum: 6c060f9f78f49f433c8060e15db57ef8 (MD5) license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Previous issue date: 2011 / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / Evidências crescentes na literatura têm sugerido papel importante para os fatores ambientais, como a exposição a pesticidas, na patogênese da doença de Parkinson. Em animais experimentais, a exposição à rotenona, um pesticida e piscicida de uso comum, induz características de parkinsonismo através da inibição do complexo I mitocondrial. O objetivo deste estudo foi investigar a morte de neurônios induzida por rotenona utilizando culturas primárias mistas neurônio/glia derivadas de hipocampo e de mesencéfalo ventral de ratos, bem como o papel do Ca2+ na neste modelo experimental e a utilização de extrato aquoso de folhas de mogno com substâncias com alto poder antioxidante. A perda neuronal foi analisada com ensaios colorimétricos (MTT e LDH). Nossos resultados mostraram significativa redução na viabilidade celular após exposição à rotenona de maneira dependente de concentração, mas não dependente de tempo. Foi observada igual e elevada suscetibilidade em culturas mistas neurônio/glia derivadas de hipocampo e de mesencéfalo ventral ao agente neurotóxico. Em termos mecanicísticos, nossos resultados mostraram um papel discreto desempenhado pelo Ca2+ mitocondrial na neurodegeneração induzida por rotenona. Além disso, neste paradigma utilizado, verificamos que o extrato aquoso de folhas de mogno não promoveu proteção contra a toxicidade da rotenona, na concentração testada; ainda, promoveu efeito sinérgico em associação com rotenona. Verificou-se ainda que a rotenona, bem como o extrato de mogno promoveu indução de morte celular tanto por necrose quanto por apoptose, nas concentrações utilizadas. Os resultados deste estudo devem avançar nosso conhecimento sobre o mecanismo de ação de fatores ambientais na patogênese da doença de Parkinson. / Increasing evidence has suggested a role for environmental factors, such as exposure to pesticides, in the pathogenesis of Parkinson’s disease. In experimental animals the exposure to rotenone, a common herbicide and piscicide, induces features of parkinsonism by inhibiting the activity of mitochondrial complex I. Here we propose to investigate rotenone-induced death of neurons by using primary neuron-enriched and neuron-glia cultures from the rat hippocampus and ventral mesencephalon. The neuronal loss was evaluated with the colorimetric MTT assay. Our results showed significant reduction in the cell viability after exposure to rotenone in a dose- but not in a timedependent manner. We also discovered a remarkable feature of rotenone-induced degeneration of cultured neurons. The higher susceptibility was observed in neuron-glia cultures from the ventral mesencephalon, suggesting that the presence of glia, especially microglia, is an important factor contributing to neurodegeneration. Also, as showed by immunohistochemistry, this type of culture presented the higher density of tirosinahidroxilase (TH)-positive neurons. Mechanistically, our results with calcium blockers showed a minimal role played by external calcium, and an important synergistic influence of the ions from the internal stores in the rotenone-induced neurodegeneration. Indeed, in this study, we report that aqueous extract of mahogany leaves didn’t protect against the rotenone-induced toxicity, in the used concentration; and promoted a synergistic effect when associated with rotenona. Finally, the mahogany leaves extract induced celular death both necrosis and apoptosis. The results of this study should advance our understanding of the mechanism of action for environmental factors in the pathogenesis of Parkinson’s disease.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-04-18T18:12:36Z No. of bitstreams: 1 Stífani Machado Araujo.pdf: 2701104 bytes, checksum: db0f252b8e5b648fd9a2f147be16081a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-18T18:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stífani Machado Araujo.pdf: 2701104 bytes, checksum: db0f252b8e5b648fd9a2f147be16081a (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Doença de Parkinson (DP) é a segunda doença neurodegenerativa mais comum no mundo, afetando cerca de 1% dos adultos com mais de 60 anos. A DP está relacionada com a degeneração de neurônios dopaminérgicos principais componentes da substância negra cerebral, concomitantemente, com a disfunção do complexo I mitocondrial e o estresse oxidativo que desempenham um papel crucial na patogênese desta doença. A rotenona (ROT) é um pesticida natural e muito utilizado para induzir fenótipo de DP em modelos animais, por ser lipofílico pode atravessar facilmente a barreira hematoencefálica causando disfunção do complexo I mitocondrial e possível morte de neurônios dopaminérgicos. Dentre as várias aplicações terapêuticas dos antioxidantes, ressalta-se sua ação neuroprotetora, uma vez que o sistema nervoso central exibe uma maior vulnerabilidade e susceptibilidade aos insultos oxidativos, o γ-orizanol (ORY) é um produto natural composto por uma mistura de ésteres de ácido ferúlico extraídos a partir do óleo de farelo de arroz, e é bem descrito na literatura por possuir propriedades antioxidantes. Assim, o objetivo deste trabalho foi investigar um possível efeito neuroprotetor do γ-orizanol sobre alterações comportamentais e bioquímicas causadas pela exposição crônica de Drosophila melanogaster a rotenona. A mosca da fruta Drosophila melanogaster, é uma espécie alternativa à utilização de modelos mamíferos que vem sendo usada com bastante confiabilidade na reprodução de modelos de disfunção dopaminérgica. As moscas (de ambos os sexos) com idades compreendidas entre 1 a 5 dias de idade foram divididos em quatro grupos de 50 moscas cada um: (1) de controle, (2) ORY 25 μM, (3) ROT 500 μM, (4) ORY 25 μM + ROT 500 μM. As moscas foram concomitantemente expostos a uma dieta contendo ROT e ORY durante 7 dias de acordo com os seus respectivos grupos. Após o tratamento foram feitas as analises comportamentais e bioquimicas. Como resultados, verificamos que o ORY ofereceu proteção contra as alterações locomotoras causadas por ROT, além de prevenir a mortalidade induzida por rotenona, protegeu contra geração de estresse oxidativo e disfunções mitocondriais além de otimizar as defesas antioxidantes celulares. Nossas descobertas apontam uma restauração dos déficits colinérgicos, e nos níveis de dopamina fornecida por pelo tratamento com ORY. Em conclusão, os presentes resultados mostram que ORY é eficaz na redução da toxicidade induzida ROT em Drosophila melanogaster, o que mostrou uma ação neuroprotetora, possivelmente devido à presença dos componentes de antioxidantes tais como o ácido ferúlico. / Parkinson's disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease in the world, affecting about 1% of adults over 60 years. The DP is linked to the degeneration of dopaminergic neurons main components of the substantia nigra brain, concurrently with mitochondrial complex I dysfunction and oxidative stress play a crucial role in the pathogenesis of this disease. The rotenone (ROT) is a natural pesticide, and used to induce PD phenotype in animal models, being lipophilic can easily cross the blood-brain barrier dysfunction causing mitochondrial complex I and possible death of dopaminergic neurons. Among the various therapeutic applications of antioxidants, it emphasizes its neuroprotective action, as the central nervous system displays a greater vulnerability and susceptibility to oxidative insults, the γ-oryzanol (ORY) is a natural product composed of a mixture of esters ferulic acid derived from rice bran oil, and is well described in the literature to possess antioxidant properties. The objective of this study was to investigate a possible neuroprotective effect of ORY on behavioral and biochemical changes caused by chronic exposure of Drosophila melanogaster the rotenone. The fly fruit Drosophila melanogaster, is an alternative species to the use of mammalian models that have been used quite reliable reproduction of dopaminergic dysfunction models. The flies (male and female) between the ages of 1 to 5 days of age were divided into four groups of 50 flies each: (1) control, (2) ORY 25 μM, (3) ROT 500 μM ( 4) ORY 25 μM + ROT 500 μM. The flies were simultaneously exposed to a diet containing ROT and ORY for 7 days according to their respective groups. After treatment were made behavioral and biochemical analysis. As a result, we find that the ORY offered protection against locomotor changes caused by ROT, and to prevent the mortality induced by rotenone, protected against the generation of oxidative stress and mitochondrial dysfunction and optimize cellular antioxidant defenses. Our findings point to a restoration of cholinergic deficits, and dopamine levels provided by the treatment ORY. In conclusion, the present results show that ORY is effective in reducing the ROT induced toxicity in Drosophila melanogaster, which showed a neuroprotective effect, possibly due to the presence of antioxidants components such as ferulic acid.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcio Rodrigo Alecio.pdf: 5329646 bytes, checksum: 74fcb177f7eeca1140502ad6646743e5 (MD5) Previous issue date: 2012-08-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The abundance, potential insecticide and evidence of synergism among the major constituents of timbo extracts (Derris and Deguelia) and the need to control of Cerotoma tingomarianus Bechyné (Coleoptera: Chrysomelidae) and Spodoptera frugiperda Smith (Lepidoptera: Noctuidae) stimulated the realization of this study, which aimed to evaluate the biological effects of timbo extracts and its purified fractions compared to rotenone, as well as combined in different concentrations, on adults of C. tingomarianus and S. frugiperda larvae. Samples timbo roots were collected of plants in the Acre and Amazonas states, and obtained extracts by hot extraction of dry material method. The timbo extracts were grouped into six distinct groups and the bioassays were carried out by means of topical contact, contact by contaminated surface (filter-paper) and intake of contaminated diet in a completely randomized design. The mortality values of two insect species were submitted to Probit analysis to determine the LC50, LD50 and LT50. The other variables were subjected to variance analysis, when possible, using the Scott-Knott test (P> 0.05) for grouping treatment means. The intoxication by intake of contaminated diet/leaves is the most effective mean of contact for adults of C. tingomarianus and S. frugiperda larvae. The toxicity of timbo species extracts is variable and is related to the chemical composition of the extracts, as well as at form of exposure and the target insect species. Rotenone alone was not toxic to adult C. tingomarianus and showed low toxicity to S. frugiperda larvae, enhancing their biological effects on the insects/larvae when associated with the fractions containing timbo extracts, constituent A, constituent B and deguelin. The toxicity of timbo extracts for C. tingomarianus adult may be related to the combined action of several constituents. Extracts containing high levels of rotenone and deguelin are indicators of toxicity to S. frugiperda larvae. The association the constituent A with constituent B probably causes mortalities in the pre-pupal and pupal weight of S. frugiperda. The extract of timbo G1 and G3 showed the highest toxicity to insects and can be considered as the most promising for the development of biotechnology products for the control of C. tingomarianus adults and S. frugiperda larvae. / A abundância, o potencial inseticida e indícios de sinergismo entre os constituintes majoritários de extratos de timbó (Derris e Deguelia) e a necessidade de controle de Cerotoma tingomarianus Bechyné (Coleoptera: Chrysomelidae) e de Spodoptera frugiperda Smith (Lepidoptera: Noctuidae) estimularam a realização desta pesquisa, que objetivou avaliar os efeitos biológicos de extratos de timbó e de suas frações comparados à rotenona purificada, isoladamente e combinados em diferentes concentrações, sobre adultos de C. tingomarianus e de lagartas de S. frugiperda. Foram coletadas amostras de raízes de plantas de timbó nos estados do Acre e do Amazonas e obtidos extratos a quente utilizando clorofórmio como solvente. Os extratos das plantas de timbó foram agrupados em seis grupos distintos e os bioensaios foram desenvolvidos pelas vias de intoxicação de contato tópico, de contato por superfície contaminada e por ingestão alimentar, com delineamento experimental inteiramente casualizado. Os valores de mortalidade das duas espécies de insetos foram submetidos à análise de Probit para determinação das CL50, DL50 e TL50. As demais variáveis foram submetidas à análise de variância, quando possível, utilizando-se o teste de Scott-Knott (P > 0,05) para agrupamento das médias dos tratamentos. A intoxicação por ingestão alimentar é a via de contato mais efetiva para adultos de C. tingomarianus e lagartas de S. frugiperda. A toxicidade dos timbós é variável e está relacionada à composição química dos extratos, a forma de exposição e a espécie de inseto alvo. A rotenona utilizada isoladamente não foi tóxica para adultos de C. tingomarianus e apresentou baixa toxicidade para lagartas de S. frugiperda, potencializando seus efeitos biológicos sobre as lagartas quando associada com as frações dos extratos de timbó contendo deguelina e os constituintes A e B. A toxicidade dos extratos de timbó para adultos de C. tingomarianus pode estar relacionada à atuação conjunta de diversos constituintes. Extratos com elevados teores de rotenona e deguelina são indicadores de toxicidade para lagartas de S. frugiperda. A associação do constituinte A com o constituinte B provavelmente provoca mortalidades na fase pré-pupa e o peso de pupa de S. frugiperda pode ser reduzido pela atuação conjunta de vários constituintes dos extratos de timbó. O constituinte A pode atuar como antagonista de mortalidade de lagartas, provocar deformações e afetar a viabilidade de adultos de S. frugiperda. Os extratos de timbó G1 e G3 apresentam a maior toxicidade para os insetos e podem ser considerados como os mais promissores para o desenvolvimento de produtos biotecnológicos para o controle de adultos de C. tingomarianus e de lagartas de S. frugiperda.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-06-23T17:23:05Z No. of bitstreams: 1 2004 - Jos? Roberto Pererira.pdf: 1063290 bytes, checksum: ac86f4bd5958ba416f5739fd8e9c3de5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-23T17:23:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004 - Jos? Roberto Pererira.pdf: 1063290 bytes, checksum: ac86f4bd5958ba416f5739fd8e9c3de5 (MD5) Previous issue date: 2004-05-25 / Laboratory and field trials were performed to evaluate the efficiency of Timb? root extract (Dahlstedtia pentaphylla) (Taub). Burk. (Leguminosae, Papilionoidae, Millettiedae) on samples of Boophilus microplus (Canestrini, 1887) in bovines of the Para?ba Valley region ? S?o Paulo, Brasil. The ?in vitro? trials were carried out using immersion of engorged females, and ?in vivo? on bovines in the field by means of artificial infestation. The standard dilution was made from one part of root powder and three parts of ethanol this was considered the 100% solution. To determine the more efficient solvent to extract rotenone from the root, laboratory trials were conducted on B. microplus engorged females with in three solvents: water, ethanol a.p. and acetone a.p. The laboratory trials permitted the calculation of lethal doses at 90% (LD90) and 50% (LD50) for larvae between seventh and fourtheenth days of application and efficient concentrations at 90% (EC90) and 50% (EC50) on strain local and Mozo with B. microplus engorged females. For the larvae of the local strain (Para?ba Valley Regional Hub) LD50 calculated was 1:31,37 mL and LD90 was 1:85,24 mL. The EC90 for engorged females, of the same strain was of 1:10,19 mL and the EC50 1:34,94 mL. For the engorged females on the hypersersitive strain Mozo the EC90 was 1:23,91 mL and the EC50 1:60,46 mL. The mortality of engorged females in relation to the different kinds of solvents, was analyzed. In the field, the best results (76,10% of control) were obtained three days after application of the product extracted in ethanol, in 1:10, on animals. Then gradually between the seventh and fourteenth days the products lost efficiency, there was no significant difference between treatments and the control group after 21 days. / Foram realizados testes laboratoriais e de campo para avaliar a efici?ncia do extrato de ra?zes da planta Dahlstedtia pentaphylla (Taub.) Burk., (Leguminosae, Papilionoideae, Millettiae) sobre amostras de Boophilus microplus ( Canestrini, 1887 ) de bovinos da regi?o do Vale do Para?ba e da cepa sens?vel Mozo. Os testes foram efetuados ?in vitro?, pela t?cnica de imers?o de tel?ginas e ?in vivo?, sobre bovinos no campo, ap?s infesta??o artificial. As dilui??es foram obtidas a partir da extra??o de roten?ides utilizando?se uma parte de p? das ra?zes da planta para tr?s de etanol, sendo considerada padr?o 100%. Visando determinar o solvente mais eficiente para a extra??o de roten?ides das ra?zes, conduziram-se testes laboratoriais sobre tele?ginas de B. microplus em tr?s solventes: ?gua, etanol p.a e acetona p.a. Os testes laboratoriais permitiram calcular a Dose Letal 90% (DL90) e DL50 para larvas com idade entre sete e 21 dias e a Concentra??o Eficaz 90% (CE90) e CE50 sobre tele?ginas de B. microplus das cepas local e Mozo. Para as larvas da cepa local (Polo Regional do Vale do Para?ba) a DL50 calculada foi de 1: 231,37 mL e DL90 1: 85,24 mL. A CE90 para as tele?ginas, da mesma cepa, foi de 1:10,19 mL e a CE50 1: 34,94 mL. Para tele?ginas da cepa sens?vel Mozo a CE90 foi de 1: 23,91 mL e a CE50, 1: 60,46 mL. Analisou-se tamb?m a mortalidade das tele?ginas frente aos diferentes solventes. No campo os melhores resultados obtidos (76,10% de controle) foram obtidos tr?s dias ap?s a aplica??o do produto extra?do em etanol, na dilui??o 1: 10, sobre os animais. A partir da? gradualmente nos dias sete e quatorze os produtos foram perdendo efici?ncia, n?o apresentando mais diferen?a significativa entre os tratamentos e o grupo controle no dia +21.