Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-01-28Bitstream added on 2014-06-13T19:56:40Z : No. of bitstreams: 1 iaochite_jc_me_rcla.pdf: 788226 bytes, checksum: 477939d964b19f7d33f61891b73d1eae (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho discute a ocorrência de brownfields no município de Americana - SP, decorrentes da crise da indústria têxtil, refletindo sobre as novas relações produtivas no período de Globalização. Analisa as novas formas espaciais geradas a partir da abertura comercial na década de 1990, onde a competitividade e a conseqüente reestruturação produtiva proporcionaram uma nova relação sócio-espacial. Avalia as possibilidades de revalorização dos brownfields e seus elos com o Desenvolvimento Local. / This work at aims discussing the occur of Brownfield in the Americana - SP Town, resulting from crisis of textile industry, reflecting about new productive relation in the Globalization period. Analyses the new forms spaces to produce with the commercial opening in the decade of 1990, whose the competitive and productive reestruturation to provide a new society-space relation. It values the possibilities of revitalize of Brownfield and your link whit the Local Development.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:05:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1629.pdf: 3149507 bytes, checksum: add0fd75e8f3b01b82bb7854587111ee (MD5) Previous issue date: 1999-01-02 / This work presents an integration environment between the standards MHEG-5 and SMIL. The MHEG-5 standard defines the syntax and the semantics of a group of objects which can be used for interoperability of multimedia applications among platforms with minimal resources. On the other hand, the SMIL standard provides synchronized media in the Web documents. In order to integrate the two standards two translators were developed. With this integration the multimedia applications can be presented either in a Web environment, using SMIL, or in authoring tools following the MHEG-5 standard. A rule database was developed to carry out the translations; which has as an objective to store the translating rules between the standards allowing for dynamism in the translation process. As a test database for the translations a Multimedia Object Server multimedia database was used in the AMOM project, where a connection module was developed between these database an the Web environment. This work has also involved the proposal of an environment which integrates the SOMm and the Web, whose title is MAW (Multimedia Application WebBuilder). / Este trabalho apresenta um ambiente de integração entre os padrões: MHEG-5 e SMIL. O padrão MHEG-5 define a sintaxe e a semântica de um conjunto de objetos que podem ser utilizados para interoperabilidade de aplicações multimídia entre plataformas com recursos mínimos. Já o padrão SMIL disponibiliza sincronismo de mídias nos documentos Web. Para integrar esses dois padrões foram desenvolvidos dois conversores. Com essa integração, as aplicações multimídia podem ser apresentadas tanto no ambiente Web, usando SMIL, como em ferramentas de autoria segundo o padrão MHEG-5. Para realizar as conversões foi desenvolvida uma base de regras, que tem como objetivo, armazenar as regras de conversões entre os padrões, possibilitando que haja dinamismo no processo de conversão. Como base de teste para as conversões, foi utilizado o banco de dados multimídia do Servidor de Objetos Multimídia (SOMm) do projeto AMOM, aonde foi desenvolvido um módulo de conexão entre esse banco de dados e o ambiente Web. Este trabalho também envolveu a proposta de um ambiente que integra, o SOMm e a Web, cujo título é MAW (Multimedia Application WebBuilder).

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissVF.pdf: 2770170 bytes, checksum: c70be91c57d8935f147f6ce4c5cce5cc (MD5) Previous issue date: 2005-05-31 / Universidade Federal de Minas Gerais / Along the time the applications usually need to evolve to catch up with and to assist to the new technologies that appear or get mature in the different computing areas, as it happens, for instance, with the programming languages. Starting from that demand, new researches are being accomplished to offer support to this development. This situation was improved with the ripening of Web technologies, once the need of the company nowadays is not always to convert an application totally, but to adapt these applications to accommodate these new technologies. The modernization of old applications, denominated legacy applications, is an arduous and a high cost task for the companies. Although there are several approaches that support this process in the literature, there is still a lack of resources that offer flexibility, take advantage of previous investments of the companies and get practical results. This way, the modernization process in the companies is almost always accomplished in a manual and "ad-hoc" form. Based on these ideas, this work presents AMGraA, an approach for gradual modernization of legacy applications, reconstructing them to attend to new technologies that came out along the time. This research project resulted of a partnership among GOES (Group of Software Engineering), a software development company, and FAPESP in support to the research and the development in the small companies. / Ao longo do tempo, as aplicações normalmente precisam evoluir para acompanhar e atender às novas tecnologias que surgem ou amadurecem nas diferentes áreas da computação, como ocorre, por exemplo, com as linguagens de programação. A partir dessa exigência, novas pesquisas estão sendo realizadas para oferecer suporte a essa evolução contínua. Esse quadro aprimorou-se com o amadurecimento das tecnologias para Web, uma vez que a necessidade da empresa hoje nem sempre é reconstruir totalmente uma aplicação, mas adaptá-la para acomodar essas novas tecnologias. A modernização de aplicações antigas, denominadas legadas, é uma tarefa árdua e de alto custo para as empresas. Embora existam na literatura várias abordagens que apóiam este processo, ainda há uma carência de recursos que ofereçam flexibilidade, aproveitem investimentos anteriores das empresas e consigam resultados práticos. Deste modo, o processo de modernização nas empresas é realizado quase sempre de forma manual e ad-hoc. Motivado por estas idéias, este trabalho apresenta a AMGraA, uma abordagem para a modernização gradativa de aplicações legadas, reconstruindo-as para atender às novas tecnologias que surgiram ao longo do tempo. Este projeto de pesquisa resultou de uma parceria entre o GOES (Grupo de Engenharia de Software), uma empresa de desenvolvimento de software, e a Fapesp, em apoio ao programa de desenvolvimento à pesquisa em pequenas empresas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissJLCM.pdf: 5103599 bytes, checksum: 48f7d264f7854ea0169a1d90633c79d2 (MD5) Previous issue date: 2004-08-26 / This project searches a boarding for construction and reuse of software components with implementation in Delphi. More and more computational resources are used in the solution of problems, aiming to automatize them, to reduce costs and increase the efficiency, performance, and security. To take care of this demand of more trustworthy softwares systems, more efficient and with lesser costs, new methods have been searched, being distinguished, currently, the Component-Based Development (CBD). The research studies different methods, available techniques and tools in literature as: CBD, Design Patterns, Software Components, Model Language (MDL), and ObjectPascal Language (Delphi), as control for the boarding. The mechanism utilized are: MVCASE tool, Draco-PUC Transformation System (TS), Software Engineer, and Delphi (RAD). This integrated mechanisms orient the Software Engineer on the Construct and on the Components Reuse for aplication development, and MVCASE tool automatize the tasks for components construct and reuse. The boarding is divided in two stages: Construct Components and Reuse Components. In a first stage, the software engineer initial from the problem domain knowledge and produces a models components of the domain, implemented in a language orientedcomponents, in the case the Delphi. As soon as they are instaled, the components are keep in the repository for reuse. In a subsequent stage the software engineer will find the components about the problem domain, that are imported from MVCASE tool repository, where they are show in tool browser. After the components are identified the applications are developed that reuse the framework components constructed. The components may be implemented in language components oriented like, C++, Java, and ObejctPascal (Delphi). In this project we are using the ObjectPascal language for the components implementation. / Este projeto desenvolve uma abordagem para construção e reutilização de componentes de software com implementação em Delphi. Cada vez mais se emprega recursos computacionais na solução de problemas, com o objetivo de automatizá-los, para diminuir custos e aumentar a eficiência, desempenho, e segurança. Para atender esta demanda de sistemas de softwares mais confiáveis, mais eficientes e com menores custos, novos métodos têm sido pesquisados, destacando-se, atualmente, o Desenvolvimento Baseado em Componentes (DBC). São utilizadas técnicas de DBC, Padrões de Projeto, Componentes de Software, a Linguagem de Modelagem MDL, e a Linguagem ObjectPascal (Delphi), como controle para a abordagem proposta. Os mecanismos utilizados são: ferramenta MVCASE, ST Draco-PUC, engenheiro de software e o ambiente Delphi. Esses mecanismos integrados orientam o engenheiro de software tanto na construção de componentes quanto da sua reutilização para criação das aplicações, e a ferramenta MVCASE automatiza parte das tarefas de construção e reutilização de componentes. A abordagem está dividida em duas etapas, Construir Componentes e Reutilizar Componentes. Numa primeira etapa, o engenheiro de software parte dos requisitos de um domínio do problema e produz o projeto dos componentes de um domínio e os componentes instalados no ambiente Delphi. Uma vez instalados, os componentes serão armazenados num repositório para posterior reutilização. Numa etapa subseqüente o engenheiro de software consulta os componentes de um domínio do problema, que são importados do repositório para a MVCASE, ficando disponíveis no browser da ferramenta. Após a identificação dos componentes necessários, constroem-se as aplicações que os reutilizam. Os componentes podem ser implementados em Linguagem Orientada a Componentes como C++, Java, e ObjectPascal (Delphi). Neste projeto adotou-se a Linguagem ObjectPascal para implementação dos componentes.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:10:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseSFS.pdf: 9606980 bytes, checksum: ef7a1582e9549c25d24fde172fb7855c (MD5) Previous issue date: 2004-07-20 / In the present work, the phase transformations in metallic materials processed by reactive milling were investigated. The as-milled samples were characterized by X-ray diffraction, transmission and scanning electron microscopy, X-ray dispersive energy spectrometry, differential scanning calorimetry and hydrogen content determination. The effect of the processing parameters on the structure, morphology, hydrogenation and contamination content were analyzed. The processed materials were a Ti33-Cr36-V31 alloy and the elemental powder mixtures Mg-50Ni and Nb-28Mg (compositions in at. %). For the Ti-Cr-V alloy, reactive milling induces the disproportionation of the original BCC solid solution phase resulting in a material composed by a mixture of vanadium hydride, hexagonal Laves phase and V-poor BCC solid solution. For the Mg-50Ni, it was observed the a higher energy mill aids the chemical and morphological homogeneity of the powders. It was also observed that initial hydrogen pressure and milling times affect both hydrogenation and phase formations. For higher times (96h) and pressures (2,0MPa of H2) of milling, it were observed evidences of a Mg-Ni-H phase disproportionation. Finally, the reactive milling of the Nb-28Mg mixture shows the catalytic effect of the Mg on the hydrogenation of this nanocomposite. After 48h milling, the Nb of the nanocomposite were almost all transformed in NbH2 and absorbed 95% of its theoretical hydrogen storage capacity. For pure Nb, processed by the same way, the phase formed was NbH and the metal absorbed only 33% of its theoretical hydrogen storage. / No presente trabalho, foram investigadas às transformações de fase em materiais metálicos processados por moagem reativa sob atmosfera de hidrogênio. As amostras, após processamento, foram analisadas por difração de raios-x, microscopia eletrônica de varredura e de transmissão, espectrometria de dispersão de energia de raios-x, calorimetria diferencial de varredura e medidas de teores de hidrogênio. A influência dos parâmetros de processamento na estrutura, morfologia e níveis de contaminação e hidrogenação dos pós processados por moagem reativa foi investigada. Os materiais processados foram a liga Ti33-Cr36-V31 e as misturas de pós elementares Mg-50Ni e Nb-28Mg (em % atômica). Como principal resultado na liga Ti-Cr-V, podemos destacar a observação de que a moagem reativa induziu à decomposição da estrutura original da liga, que era constituída por uma solução sólida com estrutura cúbica de corpo centrado, em hidreto de vanádio, fase de Laves hexagonal e solução sólida cúbica de corpo centrado (empobrecida em vanádio). No caso da moagem reativa do Mg-50Ni, observouse que um moinho de mais alta energia favorecia a obtenção de pós morfologicamente e quimicamente mais homogêneos. Observou-se, também, que o tempo de moagem e a pressão de hidrogênio nas cubas influenciava na quantidade de hidrogênio absorvida e nas fases formadas. Para maiores pressões (2,0MPa) e tempos de moagem (96h), foram observados indícios da decomposição de uma fase ternária Mg-Ni-H, sendo que a fase que se decompôs era provavelmente amorfa. Finalmente, na moagem reativa do Nb-28Mg constatou-se o efeito catalítico que o Mg exerceu na hidrogenação deste nanocompósito. Após 48h de moagem, observou-se que quase todo o Nb do nanocomposito havia se transformado em hidreto NbH2, sendo que o nanocompósito absorveu 95% da sua capacidade de armazenagem. Para o Nb puro, processado sob as mesmas condições, o hidreto NbH é formado e o metal absorveu apenas 33% de sua capacidade de armazenagem.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:11:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2081.pdf: 6174957 bytes, checksum: 676451974da9b2ef21785297b4686072 (MD5) Previous issue date: 2007-10-26 / One of the key points in steel development has been the refinement of the microstructure, however without change the chemical composition with addition of alloy elements. The refinement of the ferrite grain size leads simultaneously to an increase in strength and toughness. Ultrafine grains can be produced through thermomechanical controlled treatments, generated by dynamic strain-induced phase transformation (g®a), which also can be associated with others dynamic phenomena, such as dynamic recrystallization. In this work a low and a middle carbon steel were previously austenitized at 900ºC for 180 s and cooled at 1ºC/s to a given deformation temperature established in relation to their critical temperatures. The deformation were applied with a strain of 2,5 at a strain rate of 1 s-1. The behavior of the materials during the deformation was analyzed using the stress-strain curves obtained from torsion experiments. After deformation, the samples were air cooled and the final microstructure characterized by scanning electron microscopy. It was determined with success a route capable to produce ultrafine ferrite grains, where grain size of 1,6 μm were produced for the Cos Ar 60 steel and 1,3 μm for the SAE 1548 steel. / Um dos pontos chave no desenvolvimento de aços têm sido o refinamento da microestrutura, porém sem alterar a composição química com a adição de elementos de liga. O refinamento do tamanho de grão ferrítico conduz simultaneamente a um aumento de resistência e tenacidade. Grãos ultrafinos podem ser produzidos através de tratamentos termomecânicos controlados, gerados pela transformação dinâmica de fase (g®a) induzida por deformação, podendo estar ainda associado a outros fenômenos, como recristalização dinâmica. Neste trabalho um aço com baixo e outro com médio teor de carbono foram previamente austenititizados a 900ºC por 180 s, sendo em seguida resfriados a uma taxa de 1ºC/s e deformados por ensaios isotérmicos de torção em temperaturas estabelecidas segundo suas temperaturas críticas de transformação. As deformações foram aplicadas com uma quantidade de 2,5 e a uma taxa 1 s-1. O comportamento dos materiais durante a deformação foi analisado utilizando as curvas de escoamento plástico obtidas dos ensaios de torção. Após a deformação, as amostras foram resfriadas ao ar e a microestrutura final caracterizada por microscopia eletrônica de varredura. Foi determinada com sucesso uma rota capaz de produzir grãos ferríticos ultrafinos, onde grãos de 1,6 μm foram produzidos para o aço Cos Ar 60 e 1,3 μm para o aço SAE 1548. Um dos pontos chave no desenvolvimento de aços têm sido o refinamento da microestrutura, porém sem alterar a composição química com a adição de elementos de liga. O refinamento do tamanho de grão ferrítico conduz simultaneamente a um aumento de resistência e tenacidade. Grãos ultrafinos podem ser produzidos através de tratamentos termomecânicos controlados, gerados pela transformação dinâmica de fase (g®a) induzida por deformação, podendo estar ainda associado a outros fenômenos, como recristalização dinâmica. Neste trabalho um aço com baixo e outro com médio teor de carbono foram previamente austenititizados a 900ºC por 180 s, sendo em seguida resfriados a uma taxa de 1ºC/s e deformados por ensaios isotérmicos de torção em temperaturas estabelecidas segundo suas temperaturas críticas de transformação. As deformações foram aplicadas com uma quantidade de 2,5 e a uma taxa 1 s-1. O comportamento dos materiais durante a deformação foi analisado utilizando as curvas de escoamento plástico obtidas dos ensaios de torção. Após a deformação, as amostras foram resfriadas ao ar e a microestrutura final caracterizada por microscopia eletrônica de varredura. Foi determinada com sucesso uma rota capaz de produzir grãos ferríticos ultrafinos, onde grãos de 1,6 μm foram produzidos para o aço Cos Ar 60 e 1,3 μm para o aço SAE 1548.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:31:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3192.pdf: 3896666 bytes, checksum: 9e7ce3de8ef146dad46027cfc0847c63 (MD5) Previous issue date: 2010-07-12 / Universidade Federal de Minas Gerais / The organism Planktothrix agardhii belongs to one of the two most abundant genera in the world among the phytoplankton (the other is Microcystis sp.). Nevertheless, the genus Planktothrix is potentially toxic, producing microcystins and anotoxinas, which makes relevant knowledge of the biology of species that produce large biomass, as the case of P. agardhii, and the relationships with the communities that coexist with them. Knowledge of the composition of EPS was fundamental to the understanding of possible correlation with bacteria based on the use of EPS as a substrate. The EPS excreted by P. agardhii grown in axenic culture is a heteropolymer rich in glucose (17.04%), whose composition also have the monosaccharides: glucuronic acid 13.78%, 12.65% of fucose, from 10.95 n-acetyl galactosamine, 10.48% n-acetyl glucosamine, 7.78% of rhamnose, galactose 7.04%, 4.89% arabinose and 15.39% from other types of sugars. EPS is composed of only one fraction slightly acidic. The degradation of EPS by the bacteria in natural population of Barra Bonita reservoir started at 12 hours and was totally consumed on the 31st day of exposure. The degradation of the polysaccharide followed by gas chromatography showed a quick decrease in the amount of glucose followed by an increase in the same after the 12th day. As for glucuronic acid occurs primarily an increase in concentration, followed by a sharp decline after the 12th day. The other monosaccharides present degradation to a minimum concentration or were completely exhausted. / O organismo Planktothrix agardhii é uma das espécies pertencentes a um dos dois gêneros mais abundantes no mundo inteiro entre o fitoplancton (o outro é Microcystis sp.). Não obstante, o gênero Planktothrix é potencialmente tóxico, produtor de microcistinas e anotoxinas, o que torna relevante o conhecimento da biologia de espécies produtoras de grande biomassa, como é o caso de P. agardhii, e as relações que possa ter com as comunidades que coabitam com elas. O conhecimento da composição dos EPS (polissacarídeo extracelular) foi fundamental para o entendimento das possíveis relações com bactérias baseadas na utilização dos EPS como substrato. EPS excretado por Planktothrix agardhii cultivada em cultura axênica é um heteropolímero rico em glicose (17%), cuja composição também apresenta os seguintes monossacarídeos: 14% de ácido glicurônico, 13% de fucose, 11% de ácido siálico, 11% de N-acetil galactosamina, 10% de N-acetil glicosamina, 8% de ramnose, 7% de galactose, 5% de arabinose e 4% de outros tipos de monossacarídeos não identificados. O EPS é composto por apenas uma única fração ligeiramente ácida. A degradação do EPS pelas bactérias da população natural do reservatório de Barra Bonita iniciou-se a partir das 12 horas sendo no 31º dia de exposição totalmente consumido. A degradação do polissacarídeo acompanhada por cromatografia gasosa mostrou rápida diminuição na quantidade de glicose seguida de um aumento da mesma, após o 12 º dia. Já para ácido glicurônico primeiramente ocorre um aumento na concentração, seguido de uma diminuição acentuada após o 12º dia. Os demais monossacarídeos apresentam degradação até uma concentração mínima ou foram completamente exauridos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This research aims to investigate the dynamic and the process of differenciation that happened in the agrarian space of the Developmental Regional Council Missões. The region of study is located in the northwest of Rio Grande do Sul State and it is caracterized specially by its eminently agricultural features and the predominance of the familiar agriculture. Methodologically, we used the method of study/analysis of agrarian spaces (territory). It is known as Agrarian Systems Diagnostic Analysis and we also applied the multivariated analysis to complement this research. This research identified two differents agrarian systems historically constructed in the study´s space and the conformation of diferents homogeneous zones based on the criteria of analysis. Using criteria of natural conditions of the environment, it was possible to identify four homogeneous zones. On the other hand, when considering socioeconomical aspects, we identified five homogenous zones. In relation to the differentiation between agriculturists, we established a typology of rural establishment. In this context, we identified categories such as retired, miniagrarian, familiars and employer. In relation to the types of systems of production practiced by the agriculturist, we identified between the employer establishments the predonimant dynamic that is specialized in the grain cultures. The cattle culture have been losing space and importance in those establishments. In the familiar establishment, the milk-cattle culture is the main activity prepoderant. We also can identified that in the system area of agrarian field, it is predominant the employer agriculture. In this context, we have homegenous zones where the cattles still expressive and other in which the specialization of grain activities is dominant. Yet, in the agrarian system there is predonimance of familiar agriculture and small establishments. Generally, even though the non-linear transformation and the different ways of the homogenous zones identified, we expect that, in a medium time, the study area will present a diversified productive matrix. Futhermore, we believe that those results will not reflect in the production units that are following the inverse way, because they will probably become extremely specialized. / O presente estudo tem por objetivo investigar a dinâmica e o processo de diferenciação ocorrido no espaço agrário de abrangência do Conselho Regional de Desenvolvimento Missões. A região em estudo localiza-se ao noroeste do estado do Rio Grande do Sul e caracteriza-se especialmente por seu caráter eminentemente agrícola e a predominância da agricultura familiar. Como procedimento metodológico geral, utiliza-se do método de estudo/análise de espaços agrários, conhecido como Análise Diagnóstico de Sistemas Agrários, e de modo complementar, emprega-se a Análise Multivariada. A pesquisa identificou dois distintos sistemas agrários historicamente constituídos no espaço de estudo e a conformação de diferentes zonas homogêneas, conforme critérios de análise. Utilizando critérios de condições naturais do meio, foi possível a identificação de quatro zonas homogêneas, já quando levado em consideração os aspectos socioeconômicos são identificadas cinco zonas homogêneas. Em relação à diferenciação entre agricultores, estabelecesse inicialmente uma tipologia dos estabelecimentos rurais, sendo identificadas principalmente as categorias de aposentados, minifundiários, familiares e patronais. Quanto aos tipos de sistemas de produção praticados pelos agricultores, identifica-se que entre os estabelecimentos patronais a dinâmica predominante é de especialização nas culturas de grãos, sendo que a pecuária de corte vem perdendo seu espaço e importância nestes estabelecimentos, já nos estabelecimentos familiares a pecuária de leite é a atividade preponderante. Identifica-se ainda que na área do sistema agrário de campo, há predominância da agricultura patronal, tendo uma zona onde a pecuária de corte ainda é expressiva e outra onde a especialização nas atividades de grãos é preponderante, e na área do sistema agrário de mata a predominância de agricultores familiares e pequenos estabelecimentos. De modo geral, apesar das transformações não lineares e as diferentes trajetórias das zonas homogêneas identificadas, as perspectivas são de que a região em estudo, em médio prazo, venha a apresentar uma matriz produtiva diversificada, o que possivelmente não se refletirá nas unidades de produção, que se apresentam no caminho inverso, ou seja, tendem a se tornarem altamente especializadas.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1828.pdf: 1894013 bytes, checksum: 47084c725e570d01b5c72cabdaeed953 (MD5) Previous issue date: 2008-03-28 / Financiadora de Estudos e Projetos / The Gram-positive genus Bacillus is of great biotechnological importance. Their ability to secrete enzymes efficiently during fermentation is exploited for the production of extracellular enzymes such as penicillin G acylase (PGA). Bacillus megaterium has proven to be an excellent alternative host to Escherichia coli for heterologous gene expression. Unlike other bacilli strains, proteolytic degradation by alkaline proteases is avoided. In addition, there are no endotoxins found in the cell wall. As a result, protein yields are exceptionally high even if inexpensive substrates are used. In this work, the growth conditions of B. megaterium ATCC 14945 and its preparation for transformation by electroporation with plasmid DNA had been studied. Vegetative cells and protoplasts of B. megaterium had been used. Plasmid DNAs (pET- 32, pETduet-1, pBR322 and pHis 1522) were prepared from E. coli strains DH5α and BL21. Bacteria cultures were growth in Luria-Bertani (LB) broth, Nutrient or LBS (LB containing 0,5 M sorbitol) medium. It had been used the following Electroporation Media: 25% PEG 6000/0.1 M Sorbitol (Moro et al., 1995), 0.625 M Sacarose/1.0 mM MgCl2, pH 5.5 (Dunny et al., 1991), HEPES 10 mM, pH 7.0 (Belliveau & Trevors, 1989) and SMG (0.5 M sorbitol, 0.5 M manitol and 10% glicerol) (Xue et al., 1999). As Recovery Media after electric pulses, LB and LBSM (LB containing 0,5 M sorbitol and 0.38 M manitol) had been used. Extractions of genomic DNA of B. megaterium and plasmid DNA of E. coli had been carried through. The Colonies Forming Units method (CFU) was applied in order to analyze the B. megaterium viability before and after treatment with Electroporation Media. The biomass produced (Cx) was analyzed spectrophotometrically and by the Dry Mass method. The morphology and pureness of B. megaterium cultures had been studied by optic microscopy preparations and B. megaterium growth in liquid selective media. The best electric conditions for electroporation had been established by preliminary tests. B. megaterium transformations was performed according to protocols described by Moro et al. (1995), Dunny et al. (1991), Belliveau & Trevors (1989), Xue et al. (1999) and Romero et al. (2006). The B. megaterium growth curves in LB, Nutrient and LBS had allowed the identification of growth phases of cultures and the respective electric conditions adjustment for electroporation protocols. The cellular concentration (dry mass) found for 16 hours of culture in Nutrient, LB and LBS medium had been 1.900 g/L, 2.649 g/L and 2.320 g/L, respectively. The viable cells concentration analyses (UFC) had allowed the adjustment of plasmid DNA concentrations employed and transformation efficiencies calculation. It had been found the following cellular densities of B. megaterium grown in Nutrient, LB and LBS medium respectively after PEG/Sorbitol Electroporation Medium treatment: 8.8 x 108; 9,2 x 108 and 2.3 x 109 UFC/mL. For Sacarose/MgCl2, it had been found 2,8 x 107; 4.6 x 108 and 3.7 x 108 UFC/mL and for HEPES 5.6 x 108; 2.93 x 109 and 1.86 x 108. For SMG, it had been found 1,7 x 109; 9.4 x 109 and 1.1 x 1010 UFC/mL for Nutrient, LB and LBS medium, respectively. / Bacillus são bactérias Gram-positivas de grande importância biotecnológica. Sua habilidade para secretar enzimas eficientemente durante a fermentação é utilizada para a produção de enzimas extracelulares como penicilina G acilase (PGA). Bacillus megaterium revelou-se excelente hospedeiro alternativo à Escherichia coli para a expressão de genes heterólogos. Diferentemente de outras linhagens de bacilos, a degradação proteolítica por alcalino-proteases não é verificada. Além disso, não são encontradas endotoxinas em sua parede celular. Consequentemente, os rendimentos de produção de proteínas são excepcionalmente elevados, ainda que substratos econômicos sejam utilizados. Neste trabalho, foram estudadas as condições de crescimento de células de B. megaterium e sua preparação para transformação por eletroporação com DNA plasmidial. Foram utilizadas células vegetativas e protoplastos de B. megaterium ATCC 14945 e as linhagens de E. coli DH5α e BL21 (para amplificação e manutenção dos plasmídeos pET-32, pETduet-1, pBR322 e pHis 1522). Os meios de crescimento empregados foram Nutriente, Luria-Bertani (LB) e LBS (LB contendo 0,5 M sorbitol). Para as eletroporações, foram utilizados os Meios 25% PEG 6000/0,1 M Sorbitol (Moro et al., 1995), 0,625 M Sacarose/1,0 mM MgCl2, pH 5,5 (Dunny et al., 1991), HEPES 10 mM, pH 7,0 (Belliveau & Trevors, 1989) e SMG (0,5 M de sorbitol, 0,5 M de manitol e 10% de glicerol) (Xue et al., 1999). Como Meios de Recuperação pós-pulso elétrico, foram utilizados os Meios LB e LBSM (LB contendo 0,5 M de sorbitol e 0,38 M de manitol). Foram realizadas extrações de DNA genômico de B. megaterium e de DNA plasmidial de E. coli; ensaios de viabilidade das células de B. megaterium antes e após tratamento com os diferentes Meios de Eletroporação, pelo Método de Contagem de Unidades Formadoras de Colônias (UFC); quantificação de biomassa produzida (Cx) nos cultivos de B. megaterium nos diferentes Meios, pelo Método da Massa Seca, e acompanhamento por leitura espectrofotométrica (DO 600 nm); análise morfológica e de pureza dos cultivos por meio de preparações permanentes e a fresco e do crescimento de B. megaterium selvagem em diferentes meios seletivos; testes preliminares de eletroporação para estabelecimento das melhores condições elétricas; ensaios de eletroporação segundo os protocolos de Moro et al. (1995), Dunny et al. (1991), Belliveau & Trevors (1989), Xue et al. (1999) e Romero et al. (2006). Foram obtidas as curvas de crescimento de B. megaterium para os Meios de Cultivo Nutriente, LB e LBS. Tais curvas permitiram a identificação da fase de crescimento das culturas e o respectivo ajuste das condições elétricas para os protocolos de eletroporação. As medidas de concentração celular (massa seca) encontradas para 16 horas de cultivo, para culturas crescidas em Meio Nutriente, LB e LBS foram 1,900 g/L, 2,649 g/L e 2,320 g/L, respectivamente. As análises de concentração de células viáveis (UFC) forneceram a densidade celular após tratamento com os diferentes Meios de Eletroporação, de modo a permitir o ajuste das concentrações de DNA plasmidial a serem empregadas e o cálculo das eficiências de transformação. Após o tratamento de células de B. megaterium, crescidas em Meio Nutriente, LB e LBS, com o Meio de Eletroporação PEG/Sorbitol, foram obtidas, respectivamente: 8,8 x 108; 9,2 x 108 e 2,3 x 109 UFC/mL; para o Meio de Eletroporação Sacarose/MgCl2, 2,8 x 107; 4,6 x 108 e 3,7 x 108 UFC/mL; para o Meio de Eletroporação HEPES, 5,6 x 108; 2,93 x 109 e 1,86 x 108; para o Meio de Eletroporação SMG, 1,7 x 109; 9,4 x 109 e 1,1 x 1010 UFC/mL, respectivamente para os Meios de Crescimento Nutriente, LB e LBS.

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