Diss. (sammanfattning) Uppsala : Sveriges lantbruksuniversitet, 2006. / Härtill 4 uppsatser.

Thesis (M.Sc.) - Carleton University, 2005. / Includes bibliographical references (p.103-107 ). Also available in electronic format on the Internet.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-12Bitstream added on 2014-06-13T18:44:31Z : No. of bitstreams: 1 neves_mc_dr_jabo.pdf: 5007913 bytes, checksum: dbd1f98db55ea3fe7154227df200f61f (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Estratégias para reduzir o aquecimento da Terra e aumentar a produção animal requerem novos sistemas, onde devem ser consideradas as emissões de metano e de outros gases que possam provocar danos ao meio ambiente. O objetivo deste trabalho foi a mensuração da produção de metano por arquéias e aplicação da metagenômica para detecção destas na fração sólida do conteúdo ruminal. Para a análise da produção de metano foi colhido o conteúdo ruminal seguido do preparo da solução a ser fermentada e armazenamento dos gases. A amplificação da região 168 rDNA foi obtida por PCR e a seguir foram feitas clonagem, seqüenciamento e análise das seqüências pelos programas Sequencing Analysis 3.4 e Phred/Phrap/Consed, submetendo-as ao programa BLA8T. Maiores produções de metano e relações acetato:propionato foram observadas nos tratamentos contendo 70% de volumoso. As análises do BLA8T permitiram identificar nos tratamentos com 70% e 30% de feno, 96 seqüências relacionadas à família Methanobacteriaceae, 47 seqüências a arquéias não cultiváveis e 60 seqüências foram de arquéias desconhecidas (T1), 125 seqüências relacionadas à família Methanobacteriaceae, 42 seqüências a arquéias não cultiváveis e 32 seqüências foram de arquéias não conhecidas (T2). Para os tratamentos feitos com 70% e 30% de silagem de milho, foram observadas 30 seqüências referentes à família Methanobacteriacea, 18 seqüências à família Methanomicrobiacea, 43 seqüências a arquéias não cultiváveis e 118 seqüências foram de arquéias desconhecidas (T3) e 173 seqüências referentes à família Methanobacteriacea, 31 seqüências a arquéias não cultiváveis e 25 seqüências foram de arquéias desconhecidas (T4). As análises deste experimento mostraram variação na produção de metano quanto às diferentes proporções V:C e a metagenômic... / Strategies to reduce the Earth worming and raise animal production require new systems, where it must be considered methane and other gases emission that might cause environmental damages. The aim of this work was to evaluate the archaea methane production and the metagenomic evaluation of these bacteria present on the solid phase of the bovine ruminal content. For methane production analysis the ruminar content was collected followed by the proper manipulation for the fermentation process to take place and produced gas storage. The ribosomal 16S rRNA region was obtained by PCR amplification which was followed by cloning and DNA sequencing. The data was later analyzed by the software Sequencing Analysis 3.4, Phred/Phrap/Consed and BLAST. The highest methane production and acetate:propionate ratios were observed for the treatments containing 70% of roughage. The BLAST analysis allowed to identify 96 DNA sequences related to the Methanobacteriaceae family, 47 DNA sequences related to unculturable archaea and 60 DNA sequences were related to unknown archaea (T1), 125 DNA sequences related to Methanobacteriaceae, 42 DNA sequences do unculturable archaea and 32 DNA sequences were considered related to unknown archaea (T2) for the treatments containing 70% and 30% of hay. For those containing 70% and 30% of com silage it was possible to detect 30 DNA sequences related to Methanobacteriaceae, 18 DNA sequences related to Methanomicrobiaceae, 43 sequences related to unculturable archaea, 118 DNA sequences related to unknown archaea (T3) and 173 DNA sequences related to Methanobacteriaceae, 31 sequences related to unculturable archaea, and 25 to unknown archaea (T4). The analysis carried out in this experiment have shown a variation of the methane production as different R:C ratio were used and metagenomic with the rDNA conserved region together with archaea taken from the ruminal content DNA... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:27:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnaCDSB_TESE.pdf: 11862899 bytes, checksum: db329299185e2c022af1f916b746aae8 (MD5) Previous issue date: 2014-11-14 / The increase in anthelmintic resistance in gastrointestinal nematodes on small ruminants became a worldwide issue on the development of livestock. In order to assess the resistance scenario in that context in the Rio Grande do Norte region, in vivo and in vitro resistance tests were carried out in 30 rural properties using chemicals in the avermectin, salicylanides, benzimidazoles and imidatiazols groups. For the in vivo test, group I was used as control and four other experimental groups received oral medication, being group II given albendazole (10 mg/kg), group III levamisole (7.5 mg/kg), group IV closantel (5.0 mg/kg) and group V ivermectin (0.2 mg/kg). The nematode infection was determined using fecal egg count (FEC) essays and the efficiency of each treatment was analyzed by the fecal egg count reduction test (FECRT). For the in vivo e in vitro tests, using tiabendazole, the necessary concentration to inhibit 50% of egg hatching (EC50) and assays with a 50% inhibition of larval development (LD50) were assessed, however 50% of larval development and migration inhibition assays (LD50) essays were carried out using ivermectin. For the molecular analysis Haemonchus contortus/property were isolated for the calculation of the frequency of resistant and sensitive alleles for single nucleotide polymorphisms (SNPs): F220Y, F167Y and E198A. The results obtained from in vivo tests showed that resistance was detected for all of the drugs, with leavamisole and closantel appearing as the most effective treatments with FECRT results of 84.3% and 74.6%, respectively. In the in vitro assays, tiabendazole had a result in the hatching test of EC50 0.598 µg/ml (95% IC: 0.323-0.818), while exhibiting in the larval development test a LD50 and LD99 0.518 µg/ml(95% IC: 0.432-0,887) and 4.359 µg/ml (95% IC: 3.047-8.178), respectively. For ivermectin in the larval development test, DL50 0.637 µg/ml(95% IC: 0.382 0.903 µg/ml) e DL99 19.56 µg/ml(95% IC: 11.44 46.55 µg/ml) was observed, while in the migration essay the LD50 value was 16.337 µM (95% IC: 12.7-21.3 µM). In the molecular analysis a higher frequency of the resistant allele for SNP F200Y was observed, presenting higher percentage values of 85.81% and 73.11%, while the F167Y resistant alleles had lower values ranging from 2.93% to 43.73%. In the E198A SNP, only sensitive alleles were detected. Assessing the scenario of anthelmintic resistance in the region, one notices that it s established for the main existing drugs on the market / O aumento na resistência anti-helmíntica em nematóides gastrintestinais de pequenos ruminantes tornou-se um problema global para o desenvolvimento da pecuária. Nesse contexto, a fim de avaliar o cenário da resistência na região do Rio Grande do Norte foram realizados em 30 propriedades rurais testes de resistência in vivo e in vitro utilizando produtos químicos dos grupos das avermectina, salicilanilidas, benzimidazóis e imidatiazóis. Para o teste in vivo utilizou-se o grupo I controle quatro grupos experimentais, sendo grupo II albendazol (10 mg/kg), grupo III levamisol (7,5 mg/kg), grupo IV closantel (5,0 mg/kg) e grupo V ivermectina (0,2 mg/kg). A infecção por nematóides foi determinada utilizando ensaios de ovos por grama de fezes (OPG) e a eficiência de cada tratamento pelo teste de redução da contagem de ovos nas fezes (FECRT). Para os teste in vitro, foi utilizando tiabendazol, com concentrações necessária para inibir 50% de eclosão dos ovos (EC50) e ensaios com inibição de 50% do desenvolvimento larval, porém com a ivermectina foram realizados ensaios de inibição de 50% do desenvolvimento e migração larval (DL50). Para análise molecular foram isolados Haemonchus contortus em cada propriedade avaliada para cálculo da frequência de alelos resistentes e sensíveis para os polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs): F200Y, F167Y e E198A. Os resultados obtidos com os testes in vivo e in vitro mostraram que a resistência foi detectado em todas as drogas testadas, com o levamisol e closantel apresentando-se como os tratamentos mais eficientes, com resultados FECRT de 84,3% e 74,6%, respectivamente. Nas análises in vitro o resultado do tiabendazol no teste de eclosão foi EC50 0,598 µg/ml (IC95%: 0,323-0,818), enquanto que no desenvolvimento larval uma DL50 e DL99 de 0,518 µg/ml(IC95%: 0,432-0,887) e 4,359 µg/ml(IC95%: 3,047-8,178), respectivamente. Para ivermectina no teste de desenvolvimento larval foi observado DL50 0,637 µg/ml(CI95%: 0,382 0,903 µg/ml) e DL99 19,56 µg/ml(CI95%: 11,44 46,55 µg/ml), enquanto que no de migração o valor da DL50 foi 16,337 µM (CI95%: 12,7-21,3 µM). Na análise molecular observou-se uma frequência maior do alelo resistente para o SNP F200Y apresentando porcentagens mais altas com valores de 85,81% e 73,11%, enquanto que o F167Y apresentou valores menores de alelos resistentes variando entre 43,73% e 2,93%. No SNP E198A foram detectados alelos apenas sensíveis. Avaliando o cenário da resistência anti-helmíntica na região, percebe-se que está estabelecida para as principais drogas existentes no mercado

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TalytaLN_DISSERT.pdf: 3598046 bytes, checksum: 8625bfefb7968296859526da4d9e14cc (MD5) Previous issue date: 2013-12-10 / This study aimed to determine the therapeutic dose of tramadol in goats submitted to orchiectomy and to verify the pharmacokinetic parameters of the opioid in the species. Nineteen healthy adult goats were divided into three groups: Group 2 mg, where animals received tramadol at a dose of 2 mg.kg-1; Group 4 mg, where animals received 4 mg.kg-1 of the opioid; and Control Group which received NaCl solution at 0.9%, intravenously. After the treatment administration, lidocaine local infiltration was performed and the animals were subjected to orchiectomy. Heart and respiratory rate, blood pressure and temperature were measured besides the assessment of analgesia. At any sign of pain, ketoprofen was administered. At each time point, venous blood was collected for determination of tramadol pharmacokinetics, by HPLC means. It was observed that 4 mg.kg-1 provided better and longer-lasting analgesia when compared to the other study groups. The animals that received that dose had the smallest values of the vital parameters and, in 66,6% of them, rescue medication was administered only 16 hours after treatment. As for the pharmacokinetics, there was no difference among groups. The highest plasma concentrations of tramadol were 830 and 1479 ng.ml-1 for the animals receiving the lowest and highest doses of the opioid, Half-life was 0.28 ± 0.21 and 0.34 ± 0.24 hours for tramadol in doses of 2 and 4 mg.kg-1 , respectively. There was a wide distribution and affinity to the opioid by all tissues. Tramadol at a dose of 4 mg.kg-1 demonstrated analgesic activity more satisfying and longer lasting associated with absence of side effects in goats undergoing orchiectomy / Objetivou-se comparar os efeitos clínicos, efeitos adversos e farmacocinética do tramadol, nas doses de 2 e 4 mg.kg-1, em caprinos submetidos à orqueictomia. Foram utilizados 19 caprinos adultos hígidos, distribuídos em três grupos: grupo 2 mg, onde os animais receberam tramadol na dose de 2 mg.kg-1; grupo 4 mg, receberam 4 mg.kg-1 do opioide e o grupo controle que recebeu NaCl 0,9%, por via intravenosa. Após administração dos tratamentos, realizou-se bloqueio anestésico com infiltração local de lidocaína, sendo os animais submetidos a orquiectomia. Avaliou-se o grau de analgesia promovido pelos tratamentos e mensurou-se as frequências cardíaca e respiratória, pressão arterial e temperatura retal. Ao se verificar sinais de dor, cetoprofeno foi administrado. Em cada momento de avaliação, sangue venoso foi colhido para determinação da farmacocinética do tramadol por meio de CLAE. Observou-se que a dose de 4 mg.kg-1 promoveu maior e mais prolongada analgesia quando comparada aos demais grupos do estudo. Os animais que receberam esta dose obtiveram os menores valores dos parâmetros vitais e em 66,6% deles, medicação resgate só foi administrada 16 horas após o tratamento. Quanto a farmacocinética, não houve diferença entre os grupos. As mais elevadas concentrações plasmáticas do tramadol foram 830 e 1479 ng.ml-1 para os animais que receberam a menor e maior dose do opioide. Tempo de meia vida foi de 0,28±0,21 e 0,34±0,24 horas para o tramadol nas doses de 2 e 4 mg.kg-1. Houve ampla distribuição e afinidade do opioide pelos tecidos. O tramadol, na dose de 4 mg.kg-1 demonstrou atividade analgésica mais satisfatória e prolongada, associada a ausência de efeitos adversos. A dose de 4 mg

Made available in DSpace on 2016-08-15T20:31:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ErikaSP_DISSERT.pdf: 1538043 bytes, checksum: c1e9ee9d8ad94de102cf9059d099dad1 (MD5) Previous issue date: 2009-08-27 / This research has considered Trypanosome s outbreaks by T. vivax that occurred in four groups of little ruminants in three towns of Alto Sertão da Paraíba in 2008 and recreated the disease experimentally in caprines and ovines, in order to relate the cardiac and central nervous system injuries with the parasite. For the statistics analyses the Test of Tukey (SAS) and the Qui-square (Epi Info 6.0) were done. The natural infection evaluation was done in the first outbreak (outbreak 1) and second (outbreak 2) semester of 2008, when the clinic signs were registered, parasitemia, rectal temperature, PCV and body score. 20% of adult caprine and ovine from each flock were chosen. It was noticed that in the first outbreak, the parasitemia was significantly bigger than in the second outbreak for both species, suggesting an acute and chronic stage of the disease. There was also a significant relation between the parasitemia, the temperature, the PCV and the body score in caprines and ovines. The anemia is a more evident clinical signal of the disease, followed by weight loss. At the PCR checkup, it was noticed that all the animals checked had the parasite in the blood. To evaluate the relation between the cardiac injuries with the T. vivax, 14 male ovines were used, SRD, disposed in 3 groups, being G1 the animals evaluated up to the 20th dpi (day pos infection), the G2, animals evaluated up to the 90th dpi and the G3 which is the control group, corresponding to the days of the groups treated. The isolated from T. vivax was from the outbreak occurred from Paraiba, being inoculated 1 ml containing 107 tripomastigotes. Clinical exams were done, hematological and anatomic-pathological. The animals presented hyperthermia, hydrothorax, ascites and hidropericardium. To the necropsy, the heart from an ovine from G2 presented evidences of cardiac failure. In the histological exam, hyaline necrosis was noticed, miocarditis with infiltrated inflammatory, besides fibrosis, suggestive of cardiac failure. In the evaluation of the injuries at the SNC related to T. vivax 12 male caprines were used, SRD, also disposed in three groups: G1 (animals evaluated in the acute stage of the disease), G2 (animals evaluated at the chronic stage of the disease) and G3 (control group). The isolated from T. vivax was due to an outbreak from ovines in Paraíba, being inoculated 1 ml containing 1.25 x 105 tripomastigotes. Within this study, besides the clinical exams, hematological and anatomic-pathological exams, the biochemical exam of the LCR were also done. The animals presented tetany, bruxism, opisthotonos and severe hyperthermia. In the exam of the LCR, there was a significant increase of the proteins in general and cellularity, as well as glicorrhachia and tubidez LCR. In the histological exam, meningoencephalitis was noticed, characterized by the presence of infiltrated inflammatory, besides morules cells (cells of Mott). / Este trabalho avaliou surtos de tripanossomíase por T. vivax que ocorreu em quatro rebanhos de pequenos ruminantes em três municípios do alto sertão da Paraíba em 2008 e reproduziu a doença experimentalmente em caprinos e ovinos, a fim de relacionar as lesões cardíacas e do sistema nervoso central com o parasita. Para análise estatística foi realizado o teste de Tukey (SAS) e o Qui-quadrado (Epi Info 6.0). A avaliação da infecção natural foi realizada no primeiro (surto 1) e segundo (surto 2) semestre de 2008, quando foram registrados os sinais clínicos, parasitemia, temperatura retal, hematócrito e escore corporal. Foram escolhidos 20% de caprinos e ovinos adultos de cada rebanho. Foi observado que no surto 1, a parasitemia foi significativamente maior que no surto 2 para ambas as espécies, sugerindo uma fase aguda e crônica da doença. Houve também uma relação significativa entre a parasitemia, a temperatura, o hematócrito e o escore corporal em caprinos e ovinos. A anemia é o sinal clínico mais evidente na enfermidade, seguida da perda de peso. Ao exame da PCR, foram verificados que todos os animais avaliados possuíam o parasita no sangue. Para avaliar a relação das lesões cardíacas com o T. vivax foram utilizados 14 ovinos machos, SRD, dispostos em 3 grupos, sendo G1 os animais avaliados até o 20o dpi (dias pós-infecção), o G2, animais avaliados até o 90o dpi e o G3 que é o grupo controle, correspondente aos dias dos grupos tratados. O isolado do T. vivax foi proveniente do surto ocorrido na Paraíba, sendo inoculado 1 ml contendo 107 tripomastigotas. Foram realizados exames clínicos, hematológicos e anatomopatológicos. Os animais apresentaram hipertermia, hidrotórax, ascite e hidropericárdio. À necropsia, o coração de um ovino do G2 apresentou evidências de insuficiência cardíaca. No exame histológico, observou-se necrose hialina, miocardite com infiltrado inflamatório, além de fibrose, sugestivo de insuficiência cardíaca. Na avaliação das lesões no SNC relacionadas ao T. vivax foram utilizados 12 caprinos machos, SRD, também dispostos em três grupos: G1 (animais avaliados na fase aguda da doença), G2 (animais avaliados na fase crônica da doença) e G3 (grupo controle). O isolado do T. vivax foi decorrente de um surto em bovinos na Paraíba, sendo inoculado 1 ml contendo 1,25 x 105 tripomastigotas. Neste estudo, além dos exames clínicos, hematológicos e anatomopatológicos foram realizados também o exame bioquímico do LCR. Os animais apresentaram tetania, bruxismo, opistótono e hipermetria acentuada. No exame do LCR, houve um aumento significativo das proteínas totais e celularidade, bem como glicorraquia e tubidez do líquor. No exame histológico foi verificada meningoencefalite, caracterizada pela presença de infiltrado inflamatório, além de células morulares (células de Mott).

Submitted by Socorro Pontes (socorrop@ufersa.edu.br) on 2017-05-02T15:14:06Z No. of bitstreams: 1 CarlosHS_TESE.pdf: 942208 bytes, checksum: e19ab9490967b84c569ba6458a95e6cb (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-05-02T15:22:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarlosHS_TESE.pdf: 942208 bytes, checksum: e19ab9490967b84c569ba6458a95e6cb (MD5) / Approved for entry into archive by Vanessa Christiane (referencia@ufersa.edu.br) on 2017-05-02T15:30:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarlosHS_TESE.pdf: 942208 bytes, checksum: e19ab9490967b84c569ba6458a95e6cb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-02T15:30:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarlosHS_TESE.pdf: 942208 bytes, checksum: e19ab9490967b84c569ba6458a95e6cb (MD5) Previous issue date: 2016-04-29 / The aim of this study was to describe the profile of the sheep and goat farmers in the West Potiguar region, through questionnaires that reveal the social characteristics of the creators and hygiene and health characteristics of goat and sheep herds. They were conducted 243 interviews with creators sheep and goat farmers of family farming, with flocks of up to 100 animals. After application of the questionnaires, was obtained a database, which indicated important characteristics, as well as weaknesses of the productive chain and possible risk factors of sanitary and hygienic management. The results showed that 85.0% and 81.2% of sheep and goat farmers respectively, reside in the property; 71.2% and 75.3% of sheep and goat farmers respectively, has the property as the only source of income; more than 75.0% of the farmers have not completed primary education, regardless of the analyzed species of herd. The predominant farming system is semi-extensive, the installations are predominantly of dirt floor pressed and the use of isolation of animals was not routine practice. The deworming is a common practice in 99.1% of sheep and 95.9% of goats herds, but is performed without any technical orientation, such as dosages and frequency. Among the deworming, clostridiums is the most applied between the breeders, and the goat herd with the immunization rate (60.6%) higher than the herd sheep (41.6%). The clinical signs more reported by sheep and goats breeders were respectively, diarrhea (88.5% and 88.8%), screwworm (81.4% and 79.4%), anemia (62.8% and 59.4% ), abortion (51.3% and 46.5%) and abscess (38.1% and 30%), only varying the proportion of the related cases. We conclude that the technical assistance and the participation in associations or cooperatives contributed to an increase in productivity and control of diseases in these herds / Os objetivos deste trabalho foram descrever o perfil sanitário do rebanho e social dos criadores de ovinos e caprinos do Oeste Potiguar, através de questionários que revelassem as características sociais dos criadores e higiênico-sanitárias dos rebanhos. Foram realizadas 243 entrevistas com criadores de ovinos e caprinos da agricultura familiar, com rebanhos de no máximo 100 animais. Após aplicação dos questionários, obteve-se um banco de dados, que a partir dos quais pode-se identificar características importantes, bem como fragilidades da cadeia produtiva e eventuais fatores de risco dos manejos higiênico e sanitário. Os resultados mostraram que 85% e 81,2% dos criadores de ovinos e caprinos respectivamente, residem na propriedade; 71,2% e 75,3% tem a propriedade como única fonte de renda e mais de 75% dos criadores não concluíram o ensino fundamental, independente da espécie do rebanho analisada. O sistema de criação predominante é o semi-extensivo, as instalações são predominantemente de chão batido e o uso de quarentena e isolamento para os animais não é prática rotineira. A vermifugação é uma prática comum em 99,1% dos ovinos e 95,9% dos rebanhos caprinos, porém é realizada sem nenhuma orientação técnica, como dosagens e frequência. Dentre as imunizações, a clostridiose é a mais aplicada entre os criadores, tendo o rebanho caprino um índice de imunização (60,6%) e o rebanho ovino (41,6%). Os sinais clínicos mais relatados pelos criadores de ovinos e caprinos foram respectivamente diarreia (88,5% / 88,8%), bicheira (81,4% / 79,4%), anemia (62,8% / 59,4%), aborto (51,3% / 46,5%) e abscesso (38,1% / 30%) variando apenas a proporção das citações. Podendo-se concluir que a assistência técnica e a participação em associações ou cooperativas contribuíram para um aumento na produtividade e no controle das enfermidades nos rebanhos / 2017-05-02

Este projeto foi desenvolvido no Laboratório de Patologia Experimental do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), com a aprovação da Comitê de Ética em Pesquisa do HCPA e com apoio financeiro parcial do Fundo de Incentivo à Pesquisa e Eventos do HCPA (FIPE). O experimento 1, chamado de projeto piloto, teve como objetivo implementar a técnica de IHQ para identificar a Listeria monocytogenes (L.m.), utilizando anticorpo policlonal antilisteria monocytogenes (Biodesig ). Vários testes foram realizados para acertar a diluição (1:1000) que foi diferente da preconizada pelo fabricante. Os blocos de parafina, de dez placentas provenientes de parto prematuro ou aborto foram utilizados para os cortes histológicos e a preparação das lâminas para a coloração Hematoxilina e Eosina (HE) e imunoistoquímica (IHQ). As lâminas foram identificadas por números para resguardar a identidade das pacientes. O resultado do HE mostrou alterações inflamatórias em oito placentas e L. m. foi identificada pelo IHQ em cinco dessas placentas. O objetivo do 2º experimento foi identificar a L. m. em tecido nervoso cerebral de ruminantes, utilizando a técnica implementada no projeto piloto. O material utilizado neste trabalho foi cedido pelo Setor de Patologia Veterinária do Departamento de Patologia da Universidade Federal de Santa Maria. Os casos estudados (2 ovinos, 1 caprino e 2 bovinos) tinham suspeitas clínicas diversas e as necropsias dos animais evidenciaram aspectos sugestivos da doença. Os cinco casos foram confirmados pelo IHQ, comprovando a importância da utilização desta técnica para o diagnóstico da listeriose no SNC de ruminantes. O 3º experimento objetivou identificar a L. m. em placentas encaminhadas ao Serviço de Patologia do HCPA no ano 2000. Da mesma forma que no experimento 1, as lâminas foram identificadas por números. Após o levantamento realizado nos registros dos exames anatomopatológicos (AP) deste setor, observou-se que 714 AP eram de placentas provenientes de aborto, parto prematuro e nascimento a termo examinados naquele período. Foram sorteados 254 AP para análise através de HE, revelando que 148 desses AP apresentavam alterações inflamatórias (corioamnionite, vilite e deciduite). Os blocos destas placentas foram utilizados para fazer as lâminas e realizar IHQ. A consulta aos prontuários dos casos com alterações inflamatórias permitiu observar que um deles tinha a confirmação bacteriológica de L. m. na placenta, tornando-se este o controle positivo. O controle negativo foi selecionado entre aqueles sorteados que não apresentavam alterações inflamatórias. A presença de L. m. foi identificada em 33,78% das placentas analisadas pela técnica IHQ. Corioamnionite e vilite foram as alterações inflamatórias que mostraram diferença estatística significativa nas placentas positivas. L. m. estava presente nas placentas de 1º, 2º e 3º trimestres gestacionais. A idade das gestantes, casos de aborto e/ou parto prematuro não mostraram diferença estatística significativa com a presença ou ausência de L. m. nas placentas. Abortos habituais ocorreram em pacientes com ou sem L. m. no tecido placentário. Conclusão: a técnica de imunohistoquímica pode ser utilizada para confirmar o diagnóstico histopatológico de listeriose em placentas e tecido nervoso central de ruminantes. / This project was developed at the Pathology Experimental Laboratory of Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), after approval by the local Research Ethics Committee, and received partial financial support from the Research Incentive Fund (FIPE) of HCPA. The first experiment (or pilot scheme) aimed at implementing the immunohistochemistry (IHC) technique for the identification of Listeria monocytogenes (L.m.), by way of anti-listeria polyclonal antibody (Biodesign ). Several tests were performed in order to find the correct dilution (1:1000), which was different from that which had been recommended by the manufacturer. Paraffin-embedded blocks of placentas obtained from premature birth or abortion were used for the histological sections, and the slides were prepared for hematoxylin-eosin (HE) staining and immunohistochemistry. The slides were labeled with numbers in order to preserve patient anonymity. The result of HE staining revealed inflammatory disorders in eight placentas and L.m. was identified by IHC in five of them. The aim of the second experiment was to identify L.m. in the brain tissue of ruminants by employing the technique implemented in the pilot scheme. The material used in this study was provided by the Division of Veterinary Pathology of the Department of Pathology of Universidade Federal de Santa Maria. The animals studied (2 sheep, 1 goat and 2 cows) exhibited several clinical suspicions and the necropsy results were suggestive of the disease. The five cases were confirmed by IHC, highlighting the importance of this technique to the diagnosis of listeriosis in the CNS of ruminants. The aim of the third experiment was to identify L.m. in placentas and abortion specimens that had been referred to the Division of Pathology of HCPA in year 2000. As with the first experiment, the slides were numbered. After surveying the registries of pathoanatomical exams (PAs), we noted that 714 PAs corresponded to placentas, obtained from abortion, premature delivery and full-term birth, examined during that period. Two hundred fifty- four PAs were randomly selected (drawn out) for HE staining, and 148 of these PAs showed evidence of inflammatory disorders (chorioamnionitis, villitis and deciduitis). The blocks of these placentas were used for preparing the slides and carrying out IHC. The analysis of medical records in the cases with inflammatory disorders allowed us to observe that one of the records contained bacteriological confirmation of L.m. in the placenta (positive control). The negative control was chosen among the drawn-out PAs that did not present inflammatory disorders. L. m. was detected in 33.78% of the placentas analyzed by IHC. Chorioamnionitis and villitis showed significant statistical difference in the positive placentas. L. m. occurred in the 1st, 2nd and 3rd trimesters of pregnancy. The age of pregnant women, the cases of abortion and/or premature births were not statistically different as to the presence or absence of L. m. in the placentas. Habitual abortions occurred in patients with or without L. m in the placental tissue. Conclusion: Immunohistochemistry may be used to confirm the histopathological diagnosis of listeriosis in placentas and brain tissue of ruminants.

O experimento foi conduzido no Sistema de Pecuária de Leite (SISPEL), na Embrapa, em Pelotas, Rio Grande do Sul, com 32 vacas em lactação da raça Jersey em lactação, divididas em quatro grupos, de acordo com a produção de leite, peso vivo, escore corporal e tempo de lactação. O estudo teve o objetivo de avaliar o efeito da suplementação de diferentes fontes e níveis de selênio (Se) em vacas em lactação, sobre as características físicoquímicas do leite, produção de leite e concentração desse no sangue e leite, assim como verificar a ocorrência do leite instável não ácido (LINA) e as alterações na composição do leite e sangue decorrentes da instabilidade. Os tratamentos foram determinados como: grupo controle (dieta padrão), Selênio Inorgânico 0,3 (dieta padrão + 0,3mg Selenito de sódio/kg de concentrado), Selênio Orgânico 0,3 (dieta padrão + 0,3 mg Selêniometionina/kg de concentrado) e Selênio Orgânico 0,6 (dieta padrão + 0,6 mg selêniometionina/kg de concentrado). No leite, foram analisadas composição química, características físicas, contagem de células somáticas (CCS) e teores de Se, cálcio iônico e uréia e, no sangue, albumina, uréia, triglicerídeos, colesterol, glicose, proteína total, Ca, Mg, P e Se. A suplementação de selênio aumentou linearmente a concentração do mineral no leite e no sangue, independente da fonte. Porém, não ocorreram alterações expressivas nas características físico-químicas, CCS e produção de leite relacionada com a suplementação. Das 124 amostras de leite analisadas durante o experimento, 101 (81,45%) foram estáveis e 23 (18,55%) precipitaram em concentrações de etanol até 72%. O leite classificado como leite instável não ácido (LINA) apresentou maior concentração de cálcio iônico e menor concentração de lactose que o leite normal. O sangue de animais que produziram LINA apresentou maior concentração de uréia e triglicerídeos. / The trial was lead in the intensive system of milk production - SISPEL, at the Embrapa, in Pelotas, Rio Grande do Sul State, with 32 lactating Jersey cows, distributed in four groups, according to milk production, body weight, body condition score and days in milking. The study had the objective to evaluate the effect of the supplementation with different sources and levels of selenium (Se) for dairy cows, on the physical-chemical characteristics of milk, milk yield and selenium concentration in the blood and milk, as well as, to verify the occurrence of not acid unstable milk (LINA) and the alterations in the composition of milk and blood. The treatments were denominated as follows: control (diet without added selenium), Inorganic Selenium (standard diet + 0,3 mg sodium Selenite /kg concentrate), Organic Selenium 0,3 (standard diet + 0,3 mg Selenomethionine/kg concentrate) and Organic Selenium 0,6 (diet standard diet + 0,6 mg selenomethionine/ kg concentrate). Physical-chemical characteristics, somatic cells count (SCC), concentration of Se, ionic calcium and urea in milk and albumen, urea, triglycerides, cholesterol, glucose, total protein, Ca, Mg, P in blood had been analyzed. Supplementation of selenium increased linearly the concentration of the Se in milk and blood, independently of the source. There were not expressive alterations for physical and chemical characteristics, SCC and milk yield related to supplementation. Of the 124 analyzed milk samples during the experiment, 101 (81,45%) were stable and 23(18,55%) precipitated in alcoholic solutions wirth ethanol concentrations to 72%. Milk samples classified as not acid unstable milk (LINA) presented greater concentration of ionic calcium and lower concentration of lactose that stable milk. The blood of animals that had produced LINA presented greater concentration of lactosis and triglycerides.

Este projeto foi desenvolvido no Laboratório de Patologia Experimental do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), com a aprovação da Comitê de Ética em Pesquisa do HCPA e com apoio financeiro parcial do Fundo de Incentivo à Pesquisa e Eventos do HCPA (FIPE). O experimento 1, chamado de projeto piloto, teve como objetivo implementar a técnica de IHQ para identificar a Listeria monocytogenes (L.m.), utilizando anticorpo policlonal antilisteria monocytogenes (Biodesig ). Vários testes foram realizados para acertar a diluição (1:1000) que foi diferente da preconizada pelo fabricante. Os blocos de parafina, de dez placentas provenientes de parto prematuro ou aborto foram utilizados para os cortes histológicos e a preparação das lâminas para a coloração Hematoxilina e Eosina (HE) e imunoistoquímica (IHQ). As lâminas foram identificadas por números para resguardar a identidade das pacientes. O resultado do HE mostrou alterações inflamatórias em oito placentas e L. m. foi identificada pelo IHQ em cinco dessas placentas. O objetivo do 2º experimento foi identificar a L. m. em tecido nervoso cerebral de ruminantes, utilizando a técnica implementada no projeto piloto. O material utilizado neste trabalho foi cedido pelo Setor de Patologia Veterinária do Departamento de Patologia da Universidade Federal de Santa Maria. Os casos estudados (2 ovinos, 1 caprino e 2 bovinos) tinham suspeitas clínicas diversas e as necropsias dos animais evidenciaram aspectos sugestivos da doença. Os cinco casos foram confirmados pelo IHQ, comprovando a importância da utilização desta técnica para o diagnóstico da listeriose no SNC de ruminantes. O 3º experimento objetivou identificar a L. m. em placentas encaminhadas ao Serviço de Patologia do HCPA no ano 2000. Da mesma forma que no experimento 1, as lâminas foram identificadas por números. Após o levantamento realizado nos registros dos exames anatomopatológicos (AP) deste setor, observou-se que 714 AP eram de placentas provenientes de aborto, parto prematuro e nascimento a termo examinados naquele período. Foram sorteados 254 AP para análise através de HE, revelando que 148 desses AP apresentavam alterações inflamatórias (corioamnionite, vilite e deciduite). Os blocos destas placentas foram utilizados para fazer as lâminas e realizar IHQ. A consulta aos prontuários dos casos com alterações inflamatórias permitiu observar que um deles tinha a confirmação bacteriológica de L. m. na placenta, tornando-se este o controle positivo. O controle negativo foi selecionado entre aqueles sorteados que não apresentavam alterações inflamatórias. A presença de L. m. foi identificada em 33,78% das placentas analisadas pela técnica IHQ. Corioamnionite e vilite foram as alterações inflamatórias que mostraram diferença estatística significativa nas placentas positivas. L. m. estava presente nas placentas de 1º, 2º e 3º trimestres gestacionais. A idade das gestantes, casos de aborto e/ou parto prematuro não mostraram diferença estatística significativa com a presença ou ausência de L. m. nas placentas. Abortos habituais ocorreram em pacientes com ou sem L. m. no tecido placentário. Conclusão: a técnica de imunohistoquímica pode ser utilizada para confirmar o diagnóstico histopatológico de listeriose em placentas e tecido nervoso central de ruminantes. / This project was developed at the Pathology Experimental Laboratory of Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), after approval by the local Research Ethics Committee, and received partial financial support from the Research Incentive Fund (FIPE) of HCPA. The first experiment (or pilot scheme) aimed at implementing the immunohistochemistry (IHC) technique for the identification of Listeria monocytogenes (L.m.), by way of anti-listeria polyclonal antibody (Biodesign ). Several tests were performed in order to find the correct dilution (1:1000), which was different from that which had been recommended by the manufacturer. Paraffin-embedded blocks of placentas obtained from premature birth or abortion were used for the histological sections, and the slides were prepared for hematoxylin-eosin (HE) staining and immunohistochemistry. The slides were labeled with numbers in order to preserve patient anonymity. The result of HE staining revealed inflammatory disorders in eight placentas and L.m. was identified by IHC in five of them. The aim of the second experiment was to identify L.m. in the brain tissue of ruminants by employing the technique implemented in the pilot scheme. The material used in this study was provided by the Division of Veterinary Pathology of the Department of Pathology of Universidade Federal de Santa Maria. The animals studied (2 sheep, 1 goat and 2 cows) exhibited several clinical suspicions and the necropsy results were suggestive of the disease. The five cases were confirmed by IHC, highlighting the importance of this technique to the diagnosis of listeriosis in the CNS of ruminants. The aim of the third experiment was to identify L.m. in placentas and abortion specimens that had been referred to the Division of Pathology of HCPA in year 2000. As with the first experiment, the slides were numbered. After surveying the registries of pathoanatomical exams (PAs), we noted that 714 PAs corresponded to placentas, obtained from abortion, premature delivery and full-term birth, examined during that period. Two hundred fifty- four PAs were randomly selected (drawn out) for HE staining, and 148 of these PAs showed evidence of inflammatory disorders (chorioamnionitis, villitis and deciduitis). The blocks of these placentas were used for preparing the slides and carrying out IHC. The analysis of medical records in the cases with inflammatory disorders allowed us to observe that one of the records contained bacteriological confirmation of L.m. in the placenta (positive control). The negative control was chosen among the drawn-out PAs that did not present inflammatory disorders. L. m. was detected in 33.78% of the placentas analyzed by IHC. Chorioamnionitis and villitis showed significant statistical difference in the positive placentas. L. m. occurred in the 1st, 2nd and 3rd trimesters of pregnancy. The age of pregnant women, the cases of abortion and/or premature births were not statistically different as to the presence or absence of L. m. in the placentas. Habitual abortions occurred in patients with or without L. m in the placental tissue. Conclusion: Immunohistochemistry may be used to confirm the histopathological diagnosis of listeriosis in placentas and brain tissue of ruminants.