Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-21T14:35:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Mário S. M. Fonseca.pdf: 692936 bytes, checksum: 587d583c80cc514d64db4c7a31200b6e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-21T14:36:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Mário S. M. Fonseca.pdf: 692936 bytes, checksum: 587d583c80cc514d64db4c7a31200b6e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-21T14:36:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Mário S. M. Fonseca.pdf: 692936 bytes, checksum: 587d583c80cc514d64db4c7a31200b6e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-21T14:36:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Mário S. M. Fonseca.pdf: 692936 bytes, checksum: 587d583c80cc514d64db4c7a31200b6e (MD5) Previous issue date: 2017-04-07 / Tuberculosis (TB) is still one of the biggest infectious causes of mortality and morbidity in adults in the world. The Brazil is among the 22 countries with the highest number of cases, and the national average of around 30 cases per 100,000 habitants. The city of Manaus presents incidence above 90 cases/100,000. The pleural TB is considered the most common extrapulmonary form in adults. The diagnosis requires invasive features, such as the removal of fragments of pleura, through percutaneous needle biopsy of Cope or videopleuroscopy in addition, pleural fluid culture in conventional medium which slows the diagnostic confirmation. Molecular Diagnostic rapid test of tuberculosis (TRM-TB – Cepheid’s Xpert® MTB/RIF)) is an automated method of polymerase chain reaction (PCR), enabling early diagnosis of TB and releases the result in 2 hours, plus, determine the sensitivity to rifampicin being validated its use for sputum analysis. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of the TRM-TB for the diagnosis of pleural TB through analysis of pleural fluid. We included 17 patients with pleural effusion. 10 males and 7 females. The average age was 44 years. All performed thoracentesis and biopsy of pleura being sent samples to the TRM-TB, solid medium culture and histopathology. Of these, 11 confirmed diagnosis of TB through clinical, histopathological, molecular or microbiological tools. The TRM-TB liquid presented sensitivity of 9% (1/11). The liquid culture showed no bacterial growth in any sample. The TRM-TB pleural fragment worked not detectable in all samples. The biopsy of pleura presented diagnostic accuracy of 76%, being the best performing method for diagnosis. It is concluded that the TRM-TB for the diagnosis of pleural TB through analysis of pleural fluid has low sensitivity and based on these facts, it is not recommended to be used as the initial method of investigation of suspected cases of tuberculous pleural effusion. / A tuberculose (TB) ainda é uma das maiores causas infecciosas de mortalidade e morbidade em adultos no mundo. O Brasil se encontra entre os 22 países com maior número de casos, sendo a média nacional de incidência em torno de 30 casos por 100.000 habitantes. A cidade de Manaus apresenta incidência acima de 90 casos/100.000 habitantes. A TB pleural é considerada a forma extrapulmonar mais frequente em adultos. O seu diagnóstico necessita de recursos invasivos, tais como a retirada de fragmentos de pleura, por meio de biópsia percutânea com agulha de Cope ou por videopleuroscopia, além da cultura do líquido pleural em meio convencional, o que retarda a confirmação diagnóstica. O Teste Rápido Molecular para diagnóstico de Tuberculose (TRM-TB – Cepheid Xpert® MTB/RIF) é um método automatizado de reação de cadeia de polimerase (PCR), permitindo o diagnóstico precoce de TB, pois libera o resultado em 2 horas, além de determinar a sensibilidade à rifampicina, sendo validado o seu uso para análise de escarro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a efetividade do TRM-TB para o diagnóstico da TB pleural por meio da análise do líquido pleural. Foram incluídos 17 pacientes com derrame pleural, 10 do sexo masculino e 7 do feminino. A idade média foi de 44 anos. Todos realizaram toracocentese e biópsia de pleura, sendo enviadas amostras para o TRM-TB, cultura em meio sólido e histopatológico. Destes, 11 confirmaram diagnóstico de TB por meio de parâmetros clínicos, histopatológicos, moleculares ou microbiológicos. O TRM-TB do líquido apresentou sensibilidade de 9% (1/11). Não houve crescimento bacteriano em nenhuma amostra de líquido em cultura. O TRM-TB do fragmento pleural deu resultado não detectável em todas as amostras. A biópsia de pleura apresentou acurácia diagnóstica de 76%, sendo o método com melhor desempenho para o diagnóstico. Conclui-se que o TRM-TB para o diagnóstico de TB pleural, por meio da análise do líquido pleural, tem baixa sensibilidade e, com base nestes dados, não se recomenda a sua utilização como método inicial de investigação de casos suspeitos de derrame pleural tuberculoso.

O presente estudo tem como principal objetivo o emprego da reação em cadeia da polimerase (PCR) na elucidação da etiologia dos derrames pleurais dos pacientes com suspeita de pleurite tuberculosa, comparando-o com as técnicas diagnósticas disponíveis na atualidade. O diagnóstico da tuberculose pleural costuma ser feito por meio dos dados clínicos e radiológicos, teste tuberculínico, exames bioquímicos, microbiológicos, e citológicos do líquido pleural e da histopatologia de fragmento de pleura obtido por punção-biópsia. Ainda assim estes métodos apresentam muitas limitações, dentre as quais a baixa sensibilidade e o longo período necessário para a confirmação do diagnóstico. Estudamos 58 amostras de 45 pacientes. Destes, 16 pacientes tiveram diagnóstico clínico ou laboratorial confirmado de tuberculose, totalizando 22 amostras. Consideramos como caso de tuberculose todos os pacientes com baciloscopia, cultura ou histopatológico positivos no líquido pleural ou outro material biológico, ou que tenham apresentado melhora clínica após a introdução do tratamento empírico. Das 22 amostras com o diagnóstico de tuberculose, a PCR foi positiva em 6 amostras de 6 pacientes. A reação foi positiva em 1 amostra de um paciente em que o diagnóstico de tuberculose foi descartado. A sensibilidade, especificidade e os valores preditivo positivo e negativo nos 16 pacientes com diagnóstico de tuberculose foram 31,3%, 96,6%, 83% e 71% respectivamente. A PCR, apesar de ter apresentado uma baixa sensibilidade, demonstrou uma especificidade ótima em relação aos métodos convencionais. Está técnica pode ter utilidade como método complementar às técnicas disponíveis, na tentativa de obter um diagnóstico mais precoce e preciso nos casos de tuberculose pleural. / The present study evaluates the use of the polimerase chain reaction (PCR) to confirm the etiology of pleural effusions in patients with suspicion of pleural tuberculosis, comparing it to the current available techniques. The diagnosis of pleural tuberculosis is made through the combination of clinical data, radiologic findings, biochemical, microbiological and cytological examination of the pleural fluid and by the pathology of pleural fragment obtained by biopsy. However, these methods present a lot of limitations, including a low sensitivity and a long incubation period to confirm the diagnosis by culture. We studied 58 samples of 45 patients with pleural effusion. Of these, 16 patients had clinical diagnosis or confirmed by laboratory, in a total of 22 samples. We defined as case of tuberculosis all patients with culture or positive pathology in the fluid pleural or other biological material and those with clinical improvement after empirical treatment. Of the 22 samples with the tuberculosis diagnosis PCR was positive in 6 samples of 6 patients. The reaction was positive in a sample of a patient whose diagnosis of tuberculosis was later discarded. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value in the 16 patients with tuberculosis diagnosis were 31,3%, 96,6%, 83% and 71% respectively. In spite of having presented a low sensitivity, PCR specificity was greater than the conventional methods. This technique can be useful as an additional method to the available techniques, in the attempt of obtaining a more precocious and precise diagnosis in the cases of pleural tuberculosis.

Os métodos convencionais para o diagnóstico da tuberculose (TB) pleural possuem várias limitações, assim métodos mais sensíveis e específicos são necessários. O objetivo deste estudo foi avaliar uma metodologia de hibridização em microplaca e uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real para a detecção de DNA de Mycobacterium tuberculosis em amostras de líquido pleural, fragmento de pleura e soro. Adicionalmente, foi avaliada a utilidade da PCR em tempo real em paralelo com a cultura do líquido pleural para o diagnóstico de TB pleural. Foram avaliados 161 pacientes com derrame pleural e submetidos à toracocentese e biópsia pleural. O padrão-ouro para definição de um caso de TB pleural baseou-se na combinação de baciloscopia, cultura, exame histopatológico e critérios clínicos. Cento e sete dos 161 pacientes com derrame pleural receberam diagnóstico de TB pleural. Os resultados da metodologia de hibridização em microplaca não foram satisfatórios, assim foi desenvolvida uma técnica de PCR em tempo real. Nas amostras de líquido pleural, a PCR em tempo real mostrou uma sensibilidade de 46% (IC 95%, 36%-56%) com especificidade de 100%, enquanto a cultura obteve uma sensibilidade de 29% (IC 95%, 20%- 38%). A PCR em tempo real realizada em associação com a cultura no líquido pleural apresentou uma sensibilidade de 60% (IC 95%, 50%-70%). Para as amostras de fragmento pleural, a PCR em tempo real mostrou uma sensibilidade de 42% (IC 95%, 26%-59%) e especificidade de 100%, para este tipo de amostra o exame histopatológico apresentou a maior sensibilidade (90% - IC 95%, 84%- 96%). Nas amostras de soro a PCR em tempo real foi positiva em apenas dois pacientes, os quais também apresentaram resultado positivo nos outros tipos de amostras. Estes resultados indicam que a PCR em tempo real realizada no líquido pleural pode ser uma forma útil para obter um diagnóstico de TB pleural mais rápido, específico e com um procedimento menos invasivo para coleta das amostras. / Conventional tests for pleural tuberculosis (TB) have several limitations and more sensitive and specific methods are needed. The aim of this study was to evaluate microwell hybridization and real-time PCR (polimerase chain reaction) for detection of Mycobacterium tuberculosis DNA in pleural fluid, pleural tissue and serum. Additionally, the utility of real-time PCR in parallel with culture in pleural fluid for the diagnosis of pleural TB was assessed. One hundred sixty one patients with a pleural effusion submitted to a thoracentesis and pleural biopsy were evaluated. The gold-standard for case definition of pleural TB were the combination of acid-fast bacilli, culture, histopathologic examination and clinical parameters. One hundred seven of the 161 patients with pleural effusion received diagnosis of pleural TB. Results of microwell hybridization were not satisfactory, thus we developed a real-time PCR assay. In pleural fluid specimens, real-time PCR showed a sensitivity of 46% (CI 95%, 36%-56%) with specificity of 100%, while the sensitivity of culture was 29% (CI 95%, 20%-38%). The combination of real time PCR and culture in pleural fluid showed a sensitivity of 60% (CI 95%, 50%-70%). For the pleural tissue, real-time PCR showed a sensitivity of 42% (CI 95%, 26%-59%) with specificity of 100%, for this specimen histopathologic examination had the highest sensitivity (90% - CI 95%, 84%-96%). In the serum real-time PCR was positive in only two patients, which also had positive results in other specimens. Our results indicate that the real-time PCR is a useful approach to achieve a more rapid and specific diagnosis for pleural TB with a less invasive procedure for specimen collection.

Os métodos convencionais para o diagnóstico da tuberculose (TB) pleural possuem várias limitações, assim métodos mais sensíveis e específicos são necessários. O objetivo deste estudo foi avaliar uma metodologia de hibridização em microplaca e uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real para a detecção de DNA de Mycobacterium tuberculosis em amostras de líquido pleural, fragmento de pleura e soro. Adicionalmente, foi avaliada a utilidade da PCR em tempo real em paralelo com a cultura do líquido pleural para o diagnóstico de TB pleural. Foram avaliados 161 pacientes com derrame pleural e submetidos à toracocentese e biópsia pleural. O padrão-ouro para definição de um caso de TB pleural baseou-se na combinação de baciloscopia, cultura, exame histopatológico e critérios clínicos. Cento e sete dos 161 pacientes com derrame pleural receberam diagnóstico de TB pleural. Os resultados da metodologia de hibridização em microplaca não foram satisfatórios, assim foi desenvolvida uma técnica de PCR em tempo real. Nas amostras de líquido pleural, a PCR em tempo real mostrou uma sensibilidade de 46% (IC 95%, 36%-56%) com especificidade de 100%, enquanto a cultura obteve uma sensibilidade de 29% (IC 95%, 20%- 38%). A PCR em tempo real realizada em associação com a cultura no líquido pleural apresentou uma sensibilidade de 60% (IC 95%, 50%-70%). Para as amostras de fragmento pleural, a PCR em tempo real mostrou uma sensibilidade de 42% (IC 95%, 26%-59%) e especificidade de 100%, para este tipo de amostra o exame histopatológico apresentou a maior sensibilidade (90% - IC 95%, 84%- 96%). Nas amostras de soro a PCR em tempo real foi positiva em apenas dois pacientes, os quais também apresentaram resultado positivo nos outros tipos de amostras. Estes resultados indicam que a PCR em tempo real realizada no líquido pleural pode ser uma forma útil para obter um diagnóstico de TB pleural mais rápido, específico e com um procedimento menos invasivo para coleta das amostras. / Conventional tests for pleural tuberculosis (TB) have several limitations and more sensitive and specific methods are needed. The aim of this study was to evaluate microwell hybridization and real-time PCR (polimerase chain reaction) for detection of Mycobacterium tuberculosis DNA in pleural fluid, pleural tissue and serum. Additionally, the utility of real-time PCR in parallel with culture in pleural fluid for the diagnosis of pleural TB was assessed. One hundred sixty one patients with a pleural effusion submitted to a thoracentesis and pleural biopsy were evaluated. The gold-standard for case definition of pleural TB were the combination of acid-fast bacilli, culture, histopathologic examination and clinical parameters. One hundred seven of the 161 patients with pleural effusion received diagnosis of pleural TB. Results of microwell hybridization were not satisfactory, thus we developed a real-time PCR assay. In pleural fluid specimens, real-time PCR showed a sensitivity of 46% (CI 95%, 36%-56%) with specificity of 100%, while the sensitivity of culture was 29% (CI 95%, 20%-38%). The combination of real time PCR and culture in pleural fluid showed a sensitivity of 60% (CI 95%, 50%-70%). For the pleural tissue, real-time PCR showed a sensitivity of 42% (CI 95%, 26%-59%) with specificity of 100%, for this specimen histopathologic examination had the highest sensitivity (90% - CI 95%, 84%-96%). In the serum real-time PCR was positive in only two patients, which also had positive results in other specimens. Our results indicate that the real-time PCR is a useful approach to achieve a more rapid and specific diagnosis for pleural TB with a less invasive procedure for specimen collection.

Os métodos convencionais para o diagnóstico da tuberculose (TB) pleural possuem várias limitações, assim métodos mais sensíveis e específicos são necessários. O objetivo deste estudo foi avaliar uma metodologia de hibridização em microplaca e uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real para a detecção de DNA de Mycobacterium tuberculosis em amostras de líquido pleural, fragmento de pleura e soro. Adicionalmente, foi avaliada a utilidade da PCR em tempo real em paralelo com a cultura do líquido pleural para o diagnóstico de TB pleural. Foram avaliados 161 pacientes com derrame pleural e submetidos à toracocentese e biópsia pleural. O padrão-ouro para definição de um caso de TB pleural baseou-se na combinação de baciloscopia, cultura, exame histopatológico e critérios clínicos. Cento e sete dos 161 pacientes com derrame pleural receberam diagnóstico de TB pleural. Os resultados da metodologia de hibridização em microplaca não foram satisfatórios, assim foi desenvolvida uma técnica de PCR em tempo real. Nas amostras de líquido pleural, a PCR em tempo real mostrou uma sensibilidade de 46% (IC 95%, 36%-56%) com especificidade de 100%, enquanto a cultura obteve uma sensibilidade de 29% (IC 95%, 20%- 38%). A PCR em tempo real realizada em associação com a cultura no líquido pleural apresentou uma sensibilidade de 60% (IC 95%, 50%-70%). Para as amostras de fragmento pleural, a PCR em tempo real mostrou uma sensibilidade de 42% (IC 95%, 26%-59%) e especificidade de 100%, para este tipo de amostra o exame histopatológico apresentou a maior sensibilidade (90% - IC 95%, 84%- 96%). Nas amostras de soro a PCR em tempo real foi positiva em apenas dois pacientes, os quais também apresentaram resultado positivo nos outros tipos de amostras. Estes resultados indicam que a PCR em tempo real realizada no líquido pleural pode ser uma forma útil para obter um diagnóstico de TB pleural mais rápido, específico e com um procedimento menos invasivo para coleta das amostras. / Conventional tests for pleural tuberculosis (TB) have several limitations and more sensitive and specific methods are needed. The aim of this study was to evaluate microwell hybridization and real-time PCR (polimerase chain reaction) for detection of Mycobacterium tuberculosis DNA in pleural fluid, pleural tissue and serum. Additionally, the utility of real-time PCR in parallel with culture in pleural fluid for the diagnosis of pleural TB was assessed. One hundred sixty one patients with a pleural effusion submitted to a thoracentesis and pleural biopsy were evaluated. The gold-standard for case definition of pleural TB were the combination of acid-fast bacilli, culture, histopathologic examination and clinical parameters. One hundred seven of the 161 patients with pleural effusion received diagnosis of pleural TB. Results of microwell hybridization were not satisfactory, thus we developed a real-time PCR assay. In pleural fluid specimens, real-time PCR showed a sensitivity of 46% (CI 95%, 36%-56%) with specificity of 100%, while the sensitivity of culture was 29% (CI 95%, 20%-38%). The combination of real time PCR and culture in pleural fluid showed a sensitivity of 60% (CI 95%, 50%-70%). For the pleural tissue, real-time PCR showed a sensitivity of 42% (CI 95%, 26%-59%) with specificity of 100%, for this specimen histopathologic examination had the highest sensitivity (90% - CI 95%, 84%-96%). In the serum real-time PCR was positive in only two patients, which also had positive results in other specimens. Our results indicate that the real-time PCR is a useful approach to achieve a more rapid and specific diagnosis for pleural TB with a less invasive procedure for specimen collection.

O presente estudo tem como principal objetivo o emprego da reação em cadeia da polimerase (PCR) na elucidação da etiologia dos derrames pleurais dos pacientes com suspeita de pleurite tuberculosa, comparando-o com as técnicas diagnósticas disponíveis na atualidade. O diagnóstico da tuberculose pleural costuma ser feito por meio dos dados clínicos e radiológicos, teste tuberculínico, exames bioquímicos, microbiológicos, e citológicos do líquido pleural e da histopatologia de fragmento de pleura obtido por punção-biópsia. Ainda assim estes métodos apresentam muitas limitações, dentre as quais a baixa sensibilidade e o longo período necessário para a confirmação do diagnóstico. Estudamos 58 amostras de 45 pacientes. Destes, 16 pacientes tiveram diagnóstico clínico ou laboratorial confirmado de tuberculose, totalizando 22 amostras. Consideramos como caso de tuberculose todos os pacientes com baciloscopia, cultura ou histopatológico positivos no líquido pleural ou outro material biológico, ou que tenham apresentado melhora clínica após a introdução do tratamento empírico. Das 22 amostras com o diagnóstico de tuberculose, a PCR foi positiva em 6 amostras de 6 pacientes. A reação foi positiva em 1 amostra de um paciente em que o diagnóstico de tuberculose foi descartado. A sensibilidade, especificidade e os valores preditivo positivo e negativo nos 16 pacientes com diagnóstico de tuberculose foram 31,3%, 96,6%, 83% e 71% respectivamente. A PCR, apesar de ter apresentado uma baixa sensibilidade, demonstrou uma especificidade ótima em relação aos métodos convencionais. Está técnica pode ter utilidade como método complementar às técnicas disponíveis, na tentativa de obter um diagnóstico mais precoce e preciso nos casos de tuberculose pleural. / The present study evaluates the use of the polimerase chain reaction (PCR) to confirm the etiology of pleural effusions in patients with suspicion of pleural tuberculosis, comparing it to the current available techniques. The diagnosis of pleural tuberculosis is made through the combination of clinical data, radiologic findings, biochemical, microbiological and cytological examination of the pleural fluid and by the pathology of pleural fragment obtained by biopsy. However, these methods present a lot of limitations, including a low sensitivity and a long incubation period to confirm the diagnosis by culture. We studied 58 samples of 45 patients with pleural effusion. Of these, 16 patients had clinical diagnosis or confirmed by laboratory, in a total of 22 samples. We defined as case of tuberculosis all patients with culture or positive pathology in the fluid pleural or other biological material and those with clinical improvement after empirical treatment. Of the 22 samples with the tuberculosis diagnosis PCR was positive in 6 samples of 6 patients. The reaction was positive in a sample of a patient whose diagnosis of tuberculosis was later discarded. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value in the 16 patients with tuberculosis diagnosis were 31,3%, 96,6%, 83% and 71% respectively. In spite of having presented a low sensitivity, PCR specificity was greater than the conventional methods. This technique can be useful as an additional method to the available techniques, in the attempt of obtaining a more precocious and precise diagnosis in the cases of pleural tuberculosis.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A tuberculose está entre as dez principais causas de morte no mundo e o Brasil é um dos 22 países que concentram 80% da carga mundial da doença. A apresentação pleural, objeto central do presente estudo, é a mais comum forma extrapulmonar em indivíduos HIV soronegativos e sempre aparece como diagnóstico diferencial a ser considerado nos portadores de derrames pleurais no País. O diagnóstico de tuberculose pleural fundamenta-se principalmente na identificação do agente Mycobacterium tuberculosis no exame direto ou cultura do líquido pleural ou dos fragmentos de tecido pleural, assim como na presença de granuloma na análise histopatológica dos mesmos. O objetivo principal deste trabalho é conhecer a qualidade dos diagnósticos e o perfil epidemiológico dos portadores de tuberculose pleural no estado de Roraima visando embasar tecnicamente o fomento e aplicação de políticas públicas para o enfrentamento da doença em questão. O presente estudo foi desenhado como uma pesquisa quali-quantitativa do tipo corte transversal para avaliar os critérios diagnósticos utilizados e seus determinantes da apresentação pleural da doença no estado de Roraima, localizado na Região Norte do Brasil, dentro dos limites da Amazônia Legal, local que possui extensa diversidade sociocultural e ambiental. Trata-se de um estudo observacional, retrospectivo e descritivo baseado na revisão de dados secundários do SINAN, incluindo todos os casos notificados como portadores de tuberculose pleural de 2005 a 2013 no referido Estado. Dos 1.395 casos de tuberculose notificados no período, 8,3% foram da apresentação pleural, totalizando 38,9% das formas extrapulmonares na amostra. A taxa de incidência desta apresentação não acompanhou a tendência decrescente da forma pulmonar da doença no período. A prevalência de diagnósticos de qualidade encontrada foi de 28,5% (IC95%: 20,4 a 37,6%), e, em análise univariada nenhuma variável explicativa dentre as características demográficas e clínicas possíveis de serem apuradas no banco de dados tiveram impacto significativo na qualidade dos diagnósticos. A principal conclusão do estudo remete à necessidade de uma política de referenciamento específica a nível estadual no intuito de facilitar o acesso aos métodos diagnósticos preconizados pelo Programa Nacional de Controle da Tuberculose disponíveis no sistema de saúde. / Tuberculosis is among the ten main causes of death in the world and Brazil is one of 22 countries that account for 80 % of the global burden of disease. Pleural presentation, the main object of this study, is the most common extrapulmonary TB form in HIV-seronegative individuals and always appears as a differential diagnosis to be considered in patients with pleural effusions. The main objective was to know the quality of diagnoses and the epidemiological profile of patients with pleural tuberculosis in the state of Roraima aiming to offer a technical foundation to public policies destined to fight the disease. The diagnosis of pleural tuberculosis is based primarily on the identification of Mycobacterium tuberculosis on direct examination or culture of pleural fluid or pleural tissue fragment, as well as in the presence of granuloma on histopathological analysis of the tissue sample. The present study was designed as a qualitative and quantitative transversal research to evaluate the diagnostic criteria being used and the determinants of pleural disease presentation in the state of Roraima, located in northern Brazil, within the limits of the Amazon, and with extensive socio-cultural and environmental diversity. This is an observational, retrospective and descriptive study based on a review of secondary SINAN data, including all cases of pleural tuberculosis reported from 2005 to 2013. Of 1.395 reported cases of tuberculosis in the period, 8.3% were of pleural presentation, totaling 38.9% of extrapulmonary cases in the sample. The incidence rate of this presentation did not follow the downward trend of pulmonary tuberculosis in the period. The prevalence of quality diagnosis was found to be 28.5 % (95% CI: 20.4 to 37.6 %), and in a univariate analysis, no variable among the possible clinical and demographic characteristics searched in the data basis had significant impact in the quality of the diagnosis. The main conclusion of the study indicates the need for a specific referral policy at a state level in order to facilitate access to diagnostic methods recommended by the National Tuberculosis Control Programme available in the health system.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Loanda Carvalho S Limongi.pdf: 1004813 bytes, checksum: 09f423fef50cc45223e734df788a0c39 (MD5) Previous issue date: 2009-12-18 / Pleural tuberculosis (TBP) has often spontaneous resolution, even without treatment. However, the lack of proper diagnosis and treatment can lead to the occurrence of pulmonary and/or extra-pulmonary tuberculosis in 65% of the cases, in the five years subsequent. The objective of this study was to evaluate the effectiveness of the recombinant Hsp-X antigen (rHsp-X) in an enzyme immunoassay for determining the presence of TBP in patients with pleural effusion. For this study we used 132 samples of serum and pleural fluid (PF) from patients with pleural effusion. Of these, 97 samples were from TBP patients and 35 patients with diseases other than tuberculosis (NTBP) (28 patients with metastatic cancer, 1 patient with congestive heart failure, 2 patients whit liver failure, 1 patient with systemic lupus erythematosus and 3 patients with parapneumonic effusion). The IgM levels of PF were higher in patients with PTB than NTBP, the sensitivity and specificity of the ELISA for the PF was 42% and 83%, respectively. Testing for IgG from the serum and the PF against the recombinant antigen Hsp-X were not effective in discriminating TB patients from other diseases, the sensitivity was found to be 13% and 16% using serum and LP, respectively, with the same specificity of 83%. TBP patients presented higher levels of IgA specific for the rHSP-X than NTBP, the IgA ELISA using PF presented better sensitivity (65%) than using serum (39%), while the IgA ELISA for both types of samples presented the same specificity (83%). In conclusion, the recognition of Mycobacterium tuberculosis rHsp-X by IgA antibodies from the PF of patients with TBP reveals its possible role in the development of a diagnostic test for additional cases of TBP. Further studies must be conducted to confirm this hypothesis. / A tuberculose pleural (TBP) frequentemente tem resolução espontânea, mesmo sem tratamento. No entanto, a ausência de diagnóstico e tratamento pode levar, nos cinco anos subseqüentes, à ocorrência de tuberculose pulmonar e/ ou extrapulmonar em 65% dos casos. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da utilização do antígeno Hsp-X em um ensaio imunoenzimático para determinação da presença de TBP em indivíduos com derrame pleural. Para o estudo foram utilizadas 132 amostras de soro e líquido pleural (LP) de pacientes com derrame pleural. Destas, 97 amostras eram de pacientes TBP e 35 de pacientes com outras doenças não tuberculosas (NTBP) (28 pacientes por câncer metastático, 1 pacientes por insuficiência cardíaca congestiva, 2 paciente por insuficiência hepática, 1 paciente por lúpus eritematoso sistêmico e 3 pacientes por derrames parapneumônicos). Os níveis de IgM do LP foram mais elevados nos pacientes com TBP do que os NTBP, a sensibilidade do ELISA para do LP de 42%, para a especificidade de 83%. Os ensaios para pesquisa de IgG, do soro e do LP, contra o antígeno Hsp-X não foram eficazes em discriminar pacientes com TBP de outras doenças, a sensibilidade encontrada foi de 13% e 16%, utilizando o soro e o LP, respectivamente, para a mesma especificidade de 83%. A densidade óptica dos ensaios para pesquisa de IgA, específicos para o antígeno rHsp-X, foi mais elevada nos pacientes TBP do que os NTBP, o ELISA com a IgA do LP foi melhor que o ELISA do soro, a sensibilidade foi de 65% e 39%, respectivamente, para a mesma especificidade de 83%. Concluímos que o reconhecimento de Hsp-X recombinante de Mycobacterium tuberculosis pelos anticorpos IgA do LP de pacientes com TBP indicam que esse antígeno poderá ser utilizado para o desenvolvimento de um teste de diagnóstico complementar para casos de TBP. Estudos adicionais precisam ser realizados para confirmar tal hipótese.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-05-22T19:22:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoClinicoMorfologico.pdf: 2306884 bytes, checksum: 3364fe4e2c0a741056dfa4ce9d06de23 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-05-27T13:57:37Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoClinicoMorfologico.pdf: 2306884 bytes, checksum: 3364fe4e2c0a741056dfa4ce9d06de23 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-27T13:57:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_EstudoClinicoMorfologico.pdf: 2306884 bytes, checksum: 3364fe4e2c0a741056dfa4ce9d06de23 (MD5) Previous issue date: 2011 / A dificuldade no diagnóstico definitivo da tuberculose extrapulmonar persiste principalmente devido a baixa resolutividade dos métodos convencionais disponíveis para a detecção do Mycobacterium tuberculosis. Esse estudo teve como objetivos avaliar a contribuição da técnica imuno-histoquímica (IHQ) para a detecção de Mycobacterium spp. em casos de tuberculose pleural e ganglionar com histoquímica negativa, assim como, investigar alguns aspectos clínicos, laboratoriais e morfológicos da doença. Para obtenção desta amostra fez-se a busca dos casos no Núcleo de Vigilância Epidemiológica (NVE) e Divisão de Arquivo Médico e Estatística (DAME) do Hospital Universitário João de Barros Barreto (HUJBB) e no Departamento de Anatomia Patológica da Universidade Federal do Pará (UFPA), selecionando-se aqueles que haviam realizado exame histopatológico para esclarecimento diagnóstico do caso. Foram incluídos 50 pacientes, sendo 25 com diagnóstico presuntivo de tuberculose pleural e 25 de tuberculose ganglionar. Para obtenção dos dados clínicos e laboratoriais os respectivos prontuários foram revisados, e para confirmação dos aspectos morfológicos foi realizada a revisão de todas as lâminas selecionadas. Posteriormente, cada amostra foi submetida à técnica IHQ com anticorpo polyclonal Mycobacterium bovis BCG. Encontrou-se no grupo investigado, maior frequência do sexo masculino, cuja média de idade foi de 33,8 anos (desvio padrão: 14,1) sendo a maioria procedente da cidade de Belém-Pará e com nível de escolaridade de sete ou menos anos de estudo. Os sintomas constitucionais mais frequentes em todo o grupo foram a febre e perda ponderal. Nos pacientes com tuberculose pleural, os sintomas específicos mais encontrados foram tosse, dor torácica e dispneia, e naqueles com a forma ganglionar da doença, o envolvimento da cadeia cervical isolada foi mais frequente. Infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) ou Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (Sida) e etilismo foram as condições de risco mais frequentemente associadas. Na tuberculose pleural, 20% dos casos cursaram com derrame pleural associado à lesão parenquimatosa, e em 60% o líquido pleural foi do tipo exsudativo. Enquanto, na forma ganglionar, em 50% dos casos evidenciou-se lesão parenquimatosa à radiografia do tórax. Neste estudo, foi inexpressiva a quantidade de participantes nos quais foi realizada a pesquisa direta e cultura para bacilo álcool - ácido resistente (BAAR) nos diversos espécimes clínicos analisados (líquido pleural, tecido pleural e ganglionar, escarro e lavado broncoalveolar) O padrão morfológico predominante em ambas as formas da doença foi o granuloma tipo tuberculoide com necrose caseosa, independente do status sorológico para o HIV. A técnica IHQ contribuiu para o diagnóstico de tuberculose pleural em 21% (4/19) das amostras de tecido pleural e em 37,5% (9/24) de tecido ganglionar. Um resultado imuno-histoquímico positivo define o diagnóstico de micobacteriose, e quando associado aos achados clínicos, laboratoriais e morfológicos torna-se uma ferramenta de grande utilidade para melhorar o diagnóstico da tuberculose extrapulmonar. / The difficulty in definitive diagnosis of extra-pulmonary tuberculosis persists, mainly due to poor solutions available from conventional methods for detection of Mycobacterium tuberculosis. This study aimed to evaluate the contribution of immunohistochemical (IHC) for detection of Mycobacterium spp, in cases of pleural and lymph node tuberculosis with negative staining, as well as investigate some clinical, laboratory and morphological aspects of the disease. To obtain this sample was made in the pursuit of cases through surveillance (NVE) and Division of Medical Archives and Statistics (DAME), University Hospital João de Barros Barreto (HUJBB) and the Department of Pathology, University of Pará (UFPA), selecting those who had performed the histopathological examination for diagnosis of the case. Fifty patients were included, twenty-five with presumptive diagnosis of pleural tuberculosis and twenty-five of lymph node tuberculosis. To obtain the clinical and laboratory data were reviewed their medical records, and to confirm the morphological aspects review was performed of all selected slides. Thereafter, each sample was subjected to IHC with polyclonal Mycobacterium bovis BCG. It was found in the investigated group, more often male, whose average age was 33.8 years (SD: 14.1) with the majority coming from the city of Belem, Pará and education level of seven or fewer years of schooling. Constitutional symptoms more frequent in the whole group were fever and weight loss. In patients with pleural tuberculosis, the most frequent specific symptoms were cough, chest pain and dyspnea, and in those with lymph node involvement of the cervical alone was more frequent. Infection with human immunodeficiency virus (HIV) or Acquired Immune Deficiency Syndrome (AIDS) and alcohol consumption were the risk conditions most frequently associated. In pleural tuberculosis, 20% of cases presenting with pleural effusion associated with parenchymal injury, and 60% of the pleural fluid was exudate type. While in the lymph nodes in 50% of the cases revealed a parenchymal lesion on chest. This study was marginal participants in the amount of which has been held to direct research and culture for bacillus acid – resistant (AFB) in various clinical specimens analyzed (pleural fluid, pleural tissue and lymph node, sputum, and broncho-alveolar lavage). The predominant morphological pattern in both forms of the disease was tuberculous granulomas with caseous necrosis, regardless of serologic status for HIV. The IHC technique contributed to the diagnosis of pleural tuberculosis in 21% (4/19) samples of pleural tissue and 37.5% (9/24) of lymph node tissue. A positive immunohistochemical result defines the diagnosis of mycobacterial disease, and when associated with clinical, laboratory and morphological finds become a valuable tool to improve the diagnosis of extra-pulmonary tuberculosis.