Made available in DSpace on 2016-08-10T10:36:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antonia Custodia Pedreira.pdf: 4848091 bytes, checksum: 0551fc37f47459d8e6f29f37e4e2a6fc (MD5) Previous issue date: 2005-07-08 / The present work dealt on reflections that we have done on how the Cultural Patrimony of Porto Nacional municipality is approached in elementary schools. Through discursive analysis of elements from the historical/cultural reality, it aims the stimulation of this discussion by both teachers and students. Besides, intends to introduce and reinforce, on scholar community, the importance of patrimonial education through the construction of new elements and practices, on the perspective of the valorization and preservation of the archeo-historical site of Pontal as well as the Cultural Patrimony of Porto Nacional as a whole. / O presente trabalho é o resultado das reflexões que temos feito de como é abordado o Patrimônio Cultural, do município de Porto Nacional pelas escolas de ensino fundamental. Objetiva, a partir da análise discursiva sobre elementos da realidade histórico-cultural, despertar o interesse de professores e alunos pela questão. Além disso, procura introduzir e reforçar, no contexto da comunidade escolar, a importância da Educação Patrimonial através da construção de novos elementos e de novas práticas, na perspectiva da valorização e da preservação do sítio arqueológico e histórico de Pontal e todo Patrimônio Cultural de Porto Nacional.

Os receptores acoplados à proteína G (GPCRs) são proteínas integrais de membrana caracterizados por possuírem sete alfa-hélices transmembranares. Esses receptores são importantes alvos de estudos biomédicos e aproximadamente 40% dos medicamentos atualmente comercializados agem sobre estes receptores. O receptor de Angiotensina II do tipo 1 (AT1) é um GPCR e o principal mediador do Sistema Renina-Angiotensina que tem como principal efetor o octopeptídeo Angiotensina II (AngII). Recentemente foi descrito que as mutações A244S e I103T-A244S no receptor AT1 podem estar relacionadas com a predisposição à fibrilação atrial. Neste trabalho foi realizada a construção, caracterização bioquímica e farmacológica destes mutantes, bem como do mutante I103T, com o objetivo de compreender como a funcionalidade desses receptores mutantes poderiam contribuir para a predisposição à fibrilação atrial. Os mutantes I103T e I103T-A244S revelaram ser mais eficientes e potentes que o receptor selvagem em aumentar os níveis de cálcio intracelular em resposta à AngII. Todos os mutantes estudados apresentaram baixa eficiência quanto à ativação da via das MAPKs e apresentaram comportamento diferente do receptor selvagem quando bloqueados com o antagonista Losartan, seletivo para o receptor AT1 e muito usado na clínica como medicamento anti-hipertensivo. Esses dados ressaltam a relevância do estudo tanto em termos de melhor compreender as bases moleculares da relação entre as mutações e a doença, bem como possível prevenção ao uso de medicamentos que possam interagir e agir diferentemente em receptores com essas mutações. / G-protein coupled receptors (GPCRs) are integral membrane proteins characterized by having seven transmembrane alpha-helices. These receptors are important targets of biomedical studies and approximately 40% of currently marketed drugs act on such receptors. The angiotensin II type 1 receptor (AT1) is a GPCR and the main mediator of the Renin-Angiotensin System whose main effector is the octapeptide Angiotensin II (Ang II). It was recently described that I103T and A244S mutations in the AT1 receptor may be related to the susceptibility to atrial fibrillation. In this study we carried out the construction of these mutants and their biochemical and functional characterization. The I103T and I103T/A244S mutants were shown to be more efficient and potent than the wild-type receptor on the increase of intracellular calcium levels. All mutants showed lower efficcacy for MAPK pathway activation and showed different behavior when compared to the wild-type receptor after antagonism with Losartan. These data highlight the relevance of the present study concerning a better understanding of the molecular basis of cardiovascular diseases and showing that conventional therapies for certain diseases may lead to adverse effects on patients carrying point mutations on the receptor sequence.

A infecção do sítio cirúrgico ocupa o segundo lugar em incidência dentro do ambiente hospitalar e está relacionada à vitória do microrganismo sobre a defesa do hospedeiro; envolve, também, interesses econômicos e sociais e se constitui num desafio aos profissionais de saúde. A presente investigação teve como objetivo identificar os fatores de risco relacionados à infecção do sítio cirúrgico, em paciente submetido à cirurgia eletiva de gastrectomia, potencialmente contaminada, na especialidade de Gastrocirurgia, no período compreendido entre 1998 a 2002, em um hospital público do interior paulista. Para tanto, realizou-se um estudo retrospectivo, por meio do levantamento de informações contidas nos prontuários médicos, utilizando-se para a análise estatística dos dados os testes não paramétricos: Mann-Whitney (variáveis quantitativas) e coeficiente de contingência (variáveis qualitativas). Em 181 casos investigados, detectou-se a ocorrência de infecção do sítio cirúrgico em 17 situações (9,4%), sendo 23,5% classificadas como infecção incisional superficial; 52,9%, infecção incisional profunda e 23,5%, infecção de órgão/espaço. Quanto às variáveis referentes ao período de internação pós-operatório, período de internação total, tempo de cirurgia, sondagem vesical de demora foram associadas à presença de infecção do sítio cirúrgico. Neste estudo não se verificou associação entre infecção do sítio cirúrgico e as variáveis referentes à idade, período de internação pré-operatório, utilização de dreno, sexo, raça, diagnóstico etilismo, tabagismo, presença de doenças crônicas, realização de tricotomia, antibioticoprofilaxia, anti-sepsia, tipo de cirurgia, transfusão sangüínea e focos infecciosos à distância. / Surgical site infection occupies the second place in terms of incidence in the hospital environment and is not only related to the victory of the microorganism on the defense of its host, but also includes economic and social interests. Moreover, it also constitutes a challenge to health professionals. This research aimed to identify the risk factors related to surgical site infection in patients submitted to a potentially contaminated elective gastrectomy, as a part of Gastric surgery, in the period between 1998 and 2002, at a public hospital in the interior of São Paulo, Brazil. Therefore, a transversal study was carried out by means of a medical record information survey, using the following non-parametric tests for statistical data analysis: Mann-Whitney (quantitative variables) and contingency coefficient (qualitative variables). Out of the 181 cases that were examined, the occurrence of surgical site infection was detected in 17 situations (9.4%), 23.5% of which were categorized as superficial incisional infection, 52.9% as deep incisional infection and 23.5% as organ/space infection. The following variables were associated with the presence of surgical site infection: post-operative hospitalization period, total hospitalization period, surgery time, time to dwelling vesical catheter removal. No link could be found between surgical site infection and the variables age, pre-operative hospitalization period, drain usage, gender, race, alcoholism, smoking, history of chronic illnesses, trichotomy, antibiotic prophilaxis, antisepsis, kind of surgery, blood transfusion and distant infection sources.

Iniciativas no sentido de identificar o patrimônio geológico brasileiro com base em estratégias de Geoconservação vêm crescendo ao longo dos anos, em várias regiões do país. O presente estudo visa contribuir para a compreensão da trajetória e abrangência destas pesquisas que, apesar de importantes para a Geoconservação brasileira, são numericamente pouco expressivas devido a quatro fatores preponderantes: i) por serem pontuais; ii) devido à grande extensão do território brasileiro; iii) pela Geoconservação ainda ser uma ciência recente, sendo as pesquisas nacionais representativas apenas a partir de 2010; e iv) ainda que em número crescente, são poucos os pesquisadores envolvidos com a temática. Quanto maior o número de pesquisas realizadas sobre inventários do patrimônio geológico, melhor para a divulgação da Geoconservação no contexto acadêmico, intensificando o envolvimento de geocientistas com a temática, além do diálogo e da reflexão entre os diversos grupos de trabalho atuantes. Como parte destas iniciativas, métodos de inventário e avaliação quantitativa de sítios geológicos foram aplicados no município de Cananeia. O inventário resultou em doze sítios que representam contextos geológicos do Terreno Paranaguá, das intrusões alcalinas e básicas do Cretáceo, das variações do nível do mar no Quaternário e de processos atuais da dinâmica costeira. Onze geossítios foram definidos: 1) Metassedimentos da Praia do Pereirinha e intrusões alcalinas, 2) Metassedimentos da Ponta do Itacuruçá, 3) Serra do Itapitangui, 4) Sienito da Praia do Foles, 5) Granito Cambriú, 6) Granito Peralcalino do Ariri, 7) Granito milonítico do Ariri, 8) Intrusão diabásica do Pindaúba, 9) Intrusão alcalina do Morro de São João, 10) Terraço marinho pleistocênico do Mar Pequeno e 11) Processo erosivo dos depósitos litorâneos da Enseada da Baleia. Apenas um sítio da geodiversidade foi identificado, representado pelo Terraços de abrasão marinha da Ilha do Cardoso. A avaliação quantitativa foi feita por meio da plataforma de cadastro nacional GEOSSIT, do Serviço Geológico do Brasil (CPRM). Os parâmetros avaliados para cada geossítio relacionam-se ao Valor Científico, Risco de Degradação e Potencial de Uso Educativo e Turístico. Em conjunto, estes dados pretendem contribuir para a reflexão acerca da situação atual da prática da Geoconservação no Brasil e para auxiliar iniciativas de valorização, divulgação e gestão da geodiversidade. / Initiatives to identify Brazilian geological heritage based on Geoconservation strategies have been growing over the years in several regions of the country. The present study aims to contribute to the understanding of the trajectory and comprehensiveness of these researches that, although important for the Brazilian Geoconservation, are numerically little expressive due to four preponderant factors: i) being punctual; ii) due to the great extent of the Brazilian territory; iii) Geoconservation is still a recent science, and national surveys are only representative from 2010; and iv) although in increasing numbers, few researchers are involved with the subject. The greater the number of researches carried out on geological heritage inventories, the better for the dissemination of Geoconservation in the academic context, intensifying the involvement of geoscientists with the theme, as well as dialogue and reflection among the various working groups. As part of these initiatives, methods of inventory and quantitative evaluation of geological sites were applied in the municipality of Cananeia. The inventory resulted in twelve sites representing the geological contexts of the Paranaguá Terrain, the alkaline and basic intrusions of the Cretaceous, the variations of sea level in the Quaternary and current processes of the coastal dynamics. Eleven geosites were defined: 1) Pereirinha Beach metassediments and alkaline intrusions, 2) Metassediments of Ponta do Itacuruçá, 3) Serra do Itapitangui, 4) Sienito of Praia do Foles, 5) Cambriú Granite, 6) Peralcalino Granite of Ariri, 7) Ariri milonitic granite, 8) Pindaúba intrusion, 9) Alkaline intrusion of Morro de São João, 10) Pleistocene marine terrace of the Mar Pequeno, and 11) Erosive process of the coastal deposits of the Enseada da Baleia. Only one site of the geodiversity was identified, represented by the Terraces of marine abrasion of the Cardoso Island. The quantitative evaluation was done through the GEOSSIT national cadastre platform from the Geological Survey of Brazil (CPRM). The parameters evaluated for each geosit are related to the Scientific Value, Risk of Degradation and Potential of Educational and Tourist Use. Together, these data intend to contribute to the reflection about the current situation of the practice of Geoconservation in Brazil and to assist initiatives of valorization, diffusion and geodiversity management

Castro, PTO. Fatores de risco para infecção do sítio cirúrgico em cirurgias oncológicas do aparelho digestório do Hospital de Câncer de Barretos. 2009. 49 p. Dissertação (Mestrado). Faculdade de Medicina: Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. 2009. Infecção do sítio cirúrgico (ISC) é a infecção hospitalar (IH) de maior prevalência em pacientes cirúrgicos, determinando aumento do tempo de hospitalização, dos custos e da morbidade e letalidade. É importante conhecer os principais fatores de risco desta infecção para estabelecer medidas de prevenção através dos fatores que podem ser modificáveis. O objetivo do presente estudo foi descrever a ocorrência de ISC e estudar os seus fatores de risco em cirurgias oncológicas do aparelho digestório no Hospital de Câncer de Barretos. Indivíduos submetidos à cirurgia oncológica do aparelho digestório, no período de 01/08/2007 a 10/08/2008, foram acompanhados prospectivamente por 30 dias para diagnóstico de ISC. Simultaneamente, foram estudados possíveis fatores de risco, ligados ao paciente e ao procedimento cirúrgico. Foram avaliadas 210 cirurgias, com uma incidência global de ISC de 23,8% . As seguintes variáveis apresentaram associação independente de risco: tempo de cirurgia, tipo de cirurgia, radioterapia antes da cirurgia e tempo de experiência do cirurgião. Os fatores de risco encontrados neste estudo descrevem um grupo de indivíduos com maior risco de ISC, nos quais novos protocolos de prevenção devem ser considerados. / Castro, PTO. Risk factors for Surgical Site infection during oncology surgeries of digestive system at Barretos Cancer Hospital. 2009. 59 p. Dissertation (Master degree). School of Medicine : University of São Paulo. Ribeirão Preto. 2009. Surgical Site Infection (SSI) is the most prevalent hospital infection among surgical patients, and it increases length of stay hospitalization, higher cost and greater morbidity and mortality. It is important to know the main risk factors for such infections, in order to establish prevention measures through factors that can be modified. The objective of this study is to describe the occurrence of SSI and possible risk factors during oncology surgery of the digestive system, at Barretos Cancer Hospital. Between August 1 2007 and August 10 2008, individuals undergoing oncology surgery of the digestive system were followed up prospectively for 30 days in order to diagnose any SSI. Possible risk factors related to the patient and to surgery were studied. Two hundred ten operations were evaluated. The overall incidence of SSI was 23.8%. The following variables were independently associated with SSI: duration of surgery, type of surgery, radiotherapy prior to surgery and the surgeons length of experience. Risk factors found in this study describes a group of individuals with increased risk of ISC, in which new protocols of prevention should be considered.

A infecção de sítio cirúrgico (ISC) é uma complicação frequente que pode acometer o paciente submetido ao procedimento anestésico cirúrgico, acarretando o aumento da morbidade, mortalidade e dos custos hospitalares, bem como do sofrimento emocional e físico do paciente. Este estudo teve como objetivos estimar a incidência de ISC em pacientes submetidos à cirurgia abdominal, identificar as taxas de ISC segundo fatores relacionados ao paciente, ao procedimento anestésico cirúrgico e ao ambiente da sala cirúrgica, identificar os fatores de risco e de proteção, e identificar o efeito independente da hipotermia sobre a incidência de ISC. Para o alcance dos objetivos propostos, conduziu-se estudo de coorte com 484 pacientes submetidos à cirurgia abdominal. Para a coleta de dados elaborou-se instrumento, submetido à validação aparente e de conteúdo por cinco juízes. A coleta de dados foi realizada na unidade de internação ou na sala de recepção do centro cirúrgico, no período intraoperatório, no período de internação e reinternação, e no retorno no 30° dia após a cirurgia. A hipotermia foi avaliada a partir de três mensurações distintas, a saber: 1 - temperatura Delta; 2 - número de vezes em que a temperatura do paciente foi <36,0°C; 3 - tempo de exposição, em minutos, em que o paciente esteve submetido a temperaturas <36,0°C. A incidência bruta de ISC foi de 20,25% (98 casos). A incidência de ISC apresentou maior magnitude nos participantes do sexo feminino (22,43%), nos pacientes na faixa etária de 60 anos e mais (27,22%), e com obesidade classe II (25,71%). As médias de duração da anestesia e da cirurgia foram maiores no grupo com ISC, a incidência de ISC apresentou maior magnitude naqueles pacientes submetidos a cirurgias de porte III (85,71%) e anestesia combinada (41,10%). A incidência de ISC apresentou maior magnitude naquele participante que no final da cirurgia estava exposto à temperatura da sala de operação < 20°C (33,33%), e naqueles expostos à umidade do ar entre 45-55 kg/m3 (22,18%). Na mensuração 1 (modelo final), a hipotermia não apresentou relação causal com a ISC, e as variáveis classificação ASA, porte cirúrgico e tipo de anestesia permaneceram independentemente associadas à ISC. Na mensuração 2 (modelo final), identificou-se o efeito causal independente da hipotermia sobre a ISC, os pacientes que estiveram submetidos mais de cinco vezes a temperaturas <36,0°C apresentaram maior probabilidade (89%; RR=1,89) de desenvolverem ISC, as variáveis classificação ASA e tipo de anestesia mantiveram-se independentemente associadas à ISC. Na mensuração 3 (modelo final), também identificou-se o efeito causal independente da hipotermia sobre a ISC, os pacientes que estiveram submetidos a mais de 75 minutos a temperaturas <36,0°C apresentaram maior probabilidade (89%; RR=1,89) de desenvolverem ISC, as variáveis classificação ASA e tipo de anestesia permaneceram independentemente associadas à ISC. A raquianestesia foi fator de proteção independente para ISC, nos três modelos finais. Os resultados evidenciados poderão subsidiar a tomada de decisão dos profissionais de saúde na implementação de ações direcionadas para a prevenção e controle de ISC, com ênfase em medidas para a prevenção da hipotermia perioperatória / Surgical site infection (SSI) is a frequent complication that can affect the patient undergoing surgical anesthetic procedure, leading to increased morbidity, mortality and hospital costs, as well as emotional and physical suffering of the patient. This study aimed to estimate the incidence of SSI in patients undergoing abdominal surgery; to identify SSI rates according to factors related to the patient, to the surgical anesthetic procedure and to the operating room environment; to identify risk and protective factors; and to identify the independent effect of hypothermia on the incidence of SSI. To reach the proposed objectives, a cohort study was conducted with 484 patients undergoing abdominal surgery. An instrument was developed for data collection, and submitted to face and content validation by five judges. Data collection was performed in the inpatient care unit or in the surgical center reception room, during the intraoperative period, the hospitalization and readmission period, and on the 30th postoperative day. Hypothermia was evaluated from three different measurements: 1) delta temperature; 2) number of times the patient temperature was <36.0°C; 3) exposure time, in minutes, in which the patient was submitted to temperatures <36.0°C. The crude incidence of SSI was 20.25% (98 cases). The incidence of SSI presented higher magnitude in female participants (22.43%), in patients aged 60 years and over (27.22%), and with class II obesity (25.71%). The mean duration of anesthesia and surgery were higher in the SSI group, the SSI incidence was higher in patients undergoing surgery III (85.71%) and combined anesthesia (41.10%). The incidence of SSI presented higher magnitude in participants who were exposed, in the end of surgery, to temperature <20°C (33.33%) at the operating room; and in those exposed to air humidity between 45-55 kg/m3 (22, 18%). In the measurement 1 (final model), hypothermia did not present a causal relationship with SSI, and the variables ASA classification, surgical size and type of anesthesia remained independently associated with SSI. In the measurement 2 (final model), the independent causal effect of hypothermia on SSI was identified; patients who were submitted more than five times to temperatures <36.0°C were more likely (89%; RR=1.89) to develop SSI, the variables ASA classification and type of anesthesia remained independently associated with SSI. In the measurement 3 (final model), the independent causal effect of hypothermia on SSI was also identified; patients who were submitted to more than 75 minutes to temperatures <36.0°C were more likely (89%; RR = 1.89) to develop SSI, the variables ASA classification and type of anesthesia remained independently associated with SSI. Spinal anesthesia was an independent protective factor for SSI in the three final models. The found results may support the decision-making of health professionals in the implementation of actions directed to the prevention and control of SSI, with emphasis on measures for the prevention of perioperative hypothermia

Este trabalho é um estudo de caso, inserido na problemática do planejamento urbano, quando se pretende pontuar circunstâncias e conseqüências das ações de intervenção do poder público municipal sobre a área desse sítio histórico urbano. Destacamos que, na última década, especialmente entre os anos de 2000 e 2010, esse sítio histórico urbano, passou por transformações devido a intervenções realizadas pelo poder público municipal. Nesse recorte buscamos perceber as formas; a aparência original dos prédios; a descaracterização das edificações e a substituição dos mesmos; o traçado das ruas; a conservação da área verde e do patrimônio ambiental, como também, a ocupação e o uso do solo com as novas atividades comerciais e de lazer, tendo como exemplo, o complexo Orla Taumanan. Nessas contradições entre as políticas de reurbanização e as propostas de revitalização, questionamos de que forma o poder público e a sociedade civil estão reagindo? Partimos do entendimento de que tanto a sociedade quanto o poder público, não perceberam a importância do patrimônio cultural e natural do lugar. Acreditamos que o processo de revitalização pode incorporar e valora o espaço urbano e o patrimônio arquitetônico com todo o valor simbólico herdado da formação inicial do núcleo embrionário existente. Sendo assim, a carência de investigação e a urgência de um entendimento acerca desse assunto, que trata da proteção do sítio urbano histórico de Boa Vista, fornecerá subsídios para futuras políticas públicas, que são essenciais para proteger a área enfocada, trazendo benefícios para a sociedade. / This thesis proposes theme is a case study, which concerns to urban planning, relating to circumstance and consequence actions for intervention in the municipality on the grounds of urban historical place. We highlight that, in the last decade, particularly from 2000 to 2010, this urban historical place, changed dramatically because of interventions carried through the municipality. As for this, we search for shapes; the original look of the buildings and their deconstruction and replacement; the routes of the streets; the conservation of the green area and the environmental patrimony, as well as, the occupation and the use of the ground as new commercial and leisure activities, for instance, the Orla Taumanan. In these contradictions between reurbanization politics and the revitalization proposals, we ask: how the public power and the civil society are reacting? We agree that not only the society but also the public power do not realize the importance of cultural and natural patrimony of the place. We believe that the revitalization process may unite and value all urban area and the architectural patrimony with their symbolic value inherited from the initial formation of an existing embryonic nucleus. As for this, the lack of researches and an urgent agreement relating to this field, that deals with the protection of the historical urban place in Boa Vista, will supply subsidies future public politics, which are essential for protection of the focused area, bringing benefits for the whole society.

Este trabalho pretende debater algumas das possíveis relações entre a História e o campo do patrimônio cultural, particularizado pelos remanescentes da redução de São Miguel Arcanjo e Museu das Missões, tombados pelo Instituto do Patrimônio Histórico e Artístico Nacional (IPHAN). Busca compreender em que medida e por quais processos o arquiteto Lucio Costa e o zelador Hugo Machado, por meio de suas atuações junto aos remanescentes, aproximaram-se da operação historiográfica e atuaram, cada qual ao seu modo, na conformação de uma narrativa sobre Missões por meio da organização e preservação dos referidos bens culturais. Num primeiro momento, apresento pontos da trajetória do IPHAN, buscando identificar aspectos que caracterizam a ação de seleção e preservação do patrimônio cultural em nível federal e que julgo serem importantes para a composição de um quadro interpretativo das ações do arquiteto e do zelador em São Miguel entre 1937 e 1950.Em seguida, particularizo a análise das atuações de Lucio Costa e Hugo Machado, relacionando-as, na medida do possível, com a conformação de uma narrativa específica sobre a experiência missioneira, desenvolvida a partir da relação entre temporalidades distintas e do trânsito entre História e Memória. / This research presents a debate on a possible relationship between History and the cultural heritage field, distinguished by the remainders of São Miguel Arcanjo reduction and the Missions Museum, both protected by the National Institute of Historic and Artistic Heritage (Instituto do Patrimônio Histórico e Artístico Nacional - IPHAN). The study attempts to understand by which processes the architect Lucio Costa and the caretaker Hugo Machado, by means of their performances at the remainders, came close at the historiographical operation and acted, each one in his own way, on the Missions narrative building, through the organization and preservation of the related cultural heritage.At a first moment, I present some points of IPHAN’s trajectory attempting to identify aspects that characterize the election and preservation of the cultural heritage in federal level, and which I judge important for the construction of an interpretative frame on the architect and the caretaker actions in São Miguel between 1937 and 1950. After that, I focus the analysis at the performances of Lucio Costa and Hugo Machado, relating them as possible to the construction of a specific narrative on Missions experience, developed by the relationship of different temporalities and by the transit between History and Memory.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2015-02-25T16:22:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_FragmentosCeramicaArqueologica.pdf: 2730320 bytes, checksum: 17b6905cf4258038493ac0e737626392 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva (arosa@ufpa.br) on 2015-02-25T17:15:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22974 bytes, checksum: 99c771d9f0b9c46790009b9874d49253 (MD5) Tese_FragmentosCeramicaArqueologica.pdf: 2730320 bytes, checksum: 17b6905cf4258038493ac0e737626392 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-25T17:15:34Z (GMT). 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Muitos estudos se concentraram sobre os aspectos estilísticos das vasilhas cerâmicas representativas desses fragmentos, e mais restritamente são motivos de estudos de caracterização químico-mineral, para identificação de matéria prima, procedência, tecnologia, e principalmente a origem do seu conteúdo em P, variado e relativamente elevado. Esses teores de P estão representados por fosfatos de alumínio, em geral, amorfos a variscitaestrengita, e sua origem é creditada ao uso das vasilhas para o preparo de alimentos. Embora já aventado a possibilidade de que estes fragmentos possam responder pela a fertilidade continuada destes solos, estudos experimentais não foram realizados para demonstrar a potencial contribuição destes fragmentos para reconhecida fertilidade das TPA. O presente trabalho demonstra esta possibilidade, e para atingir este fim foram selecionados fragmentos de três sítios arqueológicos com características distintas situados em diferentes porções da Amazônia: Monte Dourado 1 (Almeirim-PA), Jabuti (Bragança-PA) e Da Mata (São José de Ribamar-MA). Inicialmente 325 fragmentos cerâmicos foram descritos mesoscopicamente e submetidos à caracterização mineralógica e química por DRX; microscopia óptica; TG-ATD; IV-FT; MEV-SED; ICP-MS e ICP-OES; adsorção gasosa; medidas dos parâmetros de fertilidade; e ensaios de dessorção de P. Com estes dados objetivou-se identificar matérias primas, processos produtivos, modificações ocorridas durante o uso e após o descarte, e desta forma avaliar as possíveis contribuições destes fragmentos a fertilidade das TPA. A hipótese de contaminação por nutrientes provindos dos alimentos durante o uso das vasilhas para preparação de alimentos foi comprovada através de experimento em laboratório simulando condições de cozimento, onde foi avaliada a incorporação de cálcio e fósforo em panelas cerâmicas similares as arqueológicas. Os resultados mostram que os antigos povos ceramistas utilizaram matérias primas dos arredores de seus sítios. A composição em termos de uma matriz com metacaulinitica e quartzo, por vezes muscovita é comum a todos os fragmentos, indicando matéria prima rica em caulinita e quartzo, fundamental para produção das vasilhas. A metacaulinita sugere que a queima ocorreu em torno de 550°C. Por outro lado, adições de antiplásticos distintos promoveram diferenças químicas e mineralógicas fazendo com que os fragmentos no seu todo divirjam entre si: os do sítio Da Mata se caracterizam pelo emprego exclusivo de cariapé, em Monte Dourado 1 o cariapé com rochas trituradas de mineralogia complexa, e no Jabuti conchas por vezes cariapé. Fosfatos amorfos são comuns a todos os sítios, embora em teores distintos, sendo que fosfatos de alumínio cristalinos tipo crandallitagoyazita foram encontrados apenas no Jabuti e fosfatos de Fe-Mg-Ca, a segelerita, em Monte Dourado 1. Os fosfatos amorfos e a crandallita-goyazita foram interpretados como indicadores de uso das vasilhas representativas dos fragmentos para preparação de alimentos, enquanto a segelerita uma neoformação ocorrida após o sítio ter sido submetido às condições hidromórficas, que persistem até atualidade. Em termos das concentrações de P, nos fragmentos do sítio Da Mata estão as menores, em média, 1,04% de P₂O₅ que assemelham-se a maioria dos fragmentos já investigados, enquanto os do Jabuti são os mais elevados (em média, 7,75%) já conhecidos, e nos do Monte Dourado 1 são, em média, 2,23% . É provável que os altos teores de P, Ca e Sr sejam provenientes da dieta alimentar a base de mariscos, como demonstra a riqueza em conchas nos fragmentos. Os teores elevados de Ca em Monte Dourado 1 refletem a presença de labradorita no antiplástico. A fertilidade potencial dos fragmentos cerâmicos é nitidamente superior a dos solos TPA quando analisados sem os fragmentos. Portanto é plausível se supor que os fragmentos podem ser fonte dos macronutrientes e micronutrientes. Isto foi comprovado através dos ensaios que comprovara a dessorção de P, a qual ocorre de forma lenta, um aspecto muito importante para reforçar a persistência da fertilidade. Essa dessorção é mais bem descrita pelo modelo de Freundlich que sugere interações entre os íons adsorvidos. O experimento que simulou condições de cozimento mostrou que o Ca e o P podem ser adsorvidos tanto nas paredes quanto nas tampas das panelas cerâmicas, porém concentrações mais elevadas são evidenciadas nas paredes. Embora o Ca tenha sido adsorvido não foi identificada uma fase seja ela amorfa ou cristalina contendo este elemento, provavelmente porque o tempo não foi suficiente. Porém quanto ao P, a adsorção ocorreu, e já a partir de 600 h formou-se variscita, um fosfato de alumínio, nas paredes das panelas. Portanto os fosfatos de alumínio podem se formar ainda nas vasilhas cerâmicas durante o preparo de alimento por cozimento, assim, sua presença nas das vasilhas cerâmicas se constitui, em um importante indicador de uso das mesmas para o cozimento de alimentos e seus fragmentos nos solos são fonte potencial importante de fertilidade. / Soils of the Amazon Dark Earth (ADE) type are known for their high fertility, which contrasts with the typically poor soils found throughout most of the Amazon. The fertility of these soils appears to persist even after their intensive use for agriculture. The ADE are usually rich in sherds, important evidence linking them to the occupation of the region by prehistoric populations. Many studies have focused on the stylistic characteristics of the vessels represented by these sherds, although less attention has been paid to the chemical and mineralogical features of this material, which are important for the identification of the raw material use to produce the artifacts, provenience, technology, and in particular the origin of their relatively high P content. These high levels of P are derived from aluminum phosphates, which are generally amorphous to variscite-strengite, and have been linked to the use of the pots for the preparation of food. While the possible role of the sherds in the maintenance of the fertility of ADE has been widely discussed, no experimental data have been presented to confirm this connection. This study presents systematic evidence that the sherds contribute to the fertility of the soils. For this, sherds were obtained from three archeological sites with distinct characteristics located in different parts of the Amazon: Monte Dourado 1 (Almeirim, Pará), Jabuti (Bragança, Pará), and Da Mata (São José de Ribamar, Maranhão). Initially, 325 sherds were first described mesoscopically and then their chemical and mineralogical composition was determined by XRD, optical microscopy, TGA/DTA, FT-IR, SEM-EDS, ICP-MS and ICP-OES. Different parameters of fertility were then measured, followed by gaseous adsorption tests, and finally, P desorption assays. These data were used to identify the raw materials used in the fabrication of the vessels, details of the productive process, modifications occurring during the use of the utensils and after being discarded, with the aim of evaluating the potential contribution of these sherds to the fertility of the ADE soils. The hypothesis of contamination by nutrients from foods during the use of the vessels for the preparation of meals was confirmed by a laboratory experiment simulating cooking conditions using ceramic pots similar to the archeological artifacts, and measuring the incorporation of Ca and P during the cooking process. The results indicate that the ancient ceramicist peoples used raw materials available in the area surrounding their habitation sites. The composition of the sherds, all of which are made from a matrix of metakaolinite and quartz, and occasionally muscovite, indicating raw materials rich in kaolinite and quartz, which are fundamental to the production of ceramic artifacts. The presence of metakaolinite indicates that the pots were fired at approximately 550°C. However, the addition of different types of antiplastic contributed to chemical and mineralogical variation among sites in the overall composition of the sherds. At Da Mata, only cariapé was used, while at Monte Dourado 1, the cariapé was mixed with crushed rocks with a complex mineralogical content, and at Jabuti, shells were used in addition to cariapé. Amorphous phosphates are common to all the sites, albeit at distinct levels, with crystalline aluminum phosphates of the crandallite-goyazite type being found only at Jabuti, and Fe-Mg-Ca phosphates, segelerite, being exclusive to Monte Dourado 1. The amorphous phosphates and crandallite-goyazite were considered to be indicators of the use of the original pots (from which the sherds were derived) for the preparation of food, whereas the segelerite was interpreted as a neoformation following exposure of the fragments to the hydromorphic conditions that persist to the present day. The lowest phosphorus concentrations-1.04% of P₂O₅ on average- were recorded at Da Mata, and were similar to the majority of sherds studied up until now, whereas the highest concentrations (a mean of 7.75%) were recorded at Jabuti, the highest values yet reported. At Monte Dourado 1, the mean concentration was 2.23%. It seems likely that the high levels of P, Ca, and Sr are related to a diet rich in shellfish, as reflected in the diversity of shells fragments found in the sherds. The high levels of calcium recorded at Monte Dourado 1 reflect the presence of labradorite in the temper. The potential fertility of the sherds is clearly greater than that of the ADE soil when analyzed without the ceramics. It thus seems reasonable to assume that the sherds are the source of the macro- and micronutrients found in the soil. This was confirmed through desorption assays, which showed that P was desorbed at a slow rate, a characteristic which may be especially important for the persistence of fertility. This process is best described by the Freundlich model, which indicates the occurrence of interactions among the adsorbed ions. The experiment that simulated cooking conditions indicated that the Ca and P may be adsorbed into both the sides and lids of the ceramic pots, albeit with higher concentrations being accumulated in the sides. While calcium was adsorbed, no phase of this element was identified, either amorphous or crystalline, probably because the duration of the experiment was too short. By contrast, the chemical adsorption of the P did occur, and after 600 h of cooking, variscite, an aluminum phosphate, formed in the sides of the pots. Aluminum phosphates may thus form in the ceramic vessels during the cooking of food. These results indicate that the presence of aluminum phosphates in the matrix of the ceramic vessels represents a reliable indicator of their use as cooking vessels, and that the sherds of these utensils in the soil constitute a potentially important source of fertility.

Nesse projeto trabalhamos com uma &#946;-glicosidase digestiva da larva da lagarta Spodoptera frugiperda (Sf&#946;gli50, 50 kD - AF052729), expressa na forma de proteína recombinante em E.colli. O nosso objetivo foi estudar o papel de dois resíduos de aminoácidos envolvidos na atividade catalítica da Sf&#946;gli50. O primeiro resíduo estudado foi o Y456, envolvido na afinidade pela porção redutora do substrato (aglicone), o segundo resíduo foi o N329 envolvido na modulação do pH ótimo. Estudo do papel do resíduo Y456 na afinidade pelo aglicone do substrato. O sítio-ativo da Sf&#946;gli50 é formado por quatros subsítios (-1, +1, +2, e +3). O subsítio que acomoda a porção não-redutora do substrato (glicone) recebe numeração negativa (-1), já os subsítios que acomodam a porção redutora do substrato (aglicone) recebem números positivos (+1, +2 e +3). Trabalhando com duas &#946;-glicosidases de plantas (milho e sorgo), Cicek et al. (2000) demonstraram que uma pequena porção da extremidade C-terminal destas &#946;-glicosidases (462SSGYTERF469 - numeração da enzima do sorgo) está envolvida na especificidade pelo aglicone do substrato, sendo que muitos desses aminoácidos são conservados em outras &#946;-glicosidases da família 1. O alinhamento das sequências destas duas enzimas com a Sf&#946;gli50 sugere que Y456 pode fazer parte do sítio de ligação do aglicone nesta &#946;-glicosidase de inseto. Utilizando experimentos de mutação sítio-dirigida, o Y456 foi substituído por uma alanina (mutante Y456A) sendo que este foi expresso na forma de proteína recombinante em bactérias BL21 DE3 utilizando o vetor pT7-7. O mutante Y456A foi parcialmente purificado através de uma cromatografia hidrofóbica em sistema de FPLC, e caracterizado utilizando diversos inibidores competitivos (glucono &#948;-lactona, celobiose, celotriose, pentilbglicosídeo e octilbtioglicosídeo). Comparando os Kis obtidos para a Sf&#946;gli50 selvagem e mutante Y456A com os inibidores glucono &#948;-lactona, celobiose e celotriose, foi proposto que Y456 encontra-se no subsítio +1 do sítio ativo da Sf&#946;gli50. Já através da comparação entre os inibidores octil&#946;tioglicosídeo e pentil&#946;glicosídeos constatou-se que Y456 interage com uma porção polar do aglicone do substrato, talvez através de uma ligação de hidrogênio. Baseando-se nestes Kis foi calculada a energia de associação de resíduos de glicose e grupos alquila nos subsítios +1 e +2, indicando que o subsítio +1 do mutante Y456A tem uma especificidade mais ampla frente à ligantes polares (glicose) e apolares (grupos butil) do que a enzima selvagem. Sabendo que este resultado foi obtido removendo-se um resíduo com um grupo polar na cadeia lateral (Y456), estes dados estão de acordo com a hipótese de que a especificidade dos subsítios da região de ligação do aglicone é determinada por um balanço entre resíduos polares e apolares (Marana et al., 2001). Estudo do papel do resíduo N329 na modulação do pH ótimo. O mecanismo de catálise da Sf&#946;gli50 é dependente de dois resíduos de ácido glutâmico: um doador de prótons (E187 - pKa= 7,5) e um nucleófilo (E399 - pKa = 5,0). Sendo o pH ótimo da Sf&#946;gli50 (6,2) uma média aritmética dos pKas destes dois resíduos catalíticos. Uma análise estrutural do sítio ativo da Sf&#946;gli50 mostra que o resíduo N329 forma ligações de hidrogênio com o resíduo E187 (doador de prótons), talvez atuando na modulação do seu pKa. Para estudar o papel do resíduo N329 na atividade da Sf&#946;gli50 foram construídos 3 mutantes, nos quais tal resíduo foi substituído por alanina (N329A), ácido aspártico (N329D) e uma glutamina (N329Q). Os mutantes foram expressos na forma de proteína recombinante em bactérias BL21 DE3 utilizando os vetores pT7-7 e pCal-n-Flag. Entretanto, tentativas de purificação das Sf&#914;gli50 mutantes através de cromatografia hidrofóbica foram infrutíferas, sugerindo uma possível inativação destas enzimas. Esta hipótese foi reforçada pela purificação das Sf&#946;gli50 mutantes e selvagem contendo o peptídeo de fusão CBP (calmodulin binding peptide) através de cromatografia de afinidade. Este experimento demonstrou que as enzimas mutantes eram de fato inativas. Frente à estes resultados não foi possível concluir a caracterização do efeito do pH na atividade catalítica das Sf&#946;gli50 mutantes N329A, N329D e N329Q. Por fim, foi proposto que a inativação da Sf&#946;gli50 devido à mutações na posição N329 pode resultar de uma desnaturação das enzimas mutantes ou do reposicionamento do ácido catalítico devido à perda ou alteração da interação com o resíduo 329. / In this project it was studied the role of two residues (N329 and Y456) in the catalytic activity of a digestive &#946;-glycosidase from Spodoptera frugiperda (Sf&#914;gli50 - AF052729). N329 is believed to modulate the enzyme pH optimum, whereas Y456 may participate in the binding of the substrate aglycone. Role of Y456 The peptide 462SSGYTERF469 of the sorghum &#946;-glycosidase is proposed to be part of the aglycone binding site in that enzyme. Some of those residues are conserved in Sf&#946;gli50, among them Y456. Using site-directed mutagenesis Y456 was replaced by A and this mutant (Y456A) expressed in bacteria. Following that, this mutant enzyme was partially purified using hydrophobic chromatography. Inhibition experiments showed that binding of &#948;-gluconolactone, which occupies subsite -1, is not affected by that mutation. In contrast, Ki values for cellobiose (that binds to subsites -1 and +1) and cellotriose (that binds to subsites -1, +1 and +2) are two-fold higher than those of wild-type enzyme, indicating that mutation Y456A decrease the interaction with these oligocellodextrins. Moreover, binding of pentyl and octyl&#946;glucosides is not affected by mutation Y456A, suggesting that Y456 interacts with aglycone polar groups. Finally, evaluation of glucose and butyl binding energies in subsite +1 revealed that mutant Y456A specificity is broader than that of wild-type enzyme. Role of N329 A structural model of Sf&#946;gli50 active site revealed that catalytic proton donor (E187) may interact with N329. In order to study the role of this interaction in the activity of Sf&#946;gli50, N329 was replaced by A, D and Q (mutants N329A, N329D and N329Q, respectively). These mutants were expressed as recombinant proteins in bacteria and purified through affinity chromatography, revealing that Sf&#946;gli50 was inactivated by those mutations. It was proposed that this inactivation may be due to protein desnaturation or a wrong positioning of the catalytic proton donor.