Este estudo teve por objetivos (1) estudar os efeitos de diferentes parâmetros de terapia fotodinâmica sobre a viabilidade de células planctônicas e biofilme de S. mutans UA159, (2) verificar a viabilidade de uso de um modelo para crescimento de biofilme bacteriano no estudo do processo de desmineralização, (3) avaliar a capacidade da terapia fotodinâmica em controlar o processo de desmineralização mediado por biofilme de S. mutans crescidos sobre discos de dentina bovina e (4) mensurar a capacidade da terapia fotodinâmica em promover estresse celular a S. mutans UA159 com deleção do gene VicK. Os procedimentos de terapia fotodinâmica foram realizados pela associação do fotossensibilizador Photogem® e de um LED vermelho visível (Biotable®, 630 nm, 50 mW/cm2) como fonte de luz. A viabilidade de células bacterianas foi determinada por dois métodos distintos: teste de atividade metabólica pelo uso da resazurina (etapa 1) e contagem de UFC (etapas 1,2 e 3). Microrradiografia transversal e análise da concentração de cálcio por espectrometria de absorção atômica foram os métodos de escolha para a determinação do perfil do conteúdo mineral (%vol), perda mineral integrada (PMI, %vol x m), profundidade de lesão (PL, m) e concentração de cálcio liberado em meio de cultura (mg/dL). A intensidade de fluorescência emitida pela modulação da proteína GFP após ensaio de estresse celular foi determinada por citometria de fluxo. Os diferentes parâmetros de terapia fotodinâmica foram capazes de reduzir a viabilidade de células planctônicas de S. mutans, bem como das células organizadas em biofilme (ANOVA a um critério, Games-Howell, p<0,05), sendo o resultado dose-dependente. Quando Photogem® a 0,25 mg/mL foi associado ao LED a 150 J/cm2, uma redução de aproximadamente 3,9 log10 na contagem de células viáveis provenientes de biofilme foi observada. O modelo para crescimento de biofilme permitu a progressão do processo de desmineralização (24 h PMI: 1905±391 vol% x m, PL: 69,9±12,2 m; 48 h - PMI: 3529±886 vol% x m, PL: 114,2±24,6 m; 72 h - PMI: 4186±1099 vol% x m, PL: 146,1±20,1 m) em função do tempo. As associações de Photogem® 0,25 mg/mL + LED 75 J/cm2 e Photogem® 0,25 mg/mL + LED 150 J/cm2 foram capazes de controlar por 24 h a perda mineral integrada, a profundidade de lesão e a concentração de cálcio liberada em relação ao grupo controle (ANOVA a um critério, Games-Howell, p<0,05). Os diferentes tipos de tratamento utilizados no ensaio de estresse celular (H2O2 a 0,0025%, H2O2 a 0,005%, Photogem® a 0,00625%, Photogem® a 0,0125%, LED 4,5 J/cm2, Photogem® a 0,00625% + LED 4,5 J/cm2 e Photogem® a 0,0125% + LED 4,5 J/cm2) produziram aumento significativo da fluorescência captada pela citometria de fluxo em relação ao grupo controle (água deionizada) (ANOVA a um critério, Games-Howell, p<0,05). Entretanto, diferenças significativas não foram notadas entre os grupos de tratamento. Portanto, a terapia fotodinâmica foi capaz de reduzir a viabilidade de células planctônicas e células organizadas em biofilme (S. mutans UA159), bem como controlar o processo de desmineralização mediado por bactéria durante 24 h. Além disso, pelo modelo utilizado, a terapia fotodinâmica pode ser capaz de modular estresse celular comparável àquele obtido com a utilização do peróxido de hidrogênio em diferentes concentrações. / The present study aimed (1) to assess the effects of different parameters of Photodynamic Antimicrobial Chemotherapy (PACT) on the viability of planktonic cells and biofilm of S. mutans UA159, (2) to test the effectiveness of a biofilm model in evaluating the demineralization process, (3) to assess the influence of PACT on the control of demineralization process mediated by S. mutans biofilm growth on dentin discs, and (4) to measure the ability of PACT in promoting cellular stress on S. mutans UA159 knockout vicK gene. PACT procedures were performed by association between a photosensitizer (Photogem®) and a visible red LED (Biotable®, 630 nm, 50 mW/cm2) as light source. Viability of bacterial cells was determined by two distinct methods: resazurin assay (phase 1) and Colony Forming Unit (CFU) counts (phases 1, 2, and 3). Transversal microradiography and calcium release analysis by atomic absorption spectrometry were chosen to analyze mineral content profile (%vol), integrated mineral loss (IML, %vol x m), lesion depth (LD, m), and concentration of calcium release in culture media (mg/dL). Fluorescence intensity levels, which were modulated by expression of Green Fluorescent Protein-reporter (GFP) after cellular stress, were measured by flow cytometer. A dose-dependent effect on the reduction of viability of planktonic cells and biofilm of S. mutans was observed after application of different parameters of PACT (one-way ANOVA, Games-Howell, p<0.05). 0.25 mg/mL Photogem® plus 150 J/cm2 LED decreased in nearly 3.9 log10 the viability of S. mutans biofilm. Progression of demineralization process was correlated with the time (24 h IML: 1905±391 vol% x m, LD: 69.9±12,2 m; 48 h - IML: 3529±886 vol% x m, LD: 114.2±24.6 m; 72 h - IML: 4186±1099 vol% x m, LD: 146.1±20.1 m). Integrated mineral loss, lesion depth and concentration of calcium release were controlled for 24 h by the following associations: 0.25 mg/mL Photogem® plus 75 J/cm2 LED, and 0.25 mg/mL Photogem® plus 150 J/cm2 LED, in comparison to control group (one-way ANOVA, Games-Howell, p<0.05). Different treatments (0.0025% H2O2, 0.005% H2O2, 0.00625% Photogem®, 0.0125% Photogem®, 4.5 J/cm2 LED, 0.00625% Photogem® plus 4.5 J/cm2 LED, and 0.0125% Photogem® plus 4.5 J/cm2 LED) increased significantly the fluorescence levels emitted by S. mutans, when compared with levels of the control group (demi water) (one-way ANOVA, Games-Howell, p<0.05). However, significant statistical differences were not observed among treatment groups. Therefore, PACT was able to decrease the viability of planktonic cells and biofilm of S. mutans UA159, as well as controlling the demineralization process mediated by bacteria for 24 h. Moreover, according to present methods, PACT may modulate cellular stress similar to hydrogen peroxide.

A poiquilodermia de Civatte (PC) é uma alteração dermatológica caracterizada por atrofia, pigmentação macular ou reticulada e telangiectasias na face, pescoço e tórax anterior. Várias tentativas de tratamentos não foram bem sucedidas por se mostrarem ineficazes e/ou com efeitos colaterais indesejáveis. Estudos clínicos mostram bons resultados clínicos no tratamento da PC com luz intensa pulsada (LIP). A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica que envolve a administração tópica de um composto fotossensibilizante seguido de irradiação seletiva da lesão com luz visível. O propósito deste trabalho consiste na avaliação clínica e histopatológica da pele com PC, no tórax anterior, em 12 pacientes do sexo feminino, antes e após o tratamento com a TFD. Foram realizadas 3 sessões de tratamento com intervalos de 30 dias entre as sessões. A TFD foi realizada com a utilização prévia de cloridrato de aminolevulinato de metila 16% em creme (Metivix) 1h e 30min (oclusivo) antes da aplicação da LIP (Lime light). A avaliação clínica mostrou melhora em 84,6% no componente vascular, 80,8% no componente melanodérmico, 82,9% na textura, 77,1% nas rítides e 58,3% na flacidez de pele. Na histopatologia notou-se após o tratamento aumento estatisticamente significativo da espessura epidérmica, diminuição estatisticamente significativa do pigmento melânico e da área dos vasos marcados pelo fator VIII. Não houve nenhum efeito colateral permanente, mostrando que a TFD-MAL é uma nova opção terapêutica segura e eficaz para o tratamento da PC no tórax anterior / Poikiloderma of Civatte (PC) is the dermatological modification characterized by atrophy, macular or reticulate pigmentation and telangiectasias on the face, neck and anterior thorax. Several treatment attempts were unsuccessful, revealing to be ineffective and/or causing adverse effects. Clinical studies indicate good clinical results in the treatment of poikiloderma of Civatte with intense pulsed light (IPL). Photodynamic Therapy (PDT) is a therapeutic modality that involves the topical administration of a photosensitizing compound, followed by a selective irradiation of the lesion with visible light. The objective of this study consisted in the clinical and histopathologic evaluations of the skin with poikiloderma of Civatte (PC) on the anterior thorax of 12 female patients, before and after being treated with photodynamic therapy (PDT). Three treatment sessions were given at 30-day intervals. Photodynamic therapy was performed with methyl aminolevulinate hydrochloride 16% (Metivix) cream applied 1h and 30min under occlusion prior to LIP (Lime light) exposure. The clinical evaluation indicated an 84.6% improvement of vascular component, 80.8% of melanodermic component, 82.9% of texture, 77.1% of wrinkles and 58.3% of skin laxity. In the histopathology, a statistically significant increase of epidermal thickness was observed after the treatment, as well as a statistically significant reduction in the number of melanin pigment and of blood vessels area marked for Factor VIII. There were no permanent side effects, showing that the PDT-MAL is a new, safe and effective technic for treating PC on the anterior thorax

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-04-01T14:52:45Z No. of bitstreams: 1 cristianeferreiraalfenas.pdf: 2237269 bytes, checksum: de6cc845b64194029dea071db9814d80 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-04-24T03:17:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 cristianeferreiraalfenas.pdf: 2237269 bytes, checksum: de6cc845b64194029dea071db9814d80 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-24T03:17:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cristianeferreiraalfenas.pdf: 2237269 bytes, checksum: de6cc845b64194029dea071db9814d80 (MD5) Previous issue date: 2012-03-22 / O propósito do presente estudo foi avaliar, in vitro, a atividade antimicrobiana da Terapia Fotodinâmica (PDT) no sistema de canais radiculares, utilizando diferentes concentrações do fotossensibilizante azul de toluidina e doses do laser, sobre biofilme de Enterococcus faecalis, ATCC 51299. Foram utilizados 42 dentes extraídos de humanos, unirradiculares e os canais foram devidamente preparados, instrumentados pela técnica de instrumentação rotatória. Os dentes foram autoclavados e os canais inoculados com uma suspensão conhecida de Enterococcus faecalis foram incubados por 21 dias. Os espécimes submetidos à PDT, utilizando combinações com diferentes concentrações do fotossensibilizante azul de toluidina (TBO) (0.5, 5 e 10μg/ml) e tempos de irradiação (60, 120, 300 e 600s) equivalentes a doses de energia 6, 12, 30 e 60J, utilizando uma fibra óptica intracanal e irradiação com o laser de diodo (AsGaAl) a 100mW. Os controles, positivo e negativo, não receberam nenhum tipo de tratamento. Amostras do conteúdo intracanal foram coletadas com cone de papel esterilizado, antes e após os respectivos tratamentos e submetidos à cultura contendo ágar BHI. Para determinar o número de unidades formadoras de colônias por mL (UFC/mL). Os dados obtidos na análise microbiológica (UFC/mL) foram analisados por meio da análise de variância e teste de Tukey. E para confirmar a formação de biofilme, dois espécimes de cada grupo foram selecionados e analisados ao microscópio eletrônico de varredura (MEV). As combinações de TBO 0.5μg/ml e 600s e 5μg/ml e 10μg/ml em todos os tempos de irradiação testados resultaram em significativa redução dos micro-organismos, sendo que a combinação TBO 5μg/ml e 600s apresentou significantemente a maior porcentagem de redução. Foi possível concluir que a utilização da PDT com o fotossensibilizante TBO e irradiação com laser de baixa potência apresenta ação antibacteriana significativa sobre biofilme de Enterococcus faecalis, sendo uma terapia promissora frente aos micro-organismos persistentes ao tratamento endodôntico convencional. / The purpose of this study was to evaluate in vitro antimicrobial activity of Photodynamic Therapy (PDT) in the root canal system, using different concentrations of photosensitizer toluidine blue (TBO) and laser doses on biofilms of Enterococcus faecalis, ATCC 51299. Used 42 extracted human teeth, single-rooted and the canals prepared to rotary instrumentation. The teeth were autoclaved and canals inoculated with a suspension Enterococcus faecalis in brain heart infusion and were incubated for 21 days. The specimens were subjected to PDT using combinations with different concentrations of the photosensitizer TBO (0.5, 5 and 10μg/ml) and irradiation times (60, 120, 300 and 600s) equivalent to doses of energy 6, 12, 30 and 60J, using an optical fiber intracanal and irradiation with diode laser (GaAlAs) to 100mW. The controls groups no treatment. Before and after the respective treatments the canal contents were sampled with sterilized paper points, the sample was dispersed in transport medium, serially diluted and culture on blood agar to determine the number of colony forming units per mL (CFU / mL). The data obtained in the microbiological analysis (CFU / mL) were analyzed by analysis of variance and Tukey test. And to confirm biofilm formation, two specimens of each group were selected and analyzed by scanning electron microscopy (SEM). Combinations of TBO 0.5μg/ml and 600s and TBO 5μg/ml, 10μg/ml and in all irradiation times tested resulted in significant reduction of micro-organisms but the combination TBO 5μg/ml and 600s showed significantly higher percentage of reduction. It was concluded that the use of PDT with the photosensitizer TBO and laser irradiation low power presents significant antibacterial action on biofilm of Enterococcus faecalis, is a promising therapy in the face of persistent micro-organisms to conventional endodontic treatment.

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-05-04T14:16:02Z No. of bitstreams: 0 / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-05-07T15:15:23Z (GMT) No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2018-05-07T15:15:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2018-02-18 / A Laserterapia de Baixa Potência (Low Level Laser Therapy – LLLT) apresenta-se como uma terapia não invasiva reconhecida por acelerar processos reparativos tanto de tecidos moles quanto de tecidos duros devido aos seus efeitos biomoduladores nas células e nos tecidos. Quando há associação de uma fonte de luz de comprimento de onda conhecido a um corante fotossensível de baixa toxicidade, temos a, também conhecida, Terapia Fotodinâmica (Photodynamic Therapy - PDT) que, ainda pouco se sabe sobre sua ação no processo de consolidação óssea. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de reparo ósseo em ratos submetidos à LLLT associada ou não ao azul de metileno a 0,01%, utilizando-se para isso a avaliação radiográfica e histológica. Defeitos ósseos foram realizados e distribuídos em quatro grupos: não tratados (Grupo controle); preenchidos por azul de metileno e não tratados (Grupo azul de metileno); tratados com laser 660nm (Grupo LLLT); preenchidos por azul de metileno e tratados com laser 660nm (Grupo LLLT + PDT). As radiografias foram realizadas nos dias 0, 7 e 14. Metade dos animais, irradiados ou não, foram eutanasiados após sete dias e a outra metade após 14 dias, sendo os fêmures removidos para análise histológica. Os resultados sugerem que, radiograficamente não houve consolidação óssea em nenhum dos grupos tratados, porém os defeitos ósseos do grupo LLLT + PDT apresentaram maior grau de radiopacidade; histologicamente houve maior aumento da área de neoformação óssea nos grupos LLLT e LLLT + PDT, com destaque para este último em ambos os períodos avaliados. Podemos desta forma, concluir que além da associação da PDT à LLLT ter sido eficaz, a combinação das duas técnicas promoveu indução da osteogênese de maneira precoce. / Low Level Laser Therapy (LLLT) is a recognized noninvasive therapy for accelerating repair processes of both soft and hard tissues due to their biomodulating effects on cells and tissues. When there is an association of a light source of known wavelength with a low toxicity photosensitive dye, we also have the known Photodynamic Therapy (PDT), which is still little known about its action in the process of bone healing. The objective of this work was to evaluate the bone repair process in rats submitted to LLLT, associated or not with 0.01% methylene blue, using radiographic and histological evaluation. Bone defects were performed and distributed in five groups: untreated (control group); filled with methylene blue and untreated (methylene blue group); treated with laser 660nm (LLLT Group); filled with methylene blue and treated with laser 660nm (LLLT + PDT Group). Radiographs were performed on days 0, 7 and 14. Half of the animals, irradiated or not, were euthanized after seven days and the other half after 14 days, and the femurs were removed for histological analysis. The results suggest that radiographically there was no bone consolidation in any of the treated groups, but the bone defects of the LLLT + PDT group presented a higher degree of radiopacity; histologically, there was a greater increase in the area of bone neoformation in the LLLT and LLLT + PDT groups, especially in the two evaluated periods. We can therefore conclude that besides the association of PDT with LLLT was effective, the combination of the two techniques promoted the induction of osteogenesis in an early manner.

Métodos de desinfecção da água destinam-se à inativação de patógenos a fim de minimizar o risco de doenças transmitidas pela água. Estes métodos incluem tratamento com luz ultravioleta e processos químicos, para o qual cloro, dióxido de cloro, hipoclorito e ozônio são comumente utilizados. No entanto, métodos analíticos modernos revelam que estes métodos padrão de desinfecção da água podem levar à formação de produtos tóxicos e potencialmente cancerígenos. Desse modo, desenvolver métodos mais adequados para a desinfecção de água é uma necessidade. Inativação Fotodinâmica é uma nova abordagem para a eliminação de microrganismos patogênicos. Basicamente, esse processo utiliza fotossensibilizadores e luz para promover uma resposta fototóxica, normalmente oxidativa, capaz de danificar biomoléculas e estruturas celulares, provocando a morte dos microrganismos. No entanto, o fotossensibilizador não pode permanecer livre como um contaminante neste tipo de aplicação. Assim, o objetivo desse estudo foi o desenvolvimento de membranas de quitosana com fotossensibilizadores incorporados visando à desinfecção microbiológica da água. As membranas foram preparadas incorporando-se o azul de metileno, a rosa de bengala, meso-tetrakis (4-N-metilpiridil)-porfirina ou a 5,10,15,20-tetrakis(p-aminofenil)-porfirina. A eficiência do processo de Inativação Fotodinâmica com os fotossensibilizadores incorporados as membrana foi investigada empregando-se a bactéria Escherichia coli como modelo, já que esta bactéria está comumente presente em águas de abastecimento. Os resultados mostraram que, dentre os quatro fotossensibilizadores incorporados em membranas de quitosana, o processo fotodinâmico empregando a TMPyP se mostrou mais efetivo: 5 log de redução após 120 minutos de irradiação com LED branco e 4 log de redução após 120 e 140 minutos de irradiação com LED azul e amarelo, respectivamente. Além disso, com o intuito de simular uma situação real de desinfecção, um sistema circulatório de água, contendo membranas de quitosana/TMPyP reforçadas com nylon, foi empregado. Os resultados mostraram que o processo de fotoinativação dinâmico foi efetivo, apresentando 3 log de redução em 80 minutos de irradiação com LED branco. Estes resultados sugerem que o processo é efetivo para inativar bactérias contaminantes na água, empregando-se fotossensibilizadores incorporados em quitosana como suporte polimérico. / Methods of water disinfection aim to inactivate pathogens in order to minimize the risk of waterborne diseases. These methods include treatment with ultraviolet light and chemical processes, for which chlorine, chlorine dioxide, hypochlorite and ozone are commonly used. However, modern analytical methods reveal that these standard methods of water disinfection may lead to the formation of toxic and potentially carcinogenic products. Thus, developing suitable methods for water disinfection is a necessity. Photodynamic inactivation is a new approach to eliminate pathogenic microorganisms. Basically, this process uses photosensitizers and light to promote a phototoxic response, normally oxidative, capable of damaging biomolecules and cellular structures, causing the death of microorganisms. However, the photosensitizer cannot remain free as a contaminant in this type of application. The objective of this study was to develop chitosan membranes with incorporated photosensitizers aiming the microbiological water disinfection. The membranes were prepared by incorporating methylene blue, rose bengal, meso-tetrakis (4-N-methylpyridyl)-porphine or the 5,10,15,20-tetrakis(p-aminophenyl)- porphyrin. The efficiency of the Photodynamic Inactivation with photosensitizers incorporated into the membrane was investigated using the bacteria Escherichia coli as a model, since this bacteria is commonly present in drinking water. The results showed that, among the four photosensitizers incorporated into chitosan membranes, the process employing the TMPyP was more effective: 5 log reduction after 120 minutes of irradiation with white LED and 4 log reduction after 120 and 140 minutes of irradiation with blue and yellow LED, respectively. Moreover, in order to simulate a real situation of disinfection, a water circulation system, containing TMPyP/chitosan membranes reinforced with nylon, was employed. The results showed that the process of photoinactivation using a dynamic system was effective, with about 3 log reduction in 80 minutes of irradiation with white LED. These results suggest that the process is effective to inactivate bacterial contaminants in water using photosensitizers incorporated into chitosan as a polymeric support.

A prevenção das doenças periimplantares baseia-se em procedimentos de rotina na clínica, com a remoção mecânica do biofilme associada ou não de agentes antimicrobianos locais e sistêmicos. No entanto, o controle do biofilme oral sobre a superfície de implantes é dificultado particularmente sobre as superfícies rugosas do titânio, que apesar de facilitarem a osseointegração, também favorecem a formação do biofilme. Objetivos: Objetivou-se analisar in vitro o efeito da TFD (Terapia fotodinâmica) usando curcumina como fotossensibilizador sobre o biofilme formado na superfície de discos de titânio com superfície rugosa e lisa. Material e Métodos: Biofilme mono espécie de Streptococus gordonii, colonizador inicial do biofilme dental, foi formado em superfícies lisas (usinadas) e rugosas (tratadas) de discos de titânio por 72 horas. Os discos lisos e rugosos foram então distribuídos em 3 grupos: tratados por 5 minutos com curcumina (60?M), clorexidina 0,12% como controle positivo e solução de DMSO (dimetilsufóxido), etanol e água como controle negativo (veículo da curcumina). As amostras foram divididas em 2 sub-grupos: ativado por LED azul (455-492nm) por 7 minutos e não-ativado. A atividade metabólica do biofilme foi determinada pelo método de redução do Sal tetralisol XTT e os resultados analisados estatisticamente pela análise da variância (ANOVA) seguida pelo teste de Tukey (p < 0,05). Resultados: Na ausência de luz, apenas o tratamento com clorexidina promoveu redução microbiana (controle positivo). O tratamento com curcumina ativada pela luz azul reduziu o número de bactérias viáveis no biofilme em 71% nos discos lisos e em 77% nos rugosos, não havendo diferença estatística com o controlepositivo.Conclusão: Os dados in vitro indicam que TFD associada à curcumina tem atividade sobre biofilme microbiano, sugerindo seu potencial no controle do biofilme oral sobre a superfície de titânio, e que este efeito independe da topografia da superfície. / Prevention of periimplant diseases is based on routine procedures in the clinic, with the mechanical removal of biofilm associated or not with local and systemic antimicrobial agents. However, the control of oral biofilm on the surface of implants is particularly difficult on the rough surfaces of titanium, which, although facilitating osseointegration, also favors biofilm formation. Objectives: The objective of this study was to analyze in vitro the effect of PDT using curcumin as a photosensitizer on the biofilm formed on the surface of titanium discs with a rough and smooth surface. Material and Methods: Biofilm mono species of Streptococus gordonii, initial colonizer of the dental biofilm, was formed on smooth (machined) and rough (treated) surfaces of titanium discs for 72 hours. The smooth and rough discs were then divided into 3 groups: treated for 5 minutes with curcumin (60 ?M), 0.1% chlorhexidine as a positive control and DMSO, ethanol and water solution as a negative control. The samples were divided into 2 subgroups: activated by blue LED (455-492nm) for 7 minutes and non-activated. The metabolic activity of the biofilm was determined by the reduction XTT salt method and the results analyzed statistically by ANOVA followed by the Tukey\'s test (p <0.05) Results: In the absence of light, only the chlorhexidine treatment promoted microbial reduction (positive control). The blue light-activated curcumin treatment reduced the number of viable bacteria in the biofilm in 71% in the smooth discs and in 77% in the wrinkles, and there was no statistical difference with the positive control. Conclusion: In vitro data indicate that PDT associated with curcumin has activity on microbial biofilm, suggesting its potential in the control of oral biofilm on the titanium surface, and that this effect is independent of surface topography.

Objetivo: Avaliar, in vitro, a efetividade da terapia fotodinâmica, com e sem o uso da fibra óptica intracanal diante de diferentes períodos de irradiação, na redução de Enterococcus faecalis em canais radiculares. Método: Foram utilizados sessenta dentes unirradiculares humanos, preparados e divididos em seis grupos (n=10), de acordo com o tratamento a ser realizado: G1, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação com laser de diodo por meio de fibra óptica intracanal (P=90mW), por um minuto e trinta segundos; G2, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação do mesmo modo que o G1, por três minutos; G3, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação sem fibra óptica intracanal (P=100mW), por um minuto e trinta segundos; G4, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação do mesmo modo que o G3 por três minutos; G5, hipoclorito de sódio 1% (t=15min); e G6, sem tratamento. Todas as amostras foram coletadas por meio de cones de papel esterilizados, antes e após os respectivos tratamentos e submetidas à cultura em placas de Petri contendo ágar BHI, em duplicata. Após 24 horas de incubação, promoveu-se a contagem das unidades formadoras de colônia (UFC/mL). Resultados: A aplicação de todos os tratamentos resultou em significativa redução dos microrganismos, apresentando-se em ordem decrescente de redução G5>G2>G4>G1>G3. Observou-se diferença estatisticamente significante entre os grupos G1 X G5 e G3 X G5. Conclusões: Os parâmetros utilizados nos diferentes grupos proporcionaram reduções intracanais significativas e semelhantes de E. faecalis; a utilização de potências máximas permitiu a redução do tempo de irradiação sem interferir a ação antimicrobiana; e o emprego da fibra óptica intracanal não influenciou de forma significativa nos resultados quando comparado ao uso da peça de mão. / Objective: To evaluate in vitro the effectiveness of photodynamic therapy on the reduction of Enterococcus faecalis in root canals, with and without use of the optical fiber into the canal in front of different period of time irradiation. Method: Sixty human single-root teeth were prepared and divided into six groups, in accordance with the treatment: G1, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation by diode laser with intracanal optic fiber (P=90mW) for one minute and thirty seconds; G2, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation the same way that G1, for three minutes; G3, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation without optic fiber (P=100mW) for one minute and thirty seconds; G4, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation the same way that G3 for three minutes; G5, 1% sodium hypochlorite (t=15min); and G6, without treatment. All the samples were collected by sterilized paper points, before and after respective treatments, and submitted to microbiological culture plated on BHI ágar duplicated. After 24 hours of incubation, it was performed the evaluation of colony-forming units (CFU/mL). Results: The application of all treatments resulted in significant reduction of microorganismsviability, showing in reductions decreasing order: G5>G2>G4>G1>G3. Significant statistical differences were observed among the groups G1 X G5 and G3 X G5. Conclusions: All the parameters used in the groups afforded significant and similar numerical reduction of E. faecalis; the use the maxim powers allowed a reduction of the irradiation time without compromise the antimicrobial effect; and the use of the intracanal optic fiber didnt influence the results when compared with the use of hand peace.

avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica (PDT) com fibra óptica ou peça de mão em canais radiculares de dentes decíduos com polpa morta, depois do preparo químico-cirúrgico, pela quantificação de microrganismos viáveis. Método: foram selecionados trinta dentes decíduos, de crianças na faixa etária entre quatro e sete anos com boa saúde geral que apresentavam um ou mais dentes com polpa morta e fístula visível clinicamente. Os dentes foram divididos em três grupos: G1- (n=10) que recebeu instrumentação com creme Endo-PTC e líquido de Dakin, G2- (n=10) que recebeu instrumentação com creme Endo-PTC e líquido de Dakin acrescida do PDT com fibra óptica e G3- (n=10) que recebeu instrumentação com creme Endo-PTC e líquido de Dakin acrescida do PDT com peça de mão. Após a obturação do canal e restauração do dente foi realizada uma tomada radiográfica. O material do interior do canal foi coletado com cones de papel esterilizados, imediatamente após a cirurgia de acesso aos canais, depois do preparo químico-cirúrgico e depois do PDT, e foram colocados em flaconetes com solução salina tamponada com fosfato (PBS) e levado ao laboratório para processamento Cada amostra foi agitada, diluída, semeada, incubada e as unidades formadoras de colônia (UFC) contadas e calculado o número de UFC/mL. Resultados: em todos os grupos experimentais houve redução do número de UFC/mL de forma significativa no interior do canal radicular. Houve redução significativa do G1 para G2 e de G1 para G3 quando comparado o log de UFC/mL da última coleta (coleta após instrumentação para G1 e após tratamento com PDT para G2 e G3), mas não houve diferença quando comparadas as últimas coletas de G2 e G3. Conclusão: a incorporação da terapia fotodinâmica, ao final do preparo químico-cirúrgico no tratamento endodôntico de dentes decíduos com polpa necrosada, potencializou a redução microbiana no interior dos canais radiculares. / to evaluate the effectiveness of photodynamic therapy (PDT) with optical fiber or handpiece in root canals of deciduous teeth with necrotic pulp, after chemical-surgical preparation, by the quantification of viable microorganisms. Method: thirty deciduous teeth were selected, of children aged between four and seven years in good general health who had one or more teeth with necrotic pulp and clinically visible fistulae. The teeth were divided into three groups: G1 (n=10) instrumentation with Endo-PTC cream and 0,5% sodium hypochlorite, G2 (n=10) instrumentation with Endo-PTC cream and 0,5% sodium hypochlorite added PDT by optical fiber, and G3 (n=10) instrumentation with Endo-PTC cream and 0,5% sodium hypochlorite added PDT with handpiece. After filling the canal and tooth restoration was performed radiography The samples were taken with sterile paper points immediately after the surgery to access the canals, after the chemical-surgical preparation, and after the PDT, and were placed in vials with saline solution buffered with phosphate (PBS) and taken to the laboratory for processing. Each sample was agitated, diluted, plated, and incubated, and the colony-forming units (CFU) were counted and the number of CFU/mL was calculated. Results: all the experimental groups showed a significant reduction in the number of CFU/mL in the root canal. There was a significant reduction from G1 to G2 and from G1 to G3, when comparing the logarithm of CFU/mL from the last sample (after instrumentation for G1 and after treatment with PDT for G2 and G3), but there was no difference when comparing the final samples of G2 and G3. Conclusion: the incorporation of photodynamic therapy at the end of the chemical-surgical preparation in the endodontic treatment of deciduous teeth with necrotic pulp increased the microbial reduction of root canals.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2016-05-19T15:00:56Z No. of bitstreams: 1 Ana Paula de Souza Mernick.pdf: 747300 bytes, checksum: 7cec9bdaa4c2bd9e6dfcc62d9bfdbd12 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T15:00:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Paula de Souza Mernick.pdf: 747300 bytes, checksum: 7cec9bdaa4c2bd9e6dfcc62d9bfdbd12 (MD5) Previous issue date: 2014-12-16 / Periodontitis is an infectious disease characterized by the destruction of the supporting tissues of the teeth and therefore the dental loss. Neutrophils are the first cells to arrive in periodontal inflammation and have as function phagocytosis and cytokine release. After a few days, the neutrophils are replaced by lymphocytes, which give the chronic nature of periodontitis. The established treatment for periodontitis is oral hygiene care, scaling and root planing, and in more advanced cases, there may be the need for systemic antibiotics. In order to reduce the prescription of antibiotics, it has been researched the use of photodynamic therapy (PDT) as antimicrobial intervention, with great results. The objective of this work is to verify if the PDT interferes with the chemotaxis of neutrophils and T lymphocytes into the periodontal tissue. For such, 05 patients who had undergone prior treatment with periodontal good oral hygiene and periodontal pockets with residual surgical indication were allocated. PDT was applied under the following parameters: methylene blue (50 µg/ml) was applied to the bottom of the periodontal pocket and after 5 minutes, via transmucosal, was irradiated with diode laser 660 nm, P = 100 mW, t = 90 s per point 9 J/point, energy density: 22 J/cm2, power density: 250 mW/cm2. One week after PDT, the surgical removal of the periodontal pockets was performed and the samples sent for routine histology and immunohistochemistry for detection of neutrophil and lymphocyte. The samples were photographed and positive cells counted with the aid of ImageJ software. The data were evaluated statistically and no significant difference between groups (Mann-Whitney p = 0.5). It was concluded that PDT did not interfere with the chemotaxis of neutrophils and T lymphocytes in the periodontal tissue after 7 days. / A periodontite é uma doença infecciosa caracterizada pela destruição dos tecidos de suporte dos dentes e consequentemente à perda do elemento dental. Os neutrófilos são as primeiras células a chegar ao processo inflamatório periodontal e têm como função fagocitose e liberação de citocinas. Após alguns dias os neutrófilos vão sendo gradualmente substituídos por linfócitos, que dão o caráter crônico da periodontite. O tratamento estabelecido para a periodontite é a orientação de higiene oral, raspagem e alisamento radicular e em casos mais avançados, pode haver a necessidade de antibioticoterapia sistêmica. No sentido de reduzir a prescrição de antibióticos, tem-se pesquisando o uso da terapia fotodinâmica (PDT) como intervenção antimicrobiana, com ótimos resultados. Assim, o objetivo deste trabalho é verificar se a PDT interfere na quimiotaxia de neutrófilos e linfócitos T no tecido periodontal. Para tal, foram alocados 05 pacientes que passaram por tratamento periodontal prévio com boa higiene oral e presença de bolsas periodontais residuais com indicação cirúrgica. A PDT foi aplicada nos seguintes parâmetros: azul de metileno (50 µg/mL) aplicado no fundo da bolsa periodontal e após 5 minutos foi irradiado via transmucosa com laser de diodo, 660 nm, P= 100 mW, t= 90 s por ponto, 9 J/ponto, densidade de energia: 22 J/cm2, densidade de potência: 250 mW/cm2. Uma semana após a PDT foi realizada remoção cirúrgica das bolsas e as amostras encaminhadas para processamento histológico de rotina e imunohistoquímica para detecção de neutrófilos e linfócitos T. As amostras foram fotografadas e as células positivas contadas com auxílio do software ImageJ. Os dados foram avaliados estatisticamente e não houve diferença significativa entre os grupos (Mann-Whitney p= 0,5). Conclui-se que a PDT não interfere na quimiotaxia de neutrófilos e linfócitos T no tecido periodontal após 7 dias.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2016-05-19T15:16:35Z No. of bitstreams: 1 Erika Elisabeth Evangelista.pdf: 1020129 bytes, checksum: dee500eb8c5a17c94acdc64c0d81e2de (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T15:16:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Erika Elisabeth Evangelista.pdf: 1020129 bytes, checksum: dee500eb8c5a17c94acdc64c0d81e2de (MD5) Previous issue date: 2014-12-11 / Periodontal disease is an inflammatory disease affecting the supporting tissues of the teeth, leading to loss of periodontal ligament and bone. The treatment involves scaling and root planning, and in more advanced cases there is the need for surgery and sometimes antibiotics. Photodynamic therapy is a therapeutic antimicrobial resource to aid in modulation of the inflammatory response triggered by the light. One of the main cells is the macrophage inflammatory process which acts in reciprocity with T lymphocytes. Thus the aim of this study was to evaluate the effect of photodynamic therapy in the chemotaxis of macrophages and activated T lymphocytes in the periodontal tissue. For such, patients who have undergone previous periodontal treatment with good oral hygiene and periodontal pockets residual requiring surgery were allocated. PDT was applied on the following parameters: methylene blue (50ug / ml) was applied to the bottom of the pocket and after 5 minutes via transmucosal the photosensitizer was irradiated with diode laser 660 nm, P = 100 mW, t = 90 s per point 9 J/point; energy density: 22 J/cm2, power density: 250 mW/cm2. One week after PDT, the surgical removal of the pockets was performed and samples sent for routine histology and immunohistochemical detection of activated T lymphocytes (CD45RO +) and macrophages (CD68 +). The samples were photographed and positive cells counted with the aid of ImageJ software. Data were evaluated statistically and no significant difference between groups (Mann-Whitney p = 0.9). We conclude that PDT does not interfere with chemotaxis of macrophages and activated T lymphocytes in periodontal tissue after seven days. / A doença periodontal é uma doença inflamatória que afeta os tecidos de suporte dos dentes, levando à perda de ligamento periodontal e de osso. O tratamento consiste em raspagem e alisamento radicular e nos casos mais avançados há a necessidade de cirurgias e, às vezes antibioticoterapia. A terapia fotodinâmica é um recurso terapêutico antimicrobiano que auxilia a modulação da resposta inflamatória desencadeada pela luz. Uma das principais células do processo inflamatório é o macrófago, que age em reciprocidade com os linfócitos T. Assim o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da terapia fotodinâmica na quimiotaxia de macrófagos e linfócitos T ativados no tecido periodontal. Para tal foi realizado um estudo clínico transversal no qual foram alocados pacientes que passaram por tratamento periodontal prévio com boa higiene oral e bolsas periodontais residuais com indicação cirúrgica. A PDT foi aplicada nos seguintes parâmetros: azul de metileno (50ug/mL) aplicado no fundo da bolsa e após 5 minutos foi irradiado via transmucosa com laser de diodo, 660 nm, P= 100 mW, t= 90 s por ponto, 9 J/ponto, densidade de energia: 22 J/cm2, densidade de potência: 250 mW/cm2. Uma semana após a PDT foi realizada remoção cirúrgica das bolsas e as amostras encaminhadas para processamento histológico de rotina e imunohistoquímica para detecção de linfócitos T ativados (CD45ro+) e macrófagos (CD68+). As amostras foram fotografadas e as células positivas contadas com auxílio do software ImageJ. Os dados foram avaliados estatisticamente e não houve diferença significativa entre os grupos (Mann-Whitney p= 0,9). Conclui-se que a PDT não interfere na quimiotaxia de macrófagos e linfócitos T ativados no tecido periodontal após 7 dias.