Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-05-24T15:40:46Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO_WILMA HELENA DE OLIVEIRA.pdf: 10365468 bytes, checksum: 189ecefef53901d70f2d98169902c17c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-24T15:40:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO_WILMA HELENA DE OLIVEIRA.pdf: 10365468 bytes, checksum: 189ecefef53901d70f2d98169902c17c (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES / A hiperglicemia está relacionada com o desenvolvimento gradual de injúria e inflamação no encéfalo e é caracterizada por prejuízo das funções cognitivas, mudanças eletrofisiológicas e alterações estruturais principalmente no hipocampo. Essas alterações no SNC causadas pela hiperglicemia são consideradas como um quadro de encefalopatia diabética. A metformina é um fármaco aprovado para consumo humano para desordens metabólicas. Seu mecanismo de ação é através da ativação de AMPK, que regula negativamente os mediadores inflamatórios in vitro e in vivo em diferentes modelos animais, através da inibição do NF-κB. O objetivo deste estudo foi avaliar a ação da metformina sobre o processo de neurodegeneração induzido pela diabetes em camundongos machos C57BL/6. Foram usados camundongos machos C57BL/6, com 12-14 semanas de idade e peso entre 25- 30 g distribuídos em cinco grupos experimentais: controle, estreptozotocina (STZ), STZ tratado com metformina na dose 100 mg/Kg (STZ+M100), STZ tratado com metformina na dose de 200 mg/Kg (STZ+M200) e apenas tratados com metformina na dose de 200 mg/Kg (M200). A diabetes foi induzida com STZ via intraperitoneal por dois dias consecutivos e a metformina foi administrada por gavagem durante 21 dias após a confirmação da diabetes. O peso e glicemia foram acompanhados semanalmente. No 21º dia foi realizado o T-maze e no 22º dia os animais foram eutanasiados, os cérebros dissecados para realização das análises de imunohistoquímica e western blot. Os animais controle e do grupo M200 não tiveram variação dos níveis normais de glicose e do peso corporal. Os animais do grupo STZ, STZ+M100 e STZ+M200 apresentaram perda de peso e elevada glicemia. Na análise da memória espacial o grupo STZ apresentou deficiência de memória e quando tratados com 200 mg/Kg de metformina apresentaram melhora significativa. Na avaliação da perda neuronal, os animais do grupo STZ apresentaram diminuição da marcação do FOX-1, do fator de crescimento neuronal e aumento da expressão da proteína apoptótica Bax, tais alterações foram revertidas pela ação da metformina na dose 200 mg/Kg (STZ+M200). Foi observada ativação dos astrócitos e micróglia no grupo STZ e houve redução de maneira dosedependente, sendo a dose 200 mg/Kg mais efetiva. Nos animais controle e STZ não houve aumento da expressão de eNOS, enquanto que os grupos tratados com metformina apresentaram aumento da expressão dessa enzima. A expressão de VEGF foi aumentada no grupo STZ e reduzida significativamente no grupo STZ+M200. Os animais diabéticos também apresentam aumento da expressão de IL-1β, Iκβα e NF-κB. O tratamento dos animais diabéticos com 200 mg/Kg de metformina reduziu a inflamação pela redução significativa a expressão de IL-1β e p-Iκβα, entretanto não houve redução significativa de NF-κB. Em conclusão, o tratamento com metformina promoveu neuroproteção, reduziu a neuroinflamação e melhorou a formação da memória espacial em camundongos diabéticos. / Hyperglicaemia is associated with gradually developing injury and inflammation in brain and characterized by impairment cognitive, structural and electrophysiological changes, mainly in hippocampus. Changes caused by hyperglicaemia are called diabetic encephalopathy. Metformin is a molecule used to treatment metabolic disorders. Its mechanism action is through phosphorilation of AMPK, that downregulates mediators of inflammation in vitro and in vivo in several animals models, by inhibiting NF-κB. Thus, probably metformin actives AMPK and decreases inflammatory effects induced by NF-κB in glial cells on diabetic encephalopathy, avoiding loss neuronal and limiting neuroinflammation. The aim of this study was to evaluate effects of metformin on neurodegeneration process induced by diabetes in male C57BL / 6 mice. Fifty male C57BL / 6 mice, 12-14 weeks-old and 25-30g weight were distributed into five experimental groups: control, streptozotocin (STZ), STZ treated with metformin at dose 100 mg / kg (STZ + M100), STZ treated with metformin at dose of 200 mg / kg (STZ + M200) and only metformin at dose of 200 mg / kg (M200). Diabetes was induced with streptozotocin given intraperitoneally for two consecutive days and metformin was administered by gavage for 21 days after confirmation of diabetes. Weight and blood glucose levels were monitored weekly. At day 21 the animals were availed by T-maze and at 22 days the animals were euthanized, the brains dissected to perform the analysis of immunohistochemistry and western blot. The control animals and M200 had no change of glucose levels and body weight. The STZ group, STZ + M100 and M200 + STZ showed weight loss and high blood glucose. The STZ group showed impairment of memory and when treated with 200 mg / kg metformin showed significant improvement. The neuronal loss evaluation of the STZ group showed a decrease of FOX-1 labeling, a reduction of NGF, as well as an increased expression of the apoptotic protein Bax, such changes were reversed by the action of metformin in the dose 200 mg / kg (STZ + M200). The activation of astrocytes and microglial cells in STZ group was reduced in a dose-dependent manner and the dose 200 mg / kg more effective. The control and STZ groups showed no alteration in eNOS expression, while groups treated with metformin showed elevated expression of this enzyme. Expression of VEGF was increased in STZ group and significantly reduced in STZ + M200 group. Also diabetic animals showed increased IL-1β, Iκβα and NF-kB expressions. Conversely, diabetic mice treated with 200 mg / kg metformin reduced inflammation availed by IL-1β and p-Iκβα, however there was a significant reduction in NF-κB. In conclusion, treatment with metformin promoted neuroprotection, reduced the neuroinflammation and improved spatial memory in diabetic mice.

Orientador: Gisele Fabrino Machado / Banca: Mary Marcondes / Banca: Antonio Carlos Alessi / Resumo: Para investigar a patogênese das alterações encefálicas durante a leishmaniose visceral, a expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias IL-1, IL-6, IL-12p40, IFN-e TNF-e das citocinas anti-inflamatórias IL-10 e TGF- foi avaliada por meio de RT-qPCR no encéfalo de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum (= chagasi). No encéfalo dos cães infectados houve aumento da expressão gênica de IL-1, IL-6, IFN- e TNF-, associada ao decréscimo da expressão de IL-10 e TGF-. Por outro lado, a expressão gênica da citocina pró-inflamatória IL-12p40 mostrou-se reduzida no encéfalo de cães com LV. Esses dados indicam a presença de um ambiente pró-inflamatório no encéfalo de cães com leishmaniose visceral, já que IL-1, IL-6 e TNF-, principalmente, é tida como um fator chave para a iniciação, manutenção e persistência da inflamação. Ainda, não foi detectada correlação entre o perfil de citocinas expresso com a manifestação clínica ou com a carga parasitária periférica de Leishmania, sugerindo que as alterações encefálicas são decorrentes da própria resposta imune do hospedeiro, independentemente da fase em que a doença se encontra / Abstract:To investigate the pathogenesis of the brain alterations during visceral leishmaniasis, the gene expression of the pro-inflammatory cytokines IL-1, IL- 6, IL-12p40, IFN-and TNF-, and the anti-inflammatory cytokines IL-10 and TGF-was evaluated in the brain of dogs naturally infected with Leishmania infantum (syn. chagasi) by means of RT-qPCR. In the brain of the infected dogs, there was noticed up-regulation of IL-1, IL-6, IFN- and TNF-gene expression, in association with down-regulation of IL-10 and TGF-. On the other hand, the gene expression of IL-12p40 was down-regulated in the brain of the dogs with visceral leishmaniasis. These data indicate the presence of a pro- inflammatory milieu in the brain of dogs with visceral leishmaniasis, since IL-1, IL-6 and TNF-are considered key factors for the initiation, maintenance and persistence of inflammation. Furthermore, it was not detected correlation between the cytokine profile with the clinical manifestation or with the peripherical parasite density of Leishmania, which suggests that the brain alterations are due to the host immune response, regardless of the stage of the disease / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-22Bitstream added on 2014-06-13T19:32:59Z : No. of bitstreams: 1 melo_gd_me_araca.pdf: 620979 bytes, checksum: ecb7701e7865b9152a891623adce1b62 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Para investigar a patogênese das alterações encefálicas durante a leishmaniose visceral, a expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias IL-1, IL-6, IL-12p40, IFN-e TNF-e das citocinas anti-inflamatórias IL-10 e TGF- foi avaliada por meio de RT-qPCR no encéfalo de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum (= chagasi). No encéfalo dos cães infectados houve aumento da expressão gênica de IL-1, IL-6, IFN- e TNF-, associada ao decréscimo da expressão de IL-10 e TGF-. Por outro lado, a expressão gênica da citocina pró-inflamatória IL-12p40 mostrou-se reduzida no encéfalo de cães com LV. Esses dados indicam a presença de um ambiente pró-inflamatório no encéfalo de cães com leishmaniose visceral, já que IL-1, IL-6 e TNF-, principalmente, é tida como um fator chave para a iniciação, manutenção e persistência da inflamação. Ainda, não foi detectada correlação entre o perfil de citocinas expresso com a manifestação clínica ou com a carga parasitária periférica de Leishmania, sugerindo que as alterações encefálicas são decorrentes da própria resposta imune do hospedeiro, independentemente da fase em que a doença se encontra / To investigate the pathogenesis of the brain alterations during visceral leishmaniasis, the gene expression of the pro-inflammatory cytokines IL-1, IL- 6, IL-12p40, IFN-and TNF-, and the anti-inflammatory cytokines IL-10 and TGF-was evaluated in the brain of dogs naturally infected with Leishmania infantum (syn. chagasi) by means of RT-qPCR. In the brain of the infected dogs, there was noticed up-regulation of IL-1, IL-6, IFN- and TNF-gene expression, in association with down-regulation of IL-10 and TGF-. On the other hand, the gene expression of IL-12p40 was down-regulated in the brain of the dogs with visceral leishmaniasis. These data indicate the presence of a pro- inflammatory milieu in the brain of dogs with visceral leishmaniasis, since IL-1, IL-6 and TNF-are considered key factors for the initiation, maintenance and persistence of inflammation. Furthermore, it was not detected correlation between the cytokine profile with the clinical manifestation or with the peripherical parasite density of Leishmania, which suggests that the brain alterations are due to the host immune response, regardless of the stage of the disease

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:36Z : No. of bitstreams: 1 000830973.pdf: 1561011 bytes, checksum: aba36b4f5af2a9f6b65ca976da701b6e (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O hábito de tatuar o corpo faz parte da cultura de muitos povos no mundo. A partir de 1990, passou a ser utilizado como forma de arte no corpo. Os pigmentos da tatuagem podem conter componentes orgânicos e inorgânicos, metais e solventes. Pouco se conhece sobre as implicações da realização de anestesia regional sobre pele tatuada. Não existem evidências documentadas ou provas científicas de que os pigmentos da tatuagem possam causar aracnoidite ou outras complicações neurológicas. Objetivos: avaliar se a punção subaracnoidea realizada sobre a pele tatuada de coelhos determinaria alterações histológicas no tecido nervoso medular e nas meninges. Analisar presença de fragmentos de tinta no interior das agulhas de punção. Metodologia: foram utilizados 36 coelhos randomizados em 3 grupos (G): G1 punção sobre tatuagem, G2 punção subaracnoidea sobre tatuagem e injeção de solução fisiológica e G3 punção subaracnoidea e injeção de solução fisiológica. A punção (agulha de Quincke 22G 21/2) foi realizada sob anestesia no espaço entre a primeira e a segunda vértebra sacral guiada por ultrassom. Os animais de G2 e G3 receberam soluções em volume de 5 μL/cm de coluna vertebral (0,2 mL) e nos de G1 foi realizado somente punção sacral e, após esta, foi injetado, através da agulha, 1 mL de solução fisiológica sobre lâmina histológica para realização de esfregaço para possível identificação do tecido. Os animais foram avaliados clinicamente por 6 meses, após os quais foram decaptados sob anestesia e retiradas as porções lombar e sacral da medula espinhal para exame histológico por microscopia óptica. Resultados: presença de pigmentos de tinta em todos os esfregaços dos materiais das agulhas de punção do G1. Infiltrado linfoplasmocitário perivascular em áreas focais das meninges em 33% dos coelhos de G2. Tecido nervoso, meninges e vasos sanguíneos normais em G3. Conclusão: a punção ... / Body tattooing is part of many peoples culture in the world. Since 1990, it has been used as a body art. The tattoo pigments may contain organic and inorganic compounds, metals and solvents. The implications of performing regional anesthesia on tattooed skin are poorly known. There are no documented evidence or scientific proof that tattoo pigments can cause arachnoiditis or other neurological complications. Objectives: to assess whether spinal puncture performed on the tattooed skin of rabbits determine histological changes in the spinal nerve tissue and meninges. To analyze the presence of fragments of ink inside of needles. Methods: 36 rabbits were randomized in 3 groups (G). G1 puncture on tattoos, G2 spinal puncture on tattoos and injection of saline, G3 spinal puncture and injection of saline. The spinal puncture was ultrasound guided and performed under anesthesia in the space between the first and second sacral vertebra (a 22G 21/2 Quincke needle was used). The animals in the groups 2 and 3 received a 5 μl/cm spine volume solution (0,2 cc). The animals in the group 1 underwent only sacral puncture and, after that, was injected through the needle 1 cc of saline. The goal was to obtain histological material for conducting smear and possible identification of the tissue. The animals were evaluated clinically for 6 months. After this time they were sacrificed and have the lumbar and sacral portions of the spinal cord removed under anesthesia for histological examination by light microscopy. Results: pigments of ink was noted in all G1 smears material of needles. Perivascular lymphocytic infiltrate was noted in focal areas of the meninges in 33% of rabbits in group 2. Nervous tissue, meninges and blood vessels were normal in G3. Conclusion: subarachnoid puncture on the tattooed skin caused histological changes in the meninges, but not in the spinal nervous tissue. Fragments of tattoo ink were found inside of needles, despite the ... / FAPESP: 2011/05782-1

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:09Z : No. of bitstreams: 1 000828361.pdf: 2321021 bytes, checksum: 942618e7aef880679b1a5900df78de46 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Angiostrongylus cantonensis é o agente etiológico da meningoencefalite eosinofílica, também chamado de verme do pulmão do rato. Mundialmente, a expansão desse nematóide está ligada à dispersão e colonização pelo caracol gigante africano (Achatina fulica). O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de larvas de A. cantonensis em moluscos A. fulica naturalmente infectados, nos nove municípios que compõem a Baixada Santista. Foram capturados 540 exemplares na área urbana dos municípios: São Vicente, Santos, Praia Grande, Cubatão, Mongaguá, Itanhaém, Peruíbe, Guarujá e Bertioga. A técnica utilizada para a obtenção de larvas foi a de Wallace & Rosen e sedimentação, por 3 h, pelo método de Baermann. Após a sedimentação, o material foi observado em microscópio estereoscópico de campo claro, para visualização das larvas que foram posteriormente congeladas a -70°C. O DNA foi extraído e submetido à PCR-RFLP (reação em cadeia da polimerase e polimorfismo de tamanho de fragmentos de restrição) direcionada para a região espaçadora transcrita interna dois (ITS2-rDNA) e clivada com a enzima ClaI. Para as análises morfológicas e morfométricas foram utilizadas 60 larvas, sendo 30 em estágio L2 e 30 em L3. No total, foram analisados 90 pontos (bairros), dos quais 73 (81,11%) apresentaram moluscos com larvas de nematóides. Dos 540 caracóis analisados, 204 (37,77%) apresentaram larvas de nematóides, sendo que 79 (38,72%) foram submetidos às análises moleculares; constatou-se a infecção por A. cantonensis em 63 (79,75%) moluscos. O número de larvas por molusco variou de 1 a 9.723 em exemplares que apresentavam 61,0 e 70,0 mm de comprimento de concha, respectivamente. Não foram observadas diferenças significativas entre o número de larvas de A. cantonensis e o comprimento das conchas dos indivíduos adultos jovens e adultos e nem entre as médias de larvas encontradas entre indivíduos ... / Angiostrongylus cantonensis is the causative agent of eosinophilic meningoencephalitis, also called rat lungworm. Worldwide, the expansion of this nematode is linked to the dispersal and colonization by giant African snail (Achatina fulica). The aim of this work was to verify the occurrence of larvae of A. cantonensis in mollusks A. fulica naturally infected in nine cities that compose the Baixada Santista region. About 540 specimens were collected in urban areas of the following cities: São Vicente, Santos, Praia Grande, Cubatão, Mongaguá, Itanhaém, Peruibe, Guarujá and Bertioga. The technique used for obtaining larvae was based on Wallace & Rosen and sedimentation for 3 h using the method of Baermann. After sedimentation, the material was observed under bright-field stereoscopic microscope for viewing larvae that were subsequently frozen at -70°C. DNA was extracted and submitted to PCR - RFLP (polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism) directed to the internal transcribed spacer region two (ITS2 - rDNA) and cleaved with ClaI enzyme. For morphological and morphometric analyses, 60 larvae were used, 30 in stage L2 and 30 in stage L3. Overall, 90 points (neighborhoods) were analyzed, of which 73 (81.11 %) showed mollusks with nematode larvae. Of the 540 snails examined, 204 (37.77 %) showed nematode larvae, and 79 (38.72 %) were submitted to molecular analyses, and infection by A. cantonensis was found in 63 (79.75 %) mollusks. The number of larvae per mollusk varied from 1 to 9723 in specimens showing 61.0 and 70.0 mm in shell length, respectively. No significant differences were observed between number of larvae of A. cantonensis and the shell length of young adults and adults, nor between the average number of larvae found between young adults and adults. Significant differences were found when comparing the number of young adult and adult individuals ...

Orientador: Reinaldo José da Silva / Coorientador: Iracy Lea Pecora / Banca: Pedro Luiz Silva Pinto / Banca: Marlene Tiduko Ueta / Banca: Maria Isabel Muller / Banca: Fábio Hideki Yamada / Resumo: Angiostrongylus cantonensis é o agente etiológico da meningoencefalite eosinofílica, também chamado de "verme do pulmão do rato". Mundialmente, a expansão desse nematóide está ligada à dispersão e colonização pelo caracol gigante africano (Achatina fulica). O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de larvas de A. cantonensis em moluscos A. fulica naturalmente infectados, nos nove municípios que compõem a Baixada Santista. Foram capturados 540 exemplares na área urbana dos municípios: São Vicente, Santos, Praia Grande, Cubatão, Mongaguá, Itanhaém, Peruíbe, Guarujá e Bertioga. A técnica utilizada para a obtenção de larvas foi a de Wallace & Rosen e sedimentação, por 3 h, pelo método de Baermann. Após a sedimentação, o material foi observado em microscópio estereoscópico de campo claro, para visualização das larvas que foram posteriormente congeladas a -70°C. O DNA foi extraído e submetido à PCR-RFLP (reação em cadeia da polimerase e polimorfismo de tamanho de fragmentos de restrição) direcionada para a região espaçadora transcrita interna dois (ITS2-rDNA) e clivada com a enzima ClaI. Para as análises morfológicas e morfométricas foram utilizadas 60 larvas, sendo 30 em estágio L2 e 30 em L3. No total, foram analisados 90 pontos (bairros), dos quais 73 (81,11%) apresentaram moluscos com larvas de nematóides. Dos 540 caracóis analisados, 204 (37,77%) apresentaram larvas de nematóides, sendo que 79 (38,72%) foram submetidos às análises moleculares; constatou-se a infecção por A. cantonensis em 63 (79,75%) moluscos. O número de larvas por molusco variou de 1 a 9.723 em exemplares que apresentavam 61,0 e 70,0 mm de comprimento de concha, respectivamente. Não foram observadas diferenças significativas entre o número de larvas de A. cantonensis e o comprimento das conchas dos indivíduos adultos jovens e adultos e nem entre as médias de larvas encontradas entre indivíduos ... / Abstract: Angiostrongylus cantonensis is the causative agent of eosinophilic meningoencephalitis, also called "rat lungworm". Worldwide, the expansion of this nematode is linked to the dispersal and colonization by giant African snail (Achatina fulica). The aim of this work was to verify the occurrence of larvae of A. cantonensis in mollusks A. fulica naturally infected in nine cities that compose the "Baixada Santista" region. About 540 specimens were collected in urban areas of the following cities: São Vicente, Santos, Praia Grande, Cubatão, Mongaguá, Itanhaém, Peruibe, Guarujá and Bertioga. The technique used for obtaining larvae was based on Wallace & Rosen and sedimentation for 3 h using the method of Baermann. After sedimentation, the material was observed under bright-field stereoscopic microscope for viewing larvae that were subsequently frozen at -70°C. DNA was extracted and submitted to PCR - RFLP (polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism) directed to the internal transcribed spacer region two (ITS2 - rDNA) and cleaved with ClaI enzyme. For morphological and morphometric analyses, 60 larvae were used, 30 in stage L2 and 30 in stage L3. Overall, 90 points (neighborhoods) were analyzed, of which 73 (81.11 %) showed mollusks with nematode larvae. Of the 540 snails examined, 204 (37.77 %) showed nematode larvae, and 79 (38.72 %) were submitted to molecular analyses, and infection by A. cantonensis was found in 63 (79.75 %) mollusks. The number of larvae per mollusk varied from 1 to 9723 in specimens showing 61.0 and 70.0 mm in shell length, respectively. No significant differences were observed between number of larvae of A. cantonensis and the shell length of young adults and adults, nor between the average number of larvae found between young adults and adults. Significant differences were found when comparing the number of young adult and adult individuals ... / Doutor

Orientador: Eliana Marisa Ganem / Coorientador: Lais Helena Navarro / Banca: Norma Sueli Pinheiro Modolo / Banca: Angélica de Fátima de Assunçao Braga / Resumo: O hábito de tatuar o corpo faz parte da cultura de muitos povos no mundo. A partir de 1990, passou a ser utilizado como forma de arte no corpo. Os pigmentos da tatuagem podem conter componentes orgânicos e inorgânicos, metais e solventes. Pouco se conhece sobre as implicações da realização de anestesia regional sobre pele tatuada. Não existem evidências documentadas ou provas científicas de que os pigmentos da tatuagem possam causar aracnoidite ou outras complicações neurológicas. Objetivos: avaliar se a punção subaracnoidea realizada sobre a pele tatuada de coelhos determinaria alterações histológicas no tecido nervoso medular e nas meninges. Analisar presença de fragmentos de tinta no interior das agulhas de punção. Metodologia: foram utilizados 36 coelhos randomizados em 3 grupos (G): G1 punção sobre tatuagem, G2 punção subaracnoidea sobre tatuagem e injeção de solução fisiológica e G3 punção subaracnoidea e injeção de solução fisiológica. A punção (agulha de Quincke 22G 21/2) foi realizada sob anestesia no espaço entre a primeira e a segunda vértebra sacral guiada por ultrassom. Os animais de G2 e G3 receberam soluções em volume de 5 μL/cm de coluna vertebral (0,2 mL) e nos de G1 foi realizado somente punção sacral e, após esta, foi injetado, através da agulha, 1 mL de solução fisiológica sobre lâmina histológica para realização de esfregaço para possível identificação do tecido. Os animais foram avaliados clinicamente por 6 meses, após os quais foram decaptados sob anestesia e retiradas as porções lombar e sacral da medula espinhal para exame histológico por microscopia óptica. Resultados: presença de pigmentos de tinta em todos os esfregaços dos materiais das agulhas de punção do G1. Infiltrado linfoplasmocitário perivascular em áreas focais das meninges em 33% dos coelhos de G2. Tecido nervoso, meninges e vasos sanguíneos normais em G3. Conclusão: a punção ... / Abstract: Body tattooing is part of many peoples culture in the world. Since 1990, it has been used as a body art. The tattoo pigments may contain organic and inorganic compounds, metals and solvents. The implications of performing regional anesthesia on tattooed skin are poorly known. There are no documented evidence or scientific proof that tattoo pigments can cause arachnoiditis or other neurological complications. Objectives: to assess whether spinal puncture performed on the tattooed skin of rabbits determine histological changes in the spinal nerve tissue and meninges. To analyze the presence of fragments of ink inside of needles. Methods: 36 rabbits were randomized in 3 groups (G). G1 puncture on tattoos, G2 spinal puncture on tattoos and injection of saline, G3 spinal puncture and injection of saline. The spinal puncture was ultrasound guided and performed under anesthesia in the space between the first and second sacral vertebra (a 22G 21/2 Quincke needle was used). The animals in the groups 2 and 3 received a 5 μl/cm spine volume solution (0,2 cc). The animals in the group 1 underwent only sacral puncture and, after that, was injected through the needle 1 cc of saline. The goal was to obtain histological material for conducting smear and possible identification of the tissue. The animals were evaluated clinically for 6 months. After this time they were sacrificed and have the lumbar and sacral portions of the spinal cord removed under anesthesia for histological examination by light microscopy. Results: pigments of ink was noted in all G1 smears material of needles. Perivascular lymphocytic infiltrate was noted in focal areas of the meninges in 33% of rabbits in group 2. Nervous tissue, meninges and blood vessels were normal in G3. Conclusion: subarachnoid puncture on the tattooed skin caused histological changes in the meninges, but not in the spinal nervous tissue. Fragments of tattoo ink were found inside of needles, despite the ... / Mestre

Orientadores : Denise Pontes Cavalcanti, Valder Roberval Arruda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T11:01:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neri_JoaoIvanildodaCostaFerreira_M.pdf: 41236330 bytes, checksum: 3729551501ea8ce88ce1ecf7a9993ee5 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Dois polimorfismos decorrentes de duas mutações de ponto (C677T e A1298C) no gene da metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR), enzima responsável pela ativação do ácido fólico no principal processo de metilação da homocisteína, vêm sendo referidos como fatores predisponentes à ocorrência de defeitos de fechamento do tubo neural (DFTN). O genótipo 677TT determina uma variante termolábil da MTHFR, com atividade reduzida a cerca de 50% e, consequentemente, aumento da homocisteína plasmática. Quanto ao segundo polimorfismo, apenas a dupla hetrozigosidade (CT/AC) parece estar associada a alterações bioquímicas semelhantes às descritas para o homozigoto 677TT. Embora os DFTNs compreendam três tipos anatomicamente distintos: anencefalia, encefalocele e espinha bífida, a maioria dos trabalhos que estudaram a relação entre as mutações no gene da MTHFR com esses defeitos o fizeram incluindo apenas as espinhas bífidas. Evidências epidemiológicas, por outro lado, sugerem que anencefalia, encefalocele e espinha bífida podem ser defeitos distintos e, possivelmente, eles possam ser classificados como defeitos altos (anencefalia, encefalocele, espinha bífida cervical e torácica) e baixos (espinhas bífidas lombares e sacrais). O presente trabalho investigou, por meio da técnica da PCR, essas duas mutações no gene da MTHFR em recém-nascidos portadores de DFTN e seus pais, compreendendo 119 famílias que foram registradas no Programa de Genética Perinatal (pROGEPE) no período de setembro de 1987 a dezembro de 2000. As fteqüências obtidas nessas famílias foram comparadas com aquelas encontradas numa amostra da população da mesma região formada por amostras de sangue de cordão colhidas, em duas etapas, dentro do período de desenvolvimento do projeto e durante o parto de recém-nascidos vivos e consecutivos que não apresentassem qualquer alteração morfológica diagnosticada até a data de sua alta da maternidade. Observou-se que a fteqüência do homozigoto mutante 677TT entre os propósitos foi de 13,5%, e nos demais grupos de 10,1% nas mães, 11,8% nos pais e 11,3% nos controles, não sendo observadas diferenças estatisticamente significativas entre os quatro grupos (i'(3) = 0,53; P = 0,91). O genótipo mutante 1298CC observado entre os propósitos, mães, pais e controles foram, respectivamente: 5,8%, 5,0%, 3,6% e 5,6%. Todas as fteqüências alélicas, seja para a mutação C677T, seja para a A1298C, em todos os grupos estudados mostraram-se estar em equilíbrio de Hardy- Weinberg. O genótipo duplamente heterozigoto (CT/AC) foi encontrado em 11,8% dos propósitos, 19,OOIÓ das mães, 20,2% dos pais e 13,2% dos controles, não sendo observada diferenças estatisticamente significativas (X:(3)= 3,93; P = 0,27).A distribuiçãodas freqüências dos genótipos homozigoto mutante (TT) e duplo heterozigoto (CT/AC) entre os sexos dos propósitos, bem como entre seus diferentes diagnósticos também não apresentaram diferenças estatisticamente significativas no presente estudo. Apesar desses resultados, a maior concentração do genótipo TT entre as espinhas bífidas lombares e sacrais, sugerem uma possível associação desse genótipo TI com os defeitos anatomicamente mais baixos. Finalmente, as freqüências muito baixas ou nulas das combinações genotípicas CT/CC, TT/AC e TT/CC, inclusive na população de controle, sugerem que tais associações são pouco viáveis / Abstract: Two current polymorphisms of two point mutations (C677T and A1298C) in the gene of the methilenetetrahydrofolate reductase (MTHFR), responsible enzyme for the activation of the folic acid in the main process ofmetylation ofthe homocysteine, come being referred as predisponent factors to the occurrence of neural tube defects (NTD). The genotype 677TT determines a thermolable variant of MTHFR, with reduced activity about 50% and, consequent1y, increase of the plasmatic homocysteine. With relationship to the second polymorphism, just the double hetrozygosity (CT/AC) seems to be associated to biochemical alterations similar to described them for the homozygous 677TT. Although NTD understands three anatomically different types: anencephaly, encephalocele and spina bifida, most of the works that studied the relationship among the mutations in the gene of MTHFR with those defects they made it just including the spina bifida. Epidemiological evidences, on the other hand, suggest that anencephaly, encephalocele and spina bifida can be different defects and, possibly, they can be classified as high defects (anencephaly, encephalocele, cervical and thoracic spina bifida) and low (lumbar and sacrais spina bifida). The present study investigated, using the technique of PCR, those two mutations in the gene ofMTHFR in newbom carriers ofNTD and their parents, understanding 119 families that were registered in the Program of Perinatal Genetics (pROGEPE) in the period of September 1987 to December 2000. The obtained frequencies in those families were compared with those found in a sample of the population of the same area formed by picked samples of cord blood, in two stages, inside of the period of development of the project and during the childbirth of newbom alive and serial that didn't present any morphologic alteration diagnosed untU the date of its discharge of the maternity. It was observed that the ftequency of the homozygote mutant 677TT among the proposals was of 13,5%, and among the other groups of 10,1% in the mothers, 11,8% in the fathers and 11,3% in the controls, not being observed statistically significant differences among the four groups (r:(3)= 0,53;p = 0,91). The mutant genotype1298CCobserved among the proposals, mothers, fathers and controls were, respectively: 5,8%, 5,0%, 3,6% and 5,6%. AlI the allelic ftequencies, be for the mutation C677T, be for the A1298C, in all the studied groups they were shown to be in Hardy-Weinberg equilibrium. The double heterozygote genotype (CT/AC) was found in 11,8% ofthe proposals, 19,0% ofthe mothers, 20,2% of the fathers and 13,2% ofthe controls, not being observed statistically significant differences (i(3) =3,93;p = 0,27).The distributionofthe ftequenciesofthe homozygotemutant (TT) and double heterozygote (CT/AC) genotypes among the sexes of the proposals and their different diagnoses didn't also present statistically significant differences in the present study. In spite of those results, the largest concentration of the genotype TT among the lumbar and sacral spinas bifida, suggests a possible association of that genotype TT with the anatomically lower defects. Finally, the very low or null ftequencies of the genotypic combinations CT/CC, TT/AC and TT/CC, besides in the control population, suggest that such associations are little viable / Mestrado / Genetica Medica / Mestre em Ciências Médicas

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-11-21T16:38:57Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 32483634 bytes, checksum: 512f1ad54959a915407448133a75d3ed (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-21T16:38:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 32483634 bytes, checksum: 512f1ad54959a915407448133a75d3ed (MD5) Previous issue date: 2018-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O protozoário Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da doença de Chagas, responsável por promover diversas alterações hematológicas e teciduais que afetam mais de 10 milhões de pessoas em todo o mundo. A espécie possui um ciclo evolutivo digene'tico. 0 T. cruzi possui uma grande diversidade genética o que lhe dá a habilidade de poder invadir uma ampla variedade de tecidos como o cardíaco, hepático, digestivo, conjuntivo e nervoso causando deficiências fisiológicas generalizadas. Neste estudo nós realizamos mediante revisões sistemáticas a avaliação das principais alterações hematológicas e morfológicas no Sistema Nervoso Central (SNC) que acontecem em mamíferos não humanos durante infecções naturais e experimentais com T. cruzi. Foram realizadas duas revisões sistemáticas utilizando bases de dados PubMed e Scopus e, através do Guia Prisma os estudos foram selecionados e submetidos à extração de dados e análise de vie's metodológico. A Tabela Arrive, foi utilizada para avaliar o nível de detalhamento cientifico dos trabalhos. No artigo 1, onde analisamos as alterações hematológicas em animais infectados com T. cruzi, dos Trinta e um estudos selecionados, a metade demostrou uma redução no número de eritrócitos, indicando anemia e, na maioria dos estudos a quantidade total de valores de leucograma aumentou, sugerindo infecção. No artigo 2, analisamos as alterações morfológicas no SNC em indivíduos infectados com T. cruzi, os 32 estudos selecionados mostraram que as alterações mais frequentes no SNC são a presença de T. cruzi e infiltrado inflamatório mononuclear, principalmente formado por linfócitos. Os principais focos de parasitismo foram as zonas perivasculares no cérebro, cerebelo, e medula espinal. Em geral nossos achados demostraram que: 1) os parâmetros hematológicos podem direcionar o diagnóstico da doença de Chagas na fase inicial; 2) O encéfalo e' o principal alvo de T. cruzi, e as alterações inflamatórias no SNC são mais frequentes na fase aguda da infecção; 3) As alterações morfológicas dependem das características da patogenicidade e virulência das cepas de T. cruzi; 4) As alterações inflamatórias foram dependentes das cepas indicando que há tropismo diferencial no SNC. / The protozoan Trypanosoma cruzi is the etiologic agent of Chagas’ disease, responsible for several hematological and tissue changes affecting more than 10 million people worldwide. The species has a digenetic evolutionary cycle. T. cruzi is endowed with great genetic diversity which gives it the ability to invade a wide variety of tissues such as the heart, liver, digestive, connective and nervous, causing generalized physiological deficiencies. In this study, we performed systematic reviews of the major hematological and morphological changes in the Central Nervous System (CNS) that occur in non-human mammals during natural and experimental T. cruzi infections. Two systematic reviews were carried out through systematic surveys in PubMed and Scopus by publications. Using the Prisma Guide, the studies were selected and submitted to data extraction and methodological bias analysis and, through the Arrive Table, the level of scientific detail of the work was evaluated. In the article 1, wherein analyzing the hematological changes in animals infected with T. cruzi, the selected Thirty-one study, half demonstrated a reduction in the number of erythrocytes, indicating anemia and, in most studies the total number of WBC values increased, suggesting infection. Article 2, we analyzed morphological changes in the CNS in subjects infected with T cruzi, the 32 selected studies showed that the more frequent changes in the CNS are the presence of T. cruzi and mononuclear inflammatory infiltrate primarily consists of T lymphocytes. The main foci of parasitism were the perivascular zones in the brain, cerebellum, and spinal cord. In general, our findings demonstrated that: 1) hematological parameters can direct the diagnosis of Chagas disease in the initial phase; 2) The brain is the main target of T cruzi, inflammatory changes in the CNS are more frequent in the acute phase of infection; 3) The morphological changes depend of the pathogenicity and virulence of T. cruzi strains; 4) Inflammatory changes were dependent on the strains indicating that there is differential tropism in the CNS.