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Biotransformação de compostos fenólicos do extrato de soja para obtenção de produto rico em compostos bioativos / Biotransformation of phenolic compounds from soymilk to obtain enriched product in bioactive compounds

Queirós, Lívia Dias, 1988- 06 June 2014 (has links)
Orientador: Gabriela Alves Macedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-25T09:23:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Queiros_LiviaDias_M.pdf: 1473794 bytes, checksum: 8841b5d38503f939739da3243001d1ed (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A soja atrai considerável atenção no atual cenário econômico mundial devido ao seu elevado potencial nutritivo e efeitos potencialmente benéficos à saúde humana, que são atribuídos principalmente às isoflavonas. Esta classe de fenóis heterocíclicos é conhecida por suas atividades biológicas, tais como as atividades estrogênica, antioxidante e antitumoral, sendo as formas agliconas mais ativas do que as glicosiladas. Contudo, estudos têm mostrado que a eficácia clínica das isoflavonas está relacionada com a capacidade de produção de equol, um metabólito da daidzeína que, segundo a literatura vigente, é produzido exclusivamente pela ação da microbiota intestinal. Assim, há evidências de que nem todos os indivíduos são capazes de metabolizar as isoflavonas a equol, sendo essa variabilidade atribuída às diferenças na composição da microflora intestinal, hábitos alimentares, fatores genéticos, dentre outros. Neste contexto, os produtos à base de soja são uma forma de incluir as isoflavonas na dieta, sendo que o extrato hidrossolúvel de soja (EHS) é um substrato que tem se apresentado com potencial para produção de novos alimentos com apelo saudável. Desse modo, com o propósito de aumentar o conteúdo de isoflavonas bioativas e avaliar a viabilidade de um processo biotecnológico para produção de equol in vitro, neste projeto foi investigada a aplicação de culturas starters e bactérias lácticas probióticas na fermentação do EHS, aliado à ação do extrato bruto de tanase obtido a partir de Paecilomyces variotti. Além disso, também foi avaliada a biotransformação dos compostos fenólicos e atividade antioxidante do produto obtido. O teor de fenóis totais foi avaliado pelo método de Folin-Ciocalteau, a atividade antioxidante pelos métodos in vitro ORAC e de sequestro de radicais DPPH e o perfil químico dos extratos, antes e depois dos processos de biotransformação, foi avaliado por CLAE-DAD com co-injeção de padrões de isoflavonas. Após o processo fermentativo e/ou tratamento enzimático do EHS, houve um significativo aumento no teor de fenólicos totais e capacidade antioxidante, evidenciada por ambos métodos empregados (ORAC e DPPH), quando comparados com o controle do EHS sem reação. Além disso, foi verificada uma modificação no perfil polifenólico das amostras do EHS biotransformadas evidenciado por CLAE-DAD, resultando em um aumento na concentração das formas agliconas em relação às glicosiladas, bem como o aumento da concentração de equol após os processos de biotransformação propostos. Os resultados obtidos por CLAE-DAD confirmaram que o extrato de tanase de P. variotty foi capaz de biotransformar as formas glicosiladas (daidzina e genistina) das isoflavonas em suas respectivas formas agliconas (daidzeína e genisteína), indicando uma atividade diglicosídica do extrato semipurificado de tanase. Pelo que se tem conhecimento, a hidrólise de isoflavonoides glicosilados por tanase, bem como a formação de equol, é um relato inédito na literatura demonstrando que é possível desenvolver um processo in vitro para a obtenção deste composto bioativo, sem a presença de bactérias intestinais, utilizando apenas uma biotransformação enzimática / Abstract: The soy attracts considerable attention in the current global economic scenario due to their high nutritional potential and potentially beneficial effects to human health, which are mainly attributed to isoflavones. This class of heterocyclic phenols is known for its biological activities, such as estrogenic, antioxidant and antitumor activities, and the aglycone forms are more active than the glycosylated. However, studies have shown that the clinical efficacy of isoflavones is related to the capacity to produce equol, a metabolite of daidzein, which according to the current literature it is produced exclusively by the action of the gut microbiota. Thus, there is evidence that not all individuals are able to metabolize isoflavones to equol and this variability is attributed to differences in the composition of gut microflora, diet, genetic factors, among others. In this context, the soy-based products are a way to include the isoflavones in the diet, and the soymilk is a substrate that has shown the potential to produce new foodstuff with healthy appeal. Thus, in order to increase the content of bioactive isoflavones and assess the viability of a biotechnological process for in vitro production of equol, in this project was investigated the application of starters and probiotic lactic bacteria strains in the fermentation of soymilk, combined with the action of the crude extract of tannase obtained from Paecilomyces variotii. Furthermore, it was also evaluated the biotransformation of phenolic compounds and antioxidant activity of the obtained product. The total phenolic content was assessed by Folin-Ciocalteau method, the antioxidant activity by in vitro methods of ORAC and DPPH radical sequestration and the chemical profile of the extracts, before and after the processes of biotransformation, was evaluated by HPLC-DAD with co- injection of standards of isoflavones. After the fermentation process and/or enzymatic treatment of the soymilk, there was a significant increase of the total phenolic content and antioxidant capacity, as evidenced by both methods employed (ORAC and DPPH), compared with the standard soymilk. Furthermore, there was observed a change in the polyphenolic profile of biotransformed samples of soymilk, evidenced by HPLC-DAD, resulting in an increase in the concentration of the aglycones in relation to glucosides forms, as well as there was a significant increase of the concentration of equol after the biotransformation processes proposed. The results obtained by HPLC-DAD confirmed that the extract of tannase from P. variotii was able to biotransform the glucosides forms (daidzin and genistin) of isoflavones in their aglycone forms (daidzein and genistein), indicating a diglycosidase activity of the crude extract of tannase. From what is known, the hydrolysis of glucosides isoflavone by tannase, as well as the formation of equol, is an unpublished report in the literature demonstrating that it is possible to develop an in vitro method for obtaining this bioactive compound, without the presence of gut bacteria process using only an enzymatic biotransformation / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestra em Ciência de Alimentos
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Desenvolvimento de sorvetes probióticos à base de extrato solúvel de soja / Development of probiotic ice cream from soluble soybean extract

Ludmila Carril Fernández 17 April 2015 (has links)
Sorvetes são alimentos que apresentam grande potencial como veículo de espécies de micro-organismos probióticos, tendo em vista que apresentam elevada aceitabilidade em todas as faixas etárias. Os alimentos elaborados a base de soja se destacam no mercado devido às inúmeras evidências científicas sobre seus efeitos benéficos à saúde humana. Desta forma, no presente trabalho objetivou-se o desenvolvimento de sorvetes probióticos formulados com diferentes extratos solúveis de soja (in natura e fermentados), utilizando-se a cepa Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. Primeiramente, avaliou-se o desempenho fermentativo (pH e acidez titulável) de 5 cepas de Lactobacillus em meio formulado com os extratos solúveis de soja ESL e ES60, cujos resultados demonstraram que estes extratos são adequados para a formulação de meios de fermentação. Na sequência foram processados sorvetes probióticos formulados com os respectivos extratos in natura (ESL e ES60) e fermentado (ESL F e ES60 F) por Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. Nos sorvetes confeccionados com os extratos na forma in natura, uma suspensão de células da referida cepa foi adicionada à calda previamente ao processo de batimento e congelamento. Os sorvetes foram estocados a -23 ºC por 5 meses e avaliados periodicamente quanto às características físico-químicas (pH, acidez titulável, composição centesimal e overrun), microbiológica (viabilidade celular) e sensoriais. Os resultados demonstram que a cepa de Lactobacillus avaliada foi capaz de fermentar os açúcares presentes nos respectivos extratos de soja produzindo ácido láctico, atingindo a concentração de 0,90% no meio formulado com o extrato de soja desengordurado ES60. Os sorvetes confeccionados com os respectivos extratos fermentados apresentaram diferenças significativas (P<0,05) quanto ao pH e acidez titulável em relação aos sorvetes com extratos in natura, atingindo valores de pH inferiores a 4,0 com produção máxima de ácido láctico de 1,36%. A composição centesimal dos sorvetes desenvolvidos está de acordo com o padrão mínimo estabelecido pela ANVISA, apresentando uma composição média de 2,5% de proteínas, 5,0-6,0% de gordura e 36,0% de sólidos totais. As características probióticas dos sorvetes estudados foram preservadas, apresentando contagens de células viáveis superiores a 106 UFC/g, com redução do número de células inferior a um ciclo logarítmico ao longo de 150 dias de estocagem a -23ºC. A análise sensorial revelou que os sorvetes formulados com os respectivos extratos in natura não apresentaram diferenças significativas entre si (P>0,05) para os atributos avaliados e apresentaram maior aceitabilidade, sendo o sorvete formulado com o extrato ESL o que obteve maior aceitação, com médias acima de 6,0 correspondente a \"gostei ligeiramente\". Os resultados demonstraram ainda que a fermentação dos extratos interferiu negativamente nas características sensoriais dos respectivos sorvetes, apresentando diferenças significativas em relação aos extratos in natura, além de resultar nos menores escores de aceitação, tendo o sorvete fermentado ES60 F sido avaliado como \"desgostei moderadamente\". Estes resultados permitem concluir que o extrato solúvel de soja é um insumo adequado para a formulação de meio de cultivo de espécies de microorganismos probióticos, além de apresentar potencial para a confecção de sorvetes probióticos mediante adaptações da tecnologia de produção de gelados comestíveis. / Ice creams are foods that have great potential as a vehicle for species of probiotic microorganisms due to its high acceptability by all age people. Foods made with soybeans byproducts stand out in the market due to the numerous scientific evidences that show its beneficial effects on human health. Therefore, this study aimed to the development of probiotic ice cream formulated with different soybean soluble extracts (in natura and fermented), using the strain Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. Primarily, it was evaluated the fermentation performance (pH and titratable acidity) of 5 Lactobacillus strains in media formulated with soluble soybean extracts ESL and ES60 (Olvebra®), and the results showed that these soybean byproducts are suitable for the formulation of fermentation media. The probiotic ice cream were formulated with the soybean extracts in natura (ESL and ES60) and fermented (ESL F and ES60 F) by Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. For the manufacture of ice cream with the soybean extracts in natura, a cell suspension was added to the basic ice cream formulation before beating and freezing procedures. The ice creams were stored at -23 ° C for 5 months and evaluated periodically regarding the physico-chemical characteristics (pH, titratable acidity, chemical composition and overrun), microbiological (cell viability) and sensorial evaluation. The results shown that the Lactobacillus strain were capable to metabolize the sugars presented in the soluble soybean extracts producing lactic acid reaching a concentration of 0.90% in the media formulated with defatted soybean extract ES60. The ice creams made with fermented extracts showed significant differences (P <0.05) regarding pH (< 4,0) and titratable acidity (1,36%) in relation to the ice creams manufactured with extracts in natura. The results concerned to the chemical composition of the ice cream, showed that the values obtaneid are in accordance with those stablished by ANVISA, presenting an average composition of 2.5% protein, 5,0-6,0% fat and 36,0% total solids. The probiotic characteristics, of the formulated ice creams, were preserved presenting viable cell counts greater than 106 UFC/g, and a decreasing in the cell number lower than one log cycle after 150 days of storage at -23 ºC. Regarding the sensorial evaluation, the results revealed that the ice creams formulated with soybean extracts in natura showed no significant differences between them (P> 0.05) for the evaluated attributes and they showed higher acceptability. The ice cream formulated with ESL extract presented higher acceptance, with average notes greater than 6.0, corresponding to \"like slightly\". The results also showed that the fermentation of the extracts influenced negatively on the sensory properties of the ice cream, showing significant differences regarding the ice cream made with the extracts in natura, and lower acceptance scores, being the fermented ice cream ES60 F evaluated as \"moderately disliked\". These results indicate that the soluble soybean extracts evaluated in the present work are suitable for culture medium formulation for probiotic microorganisms, and also shown its potential for making probiotic ice cream by adaptation of the technology.
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Consumo de extrato hidrossolúvel de soja diminui a qualidade do tecido ósseo de ratos machos jovens / Bruna Rezende Silva Martins de Oliveira. -

Oliveira, Bruna Rezende Silva Martins de. January 2014 (has links)
Orientador: Mário Jefferson Quirino Louzada / Banca:José Carlos Silva Camargo Filho / Banca: João César Bedran de Castro / Resumo: Nos últimos anos, a soja tem sido objeto de vários estudos devido ao aumento do consumo de seus derivados, no entanto ainda não há consenso sobre as reais efeitos deste alimento. A soja é uma leguminosa rica em proteínas, fonte de cálcio e isoflavonas. Um dos possíveis efeitos das isoflavonas é de reduzir a perda óssea na menopausa. A proposta desse estudo foi analisar a influência da dieta suplementada com extrato hidrossolúvel de soja (EHS) na massa óssea de ratos jovens. Foram utilizados 16 ratos Novergicus Albinus linhagem Wistar, machos, jovens e saudáveis. Aleatoriamente, foram separados em dois grupos: controle (GC), que permaneceram por 11 semanas em gaiola comum recebendo 500 ml de água e 300g de ração diariamente, e suplementado (GS), ao qual foi oferecido além de água e ração, 500 ml de leite a base de soja, durante o mesmo período experimental do controle. Durante o período experimental o consumo de ração e ingestão de liquídos foram mensurados, bem como a massa dos animais. Ao final do período experimental os animais foram anestesiados com Ketamina e Xilasina e realizou-se coleta de sangue por meio de punção cardíaca e depois eutanasiados por decapitação. Os ossos foram submetidos à densitometria óssea - DXA e ensaio mecânico, para avaliação da densidade mineral óssea - DMO (g/cm2), Força Máxima (N) e Rigidez (kN/m). O sangue foi centrifugado para obtenção do plasma e determinação da concentração de cálcio, fósforo e fosfatase alcalina. O consumo de EHS provocou diminuição da DMO, força máxima e rigidez. Conclui-se assim, que o extrato hidrossolúvel de soja influenciou negativamente nas propriedades ósseas de ratos jovens machos / Abstract: In recent years, soy has been the subject a lot of studies due to increased consumption of their products, however there is still no consensus on the actual properties of this food. Soybeans are a rich legume protein, a source of calcium and isoflavones. One of the possible effects of isoflavones is to reduce bone loss at menopause. The purpose of this study was to analyze the influence of diet supplemented with (SES) in bone mass in young rats. 16 rats Novergicus Albinus Wistar strain, male, young and healthy were used. Randomly separated into two groups, control (GC), which remained for 11 weeks in common cage receiving 500 ml of water and 300 g of feed daily, and the second group supplemented (GS), that was offered in addition to water and feed 500ml of milk to soy. During the experimental period, feed intake and intake of liquids were measured as well as the mass of animals. At the end of the experimental period the animals were anesthetized with ketamine and xylazine, held blood...(Complete abstract eletronic acccess below) / Mestre
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Desenvolvimento de sorvetes probióticos à base de extrato solúvel de soja / Development of probiotic ice cream from soluble soybean extract

Fernández, Ludmila Carril 17 April 2015 (has links)
Sorvetes são alimentos que apresentam grande potencial como veículo de espécies de micro-organismos probióticos, tendo em vista que apresentam elevada aceitabilidade em todas as faixas etárias. Os alimentos elaborados a base de soja se destacam no mercado devido às inúmeras evidências científicas sobre seus efeitos benéficos à saúde humana. Desta forma, no presente trabalho objetivou-se o desenvolvimento de sorvetes probióticos formulados com diferentes extratos solúveis de soja (in natura e fermentados), utilizando-se a cepa Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. Primeiramente, avaliou-se o desempenho fermentativo (pH e acidez titulável) de 5 cepas de Lactobacillus em meio formulado com os extratos solúveis de soja ESL e ES60, cujos resultados demonstraram que estes extratos são adequados para a formulação de meios de fermentação. Na sequência foram processados sorvetes probióticos formulados com os respectivos extratos in natura (ESL e ES60) e fermentado (ESL F e ES60 F) por Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. Nos sorvetes confeccionados com os extratos na forma in natura, uma suspensão de células da referida cepa foi adicionada à calda previamente ao processo de batimento e congelamento. Os sorvetes foram estocados a -23 ºC por 5 meses e avaliados periodicamente quanto às características físico-químicas (pH, acidez titulável, composição centesimal e overrun), microbiológica (viabilidade celular) e sensoriais. Os resultados demonstram que a cepa de Lactobacillus avaliada foi capaz de fermentar os açúcares presentes nos respectivos extratos de soja produzindo ácido láctico, atingindo a concentração de 0,90% no meio formulado com o extrato de soja desengordurado ES60. Os sorvetes confeccionados com os respectivos extratos fermentados apresentaram diferenças significativas (P<0,05) quanto ao pH e acidez titulável em relação aos sorvetes com extratos in natura, atingindo valores de pH inferiores a 4,0 com produção máxima de ácido láctico de 1,36%. A composição centesimal dos sorvetes desenvolvidos está de acordo com o padrão mínimo estabelecido pela ANVISA, apresentando uma composição média de 2,5% de proteínas, 5,0-6,0% de gordura e 36,0% de sólidos totais. As características probióticas dos sorvetes estudados foram preservadas, apresentando contagens de células viáveis superiores a 106 UFC/g, com redução do número de células inferior a um ciclo logarítmico ao longo de 150 dias de estocagem a -23ºC. A análise sensorial revelou que os sorvetes formulados com os respectivos extratos in natura não apresentaram diferenças significativas entre si (P>0,05) para os atributos avaliados e apresentaram maior aceitabilidade, sendo o sorvete formulado com o extrato ESL o que obteve maior aceitação, com médias acima de 6,0 correspondente a \"gostei ligeiramente\". Os resultados demonstraram ainda que a fermentação dos extratos interferiu negativamente nas características sensoriais dos respectivos sorvetes, apresentando diferenças significativas em relação aos extratos in natura, além de resultar nos menores escores de aceitação, tendo o sorvete fermentado ES60 F sido avaliado como \"desgostei moderadamente\". Estes resultados permitem concluir que o extrato solúvel de soja é um insumo adequado para a formulação de meio de cultivo de espécies de microorganismos probióticos, além de apresentar potencial para a confecção de sorvetes probióticos mediante adaptações da tecnologia de produção de gelados comestíveis. / Ice creams are foods that have great potential as a vehicle for species of probiotic microorganisms due to its high acceptability by all age people. Foods made with soybeans byproducts stand out in the market due to the numerous scientific evidences that show its beneficial effects on human health. Therefore, this study aimed to the development of probiotic ice cream formulated with different soybean soluble extracts (in natura and fermented), using the strain Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. Primarily, it was evaluated the fermentation performance (pH and titratable acidity) of 5 Lactobacillus strains in media formulated with soluble soybean extracts ESL and ES60 (Olvebra®), and the results showed that these soybean byproducts are suitable for the formulation of fermentation media. The probiotic ice cream were formulated with the soybean extracts in natura (ESL and ES60) and fermented (ESL F and ES60 F) by Lactobacillus delbrueckii UFV H2B20. For the manufacture of ice cream with the soybean extracts in natura, a cell suspension was added to the basic ice cream formulation before beating and freezing procedures. The ice creams were stored at -23 ° C for 5 months and evaluated periodically regarding the physico-chemical characteristics (pH, titratable acidity, chemical composition and overrun), microbiological (cell viability) and sensorial evaluation. The results shown that the Lactobacillus strain were capable to metabolize the sugars presented in the soluble soybean extracts producing lactic acid reaching a concentration of 0.90% in the media formulated with defatted soybean extract ES60. The ice creams made with fermented extracts showed significant differences (P <0.05) regarding pH (< 4,0) and titratable acidity (1,36%) in relation to the ice creams manufactured with extracts in natura. The results concerned to the chemical composition of the ice cream, showed that the values obtaneid are in accordance with those stablished by ANVISA, presenting an average composition of 2.5% protein, 5,0-6,0% fat and 36,0% total solids. The probiotic characteristics, of the formulated ice creams, were preserved presenting viable cell counts greater than 106 UFC/g, and a decreasing in the cell number lower than one log cycle after 150 days of storage at -23 ºC. Regarding the sensorial evaluation, the results revealed that the ice creams formulated with soybean extracts in natura showed no significant differences between them (P> 0.05) for the evaluated attributes and they showed higher acceptability. The ice cream formulated with ESL extract presented higher acceptance, with average notes greater than 6.0, corresponding to \"like slightly\". The results also showed that the fermentation of the extracts influenced negatively on the sensory properties of the ice cream, showing significant differences regarding the ice cream made with the extracts in natura, and lower acceptance scores, being the fermented ice cream ES60 F evaluated as \"moderately disliked\". These results indicate that the soluble soybean extracts evaluated in the present work are suitable for culture medium formulation for probiotic microorganisms, and also shown its potential for making probiotic ice cream by adaptation of the technology.
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Consumo de extrato hidrossolúvel de soja diminui a qualidade do tecido ósseo de ratos machos jovens: Bruna Rezende Silva Martins de Oliveira. -

Oliveira, Bruna Rezende Silva Martins de [UNESP] 18 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-08-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:28Z : No. of bitstreams: 1 000836359.pdf: 287424 bytes, checksum: cd8d967f845ba5f47a1d10214b049451 (MD5) / Nos últimos anos, a soja tem sido objeto de vários estudos devido ao aumento do consumo de seus derivados, no entanto ainda não há consenso sobre as reais efeitos deste alimento. A soja é uma leguminosa rica em proteínas, fonte de cálcio e isoflavonas. Um dos possíveis efeitos das isoflavonas é de reduzir a perda óssea na menopausa. A proposta desse estudo foi analisar a influência da dieta suplementada com extrato hidrossolúvel de soja (EHS) na massa óssea de ratos jovens. Foram utilizados 16 ratos Novergicus Albinus linhagem Wistar, machos, jovens e saudáveis. Aleatoriamente, foram separados em dois grupos: controle (GC), que permaneceram por 11 semanas em gaiola comum recebendo 500 ml de água e 300g de ração diariamente, e suplementado (GS), ao qual foi oferecido além de água e ração, 500 ml de leite a base de soja, durante o mesmo período experimental do controle. Durante o período experimental o consumo de ração e ingestão de liquídos foram mensurados, bem como a massa dos animais. Ao final do período experimental os animais foram anestesiados com Ketamina e Xilasina e realizou-se coleta de sangue por meio de punção cardíaca e depois eutanasiados por decapitação. Os ossos foram submetidos à densitometria óssea - DXA e ensaio mecânico, para avaliação da densidade mineral óssea - DMO (g/cm2), Força Máxima (N) e Rigidez (kN/m). O sangue foi centrifugado para obtenção do plasma e determinação da concentração de cálcio, fósforo e fosfatase alcalina. O consumo de EHS provocou diminuição da DMO, força máxima e rigidez. Conclui-se assim, que o extrato hidrossolúvel de soja influenciou negativamente nas propriedades ósseas de ratos jovens machos / In recent years, soy has been the subject a lot of studies due to increased consumption of their products, however there is still no consensus on the actual properties of this food. Soybeans are a rich legume protein, a source of calcium and isoflavones. One of the possible effects of isoflavones is to reduce bone loss at menopause. The purpose of this study was to analyze the influence of diet supplemented with (SES) in bone mass in young rats. 16 rats Novergicus Albinus Wistar strain, male, young and healthy were used. Randomly separated into two groups, control (GC), which remained for 11 weeks in common cage receiving 500 ml of water and 300 g of feed daily, and the second group supplemented (GS), that was offered in addition to water and feed 500ml of milk to soy. During the experimental period, feed intake and intake of liquids were measured as well as the mass of animals. At the end of the experimental period the animals were anesthetized with ketamine and xylazine, held blood...(Complete abstract eletronic acccess below)
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Avaliação do efeito osteogênico por diferentes fitoestrógenos em cultura de osteoblastos derivados de células tronco mesenquimais / Evaluation of the osteogenic effect of different phytoestrogens in osteoblasts culture derived from mesenchymal stem cells

Faria, Amanda Natalina de 15 March 2013 (has links)
A menopausa é provocada pela falência da produção de hormônios ovarianos e tem como consequências alterações desfavoráveis no metabolismo e perda de massa óssea. O declínio da produção de estrógeno é considerado um grande fator de risco para o desenvolvimento da osteoporose em mulheres e como tratamento faz-se o uso da Terapia de Reposição Hormonal. No entanto, esta terapia tem trazido riscos á saúde de alguns grupos de mulheres. Como alternativa ao tratamento tradicional, tem-se os fitoestrógenos, e com eles as isoflavonas, encontradas principalmente na soja, Trifolium pratense e Cimicifuga racemosa. Este estudo teve como objetivo comparar a capacidade de estimular a osteogênese in vitro, a partir de cultura de osteoblastos derivados de células tronco mesenquimais, em duas preparações de fitoestrógenos: O extrato de soja biotransformado pelo fungo Aspergillus awamori (ESBF), e o Menoflavon® 40mg (Melbrosin International) composto pela isoflavona Trifolium pratense. Para este objetivo foram realizadas: a) Avaliação do crescimento e proliferação celular b) Viabilidade e crescimento das culturas de osteoblastos. c) Dosagem de proteína total das culturas de osteoblastos. d) Determinação da atividade específica da enzima fosfatase alcalina. e) Formação da matriz mineralizada. O Menoflavon® foi testado nas concentrações de 28,75 nM de daidzeína (D) + 7,5 nM de genisteína (G) (0,5 ?g/mL de Menoflavon®); 57,5 nM de D + 15 nM de G (1 ?g/mL de Menoflavon®); e 230 nM de D + 60 nM de G (4 ?g/mL de Menoflavon®); controle padrão de 57,5 nM de D + 15 nM de G comercial e controle de dimetilsulfóxido (DMSO). O ESBF foi testado nas concentrações de 1,181 nM de D + 0,922 nM de G (0,5 ?g/mL de ESBF); 2,361 nM de D + 1,845 nM de G (1 ?g/mL de ESBF); 9,445 nM de D + 7,379 nM de G (4 ?g/mL de ESBF); controle padrão de 2,361 nM de D + 1,845 nM de G comercial e controle de DMSO. Com a metodologia do MTT (3[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-brometo difenil tetrazolium) e da Resazurina comprovamos que não houve morte celular nas concentrações testadas com as duas formulações. A dosagem de proteínas totais manteve-se constante com as duas formulações e a formação de matriz mineralizada também manteve-se constante em relação ao controle para ambos. A atividade específica da fosfatase alcalina teve um decréscimo significativo ao 14º dia com todas as concentrações testadas e ao 21º dia com algumas concentrações de Menoflavon e com o ESBF decresceu em alguns dias, no entanto manteve-se estável no restante do teste. O ESBF mostrou ser melhor que o Menoflavon®, já que obtivemos resultados semelhantes e sua concentração é 24 vezes menor. No entanto, o estudo realizado mostrou que tanto o ESBF quanto o Menoflavon® não são capazes de estimular a osteogênese in vitro, a partir de cultura de osteoblastos derivados de células tronco mesenquimais. / Menopause is caused by failure in the production of ovarian hormones and its consequences are unfavorable changes in metabolism and bone loss. The decline in estrogen production is considered a major risk factor for the development of osteoporosis in women, and the Hormone Replacement Therapy is used as treatment. However, this therapy has brought some risks to the health of some groups of women. As an alternative to the traditional treatment, phytoestrogens as isoflavones, found mainly in soy, Trifolium pratense, Cimicifuga racemosa and rye can be used. This study aimed to compare the ability of two preparations of phytoestrogens to stimulate osteogenesis in vitro (from cultures of osteoblasts derived from mesenchymal stem cells): soy extract biotransformed by the fungus Aspergillus awamori (ESBF), and Menoflavon® 40mg (Melbrosin International) composed by the isoflavone Trifolium pratense. With this objective, were used: a) Evaluation of cell growth and proliferation; b) Viability of the cultures of osteoblasts; c) Determination of total protein from the cultures of osteoblasts; d) Determination of the specific activity of the enzyme alkaline phosphatase; e) Formation of mineralized matrix. Menoflavon® was tested at the concentrations of 28.75 nM of daidzein (D) + 7.5 nM of genistein (G) (Menoflavon® 0.5 ?g/mL); 57.5 nM D + 15 nM G (Menoflavon® 1 ?g/mL); and 230 nM D + 60 nM G (Menoflavon® 4 ?g/mL); standard control of commercial 57.5 nM D + 15 nM G and DMSO control. ESBF was tested at the concentrations of 1.181 nM D + 0.922 nM G (ESBF 0.5 ?g/mL); 2.361 nM D + 1.845 nM G (ESBF 1 ?g/mL); 9.445 nM D + 7.379 nM G (ESBF 4 ?g/mL); standard control of commercial 2.361 nM D + 1.845 nM G and dimetilsulfoxide (DMSO) control. With the MTT and Resazurin methods we verified that there was no cell death for all concentrations tested with the two formulations. The amount of total protein remained constant with the two formulations, and the formation of mineralized matrix also were the same as the control. The specific activity of alkaline phosphatase decreased significantly on day 14 for all concentrations tested, and at day 21 for some concentrations of Menoflavon®, with the ESBF decreased some days, however remained constant in the other tests. Therefore, ESBF proved better than Menoflavon®, since we obtained similar results for both, but the concentration of ESBF is 24 times smaller than the concentration of Menoflavon®. However, both the ESBF and the Menoflavon® were not capable of stimulating osteogenesis in vitro from cultures of osteoblasts derived from mesenchymal stem cells.
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Avaliação do desempenho de uma língua eletrônica na identificação de cultivares de soja. / Performance evaluation of an electronic tongue in identification of soybeans.

Gregorut, Camila 30 September 2010 (has links)
A soja é um produto de grande importância para a economia brasileira, pois o Brasil é o segundo produtor mundial de soja. Sua aplicação mais conhecida é como óleo refinado, entretanto, a soja é bastante utilizada nas mais variadas indústrias. Do ponto de vista nutricional, a soja se destaca por possuir um alto valor protéico, sendo por isso muito empregada em indústrias alimentícias. Porém, os produtos alimentícios a base de soja ainda enfrentam uma grande resistência por parte dos consumidores. Esta resistência do mercado consumidor tem motivado os produtores de soja e as indústrias a buscarem o desenvolvimento de grãos com características especiais. Este trabalho auxilia nesta busca, pesquisando um método capaz de discriminar cultivares de soja fornecidos pela Embrapa Soja através da utilização de uma Língua Eletrônica (LE). A Língua Eletrônica é um sistema multissensorial composto por um conjunto de sensores não-específicos que respondem diferentemente para cada analito, sendo capaz de reconhecer e diferenciar amostras através da obtenção de impressões digitais destas. Neste trabalho, os sensores da Língua Eletrônica foram construídos a partir de filmes automontados de polímeros condutores. Foram realizados testes de repetibilidade e reprodutibilidade, além do estudo de sensibilidade dos sensores que compõem o sistema multissensorial. A Língua Eletrônica construída mostrou-se capaz de diferenciar os cinco cultivares estudados, especialmente aqueles que possuíam características notadamente distintas. Foram observadas variações das medidas ao longo dos dias, o que foi atribuído a uma possível degradação dos grãos de soja e do extrato de soja preparado. Foi proposto ainda um método alternativo de preparação do extrato de soja sem a utilização de tratamento térmico. Devido ao seu bom desempenho nos estudos citados, a Língua Eletrônica se mostrou viável para o emprego em uma pré-seleção de cultivares de soja. / Soy is a commodity of great importance to the Brazilian economy since Brazil is the second biggest producer of soy in the world. Soybeans are usually employed in the production of refined oil for cooking as well as in many other foodstuff industries due to its high protein content. However, foodstuffs based on soy still face some resistance by consumers mainly because of the characteristic soy taste imposed to their respective products. This actual scenario has motivated producers and foodstuff industries to develop new soybeans varieties with improved and more pleasant taste. This work was intended to provide a methodology based on an electronic tongue system (ET) in order to help both producer and industries to develop and identify different soybean cultivars. Different soybeans cultivars developed by Embrapa Soja were evaluated by the ET. The ET is a multisensorial system composed by an array of non-specific, layer-by-layer assembled conducting polymer chemical sensors, which display distinct electrical fingerprints to different samples. The distinct responses make the ET capable to distinguish as well as recognize different samples when previously trained. The sensitivity, repeatability and reproducibility of chemical sensors responses to soybeans liquid extracts were evaluated and confirmed by exhaustive cyclic operation. The ET was indeed able to discriminate 5 different soybeans cultivars, in particular those with pronounced distinct properties. It was observed a systematic variation on the ET responses in a same day of analysis as well as for prolonged days which we have attributed to possible degradation of raw soybeans and its respective liquid extracts. An alternative procedure for soybean extract preparation absent of cooking was developed. The remarkable performance of the ET makes the system of great potential to perform the pre-selection of soybeans cultivars, with reliability and output.
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Avaliação do efeito osteogênico por diferentes fitoestrógenos em cultura de osteoblastos derivados de células tronco mesenquimais / Evaluation of the osteogenic effect of different phytoestrogens in osteoblasts culture derived from mesenchymal stem cells

Amanda Natalina de Faria 15 March 2013 (has links)
A menopausa é provocada pela falência da produção de hormônios ovarianos e tem como consequências alterações desfavoráveis no metabolismo e perda de massa óssea. O declínio da produção de estrógeno é considerado um grande fator de risco para o desenvolvimento da osteoporose em mulheres e como tratamento faz-se o uso da Terapia de Reposição Hormonal. No entanto, esta terapia tem trazido riscos á saúde de alguns grupos de mulheres. Como alternativa ao tratamento tradicional, tem-se os fitoestrógenos, e com eles as isoflavonas, encontradas principalmente na soja, Trifolium pratense e Cimicifuga racemosa. Este estudo teve como objetivo comparar a capacidade de estimular a osteogênese in vitro, a partir de cultura de osteoblastos derivados de células tronco mesenquimais, em duas preparações de fitoestrógenos: O extrato de soja biotransformado pelo fungo Aspergillus awamori (ESBF), e o Menoflavon® 40mg (Melbrosin International) composto pela isoflavona Trifolium pratense. Para este objetivo foram realizadas: a) Avaliação do crescimento e proliferação celular b) Viabilidade e crescimento das culturas de osteoblastos. c) Dosagem de proteína total das culturas de osteoblastos. d) Determinação da atividade específica da enzima fosfatase alcalina. e) Formação da matriz mineralizada. O Menoflavon® foi testado nas concentrações de 28,75 nM de daidzeína (D) + 7,5 nM de genisteína (G) (0,5 ?g/mL de Menoflavon®); 57,5 nM de D + 15 nM de G (1 ?g/mL de Menoflavon®); e 230 nM de D + 60 nM de G (4 ?g/mL de Menoflavon®); controle padrão de 57,5 nM de D + 15 nM de G comercial e controle de dimetilsulfóxido (DMSO). O ESBF foi testado nas concentrações de 1,181 nM de D + 0,922 nM de G (0,5 ?g/mL de ESBF); 2,361 nM de D + 1,845 nM de G (1 ?g/mL de ESBF); 9,445 nM de D + 7,379 nM de G (4 ?g/mL de ESBF); controle padrão de 2,361 nM de D + 1,845 nM de G comercial e controle de DMSO. Com a metodologia do MTT (3[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-brometo difenil tetrazolium) e da Resazurina comprovamos que não houve morte celular nas concentrações testadas com as duas formulações. A dosagem de proteínas totais manteve-se constante com as duas formulações e a formação de matriz mineralizada também manteve-se constante em relação ao controle para ambos. A atividade específica da fosfatase alcalina teve um decréscimo significativo ao 14º dia com todas as concentrações testadas e ao 21º dia com algumas concentrações de Menoflavon e com o ESBF decresceu em alguns dias, no entanto manteve-se estável no restante do teste. O ESBF mostrou ser melhor que o Menoflavon®, já que obtivemos resultados semelhantes e sua concentração é 24 vezes menor. No entanto, o estudo realizado mostrou que tanto o ESBF quanto o Menoflavon® não são capazes de estimular a osteogênese in vitro, a partir de cultura de osteoblastos derivados de células tronco mesenquimais. / Menopause is caused by failure in the production of ovarian hormones and its consequences are unfavorable changes in metabolism and bone loss. The decline in estrogen production is considered a major risk factor for the development of osteoporosis in women, and the Hormone Replacement Therapy is used as treatment. However, this therapy has brought some risks to the health of some groups of women. As an alternative to the traditional treatment, phytoestrogens as isoflavones, found mainly in soy, Trifolium pratense, Cimicifuga racemosa and rye can be used. This study aimed to compare the ability of two preparations of phytoestrogens to stimulate osteogenesis in vitro (from cultures of osteoblasts derived from mesenchymal stem cells): soy extract biotransformed by the fungus Aspergillus awamori (ESBF), and Menoflavon® 40mg (Melbrosin International) composed by the isoflavone Trifolium pratense. With this objective, were used: a) Evaluation of cell growth and proliferation; b) Viability of the cultures of osteoblasts; c) Determination of total protein from the cultures of osteoblasts; d) Determination of the specific activity of the enzyme alkaline phosphatase; e) Formation of mineralized matrix. Menoflavon® was tested at the concentrations of 28.75 nM of daidzein (D) + 7.5 nM of genistein (G) (Menoflavon® 0.5 ?g/mL); 57.5 nM D + 15 nM G (Menoflavon® 1 ?g/mL); and 230 nM D + 60 nM G (Menoflavon® 4 ?g/mL); standard control of commercial 57.5 nM D + 15 nM G and DMSO control. ESBF was tested at the concentrations of 1.181 nM D + 0.922 nM G (ESBF 0.5 ?g/mL); 2.361 nM D + 1.845 nM G (ESBF 1 ?g/mL); 9.445 nM D + 7.379 nM G (ESBF 4 ?g/mL); standard control of commercial 2.361 nM D + 1.845 nM G and dimetilsulfoxide (DMSO) control. With the MTT and Resazurin methods we verified that there was no cell death for all concentrations tested with the two formulations. The amount of total protein remained constant with the two formulations, and the formation of mineralized matrix also were the same as the control. The specific activity of alkaline phosphatase decreased significantly on day 14 for all concentrations tested, and at day 21 for some concentrations of Menoflavon®, with the ESBF decreased some days, however remained constant in the other tests. Therefore, ESBF proved better than Menoflavon®, since we obtained similar results for both, but the concentration of ESBF is 24 times smaller than the concentration of Menoflavon®. However, both the ESBF and the Menoflavon® were not capable of stimulating osteogenesis in vitro from cultures of osteoblasts derived from mesenchymal stem cells.
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Avaliação do desempenho de uma língua eletrônica na identificação de cultivares de soja. / Performance evaluation of an electronic tongue in identification of soybeans.

Camila Gregorut 30 September 2010 (has links)
A soja é um produto de grande importância para a economia brasileira, pois o Brasil é o segundo produtor mundial de soja. Sua aplicação mais conhecida é como óleo refinado, entretanto, a soja é bastante utilizada nas mais variadas indústrias. Do ponto de vista nutricional, a soja se destaca por possuir um alto valor protéico, sendo por isso muito empregada em indústrias alimentícias. Porém, os produtos alimentícios a base de soja ainda enfrentam uma grande resistência por parte dos consumidores. Esta resistência do mercado consumidor tem motivado os produtores de soja e as indústrias a buscarem o desenvolvimento de grãos com características especiais. Este trabalho auxilia nesta busca, pesquisando um método capaz de discriminar cultivares de soja fornecidos pela Embrapa Soja através da utilização de uma Língua Eletrônica (LE). A Língua Eletrônica é um sistema multissensorial composto por um conjunto de sensores não-específicos que respondem diferentemente para cada analito, sendo capaz de reconhecer e diferenciar amostras através da obtenção de impressões digitais destas. Neste trabalho, os sensores da Língua Eletrônica foram construídos a partir de filmes automontados de polímeros condutores. Foram realizados testes de repetibilidade e reprodutibilidade, além do estudo de sensibilidade dos sensores que compõem o sistema multissensorial. A Língua Eletrônica construída mostrou-se capaz de diferenciar os cinco cultivares estudados, especialmente aqueles que possuíam características notadamente distintas. Foram observadas variações das medidas ao longo dos dias, o que foi atribuído a uma possível degradação dos grãos de soja e do extrato de soja preparado. Foi proposto ainda um método alternativo de preparação do extrato de soja sem a utilização de tratamento térmico. Devido ao seu bom desempenho nos estudos citados, a Língua Eletrônica se mostrou viável para o emprego em uma pré-seleção de cultivares de soja. / Soy is a commodity of great importance to the Brazilian economy since Brazil is the second biggest producer of soy in the world. Soybeans are usually employed in the production of refined oil for cooking as well as in many other foodstuff industries due to its high protein content. However, foodstuffs based on soy still face some resistance by consumers mainly because of the characteristic soy taste imposed to their respective products. This actual scenario has motivated producers and foodstuff industries to develop new soybeans varieties with improved and more pleasant taste. This work was intended to provide a methodology based on an electronic tongue system (ET) in order to help both producer and industries to develop and identify different soybean cultivars. Different soybeans cultivars developed by Embrapa Soja were evaluated by the ET. The ET is a multisensorial system composed by an array of non-specific, layer-by-layer assembled conducting polymer chemical sensors, which display distinct electrical fingerprints to different samples. The distinct responses make the ET capable to distinguish as well as recognize different samples when previously trained. The sensitivity, repeatability and reproducibility of chemical sensors responses to soybeans liquid extracts were evaluated and confirmed by exhaustive cyclic operation. The ET was indeed able to discriminate 5 different soybeans cultivars, in particular those with pronounced distinct properties. It was observed a systematic variation on the ET responses in a same day of analysis as well as for prolonged days which we have attributed to possible degradation of raw soybeans and its respective liquid extracts. An alternative procedure for soybean extract preparation absent of cooking was developed. The remarkable performance of the ET makes the system of great potential to perform the pre-selection of soybeans cultivars, with reliability and output.

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