Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A leptina tem um papel importante na regulação do sistema reprodutivo além de seu papel principal na regulação do peso corporal e ingestão alimentar. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração de leptina durante o período neonatal na função testicular da prole adulta. Vinte e quatro filhotes de 12 mães foram divididos em 2 grupos: Grupo leptina: injetados com 50 L de leptina (80ng/gPC, subcutânea) nos primeiros 10 dias de vida e Grupo Controle: injetados com o mesmo volume de solução salina. Todos os animais foram sacrificados aos 90 dias de vida. Parâmetros analisados: consumo alimentar, massa corporal, crescimento linear, data de início da puberdade, perfil lipídico, níveis séricos de estradiol e testosterona, expressão gênica (PCR em tempo real) e expressão proteica (Western blot) de ObRa, OBRb, aromatase, AR, ER, morfometria testicular, número, morfologia e viabilidade de espermatozoides. Os dados foram expressos como média erro padrão. A significância estatística foi determinada pelo teste t de Student. A Injeção de leptina levou a uma redução (p≤0,008) no consumo alimentar a partir do dia 26 ao 40 e do dia 70 em diante, enquanto que a massa corporal (p≤0,03) e o crescimento linear (p≤0,05) foram reduzidos do dia 26 até o dia 45. O peso da hipófise (p≤0,0006), hipotálamo (p≤0,01), próstata (p≤0,003), testículo (p≤0,008) e epidídimo (p≤0,004) e bexiga (p≤0,009) foram significativamente reduzidos pela injeção de leptina. A Injeção de leptina adiantou o início da puberdade (C=45,0 0,3; L=41,6 0,3; dias, P≤0,0001). Em relação ao perfil lipídico, a administração de leptina gerou um aumento nos níveis séricos de TG (C= 116,5 15,9; L=172,6 19,7; ng/dL, P≤0,05) e uma redução nos níveis de HDL (C=33 1,5; L = 24 3,5; ng/dL, P≤0,02). Os níveis séricos de testosterona também foram reduzidos pela leptina (C=5,2 1,0; L=1,1 0,3; ng/mL, P≤0,003). Todos os genes avaliados por PCR em tempo real mostraram um aumento na sua expressão: Obra (C=0,32 0,04; L=0,69 0,16; P≤0,04), OBRb (C=0,37 0,06; L=0,71 0,16; P≤0,03), AR (C=0,28 0,02; L=0,71 0,16; P≤0,02), Aromatase (C=0,31 0,04; L=0,53 0,09; P≤0,04), ER-α (C=0,79 0,03; L=0,93 0,03; P≤0,01), ER-β (C=0,29 0,03; L=0,73 0,16; P≤ 0,02). Por outro lado, a expressão proteica de OBR (C=4,4 0,29; L=6,6 0,84; P≤0,05), ER-α (C=0,4 0,02; L=0,6 0,05; P≤0,03) e aromatase (C=0,4 0,03; L=0,5 0,02; P≤0,04) aumentaram, enquanto que a expressão proteica de AR (C=0,16 0,01; L=0,09 0,01; P≤0,009) foi reduzida pela administração de leptina. A análise morfométrica mostrou que a leptina levou a um aumento da área total do túbulo seminífero (C=64,6 3,1; L=56,1 2,1;μm, P≤0,01), aumento da área luminal (C=40,6 2,3; L= 48,7 0,9; μm P≤ 0,004) e na altura do epitélio (C=21,5 1,2; L=24,6 1,1; μm, P≤0,03), enquanto que o comprimento do túbulo seminífero foi reduzido no grupo tratado (C=2200 350; L= 1100 110;cm, P≤0,006). A administração de leptina levou a um aumento no número total de espermatozoides (C=20x107 2x107; L=30x107 5x107;Cls/mL, P≤0,009) e no número de anormalidades (C=40,6 1,9; L=45,8 1,2, P≤0,049). Podemos concluir que a leptina tem um papel importante na morfologia e função testicular. A leptina parece ter efeito direto neste tecido uma vez que a expressão gênica e proteica de OBR, AR, ER e aromatase foram alterados pela administração da leptina. / Leptin has an important role in regulating the reproductive system besides its main role in the regulation of body weight and food intake. The aim of this study was to evaluate the effect of leptin administration during the neonatal period in the testis function of the adult offspring. Twenty-four pups from 12 dams were separated into 2 groups: Leptin group: injected with 50μL of leptin (80ng/gBW, subcutaneous); control group: injected with the same volume of saline solution for the first 10 days of life. All animals were killed at 90 days of life. Parameters analyzed: Body weight, linear growth and food consumption; onset of puberty, lipid profile, testosterone and estradiol serum levels, gene (Real time PCR) and protein expression (Western blot) of OBRa, OBRb, aromatase, AR, ER, testicular morphometry, spermatozoa number, morphology and viability. Data were expressed as mean standard error. Statistical significance was determined by students t-test. Leptin injection led to a reduction in food consumption (p≤0.008) from day 26 to 40 and from day 70 onward while body weight (p≤0.03) and linear growth (p≤0.05) were reduced from 26 to 45 days of life. Pituitary (p≤0.0006), hypothalamus (p≤0.01), prostate(p≤0.003), testis (p≤0.008), epididymis(p≤0.004) and bladder (p≤0.009) weights were significantly reduced by leptin injection. Leptin injection also advanced the onset of puberty (C=45.0 0.3; L=41.6 0.3; days, P≤0.0001). In relation to lipid profile, leptin administration led to an increase in TG (C=116.5 15.9; L=172.6 19.7; ng/dL, P≤0.05) and a reduction in HDL (C=33 1.5; L=24 3.5; ng/dL, P≤0.02) serum levels. Testosterone serum levels (C=5.2 1.0; L=1.1 0.28; ng/mL, P≤0.003) were also reduced by leptin. All gene evaluated by real time PCR showed an increase in its expression: OBRa (C=0.32 0.04; L=0.69 0.16; P≤0.04), OBRb (C=0.37 0.06; L=0.70 0.16; P≤0.03), AR (C=0.28 0.02; L=0.71 0.16; P≤0.02), Aromatase (C=0.31 0.04; L=0.53 0.09; P≤0.04), ER-α (C=0.79 0.03; L=0.92 0.03; P≤0.01), ER-β (C=0.29 0.03; L=0.7286 0.16; P≤0.02). On the other hand, the protein expression of OBR (C=4.4 0.29; L=6.6 0.84; P≤0.05), ER-α (C=0.4 0.02; L=0.44 0.02; P≤0.03) and aromatase (C=0.4 0.03; L=0.5 0.01;AU, P≤0.04) were increased while AR (C=0.16 0.01; L=0.09 0.01; P≤0.009) was reduced by leptin administration. The morphometric analysis showed that leptin led to an increase in the total area (C=64.6 3.1; L=56.1 2.1; μm P≤0.01) and luminal areas (C=40.6 2.3; L=48.7 0.9; μm P≤0.004) and in the epithelial height (C=21.5 1.2; L=24.6 1.1; μm P≤0.03), while the length of seminiferous tubule was reduced (C=2200 350; L= 1100 110; cm P≤0.006). Leptin administration led to an increase in the total number of spermatozoa (C=20x107 2x107; L=30x107 5x107; P≤0.009) and in the number of abnormalities (C=40.6 1.9; L=45.8 1.2; P≤0.049). We can conclude that leptin has an important role in the morphology and testis function. The leptin effect seems to be direct in this tissue since the gene and protein expression of OBR, AR, ER and aromatase and spermatozoa number were changed by leptin administration.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:03:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-25. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:00Z : No. of bitstreams: 1 000847999.pdf: 2110688 bytes, checksum: 3cfbc2629db1b4c973c6917a12690b53 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As células de Sertoli, encontradas no epitélio seminífero, formam a barreira hematotesticular através de suas junções comunicantes e de oclusão, responsável por proporcionar um ambiente protegido e coordenar o processo espermatogênico, fundamental para a manutenção da fertilidade masculina. A dinâmica de formação da barreira hematotesticular está diretamente relacionada com o equilíbrio entre síntese e degradação de moléculas especializadas, e sofre influência através de regulação androgênica e de fatores de crescimento específicos como o TGF-β2, sendo particularmente sensível aos fatores ambientais. A exposição à desreguladores endócrinos (DEs), capazes de interferir na modulação da barreira, pode levar a infertilidade. Atualmente o fator masculino pode ser responsável por 30-50% dos casos de infertilidade, sendo de grande importância o estabelecimento da relação entre a exposição aos DEs e o processo de formação dos gametas. Este estudo objetivou correlacionar a ação de dois desreguladores endócrinos, o Monobutil ftalato (MBP) e o Bisfenol A (BPA), em diferentes períodos de exposição, a partir de uma dose de baixa toxicidade, sobre a linhagem HSec de células de Sertoli humanas (in vitro) e sua possível ação sobre proteínas da barreira hematotesticular e proteínas regulatórias envolvidas na modulação da degradação e síntese dessa barreira. Para tal, as células da linhagem HSec foram cultivadas em meio específico para a expansão e submetidas à exposição ao MBP e ao BPA em baixas doses por 6 e 48 horas. Em seguida, as células foram isoladas e submetidas à extração de proteínas. Foram analisadas as proteínas: Ocludina, Ncaderina, β-catenina e Receptor de Andrógeno (AR) por Western Blot. Os resultados foram comparados para os dois agentes nos diferentes períodos de exposição em relação às células não expostas, mostrando que os dois agentes foram capazes de reduzir a... / Sertoli cells, found in the seminiferous epithelium, form the blood-testis barrier via their gap and tight junctions, responsible for providing a protected environment and coordinate the spermatogenic process, essential for male fertility maintenance. The dynamics of the blood-testis barrier formation is directly related to the balance between synthesis and degradation of specialized molecules, and is influenced by androgen regulation and specific growth factors such as TGF-β2, being particularly sensitive to environmental factors. Exposure to endocrine disruptors (EDs), which interfere in the barrier modulation, can lead to infertility. Currently the male factor may be responsible for 30-50% of infertility cases, being the establishment of the relationship between exposure to EDs and the process of gametes formation of great importance. This study aimed to correlate the action of two EDs, monobutyl phthalate (MBP) and bisphenol A (BPA) in different periods of exposure, from a dose of low toxicity on the HSec lineage of human Sertoli cells (in vitro) and its possible action on proteins of blood-testis barrier and regulatory proteins involved in modulation of degradation and synthesis of this barrier. To this end, cells were cultured in HSec lineage specific medium and exposed to MBP and BPA in low doses for 6 and 48 hours. Then, cells were isolated and subjected to protein extraction. Proteins analyzed were: occludin, Ncadherin, β-catenin and Androgen Receptor (AR) by Western blot. The results were compared for the two agents in different exposure times to non-treated cells, showing that both agents were able to reduce the expression of important BTB proteins, presenting potential for disrupting the structure and maintenance of the barrier and, consequently, sperm production and male fertility

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / In this research we observed the effects of different anabolic androgenic steroid administration for protocols (EAA), selecting two molecules, Boldenone (BOL) and Stanozolol (ST).Among the used protocols, Protocol I, represents users who want to accelerate the anabolic effects using higher than recommended doses, in a shorter period of time, the Protocol II represents groups of anabolic steroid users, who elect a moderate dose and time intermediate and protocol III, which represents users that reduce the dose and prolong the exposure time for the purpose of decreasing androgenic effects. Our findings strongly suggest that the treatment with BOL and ST affect the anxiety, dominance and aggression behavior in mice dose and time of exposuredependent. Furthermore, it is emphasized that the memory impairment induced by boldenone is correlated with the increase of acetyl cholinesterase (AChE) activity in cerebral cortex and hippocampussuggesting that a dysfunction of the cholinergic system may be involved in the mechanism of this alteration, along with the damage associated with oxidative stress as well described in our results. Simultaneously, we evaluated the impact of these treatments on the morphology and oxidative stress parameters in the testes of rats. The increased of oxidative and nitrosative stress markers was evident, as well as significant changes in the normal morphology of the testicle, which is probably associated with the presence of these reactive species.The mechanisms by which the EAA interfere with testicular physiology and behavioral changes have not been deeply studied by our group, but there is strong evidence of the involvement of reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) in development. Our data shows that EAA, even at low doses, might result in a neuropathological consequences. Similarly, in the testis, no protocol proved to be safe in removing the possibility of reproductive disturbances that could lead to long-term sterility. / Na presente tese verificamos os efeitos de diferentes protocolos de adiministração de esteróides androgênicos anabolizantes (EAA) utilizando duas diferentes moléculas frequentemente eleitas pelos usuários, a Boldenona (BOL) e o Estanazolol (ES). Dentre os protocolos utilizados, o protocolo I, representa os usuários que desejam acelerar os efeitos anabólicos usando doses superiores às recomendadas, em um intervalo de tempo mais curto, o protocolo II representa grupos de usuários de esteróides anabolizantes, que elegem uma dose moderada e tempo intermediário e protocolo III, que representa usuários que reduzem a dose e prolongam o tempo de exposição com o objetivo de diminuir os efeitos androgênicos.Nossos dados sugerem fortemente que o tratamento com BOL e ES afetam o comportamento de ansiedade, dominância e agressividade em ratos de forma dependente da dose e do tempo de exposição. Além disso, destaca-se que a perda da memória induzida pela BOL correlaciona-se com o aumento da atividade da acetilcolinesterase (AChE) no córtex cerebral e no hipocampo, e que essa disfunção do sistema colinérgico poderia estar envolvido no mecanismo dessa alteração, somado ainda ao dano associado ao estresse oxidativo também descrito em nossos resultados. Ao mesmo tempo, avaliou-se o impacto desses tratamentos sobre a morfologia e os parâmetros de estresse oxidativo dos testiculos de ratos. Foi evidenciado a elevação dos marcadores de estresse oxidativo e nitrosativo assim como alterações significativas na morfologia normal do testiculo, que provavelmente está associado a presença dessas espécies reativas. Ainda que não tenhamos aprofundados os mecanismos pelos quais os EAA interferem com a fisiologia testicular e as alterações comportamentais, está claro que há um envolvimento das espécies reativas de oxigênio (ERO) e espécies reativas de nitrogênio (ERN) no desenvolvimento das mesmas. Nossos dados levantam a preocupação de que os EAA, mesmo em pequenas doses, possam provocar consequências neuropatológicas levando a alterações comportamentais distintas de acordo com o protocolo utilizado. Da mesma forma, no testiculo, não houve protocolo seguro que descartasse a possibilidade de alterações reprodutivas que poderiam a longo prazo levar a esterilidade.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 486467 bytes, checksum: bdc60d374f992e09ac77346aa7e98b20 (MD5) Previous issue date: 2005-12-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study of the testis morphology and the spermatogenetic process in wild animals is fundamentally important for the knowledge about the physiologic patterns by which the assisted reproduction protocols are established. The following objectives were proposed in this study: to describe the data of both testis morphometry and seminiferous tubule; to quantify the population relationships of the seminiferous epithelium, Sertoli cell indexes, and the testis spermatic reserve, as well as to characterize and describe the arrangement of the intertubular space components in adult African lions (Panthera leo) kept in captivity. So, testis fragments taken from five adult lions proceeding from zoological parks located in São Paulo and Minas Gerais states. The animals were submitted to testis biopsies in order to obtain biological material for the histological evaluation of the obtained fragments. The average body weight of these animals was 183.7 kg, from which 0.015% were allocated in testis mass and 0.009% were specifically in the seminiferous tubules that represented 75.6% of the testis parenchyma. The average diameter of the seminiferous tubules was 252.7 m and the average thickness of the seminiferous epithelium was 93.2 μm. The African lions averaged 12.3 meters for seminiferous tubule per testis gram. In these animals seminiferous epithelium, 10.3 primary spermatocytes at preleptotene phase are produced by A-type spermatogonia. During meiotic divisions, only 2.7 spermatids were produced from primary spermatocytes. The general spermatogenesis production of the African lions kept in captivity was 22.1 cells, and each Sertoli cell was able to sustain and maintain 14.9 cells of the germinative line, from which 7.9 are round spermatids. At each seminiferous epithelium cycle, approximately 103 million spermatozoids are produced by each gram of testis. In relation to the intertubular compartment in African lions testis, about 16% of the testis parenchyma is occupied by Leydig cells, 7.1% by conjunctive tissue, and 0.7% by blood vessels. The average volume of the Leydig cells and their average nuclear diameter were found to be 2578 μm3 and 7.1 μm, respectively. The Leydig cells occupied 0.0019% of the corporal weight, on the average, and their average number for each testis gram was superior to that found for most mammals, as exceeding 50 million. / O estudo da morfologia testicular e do processo espermatogênico em animais selvagens é fundamental para o conhecimento de padrões fisiológicos, pelos quais podem-se estabelecer protocolos em reprodução assistida. Os objetivos deste estudo foram descrever dados de morfometria testicular e túbulo seminífero, quantificar as relações populacionais do epitélio seminífero, índice de células de Sertoli e a reserva espermática testicular, e ainda, caracterizar e descrever o arranjo dos componentes do espaço intertubular, em leões africanos (Panthera leo) adultos, mantidos em cativeiro. Para tal, foram utilizados fragmentos testiculares obtidos de cinco leões adultos, provenientes de Parques Zoológicos dos Estados de São Paulo e Minas Gerais, os quais foram submetidos a biópsias testiculares a fim de se obter material biológico para avaliação histológica dos fragmentos obtidos. Nos animais estudados, o peso corporal médio foi de 183,7 kg, dos quais 0,015% estão alocados em massa testicular e 0,009%, especificamente em túbulos seminíferos, os quais representaram 75,6% do parênquima testicular. O diâmetro médio dos túbulos seminíferos foi de 252,7μm e a espessura média do epitélio seminífero foi de 93,2μm. Os leões africanos apresentaram, em média, 12,3 metros de túbulo seminífero por grama de testículo. No epitélio seminífero destes animais, 10,3 espermatócitos primários em pré-leptóteno são produzidos por espermatogônias do tipo A. Durante as divisões meióticas, apenas 2,7 espermátides foram produzidas a partir de espermatócitos primários. O rendimento geral da espermatogênese de leões africanos mantidos em cativeiro foi de 22,1 células e, cada célula de Sertoli, foi capaz de sustentar e manter 14,9 células da linhagem germinativa, das quais 7,9 são espermátides arredondadas. A cada ciclo do epitélio seminífero, cerca de 103 milhões de espermatozóides são produzidos por grama de testículo. Em relação ao compartimento intertubular do testículo de leões africanos, cerca de 16% do parênquima testicular é ocupado por células de Leydig, 7,1% por tecido conjuntivo e 0,7 % por vasos sanguíneos. O volume médio das células de Leydig e o seu diâmetro nuclear médio, encontrados foram, respectivamente, 2578 μm3 e 7,1 μm. As células de Leydig ocuparam em média 0,0019% do peso corporal e seu número médio por grama de testículo apresentou-se superior ao encontrado para a maioria dos mamíferos, ultrapassando os 50 milhões.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1375953 bytes, checksum: 3ac86e7ae358657b9a411be671fd6137 (MD5) Previous issue date: 2006-11-30 / Universidade Federal de Viçosa / For this experiment it was utilized testicles fragments from 14 adults White-Eyed Parakeet (Aratinga leucophthalma), proceeding from the Centro de Triagem de Animais Silvestres - Universidade Federal de Viçosa, Minas Gerais, Brazil. The fragments were evaluated for seasonal reproductive activities using the following parameters: average thickness of testicular tunica albuginea, volumetric proportion of tubular and extratubular compartment, average diameter of the seminiferous tubules, and in addition the average of corporal weight. For this experiment the animals were distributed into four groups and had collected testicular fragments on the following dates: February 6, 2006, May 11, 2006, August 16, 2006 and November 7, 2006. These dates corresponded to the seasons of Summer, Fall, Winter and Spring respectively. The animals were submitted to general anesthesia, using a volatile gas, and a incisional biopsy was made using celioscopy. The fragments collected were processed histologically, the slides were prepared and later evaluated using an optical microscope. The average seasonal values of body weight increased starting at the Winter and reaching the peak during the Spring. A seasonal testicle cycle was observed in Aratinga leucophthalma, since increased significant values of volumetric proportion of seminiferous tubules, average diameter of the seminiferous tubules and degree of spermatogenic development were observed during the Spring, in contrast with the minimum values of these same parameters observed during the Fall. Furthermore, the average thickness of the testicular tunica albuginea was significantly greater during the Fall, showing a significant and gradual decrease of the values during the Spring. The evaluated parameters of spermatic production in Aratinga leucophthalma, during the different seasons, showed strong positive correlations with the average daily light (p<0,1) and strong negative correlation with the relative air humidity (p<0,1). In conclusion, during the Spring the testicles of the Aratinga leucophthalma show the values of the quantitative parameters of spermatic production, compatible with the period of greater activity, the opposite happening during the Fall. / Para o presente experimento foram utilizados fragmentos testiculares de 14 periquitões-maracanã (Aratinga leucophthalma) adultos, provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres da UFV, para a avaliação sazonal da atividade reprodutiva através dos seguintes parâmetros: espessura média da albugínea testicular, proporção volumétrica dos compartimentos tubular e extratubular, diâmetro médio do túbulo seminífero, além do peso corporal. Para tal, os animais foram distribuídos em quatro grupos e tiveram fragmentos testiculares coletados nas seguintes datas: 06/02/2006, 11/05/2006, 16/08/2006 e 07/11/2006, correspondendo ao período intermediário das estações de verão, outono, inverno e primavera, respectivamente. Os animais submetidos à anestesia geral volátil foram biopsiados por meio de celioscopia. Os fragmentos coletados foram processados histologicamente para confecção de lâminas, que foram avaliadas ao microscópio de luz. Os valores médios sazonais de peso corporal foram crescentes a partir do inverno, culminando com as maiores médias durante a primavera. Um ciclo testicular sazonal foi observado em A. leucophthalma, uma vez que valores significativamente maiores de proporção volumétrica de túbulos seminíferos, diâmetro médio dos túbulos seminíferos e grau de desenvolvimento espermatogênico foram observados na primavera, em relação aos valores mínimos destes parâmetros observados no outono. A espessura média da albugínea testicular foi significativamente maior durante o outono, apresentando decréscimo gradativo até atingir valores significativamente menores na primavera. Os parâmetros da produção espermática avaliados em A. leucophthalma, nas diferentes estações do ano, apresentaram alta correlação positiva com a luminosidade média diária (p<0,1) e alta correlação negativa com a umidade relativa do ar (p<0,1). Conclui-se que durante a primavera, os testículos de A. leucophthalma apresentam os valores dos parâmetros qualiquantitativos de produção espermática compatíveis com período de maior atividade reprodutiva, o inverso acontecendo durante o outono.

Thesis submitted in fulfilment of the requirements for the degree Master of Technology: Biomedical Technology in the Faculty of Health and Wellness Sciences at the Cape Peninsula University Of Technology 2014 / Oxidative stress (OS) plays a central role in the progression of diabetes mellitus (DM). Prevention of DM and its complications is a challenging health problem as it impacts on various organ functions, including reproduction. Diabetes mellitus with hyperglycaemic condition generates high production of reactive oxygen species. An imbalance between antioxidant mechanism and reactive oxygen species generates oxidative stress. OS damages the sperm membrane by oxidation of polyunsaturated fats which in turn reduces the sperm motility and ability to fuse with the oocyte and OS directly damage sperm DNA, compromising the paternal genomic contribution to the embryo development. Recent experimental evidence shows that modulation of oxidative stress and natural antioxidants may determine the outcome of male reproductive function. Previous investigations indicate that the supplementation and treatment with phytomedicine might play role in the prevention and management of DM and its subsequent complications on male reproductive function. This study explored the pharmacological potential of kolaviron (KV) on testicular and epididymal tissue in diabetic and non- diabetic Wistar rats. All experiments were conducted for a period of six weeks. Male Wistar rats (240–290 g) were randomly divided into 5 groups (n=12) where all the rats received a standard diet. Non diabetic rats control group and other four groups injected with different treatments. Non diabetic rat (N) received vehicle: Dimethylsulfoxide. Diabetes rats (D) were induced by a single intraperitoneal injection of freshly prepared streptozotocin (STZ) solution, 50mg/kg body weight. The N and D were treated with kolaviron (100 mg/kg body weight) orally, five times a week .The last group, diabetic rats were given subcutaneously injection of the standard anti-diabetic drug, insulin (0.2 u/kg) every second day. After the feeding period, testicular and epididymal tissues were collected and were analysed. All parameters were determined using appropriate methods in homogenized tissues. Data were expressed as mean ± SD. Plasma glucose as well as malondialdehyde (MDA) was significantly higher, while body, testicular and epididymal weights were lower in the D group compared to the N group and N+KV. Both kolaviron and insulin were able to ameliorate these effects. Testicular and epididymal antioxidant enzymes such as superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx) in induced diabetic rats were significantly (p<0.05) low compared to diabetic control group. However, KV treated group shown significantly higher SOD, CAT and GPx activities compared D group. In conclusion, our findings demonstrated that KV could improve antioxidant enzymes and modulate STZ induced diabetic related oxidative stress in the male reproductive system. Kolaviron can potentially be used as an anti-diabetic treatment, however further studies are needed. Key words: Oxidative stress, Diabetes mellitus, antioxidants, kolaviron, epididymal tissue, testicular tissue, superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase, lipid peroxidation, streptozotocin

Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / A leptina tem um papel importante na regulação do sistema reprodutivo além de seu papel principal na regulação do peso corporal e ingestão alimentar. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da administração de leptina durante o período neonatal na função testicular da prole adulta. Vinte e quatro filhotes de 12 mães foram divididos em 2 grupos: Grupo leptina: injetados com 50 L de leptina (80ng/gPC, subcutânea) nos primeiros 10 dias de vida e Grupo Controle: injetados com o mesmo volume de solução salina. Todos os animais foram sacrificados aos 90 dias de vida. Parâmetros analisados: consumo alimentar, massa corporal, crescimento linear, data de início da puberdade, perfil lipídico, níveis séricos de estradiol e testosterona, expressão gênica (PCR em tempo real) e expressão proteica (Western blot) de ObRa, OBRb, aromatase, AR, ER, morfometria testicular, número, morfologia e viabilidade de espermatozoides. Os dados foram expressos como média erro padrão. A significância estatística foi determinada pelo teste t de Student. A Injeção de leptina levou a uma redução (p&#8804;0,008) no consumo alimentar a partir do dia 26 ao 40 e do dia 70 em diante, enquanto que a massa corporal (p&#8804;0,03) e o crescimento linear (p&#8804;0,05) foram reduzidos do dia 26 até o dia 45. O peso da hipófise (p&#8804;0,0006), hipotálamo (p&#8804;0,01), próstata (p&#8804;0,003), testículo (p&#8804;0,008) e epidídimo (p&#8804;0,004) e bexiga (p&#8804;0,009) foram significativamente reduzidos pela injeção de leptina. A Injeção de leptina adiantou o início da puberdade (C=45,0 0,3; L=41,6 0,3; dias, P&#8804;0,0001). Em relação ao perfil lipídico, a administração de leptina gerou um aumento nos níveis séricos de TG (C= 116,5 15,9; L=172,6 19,7; ng/dL, P&#8804;0,05) e uma redução nos níveis de HDL (C=33 1,5; L = 24 3,5; ng/dL, P&#8804;0,02). Os níveis séricos de testosterona também foram reduzidos pela leptina (C=5,2 1,0; L=1,1 0,3; ng/mL, P&#8804;0,003). Todos os genes avaliados por PCR em tempo real mostraram um aumento na sua expressão: Obra (C=0,32 0,04; L=0,69 0,16; P&#8804;0,04), OBRb (C=0,37 0,06; L=0,71 0,16; P&#8804;0,03), AR (C=0,28 0,02; L=0,71 0,16; P&#8804;0,02), Aromatase (C=0,31 0,04; L=0,53 0,09; P&#8804;0,04), ER-&#945; (C=0,79 0,03; L=0,93 0,03; P&#8804;0,01), ER-&#946; (C=0,29 0,03; L=0,73 0,16; P&#8804; 0,02). Por outro lado, a expressão proteica de OBR (C=4,4 0,29; L=6,6 0,84; P&#8804;0,05), ER-&#945; (C=0,4 0,02; L=0,6 0,05; P&#8804;0,03) e aromatase (C=0,4 0,03; L=0,5 0,02; P&#8804;0,04) aumentaram, enquanto que a expressão proteica de AR (C=0,16 0,01; L=0,09 0,01; P&#8804;0,009) foi reduzida pela administração de leptina. A análise morfométrica mostrou que a leptina levou a um aumento da área total do túbulo seminífero (C=64,6 3,1; L=56,1 2,1;&#956;m, P&#8804;0,01), aumento da área luminal (C=40,6 2,3; L= 48,7 0,9; &#956;m P&#8804; 0,004) e na altura do epitélio (C=21,5 1,2; L=24,6 1,1; &#956;m, P&#8804;0,03), enquanto que o comprimento do túbulo seminífero foi reduzido no grupo tratado (C=2200 350; L= 1100 110;cm, P&#8804;0,006). A administração de leptina levou a um aumento no número total de espermatozoides (C=20x107 2x107; L=30x107 5x107;Cls/mL, P&#8804;0,009) e no número de anormalidades (C=40,6 1,9; L=45,8 1,2, P&#8804;0,049). Podemos concluir que a leptina tem um papel importante na morfologia e função testicular. A leptina parece ter efeito direto neste tecido uma vez que a expressão gênica e proteica de OBR, AR, ER e aromatase foram alterados pela administração da leptina. / Leptin has an important role in regulating the reproductive system besides its main role in the regulation of body weight and food intake. The aim of this study was to evaluate the effect of leptin administration during the neonatal period in the testis function of the adult offspring. Twenty-four pups from 12 dams were separated into 2 groups: Leptin group: injected with 50&#956;L of leptin (80ng/gBW, subcutaneous); control group: injected with the same volume of saline solution for the first 10 days of life. All animals were killed at 90 days of life. Parameters analyzed: Body weight, linear growth and food consumption; onset of puberty, lipid profile, testosterone and estradiol serum levels, gene (Real time PCR) and protein expression (Western blot) of OBRa, OBRb, aromatase, AR, ER, testicular morphometry, spermatozoa number, morphology and viability. Data were expressed as mean standard error. Statistical significance was determined by students t-test. Leptin injection led to a reduction in food consumption (p&#8804;0.008) from day 26 to 40 and from day 70 onward while body weight (p&#8804;0.03) and linear growth (p&#8804;0.05) were reduced from 26 to 45 days of life. Pituitary (p&#8804;0.0006), hypothalamus (p&#8804;0.01), prostate(p&#8804;0.003), testis (p&#8804;0.008), epididymis(p&#8804;0.004) and bladder (p&#8804;0.009) weights were significantly reduced by leptin injection. Leptin injection also advanced the onset of puberty (C=45.0 0.3; L=41.6 0.3; days, P&#8804;0.0001). In relation to lipid profile, leptin administration led to an increase in TG (C=116.5 15.9; L=172.6 19.7; ng/dL, P&#8804;0.05) and a reduction in HDL (C=33 1.5; L=24 3.5; ng/dL, P&#8804;0.02) serum levels. Testosterone serum levels (C=5.2 1.0; L=1.1 0.28; ng/mL, P&#8804;0.003) were also reduced by leptin. All gene evaluated by real time PCR showed an increase in its expression: OBRa (C=0.32 0.04; L=0.69 0.16; P&#8804;0.04), OBRb (C=0.37 0.06; L=0.70 0.16; P&#8804;0.03), AR (C=0.28 0.02; L=0.71 0.16; P&#8804;0.02), Aromatase (C=0.31 0.04; L=0.53 0.09; P&#8804;0.04), ER-&#945; (C=0.79 0.03; L=0.92 0.03; P&#8804;0.01), ER-&#946; (C=0.29 0.03; L=0.7286 0.16; P&#8804;0.02). On the other hand, the protein expression of OBR (C=4.4 0.29; L=6.6 0.84; P&#8804;0.05), ER-&#945; (C=0.4 0.02; L=0.44 0.02; P&#8804;0.03) and aromatase (C=0.4 0.03; L=0.5 0.01;AU, P&#8804;0.04) were increased while AR (C=0.16 0.01; L=0.09 0.01; P&#8804;0.009) was reduced by leptin administration. The morphometric analysis showed that leptin led to an increase in the total area (C=64.6 3.1; L=56.1 2.1; &#956;m P&#8804;0.01) and luminal areas (C=40.6 2.3; L=48.7 0.9; &#956;m P&#8804;0.004) and in the epithelial height (C=21.5 1.2; L=24.6 1.1; &#956;m P&#8804;0.03), while the length of seminiferous tubule was reduced (C=2200 350; L= 1100 110; cm P&#8804;0.006). Leptin administration led to an increase in the total number of spermatozoa (C=20x107 2x107; L=30x107 5x107; P&#8804;0.009) and in the number of abnormalities (C=40.6 1.9; L=45.8 1.2; P&#8804;0.049). We can conclude that leptin has an important role in the morphology and testis function. The leptin effect seems to be direct in this tissue since the gene and protein expression of OBR, AR, ER and aromatase and spermatozoa number were changed by leptin administration.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The present study was conducted to evaluate the effects of heat stress on testis and semen criteria, and seminal plasma proteome of rams. Scrotal insulation (SI) was in place for eight days, using six rams. Animals were evaluated before (day 0), during and after SI until semen parameters returned to normal. Scrotal circumference, other testis parameters and sperm motility decreased after SI but returned to pre-insulation values on days 71, 85 and 113, respectively. Rams became azoospermic from day 29 to 71. The number of detectable spots per 2D gel decreased from 256  31 to 104  14 between days 0 and 29 (p < 0.05), returning to pre-insulation values on day 134. Several seminal proteins detected before insulation were absent when animals had low sperm motility or azoospermia, including albumin, arylsulfatase A, plasma glutamate carboxypeptidase, cathepsin F, transferrin, alpha-2-macroglobulin, angiotensin-converting enzyme, alpha fucosidase, beta galactosidase, TCP-1 containing chaperonins, heat shock protein 70 kDa, clusterin, palate, lung and nasal epithelium clone, ram seminal vesicle proteins, bodhesin 2, superoxide dismutase, cystatin B, peroxiredoxin 5, tissue inhibitor of metalloproteinase 2. Expression of other 17 proteins were quantitatively changed in the seminal plasma 2-D maps as the result of SI, such as actin, protein DJ-1, HRPE773-like, C-reactive protein precursor and porcine seminal plasma spermadhesins, among others. In conclusion, the expression of seminal plasma proteins was drastically altered by scrotal insulation, coincidental with changes in testis size and semen criteria. Proteins affected by heat stress are potentially involved in several events, from sperm protection and maturation to fertilization. / O presente estudo foi conduzido para avaliar os efeitos do estresse tÃrmico no testÃculo, parÃmetros seminais e proteoma do plasma seminal de carneiros. Seis carneiros da RaÃa Morada Nova var. branca foram submetidos à insulaÃÃo escrotal (IE) por oito dias. Os animais foram avaliados antes (dia 0), durante e apÃs a insulaÃÃo atà que os parÃmetros seminais tivessem retornado a normalidade. A circunferÃncia escrotal, bem como os demais parÃmetros de biometria testicular e a motilidade espermÃtica diminuÃram apÃs a IE, mas com retorno aos valores de prÃinsulaÃÃo entre os dias 71, 85 e 113, respectivamente. Os carneiros tornaram-se azoospÃrmicos entre os dias 29 e 71. O nÃmero de spots detectÃveis/gel diminuiu de 256  31 para 104  14 entre os dias 0 e 29 (p < 0,05), retornando aos valores prÃinsulaÃÃo no dia 134. Algumas proteÃnas detectadas no plasma seminal antes da insulaÃÃo estavam ausentes quando os animais tiveram menor motilidade espermÃtica ou azoospermia, incluindo albumina, arilsulfatase A, plasma glutamato carboxipeptidase, catepsina F, transferrina, alfa-2-macroglobulina, enzima conversora de angiotensina, alfa fucosidase, beta galactosidase, chaperonina contendo TCP-1, proteÃna de choque tÃrmico 70 kDa, clusterina, âpalate, lung and nasal epithelium cloneâ, âram seminal vesicle proteinsâ, bodesina 2, superÃxido dismutase, cistatina B, peroxiredoxina 5, tecido inibidor de metaloproteinase 2. ExpressÃes de outras 17 proteÃnas foram quantitativamente alteradas nos mapas bidimensionais do plasma seminal como resultado da IE, como a actina, proteÃna DJ-1, HRPE773, proteÃna C-reativa, âporcine seminal plasma espermadhesinsâ, entre outras. Conclui-se, que a expressÃo de proteÃnas no plasma seminal foi drasticamente alterada pela insulaÃÃo escrotal, coincidindo com mudanÃas no tamanho testicular e parÃmetros espermÃticos. As proteÃnas afetadas pelo calor estÃo potencialmente envolvidas em diversos eventos, como proteÃÃo espermÃtica, maturaÃÃo e fertilizaÃÃo.

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:43:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monteiro_JulianaCastro_M.pdf: 5278625 bytes, checksum: 63e213bed61e034d07b8ef348696a065 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: TA ciclosporina A (CsA) possui potentes propriedades imunossupressivas e tem sido amplamente usada na terapia de transplantes de órgãos, aumentando as taxas de sobrevivência dos enxertos, e no tratamento de algumas doenças auto-imunes. Apesar de ser um importante medicamento, diversas reações colaterais são verificadas, entre elas a toxicidade testicular, levando à infertilidade masculina. Heteropterys aphrodisiaca é uma planta com indicações de estimulante e potente afrodisíaco, que aumenta o peso corporal e testicular e o volume das células de Leydig nos testículos de ratos adultos. Assim o efeito da associação dessas drogas foi estudado em ratos Wistar em idade reprodutiva, com avaliação da morfometria, estrutura e ultra-estrutura testicular. Foram utilizados 30 ratos divididos em 5 grupos: I- controle; II- tratamento com CsA; III- concomitante uso de CsA e H. aphrodisiaca; IV- pré-tratamento com H. aphrodisiaca por 30 dias, seguido de CsA por 26 dias; V- tratamento com H. aphrodisiaca. CsA foi administrada na dose de 15 mg/kg/dia e H. aphrodisiaca na dose de 0.5 ml de infusão preparada com 25g de raízes secas/100 ml água fervente. Os tratamentos foram administrados diariamente por gavagem, durante 56 dias. Aumento do peso corporal foi observado em todos os grupos, mas os grupos II e III tiveram menor ganho de peso. O peso dos testículos e dos órgãos sexuais acessórios, assim como a proporção e o volume dos compartimentos tubular e intersticial não alteraram nos grupos tratados. Com a administração de CsA houve aumento na proporção de tecido conjuntivo e redução na proporção de células de Leydig que, além disso, eram menores e com citoplasma mais denso que as células dos animais de outros grupos tratados. Por outro lado, a infusão de H. aphrodisiaca resultou em aumento do volume nuclear das células de Leydig. Os níveis de testosterona plasmáticos, o número de células de Leydig por testículo e por grama de testículo aumentou significativamente nos animais do grupo III. CsA causou degeneração das células germinativas, vacuolização nas células de Sertoli, espermátides arredondadas anormais e atrofia das organelas envolvidas na síntese de esteróides nas células de Leydig. H. aphrodisiaca causou vacuolização nas células de Sertoli, perda do contato e espaçamento entre as células germinativas e aumento de retículo endoplasmático liso e mitocôndrias nas células de Leydig. O tratamento concomitante e sequencial com CsA e H. aphrodisiaca foi efetivo em manter a ultra-estrutura das células de Leydig. Nesses tratamentos, as alterações observadas no epitélio seminífero foram a combinação das modificações observadas em cada tratamento separadamente. Entretanto, H. aphrodisiaca exerceu um efeito protetor no epitélio germinativo, uma vez que as modificações encontradas nesses grupos foram menos severas em relação ao grupo tratado somente com CsA / Abstract: Cyclosporine A (CsA) has potent immunosuppressive properties and it has markedly improved the ability of transplant patients to survive grafts and is also used in some autoimmune diseases. However, the drug has several side effects, including testicular toxicity, leading to male infertility (and temporary impotence?). Stimulant and aphrodisiac properties has been attributed to the plant, Heteropterys aphrodisiaca. Data from other experiments suggests that the root extract can increase body and testicular weight and the volume of Leydig cells in rat testis. Thus, the present work was undertaken to study the association of the drug and the medicinal herb in Wistar rats, evaluating testicular morphometry, structure and ultrastructure. Thirty adult rats were used, divided into five groups: I- control; II¿ CsA; III¿ simultaneous use of CsA and H. aphrodisiaca; IV- H. aphrodisiaca for 30 days and CsA sequentially for another 26 days; V- H. aphrodisiaca. CsA was administered at a dose of 15 mg/kg/day and/or H. aphrodisiaca at a dose of 0.5 ml of the infusion prepared with 25g of roots/100ml boiling water, daily by gavage, during 56 days. Increased body weight was observed for all groups, but the animals that received CsA for 56 days showed the smallest body weight gain. The testis and accessory sex organs weights were unchanged. The volume and volumetric proportion of seminiferous tubules and interstitial compartments did not alter in all treated groups. Morphometry showed increased connective tissue volumetric proportion and decreased Leydig cell volumetric proportion in CsA-treated rats. The Leydig cells of CsA-treated animals were smaller and more dense than other groups. On the other hand, the H. aphrodisiaca infusion resulted in an increase in Leydig cell nuclear volume. The plasma testosterone levels and number of Leydig cells per testis increased significantly in group III. Using transmission electron microscopy, it was possible to ascertain that CsA caused germ cell degeneration, Sertoli cell vacuolization, abnormal round spermatids and atrophy of the organelles involved in steroid synthesis in Leydig cells. H. aphrodisiaca caused Sertoli cell vacuolization, loss of germ cell attachment and expanded intercellular spaces between germ cells and Leydig cells with more mitochondria and smooth endoplasmic reticulum. The simultaneous and sequential treatment with H. aphrodisiaca and CsA was effective in maintaining the Leydig cell ultrastructure. In these treatments, the seminiferous epithelium alterations were a combination of the modifications observed for each isolated treatment. However it can be stated that H. aphrodisiaca had a protective effect on the testicular tissue, since less severe modifications were found for this group in relation to the rats that received only CsA / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder, Sergio Luis Pinto da Matta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T09:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Predes_FabriciadeSouza_M.pdf: 1559316 bytes, checksum: e206924da33f15ad0daf61b7e2a85726 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: o cádmio (Cd) é um dos poluentes ambientais importantes que causam danos a vários órgãos e tecidos, incluindo os testículos. O objetivo deste trabalho é investigar o efeito protetor e curativo do extrato de G biloba (GbE) nos testículos de ratos adultos Wistar tratados com dose única de Cd. Trinta animais foram divididos aleatoriamente em 5 grupos que receberam: Grupo 1: água por 56 dias ( controle); Grupo 2: GbE por 56 dias; Grupo 3: CdClz (dose única) e água por 56 dias; Grupo 4: CdCh (dose única) e GbE por 56 dias (Cd + GbE); Grupo 5: pré-tratamento com GbE por 30 dias e CdCh no 31° dia (GbE-Cd). O GbE foi administrado diariamente na dose de 100 mg/Kg de peso corporal por gavagem. O cloreto de cádmio (CdCh) foi injetado intraperitonealmente em dose única de 3 umol/Kg de corporal. Após a coleta de sangue, os ratos foram fixados por perfusão com Kamovsky modificado. Fragmentos de testículo incluídos em metacrilato foram secionados na espessura de 3um e corados com azul de toluidina/borato de sódio 1% para estudo morfométrico em miCroscopia óptica. Para observação em microscópio eletrônico de transmissão fragmentos de testículo foram refixados com tetróxido de ósmio 1 % no mesmo tampão a 4°C, desidratados em acetona e incluídos em Epoxy. Cortes ultrafinos foram feitos com navalha de diamante e contrastados com acetato do uranila 2% e citrato de chumbo 2%. Os níveis de testosterona plasmática obtida por RIA não foram alterados neste estudo. Não houve alteração do peso corporal e testicular, do epidídimo e das glândulas acessórias, vesícula seminal e próstata além do índice gonadossomático. A proporção volumétrica e o volume absoluto dos componentes testiculares não alteraram após os tratamentos. O grupo 3 que recebeu somente Cd teve redução significativa no volume individual das células de Leydig. Entretanto, animais que receberam GbE como pré tratamento ou GbE após a dose de Cd não apresentaram esta redução. Isto sugere que GbE é eficaz em manter o volume das células de Leydig em ratos tratados com Cd. O número de células de Leydig não variou nos grupos estudados. Em microscopia eletrônica foram visíveis os efeitos do Cd nos testículos. Nas células de Sertoli foram observados vacuolização citoplasmática, alterações nas junções celulares e acúmulo de gotículas de lipídio e corpos residuais. Espaços intercelulares expandidos foram observados no epitélio germinativo. Cromatina irregularmente condensada e acrossoma anormal foram encontradas em espermátides alongadas. Algumas células endoteliais sofreram alterações morfológicas no núcleo e perderam algumas junções. As células de Leydig mostraram o citoplasma denso com organelas, como retículo endoplasmático liso e mitocôndrias, mal definidas. A administração de GbE após a dose de Cd mostrou-se eficaz em manter a ultraestrutura normal dos testículos do rato. Diferentemente, o pré-tratamento com GbE não foi eficaz em proteger o epitélio seminífero da toxicidade do Cd. Entretanto, as células de Leydig apresentaram morfologia normal com o retículo endoplasmático liso bem definido e numerosas mitocôndrias. Conclui-se que a administração de GbE por 56 dias após dose única de 3 umol de CdCh é capaz de proteger todo o parênquima testicular dos efeitos tóxicos do Cd. Entretanto, o pré-tratamento com GbE não protegeu o epitélio seminífero, mas foi eficaz em proteger as células de Leydig dos efeitos tóxicos do cádmio / Abstract: Cadmium is one of the important environmental pollutants that affect various organs and tissues, including the testis. The aim of this study was to investigate the protective and curative effect of G. biloba extract (GbE) on cadmium-induced testis damage of adult Wistar rats. Thirty rats were randomly divided in five groups that consisted in :Group 1: water for 56 days (control); Group 2: GbE for 56 days; Group 3: CdClz (single dose) and water for 56 days; Group 4: CdCh (single dose) and GbE for 56 days (Cd + GbE); Group 5: pre-treatment with GbE for 30 days and CdCh on the thirty-first day (GbE-+Cd).The GbE was administered daily in a dose of 100 mg/Kg BW by gavage. The cadmium chloride (CdCh) was injected i.p. in a single dosage of 3 umol/Kg BW. After blood collection, rats were fixed by whole-body perfusion in Karnovsky fixative. Methacrylate-embedded testis fi-agments were sectioned at 3um thickness and stained with toluidine blue/sodium borate 1 % for morphometric study in the light microscope. For electron microscopy transmission examination, testis fragments were post-fixed with 1 % osmium tetroxide in the same buffer at 4°C, dehydrated in acetone and embedded in epoxy resin. Ultrathin sections were cut with a diamond knife and stained with 2% uranyl acetate and 2% lead citrate prior to observation. Plasma testosterone values obtained by the RIA method were not modified in this study. No change occurred in the average of corporal and testicular weight, gonadosomatic index, epididymis and accessory glands weight. The volumetric proportion and absolute volume oftesticular componenfs did not change after the treatments. Group 3 had a significant reduction in Leydig cell individual volume. However, animals that received GbE as pre-treatment or GbE after a cadmium dose did not present this reduction of Leydig cell volume. This suggests that GbE is effective in maintaining Leydig cell volume in cadmium-damaged testis. The number ofLeydig cells did not vary in any group studied. In electron microscopy observations, this Cd dose caused visible alterations in the testis. Cytoplasmic vacuolation, disruption oftight junctions, accumulation oflipid droplets and residual bodies were observed in Sertoli cells. Expanded intracellular spaces were observed between the tubule cells. Irregularly condensed chromatin and abnormal acrosomes were found in late spermatids. Endothelium was affected, showing some disruption of tight junetions and morphologieally altered nuclei. Leydig eells showed a dense eytoplasm with poorly defined organelles sueh as SER and mitoehondria. The administration of GbE after the Cd dose is effeetive in maintaining almost normal rat testis ultrastructure. However, GbE pretreatment was not able to protect testis from Cd toxicity, since toxicity signals were observed in the seminiferous epithelium. However, Leydig cells showed the normal morphology with well-defined and abundant smooth endoplasmic reticulum and mitochondria. It can be concluded that, GbE administration for 56 days after a single dose of 3 umol of CdCh could protect the testicular parenchyma from Cd toxic effects. However, GbE pretreatment did not protect the seminiferous epithelium, although it was effective in protecting Leydig cells from Cd toxic effeets / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural