Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_isabel_madrid.pdf: 2158071 bytes, checksum: 0cdf6bd60773cb623d04e6df539e8aa9 (MD5) Previous issue date: 2011-02-25 / Sporotrichosis has been receiving attention in any world in the several areas of the health as an important fungal disease. So, this work aimed: (i) to study cases of sporotrichosis diagnosed in the south region of Rio Grande do Sul in a period of ten years, (ii) to study the morphological and pathogenicity characteristics of S. schenckii isolates, (iii) to determine the sensitivity of S. schenckii isolates to the commercial disinfectants. Sporotrichosis cases were analysed as for geographical distribution, it clinical forms of the disease, presence of the fungus in different anatomical sites and tecidual inflammatory response. The 42 S. schenckii isolates originating from clinical cases, environment isolates and reference strains used in the phenotypic study were evaluated as for macromorphology in Sabouraud agar added of chloramphenicol, potato agar and ágar lactrimel, incubated 25ºC and 35ºC for 21 days. The micromorphology was analyzed in potato agar to 25ºC whereas the termotholerance was evaluated in ágar Sabouraud added of 1% yeast extract, incubated 41ºC for seven days. Ultraestructural study of nine clinical isolates and two reference strains of S. schenckii were carried by transmission electron microscopy. Susceptibility of 12 S. schenckii isolates to disinfectants was performed by the techniques of broth microdilution, agar diffusion and direct exposute test. The 103 cases of sporotrichosis in animals demonstrated that this is an endemic mycosis in the south region of Rio Grande do Sul being more frequent in young felines and adult dogs. The felines developed disseminated cutaneous form with more frequency. Therefore, in canines, the fixed cutaneous form was predominant though it has taken place in 18.2% of the dog to respiratory form with absence of cutaneous lesions. Research of the S. schenckii in nails, oral cavity, conjunctival mucosa, blood and testicles demonstrated high fungal positivity in samples of oral cavity (45.2%) and testicles (46.6%). The study of the hematological alterations related with the clinical form of the disease demonstrated that animals with the cutaneous fixed form of the mycosis do not present alterations in the blood count. However, animals with the cutaneous disseminated form develop important alterations characterized mainly for leucocytosis with neutrophilia and anaemia. Morphological analyzes of 42 clinical and environmental isolates of S. schenckii demonstrated macro and micromorphogical differences in the different culture medium utilized. In the thermotolerance evaluation 26.2% isolates were capable of growth at 41oC, specially isolates of feline sporotrichosis. The ultraestructural study showed presence of granules of melanin in all S. schenckii isolates of canine sporotrichosis and correlation among melanin and cell wall thickness. In vitro evaluation of disinfectants demonstrated chlorexidine digluconate antifungal activity in the microdilution broth and agar diffusion techniques and the sodium hypochlorite showed best performance in the direct exposure test. The presence of the organic matter interfered in the antifungal action of both disinfectants. Sodium hypochlorite showed better results with total elimination of the fungal load in the absence of organic matter and a reduction of 60 % of the fungal load in the presence of this. / A esporotricose tem se destacado mundialmente nas diversas áreas da saúde como uma importante doença fúngica. Assim, este trabalho teve como objetivos: (i) estudar casos de esporotricose diagnosticados na região sul do Rio Grande do Sul num período de dez anos, (ii) estudar as características morfológicas e de patogenicidade de isolados de Sporothrix schenckii, (iii) determinar a suscetibilidade de S. schenckii a desinfetantes comerciais. Os casos de esporotricose foram analisados quanto a distribuição geográfica, forma clíinica da doença, presença do fungo em diferentes sítios anatômicos e resposta tecidual. Os 42 isolados de S. schenckii provenientes de casos clínicos, isolados do ambiente e cepas de referência utilizados no estudo fenotípico foram avaliados quanto a macromorfologia em ágar Sabouraud acrescido de cloranfenicol, ágar batata e ágar lactrimel incubados a 25ºC e 35ºC por 21 dias. A micromorfologia foi avaliada em ágar batata a 25ºC enquanto que a termotolerância foi avaliada em ágar Sabouraud acrecido de extrato de levedura 1% incubado a 41ºC por sete dias. O estudo ultraestrural dos nove isolados clínicos e duas cepas de referência de S. schenckii foi realizado por microscopia eletrônica de transmissão. A suscetiblidade de 12 isolados de S. schenckii a desinfetantes foi realizada pelas técnicas de microdiluição em caldo, difusão em agar e teste de exposição direta. Os 103 casos de esporotricose em animais demonstraram que esta é uma micose endêmica na região sul do Rio Grande do Sul ocorrendo com mais freqüência em felinos jovens e cães adultos. Os felinos desenvolveram principalmente a forma cutânea disseminada enquanto que em caninos, a forma cutânea fixa foi a mais freqüente embora tenha ocorrido em 18,2% dos caninos, a forma respiratória com ausência de lesões cutâneas. A pesquisa do fungo S. schenckii em unhas, cavidade oral, mucosa conjuntival, sangue e testículos revelou alta positividade fúngica em amostras de testículos (46,6%) e cavidade oral (45,2%). O hemograma de animais com a forma cutânea fixa não apresentou alterações nos valores hematológicos enquanto que aqueles com a forma cutânea disseminada apresentaram alterações tanto no leucograma como no eritrograma, caracterizadas por leucocitose por neutrofilia e anemia normocítica e normocrômica. A análise morfológica de 42 isolados clínicos e do ambiente de S. schenckii demonstrou diferenças macro e micromorfológicas nos diferentes meios de cultivo utilizados. Na avaliação da termotolerância obteve-se 26,2% dos isolados termotolerantes, sendo a maioria proveniente de casos de esporotricose felina. O estudo ultraestrutural revelou presença de grânulos de melanina em todos os isolados de S. schenckii originados de esporotricose canina e correlação entre presença de melanina e espessura da parede celular. A avaliação in vitro de desinfetantes demonstrou maior ação antifúngica do digluconato de clorexidina nas técnicas de microdiluição em caldo e difusão em agar enquanto que o hipoclorido de sódio apresentou melhor eficácia na técnica de exposição direta. A presença de matéria orgânica interferiu na ação antifúngica de ambos os desinfetantes, entretanto, o hipoclorito de sódio apresentou melhores resultados com inativação total da carga fúngica na ausência de matéria orgânica e redução de 60% da carga fúngica na presença desta.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-01-27T09:53:10Z No. of bitstreams: 1 camilasoaresfurtadocouto.pdf: 1669181 bytes, checksum: 87973d12c5cb4fed37df8f6a9afc5413 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-01-27T11:08:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 camilasoaresfurtadocouto.pdf: 1669181 bytes, checksum: 87973d12c5cb4fed37df8f6a9afc5413 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-27T11:08:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 camilasoaresfurtadocouto.pdf: 1669181 bytes, checksum: 87973d12c5cb4fed37df8f6a9afc5413 (MD5) Previous issue date: 2014-07-10 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A esporotricose é uma importante micose subcutânea, que pode afetar seres humanos e animais, cujo principal agente etiológico é o Sporothrix schenkii. O tratamento de micoses vem sendo motivo de preocupação, devido à ocorrência de recidivas e surgimento de linhagens resistentes aos antifúngicos convencionais (sintéticos). Desta forma, há uma crescente busca por novos fármacos de origem sintética ou oriundo de fontes naturais eficazes e com novos mecanismos de ação. O objetivo deste trabalho foi identificar os componentes dos óleos essenciais de Baccharis trimera e Origanum vulgare por meio da cromatografia gasosa, investigar seus potenciais antifúngicos in vitro frente a quatro linhagens de Sporothrix schenckii e duas de S. brasiliensis. A anfotericina B e o cetoconazol foram utilizados como fármacos de referência. Os ensaios antifúngicos foram realizados por meio da triagem microbiológica e estabelecidas as concentrações inibitórias mínimas (CIM) e fungicidas mínimas (CFM) para as substâncias de interesse. A análise cromatográfica do óleo essencial de B. trimera demonstrou que o β-pineno (23,4%) foi o componente majoritário e no óleo de O. vulgare foi o γ-terpineno (30,5%) . Os valores de CIM e de CFM para o óleo de B. trimera e O. vulgare foram, respectivamente, 125 μg/mL e 62,5 μg/mL para a linhagem A; 500 μg/mL e 62,5 μg/mL para a linhagem B; 125 μg/mL e 125 μg/mL para o isolado S. schenckii ATCC 1099-18; 32,25 μg/mL e 125 μg/mL para o S. brasiliensis ATCC 5110; 62,5 μg/mL e 250 μg/mL para S. brasiliensis IPEC 17943 e 125 μg/mL e 500 μg/mL para o S. schenckii IPEC 15383. A ação dos dois óleos essenciais foi caracterizada como fungicida. Através das imagens de microscopia eletrônica de varredura (MEV), pode ser observado que os óleos essenciais provocam os mesmos tipos de alterações que os fármacos de referência, e em alguns casos em maior intensidade. Os resultados obtidos até o momento revelaram-se promissores e estimulam a continuidade da pesquisa. / Sporotrichosis is an important subcutaneous mycosis, that can affect humans and animals, which is the main etiological agent Sporothrix schenkii. The treatment of fungal infections has been of concern due to the occurrence of relapses and the emergence of strains resistant to conventional antifungal drugs (synthetic). Thus, there is a growing search for new and effective natural products with novel mechanisms of action. The objective was to identify the components of the essential oils of Origanum vulgare and Baccharis trimera and investigate their potential antifungal in vitro against four strains of S. schenckii and two of S. brasiliensis. Amphotericin B and ketoconazole were used as reference drugs. Antifungal assays were performed by means of microbiological screening and established the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) for the substances of interest. The chromatographic analysis of the essential oil of B. trimera demonstrated that β - pinene (23.4%) was the major component and in O. vulgare oil was the γ - terpinene (30.5%) . The MIC and MFC values for oil B. trimera and O. vulgare were, respectively, 125 μg/mL and 62.5 μg/mL for strain A; 500 μg/mL and 62.5 μg/mL for strain B; 125 μg/mL e 125 μg/mL for S. schenckii ATCC 1099-18; 32.25 μg/mL and 125 μg/mL for strain S. brasiliensis ATCC 5110; 62.5 μg/mL and 250 μg/mL for S. brasiliensis IPEC 17943; 125 μg/mL and 500 μg/mL for S. schenckii IPEC 15383. The action of the essential oil was characterized as a fungicide. Through the images of scanning electron microscopy may be noted that the essential oils cause the same kinds of changes that reference drugs, and in some cases greater intensity. The results obtained so far have shown promise and stimulate continuing research.

Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010 / Historicamente a esporotricose esteve associada a profissionais que lidam com a terra, local onde o fungo causador habita. No entanto, recentemente em determinada área urbana tem sido registrada a ocorrência de casos relacionados à arranhadura ou mordedura de animais como o gato, levando a surtos familiares, acometendo indivíduos de todas as faixas etárias e sexo. Objetivo: Analisar a distribuição sócio-espacial da esporotricose na Região Metropolitana do Estado do Rio de Janeiro no período de 1997 a 2007, caracterizando padrões e espaços críticos e condições particulares da transmissão. Metodologia Estudo descritivo sócio-espacial dos dados do Serviço de Vigilância em Saúde/IPEC,que foram complementados pela revisão dos prontuários. Para espacialização foi utilizada a técnica de Georreferenciamento dos casos, pelo endereço de residência. Resultados: Foram diagnosticados 1.848 casos, com média de 168 casos/ano. O último quadriênio totalizou 1.289 casos - 2,3 vezes mais que nos sete anos anteriores. Foram atendidas predominantemente mulheres (66,9 por cento), com idade entre 20 e 69 anos (53,3 por cento), que permaneciam no domicílio por um período prolongado, à serviço ou não (33,1 por cento) em relação a 8,4 por cento de homens.Do total de atendidos, 16,61 por cento relatou história de trauma com plantas e 66,88 por cento trauma com animal: 78,1 por cento correlacionado a gatos e 8,8 por cento sem correlação com felinos. Relacionou-se a existência de felino(s) no domicílio à contaminação pelo Sporotrichum schenckii através do gato. 95 por cento dos pacientes residiam na Região Metropolitana. . O georreferenciamento de 1.681 casos (91 por cento), mostrou que 1.610 residiam em cinco Municípios limítrofes ao Rio de Janeiro. A análise de Kernel evidenciou sete áreas onde a transmissão apresentou-se mais intensa. Duas localidades foram selecionadas para estudo dos padrões de transmissão: a primeira identificada como AQ-RJ e a segunda identificada como AQ-DC. A primeira foi escolhida pela intensidade variada durante o período e a segunda pela intensidade no final do período. Utilizando como limite para análise a primeira faixa de intensidade do Kernel foram identificados os casos que compunham cada localidade - em ambas a distribuição por sexo permaneceu 2:1 mulheres / homem, com atividades relacionadas à casa 37,5 por cento e 62,5 por cento respectivamente. Neste aspecto foi observada ligeira diferença com relação ao perfil do Estado, onde a média foi de 41 por cento. Na AQ_RJ 58,3 por cento e na AQ_DC 75 por cento dos pacientes adoeceram por trauma com gato, em média 66 por cento dos pacientes possuem gato no ambiente domiciliar. Conclusões: Gatos em ambiente domiciliar, como opção para controle de roedores e em contato com a natureza, é fator de risco para contaminação por esporotricose. Os ratos podem estar sendo a população-ponte entre o fungo e os gatos e, principalmente nos lugares onde a intensidade de transmissão da doença tem sido mais elevada, existe um ambiente propício para sua difusão. Ações de educação em saúde, o tratamento dos animais, o controle dos vetores e a melhoria das condições de saneamento são caminhos importantes para o controle da doença. O desconhecimento sobre a doença e os cuidados necessários para evitar a contaminação, contribuem para manutenção dos casos ao longo destes anos. Para o real conhecimento da situação epidemiológica da esporotricose humana no Estado do Rio de Janeiro é necessária a instituição desta como Doença de Notificação Compulsória a Nível Estadual. / Historically sporotrichosis has been related to professionals dealing with soil, which is the place where causal fungus live. Recently however, case occurrence registers, related to animal scratches or animal bites, as cats living in an urban area, leading to family outbreaks and individuals exposure from all ages and genre. Objective: to analyze the sporotrichosis socio-spacial distribution in the Metropolitan Region of Rio de Janeiro state through the period of 1997 to 2007, characterizing patterns and critical spaces and particular transmission conditions. Methodology: descriptive socio-spatial data study from the Health Surveillance Service / IPEC, which has been complemented by medical forms review. Case georeferencing technique was used for spatialization through home addresses. Results: 1848 cases were diagnosed with mean of 168 cases per year, and the last quadrennium totalizing 1289 cases- 2,3 more times than the last past 7 years. Women were predominantly treated (66,9%), adults (between 20 and 69 years old =53,3%), staying at home for long periods, either workers or non-workers; 33,1% in relation to 8,4% males. 16,61% told a story about trauma with plants to 66,88% trauma with animal, from these 78,1% related it to their cat and 8,8% did not mention the feline source. The Sporotrichum schenckii relation to contamination was identified by cats, by the fact of having a cat at home. 95% of patients lived in the Metropolitan Region. Georeferencing of 1681 cases (91%), showed that 1610 lived in 5 Municipality areas neighboring the Rio de Janeiro municipality. Kernel analysis brought 7 areas into evidence where the most intense transmission was shown. For the transmission patterns study two localities were identified: the first one was identified as AQ-RJ and the second one was identified as AQ-DC, the first one was chosen because of its varied intensity during the period and the second one for the intensity at the end of that period. Using the first Kernel intensity for the analysis limit, the cases which comprehended each locality were identified, in both, genre distribution remained 2:1 female/male, with home related activities 37,5% and 62,5% respectively, this fact is differentiated from the State profile, where the mean was 41%. In these localities 58,3% and 75% patients became ill by trauma with cats, with an average of 66% having a cat in the home environment. Conclusions: cats into home environment as an option to rodent control and nature contact, are the risk factor for sporotrichosis contamination. Rats may be the bridging population between fungus and cats, mainly in places with highest transmission intensity with an appropriate environment for their spreading. Health education actions, animal treatment, vector control and sanitation improvement conditions are important ways to control the disease. Lack of disease knowledge and necessary care, in order to avoid contamination, contribute for the maintenance of cases along the years. For the actual epidemiological situation acknowledgment of human sporotrichosis in the Rio de Janeiro state, it is necessary to establish it as a Mandatory Disease Reporting at State level.