Orientador : Wilheim Baumeier / Co-orientador : Flávio Queiroz-Telles Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Gradução em Medicina Interna / Resumo: Um estudo aberto, prospectivo, randomizado, foi realizado, empregando-se o itraconazol na terapêutica da onicomicose causada por dermatófitos. Foram comparados dois gaipos de pacientes, um que recebeu o itraconazol diariamente (grupo D = 17 pacientes) e outro onde a terapêutica foi administrada sob a forma de pulsoterapia (grupo P = 18 pacientes). Nos dois grupos, o itraconazol foi administrado durante 3 meses. Os grupos foram analisados de modo comparativo quanto à eficácia e toxicidade dos esquemas terapêuticos. Ao final da terapêutica, 59% dos pacientes do grupo D e 39% do gaipo P, apresentaram-se clinicamente responsivos. Após 4 meses de seguimento pós-terapêutico, 77% dos pacientes do gaipo D e 72% do grupo P, obtiveram resposta clínica ao tratamento. Numa segunda avaliação pós-terapêutica, aos 16 meses, todos os pacientes que compareceram ao exame e que eram responsivos na avaliação anterior, mantiveram este critério. Não se observaram diferenças estatisticamente significativas entre os grupos em ambos os períodos de avaliação da resposta terapêutica. Os dois esquemas foram bem toleradas pelos pacientes, não ocorrendo diferenças estatisticamente significativas de incidência de toxicidade clínica ou laboratorial. Em relação à quantidade total de itraconazol ingerida em cada esquema terapêutico, os pacientes do grupo D, receberam 2,14 vezes mais itraconazol que os do grupo P. Concluímos que a administração do itraconazol sob a forma de pulsoterapia, é tão eficaz quanto o esquema diário, com a vantagem de apresentar menor custo por tratamento devido à menor quantidade de medicamento utilizada. / Abstract: The pharmacokinetic profile o f itraconazole in the nails rose up a new concept in the therapy o f onychomycosis. The sustained levels that this compound achieves in the nails allows one to employ intermittent pulse therapy which is more convenient for the patient because it reduces drug intake to one week in a month. Nevertheless, comparative data o f daily administered itraconazole versus pulse therapy are missing. The aim o f this study was to compare the efficiency and toxicity o f both therapeutic schemes. We compared in a randomized trial, two groups o f patients with clinically and mycologically proved dermatophytic onychomycosis. The first group (D, 17 patients) received 200 mg o f daily itraconazole during 3 months and the second group (P, 18 patients), received 400 mg o f itraconazole per day for a week in each month, during 3 months. The severity o f the nail disease was assessed by the measurement o f the lesions, according to the method o f Zaias. Nail lesions were followed during therapy by clinical and mycological examinations while itraconazole's toxicity was studied by hematological and biochemical parameters. At the end o f the 3 months therapy, 59% of group D and 39% o f group P werw clinically responsives. After a median follow up o f 4 months( l - 6 months), starting at the end o f the therapy period, 77% patients from group D and 72% from group P, reached clinical response. There was no statistical difference between the two groups (p < 0.05). In both, itraconazole intake was well tolerated in clinical and laboratorial terms. Our results show that both itraconazole schemes can be used in the management o f dermatophytic onychomycosis. However, the total drug intake in group D patients was 2.14 higher than in group P. This difference was statistically significant and suggests that pulse therapy with itraconazole may be a more convenient and economical regimen to treat patients with onychomycosis.

Introdução É sabido que existe um aumento das partes moles sub-ungueais nos dedos com hipocratismo, o que foi verificado no passado por estudos de anatomia patológica. No presente trabalho este espessamento das partes moles sub-ungueais foi avaliado em indivíduos vivos por meio de imagens radiográficas dos dedos. Objetivo Apresentar um método destinado a avaliar, em imagens radiográficas de dedos indicadores, as alterações estruturais que ocorrem no hipocratismo, através da mensuração “in vivo” da espessura das partes moles sub-ungueais, contrapondo esta medida com valores do ângulo hiponiquial. Métodos Imagens radiográficas foram obtidas do perfil de dedos indicadores que eram colocados diretamente sobre o chassis, sem interposição de grade anti-difusora, com distância foco-filme de 1,0 metro. Sobre as imagens obtidas mediram-se a espessura das partes moles entre a base da unha e a falange, e também o ângulo hiponiquial. O método foi aplicado a 85 pacientes, todos clinicamente portadores de hipocratismo digital (e com ângulo hiponiquial maior que 192,0º), e a 79 indivíduos normais, sem hipocratismo clínico (e com ângulo hiponiquial inferior a 188,0º).Resultados A espessura das partes moles sub-ungueais nos 85 pacientes com hipocratismo mediu 3,91 ± 0,55 mm (3,00 –5,50 mm) e nos indivíduos normais 2,34 ± 0,29 mm (1,50 – 3,00 mm) – uma diferença significativa (p < 0,001). Em somente um dos casos normais a espessura das partes moles sub-ungueais foi superior a 2,75 mm (3,00 mm). O coeficiente de correlação ( r ) entre os valores da espessura das partes moles subungueais e os do ângulo hiponiquial foi 0,88. Conclusões A avaliação radiográfica da espessura das partes moles sub-ungueais de dedos indicadores de indivíduos vivos foi facilmente efetuada. O método mostrou que esta espessura encontrou-se significativamente aumentada em pacientes com hipocratismo digital, o que havia sido previamente relatado por outros autores em materiais de anatomia patológica. Houve estreita correlação entre os valores da espessura das partes moles subungueais e os do ângulo hiponiquial.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-23T06:35:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 238710.pdf: 854062 bytes, checksum: 2ece1a49d491eacf08656c6d511b7ae0 (MD5) / Uncaria tomentosa (Willd.) DC (Rubiaceae) is an indigenous plant of the Amazon rainforest, popularly known as cat#s claw. The medicinal use of this plant by Peruvian indians has drawn scientific interest over its healing propreties, and gave rise to an increasing number of studies about its biological activities. Chemically, the substances of greatest interest present in this plant are indole and oxindole alkaloids. This study characterizes the antinociceptive activity of a standardized fraction of oxindole alkaloids from U. tomentosa (UT) in mouse models of nociception. Pretreatment of animals with UT (3-300 mg/kg, i.p.) decreased, in a dose-dependent way, nociception elicited by chemical stimuli such as the intraperitoneal injection of acetic acid and the intraplantar injection of formalin, glutamate or capsaicin. Treatment with UT (300 mg/kg) significantly increased the latency of animals to respond to thermal noxious stimuli (hot plate and tail flick tests), probably revealing central effects of the alkaloids. Moreover, treatment with UT was able to inhibit nociceptive behavior caused by intratecal injection of glutamate, NMDA, substance P and the proinflammatory cytokines TNF-á and IL-1â. The antinociceptive effect of UT (100 mg/kg, i.p.) in the formalin test was abolished by pretreatment with ketanserin, an antagonist of serotonergic 5-HT2 receptors, but not by antagonists of the opioid receptors (naltrexone), muscarinic cholinergic receptors (atropine), or adrenergic á1 and á2 receptors (prazosin and yoimbine, respectively). In a similar way, pre-treatment with L-arginine, a substrate for the nitric oxide synthase enzyme, did not affect the antinociceptive activity of UT in the formalin test. These data suggest that the antinociceptive activity of UT involves an interaction with the serotonergic and the glutamatergic systems, but not with the other systems tested here.

Orientador : Profª. Drª. Betina Werner / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 28/11/2016 / Inclui referências : f. 85-89 / Área de concentração: Medicina interna / Resumo: Fundamentação: A onicomicose, ou micose das unhas, pode acometer até 14% da população, sendo mais frequente em idosos. Os métodos mais empregados para diagnóstico são o exame micológico direto e a cultura para fungos, porém esses métodos tem baixa sensibilidade. Em auxílio, surgiu o clipping com valores de sensibilidade e valores preditivos altos. Métodos: Foi elaborado um estudo observacional e descritivo de 62 amostras de onicomicose coletadas por clipping e coradas por PAS, com objetivo de caracterizar critérios da unha e dos fungos, descrevendo e comparando com resultados das culturas. Resultados: Medidas de espessura da placa superiores a 0,50 mm e da região subungueal acima de 0,31 mm são fortemente indicativas de onicomicose. Também são indicativos paraceratose granular, maior número de camadas de paraceratose subungueal, fendas, linha da zona de transição ungueal borrada e irregular, lagos serosos e neutrófilos. Pequena quantidade de fungos, estruturas similares a brotamento, hifas septadas, ramificações e dismorfismo indicam maior probabilidade de dermatófitos. Menores medidas da espessura da placa, ausência de neutrófilos, ausência de camadas de paraceratose, presença de fungos na placa e presença de estruturas leveduriformes agrupadas são sugestivas de infecção por Candida sp. Casos causados por Aspergilus sp. apresentam mais fendas e linha da zona de transição ungueal irregular. Conclusão: O exame microscópico da unha é um excelente método diagnóstico para onicomicose, com as vantagens de ajudar nos diferenciais da onicomicose, gravidade da contaminação ungueal, direcionamento da investigação do agente etiológico e potencial para previsão prognóstica. Palavras-chave: clipping, exame microscópico de unha, onicomicose, fungos, dermatófitos, doenças das unhas. / Abstract: Backgound: Onychomycosis, or mycosis of the nails, may affect up to 14% of the population, being more frequent in the elderly. The most widely used diagnostic methods are direct mycological examination and culture for fungi, but these methods have low sensitivity. Clipping however has high sensitivity and good predictive value. Methods: An observational and descriptive study of 62 samples of onychomycosis collected by clipping and stained by PAS was designed in order to characterize nail and fungi and to describe and compare the results of cultures. Results: Thickness measurements of the upper plate to 0.50 mm and subungual region above 0.31 mm are strongly indicative of onychomycosis. They are also indicative of granular parakeratosis, further layers of subungual parakeratosis, clefts, line blurred and irregular ungual transition zones, serous lakes and neutrophils. A small amount of fungus, similar structures budding, septate hyphae, branching and dimorphism indicate a greater likelihood of dermatophytes. A smaller than average plate thickness, the absence of neutrophils, the absence of layers of parakeratosis, the presence of molds on the plate and the presence of yeast grouped structures are suggestive of infection by Candida sp. Cases caused by Aspergillus sp. have more clefts and an irregular line of the ungual transition zone. Conclusion: Microscopic examination of the nail is an excellent diagnostic method for onychomycosis, with the advantages of helping to dertermine differentials diagnosis, measuring severity of nail contamination, directing the investigation of the etiological agent and potentialy leading to prognostic prediction. Keywords: clipping, microscopic nail exam, onichomycosis, fungi, dermatophytes, nail disease

Introdução É sabido que existe um aumento das partes moles sub-ungueais nos dedos com hipocratismo, o que foi verificado no passado por estudos de anatomia patológica. No presente trabalho este espessamento das partes moles sub-ungueais foi avaliado em indivíduos vivos por meio de imagens radiográficas dos dedos. Objetivo Apresentar um método destinado a avaliar, em imagens radiográficas de dedos indicadores, as alterações estruturais que ocorrem no hipocratismo, através da mensuração “in vivo” da espessura das partes moles sub-ungueais, contrapondo esta medida com valores do ângulo hiponiquial. Métodos Imagens radiográficas foram obtidas do perfil de dedos indicadores que eram colocados diretamente sobre o chassis, sem interposição de grade anti-difusora, com distância foco-filme de 1,0 metro. Sobre as imagens obtidas mediram-se a espessura das partes moles entre a base da unha e a falange, e também o ângulo hiponiquial. O método foi aplicado a 85 pacientes, todos clinicamente portadores de hipocratismo digital (e com ângulo hiponiquial maior que 192,0º), e a 79 indivíduos normais, sem hipocratismo clínico (e com ângulo hiponiquial inferior a 188,0º).Resultados A espessura das partes moles sub-ungueais nos 85 pacientes com hipocratismo mediu 3,91 ± 0,55 mm (3,00 –5,50 mm) e nos indivíduos normais 2,34 ± 0,29 mm (1,50 – 3,00 mm) – uma diferença significativa (p < 0,001). Em somente um dos casos normais a espessura das partes moles sub-ungueais foi superior a 2,75 mm (3,00 mm). O coeficiente de correlação ( r ) entre os valores da espessura das partes moles subungueais e os do ângulo hiponiquial foi 0,88. Conclusões A avaliação radiográfica da espessura das partes moles sub-ungueais de dedos indicadores de indivíduos vivos foi facilmente efetuada. O método mostrou que esta espessura encontrou-se significativamente aumentada em pacientes com hipocratismo digital, o que havia sido previamente relatado por outros autores em materiais de anatomia patológica. Houve estreita correlação entre os valores da espessura das partes moles subungueais e os do ângulo hiponiquial.

Orientadora : Profª Drª Juliana Bello Baron Maurer / Co-orientadora : Profª Drª Fabíola Regina Stevan Hancke / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Defesa: Curitiba, 29/06/2011 / Inclui referências / Resumo: A Uncaria tomentosa (Willd.) D.C., popularmente conhecida como unha-de-gato, e uma planta medicinal da Amazonia empregada no tratamento de varias doencas por possuir potentes atividades anti-inflamatorias e imunoestimulantes. O objetivo desse estudo foi analisar quimicamente duas fracoes aquosas obtidas a partir de dois diferentes extratos comerciais, os quais correspondem as principais formas de utilizacao dessa planta: decocto (fracao D10a) e capsulas fitoterapicas (1AERT). As analises quimicas demonstraram a presenca de compostos fenolicos (86% para D10a e 42% para 1AERT) e componentes glicidicos (45% para D10a e 28% para 1AERT), um baixo teor de proteinas (<10%), bem como a ausencia de alcaloides (<0,01%) nessas fracoes. Entre os componentes glicidicos, 0,3% correspondem a arabinogalactanas-proteinas (AGPs) e 6% sao acucares acidos na fracao D10a, enquanto na 1AERT os teores desses compostos correspondem a 23 e 26%, respectivamente para D10a e 1AERT. Atraves da composicao monossacaridica observou-se que a fracao D10a e constituida principalmente de Rha (28%) e Glc (56%), e a 1AERT por Rha (8%), Ara (11%), Gal (23%) e Glc (26%). A atividade biologica dessas fracoes foi avaliada in vitro atraves do efeito exercido sobre cultura de macrofagos peritoneais de camundongos e sobre o sistema complemento humano. As fracoes nao foram citotoxicas para os macrofagos nas concentracoes de 0,32-320 ƒÊg/m., em 48h de tratamento. Somente a fracao 1AERT foi capaz de estimular a producao de NO apos 48h de tratamento, exercendo um aumento de 50% na concentracao de 320 ƒÊg/m.. Em relacao a producao de citocinas, as fracoes apresentaram atividades semelhantes em diferentes intensidades apos incubacao de 24h. Na concentracao de 320 ƒÊg/m., a fracao D10a aumentou a producao de TNF-ƒ¿ em 125% e de IL-6 em 1233%, e reduziu a producao de IL-1ƒÀ em 85%. Ja a fracao 1AERT, na mesma concentracao, aumentou a producao de TNF-ƒ¿ em 230% e de IL-6 em 664%, e reduziu a producao de IL-1ƒÀ em 61%. Ambas as fracoes nao exerceram efeito sobre a producao de IL-10. A atividade imunoestimulante em macrofagos pode ser observada tambem, apos 24 h de tratamento, atraves do teste de retencao do corante vermelho neutro, que demonstrou a capacidade das fracoes em estimular a fagocitose em macrofagos, e atraves da analise morfologica das celulas, que apresentaram morfologia tipica de macrofagos ativados. Alem disso, as fracoes foram avaliadas quanto a capacidade de modulacao do sistema complemento atraves do ensaio hemolitico, sendo caracterizadas como ativadoras do complemento atraves da via classica. A fracao D10a foi capaz de modular o sistema complemento atraves da via alternativa, enquanto a fracao 1AERT apresentou efeitos pouco expressivos atraves dessa via. A partir dos resultados obtidos, pode-se concluir que as fracoes testadas podem ser classificadas como modificadoras da resposta biologica, e que ambas apresentaram as atividades imunoestimulantes e anti-inflamatorias descritas para U. tomentosa. As diferencas nas atividades observadas para cada fracao estao relacionadas com a diferenca na composicao quimica, levando a conclusao de que a mistura de compostos bioativos e importante para a atividade apresentada por essa planta, e que a sua forma de utilizacao (decocto ou capsulas fitoterapicas) interfere na atividade biologica encontrada. / Abstract: Uncaria tomentosa (Willd.) D.C., a medicinal plant from the Amazon basin, popularly known as gCat's claw h, has been widely used for its anti-inflammatory and immune-stimulant activities. In this study, two aqueous fractions, obtained from two different commercially available extracts, were chemically analyzed. These two fractions represent the major use forms of U. tomentosa: by decoction (fraction D10a) and phytotherapic capsules (1AERT). The chemical analysis demonstrated the presence of phenolic compounds (86% for D10a and 42% for 1AERT), carbohydrate compounds (45% for D10a and 28% for 1AERT), a low protein content (<10%), and absence of alkaloids (<0.01%) in those fractions. Among the carbohydrate compounds, 0.3% were arabinogalactan-proteins (AGPs) and 6 % were acidic sugars in fraction D10a, while AGPs were 23% and acidic sugars were 26% of the carbohydrate compounds in fraction 1AERT. Analysis of the monosaccharide content showed that fraction D10a consisted of Rha (28%) and Glc (56%), mainly, while fraction 1AERT consisted of Rha (8%), Ara (11%), Gal (23%) and Glc (26%). The biological activity of the fractions was evaluated in vitro through the analysis of their effect on culture cells of mouse peritoneal macrophages and on human complement system, as well. The fractions showed no cytotoxicity on the macrophages, when used in the 0.32-320 ƒÊg/m. range, for 48 hours. Fraction 1AERT was able to stimulate NO production, after 48 hours of treatment, enhancing NO production by 50%, when used at 320 ƒÊg/m.. No difference, towards cytokines production, was observed for both fractions, after incubation for 24h. Fraction D10a, at 320 ƒÊg/m., increased TNF-ƒ¿ production in 125%, and IL-6 production in 1233%, while reducing IL-1ƒÀ production in 85%. Fraction 1AERT, also at 320 ƒÊg/m., increased TNF-ƒ¿ production in 230%, and IL-6 production in 664%, while reducing IL-1ƒÀ production in 61%. None of the fractions had any effect on IL-10 production. After a 24 hours treatment, morphological analysis of the cells and the neutral red retention assay demonstrated the immune-stimulant activity of both fractions. Tests accessing the immune-stimulant activity of D10a and 1AERT fractions, showed increased phagocitosis and the typical morphology of activated macrophages in macrophages cultivated in the presence of both fractions. In addition, the fractions were evaluated for their ability to modulate the complement system, through the hemolytic assay. Results from these assays characterized both fractions as activators of the complement system through the classical pathway. Fraction D10a was able to modulate the complement system through the alternative pathway, while fraction 1AERT showed modest effects through the alternative pathway. From these results, it can be concluded that both fractions can be classified as modifiers of the biological response and presented the immune-stimulant and anti-inflammatory activities described for U. tomentosa. Differences in the observed activities for each fraction are related to differences in chemical composition, which leads to the conclusion that the mixture of the bioactive compounds is important for the activity showed by the plant. In addition, it can be concluded that the way the plant is used (decoction or phytotherapic capsules) interferes with the biological activity found.

Introdução É sabido que existe um aumento das partes moles sub-ungueais nos dedos com hipocratismo, o que foi verificado no passado por estudos de anatomia patológica. No presente trabalho este espessamento das partes moles sub-ungueais foi avaliado em indivíduos vivos por meio de imagens radiográficas dos dedos. Objetivo Apresentar um método destinado a avaliar, em imagens radiográficas de dedos indicadores, as alterações estruturais que ocorrem no hipocratismo, através da mensuração “in vivo” da espessura das partes moles sub-ungueais, contrapondo esta medida com valores do ângulo hiponiquial. Métodos Imagens radiográficas foram obtidas do perfil de dedos indicadores que eram colocados diretamente sobre o chassis, sem interposição de grade anti-difusora, com distância foco-filme de 1,0 metro. Sobre as imagens obtidas mediram-se a espessura das partes moles entre a base da unha e a falange, e também o ângulo hiponiquial. O método foi aplicado a 85 pacientes, todos clinicamente portadores de hipocratismo digital (e com ângulo hiponiquial maior que 192,0º), e a 79 indivíduos normais, sem hipocratismo clínico (e com ângulo hiponiquial inferior a 188,0º).Resultados A espessura das partes moles sub-ungueais nos 85 pacientes com hipocratismo mediu 3,91 ± 0,55 mm (3,00 –5,50 mm) e nos indivíduos normais 2,34 ± 0,29 mm (1,50 – 3,00 mm) – uma diferença significativa (p < 0,001). Em somente um dos casos normais a espessura das partes moles sub-ungueais foi superior a 2,75 mm (3,00 mm). O coeficiente de correlação ( r ) entre os valores da espessura das partes moles subungueais e os do ângulo hiponiquial foi 0,88. Conclusões A avaliação radiográfica da espessura das partes moles sub-ungueais de dedos indicadores de indivíduos vivos foi facilmente efetuada. O método mostrou que esta espessura encontrou-se significativamente aumentada em pacientes com hipocratismo digital, o que havia sido previamente relatado por outros autores em materiais de anatomia patológica. Houve estreita correlação entre os valores da espessura das partes moles subungueais e os do ângulo hiponiquial.

Made available in DSpace on 2016-04-27T12:29:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 cintia_mello_ioc_mest_2015.pdf: 2747649 bytes, checksum: 92f3eedd9bed909aa684e19d506eabf4 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A incidência de dengue em todo o mundo tem aumentado nas últimas décadas. As respostas imunológicas exacerbadas desempenham um papel crucial para a sua fisiopatologia, tais como a indução do extravasamento plasmático, originado principalmente pela produção de uma cascata de citocinas inflamatórias e que podem induzir distúrbios de coagulação e alteração da permeabilidade vascular levando, eventualmente, a hemorragias graves e ao choque. Os produtos naturais, que têm propriedades imunomoduladoras descritas na etnofarmacologia, podem promover o controle da replicação viral e uma redução de citocinas que induzem a permeabilidade endotelial, o que poderia resultar em manifestações clínicas mais leves. O objetivo deste estudo foi investigar se compostos provenientes de uma planta medicinal poderiam modular a resposta imune inata associada com características imunopatológicas na infecção pelo vírus Dengue (DENV), usando um modelo de infecção in vitro com linhagens contínuas de hepatócitos humanos (Huh-7). Métodos e Resultados: Após infecção das células-alvo Huh-7 pelo DENV-2, as culturas foram tratadas com lotes únicos de extratos hidroalcoólicos de Uncaria sp. (UGC ou UGF), em diferentes concentrações. A taxa de células contendo antígenos virais foi determinada após períodos de incubação por imunofluorescência vírus específica e citometria de fluxo A proteína viral não estrutural (NS1), indicativa de replicação viral, foi detectada nos sobrenadantes de cultura de células assim como as citocinas/quimiocinas MIF, IL-8 e IL-6, todas determinadas por ensaios de ELISA. Nos mesmos sobrenadantes, a produção do fator inflamatório óxido nítrico foi determinada indiretamente pela detecção de nitrito (Reação de Griess). Além disso, foram observados por citometria de fluxo alterações de viabilidade celular, apoptose e necrose, utilizando marcações pelo kit LIVE/DEAD e por Anexina V e Iodeto de propídio (PI). Foram observados efeitos antivirais de UGC e UGF, estatisticamente significantes, em comparação com células não tratadas, em concentrações que reduziram a frequência de células positivas para o antígeno viral e a quantidade de NS1 secretada. Efeitos imunomoduladores significantes foram mostrados pela redução da secreção de MIF, IL-8 e IL-6. Houve um aumento na produção de nitrito em culturas infectadas e tratadas com os dois extratos em diferentes concentrações, além de redução das taxas de apoptose e necrose, significantes. Conclusão: Existem compostos ativos na espécie vegetal que possuem capacidades antiviral e imunomoduladora. Sendo assim, mostraram-se potenciais candidatos para o desenvolvimento de um produto para tratamento da dengue. Apoiado por FIOCRUZ / RPT11D; IOC / PROEP; CNPq; FAPERJ; CAPES / The incidence of dengue worldwide has increased in recent decades. The exacerbated immune responses play a crucial role in the infection pathophysiology, such as the induction of plasma extravasation. It is caused mainly by the production of a cascade of inflammatory cytokines that can induce coagulation disorders and alterations in vascular permeability leading, eventually, to severe hemorrhages and shock. Natural products, which have immunomodulatory properties described in ethnopharmacology, can promote the control of viral replication and a reduction of cytokines that induce endothelial permeability, which could result in milder clinical manifestations. The aim of this study was to investigate whether compounds from a medicinal plant could modulate the innate immune response associated with immunopathological characteristics in infection Dengue virus (DENV), using an in vitro model of infection with continuous lines of human hepatocytes (Huh-7). Methods and Results: After infection of Huh-7 target cells by DENV-2, cultures were treated with single lots hydroalcoholic extracts of Uncaria sp. (UGC or UGF), at different concentrations. The rate of cells containing viral antigens was determined after incubation periods by virus-specific immunofluorescence and flow cytometry. Viral non-structural protein (NS1), indicative of viral replication, was detected in cell culture supernatants and cytokines/chemokines, MIF, IL-8 and IL-6, all determined by ELISA assays In the same supernatants, the production of inflammatory factor nitric oxide was determined indirectly by nitrite (Griess reaction). Moreover, cells were analyzed by flow cytometry for cell viability changes, apoptosis and necrosis, by using LIVE/DEAD and Annexin V and Propidium iodide (PI) kits. Antiviral effects were observed by UGC and UGF, statistically significant, compared to untreated cells at concentrations that reduced the rate of viral antigen positive cells, and the amount of the secreted NS1. Significant immunomodulatory effects were shown by the reduction in secretion of MIF, IL-8 and IL-6. An increase in nitrite production in infected and treated cells was observed with the two extracts in different concentrations. In addition, reduced rates of apoptotic and necroptic cells were significant. Conclusion: There are active compounds in plant species that have antiviral and immunomodulatory capabilities. Therefore, were potential candidates for the development of a product for treatment of dengue. Supported by FIOCRUZ/RPT11D; IOC/PROEP; CNPq; FAPERJ; CAPES / 2017-01-27

Introdução: as verrugas ungueais são consideradas o tumor benigno que mais acomete o complexo ungueal, sendo causadas pelo papiloma vírus humano. A maioria das alternativas terapêuticas é considerada ineficaz, com altas taxas de recidiva, além do potencial risco de distrofia ungueal. A bleomicina é a opção de tratamento que apresenta bom perfil de segurança e altas taxas de cura. A eletroquimioterapia é uma técnica que combina a eletroporação com a prévia administração de uma droga citotóxica de baixa permeabilidade, aumentando assim a penetração da droga no interior das células, o que amplia a eficácia do tratamento. A bleomicina é o agente quimioterápico mais utilizado na eletroquimioterapia, por ser um excelente exemplo de droga citotóxica não permeável à membrana celular (hidrofílica). Objetivos: avaliar a eficácia da eletroquimioterapia com bleomicina intralesional no tratamento das verrugas ungueais, comparando este método, com o uso isolado da bleomicina intralesional, além de descrever os efeitos adversos relacionados com o emprego das duas técnicas. Metodologia: Ensaio clínico randomizado duplo-cego e controlado. Incluíramse 44 pacientes de ambos gêneros, com idade variando entre 18 e 60 anos, e diagnóstico clínico e histológico de verruga ungueal de quirodáctilos. O estudo foi submetido e aceito pelo comitê de ética, e todos os pacientes assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Vinte e dois pacientes foram tratados apenas com bleomicina intralesional e 21 com eletroquimioterapia associada à bleomicina intralesional. Após uma única aplicação, os pacientes foram acompanhados por 180 dias. A comparação da cura entre os grupos foi avaliada pelo teste exato de Fisher para tabelas 2 x 2. O software utilizado foi o XLSTAT 2018. Resultados: dos 44 pacientes que participaram da pesquisa, um paciente do grupo da bleomicina intralesional isolada deixou o estudo antes da realização da técnica. A maioria das lesões se localizava na região periungueal (77,3%), enquanto que, os 22,7% das lesões restantes se localizaram na região subungueal. A média de idade dos pacientes foi de 37 anos para o grupo da eletroquimioterapia associada à bleomicina, e de 36 anos para o grupo da bleomicina. A maioria dos pacientes foi do gênero feminino (68%). Dos 22 pacientes finalizados para o grupo da bleomicina 11 (50,0%) apresentaram cura, enquanto que, dos 21 pacientes finalizados do grupo da eletroquimioterapia associada à bleomicina, 18 pacientes (85,7%) apresentaram cura. Foi observada associação significativa entre os pacientes com ou sem cura e os tratamentos do grupo bleomicina e do grupo eletroquimioterapia associada à bleomicina (teste exato de Fisher; p = 0,022). Nenhum dos pacientes, tanto do grupo da bleomicina, quanto do grupo da eletroquimioterapia associada à bleomicina, apresentou efeitos colaterais sistêmicos. Notou-se que os efeitos colaterais como a necrose hemorrágica e dor moderada ocorreram em maior proporção para os participantes do grupo da eletroquimioterapia associada à bleomicina, com quase 70% do total de 21 pacientes observados. Independentemente da técnica empregada, todos os participantes consideraram os efeitos adversos toleráveis. Conclusão: o uso intralesional da bleomicina associada à eletroporação (eletroquimioterapia), no tratamento das verrugas ungueais (periungueais e subungueais), apresentou cura estatisticamente superior quando comparada ao uso isolado da bleomicina intralesional. Os efeitos colaterais foram mais frequentes no grupo da eletroquimioterapia associada à bleomicina, em relação ao grupo de monoterapia com a bleomicina / Introduction: ungual warts are considered a benign tumor most commonly affecting the nail complex and caused by the human papillomavirus. Most therapeutic options are considered ineffective, with high relapse rates and a potential risk of ungual dystrophy. Bleomycin is a therapeutic option showing good safety profile, and high cure rates. Electrochemotherapy is a technique combining electroporation with the previous injection of a low permeability cytotoxic drug, which increases drug penetration into the cells, and therefore,enhances treatment efficacy. Bleomycin is the most commonly used chemotherapeutic agent in electrochemotherapy because it is an excellent example of cell-membrane non-permeable cytotoxic drug (hydrophilic). Objectives: evaluate the efficacy of electrochemotherapy plus intralesional bleomycin in the treatment of ungual warts in comparison with intralesional bleomycin alone, as well as describe the adverse effects of both techniques. Methodology: the research was a randomized, double-blind, controlled clinical trial. Forty-four 18-60-year-old female and male patients clinically and histologically diagnosed with ungual wart on fingers were included. The study was submitted to and accepted by the Ethics Committee, and all patients signed the Informed Consent Form. Twenty-two patients were treated with intralesional bleomycin alone and 21 with electrochemotherapy associated with intralesional bleomycin. After a single application, patients were followed for 180 days. Cure rate between groups was evaluated by using the Fisher\'s exact test for tables 2 x 2. The software used was XLSTAT 2018. Results: of the 44 included patients, 22 were randomized to the bleomycin group and 21 to the electrochemotherapy plus bleomycin group. One patient of the bleomycin group did not complete the study. Most lesions were located in the periungual region (77.3%), while the remaining 22.7% of lesions were located in the subungual region. Patient\'s mean age was 37 years for the electrochemotherapy plus bleomycin group and 36 years for the bleomycin group. Most patients were females (68%). Of 22 patients in the bleomycin group completing the study, 11 (50%) achieved the cure, while 18 (85.7%) of 21 patients completing the study in the electrochemotherapy plus bleomycin group showed cure. A significant association of patients with or without cure with the treatments received in the bleomycin group and the electrochemotherapy plus bleomycin group (Fisher\'s exact test; p = 0.022). None of the patients in either group had systemic side effects. Local side effects such as hemorrhagic necrosis and moderate pain were observed to occur in a higher proportion for electrochemotherapy plus bleomycin group, with almost 70% of total (21) patients. Regardless the technique used, all participants considered the adverse effects tolerable. Conclusion: the intralesional use of bleomycin associated with electroporation (electrochemotherapy) for the treatment of ungual warts (both periungual and subungual) showed high cure rate when compared with intralesional bleomycin alone. Side effects were more frequently seen in the electrochemotherapy plus bleomycin group than in the bleomycin monotherapy group

Diferentes explantes vegetativos de Bauhinia jorticata Link foram inoculados in vitro para se estabelecer um protocolo de micropropagação com o uso de técnicas de cultura de tecidos. Para tanto, foi avaliado o efeito de diferentes fitorreguladores sobre estes explantes. Estabeleceu-se que os melhores explantes foram aqueles retirados a partir de tecidos da parte aérea (segmentos nodais e de entrenós) tanto para a indução de calos como para micropropagação. Os fitorreguladores ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e 6-Benzilaminopurina (BAP) nas concentrações de 0,25 mg/L e 0,50 mg/L, respectivamente, foram eficientes na indução de calos em 30 dias após a inoculação. BAP na concentração de 0,25 mg/L foi eficaz na indução de micropropagação em 60 dias de cultivo e ácido indolbutírico (IBA) na concentração de 1,0 mg/L foi efetivo na indução do enraizamento em 40 dias de cultivo / Different vegetative explants of Bauhinia forficata Link were inoculated in vitro in order to stablish a micropropagation protocol. The effect of different plant growth regulators was evaluated in the explants. Explants from shoot (nodal segments and internode) showed the best responses for callus induction as well as for micropropagation. The phytoregulators 2,4-dichlorophenoxiacetic (2,4-D) acid and 6- benzilaminopurine (BAP) efficientely induced callus on concentrations of 0,25 mg/L and 0,50 mg/L, respectiveIy, within 30 days after the inoculation. The BAP in a concentration of 0,25 mg/L was effective on the shoots induction within 60 days of cuIture. Indolbutiric acid (IBA) used on a concentration of 1,0 mg/L was effictive on the root induction within 40 days of cuIture