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Desenvolvimento e caracterização de carreadores lipídicos nanoestruturados contendo praziquantel

Santos, Fernanda Kolenyak dos [UNESP] 20 January 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-20Bitstream added on 2014-06-13T20:57:40Z : No. of bitstreams: 1 santos_fk_me_arafcf.pdf: 504042 bytes, checksum: ff6921c63666c7dee3c57494e9ca1b8f (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A esquistossomose é uma doença que atinge cerca de 200 milhões de pessoas no mundo todo. A alta incidência desta doença está ligada à falta de condições sanitárias, ao diagnóstico tardio e, principalmente, à falta de tratamento medicamentoso eficiente. O praziquantel é o fármaco de primeira escolha para o tratamento da esquistossomose. No entanto, falhas no tratamento com este fármaco e relatos de isolamento de S. mansoni tolerantes podem comprometer a eficiência do PZQ. Assim, o PZQ representa um fármaco em que pesquisas para melhorar as suas propriedades biofarmacêuticas são necessárias, pois apresenta baixa solubilidade em meio aquoso e biodisponibilidade baixa ou errática. O presente trabalho vê como finalidade desenvolver carreadores lipídicos nanoestruturados (NLC) contendo praziquantel empregando como sistema lipídico o monoestearato de glicerila (GMS) e o ácido oléico (AO) e como sistema tensoativo a associações de monoestearato de polioxietileno sorbitano 60 (TWEEN60), fosfatidilcolina, Poloxamer (Pluronic F-127 PLU). Os NLCs foram preparados através de dois diferentes métodos, de sonicação e alta velocidade de cisalhamento a quente. Os sistemas foram caracterizados através da avaliação dos parâmetros de distribuição de tamanho, potencial zeta, índice de polidispersidade e eficiência de encapsulação. O transporte intestinal do fármaco foi avaliado através do modelo do saco intestinal invertido. Ambos os métodos de obtenção empregados mostraram-se eficazes para o preparo dos NLCs em escala nanometrica, com índice de polidispersidade homogeneo e um... / The Schistosomiasis is a debilitating disease with high misfit in the quality of people life reached about 200 million people worldwide. The high incidence of this disease is linked to poor sanitary conditions, late diagnosis, and especially the lack of effective drug treatment. Praziquantel is the drug of first choice for treatment of schistosomiasis. However, treatment failures with this drug and reports of isolation of S. mansoni tolerance may compromise the efficiency of PZQ. Thus, the PZQ represents an example in which surveys to improve the biopharmaceutical properties are needed, since it has low solubility in aqueous and low or erratic bioavailability. This work aims to develop nanostructured lipid carriers (NLC) containing praziquantel employing as lipid system the glycerin monostearate (GMS) and oleic acid (OA) as a surfactant system and some combination of polyoxyethylene sorbitan monostearate 60 (TWEEN60), phosphatidylcholine and Poloxamer (Pluronic F-127 PLU) as a surfactant system. NLCs were prepared by two different methodologies, the sonication and high shear rates to warm. The systems were characterized by determination of size distribution, zeta potential, polydispersity index and encapsulation efficiency. The intestinal transport of the drug was evaluate by using the model of inverted intestinal sac. Both methods were effective for the preparation of NLCs with an average diameter in the nanometer range, the polydispersity index indicating homogeneity of particle size and a zeta... (Complete abstract click electronic access below)
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Up-converting phosphor - lateral flow caa, kato-katz and poc-cca: a comparative analysis in Schistosoma mansoni infection diagnosis in a low endemic area / Up-converting phosphor - lateral flow, kato-katz e poc-cca: uma anÃlise comparativa no diagnÃstico da infecÃÃo por Schistosoma mansoni

Mariana Silva Sousa 29 January 2015 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A esquistossomose acomete pelo menos 230 milhÃes de pessoas e està associada com pelo menos 200.000 mortes anualmente no mundo. A detecÃÃo dos antÃgenos circulantes de Schistosoma està se tornando uma ferramenta promissora para o diagnÃstico de infecÃÃes ativas. Os nÃveis sÃricos desses antÃgenos estÃo relacionados com a carga parasitÃria e a intensidade de infecÃÃo e diminuem rapidamente apÃs o tratamento medicamentoso, demonstrando ser uma abordagem Ãtil tambÃm na avaliaÃÃo da resposta terapÃutica. Foi avaliada a prevalÃncia da infecÃÃo ativa pelo S. mansoni atravÃs do ensaio Up- Converting Phosphor Lateral Flow (UCP-LF) para determinaÃÃo do AntÃgeno AnÃdico Circulante (CAA) na urina e comparada com a da tÃcnica de Kato-Katz para a detecÃÃo de ovos nas fezes e com a do teste Point-of-Care â CCA (POC-CCA), que detecta o AntÃgeno CatÃdico Circulante (CCA) na urina. AlÃm disso, a resposta terapÃutica foi avaliada pelos mÃtodos que detectam os antÃgenos circulantes seis semanas apÃs o tratamento. O estudo foi realizado na localidade de Bananeiras, Capistrano, uma Ãrea endÃmica no Estado do CearÃ. De 297 habitantes da localidade, 285 aceitaram participar do estudo, dos quais 159 receberam o tratamento. Destes, 128 entregaram as amostras de urina e fezes requisitadas antes e apÃs o tratamento e foram avaliados pelos trÃs mÃtodos. O ensaio UCP-LF CAA detectou 44 positivos (34,4%). A tÃcnica de Kato-Katz revelou apenas duas amostras de fezes positivas (1,6%) e o POC-CCA detectou 8 positivos (6,2%). As sensibilidades dos diferentes ensaios foram determinadas contra um padrÃo ("ouro") de positividade de infecÃÃo combinado, mostrando-se maior para o ensaio UCP-LF CAA (92%), seguido pelo POC-CCA (17%), enquanto o Kato-Katz (trÃs lÃminas) teve uma sensibilidade muito baixa (4%). A maior taxa de prevalÃncia de infecÃÃes ativas encontrada foi em pessoas com idades de 30 a 39 anos. As concentraÃÃes de CAA antes do tratamento variaram de 0,16 a 61,12 pg CAA / ml de urina, havendo um decrÃscimo significativo dos nÃveis de CAA apÃs seis semanas do tratamento (Wilcoxon, P = 0,003). Dessa maneira, tendo em conta essas observaÃÃes promissoras, o UCP-LF CAA mostrou um valor potencial para a determinaÃÃo da prevalÃncia de esquistossomose mansoni em Ãreas de baixa endemicidade; contudo, outros estudos mais amplos sÃo necessÃrios.
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Obtenção por irradiação de micro-ondas, caracterização e avaliação esquistossomicida e antimicrobiana de novas tiossemicarbazonas derivadas de 1,2-naftoquinonas

BARBOSA, Vanessa Xavier 31 October 2014 (has links)
Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-11T14:42:31Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Vanessa Xavier Barbosa.pdf: 13424124 bytes, checksum: aa490454f498bf0b9f6ca80cbef3a435 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T14:42:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Vanessa Xavier Barbosa.pdf: 13424124 bytes, checksum: aa490454f498bf0b9f6ca80cbef3a435 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-10-31 / FACEPE / A esquistossomose é uma parasitose causada por trematódeos do gênero Schistosoma que atinge mais de 240 milhões de pessoas no mundo, principalmente em áreas tropicais e pobres. O Praziquantel representa, na atualidade, a única alternativa de tratamento. Embora ele seja seguro e eficaz, a elevada prevalência dessa parasitose vem sendo mantida há décadas devido, principalmente, a migração da população em áreas endêmicas e ao aparecimento de resistência aos fármacos anteriormente utilizados. Diante deste contexto, o propósito deste trabalho foi sintetizar uma nova série de derivados da β-lapachona através da inserção de uma porção tiossemicarbazona no núcleo quinonóidico da naftoquinona. Foram sintetizados 8 compostos, sendo 7 inéditos, com diferentes tiossemicarbazonas (3a-3h) através de metodologias simples e com bons rendimentos, utilizando o método de aquecimento convencional e por irradiação de micro-ondas. A maioria dos derivados foi obtida de forma mais rápida, simples e efetiva através das reações em micro-ondas, obtendo melhores rendimentos em um tempo reacional menor quando comparada ao convencional. As estruturas moleculares foram confirmadas por massa de alta resolução, ressonância magnética nuclear (1H e 13C) e espectrometria de infravermelho. A atividade esquistossomicida in vitro da β-lapachona e dos oito derivados (3a-3h) foi avaliada frente a vermes adultos de Schistosoma mansoni. Dos nove compostos testados a β-lapachona e o derivado 3a (Z)-2-(2,2-dimetil-5-oxo-3,4-diidro-2H-benzo[h]cromen-6(5H)-ilideno)hidrazina-carbotioamida) apresentaram atividade esquistossomicida com letalidade de 100% (100 μM) e 83% (100 μM), respectivamente, durante o período de observação. No entanto, a atividade esquistossomicida do derivado 3a foi observada já na menor concentração avaliada (12,5 μM), registrando 17% de vermes mortos ao final do experimento. Os demais derivados exibiram efeito na motilidade e no desacasalamento dos vermes, destacando-se os derivados 3c e 3e. A atividade antibacteriana da β-lapachona e dos derivados foi realizada frente ao Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (SARM). A β-lapachona apresentou o melhor resultado com Concentração Inibitória Mínima (CIM) igual a 64 μg/mL e os demais derivados apresentaram CIM ≥ 128 μg/mL. Todos os compostos quando comparados à literatura exibiram CIM inferiores a antibióticos comerciais, como a ampicilina (CIM ≥ 512μg/mL) e a cefoxitina (CIM ≥ 256 μg/mL). Dentre todos os compostos, a β-lapachona e o derivado 3a foram os mais eficazes em inviabilizar vermes adultos de Schistosoma mansoni.
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Análise ultraestrutural da interação da lipoproteína de baixa densidade (LDL) humana com o tegumento do Schistosoma mansoni e identificação da proteína ligante de LDL

da Silva Andrade Pereira, Adriana 31 January 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1276_1.pdf: 1492422 bytes, checksum: a909298503f5ea7da3bf64aee390832f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A esquistossomose mansônica é uma doença endêmica em várias partes das América e da África, causada pelo Schistosoma mansoni. Segundo dados da Organização Mundial de Saúde existem entre 200 e 300 milhões de pessoas infectadas no mundo e aproximadamente 1 bilhão sob risco. O verme adulto do Schistosoma mansoni adquiriu uma habilidade peculiar para escapar do ataque do sistema imune do hospedeiro. Muitos mecanismos têm sido propostos para explicar a sobrevivência do parasita, um deles é a aquisição de lipoproteínas plasmáticas. O que chama a atenção para as lipoproteínas nestes mecanismos é o fato de os esquistossômulos não sintetizarem nem colesterol, nem ácidos graxos de cadeia longa, entretanto, estes compostos estão presentes nas suas estruturas. Provavelmente, eles adquirem do hospedeiro através da interação do tegumento do verme com as lipoproteínas no sangue do animal infectado. Neste trabalho, microscopia eletrônica de varredura, eletroforese 2-D e immunoblotting foram utilizadas como ferramentas para estudar a interação da lipoproteína de baixa densidade (LDL) com o tegumento do Schistosoma mansoni e identificar a proteína ligante de LDL. Depois de 50 dias de infecção (100 cercárias, cepa São Lourenço da Mata - SLM), camundongos albinos (Mus musculus) foram sacrificados e os vermes adultos retirados, os quais foram separados para incubação com LDL para a microscopia eletrônica de varredura e preparação do extrato para identificação da proteína ligante de LDL. Os vermes foram lavados e incubados em meio de cultura RPMI 1640 + 10% (v/v) de soro deficiente de lipoproteína (LPDS), contendo 40 μg de LDL/mL durante 30, 60, 120 min. Vermes controles foram processados da mesma forma sem LDL. O extrato de proteínas foi obtido e 200 μg de proteínas foram aplicadas em fitas gradiente de pH imobilizado (IPG strip), 7 cm, pH=3-10, seguidos de focalização isoelétrica no sistema Multiphor II (GE Healthcare) e SDS-PAGE. Proteínas foram transferidas para membranas de PDVF, e bloqueadas com caseína 3%. Subsequentemente, incubações foram feitas com soro humano, anticorpo policlonal anti-LDL (chicken) e conjugado peroxidase anti-chicken (IgG). A membrana foi revelada com substrato TMB e duas bandas foram identificadas apresentando pesos moleculares e pontos isoelétricos (pI) de 55.5 kDa e pI 5.12 e de 28.5 kDa e pI 7.17, respectivamente. Os resultados da microscopia eletrônica de varredura demonstraram uma maior interação de partículas de LDL com a região dorsal mediana do parasita, em relação à outras regiões do tegumento. Agregados lipoprotéicos foram observados nas incubações de 30 e 60 min, sendo verificado uma diminuição na incubação de 120 min. O tamanho das partículas de LDL diminuiu com o tempo de incubação, esses resultados sugerem que a redução do tamanho das partículas pode ser devido ao uso dos lipídeos das lipoproteínas pelo verme. Concluímos que a identificação da proteína ligante poderá ajudar novos projetos terapêuticos, levando a um bloqueio da interação LDL/parasita e consequentemente a morte dos vermes
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Determinação dos níveis de IL-33, ST2 e quimiocinas em pacientes alérgicos e com esquistossomose mansoni ou geohelmintíases

NASCIMENTO, Wheverton Ricardo Correia do 21 February 2017 (has links)
Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-17T22:16:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Wheverton Ricardo Correia do Nascimento.pdf: 3005039 bytes, checksum: 584879c98cbd13747a52ce9dd7c5e6dd (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-19T22:25:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Wheverton Ricardo Correia do Nascimento.pdf: 3005039 bytes, checksum: 584879c98cbd13747a52ce9dd7c5e6dd (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-19T22:25:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Wheverton Ricardo Correia do Nascimento.pdf: 3005039 bytes, checksum: 584879c98cbd13747a52ce9dd7c5e6dd (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Infecções por Schistosoma mansoni e geohelmintos, na presença de IgE anti-Ascaris, modulam a intensidade das alergias. Neste cenário, as quimiocinas que alteraram o recrutamento celular, IL-33 indutora de resposta Th2, e seu receptor solúvel ST2 (ST2s) não foram investigados. Objetivou-se avaliar CXCL8/IL-8, CCL5/RANTES, CXCL9/MIG, CCL2/MCP-1, CXCL10/IP-10 e a expressão do RNAm de IL-33 e ST2s, bem como, os níveis de IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, TNF-α e IFN-γ e dos anticorpos IgE total, anti-Blomia e anti-Asc, eosinófilos no hospedeiro infectado com S. mansoni ou gehelmintos e investigar sua associação com asma/rinite e a positividade para teste cuâneo (SPT) para aeroalérgenos. Para isto, realizou-se estudo de Caso-Controle aninhado a um corte transversal. Aplicou-se o questionário ISAAC, obtiveram-se dados socioeconômicos e parasitológicos e quatro grupos (carga parasitária baixa): Alérgicos/Infectados (A-I); Alérgicos/Não Infectados (A-NI); Não Alérgicos/Infectados (NA-I); Não Alérgicos/Não Infectados (NA-NI), realizou-se o teste de reatividade cutânea para aeroalérgenos. Coletou-se sangue para cultura (Fitohemaglutinina; 24hs) e, no sobrenadante foram dosadas citocinas e quimiocinas (cytometric bead array) e nas células a expressão do RNAm (qPCR). A infecção por S. mansoni constitui proteção para reatividade do SPT (OR=0,351, IC95%=0,153 – 0,802; p=0,017) e asma/rinite (OR=0,274, IC95%= 0,135 - 0,554; p<0,0001). A IgE anti-Asc não interferiu na proteção induzida pelo S. mansoni. Em comparação ao grupo NA-NI, no grupo A-I, houve menor expressão da IL-33 e produção de CCL2/MIP-1, acompanhado de mais IL-10. No grupo NA-I, foi detectado menos IL-33 e mais CXCL10/IP10 e CXCL9/MIG e no grupo A-NI mais IL-10. Os geohelmintos constituíram proteção para asma/rinite (OR=0,337; IC95% = 0,132 – 0,829; p=0,008) com menor frequencia de crise no último ano, chiado no peito após exercício físico e tosse seca à noite. Em comparação ao grupo NA-NI, os grupos infectados com ou sem alergia apresentaram menor razão na expressçao IL-33/ST2s. Sendo assim, os dados sugerem que houve uma modulação negativa na produção do CCL2/MIP-1, pelo S. mansoni e geohelmintos, e na atuação da IL-33. Contudo, o primeiro parasita prejudicou a produção de IL-33 e segundo levou ao sequestro via ST2s. Estes achados podem explicar a atenuação das manifestações alérgicas em áreas endêmicas para esquistossomose e geohelmintíases. / Schistosoma mansoni and geohelminths infections, in the presence of anti-Ascaris IgE, module the intensity of allergies. Chemokines that altered cell recruitment, and IL-33-inducing Th2 response, and its soluble ST2 receptor (sST2) were not investigated. The aim of study was to evaluate CXCL8/IL-8, CCL5/RANTES, CXCL9/MIG, CCL2/MCP-1, CXCL10/IP-10 and IL-33 mRNA expression and ST2s, as well as IL-2 , IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, TNF-α and IFN-γ levels, and total IgE, anti-Blomia and anti-Asc antibodies, eosinophils in the host infected with S. mansoni or gehelmintos Its association with asthma/rhinitis, and the Skin Prick Test (SPT) for aeroallergens. Case-Control study was carried out nested to a cross-section. The ISAAC questionnaire was applied, socioeconomic and parasitological data and four groups (low parasite load): Allergic / Infected (A-I); Allergic / Non-Infected (A-NI); Non-allergic / Infected (NA-I); Non-Allergic / Non-Infected (NA-NI), the skin reactivity test for aeroallergens was performed. Culture blood (Phytohemagglutinin, 24hs) was collected and cytometric bead array (cytometric bead array) and mRNA expression (qPCR) were measured in the supernatant. S. mansoni infection provides protection for SPT reactivity (OR = 0.351, 95% CI = 0.153 - 0.802, p = 0.017) and asthma / rhinitis (OR = 0.274, 95% CI = 0.135-0.554, p <0.0001). Anti-Asc IgE did not interfere with S. mansoni induced protection. Compared to the NA-NI group, in the A-I group, there was lower expression of IL-33 and production of CCL2 / MIP-1, accompanied by more IL-10. In the NA-I group, less IL-33 and more CXCL10 / IP10 and CXCL9 / MIG and in group A-NI plus IL-10 was detected. The geohelminths constituted protection for asthma/rhinitis (OR = 0.337, 95% CI = 0.132 - 0.829, p = 0.008) with a lower frequency of crisis in the last year, chest wheezing after exercise and dry cough at night. Compared to the NA-NI group, the groups infected with or without allergy had a lower ratio in IL-33/ST2s expression. Thus, the data suggest that there was a negative modulation in the production of CCL2/MIP-1, by S. mansoni and geohelminths, and in the performance of IL-33. However, the first parasite impaired IL-33 production and second led to sequestration via ST2s. These findings may explain the attenuation of allergic manifestations in endemic areas for schistosomiasis and geohelminthiasis.
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Cinética de produção de anticorpos anti-ovalbumina em camundongos adultos sensibilizados com antígenos do Schistosoma mansoni na fase de amamentação

SALES, Iana Rafaela Fernandes 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1045_1.pdf: 612428 bytes, checksum: eb901f71091242955ff0e175fc6c3603 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Gestantes cronicamente infectadas pelo Schistosoma mansoni são comuns em áreas endêmicas. Exposição aos componentes parasitários in utero e através da amamentação altera a resposta imune a antígenos homólogos (do parasito) em descendentes adultos. Com relação à modulação para antígenos heterólogos, estudos experimentais relatam que descendentes adultos, previamente amamentados em fêmeas infectadas apresentaram uma potencialização da produção de anticorpos anti-ovalbumina (OVA), no 8º dia, pós-imunização com este antígeno. Neste estudo, avaliamos a longevidade desta potencialização e se a mesma é dependente da via de administração dos componentes parasitários (oral ou subcutânea). Para isto, fêmeas Swiss webster não-infectadas (30 dias) ou infectadas (20 cercárias S. mansoni), no 60º dia, tiveram seus estros sincronizados e foram acasaladas. Após o nascimento, parte dos filhotes de mães não infectadas foi amamentada em mães esquistossomóticas. Assim, foram obtidos os seguintes grupos para análise da longevidade da potencialização: Amamentados em mães Infectadas (AI); Nascidos/amamentados em mães infectadas (MIAI) e Nascidos/amamentados em mães não infectadas (Controle). Para análise da influencia da via de administração, adicionamos dois grupos experimentais: Nascidos/amamentados em mães não infectadas e imunizados com antígeno solúvel dos ovos do S. mansoni (SEA), s.c, quando recém nascidos, na dose de 0,12&#956;g/animal (SEA.1) ou 1,2 &#956;g/animal (SEA.2). No 45º dia, todos os animais foram imunizados (s.c) com OVA, emulsificada em adjuvante e submetidos a sangrias no 8º, 14º, 21º, 28º, 35º e 68º dia pós-imunização. Os níveis de IgG1 e IgG2a anti- OVA foram dosados por ELISA. Foi observado que a produção de IgG1 e IgG2a anti-OVA no grupo controle foi mais evidente a partir do 28º dia após a imunização. Contudo, nos animais que receberam leite materno de mães-infectadas (AI e MIAI) foram detectados 4 vezes mais IgG1 já no 8º dia, sendo estes níveis mantidos no 14º dia e com um aumento aproximado de 2 vezes no 21º e 28º dias. Para os animais sensibilizados com componentes parasitários, por via s.c., também houve uma potencialização, entre 14º e 28º dia pósimunização, nos camundongos que receberam a menor dose antigênica (SEA.1). Não houve diferença nos níveis de IgG1 no 35º e 68º dias entre os grupos estudados. Em relação aos títulos de IgG2a anti-OVA, o incremento na produção dessa imunoglobulina foi observado apenas nos lactentes de mães infectadas. Contudo, não foi duradoura, sendo detectada apenas no 8º dia pós-imunização. Sendo assim, antígenos do S. mansoni, administrados por via oral ou subcutânea, na fase de lactação, antecipa o pico de produção de anticorpos e leva a uma potencialização sustentada da síntese de IgG1 para um antígeno heterólogo, nos descendentes adultos
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Caracterização dos hemócitos de Biomphalaria glabrata e Biomphalaria straminea sadios e infectados por Schistosoma mansoni

CAVALCANTI, Marília Gabriela dos Santos 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T18:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5629_1.pdf: 20032687 bytes, checksum: d731e88ee3e7c7f4ba8501e372528ee0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O ciclo do Schistosoma mansoni depende da existência de hospedeiros intermediários que no Brasil são caramujos do gênero Biomphalaria. Em muitas espécies de invertebrados sabe-se que os hemócitos e fatores humorais da hemolinfa são responsáveis pela defesa imunológica contra patógenos, que efetivamente podem impedir ou limitar uma espécie de funcionar como vetor competente. Sabendo-se que o B. glabrata demonstra maior suscetibilidade ao S. mansoni em relação ao B. straminea, o presente estudo teve como objetivo elucidar as bases celulares do sistema de defesa dos caramujos das espécies B. glabrata e B. straminea. Para a avaliação morfológica dos hemócitos nas condições sadios e infectados pelos miracídios de S. mansoni, foi utilizada a microscopia óptica, de interferência diferencial e microscopia eletrônica de transmissão. Na caracterização dos hemócitos através de lectinas (UEA-1, DBA, LCA, BS-I e WGA) conjugadas a FITC, foi utilizado o microscópio confocal a laser. Foi realizado também a avaliação cinética diferencial das células nas condições sadios e infectados pelos miracídios de S. mansoni, utilizando hemocitômetro nos tempos de 2h, 15 e 30d. Neste trabalho foi identificado cinco tipos celulares na hemolinfa das duas espécies: células blásticas, granulócitos e hialinócitos do tipo I, II e III. As células blásticas se mostram esféricas com núcleo grande localizado centralmente, em B. straminea infectados estas células não apresentaram muitas modificações morfológicas, porém em B. glabrata este tipo celular passou a apresentar alterações no formato da célula. Os granulócitos apresentaram-se com vários grânulos eletrodensos. Em B. glabrata infectados estas células não se mostraram com alterações morfológicas, porém, em B. straminea foi possível identificar liberação de grânulos. O hialinócito do tipo I foi o tipo celular mais encontrado na hemolinfa de ambas as espécies, tais células são polimórficas e apresentam muitas projeções citoplasmáticas. Estas células em caramujos infectados apresentaram-se com maior adesão celular e maior quantidade de grânulos de glicogênio. Nos hialinócitos do tipo I em B. straminea, não identificamos adesão celular, e assim como B. glabrata, passaram a apresentar mais projeções citoplasmáticas após infecção. Os hialinócitos do tipo II e III são células ovais e geralmente apresentam coloração homogênea. Estes tipos celulares apresentaram poucas alterações morfológicas após a infecção nas duas espécies estudadas. Em relação à marcação com lectinas foi evidenciado um aumento na marcação após a infecção em quase todos os hemócitos de B. glabrata e B. straminea. Na avaliação da dinâmica hemocitária em B. glabrata foram identificadas variações significantes em três dos cinco tipos celulares: células blásticas, granulócito e hialinócito I. Os mesmos resultados foram encontrados em B. straminea. Neste trabalho foi realizada a caracterização e padronização dos hemócitos de B. glabrata e B. straminea, sadios e infectados com miracídios de S. mansoni. Desta forma, o presente estudo possibilitou um melhor entendimento sobre o papel dessas células no processo de defesa contra o S. mansoni e sugere uma relação da resposta imune celular na suscetibilidade ou não ao Trematóide
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Proteolytické systémy krevničky střevní (Schistosoma mansoni). / Proteolytic systems of the blood fluke (Schistosoma mansoni).

Fajtová, Pavla January 2018 (has links)
Schistosomiasis is a serious parasitic disease caused by blood flukes of the genus Schistosoma. It is a global health problem with more than 200 million people infected and 750 million people at risk. Current therapy relies on a single drug, praziquantel, for which there are concerns of emerging drug resistance. Proteases of schistosoma are promising target molecules for the development of new therapeutic strategies against schistosomiasis. This work focuses on the comprehensive characterization of proteolytic systems of Schistosoma mansoni and determination of their role in the interaction with the human host. First, the major proteolytic activities secreted by individual developmental stages of schistosoma that parasitize the human body were classified using functional proteomics. This analysis demonstrated their complex and specific distribution with predominant serine and cysteine proteases and metalloproteases. Second, tegumental and digestive proteases, namely prolyl oligopeptidase and cathepsins B, C and D, were identified by chemical genomics as suitable target molecules for therapeutic intervention. Prolyl oligopeptidase was biochemically characterized using a recombinant protein, its effective inhibitors were developed as templates for antischistosomal drugs, and a biological role of the...
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Protection Against Schistosoma Mansoni Infection With a Recombinant Baculovirus-Expressed Subunit of Calpain

Hota-Mitchell, Sheela, Siddiqui, Afzal A., Dekaban, Gregory A., Smith, Jana, Tognon, Cristina, Podesta, Ronald B. 01 October 1997 (has links)
Infections by human schistosomes, in particular Schistosoma mansoni, account for significant morbidity and mortality every year in tropical and sub-tropical areas. The eggs of the parasite induce pathological changes in the infected host; in chronic and heavy infections, these changes may lead to death. A well-designed anti-schistosomal vaccine, alone or in concert with existing control measures such as chemotherapy, may prove to be a safe, inexpensive and effective means of reducing the occurrence of severe disease and death in S. mansoni infection. Previous studies have demonstrated the importance of the syncytial layer containing the apical plasma membrane (APM) of S. mansoni in both the survival of the parasite in the mammalian host and as a potential source of immunogens which may be utilized as vaccine candidates. In this paper we present evidence for the protective capacity of several schistosomal antigen preparations, including a calcium binding protein of the APM, S. mansoni calpain (GenBnnk accession no. M74233). We have constructed and characterized expression of a recombinant baculovirus expressing the large subunit of S. mansoni calpain, Sm-p80. This recombinant Sm-p80 is recognized by IgA, IgM, IgG1, and IgG3 isotype antibodies found in S. mansoni-infected human sera and partially-purified recombinant Sm-p80 provided a 29-39% reduction in worm burden in immunized mice challenged with S. mansoni. Our data indicate that Sm-p80 may be a useful vaccine antigen for the reduction of the morbidity associated with S. mansoni infections of mammalian hosts.
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Proteolytické enzymy krevničky střevní (Schistosoma mansoni): patobiochemie a využití v biomedicíně / Proteolytic enzymes of the blood fluke Schistosoma mansoni: pathobiochemistry and their use in biomedicine

Leontovyč, Adrian January 2021 (has links)
Blood flukes of the genus Schistosoma are causative agents of the disease schistosomiasis, which affects more than 250 million people worldwide and together with malaria represents the most important parasitic infection. There is a high risk of resistance development against the only drug in use, therefore novel therapeutic approaches for schistosomiasis are intensively researched. Proteolytic enzymes of schistosomes are crucial for their survival in the host and thus are promising drug and vaccine targets. This thesis is focused on two proteases of the human blood fluke Schistosoma mansoni, which were produced as recombinant proteins and functionally characterized. The first one is serine protease SmSP2, which is localized at the surface of the adult worms and secreted into the blood of the host. It was identified as a vasodilatory and fibrinolytic agent, and its modulatory role in host-parasite interactions was proposed. The second one is cysteine cathepsin SmCL3, which is involved in the digestion of host blood proteins serving schistosomes as nutrients. Potent peptidomimetic inhibitors of SmCL3 were identified, and their antischistosomal activity was demonstrated in an assay with live parasites. The thesis provides new important information about S. mansoni proteases, their pathobiochemistry...

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