Mutações com ganho de função do proto-oncogene Ras se encontram entre umas das mais freqüentes modificações em cânceres humanos, além disso, tumores com esses caracterísitcas possuem, em geral, mau prognóstico. O objetivo inicial desta tese foi estudar novos mecanismos anti-proliferativos disparados por dois agentesmitogênicos, FGF2 (\"Fibroblast Growth Factor 2\") e PMA (\"Phorbol-12-Myristate-13-Acetate\", (um diéster de forbol), sobre células de camundongos transformadas por Ras e refratárias a apoptose. Para isso utilizamos duas linhagens celulares: uma linhagem naturalmente trtansformada por uma ampliação do gene K-Ras, que é derivada de um tumor de córtex adreno-cortical de camundongo e é denominada Y1, e uma sublinhagem derivada de Balb/c-3T3, transformada em laboratório com o oncogene H-RasV12 humano. A fim de se elucidar o mecanismo de ação de FGF2, foram selecionadas e caracterizadas múltiplas sublinhagens clonais resistentes a FGF2, derivadas das linhagens parentais Y1 e B61. Mostramos assim, que o FGF2 exerce um forte efeito negativo, de forma que os clones resistentes ao mesmo tendem a perder aos altos níveis de expressão da proteína Ras. Mostramos ainda que esses células passam a ser dependentes de FGF2 para crescer em cultura, perdem a capacidade de crescimento em suspensão e são menos tumorigênicas quando comparadas às células parentais. Em uma segunda etapa, caracterizamos o efeito citotóxico de PMA sobre células transformadas por Ras, e vimos que esse efeito é mais acentuado para células transformadas por K-Ras, mas é nulo sobre células imortalizadas não tumorigênicas. Mostramos ainda que esse efeito passa pela ativação da via de PKC. A inibição da proliferação por PMA se deve, ao menos parcialmente, à indução de senescência nessas células. De forma semelhante ao que foi para o estudo com FGF2, foram selecionados clones resistentes a PMA, derivados de Y1. Os clones obtidos se mostraram muito instáveis, pouco resistentes a PMA e dependentes de FGF2 para crescer. Todos os clones testados se mostram tumorigênicos, entretanto, apresentaram maior tempo de latência, estaticamente diferente da célula parental, Y1. Assim, neste trabalho, mostramos que duas substâncias, com caráter mitogênico e potencialmente oncogênico, são capazes de inibir seletivamente a proliferação de células transformadas por Ras, uma vez que elas não têm efeito sobre células não transformadas. Desvendar os mecanismos que causam a citotoxidade dessas substâncias deve trazer informações relevantes com possibilidades de impacto em terapia de tumores dependentes dos oncogenes Ras. / Amplification and gain of function mutations in ras proto-oncogenes are frequent genetic lesions in human cancers of bad prognostic. This thesis aimed to investigate novel anti-proliferative mechanisms induced by two mitogens, FGF2 (\"Fibroblast Growth Factor 2\") and PMA (\"Phorbol-12-Myristate-13-Acetate\", a phorbol diester), in murine cell lines transformed by ras and resistant to apoptosis. To this end, we took two different mouse malignant cell lines: Y1, a cell line derived from an adrenal tumor, naturally transformed by K-ras amplification and another one, 3T3-B61, obtained by transformation of Balb-3T3 fibroblasts with the H-rasV12 oncogene. To elucidate FGF2 mechanisms of action, we selected, isolated and characterized clonal sublines resistant to FGF2 from both Y1 and 3T3-B61 parental lines. FGF2-resistant clones are rare normal-like revertant sublines that no longer display Ras over expression, dependent on FGF2 for growth, do not grow in suspension cultures and exhibit low tumorigenicity in Nude mice. These results show that FGF2 exerts a strong selective pressure against ras-transformed cells, inducing senescence and irreversibly blocking proliferation. Differently from FGF2 , PMA citotoxic effect is completely dependent on PKC activity. In addition, PMA is highly toxic to K-Ras transformed Y1 cells, poorly toxic to H-Ras-transformed 3T3-B61 cells and not toxic to immortalized non tumorigenic cell lines. Attempts to select PMA-resistant cells fropm Y1 parental line have yielded very rare, highly clonal sublines, dependent on FGF2 for proliferation. In conclusion, two mitogens, FGF2 and PMA, can selectively inhibit Ras-driven proliferation, a phenomenon of great interest for biology and therapy of tumors dependent on ras oncogenes.

A tecnologia atual permite armazenar grandes quantidades de dados, no entanto sua exploração e compreensão resultam em um enorme desafio devido não só ao tamanho dos conjuntos produzidos mas também sua complexidade. Nesse sentido a visualização de informação vem se mostrando um recurso extremamente poderoso para ajudar a interpretar e extrair informação útil desse universo de dados. Dentre as abordagens existentes, as tecnicas de projeção multidimensional estão emergindo como um instrumento de visualização importante em aplicações que implicam a análise visual de dados de alta dimensão devido ao poder analítico que essas oferecem na exploração de relações de similaridade e correlação de dados abstratos. Contudo, os resultados obtidos por tais técnicas estão intimamente ligados à qualidade do espaço de características que descrevem os dados sendo processados. Se o espaço for bem formado e refletir as relações de similaridade esperadas por um usuário, os resultados nais serão satisfatórios. Caso contrário pouca utilidade terão as representações visuais geradas. Neste projeto de mestrado técnicas de projeção multidimensional são empregadas, para, não somente explorar conjuntos de dados multidimensionais, mas também para servir como um guia em um processo que visa \"moldar\" espaços de características. A abordagem proposta se baseia na combinação de projeções de amostras e mapeamentos locais, permitindo ao usuário de forma interativa transformar os atributos dos dados por meio da modicação dessas projeções. Mais especicamente, as novas relações de similaridade criadas pelo usuário na manipulação das projeções das amostras são propagadas para o espaço de característica que descreve os dados, transformando-o em um novo espaço que reflita essas relações, ou seja, o ponto de vista do usuário sobre as semelhanças e diferenças presentes nos dados. Resultados experimentais mostram que a abordagem desenvolvida nesse projeto pode com sucesso transformar espaços de características com base na manipulação da projeção de pequenas amostras, melhorando a coesão e separação de grupos. Com base no ferramental criado, um sistema de recuperação de imagens por conteúdo e sugerido, mostrando que a abordagem desenvolvida pode ser bastante útil nesse tipo de aplicação / Although the current technology allows storing large volumes of data, their exploration and understanding remains as challenges not only due to the size of the produced datasets but also their complexity. In this sense, the information visualization has proven to be an extremely powerful instrument to help users to interpret and extract useful information from this universe of data. Among the existing approaches, multidimensional projection techniques are emerging as an important visualization tool in applications involving visual analysis of high dimensional data due to the analytical power that these techniques oer in the exploitation of similarity relations and abstract data correlation. However, the results obtained by these techniques are closely tied to the quality of the feature space which describes the data being processed. If the space is well formed and reflect the similarity relations expected by an user, the nal results will be satisfactory. Otherwise, little utility will have the created visual representations. In this master\'s project, multidimensional projections techniques are employed not only to explore multidimensional data sets, but also to serve as a guide in a process that aims to \"mold\" features spaces. The proposed approach is based on the combination of projections of samples and local mappings, allowing the user to interactively transform the data attributes by modifying these projections. Specifically, the new similarity relations created by the user in manipulating the projections of the samples are propagated to the feature space that describes the data, transforming it into a new space that reflects these relationships, i.e., the point of view of the user about the similarities and dierences in the data. Experimental results show that the approach developed in this project can successfully transform feature spaces based on the manipulation of projections of small samples, improving the cohesion and separation of groups. Based on the created framework, a content-based image retrieval system is suggested, showing that the developed approach can be very useful in this type of application

A tese analisa o comportamento inovativo das grandes empresas da indústria de transformação brasileira, consideradas importantes agentes do desenvolvimento econômico, com ênfase no papel desempenhado pelas empresas estrangeiras. A partir de uma abordagem baseada na ―teoria econômica evolucionária‖, considera-se que as inovações (tecnológicas, organizacionais e institucionais) são um mecanismo fundamental do desenvolvimento econômico. Dessa forma, procurou-se identificar em que medida as grandes empresas estrangeiras da indústria de transformação brasileira têm se caracterizado como agentes do desenvolvimento econômico nacional, em função da histórica trajetória dependente da economia nacional em relação ao capital produtivo internacional. Com base nos dados da Pesquisa de Inovação Tecnológica (PINTEC-IBGE), foram elaborados indicadores sobre inovação (taxa de inovação, esforço inovativo, relações de cooperação, incentivos à inovação, responsabilidade pela inovação, fontes de informação, qualificação das pessoas ocupadas em P&D e problemas e obstáculos à inovação), a partir dos quais se fez uma análise comparativa acerca do comportamento inovativo das grandes empresas (500 e mais empregados), nacionais e estrangeiras, entre 1998 e 2005. Com base nos indicadores analisados, verificou-se que as grandes empresas estrangeiras da indústria de transformação brasileira têm dado uma contribuição restrita ao desenvolvimento de inovações em território brasileiro. Além disso, os indicadores também demonstram que há uma influência reduzida, tanto de empresas nacionais como de estrangeiras, sobre o desenvolvimento do ―sistema nacional de inovações‖. Portanto, a atração de investimentos estrangeiros diretos não tem se caracterizado, na perspectiva ―evolucionária‖, como forma adequada ou suficiente de promoção do desenvolvimento econômico nacional. Como agravante, as ―estratégias seguidoras‖ das empresas nacionais têm amplificado os efeitos do comportamento inovativo das empresas estrangeiras. / The thesis analyzes the innovative behavior of large firms in Brazilian transformation industry, considered important agents of economic development, with emphasis on the role played by foreign enterprises. Initiating with an approach based on the ―evolutionary economic theory‖, its considered that the innovations (technological, organizational, and institutional) are a fundamental mechanism of economic development. Thus, it sought to identify to what extent the Brazilian industries large foreign enterprises are characterized as agents of national economic development, due to the dependent historical course of the national economy in relation to international productive capital. Based on the ―Pesquisa de Inovação Tecnológica‖ (PINTEC-IBGE) data, indicators were elaborated about innovation (innovation rate, innovative effort, relations of cooperation, innovation incentives, responsibility for the innovation, sources of information, qualification of the people occupied in P&D, and problems and obstacles to the innovation), from which was made a comparative analysis concerning the innovative behavior of the large national and foreign enterprises (500 and more employees), between 1998 and 2005. Based on the analyzed indicators, it was verified that the Brazilian industries large foreign enterprises have given a restricted contribution to the development of innovations in Brazilian territory. Moreover, the indicators also demonstrate that it has a reduced influence, by national as well as foreign enterprises, on the development of the ―national innovation system‖. Therefore, the attraction of foreign direct investments haven't been characterized, in the ―evolutionary‖ perspective, as an adequate or sufficient form of promotion of the national economic development. As an aggravation, the national enterprise's ―following strategies‖ have amplified the effect of the foreign enterprise's innovative behavior.

A estrutura urbana muda de acordo com as necessidades da sociedade. Essas modificações são identificadas em características físicas como a volumetria das edificações, intensidade de ocupação urbana, e infraestrutura. Cada decisão de alocação de atividades é tomada considerando a estrutura urbana existente que limita a capacidade de decisão de outras atividades pelo uso do espaço ou das relações estabelecidas assumindo um comportamento sistêmico. Considera-se a transformação, tanto espacial, quanto de uso do solo como o resultado da interação entre diferentes níveis de um sistema: decisões individuais, subsistemas urbanos (interdependência socioeconômica) e o macrossistema urbano (interação entre subsistemas) gerando um processo de mudança contínuo. O conceito de interação espacial oferece um modelo abstrato abrangente no qual a cidade sofre a influência de um “campo de forças” gerado pela distribuição das atividades que atraemse ou repelem-se umas às outras. O crescimento e a alocação das atividades seguem princípios como atratividade, acessibilidade (Wilson, 1961), competição, economia de aglomeração e relações socioeconômicas. A transformação da estrutura urbana é considerada como o resultado da interação entre componentes de um sistema complexo com diferentes níveis de organização: decisões individuais, subsistemas urbanos e macrossistema urbano. Essa abordagem considera os conceitos ligados às teorias neoclássicas dentro de um arcabouço teórico ligado à autoorganização e sinergética (Haken, 1983). A representação da dinâmica urbana será feita a partir do Modelo Autômato celular POTENCIAT (Potencial Change and Intra-urban Attractiveness) onde atividades são alocadas baseadas com base na informação disponível que consistem de: geração de atratividade de atividades iguais e suas complementares; geração de repulsão entre atividades incompatíveis. As relações funcionais definem a complementaridade e repulsão, assim como a capacidade de competir com as outras atividades do sistema. A analogia reduz o sistema urbano a um campo de cargas positivas e negativas, simulando atratividade de cada atividade urbana localizada espacialmente. Os resultados das Simulações do Modelo Potenciat são objeto de estudo a partir de cinco indicadores para encontrar convergência com propriedades e comportamentos existentes em sistemas reais. Os resultados das quatro simulações serão avaliados segundo suas propriedades espaciais e estruturais. / Urban environment changes according to the needs of our society. These modifications are identified in characteristics such as building typology, intensity of urban occupation, and infrastructure. Each decision is taken considering the existing urban structure and it limits the decisions of other activity units by the use of space or the relations that are established, therefore assuming a systemic behavior. It is considered here the transformation, either spatial or of urban land use as a result of the interaction among different levels of a system: individual decisions, urban subsystems (social and economic interdependence) and urban macro system (interaction among subsystems), generating an ever changing process. The concept of spatial interaction offers a thorough abstract model, in which the city is a changing force field, created by the activities’ distribution that attract or repel themselves. The growth and location of activities follow principles such as attractiveness, accessibility (Wingo 1961), competition, agglomeration economy and social and economic relationship. Urban structure transformation is considered as a result of the interaction of components of a complex system with different organization levels: individual decisions, urban subsystems and urban macro systems. This approach considers the concepts related to the neoclassical theories within a theoretical framework linked to self-organization and sinergetics (Haken, 1983) Urban dynamic representation will occur from the Celular Automata POTENCIAT model (Potencial Change and Intra-urban Attractiveness) where activities are allocated based on the available information, which consists of: generating attractiveness by means of equal activities and their complementary ones; generating repulsion of incompatible attractivenesses. Each urban activity defines the complementarity and repulsion relations, as well as the capacity of expelling other activities from the system. The analogy used reduces the urban system to an electric field of positive and negative charges, simulating the attractiveness of each urban activity located spatially. Results of Simulations with Model POTENCIAT are object of a study based on five indicators in order to find convergence with existing properties and behavior in real systems. The results of four simulations will be evaluated according to their spatial and structural properties.

A indústria de transformação brasileira recebeu rigorosos apoios públicos com a reintrodução da política industrial na década de 2000, através da Política Industrial Tecnológica e de Comércio Exterior – PITCE – (2003) e, posteriormente da Política de Desenvolvimento Produtiva – PDP – (2008). No entanto, a queda da produtividade – que sinaliza diminuição do produto por trabalhador, encarecimento dos bens produzidos e, assim, perda de competitividade – vai de encontro aos objetivos daquelas políticas, que propunham aumento da escala produtiva, ampliação da inovação privada e incremento da competitividade da indústria doméstica no mercado internacional. Perante o desse decrescimento desse indicador, propôs-se investigar se algum mecanismo econômico operou na relação entre política industrial e produtividade ou se as políticas introduzidas nesse recorte de tempo falharam. Para tanto, foram utilizados dados sobre incentivo público, emprego, produção e inovação, e foi proposto um modelo que relaciona a introdução de uma política industrial com a produtividade do trabalho, a qual teve sua variação calculada através da técnica shift-share. Concluiu-se que o decrescimento da produtividade ocorreu em uma fase de transição, da ausência para a presença de política, na qual a variação dos custos ampliou-se mais do que a da produção. Na fase de plena utilização dos benefícios da política industrial pelas firmas houve aumento da produtividade, e a oscilação da produção superou a de custo. / Brazil’s Manufacturing Industry has received considerable amounts of public resources since the issuing of the industrial policies in the 2000’s, through PITCE1 (2003), and PDP2 (2008). However, the decrease of productivity – which implies reduction on the quantity of products made by worker, inflation on the goods produced, therefore, loss of competitiveness – goes against the goals of such policies, which aimed at enhancing the production scale, expanding private innovation, and increasing competitiveness of the national industry in the international market. In the face of such negative factors, this research sought to investigate whether there had been an economic agent on the association of industrial policy and productivity or the policies applied during this period just failed. In order to explain this, data has been used, relating to public incentives, employment, production and innovation, and a model has been suggested, in which its variables were calculated through the shift-share technique. It can be inferred that the decrease of productivity occurred during a transition period, in which the variation of costs grew higher than the production one. On the stage in which the firms benefitted from the policy, the swing of production surpassed the costs, thus, enhancing the productivity.

A paisagem possibilita um olhar para a cidade que integra diversos aspectos da relação sociedadenatureza, e, ao expressar diferentes momentos da ação de uma cultura sobre o espaço, é também uma acumulação de tempos. O presente trabalho pretende compreender as dinâmicas de transformação da paisagem contemporânea, buscando desvelar suas múltiplas camadas temporais a partir de uma perspectiva histórica. Para acessar os vestígios do passado e realizar um percurso no tempo, adota-se a imagem fotográfica como fonte para a investigação. Nesse encontro da paisagem e da fotografia, enquanto fenômenos visíveis que se oferecem a leituras espaço-temporais, sob a inspiração benjaminiana do princípio da montagem, articulam-se os fundamentos teórico-metodológicos que se desdobram na construção e na aplicação de um método para a interpretação da paisagem segundo suas características constituintes da forma, função e estrutura. Como estudo de caso, utiliza-se fotografias de “Porto Alegre vista do Guaíba” em diferentes períodos, considerados emblemáticos em relação às transformações urbanas. Ao acessar as fotografias enquanto vestígios deixados como uma experiência sensível do mundo, a paisagem se revela, permitindo a apreensão de seus significados. / Landscape provides a look at the city integrating various aspects of the society-nature relationship. As it expresses different connections of cultural action over space, it is also an overlapping of time. This study aims to understand the transformation dynamics of the contemporary landscape, seeking to uncover its many layers of time from a historical perspective. In order to access the vestiges of the past and make a journey in time, the photographic image is the source for research. When landscape and photography meet and visible space-time readings phenomena take place inspired by Benjamin’s principle of montage, theoretical and methodological articulation unfolds in the construction and application of a method for interpretation of the landscape according to its form, function and structure. As a case study, photographs of “Porto Alegre view from Guaíba” at various times are considered emblematic in relation to urban transformation. By accessing the photographs as traces left and as a sensory experience of the world, the landscape reveals itself, allowing seizure of meanings.

O trabalho trata das modificações sofridas pelo corpo desde que a ele se somaram próteses — aparatos tecnológicos —, especialmente a partir do advento da Revolução Industrial, mudanças essas que reverberaram na produção de espaço da arquitetura. Tem-se como hipótese que tais transformações do corpo, ao interferirem no modo como o mundo é percebido e experimentado pelo homem, trazem questões a serem refletidas no âmbito da arquitetura, uma vez que o cenário atual em que ela se produz aponta para novas vivências do espaço urbano. Analisa-se que arquitetura é possível diante de um meio ciborgue, em que as contaminações do corpo pela máquina mobilizam novas formas de aproximação entre usuário e obra. / The research deals with the transformations suffered by the body since they added prothesis — technological instruments —, especially from the advent of Industrial Revolution, changes that reverberated in architecture’s space. The hypothesis is that such transformations, when intervening with the way men perceive the world, bring questions to be reflected by the discipline, once the current scene where architecture is produced leads to new experiences of urban space. It is analyzed what architectural production is made possible in a cyborg ambience, where the contaminations of body by machine mobilize new forms of approach between habitants and buildings.

Este trabalho tem como objetivo analisar um fenômeno bastante comum na realidade brasileira, que é o da transformação do espaço urbano de conjuntos habitacionais padrão COHAB efetuada individualmente pelos moradores, após sua ocupação. A incapacidade de um grande número de projetos de conjuntos residenciais populares em atender às expectativas espaciais socialmentedeterminadas pelos residentes, manifesta-se pela total descaracterização das concepções originais que representam não apenas alterações de ordem quantitativa no interior do conjunto mas, fundamentalmente, de estrutura urbana. Não é uma mudança de forma apenas, mas de modelo. Particularmente neste caso, situam-se aqueles conjuntos cujos projetos seguem de forma mais intensa os preceitos do espaço urbano modernista. Como estudo de caso, utilizou-se o Conjunto Rubem Berta, da COHAB/RS, construído em Porto Alegre a partir do final da década de 70 e ainda hoje em transformação. Percebe-se que as alterações são efetuadas com a adoção de determinados mecanismos de transformação do espaço os quais, além de serem recorrentes no interior do próprio conjunto, são identificadas também em outros assentamentos de origem similar. Por outro lado, as regras de organização local das transformações espaciais produzem um estrutura global nova. / The main goal of this piece of research is to investigate a quite common phenomenon found all over the country, concerning the urban changes introduced individually by the dwellers of public housing estates. A great number of housing estates, particularly those designed according to modernist concepts, seem to be unable to support space related social requirements and are then widely transformed when compared to the origina llayouts. Beyond the quantitative features, the morphological changes that took place in those housing estates mean a fundamental new approach to urban structures as built up by their dwellers. As a case study is analysed the Rubem Berta Housing Estate which was built in Porto Alegre/RS in the late 70's. Since its occupation the urban transformations there have never stopped. lt's possible to realize that the dwellers use some physical rules to define the new settlement which are very similar within the estate itself and, at the same time, very similar to those found in other transformed housing estates. The local rules of physical transformation produce a new overall structure for the whole urban complex of the estate.

Submitted by Israel Vieira Neto (israel.vieiraneto@ufpe.br) on 2015-03-09T13:04:30Z No. of bitstreams: 2 Liliane Aparecida.pdf: 1344093 bytes, checksum: ed28a9c41086885fe0f6deecf133e3c5 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-09T13:04:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Liliane Aparecida.pdf: 1344093 bytes, checksum: ed28a9c41086885fe0f6deecf133e3c5 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-14 / AGEFEPE / A Região Nordeste do Brasil vem apresentando índices de crescimento econômico superiores a média brasileira. O estado de Pernambuco possui papel de destaque, devido ao Complexo Suape e a implantação da Refinaria Abreu e Lima. Nesse contexto, a universidade adquire importância por formar capital humano e disponibilizar suporte científico e tecnológico. O objetivo desse estudo é analisar a relação institucional entre a UFPE e a Refinaria Abreu e Lima na estruturação da indústria de refino de petróleo em Pernambuco, assumindo a hipótese de Evans (2004) para explicar o processo de transformação industrial: é a insuficiência de burocracia que prejudica o desenvolvimento e não sua prevalência. Os objetivos específicos são analisar que papel de transformação industrial, com base em Evans (2004) orienta a relação entre a UFPE e a Refinaria Abreu e Lima na estruturação da indústria de refino de petróleo em Pernambuco e como a presença da burocracia, que orienta essa relação, contribui para o desenvolvimento dessa indústria. A fundamentação teórica abrange os conceitos de Estado e Burocracia, desenvolvimento econômico, produtividade, produção de conhecimento, atuação da instituição universidade, economia dos custos de transação (ECT) e os papéis de transformação industrial de Evans (2004). Posteriormente, será explanada a metodologia de Análise Argumentativa. Os resultados demonstram que a atuação da UFPE é vista nos papéis de transformação industrial demiurgo e pastor. A relação estabelecida entre a UFPE, a Refinaria Abreu e Lima e o Governo do Estado de Pernambuco caracteriza uma Hélice Tríplice, conforme Etzkowitz (2009). Essa relação é vista de forma positiva pelos partícipes e reforçou-se a importância da universidade na formação de recursos humanos e na atuação em P&D. Apesar desses aspectos, foram apontadas a falta de apoio institucional interno na UFPE e as dificuldades em alinhar as necessidades de equipamentos do corpo docente com as demandas de P&D da indústria, o que tem gerado comportamentos oportunistas e tornado imprescindíveis mecanismos de governança. Evidenciou-se, ainda, a importância da adoção pela UFPE de um modelo de gestão com maior participação dos centros acadêmicos e a descentralização na tomada de decisões. Com a adoção de mecanismos burocráticos que adeque seus meios (cursos de graduação e pós-graduação, laboratórios de pesquisa) aos objetivos pretendidos (apoiar a estruturação da indústria de refino de petróleo) a UFPE garantiria a máxima eficiência na relação institucional com a Refinaria Abreu e Lima.

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-13T19:12:41Z No. of bitstreams: 2 Daniel_Tese - Fevereiro 2012.pdf: 2496504 bytes, checksum: 0a41c4b620d4bc11a409448f39581a21 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T19:12:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Daniel_Tese - Fevereiro 2012.pdf: 2496504 bytes, checksum: 0a41c4b620d4bc11a409448f39581a21 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-02 / A murcha de fusário, causada por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), é uma importante doença para a cultura do tomate, sendo a utilização de cultivares resistentes a melhor estratégia para o controle desse patógeno. A transformação genética de plantas constitui instrumento biotecnológico essencial para o melhoramento, pela introdução de genes exógenos, manutenção das características originais da variedade e encurtamento do tempo para obtenção de uma nova cultivar. Um dos maiores obstáculos para a manutenção dessa resistência reside na busca de genes alvos envolvidos na defesa em plantas e monitoramento da variabilidade dos fitopatógenos. Assim, este estudo foi conduzido com o objetivo de determinar a variabilidade genética de diferentes isolados das três raças de Fol, mediante marcadores moleculares, caracterizar um gene diferencialmente expresso isolado de um genótipo resistente não comercial submetido ao ataque de fusário e de transferir, via transformação genética, esse gene para uma cultivar comercial sensível ao fungo. Analisando a variabilidade genética de isolados pertencentes às três raças de Fol utilizando marcadores moleculares RAPD e IGS, foi demonstrado que a raça 3 é distinta das demais raças, estabelecendo um agrupamento das raças 1 e 2. Devido ao fato das cultivares comerciais com resistência às raças 2 e 3 de Fol, ainda não estarem amplamente disponíveis, com o objetivo de identificar genes envolvidos em defesa, foi construída uma biblioteca de cDNA usando hibridização subtrativa supressiva (Suppresive Subtractive Hybridization, SSH) a partir de um genótipo resistente (genótipo BRH) desafiado com a raça 2 de Fol. Dentre os genes identificados, uma quitinase (SolChi) foi selecionada para verificar respostas no nível da expressão gênica das plantas BRH submetidas à inoculação com a raça 2 de Fol, utilizando a técnica de PCR em tempo real (qRT-PCR), em que a normalização da expressão desse gene foi feita a partir da expressão do fator de elongação α1 (EF-1α) de tomate, classificado como gene housekeeping. Observou-se o aumento da expressão do gene SolChi após 24 horas da inoculação do fitopatógeno em tecido radicular quando comparado com as plantas controles. O gene SolChi foi transferido para a cultivar comercial Santa Clara, sensível à murcha de fusário, por transformação genética via Agrobacterium tumefaciens, estirpe EHA 105, sob o controle do promotor 35S de CaMV duplicado, superexpressando esse gene. Mudas transgênicas (T0) foram confirmadas por PCR, usando primers específicos, para o transgene e a frequência de transformação obtida foi de 7%. A transformação e transcrição dos transgenes foram confirmadas em T1 por PCR e transcrição reversa- PCR (RT-PCR) respectivamente. A resistência ao patógeno será, posteriormente, avaliada pela inoculação de isolado da raça 2 de Fol em plantas mantidas in vivo. Isolado da raça 2 de Fol induz a expressão diferenciada do gene de SolChi em raízes de tomateiro genótipo BRH, sugerindo uma possível participação no mecanismo de defesa do tomateiro contra o fusário, indicando um importante alvo para programas de melhoramento, em que também faz-se necessário o estudo constante da variabilidade genética do patógeno.