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Estudo comparativo da eficiência de diferentes técnicas de mensuração da concentração espermática em suínos / Efficiency of different measurement techniques of sperm concentration in swine

Vianna, Wagner Loesch 31 October 2006 (has links)
A inseminação artificial (IA) é uma técnica cada vez mais utilizada na suinocultura moderna, pois propicia ao suinocultor vantagens quanto ao desempenho dos reprodutores, ao controle dos cruzamentos e à facilidade na introdução de material genético. Entretanto, a produção de doses inseminantes com qualidade é um dos principais fatores envolvidos no sucesso da técnica. Nesse contexto, a adequada mensuração da concentração espermática do ejaculado suíno é parte fundamental da rotina de trabalho de Centrais de Inseminação Artificial em Suínos. Foram realizados dois experimentos onde se objetivou: Experimento 1 - avaliar a acurácia, a precisão e a robustez do volume do ejaculado do Espermiodensímetro de Karras (ESPM) e do Espectrofotômetro (ESPT), em comparação à Câmara de Neubauer (CN), técnica padrão e também produzir uma tabela de correção de escala do ESPM; Experimento 2 - avaliar o tempo gasto e a repetibilidade de cada técnica, além de comparar a tabela ajustada do ESPM produzida no Experimento 1 com a tabela padrão do ESPM. Utilizaram-se 141 ejaculados, que revelaram concentrações espermáticas médias (milhões de sptz/mL) e número médio de doses que poderiam ser produzidas, respectivamente de 229,1 e 22,6; 185,0 e 18,5; 283,6 e 28,0 para a CN, o ESPT e o ESPM. O viés médio (acurácia) obtido através da média da diferença do resultado da técnica alternativa e da técnica padrão, e o desvio-padrão do viés médio (precisão) do ESPT, em comparação à CN, foram, respectivamente de - 44,1 e 52,6, enquanto que para o ESPM foram de 54,5 e 44,8 (milhões de sptz/mL). Observou-se que o ESPT tende a subestimar e o ESPM a superestimar a concentração espermática, em comparação à CN. O ESPT foi igualmente preciso e mais acurado que o ESPM. Houve pouca influência do volume do ejaculado sobre os resultados do ESPM e do ESPT através dos resultados de robustez para o volume do ejaculado. O ESPM apresentou maior repetibilidade e menor tempo gasto para a realização dos exames, seguido do ESPT e, por último, da CN (P<0,05). A tabela produzida com os dados do Experimento 1 apresentou resultados mais aproximados aos da CN, em comparação com a tabela padrão do ESPM (2,96 bilhões de espermatozóides vivos/dose vs 2,36 bilhões de espermatozóides vivos/dose, respectivamente). Maiores informações de outras Centrais de Inseminação Artificial em Suínos (CIAS) sobre o uso a campo da tabela ajustada produzida, denominada \"Tabela Ajustada para o Espermiodensímetro LPS-FMVZ-USP\", seriam úteis para comprovar a sua eficiência a campo. / Artificial Insemination (AI) in swine is a rising technique that has been used during the last years at the swine production systems, because it furnish several advantages to the producers just like boar high efficiency, better breeding control and easiness in introducing foreign genetic materials. Nevertheless, high quality insemination doses output is one of the most important factors involving the technique success. In this manner, a correct measurement of the spermatic concentration of boars is a basic work routine of the Swine Artificial Insemination Centers (CIAS). Two trials had been performed, whose objectives were: Experiment 1 - evaluate the accuracy, precision and robustness for ejaculation volume of Spermdensimeter (ESPM) and Spectrofotometer (ESPT) in relation to the Neubauer Count chamber (CN), designed as the standard technique. Moreover, produce a scale correction of the ESPM table; Experiment 2 - evaluate the spent time and repetitiousness of each technique, and compare the ESPM adjusted table produced in Experiment 1 with the ESPM standard table. A total of 141 boar ejaculation was used for spermatic concentration measurement by the techniques described above. The average spermatic concentrations (106 sptz/mL) and average doses number were, respectively: 229.1 and 22.6, 185.0 and 18.5, 283.6 and 28.0 for CN, ESPT and ESPM. ESPT mean bias (accuracy) and standard deviation bias (precision), in relation to the CN were, respectively -44.1 and 52.6, while ESPM were 54.4 and 44.8 (106 sptz/mL). Through these results its possible to conclude that ESPT has a tendency to subestimate and ESPM to superestimate the spermatic concentration in relation to the CN. ESPT was more accurate and equally precise than ESPM. Little effect of ejaculation volume on accuracy and precision in both techniques (ESPM and ESPT) was confirmed by the robustness results. ESPM presented a minor coefficient of variation and timeless, followed by ESPT, and finally by CN (P<0,05). The adjusted table produced with Experiment 1 data presented similar results to CN, in relation to the ESPM standard table (2.96 billion of lives sptz/dose vs 2.36 billion of lives sptz/dose, respectively). Complementary data from others CIAS about field use of the ESPM adjusted table produced, named \"Adjusted Table for Karras Spermdensimeter LPS-FMVZ-USP\", would be useful to prove it efficiency.
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Estudo comparativo da eficiência de diferentes técnicas de mensuração da concentração espermática em suínos / Efficiency of different measurement techniques of sperm concentration in swine

Wagner Loesch Vianna 31 October 2006 (has links)
A inseminação artificial (IA) é uma técnica cada vez mais utilizada na suinocultura moderna, pois propicia ao suinocultor vantagens quanto ao desempenho dos reprodutores, ao controle dos cruzamentos e à facilidade na introdução de material genético. Entretanto, a produção de doses inseminantes com qualidade é um dos principais fatores envolvidos no sucesso da técnica. Nesse contexto, a adequada mensuração da concentração espermática do ejaculado suíno é parte fundamental da rotina de trabalho de Centrais de Inseminação Artificial em Suínos. Foram realizados dois experimentos onde se objetivou: Experimento 1 - avaliar a acurácia, a precisão e a robustez do volume do ejaculado do Espermiodensímetro de Karras (ESPM) e do Espectrofotômetro (ESPT), em comparação à Câmara de Neubauer (CN), técnica padrão e também produzir uma tabela de correção de escala do ESPM; Experimento 2 - avaliar o tempo gasto e a repetibilidade de cada técnica, além de comparar a tabela ajustada do ESPM produzida no Experimento 1 com a tabela padrão do ESPM. Utilizaram-se 141 ejaculados, que revelaram concentrações espermáticas médias (milhões de sptz/mL) e número médio de doses que poderiam ser produzidas, respectivamente de 229,1 e 22,6; 185,0 e 18,5; 283,6 e 28,0 para a CN, o ESPT e o ESPM. O viés médio (acurácia) obtido através da média da diferença do resultado da técnica alternativa e da técnica padrão, e o desvio-padrão do viés médio (precisão) do ESPT, em comparação à CN, foram, respectivamente de - 44,1 e 52,6, enquanto que para o ESPM foram de 54,5 e 44,8 (milhões de sptz/mL). Observou-se que o ESPT tende a subestimar e o ESPM a superestimar a concentração espermática, em comparação à CN. O ESPT foi igualmente preciso e mais acurado que o ESPM. Houve pouca influência do volume do ejaculado sobre os resultados do ESPM e do ESPT através dos resultados de robustez para o volume do ejaculado. O ESPM apresentou maior repetibilidade e menor tempo gasto para a realização dos exames, seguido do ESPT e, por último, da CN (P<0,05). A tabela produzida com os dados do Experimento 1 apresentou resultados mais aproximados aos da CN, em comparação com a tabela padrão do ESPM (2,96 bilhões de espermatozóides vivos/dose vs 2,36 bilhões de espermatozóides vivos/dose, respectivamente). Maiores informações de outras Centrais de Inseminação Artificial em Suínos (CIAS) sobre o uso a campo da tabela ajustada produzida, denominada \"Tabela Ajustada para o Espermiodensímetro LPS-FMVZ-USP\", seriam úteis para comprovar a sua eficiência a campo. / Artificial Insemination (AI) in swine is a rising technique that has been used during the last years at the swine production systems, because it furnish several advantages to the producers just like boar high efficiency, better breeding control and easiness in introducing foreign genetic materials. Nevertheless, high quality insemination doses output is one of the most important factors involving the technique success. In this manner, a correct measurement of the spermatic concentration of boars is a basic work routine of the Swine Artificial Insemination Centers (CIAS). Two trials had been performed, whose objectives were: Experiment 1 - evaluate the accuracy, precision and robustness for ejaculation volume of Spermdensimeter (ESPM) and Spectrofotometer (ESPT) in relation to the Neubauer Count chamber (CN), designed as the standard technique. Moreover, produce a scale correction of the ESPM table; Experiment 2 - evaluate the spent time and repetitiousness of each technique, and compare the ESPM adjusted table produced in Experiment 1 with the ESPM standard table. A total of 141 boar ejaculation was used for spermatic concentration measurement by the techniques described above. The average spermatic concentrations (106 sptz/mL) and average doses number were, respectively: 229.1 and 22.6, 185.0 and 18.5, 283.6 and 28.0 for CN, ESPT and ESPM. ESPT mean bias (accuracy) and standard deviation bias (precision), in relation to the CN were, respectively -44.1 and 52.6, while ESPM were 54.4 and 44.8 (106 sptz/mL). Through these results its possible to conclude that ESPT has a tendency to subestimate and ESPM to superestimate the spermatic concentration in relation to the CN. ESPT was more accurate and equally precise than ESPM. Little effect of ejaculation volume on accuracy and precision in both techniques (ESPM and ESPT) was confirmed by the robustness results. ESPM presented a minor coefficient of variation and timeless, followed by ESPT, and finally by CN (P<0,05). The adjusted table produced with Experiment 1 data presented similar results to CN, in relation to the ESPM standard table (2.96 billion of lives sptz/dose vs 2.36 billion of lives sptz/dose, respectively). Complementary data from others CIAS about field use of the ESPM adjusted table produced, named \"Adjusted Table for Karras Spermdensimeter LPS-FMVZ-USP\", would be useful to prove it efficiency.
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In vivo acute changes in ATP and glucose concentrations in the rat testicles following unilateral torsion: experimental study / Estudo experimental das alteraÃÃes agudas na glicemia e concentraÃÃes testiculares de ATP e glicose induzidas por torÃÃo unilateral, in vivo

SÃrgio Botelho GuimarÃes 04 April 2002 (has links)
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Spematic cord torsion is one of the more common surgical urological emergencies in childhood. An experimental study has been conducted to investigate acute changes in testicular concentrations of ATP and glucose following one-hour unilateral 720 testicular torsion. Sixty prepubertal male Wistar rats were distributed into two groups: Group 2(Ischemia) and Group 1(Sham operated). Each group(n=30) was divided into 5 subgroups (n=6). All animals were subjected to right testicular torsion of 720Â. The testicular torsion of animals from Group 1 was immediately corrected. Group 2 animals had their testicular torsion lasting one hour followed by detorsion. Testicles were collected and arterial blood samples taken from abdominal aorta of each animal subgroup at the and of ischemic period or one hour after sham operation and 0.5, 1,6 and 24 hours later. ATP and glucose concentrations were significantly decreased (p<0,05) in ischemia group as compared to sham group at the end of ischemic period. There was no difference in glycemia when comparing ischemic versus sham-operated rats. Glucose concentrations were significantly increase (p<0,05) in ipsilateral testis of sham-operated rats No significant change in ATP and glucose concentrations were found in the left testicle in comparasion to the ones measured in the rigth testicle of the same animal. The decrease in ATP and glucose concentrations may be explained by the reduction in blood flow to the torted testis imposed by torsion. The absence of significant contralateral alterations in the concentrations of ATP and glucose could be related to the limited time of isquemia imposed to the right testis. It is concluded that unilateral one-hour testicular torsion causes a decrease in ipsilateral testicular perfusion resulting in decresead testicular concentrations of glucose and ATP in the ipstelial (right) testicles and no alterations in the concentrations of glucose and ATP in the contraleral testicles. Simple testicle manipulation (Sham Operation) causes a signficant increase in glucose concentrations in the ipsilateral(right)testis. / A torÃÃo do cordÃo espermÃtico à a emergÃncia geniturinÃria mais comum na idade pediÃtrica. Foram estudadas as alteraÃÃes metabÃlicas agudas nas concentraÃÃes testiculares de ATP e glicose apÃs uma hora de isquemia induzida por torÃÃo do cordÃo espermÃtico. Sessenta ratos wistar machos prÃ-pÃberes, foram distribuÃdos em 2 grupos de 30 animais cada e cada grupo em 5 subgrupos de 6 ratos. Os ratos do grupo 1 foram submetidos à torÃÃo seguida por distorÃÃo imediata (cirurgia simulada) do testÃculo direito. Os animais do grupo 2 foram submetidos à torÃÃo do testÃculo direito (720o) durante uma hora. Os animais dos diferentes subgrupos foram sacrificados 30 minutos, 1 hora, 6 horas e 24 horas apÃs a distorÃÃo ou realizaÃÃo da cirurgia simulada para a remoÃÃo dos testÃculos e coleta de amostra de sangue arterial. As alteraÃÃes das concentraÃÃes de glicose e ATP foram determinadas por mÃtodos enzimÃticos. Ocorreu queda significante (p<0,05) da concentraÃÃo de glicose e ATP no tempo 0 h, nos testiculos isquemiados. NÃo ocorreram alteraÃÃes na glicemia nem nas concentraÃÃes de glicose e ATP nos testÃculos contralaterais. Os animais submetidos à cirurgia simulada apresentaram aumento significante (p< 0,05) da concentraÃÃo de glicose no testÃculo ipsilateral quando comparada à concentraÃÃo de glicose no testÃculo esquerdo dos mesmos animais nos tempos 0 h e 24h. A diminuiÃÃo do fluxo sangÃÃneo em decorrÃncia da torÃÃo explica a reduÃÃo das concentraÃÃes de ATP e glicose nos testÃculos isquemiados. A ausÃncia de alteraÃÃes nas concentraÃÃes de ATP e glicose nos testÃculos contralaterais (esquerdos) poderia ser uma decorrÃncia do reduzido tempo de isquemia imposto ao testÃculo ipsilateral (direito). Concluiu-se que a torÃÃo testicular unilateral de 720o, por uma hora, induz uma reduÃÃo significante (p < 0,05) das concentraÃÃes testiculares de ATP e de glicose no testÃculo isquemiado sem alteraÃÃes correspondentes da glicemia. A simples manipulaÃÃo do testÃculo direito (cirurgia simulada) induz um aumento da concentraÃÃo de glicose testicular.
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Proust et Platon. Convergences linguistiques, érotiques et philosophiques / Proust and Plato. Linguistic, amorous and philosophical convergences

Charcharé, Hélène 27 January 2017 (has links)
La thèse intitulée Proust et Platon se fonde principalement sur les affinités qui unissent les deux génies. Bien qu’il y ait un écart temporel considérable entre eux, on essaie d’élaborer un rapprochement à trois temps. Une première partie est consacrée à l’étymologie et la philosophie du langage, à savoir à l’effort de Proust et de Platon afin d’établir la rectitude du nom par rapport à la chose qu’il représente. Dans un tout premier temps, on met pour lors le langage à l’épicentre de notre analyse, en s’efforçant de localiser les différentes tendances –cratylisme, hermogénisme, naturalisme, conventionnalisme– dans un dialogue capital : le Cratyle. En deuxième lieu, c’est l’étymologie qui ranime toute cette effervescence linguistique, en représentant un sujet pivotal chez Proust et chez Platon : elle questionne l’emploi des mots et des noms, ainsi que leur relevance avec la chose qu’ils représentent. L’autre grande théorie linguistique proposée est l’hermogénisme, dû à la théorie d’Hermogène chez Cratyle. Il prétend mettre en avant la thèse centrale du disciple de Socrate qui soutient que les noms sont justes en fonction d’une convention entre les interlocuteurs qui les utilisent. Dans un deuxième temps, c’est l’amour dans toutes ses manifestations qui prend le relais. Il est question de l’œuvre la plus délectable de Platon, le Banquet. On va commencer en mettant en avant le propre rôle du banquet en tant qu’institution dans l’antiquité. Là on trouve sans aucun doute le champ le plus fécond afin de parler d’éros adolescent, de l’androgyne, mais aussi d’ἀγάπη. Mais le Banquet a aussi son côté aristophanesque : en attribuant au grand comédien l’articulation de son mythe le plus célèbre, Platon a voulu peut-être mettre en lumière le côté le plus parodique de l’éros. Toutefois, ce mythe paradisiaque déclenche aussi l’examen de bien des thèmes qui concerne l’homosexualité en Grèce d’antan. La partie proustienne sur l’amour se consacre dans un premier temps à l’importance du banquet mondain, lieu d’apprentissage social, érotique et artistique pour le narrateur. Ensuite, il repose sur les différentes manifestations de l’ἒρως et de l’ἀγάπη dans la Recherche : amitié, inversion, procréation artistique. La dernière étape de la deuxième partie est vouée à la mort et l’au-delà dans l’antiquité grecque et les trois narrations de descentes à l’enfer dans le corpus platonique. On va constater que la mort constitue au même titre que l’amour le leitmotiv incontournable de la Recherche également. Pour la partie finale, on a choisi un titre sans doute déconcertant : Δεύτερος πλοῦς, seconde navigation. Par là, on voudrait souligner l’effort de Platon et de Proust d’atteindre les vérités les plus inabordables en empruntant des sentiers iconoclastes : pour Platon, il s’agirait de la réminiscence, de l’esthétique idéale et du mythe, tandis que la section proustienne est axée sur le temps et la mémoire, l’esthétique et les diverses techniques narratives de la Recherche. On espère qu’à la fin de cette recherche les reflets contigus mis en évidence dans les œuvres de Platon et de Proust se seraient convertis en éclats miroitants. / The thesis entitled Proust and Plato is mainly based on the affinities between the two great figures of universal scope. Although there is a significant time gap between them, we have tried to develop an approximation in three distinct parts. The first part is devoted to etymology and philosophy of language, namely the effort of Proust and Plato to establish the correctness of the name against the thing it represents. At first, we put the language at the epicenter of our analysis, in an effort to locate the various tendencies, –cratylism, hermogenism, naturalism, conventionalism –, in a critical dialogue: the Cratylus. Secondly, it is etymology that revives the linguistic effervescence, representing a pivotal topic in both Proust and Plato: it questions the use of words and names, as well as their relevance with the thing they represent. The other great linguistic theory proposed is hermogenism, named after the theory of Hermogenes in the Cratylus, who argues that the names have been invented on the basis of an agreement between the people who use them. Secondly, it is love in all its manifestations that takes over: the focus is on the most delightful work of Plato, the Banquet. We will start by highlighting the role of the banquet as an institution in antiquity. These are without a doubt the mostappropriate surroundings to talk about pederasty, the androgyne, but also ἀγάπη. Nevertheless, the Banquet also has its Aristophanian side: by assigning to the great comedy writer the articulation of his most famous myth, Plato perhaps wanted to highlight the more satirical side of eros. However, this idyllic myth also triggers the review of many themes concerning homosexuality in ancient Greece. The Proustian part on love is dedicated initially to the importance of the aristocratic banquet, place of the social, romantic and artistic initiation of the Narrator. It is furthermore based on the different manifestations of ἒρως and ἀγάπη in the novel:friendship, homosexuality, artistic procreation. The last stage of the second part is dedicated to death and the beyond in Greek Antiquity and the three tales of nekyia in the Platonic corpus. We will underline the existence of it as a leitmotiv in the Proustian novel as well. The final section has a rather disconcerting title: Δεύτερος πλοῦς, a second navigation. Here, we would like to emphasize the effort of Plato and Proust to reach the most unfathomable truths by taking iconoclastic paths: for Plato, it would be reminiscence, Ideal aesthetics and myth, while the Proustian segment focuses on time and memory, aesthetics and the narrative techniques of the novel. We hope that at the end of this study the contiguous reflections highlighted in the works of Plato and Proust will have turned into dazzling sparkles.
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Avaliação dos efeitos da congelação do sêmen suíno em diferentes concentrações na palheta de 0,5 ml em relação às características de motilidade, integridade das membranas espermáticas e peroxidação lipídica / Assessment of the effects of freezing of boar semen in different concentrations in 0.5 ml straw in relation to the motility characteristics of the sperm integrity and membrane lipid peroxidation

Ravagnani, Gisele Mouro 26 June 2015 (has links)
A ausência de trabalhos verificando a melhor concentração de espermatozoides para se congelar o sêmen de cachaços em palhetas de 0,5 mL, gerou a necessidade deste estudo. Foi proposto, por meio deste expererimento, encontrar uma quantidade ideal, ou seja, uma concentração em que se consiga congelar o maior número de espermatozoides por palheta, sem aumentar os danos já causados pelo processo de criopreservação dos espermatozoides de cachaços. Diante disso, foram realizadas 5 coletas de 5 cachaços (n=25), utilizando apenas a fração rica do ejaculado. Estes foram divididos em cinco concentrações espermáticas diferentes, a saber: 100, 200, 300, 600 e 800x106 espermatozoides/mL e congelados em palhetas de 0,5mL. Após o processo de criopreservação, realizado por um sistema automatizado, as plalhetas foram acondicionadas em botijão criogênico. Para as análises, 2 palhetas de cada concentração foram descongeladas em banho maria (37ºC por 30 segundos) e submetido às avaliações das características de motilidade por meio do CASA, citometria de fluxo para a análise da integridade das membranas acrossomal e plasmática, potencial mitocondrial, peroxidação lipídica e fluidez da membrana espermática (capacitação), além da morfologia espermática por microscopia de contraste de interferência diferencial de fase. As variáveis avaliadas foram submetidas à análise de variância e ao teste de média PDDIF, ao nível de 5%. O aumento da concentração espermática, na palheta de 0,5mL, afetou significativamente (p<0,05) a motilidade total e progressiva, velocidade progressiva, velocidade de trajeto, linearidade, retilinearidade, frequência de batimento flagelar e hiperativação. O aumento do número de espermartozoides na palheta não alterou (p>0,05) a porcentagem de células que apresentavam simultaneamente a integridade das membranas plasmática e acrossomal e com potencial mitocondrial (MIAIAP), o aumento não influenciou (p>0,05) as variáveis peroxidação lipídica, capacitação e morfologia espermática. Baseado nos resultados, pode-se sugerir a congelação de até 300x106 espermatozoides/mL, na palheta de 0,5 mL, sem maiores danos à motilidade e integridade das membranas espermáticas. / The lack of studies veryfing the best concentration of sperm to freeze the boar semen in 0.5 ml straws, bring forth necessity for this study. The experiment proposed to find an optimal amount, in other words a concentration that is possible to freeze the higher number of spermatozoa per straw without increasing the damage already caused by the process of cryopreservation of boar spermatozoa. Therefore, there were 5 semen collections of 5 boars (n = 25) using only the rich fraction of the ejaculate. They were divided into five different sperm concentrations, namely 100, 200, 300, 600 and 800x106 sperm/mL and frozen in 0.5 mL straw. After the cryopreservation process, carried out by an automated system, straws were placed in cryogenic cylinders. For the analysis, two straws of each concentration were thawed in water bath (37°C for 30 seconds) and subjected to evaluations of motility characteristics through CASA, flow cytometry to analyze the integrity of the acrosome and plasma membrane, mitochondrial potential, peroxidation and lipid fluidity of sperm membrane (capacitation), and the sperm morphology by phase differential interference contrast microscopy. The variables were subjected to analysis of variance and the average test PDDIF, at 5%. The increased sperm concentration, in the 0.5mL straw, affected significantly (p <0.05) total and progressive motility, progressive velocity, path velocity, linearity, straightness, flagellar beat frequency and hyperactivation. The increase in the spermatozoa number, in 0,05 mL straw, did not change (p> 0.05) the percentage of cells that simultaneously showed the integrity of plasma and acrosomal membranes and with high mitochondrial potential (MIAIHM), the increase did not affect (p> 0.05) the lipid peroxidation variables, training and sperm morphology. Based on the results, it can be suggested to freeze with 300x106 spermatozoa/mL, in 0.5 mL straw, without major damage to the integrity and motility of the sperm membrane.
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Avaliação dos efeitos da congelação do sêmen suíno em diferentes concentrações na palheta de 0,5 ml em relação às características de motilidade, integridade das membranas espermáticas e peroxidação lipídica / Assessment of the effects of freezing of boar semen in different concentrations in 0.5 ml straw in relation to the motility characteristics of the sperm integrity and membrane lipid peroxidation

Gisele Mouro Ravagnani 26 June 2015 (has links)
A ausência de trabalhos verificando a melhor concentração de espermatozoides para se congelar o sêmen de cachaços em palhetas de 0,5 mL, gerou a necessidade deste estudo. Foi proposto, por meio deste expererimento, encontrar uma quantidade ideal, ou seja, uma concentração em que se consiga congelar o maior número de espermatozoides por palheta, sem aumentar os danos já causados pelo processo de criopreservação dos espermatozoides de cachaços. Diante disso, foram realizadas 5 coletas de 5 cachaços (n=25), utilizando apenas a fração rica do ejaculado. Estes foram divididos em cinco concentrações espermáticas diferentes, a saber: 100, 200, 300, 600 e 800x106 espermatozoides/mL e congelados em palhetas de 0,5mL. Após o processo de criopreservação, realizado por um sistema automatizado, as plalhetas foram acondicionadas em botijão criogênico. Para as análises, 2 palhetas de cada concentração foram descongeladas em banho maria (37ºC por 30 segundos) e submetido às avaliações das características de motilidade por meio do CASA, citometria de fluxo para a análise da integridade das membranas acrossomal e plasmática, potencial mitocondrial, peroxidação lipídica e fluidez da membrana espermática (capacitação), além da morfologia espermática por microscopia de contraste de interferência diferencial de fase. As variáveis avaliadas foram submetidas à análise de variância e ao teste de média PDDIF, ao nível de 5%. O aumento da concentração espermática, na palheta de 0,5mL, afetou significativamente (p<0,05) a motilidade total e progressiva, velocidade progressiva, velocidade de trajeto, linearidade, retilinearidade, frequência de batimento flagelar e hiperativação. O aumento do número de espermartozoides na palheta não alterou (p>0,05) a porcentagem de células que apresentavam simultaneamente a integridade das membranas plasmática e acrossomal e com potencial mitocondrial (MIAIAP), o aumento não influenciou (p>0,05) as variáveis peroxidação lipídica, capacitação e morfologia espermática. Baseado nos resultados, pode-se sugerir a congelação de até 300x106 espermatozoides/mL, na palheta de 0,5 mL, sem maiores danos à motilidade e integridade das membranas espermáticas. / The lack of studies veryfing the best concentration of sperm to freeze the boar semen in 0.5 ml straws, bring forth necessity for this study. The experiment proposed to find an optimal amount, in other words a concentration that is possible to freeze the higher number of spermatozoa per straw without increasing the damage already caused by the process of cryopreservation of boar spermatozoa. Therefore, there were 5 semen collections of 5 boars (n = 25) using only the rich fraction of the ejaculate. They were divided into five different sperm concentrations, namely 100, 200, 300, 600 and 800x106 sperm/mL and frozen in 0.5 mL straw. After the cryopreservation process, carried out by an automated system, straws were placed in cryogenic cylinders. For the analysis, two straws of each concentration were thawed in water bath (37°C for 30 seconds) and subjected to evaluations of motility characteristics through CASA, flow cytometry to analyze the integrity of the acrosome and plasma membrane, mitochondrial potential, peroxidation and lipid fluidity of sperm membrane (capacitation), and the sperm morphology by phase differential interference contrast microscopy. The variables were subjected to analysis of variance and the average test PDDIF, at 5%. The increased sperm concentration, in the 0.5mL straw, affected significantly (p <0.05) total and progressive motility, progressive velocity, path velocity, linearity, straightness, flagellar beat frequency and hyperactivation. The increase in the spermatozoa number, in 0,05 mL straw, did not change (p> 0.05) the percentage of cells that simultaneously showed the integrity of plasma and acrosomal membranes and with high mitochondrial potential (MIAIHM), the increase did not affect (p> 0.05) the lipid peroxidation variables, training and sperm morphology. Based on the results, it can be suggested to freeze with 300x106 spermatozoa/mL, in 0.5 mL straw, without major damage to the integrity and motility of the sperm membrane.
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Análises morfológicas do epidídimo de ratos pós-púberes e idosos após o tratamento com doses suprafisiológicas de decanoato de nandrolona e o exercício resistido em meio aquático / Morphological analyzes of the epididymis of adults and elderly rats after supraphysiological doses of nandrolone decanoate and resistance exercise in aquatic environment

Brandl, Lana 04 March 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T14:17:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lana_Branai.pdf: 2297634 bytes, checksum: 8dbbaa1b059e5e38dcdd38ba4a303557 (MD5) Previous issue date: 2016-03-04 / Nowadays, the search for beauty, has caused health problems associated with the use of anabolic androgenic steroid (AAS) and even strenuous exercise, and the male reproductive system is the subject of studies to be sensitive to changes in the concentration of this type of hormone; these changes may also occur with increasing age, causing changes in androgen-dependent organs, like the epididymis. This study aimed to verify if treatment with AAS associated or not to exercise, in Sprague-Dawley rats alters the morphology of the epididymis in adult rats and its chronic effects in the elderly. The training was conducted by jumping into the water, weighing overloading, being considered as resistance exercise in water. The AAS administration occurred by intramuscular injection of nandrolone decanoate (10 mg / kg / week). Epididymal samples were subjected by histological routine of hematoxylin and eosin for morphological and morphometric analysis. It was analyze all parts of the epididymis (initial segment, caput, corpus and cauda) of 56 Sprague-Dawley rats, virgins, with 13 weeks old, divided into eight groups with seven animals each: GC - adults and sedentary; GCi - elderly and sedentary; GN - adults, sedentary treated with AAS; GNi - elderly, sedentary treated with AAS; GE - adults treated with exercise; GEi - elderly treated with exercise; GNE - adults, exercise and treatment with AAS; GNEi - elderly, exercise and treatment with AAS. The results show significant changes in duct diameters; the GE was lower when compared to other groups, and the groups that were used anabolic steroids, had a larger diameter than the other, and these changes occurred mainly in the initial segments. The epithelial height in the initial segment was also considered higher in the groups that administered AAS. The elderly groups tend to return to normal, increasing the parameters of epithelial height and diameter when these were decreased, and lowering them when they were enlarged when compared with the related adult group (with common variable), except at the tail of GNEi. As the results of this study, we can conclude that both treatment in adulthood, with exercise and the use of AAS, changes morphometric and morphological parameters of the epididymis, and its chronic effects can be diminished with age. / Atualmente, a procura pela beleza estética, tem causado problemas de saúde associados ao uso de esteroides androgênicos anabolizantes (EAAs) e até mesmo a exercícios físicos intensos. O sistema genital masculino é alvo de estudos por ser sensível a mudanças na concentração desse tipo de hormônio; essas alterações também podem ocorrer com o aumento da idade, influenciando órgãos androgênio-dependentes, como o epidídimo. Nesse sentido, objetivou-se com esse estudo, verificar se o tratamento com EAAs associado ou não ao exercício físico resistido, em ratos Sprague-Dawley, altera a morfologia do Epidídimo em ratos adultos e seus efeitos a longo prazo em idosos. Foram analisadas todas as porções dos epidídimos (segmento inicial, cabeça, corpo e cauda) de 56 ratos, virgens, da linhagem Sprague-Dawley (com 13 semanas de vida ao iniciarem o experimento), separados em oito grupos com sete animais cada: GC - adultos e sedentários; GCi - idosos e sedentários; GN - adultos, sedentários, tratados com EAA; GNi - idosos, sedentários, tratados com EAA; GE - adultos tratados com exercício; GEi - idosos tratados com exercício; GNE - adultos, exercício e tratamento com EAA; GNEi - idosos, exercício e tratamento com EAA. O treinamento realizado foi exercício resistido em meio aquático (através de saltos na água, com sobrecarga) com duração de oito semanas (três vezes na semana). A administração de EAAs ocorreu pela aplicação intramuscular de Decanoato de Nandrolona (10 mg/kg/semana) também durante oito semanas (duas vezes na semana). Amostras epididimárias passaram pela rotina histológica de hematoxilina e eosina para análise morfológica e morfométrica. Os resultados mostraram alterações significativas nos diâmetros de ductos, sendo que o GE foi menor quando comparado ao controle, e, nos grupos em que foram utilizados anabolizantes, tiveram diâmetro aumentado significativamente, e essas alterações ocorreram principalmente nos segmentos mais iniciais. A altura epitelial, no segmento inicial, também foi maior nos grupos em que foi utilizado anabolizante. Os grupos idosos tenderam a retornar a normalidade, aumentando os parâmetros de altura e diâmetro quando esses estavam diminuídos, e diminuindo-os quando estavam aumentados em comparação ao grupo adulto relacionado (com variável em comum), a não ser na cauda, do GNEi, em que houve aumento significativo. Achados morfológicos indicaram presença de debris celulares em lúmen (GN e GNEi) e infiltrados intersticiais (GN, GNE, GE e GCi). Conforme os resultados desse estudo, pôde-se concluir que tanto o tratamento na fase adulta com exercício, quanto à utilização de EAAs altera parâmetros morfométricos e morfológicos do epidídimo, e que seu efeito crônico pode ser diminuído com a idade.
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Impact des facteurs maternels et paternels sur les résultats de FIV / ICSI et investigations génétiques des spermatozoïdes d'hommes infertiles / Impact of maternal and paternal factors on the results of IVF / ICSI and genetic investigations on the spermatozoa of infertile men

El Fekih, Sahar 20 December 2018 (has links)
L’infertilité concerne 8 à 12% des couples en âge de procréer. Face à ce problème, des prises en charge médicales peuvent être proposées comme la fécondation in vitro (FIV) et l’injection intracytoplasmique de spermatozoïde (ICSI). Toutefois, le taux d’échec de ces techniques reste relativement élevé. Dans la première partie, l’impact des facteurs maternels et paternels sur les résultats de 194 cycles de FIV et 586 cycles d’ICSI a été étudié. L’âge maternel, le nombre d’ovocytes ponctionnés et matures influencent principalement les résultats. Ni l’âge paternel ni les paramètres spermatiques (numération et mobilité) ne s’associent significativement à l’échec des techniques d’assistance médicale à la procréation (AMP). Seule la morphologie du spermatozoïde injecté a une influence sur la fécondation en ICSI. En deuxième partie, l’apoptose, la fragmentation de l’ADN et le contenu chromosomique avant et après tri cellulaire à l’aide des microbilles magnétiques ont été étudiés chez des hommes avec un taux de fragmentation de l’ADN spermatique anormal et chez des hommes porteurs d’une anomalie chromosomique constitutionnelle. Une diminution significative des spermatozoïdes apoptotiques avec un ADN fragmenté et chromosomiquement déséquilibrés a été observée. Le tri cellulaire aboutissant à une sélection de spermatozoïdes de meilleure qualité pourrait s’avérer une méthode de référence pour l’AMP. Dans une troisième partie, un protocole fiable a été élaboré pour étudier le transcriptome des spermatozoïdes. La mise au point de ces technologies permettra de mieux comprendre les causes d’échec des techniques d’AMP et ainsi améliorer leur taux de réussite. / Infertility concerns 8-12% of couples of reproductive age. Various medical treatments such as in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) are available to address this problem. However the rate of failure of these procedures remains relatively high.In the first part of this work the impact of maternal and paternal factors on the results of 194 IVF cycles and 586 ICSI cycles was studied. Results are mainly affected by maternal age, the number of oocytes retrieved and the number of mature oocytes collected. Neither paternal age nor spermatic parameters (number and mobility) are significantly associated with the failure of Assisted Reproductive Technologies (ART). Only the morphology of the sperm injected during ICSI influences fertilization rate.In the second part of this work apoptosis, DNA fragmentation and the chromosomal content before and after cell sorting with magnetic micro beads were studied in men with an abnormal level of sperm DNA fragmentation and in men with a constitutional chromosome abnormality. A significant decrease of apoptic spermatozoa with fragmented DNA and chromosome imbalance was observed. Thus cell sorting leading to the selection of better quality spermatozoa could become a reference method for ART.In a third part of the work a reliable protocol for the study of spermatic transcriptomes is designed.The development of these technologies will lead to a better understanding of the underlying causes ofART failure and thus increase the success rate.
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Efeito da gelatina na refrigeração à 50C do sêmen ovino / Gelatin in the extender of the ram semen cooled at 50C

Gheller, Stela Mari Meneghello 12 February 2015 (has links)
Submitted by Ubirajara Cruz (ubirajara.cruz@gmail.com) on 2017-05-15T16:46:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) / Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2017-05-16T16:45:47Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-16T16:45:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertacao_Stela_Gheller.pdf: 569023 bytes, checksum: a5e2134d6233755fa80a8cad9319a551 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Na refrigeração a sobrevivência da célula espermática é dependente da sua orientação espacial no meio diluidor não devendo essas se aglutinarem e nem sedimentarem. Em diluentes mais sólidos como os suplementados com gelatina, essa disposição pode ser beneficiada, além de ocorrer uma redução na demanda metabólica celular devido a redução da motilidade quando refrigerado. Em decorrência disto, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição de gelatina ao diluente para sêmen ovino acondicionado a 50, através de parâmetros de qualidade seminal realizados por teste in vitro durante um período de até 72hs.. Foram utilizados 8 carneiros, realizando-se 4 coletas de sêmen para cada macho, totalizando 32 ejaculados. Dois diluentes foram utilizados neste estudo, E1 (leite integral 10%, 0,2 g de D-gligose, 50 mg de estreptomicina e 100 ml de água mili Q), e a E2 (E1 acrescido de 1,5% de gelatina). Foram avaliados os parâmetros de motilidade, morfologia espermática, integridade de membrana, DNA e acrossoma durante os períodos de 0, 24, 48 e 72h de armazenado a 5ºC. Durante as primeiras 48 horas de armazenamento, não houve diferença estatística na motilidade entre E1 e E2, no entanto, a E2 nas 72 horas (51,9%) foi mais eficaz (P <0,05) na manutenção dos parâmetros de motilidade do que o E1 (31,1%). A integridade do acrossoma foi semelhante em ambos os extensores a 0, 24 e 48 horas, mas às 72h a E2 foi maior (P <0,05) da qualidade neste parâmetro (E1= 42,9 e E2 = 66,9). As variáveis, integridade de membrana, DNA, e morfologia espermática, não apresentaram diferença entre os tratamentos (P>0,05). Com os resultados encontrados pode-se concluir que a adição de gelatina na concentração de 1,5% ao diluente melhorou a motilidade e integridade do acrossoma em sêmen ovino armazenado por até 72hs, a 5ºC aumentando assim o período de armazenamento das doses em 24 horas, sem perda de qualidade do espermática em testes realizado in vitro. / Under refrigeration, the spermatic cell survivability depends upon its spatial orientation in the extender medium and the agglutination or sedimentation of these cells should not occur. In more solid extenders like the one supplemented with gelatin, the spatial disposition can be improved, and also the metabolic demand is lower by the reduced motility provoked by more solid medium. The main aim of this work was evaluate the qualitative effect provoked by addition of gelatina to the ram semen extender stored at 5ºC. There were used 8 rams being accomplished 4 semen collections for each, totalizing 32 ejaculates. Two extenders were used in this study, E1 (whole milk 10%, 0.2g D-Glugose, 50 mg streptomycin and 100 ml of mili Q water), and the E2 (E1 plus 1.5% of gelatin). There were evaluated motility, cell morphology, DNA, membrane and acrosome integrity, during the period of 0h, 24hs, 48hs, and 72 hours of storage under refrigeration at 5°C. During the first 48hs of storage the spermatic motility remained the same in the E1 and E2, however, at 72hs the E2 (51,9%) was more efficient in the maintenance of the motility parameters (P<0.05) than the E1 (31,1%). The acrosome integrity was similar in both extenders at 0h, 24hs and 48h of storages, but at 72hs the E2 showed the best result (P<0.05) in this parameter (E1=42,9% and E2=66,9%). The viability, morphology and membrane and DNA integrity had not shown statistical difference comparing the treatments (P>0.05). With the results there is possible to conclude that the addition of gelatin to the extender increased the motility and acrosome integrity in ram semen stored at 5ºC, increasing through this the possibility of extending the storage time under refrigeration of the semen doses to more than 24hs.
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Expressão de aquaporinas (AQPS 1 e 9) nos ductos eferentes e epidídimo de ratos Wistar com obesidade induzida induzida por dieta de cafeteria

Ferreira, Leonardo Eduardo 01 July 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-10T14:17:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leonardo.pdf: 2065969 bytes, checksum: ecaa0d3dc812ef2017f1f16fc1f49d2a (MD5) Previous issue date: 2013-07-01 / The induction of obesity in experimental animals with cafeteria diet simulates the high-calorie food that humans eat, nowadays, thus enabling to study obesity and comorbidities resulting from this condition. The male reproductive system is directly affected by obesity with increased lipid peroxidation, increase of apoptotic bodies, changes in parameters espermatobioscópicos and reduced fertility. The aim of the study was to evaluate whether there are changes caused by obesity in epithelia of efferent ducts and epididymis , both in relation to morphology and expression of aquaporins 1 and 9 ( AQPs 1 and 9 ) in adult Wistar rats . After weaning , the animals were randomly divided into two groups : control group ( CON ) received standard diet and water ad libitum ( n = 10 ) and group cafeteria ( CAF ) , which received cafeteria diet soda and degassed ad libitum ( n = 10). The treatment group CAF began after the 12th week of life, totaling 40 weeks of consumption of cafeteria diet, being all dead animals with 52 weeks of age. The efferent ducts , along with initial segments ( Si ) , head ( Cç ) , body ( Co ) and tail ( Cd ) epididymis were submitted to routine histological and immunohistochemical staining for AQP- 1 and AQP- 9 . In the present study we evaluated the data: body mass, length nasoanal, waist circumference, Lee index and retroperitoneal fat mass and perigonadais; also evaluated dimensions, using morphometry and morphology of the epithelia of the efferent ducts and segments Si, Cç, Co and Cd epididymis and analyzed the expression of AQP- 9 and AQP- 1 in the efferent ducts and epididymal segments above. Changes in expression of AQPs in the efferent ducts and the epididymal epithelium were observed with increased expression of AQP- 1 and AQP- 9 reduction in efferent ducts and epididymal cauda, respectively, in animals treated with cafeteria diet. Also, there were morphological changes in the epididymal epithelium, such as increasing the number and size of cells and clear halo; increased endocytic organelles, and heterogeneous distribution of stereocilia, in animals with diet-induced obesity cafeteria. Given the results, it is believed that these changes should cause a profound impact on the luminal environment and interfere in the transport process, maturation, maintenance, protection and storage of sperm, being responsible for obesity alter the expression of AQP- 1 in efferent ducts, AQP- 9 in the epididymal cauda, the relative distribution of cells and clear halo and morphological characteristics of these parts via the sperm. However, more studies are needed to elucidate the specific mechanisms by which the cafeteria diet affects sperm morphology via specifically efferent ducts and epididymal ducts / A indução à obesidade, no modelo experimental animal com dieta de cafeteria, simula a alimentação com alto teor calórico que os seres humanos ingerem, na atualidade, possibilitando, assim, estudar a obesidade bem como as comorbidades advindas desta condição. O sistema genital masculino é afetado diretamente pela obesidade com aumento de peroxidação lipídica, aumento de corpos apoptóticos, mudanças nos parâmetros espermatobioscópicos e redução de fertilidade. O objetivo do estudo foi avaliar se há alterações causadas pela obesidade nos epitélios dos ductos eferentes e epididimário, tanto em relação à morfologia quanto à expressão de aquaporinas 1 e 9 (AQPs 1 e 9) em ratos Wistar adultos. Após o desmame, os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: grupo controle (CON), que recebeu dieta padrão e água ad libitum (n=10) e grupo cafeteria (CAF), que recebeu dieta de cafeteria e refrigerante desgaseificado ad libitum (n=10). O tratamento do grupo CAF teve início depois da 12º semana de vida, totalizando 40 semanas de consumo da dieta de cafeteria, sendo todos os animais mortos com 52º semanas de idade. Os ductos eferentes, juntamente com segmentos inicial (Si), cabeça (Cç), corpo (Co) e cauda (Cd) do epidídimo, foram submetidos à rotina histológica e imunohistoquímica para AQP-1 e AQP-9. No presente estudo foram avaliados os dados: massa corporal, comprimento nasoanal, circunferência abdominal, índice de Lee e massa das gorduras retroperitoniais e perigonadais; também, avaliou-se dimensões, através de morfometria, e características morfológicas dos epitélios dos ductos eferentes e segmentos Si, Cç, Co e Cd do epidídimo, bem como foram analisadas as expressões de AQP-9 e AQP-1 nos ductos eferentes e segmentos epididimários supracitados. Alterações na expressão das AQPs, nos ductos eferentes e parte do epitélio epididimário, foram observadas com aumento na expressão de AQP-1 e redução de AQP-9 nos ductos eferentes e cauda epididimária, respectivamente, dos animais tratados com dieta de cafeteria. Também, ocorreram alterações morfológicas no epitélio epididimário, como aumento do número e tamanho de células halo e claras; aumento de organelas endocíticas; e distribuição heterogênea de estereocílios, nos animais com obesidade induzida por dieta de cafeteria. Em vista dos resultados, acredita-se que essas alterações devem causar um profundo impacto sobre o ambiente luminal e interferir no processo de transporte, maturação, manutenção, proteção e armazenamento dos espermatozoides, sendo a obesidade responsável por alterar a expressão de AQP-1 nos ductos eferentes, da AQP-9 na cauda epididimária, a distribuição relativa de células claras e halo e características morfológicas destas partes da via espermática. No entanto, mais estudos são necessários para esclarecer os mecanismos específicos pelos quais a dieta de cafeteria afeta a morfologia da via espermática, especificamente dos ductos eferentes e ductos epididimários

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