Made available in DSpace on 2015-12-10T14:23:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:39Z : No. of bitstreams: 1 000853880.pdf: 1851862 bytes, checksum: 828711480dc6e6cc9c37d4388711ad29 (MD5) / A doença de Jorge Lobo é uma infecção crônica, que afeta a pele e tecidos subcutâneos, cujo agente etiológico é o fungo Lacazia loboi. Dependendo da localização das lesões, pode ser classificada como localizada, multifocal ou disseminada e no que diz respeito aos aspectos imunológicos, estudos relatam predominância do perfil Th2 nos pacientes, além de maior frequência de células positivas para TGF-β e IL-10 no infiltrado inflamatório presente nas lesões. Porém, com a descoberta de outros perfis como Treg e Th17, outras subpopulações podem estar envolvidas na imunopatogênese da doença. Diante disso, com o intuito de explicar a imunorregulação entre estas subpopulações, este estudo teve por objetivo avaliar o papel das células Treg, Th1, Th2 e Th17, por meio da expressão de mRNA. No total, 114 amostras [pacientes portadores de lesão única (55), pacientes portadores de lesões múltiplas (47) e controles saudáveis (12)] foram avaliadas quanto a expressão gênica de alvos relacionados aos perfis Th1 (T-bet, IFN-γ), Th2 (GATA3, IL-5, IL-4, IL-13, IL-33), Th17 (IL-17F) e T regulatório (TGF-β1, FoxP3, CTLA4, IL-10). Os resultados obtidos neste estudo demonstraram expressão significativamente maior de TGF-β1, IL-10, CTLA4, FoxP3, T-bet e IL-17F, e significativamente menor de GATA3 e IL-4 em todos os portadores da doença avaliados. Adicionalmente, ao avaliar a expressão entre os grupos de lesão única (forma localizada) e lesões múltiplas (formas multifocais e disseminadas), TGF-β1 e IL-5 apresentaram expressão significativamente maior nos pacientes com lesão única e múltiplas, respectivamente. Em resumo, constatamos que a ação desta população está relacionada à capacidade de inibir a resposta antifúngica modulando principalmente a expressão de citocinas envolvidas na proteção, tais como, IFN-γ e IL-17F / Jorge Lobo's disease is a chronic disease that affect the skin and subcutaneous tissues, whose etiologic agent is the fungi Lacazia loboi. Depending on localization of lesions, it can be classified as localized, multifocal or disseminated. In respect to immunologic aspects, previous studies show the predominance of Th2 profile in patients, in addition to more frequent TGF-β and IL-10 positive cells in the inflammatory infiltrate present in lesions. However, the increased understanding about T regulatory (Treg) and Th17profiles suggest that other subpopulation of cells can be involved in the immunopathogenesis of Jorge Lobo's disease. Aiming at explaining the immunoregulation caused by these subpopulations, this study had as objective to evaluate the role of Treg, Th1, Th2 and Th17, through mRNA expression. A total of 114 samples [single lesion patients (55), multiple lesion patients (47) and healthy controls (12)] were evaluated by gene expression of targets associated to Th1 (T-bet, IFN-γ), Th2 (GATA3, IL-5, IL-4, IL-13, IL-33), Th17 (IL-17F) and T regulatory (TGF-β1, FoxP3, CTLA4, IKZF2, IL-10) profiles. The results obtained in this study demonstrated significant higher expression of TGF-β1, IL-10, CTLA4, FoxP3, T-bet and IL-17F, and significant lower expression of GATA3 and IL-4 in all patients. Additionally, the expression comparing single lesions (localized form) and multiple lesions (multifocal and disseminated forms) patients showed significant higher levels of TGF-β1 and IL-5, respectively, in single and multiple lesions patients. In summary, the role of the Treg population is associated with inhibition of the antifungal activity, thus modulating mainly the expression of cytokines associated protection against fungal infection, such as IFN-γ and IL-17F

Orientador: Ida Maria Foschiani Dias Batista / Coorientador: Andrea de faria FernandesBelone / Coorientador: Ana Paula Fávaro Trombone Garlet / Banca: Luciane Dias-Melicio / Resumo: A doença de Jorge Lobo é uma infecção crônica, que afeta a pele e tecidos subcutâneos, cujo agente etiológico é o fungo Lacazia loboi. Dependendo da localização das lesões, pode ser classificada como localizada, multifocal ou disseminada e no que diz respeito aos aspectos imunológicos, estudos relatam predominância do perfil Th2 nos pacientes, além de maior frequência de células positivas para TGF-β e IL-10 no infiltrado inflamatório presente nas lesões. Porém, com a descoberta de outros perfis como Treg e Th17, outras subpopulações podem estar envolvidas na imunopatogênese da doença. Diante disso, com o intuito de explicar a imunorregulação entre estas subpopulações, este estudo teve por objetivo avaliar o papel das células Treg, Th1, Th2 e Th17, por meio da expressão de mRNA. No total, 114 amostras [pacientes portadores de lesão única (55), pacientes portadores de lesões múltiplas (47) e controles saudáveis (12)] foram avaliadas quanto a expressão gênica de alvos relacionados aos perfis Th1 (T-bet, IFN-γ), Th2 (GATA3, IL-5, IL-4, IL-13, IL-33), Th17 (IL-17F) e T regulatório (TGF-β1, FoxP3, CTLA4, IL-10). Os resultados obtidos neste estudo demonstraram expressão significativamente maior de TGF-β1, IL-10, CTLA4, FoxP3, T-bet e IL-17F, e significativamente menor de GATA3 e IL-4 em todos os portadores da doença avaliados. Adicionalmente, ao avaliar a expressão entre os grupos de lesão única (forma localizada) e lesões múltiplas (formas multifocais e disseminadas), TGF-β1 e IL-5 apresentaram expressão significativamente maior nos pacientes com lesão única e múltiplas, respectivamente. Em resumo, constatamos que a ação desta população está relacionada à capacidade de inibir a resposta antifúngica modulando principalmente a expressão de citocinas envolvidas na proteção, tais como, IFN-γ e IL-17F / Abstract: Jorge Lobo's disease is a chronic disease that affect the skin and subcutaneous tissues, whose etiologic agent is the fungi Lacazia loboi. Depending on localization of lesions, it can be classified as localized, multifocal or disseminated. In respect to immunologic aspects, previous studies show the predominance of Th2 profile in patients, in addition to more frequent TGF-β and IL-10 positive cells in the inflammatory infiltrate present in lesions. However, the increased understanding about T regulatory (Treg) and Th17profiles suggest that other subpopulation of cells can be involved in the immunopathogenesis of Jorge Lobo's disease. Aiming at explaining the immunoregulation caused by these subpopulations, this study had as objective to evaluate the role of Treg, Th1, Th2 and Th17, through mRNA expression. A total of 114 samples [single lesion patients (55), multiple lesion patients (47) and healthy controls (12)] were evaluated by gene expression of targets associated to Th1 (T-bet, IFN-γ), Th2 (GATA3, IL-5, IL-4, IL-13, IL-33), Th17 (IL-17F) and T regulatory (TGF-β1, FoxP3, CTLA4, IKZF2, IL-10) profiles. The results obtained in this study demonstrated significant higher expression of TGF-β1, IL-10, CTLA4, FoxP3, T-bet and IL-17F, and significant lower expression of GATA3 and IL-4 in all patients. Additionally, the expression comparing single lesions (localized form) and multiple lesions (multifocal and disseminated forms) patients showed significant higher levels of TGF-β1 and IL-5, respectively, in single and multiple lesions patients. In summary, the role of the Treg population is associated with inhibition of the antifungal activity, thus modulating mainly the expression of cytokines associated protection against fungal infection, such as IFN-γ and IL-17F / Mestre

Orientador: João Tadeu Ribeiro Paes / Banca: Edislaine Barreiros de Souza / Banca: Márcia Zilioli Bellini / Resumo: As pesquisas com células-tronco têm avançado expressivamente e ocupam um papel de destaque no contexto do novo ramo terapêutico que se convencionou denominar de medicina regenerativa. A abundância e facilidade de obtenção do tecido muscular têm permitido a ampliação dos estudos acerca de seu potencial como fonte de células-tronco mesenquimais. Neste sentido, diferentes metodologias têm sido propostas para a obtenção de células-tronco mesenquimais oriundas do tecido muscular (CTDM), objetivando cultivo e aplicação clínica em medicina humana e veterinária. Um aspecto importante a ser considerado nos diversos protocolos de isolamento de células-tronco mesenquimais refere-se ao emprego rotineiro da colagenase de origem bacteriana (Clostridium histolyticum). O emprego de reagentes xenobióticos, como a colagenase, rotineiramente empregados, obedecem às recomendações da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA - Brasil), que preconiza a não utilização desses produtos no cultivo de células destinadas à terapia celular em pacientes humanos, uma vez que podem conter agentes infecciosos e contaminantes capazes de desencadear severas reações imunológicas. Neste contexto, objetivou-se, neste estudo, a proposição de novas metodologias a fim de substituir o emprego de xenobióticos no processo de obtenção CTDM. Para tanto, foram comparados os métodos de digestão enzimática (colagenase), dissociação mecânica e explante, em diferentes meios de cultura. O conjunto de resultados mostra que as técnicas de dissociação mecânica e explante são metodologias... / Abstract: The researches with stem cells have advanced significantly and take a prominent role in the context of the new treatment branch that has been conventionally called of regenerative medicine. The abundance and ease of obtaining muscle tissue have allowed the expansion of studies on its potential as a source of mesenchymal stem cells. In this sense, different methodologies have been proposed for obtaining mesenchymal stem cells derived of muscle tissue (SCDM), aiming cultivation and clinical application in human and veterinary medicine. An important aspect to be considered in the various protocols of isolation of mesenchymal stem cells refers to the routine use of bacterial collagenase (Clostridium histolyticum). The use of xenobiotic reagents, such as collagenase, contrasts with the recommendations of the National Health Surveillance Agency (ANVISA - Brazil), which recommends the avoidance of the use of these products in the cultivation of cells destined for cell therapy in human patients, since which may contain infectious agents and contaminants that are capable of triggering severe immunological reactions. In this context, we aimed in this study to propose new methods to replace the use of xenobiotics in the process of obtaining SCDM. For this end, the methods of enzymatic digestion (collagenase), mechanical dissociation and explant were compared in different culture media. The set of results shows that the techniques of mechanical dissociation and explant are viable methodologies for replacement of collagenase procedures for obtaining SCDM. These new methodological... / Mestre

Orientador: Jose Alfredo Usberti Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T00:41:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Casale_ChristianeMariaOmetto_M.pdf: 5729096 bytes, checksum: 9e6ad1ed69ca8c0db55069663857de24 (MD5) Previous issue date: 1996 / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Daria Repka / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T20:54:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gavino_VandaAparecida_M.pdf: 1213422 bytes, checksum: 63e55917673ac05dcca108dd6f25622c (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Cecilia Amelia de Carvalho Zavaglia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia mecanica / Made available in DSpace on 2018-08-04T05:13:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_ClaudioRobertoCutrim_M.pdf: 4282761 bytes, checksum: ab691d570344037977f1501d694b7a37 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Litografia macia tem sido usado recentemente para criar micro e nano estruturas bi e tridimensionais para cultura de células e engenharia de tecidos usando PDMS (poli dimetil-siloxano). PDMS é um elastômero biocompatíveí, opticamente transparente, não tóxica, e barato que pode ser moldado com alta fidelidade. Fabricou-se um arranjo de estruturas quadradas com espaçamento regular e secção transversal variando 100µmx100 µm, 150µmx 150µm, 200µmx200µm, 50µmx250µm com 50 µm de altura e uma linha separando cada uma dessas estruturas de 30µm. A proposta deste arranjo foi implementar a técnica de litografia macia para construção de dispositivos para aplicação em engenharia de tecidos, tais como: estudar o comportamento celular, adesão e espalhamento celular. Fabricaram-se também membranas porosas com diâmetro de 100 µm com altura de 35µm e espaçamento entre os poros de 35um e alguns canais microfluídicos. Estes arcabouços tridimensionais fornecerão o suporte físico para a fixação celular e reconstrução tecidual / Abstract: Soft lithography and microtransfer techniques have been used to create two and three dimensional micro and nanostructures for cells culture and tissue engineering, using PDMS (polydimethylsiloxane). PDMS is a biocompatible elastomer, optically transparent, non-toxic and inexpensive that can be molded with high fidelity. We fabricated three dimensional PDMS structures with regular spaced square arrays with l00µm, 150µm, 200µm and 250µm a side and 30µm line width and 50µ hight. The purpose of these structures is implematation of lithography soft for biomedical research such: study the behavior, adhesion and spreading of the cells.We also fabricated PDMS porous membrane with diameter of 100µm, 30µm height, spaced by 35µm and some microfluidic channels. These three dimensional scaffolds will provide the physical support to cells attachment and tissue reconstruction / Mestrado / Materiais e Processos de Fabricação / Mestre em Engenharia Mecânica

Orientador: Maro Ran-Ir Sondahl / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T09:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_IoneSalgado_M.pdf: 19420709 bytes, checksum: a5495190bd87c539fc1cbc22b4ec608b (MD5) Previous issue date: 1982 / Resumo: Tecidos de 36 cultivares de Phaseolus vulgatis L. foram cultivados in vitro, visando desenvolvimento metodológico para o controle da diferenciação, a fim de permitir a aplicação das técnicas de cultura de célula de tecidos no melhoramento destas espécies. A cultua in vitro de tecidos de Phaseolus vulgaris cv. Moruna foi estabelecida na presença dos sais inorgânicos cv. MS cuplementados com KIN e 2,4-D (1 ¿ 50 'mu¿M) A especificidade de resposta à indução de calos e raízes variou conforme a origem de explante (hipocólito, cotilédone embrião, folha primária ou trifoliolada). Nesta interação, a difernciação de raízes foi inibida em concentrações superiores a 5 'mu¿M de 2,4 ¿ D. Explantes foliares forma os mais favoráveis à indução de calos. Folhas primárias de 'Moruna¿ serviram como fonte de explante par testar diferentes interações de citocinina (KIN, 6 ¿ BA e 2ip = 0 ¿ 75 'mu¿M) e auxina (2,4 ¿D = 0 ¿ 50¿mu¿M; NAA = 0 ¿ 75¿mu¿M; IAA = 0 ¿ 100¿mu¿M)). A interação KIN/2,4 ¿D foi a mais efetiva para a proliferação de calos. Nesta interação não ocorreu diferenciação de raízes e obteve-se calos de cor creme e friáveis. O crescimento comparativo de calos de quatro cultivares de P. vulgaris permitiu uma caracterização genotípica . Calos de folhas trifolioladas, na interação de KIN/2,4 ¿ D, apresentaram melhor especificidade de crescimento em comparação com a utilização de folhas primárias na interação 6-BA/2,4-D ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Tissues of 36 cultivars of Phaseolus vulgaris L. wee established in vitro aiming toward the development of a protocol for plant differentiation from bean tissues in order to apply the in vitro techniques for the improvement of this species. Callus cultures of Phaseolus vulgaris cv. Moruna were established in the presence of MS medium supplemented with KIN and 2,4-D (1-50 uM). Callus prolifaration differed according with the source of explant (hypocotil, comtyledone, embryo, primary leaf or trifoliolate leaf). Root differentiatiosn was inhibited at levels of 2,4 ¿ D 5¿mu¿M or higher, in the presence of KIN. Leaf cultures were more favorable to callus induction that other sources of explants. Primary leaves of ¿Moruna¿ were inoculated to test different interaction of cytokinin (KIN, 6 ¿ BA and 2ip = 0 ¿ 75¿mu¿M) versus auxin (2,4 ¿ D = 0 ¿ 50¿mu¿M; NAA = 0 ¿ 75¿mu¿M; IAA = 0 ¿ 100 'mu¿M). The interaction of KIN/2,4 ¿ D was the most effective for callus proliferation. In the presence of these growt regulators creamish friable callus developed with the absence of roots. A genotypic characterization among four ¿ cultivars of P. vulgaris were obtained based on callus induction from trifoliolate in the pesence of KIN/2,4 ¿ D. These conditions were superior to discriminate in contrast to callus induction from primary leaves in the presence of 6 ¿ BA /2,4 ¿ D ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Jose Alfredo Usberti Filho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T11:30:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Segeren_MoniqueInes_D.pdf: 6984963 bytes, checksum: 7fb5387d1090cd568087489828686a6e (MD5) Previous issue date: 1993 / Doutorado / Genetica Vegetal / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Marcus Antonio Rossi Feliciano / Coorientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Coorientador: Ricardo Andres Ramirez Uscategui / Banca: Felipe Farias Pereira da Câmara Barros / Banca: Eliandra Antonia Pires Buttler / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a rigidez de tecidos materno fetais em ovinos a partir da décima semana de gestação, por meio da elastografia ARFI (Acoustic Radiation Force Impulse), determinando padrões qualitativos e quantitativos, com o intuito de verificar a aplicabilidade da técnica elastográfica no estudo do desenvolvimento desses tecidos. Foram avaliadas 24 ovelhas multíparas, com peso entre 40 e 60 quilos e idade entre 2 e 5 anos, da raça Santa Inês. Após a realização de exames prévios e verificada a higidez dos animais, estes foram submetidos a um protocolo de sincronização de estro seguido da monta natural. Quando confirmada a prenhez, foram submetidos aos exames ultrassonográfico convencional e elastografia (método ARFI quantitativo e qualitativo) do tecido pulmonar, hepático, renal e placentônios, com a utilização do aparelho ultrassonográfico ACUSON S2000/SIEMENS e softwares específicos. Os exames foram realizados semanalmente, a partir da décima semana gestacional (64 a 70 dias) até a semana da parição, sendo verificados os achados sonográficos destes tecidos, velocidade de cisalhamento (avaliação elastográfica quantitativa) e suas características de rigidez (avaliação elastográfica qualitativa). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e se utilizou nível de significância de 5% para todos os testes realizados. Os animais não apresentaram quaisquer alterações clínicas e obstétricas durante o período gestacional e parto. Os neonatos apresentar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the stiffness of maternal fetal tissues of ovines from the tenth week of gestation, using elastography ARFI (Acoustic Radiation Force Impulse), with the purpose of verifying the applicability of the elastographic technique in the study of the development of these tissues throughout the gestational period. Twenty - four multiparous ewes, weighing between 40 and 60 kilos and age between 2 and 5 years, of the Santa Inês breed were evaluated. After conducting preliminary exams and checked the healthiness of the animals, these were submitted to an estrus synchronization protocol and natural mating. When the pregnancy was confirmed, they were submitted to the conventional ultrasound examinations and elastography (quantitative and qualitative method ARFI) with the use of the ultrasound equipment ACUSON S2000 / SIEMENS and specific software. The exams were performed weekly, from the 10th gestational week (64 to 70 days) until the week of parturition and the shear wave velocity (quantitative elastographic evaluation) and stiffness characteristics were verified (Qualitative elastographic evaluation).The experimental lineation was completely randomized and used 5% significance level for all tests. The animals did not present any clinical and obstetric alterations during pregnancy and birth. The newborns presented themselves healthy and normal. ARFI elastography was performed consistently and without any difficulty. Qualitative elastography did not appear deformable, demonstrating homogeneous image. For qu... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Aparecida Conceição Boliani / Banca: Mario Luiz Teixeira de Moraes / Banca: José Luis Sussumo Sasaki / Banca: José Carlos Cavichioli / Banca: Silvia Correa Santos / Resumo: As espécies nativas brasileiras devem ser preservadas e pesquisadas para manutenção e perpetuação no seu bioma de origem. De forma geral, as frutíferas nativas são fontes de geração de renda para a população local, devido os seus diversos usos na alimentação humana e animal, além de interesses sociais e ambientais. Entre as diversas espécies frutíferas nativas destacam-se o barueiro e o jatobazeiro, que podem ser utilizadas a madeira, a semente, a polpa, a resina, as folhas e ainda podem fazer parte de algum sistema de produção como agrossilvopastoril. Entretanto, a exploração do jatobazeiro e do barueiro não podem ocorrer só através do extrativismo predatório, devem ser implantadas de forma comercial, devido ao comportamento sazonal de produção e a demanda de consumo. Contudo, para diminuição da utilização predatória das espécies nativas florestais, técnicas de propagação e cultivo devem ser pesquisadas, pois a produção de sementes não ocorre o ano todo, e muitas sementes possuem diversos tipos de dormência. É importante conhecer o melhor método de propagação destas espécies para produção de mudas e a adaptação em diferentes tipos de nutrições de solos ou substratos. Desta forma, objetivou-se com este trabalho a produção de mudas de barueiro e jatobazeiro em diferentes tipos de substratos e desenvolver protocolos para micropropagação do baru. Foi possível verificar que no solo puro ocorreu o melhor desenvolvimento das mudas, e que a calagem e a adubação mineral proporcionaram incremento no crescimento das mudas. A adição de esterco ao substrato não beneficiou a produção de muda das espécies, devido o excesso de alguns nutrientes, que ocasionou um desbalanceamento nutricional. O baru pode ser micropropagado em laboratório, e suas sementes germinaram in vitro / Abstract: Brazilian native species should be preserved and researched for maintenance and perpetuation of origin in your biome. Generally, the native fruits are sources of income generation for the local population, because their many uses in food and feed, as well as social and environmental interests. Among the various native fruit species include the barueiro and jatobazeiro and which can be used as wood, seeds, pulp, resin, and the sheets may also be part of a production system as farming areas. However, the exploitation of jatobazeiro and barueiro may not occur only through predatory extraction, should be deployed commercially, due to seasonal production and consumer demand. However, to maximize the use of predatory native forest species, propagation and cultivation techniques should be investigated, since seed production does not occur throughout the year, and many seeds have various types of dormancy. It is important to know the best method of propagation of these species for seedling production and adaptation in different types of soils or substrates nutritions. Thus, the aim of this work was to produce seedlings and barueiro jatobazeiro on different types of substrates and develop protocols for micropropagation of the baru. It was possible to verify that the pure soil was the best seedling development, and that liming and mineral fertilization provided increased growth of seedlings. The manure applied to the substrate did not benefit seedling production of species, because the excess of some nutrients, which caused a nutritional imbalance. The baru can be micropropagated in the laboratory, and their seeds germinated in vitro / Doutor