A Uncaria tomentosa (U. tomentosa), popularmente conhecida como \"Unha-de-gato\", é uma planta medicinal nativa das Américas, mundialmente empregada devido às suas atividades anti-inflamatórias e imunomodulatórias. O consumo desta planta ocorre não apenas na forma in natura, mas principalmente como fitoterápico, sendo muitas vezes utilizada de forma indiscriminada pela população. Apesar de vários estudos revelarem as propriedades terapêuticas da U. tomentosa, poucos são os trabalhos que empregam protocolos estabelecidos por agências regulamentadoras internacionais, para a avaliação dos possíveis efeitos tóxicos e imunotóxicos deste fitoterápico. Assim, o propósito do presente estudo foi verificar se a administração de um extrato seco de U. tomentosa, comercialmente disponível no mercado, poderia ocasionar efeitos tóxicos e imunotóxicos em ratos após 90 dias de tratamento. Para isso, 40 ratos Wistars machos foram tratados oralmente com as doses de 15, 75 ou 150 mg/kg de extrato seco de U. tomentosa comercialmente disponível no mercado, contendo teores de alcaloides de acordo com aqueles valores preconizados em literatura. No final do período experimental, os animais foram submetidos à eutanásia para realização de avaliações bioquímicas, hematológicas, histopatológicas, análise de órgãos linfoides e não-linfoides, avaliação das respostas imunes inata, inflamatória e humoral, bem como teste para determinação de reação de hipersensibilidade do tipo IV. Os resultados revelaram aumento nos níveis de ALT dos animais tratados com a dose de 75 mg/kg, e redução nos índices glicêmicos de ratos tratados com 75 e 150 mg/kg de U. tomentosa. Entretanto, somente os ratos tratados com a maior dose exibiram discreta vacuolização centro-lobular hepática; assim, somente os dados de ALT não são sugestivos de efeitos hepáticos adversos da U. tomentosa após um longo período de tratamento. A redução nos índices sanguíneos de glicose dos ratos, após tratamento com a U. tomentosa, podem representar importante risco para seres humanos diabéticos, susceptíveis ao desenvolvimento de hipoglicemia e que fazem uso da U. tomentosa para outros propósitos. Em conclusão, estes estudos demonstraram que, apesar de a U. tomentosa não promover efeitos tóxicos e imunotóxicos, o uso prolongado da mesma, a altas doses, pode promover redução dos índices glicêmicos. / Uncaria tomentosa (U. tomentosa), commonly known as \"Cat\'s claw\", is a native medicinal plant from America, it is employed worldwide for its anti-inflammatory and immunomodulatory activities. The consumption of this plant occurs not only in natura, but mainly as a phytotherapic, used indiscriminately by the population. Although many researchers revealed the therapeutic properties of U. tomentosa, few studies employing established protocols by international regulatory agencies for the evaluation of the possible toxic and immunotoxic effects of this herbal medicine. Thus, the purpose of the present study was to verify if the dry extract of U. tomentosa could promote toxic and/or immunotoxic effects in rats following 90 days of treatment. For this, forty male rats were orally treated with 15, 75 or 150mg/kg of dry extract of U. tomentosa, commercially available, containing levels of alkaloids according to those values recommended in the literature. At the end of experimental period, the rats were killed for the evaluation of the biochemistry, haematology, histopathology, status of the lymphoid and non-lymphoid organs, evaluation of innate, inflammatory and humoral immune responses, as well as a test to determine the delayed type hypersensitivity. The results revealed an increase in the levels of ALT in the animals treated with 75mg/kg and a reduction in the glycaemic levels of rats treated with 75 and 150mg/kg of U. tomentosa. However, only rats treated with the higher dose showed a slight centrilobular hepatic vacuolation; thus, ALT data alone are not suggestive of a hepatic adverse effect of U. tomentosa following long-term treatment. The reduction in blood glucose levels of the rats, could represent an important risk for diabetic humans, who are susceptible to the development of hypoglycaemia and who might use U. tomentosa for purposes other than anti-diabetes. In conclusion, these studies demonstrated that, while U. tomentosa has no immunotoxic effect, long-term U. tomentosa treatment at high doses can promote reduction in glycemic levels.

O melanoma ungueal compreende cerca de 0,7 a 3,5% de todos os tipos de melanoma. Devido à dificuldade no diagnóstico precoce, seu prognóstico é reservado quando comparado às demais formas de melanoma. A amputação falangeana se propõe a extirpar o tumor respeitando os princípios da cirurgia oncológica, apesar de acarretar déficit funcional e estigmas sociais, além de não prolongar a sobrevida, particularmente nos casos iniciais. Abordagens mais conservadoras, como a cirurgia funcional, são utilizadas em casos in situ ou microinvasivos, que consistem na remoção de todo o complexo ungueal e preservação da falange distal, com bom resultado cosmético e funcional. Este estudo retrospectivo propõe comparar a sobrevida de pacientes tratados em cada uma das técnicas mencionadas, a partir de dados coletados de prontuários. Não houve alteração da sobrevida dos pacientes com melanoma ungueal tratados com amputação ou cirurgia funcional / Nail melanoma represents about 0.7-3.5% of all types of melanoma. Because its early diagnosis is difficult, the prognosis is conservative when compared with other forms of melanoma. The phalangeal amputation is intended to excise the tumor according to the cancer surgery principles, despite resulting in functional deficit and social stigmata and failing to extend survival, especially in early cases. More conservative approaches, such as functional surgery, have been used in \'in situ\' or microinvasive cases, which consist of removing the entire nail complex and preserving the distal phalange, provide good aesthetic and functional results. This retrospective study proposes to compare the survival of patients treated with each of these techniques by reviewing the data collected from their medical records. No changes were observed in the survival of nail melanoma patients treated with amputation or functional surgery

O melanoma ungueal compreende cerca de 0,7 a 3,5% de todos os tipos de melanoma. Devido à dificuldade no diagnóstico precoce, seu prognóstico é reservado quando comparado às demais formas de melanoma. A amputação falangeana se propõe a extirpar o tumor respeitando os princípios da cirurgia oncológica, apesar de acarretar déficit funcional e estigmas sociais, além de não prolongar a sobrevida, particularmente nos casos iniciais. Abordagens mais conservadoras, como a cirurgia funcional, são utilizadas em casos in situ ou microinvasivos, que consistem na remoção de todo o complexo ungueal e preservação da falange distal, com bom resultado cosmético e funcional. Este estudo retrospectivo propõe comparar a sobrevida de pacientes tratados em cada uma das técnicas mencionadas, a partir de dados coletados de prontuários. Não houve alteração da sobrevida dos pacientes com melanoma ungueal tratados com amputação ou cirurgia funcional / Nail melanoma represents about 0.7-3.5% of all types of melanoma. Because its early diagnosis is difficult, the prognosis is conservative when compared with other forms of melanoma. The phalangeal amputation is intended to excise the tumor according to the cancer surgery principles, despite resulting in functional deficit and social stigmata and failing to extend survival, especially in early cases. More conservative approaches, such as functional surgery, have been used in \'in situ\' or microinvasive cases, which consist of removing the entire nail complex and preserving the distal phalange, provide good aesthetic and functional results. This retrospective study proposes to compare the survival of patients treated with each of these techniques by reviewing the data collected from their medical records. No changes were observed in the survival of nail melanoma patients treated with amputation or functional surgery

A Uncaria tomentosa (U. tomentosa), popularmente conhecida como \"Unha-de-gato\", é uma planta medicinal nativa das Américas, mundialmente empregada devido às suas atividades anti-inflamatórias e imunomodulatórias. O consumo desta planta ocorre não apenas na forma in natura, mas principalmente como fitoterápico, sendo muitas vezes utilizada de forma indiscriminada pela população. Apesar de vários estudos revelarem as propriedades terapêuticas da U. tomentosa, poucos são os trabalhos que empregam protocolos estabelecidos por agências regulamentadoras internacionais, para a avaliação dos possíveis efeitos tóxicos e imunotóxicos deste fitoterápico. Assim, o propósito do presente estudo foi verificar se a administração de um extrato seco de U. tomentosa, comercialmente disponível no mercado, poderia ocasionar efeitos tóxicos e imunotóxicos em ratos após 90 dias de tratamento. Para isso, 40 ratos Wistars machos foram tratados oralmente com as doses de 15, 75 ou 150 mg/kg de extrato seco de U. tomentosa comercialmente disponível no mercado, contendo teores de alcaloides de acordo com aqueles valores preconizados em literatura. No final do período experimental, os animais foram submetidos à eutanásia para realização de avaliações bioquímicas, hematológicas, histopatológicas, análise de órgãos linfoides e não-linfoides, avaliação das respostas imunes inata, inflamatória e humoral, bem como teste para determinação de reação de hipersensibilidade do tipo IV. Os resultados revelaram aumento nos níveis de ALT dos animais tratados com a dose de 75 mg/kg, e redução nos índices glicêmicos de ratos tratados com 75 e 150 mg/kg de U. tomentosa. Entretanto, somente os ratos tratados com a maior dose exibiram discreta vacuolização centro-lobular hepática; assim, somente os dados de ALT não são sugestivos de efeitos hepáticos adversos da U. tomentosa após um longo período de tratamento. A redução nos índices sanguíneos de glicose dos ratos, após tratamento com a U. tomentosa, podem representar importante risco para seres humanos diabéticos, susceptíveis ao desenvolvimento de hipoglicemia e que fazem uso da U. tomentosa para outros propósitos. Em conclusão, estes estudos demonstraram que, apesar de a U. tomentosa não promover efeitos tóxicos e imunotóxicos, o uso prolongado da mesma, a altas doses, pode promover redução dos índices glicêmicos. / Uncaria tomentosa (U. tomentosa), commonly known as \"Cat\'s claw\", is a native medicinal plant from America, it is employed worldwide for its anti-inflammatory and immunomodulatory activities. The consumption of this plant occurs not only in natura, but mainly as a phytotherapic, used indiscriminately by the population. Although many researchers revealed the therapeutic properties of U. tomentosa, few studies employing established protocols by international regulatory agencies for the evaluation of the possible toxic and immunotoxic effects of this herbal medicine. Thus, the purpose of the present study was to verify if the dry extract of U. tomentosa could promote toxic and/or immunotoxic effects in rats following 90 days of treatment. For this, forty male rats were orally treated with 15, 75 or 150mg/kg of dry extract of U. tomentosa, commercially available, containing levels of alkaloids according to those values recommended in the literature. At the end of experimental period, the rats were killed for the evaluation of the biochemistry, haematology, histopathology, status of the lymphoid and non-lymphoid organs, evaluation of innate, inflammatory and humoral immune responses, as well as a test to determine the delayed type hypersensitivity. The results revealed an increase in the levels of ALT in the animals treated with 75mg/kg and a reduction in the glycaemic levels of rats treated with 75 and 150mg/kg of U. tomentosa. However, only rats treated with the higher dose showed a slight centrilobular hepatic vacuolation; thus, ALT data alone are not suggestive of a hepatic adverse effect of U. tomentosa following long-term treatment. The reduction in blood glucose levels of the rats, could represent an important risk for diabetic humans, who are susceptible to the development of hypoglycaemia and who might use U. tomentosa for purposes other than anti-diabetes. In conclusion, these studies demonstrated that, while U. tomentosa has no immunotoxic effect, long-term U. tomentosa treatment at high doses can promote reduction in glycemic levels.

Submitted by ISABELA CRISTINA GOMES HONÓRIO null (isabelagomeshonorio@gmail.com) on 2016-05-25T19:12:00Z No. of bitstreams: 1 ESTUDO DA DIVERSIDADE GENÉTICA E QUÍMICA DE Uncaria tomentosa Willd. ex Roem. & Schult. E Uncaria guianensis Gmell DE POPULAÇÕES NATURAIS LOCALIZADAS NA AMAZÔNIA..pdf: 2336644 bytes, checksum: 05f34f338ce3e8cd544dea281a52873d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-05-30T17:46:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 honorio_icg_dr_bot.pdf: 2336644 bytes, checksum: 05f34f338ce3e8cd544dea281a52873d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-30T17:46:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 honorio_icg_dr_bot.pdf: 2336644 bytes, checksum: 05f34f338ce3e8cd544dea281a52873d (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Uncaria tomentosa Willd. ex Roem. & Schult. e Uncaria guianensis Gmell. são plantas medicinais nativas da Amazônia, utilizadas na medicina tradicional com ação anti-inflamatória, sofrem pressão antrópica como o desmatamento e extrativismo predatório para uso e necessitam de cuidados em relação à conservação. U. tomentosa é uma das plantas medicinais que compõe a lista da relação nacional de medicamentos essenciais (RENAME) disponibilizada pelo Ministério da Saúde para os municípios brasileiros, através do Sistema Único de Saúde (SUS) e a U. guianensis apesar de não estar nesta lista apresenta também alcaloides oxindólicos pentacíclicos, como marcadores químicos, sendo utilizada popularmente como anti-inflamatória e sua ocorrência na natureza é maior quando comparada à U. tomentosa. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a diversidade genética e química entre os indivíduos de U. tomentosa e U. guianensis por marcador molecular SRAP (Sequence-Related Amplifield Polymosphism) e quantificar os alcaloides oxindólicos pentacíclicos mitrafilina e isomitrafilina em folhas por HPLC. A coleta do material foi feita nos estados do Acre, Amazonas, Amapá e Pará. Para ambas as espécies foram coletadas oito populações, em municípios distintos com 20 indivíduos cada. A genotipagem de U. tomentosa foi realizada utilizando três combinações de primers e os fragmentos submetidos à eletroforese em gel de poliacrilamida. A genotipagem de U. guianensis foi realizada usando quatro combinações de primers e os fragmentos analisados no equipamento 4300 DNA Analyser LI-COR®. A quantificação dos alcaloides oxindólicos pentacíclicos mitrafilina e isomitrafilina foi realizada de acordo com método já descrito na literatura com algumas modificações. Nas populações avaliadas de U. tomentosa a variabilidade genética foi maior dentro (75%) das populações do que entre elas (25%). O valor de Fst foi de 0,246, evidenciando que as populações estão estruturadas em Modelo de Ilhas. A maior porcentagem de locus polimórficos (95,68%) e a maior diversidade genética foram encontradas na população coletada no município de Mâncio Lima - AC. O fluxo gênico foi considerado restrito (Nm=1,57) e não houve correlação entre as distâncias geográfica e genética. Para a espécie U. guianensis, a variabilidade genética também foi maior dentro das populações (81%) do que entre elas (19%). O valor de Fst foi de 0,188, o que mostra que as populações estão se aproximando do Modelo de Ilhas. A maior porcentagem de locus polimórficos (90,21%) e a maior variabilidade genética foram verificadas na população coletada no município de Mazagão-AC. O fluxo gênico foi considerado baixo (Nm = 2,57) e houve fraca correlação entre as distâncias geográfica e genética, portanto considerada não significativa. A maior concentração dos alcaloides mitrafilina (11,17 mg.g-1.PS) e isomitrafilina (2,99 mg.g-1.PS) em U. tomentosa foram encontradas nos indivíduos da população de Tarauacá-AC e em U. guianensis foi de 1,09 mg.g-1.PS de mitrafilina e 0,29 mg.g-1.PS de isomitrafilina encontradas na população de Boca do Acre-AM. Além disso, para essa espécie, foi possível quantificar mitrafilina em apenas 24,8% dos indivíduos e a isomitrafilina em 20,4% dos indivíduos estudados. Conclui-se que a conservação de ambas as espécies deverá ser realizada com a coleta de um maior número de indivíduos nas populações com maiores variabilidades genética e química. / Uncaria tomentosa Willd. ex Roem. & Schult. and Uncaria guianensis Gmell. are medicinal plants natives from Amazonia state, used in the ocidental medicine for its anti-inflammatory effect, which are suffering from the actions of mankind by deforestation and predatory extraction, requesting care for their conservation. U. tomentosa is one of the medicinal plants that make up the national ratio of the list of essential drugs (RENAME) made available by the Ministry of Health to the municipalities through the Unified Health System (SUS) and U. guianensis although this is not list also features pentacyclic oxindole alkaloids, as markers, being popularly used as anti-inflammatory and its occurrence in nature is higher compared to U. tomentosa. The objectives of the present study were to evaluate the chemical and genetical diversity between individuals of U. tomentosa and U. guianensis by molecular marker SRAP (Sequence-Related Amplifield Polymosphism) and quantify pentacyclic oxindolic alkaloides mitraphylline and isomitraphylline in leaves via HPLC. Samples were collected in the states of Acre, Amazonas, Amapá and Pará. For both species, 20 samples were collected from each of the eight populations coming from different locations. The genotyping of U. tomentosa was realized by using the combination of three primers and the fractions submitted to an electrophoresis in acrylamide gel. The genotyping of U. guianensis was realized by using the combination of four primers and the fractions analyzed with a 4300 DNA Analyser LICOR®. The quantification of pentacyclic oxindole alkaloides mitraphylline and isomitraphylline were realized by using the existing method with some modifications. The U. tomentosa populations showed higher genetic variability inside the same population(75%) than between different populations (25%). The value of Fst was 0,246, showing that the populations are following the Island Model. The highest percentage of polymorphic locus (95,68%) and the highest genetic diversity were found in the population from Mâncio Lima - AC. The gene traffic was considered restrictive (Nm=1,57) and there was no correlation between geographic and genetic distances. For U. guianensis, the genetic variability was higher inside same populations (81%) than between different populations (19%). The value of Fst was 0,188, showing that the populations are coming close to the Island Model (modelo de ilhas). A higher percentage of polymorphic locus (90,21%) and a higher genetic variability were confirmed in the population colected in Mazagão - AC. The gene traffic was considered low (Nm = 2,57) and as having a weak correlation between geographic and genetic distances and, therefore, considered not significant. The highest alkaloid concentrations of mitraphylline (11,17 mg.g-1 .PS) and isomitraphylline (2,99 mg.g-1 .PS) in U. tomentosa were found in samples of the population from Tarauacá - AC and in U. guianensis samples showed alkaloid concentrations of 1,09 mg.g-1 .PS of Mitraphylline and 0,29 mg.g-1 .PS of Isomitraphylline in the population from Boca do Acre - AM. Besides that, to this species, it was possible to quantify mitraphylline in only 24.8% of individuals isomitraphylline and 20.4% of subjects studied. It’s concluded that the conservation of both species should be done with the collection of a greater number of individuals in populations with higher genetic and chemical variability.

Diferentes explantes vegetativos de Bauhinia jorticata Link foram inoculados in vitro para se estabelecer um protocolo de micropropagação com o uso de técnicas de cultura de tecidos. Para tanto, foi avaliado o efeito de diferentes fitorreguladores sobre estes explantes. Estabeleceu-se que os melhores explantes foram aqueles retirados a partir de tecidos da parte aérea (segmentos nodais e de entrenós) tanto para a indução de calos como para micropropagação. Os fitorreguladores ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e 6-Benzilaminopurina (BAP) nas concentrações de 0,25 mg/L e 0,50 mg/L, respectivamente, foram eficientes na indução de calos em 30 dias após a inoculação. BAP na concentração de 0,25 mg/L foi eficaz na indução de micropropagação em 60 dias de cultivo e ácido indolbutírico (IBA) na concentração de 1,0 mg/L foi efetivo na indução do enraizamento em 40 dias de cultivo / Different vegetative explants of Bauhinia forficata Link were inoculated in vitro in order to stablish a micropropagation protocol. The effect of different plant growth regulators was evaluated in the explants. Explants from shoot (nodal segments and internode) showed the best responses for callus induction as well as for micropropagation. The phytoregulators 2,4-dichlorophenoxiacetic (2,4-D) acid and 6- benzilaminopurine (BAP) efficientely induced callus on concentrations of 0,25 mg/L and 0,50 mg/L, respectiveIy, within 30 days after the inoculation. The BAP in a concentration of 0,25 mg/L was effective on the shoots induction within 60 days of cuIture. Indolbutiric acid (IBA) used on a concentration of 1,0 mg/L was effictive on the root induction within 40 days of cuIture

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-05-18T13:21:42Z No. of bitstreams: 1 evertonsoaresrocha.pdf: 712182 bytes, checksum: 97a37b4b654611a7c6bee4c33692baf6 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-07-01T18:38:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 evertonsoaresrocha.pdf: 712182 bytes, checksum: 97a37b4b654611a7c6bee4c33692baf6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-01T18:38:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 evertonsoaresrocha.pdf: 712182 bytes, checksum: 97a37b4b654611a7c6bee4c33692baf6 (MD5) Previous issue date: 2012-12-11 / FUNDAMENTOS: As alterações no exame clínico das unhas são frequentes nos adultos e mais raras nas crianças. Existem poucos trabalhos investigando a frequência e a natureza de alterações ungueais em pacientes pediátricos. OBJETIVO: Investigar a prevalência e a natureza de onicodistrofias em crianças escolares e identificar quais são as mais prevalentes. MÉTODOS: Estudo transversal realizado de setembro/2011 a março/2012. Foram examinadas 177 crianças, de 7 a 10 anos, de uma escola pública de Juiz de Fora-MG, Brasil. As alterações encontradas foram registradas com fotografias. As análises estatísticas foram realizadas no SPSS, 15.0. RESULTADOS: Pelo menos um tipo de alteração em uma das unhas de 91 crianças (51,4%) foi detectado. As unhas dos dedos dos pés foram mais afetadas que nas mãos (32,2% contra 24,9%). Constatou-se também uma maior variedade de alterações ungueais nos pés. Foram observadas mais alterações entre as crianças do gênero masculino que entre as do feminino. No grupo de indivíduos melanodérmicos, a percentagem de alterações encontradas foi maior que nos demais grupos de cor da pele. A leuconíquia foi o sinal clínico mais encontrado nas unhas das mãos, enquanto o grupo “onicodistrofias provocadas por traumatismos” constituiu a alteração mais frequente nas unhas dos pés. Nestas, a melanoníquia foi também um sinal clínico frequente. O hábito de roer as unhas (onicofagia) foi relatado por 34 estudantes (19,2%). CONCLUSÃO: Os achados mostram uma prevalência significativa de alterações no exame das unhas. Portanto, recomenda-se que a inspeção das unhas das mãos e dos pés faça parte do exame clínico dermatológico pediátrico. / BACKGROUND: Changes in the clinical examination of the nails are frequent in adults and rarer in children. There are few studies investigating the frequency and nature of nail alterations in infant patients. OBJECTIVE: To investigate the prevalence and nature of onychodistrophies in schoolchildren and to identify which are the most prevalent. METHODS: a cross-sectional study was carried out from September 2011 to March 2012. One hundred and seventy-seven children have been examined, aged 7-10 years, from a public school of Juiz de Fora-MG, Brazil. The alterations were recorded by photographs. The statistical analysis was performed in SPSS, 15.0. RESULTS: At least one type of change in one of the nails of 91 children (51.4%) was detected. The nails of the toes were more affected (32.2%) than in the hands (24.9%). A greater variety of nail changes in the feet was also observed. Most changes were noted among male children than among females. The percentage of changes found in the group of melanodermic individuals was greater than in the other groups of colored skin. Leukonychia was the most frequent clinical sign found in fingernails, while the group "onychodistrophies caused by trauma" was the most frequent change in the toenails. In these, the melanonychia was also a frequent clinical sign. The habit of nail biting (onychophagy) was reported by 34 students (19.2%). CONCLUSION: The findings show a significant prevalence of alterations in the examination of the nails. Therefore, it is recommended that the inspection of the nails of the hands and feet takes part of pediatric dermatological clinical examination.

A Uncaria tomentosa (Willd.) DC., comumente conhecida como unha de gato ou cat´s claw, é uma planta endêmica da Amazônia Peruana. Devido às suas propriedades terapêuticas, seus extratos e derivados são comercializados ao redor do mundo. As propriedades medicinais são atribuídas aos glicosídeos do ácido quinóvico, polifenois e especialmente aos alcalóides oxinólicos pentacíclicos. Assim, a mitrafilina é o principal alcalóide presente nos extratos da planta e, portanto, é o marcador químico de suas formulações comerciais. O processo de extração é uma etapa importante na padronização de seus extratos e, considerando a falta de estudos a respeito de sua influência sob o perfil fitoquímico, amostras de casca de unha de gato foram extraídas por meio de maceração dinâmica e extração assistida por micro-ondas. O objetivo desse estudo foi avaliar a influência dos fatores envolvidos no processo extrativo a respeito de sua composição química, atividade anti-inflamatória e antioxidante. Devido ao grande número de fatores de extração a serem avaliados, um planejamento experimental do tipo Placket Burman foi selecionado e os fatores escolhidos nessa etapa foram: porcentagem de planta em solvente, temperatura e tempo de extração. Adicionalmente, através de um planejamento Box Behnken, as condições ótimas de extração foram delineadas na segunda etapa do estudo. O tempo e a porcentagem de planta em solvente foram fatores significantes para a extração assistida por micro-ondas. Entretanto, o conteúdo de mitrafilina nesses extratos foi reduzido - comparativamente ao seu conteúdo total presente nas amostras analisadas - e, portanto, mais estudos são necessários para otimizar o seu rendimento. Além disso, o extrato otimizado foi avaliado quanto à capacidade anti-inflamatória, em um teste de edema de pata induzido por carragenina e apresentou uma capacidade inibitória na concentração de 0,57 mg de mitrafilina/ Kg de rato. Por conseguinte, tais achados confirmaram a sua atividade anti-inflamatória. Os resultados obtidos a partir da extração por maceração dinâmica sugerem que o alcalóide é facilmente extraído, pois não foi afetado por nenhuma das variáveis experimentais. Adicionalmente, os extratos apresentaram maior conteúdo de mitrafilina - comparativamente aos resultados observados na extração por micro-ondas. Entretanto, devido ao menor tempo empregado na extração assistida por micro-ondas, outros estudos são necessários a fim de otimizar a extração desse alcalóide por esse método. O extrato otimizado sob as condições de maceração dinâmica foi seco em spray drying e, utilizando um planejamento de mistura do tipo simplex-centroid, o efeito de diferentes misturas de três adjuvantes foi avaliado: Dmanitol, maltodextrina e Aerosil. Embora os extratos secos com Aerosil e maltodextrina tenham prevenido a degradação de mitrafilina - quando comparado ao extrato seco sem excipiente - a secagem resultou em elevada perda no conteúdo de alcalóide e também propriedades farmacotécnicas inadequadas. Tais observações sugerem que, mesmo em condições amenas de secagem, há a degradação do alcalóide. Portanto, tais resultados reforçam a necessidade de avaliações complementares a fim de prevenir a ocorrência de tais eventos / The Uncaria tomentosa (Willd.) DC. commonly known as unha-de-gato or cat´s claw is an endemic plant from the Peruvian Amazon. Due its therapeutic properties, the crude drug and a variety of extracts are commercialized worldwide. The healing properties are attributed to the glycosides of quinovic acid, polyphenols, and especially to the pentacyclic oxindole alkaloids. Thereby, mitraphylline is the main alkaloid present in the bark extract of U. tomentosa, and therefore, is the chemical marker of commercial formulations derived from the plant. The extraction process is an important step in the standardization of plant extract and considering the lack of studies that relate the influence of extractive processes in phytochemical profile of the cat´s claw extracts, the bark samples were extracted by dynamic maceration and microwave assisted extraction. The study aimed evaluate the influence of the extraction factors on the chemical composition, antioxidant and anti-inflammatory activities of the extracts from cat \'s claw barks. Due to the wide number of possible extraction factors to be evaluated and the lack of knowledge about the importance of this factor effects on U. tomentosa extract, the Placket Burman factorial design was selected and the experimental factors chosen in this step were: % plant solvent ratio, temperature and extraction time. Through a Box Behnken planning the optimal extraction conditions of cat´s claw bark will be outlined in the second stage of this work. The time and % plant solvent ratio were significant factors for microwave assisted extraction. However, the contents extracted of mitraphylline have been reduced - compared to the total yield of the plant - and, therefore, more studies are needed to optimize the alkaloid yield. The extract from the optimized conditions, was evaluated in carrageenan-induced rat paw oedema, and presented inhibitory capacity in concentration of 0.57 mg of mitraphylline / kg of rat. Therefore, these findings confirm its anti-inflammatory activity. The results obtained in the extractions by dynamic maceration, suggest that the alkaloid is easily extracted and is not affected by experimental variables. In addition, compared to microwave extraction, this methodology allowed extracts with higher content of mitraphylline. However, in view of the shorter extraction time employed in microwave extraction, other reviews are needed to increase the extraction of mitraphylline, by this method. The extract optimized by the conditions under dynamic maceration was dried in spray drying and using a simplex-centroid mixture design, the effect of different mixtures of three adjuvants - D- mannitol, maltodextrin and Aerosil- were evaluated. Although dried extracts with the aid of Aerosil and maltodextrin slightly prevented the degradation of mitraphylline - as compared to the dry extract without excipient - the drying process resulted in high loss in the total content of this alkaloid and inadequate physical properties. Such observation suggests that, even under the mild drying conditions, there is degradation of the alkaloid. Therefore, these results reinforce the need for auxiliary evaluations to prevent the occurrence of such events.

Uncaria tomentosa (Willd) DC. é uma árvore nativa das Américas Central e do Sul, onde é popularmente conhecida como "unha-de-gato". Sua casca é largamente utilizada na medicina tradicional para o tratamento de diversas doenças, como gastrite, asma e artrite. Quanto à sua composição química é descrita a presença de alcalóides indólicos e oxindólicos, compostos polifenólicos e derivados do ácido quinóvico. Este trabalho teve como objetivo obter em separado frações enriquecidas dos referidos grupos químicos de Uncaria tomentosa, empregando o procedimento de extração em fase sólida, bem como a validação dos métodos analíticos aplicados a cada fração bioativa. Adicionalmente, as frações enriquecidas foram avaliadas quanto ao potencial efeito antiproliferativo contra linhagens de células de glioma e atividade imunoadjuvante empregando como modelo vacinas virais contendo BoHV-5, respectivamente em ensaios in vitro e in vivo. Todos os métodos de análise necessários para o acompanhamento e controle de qualidade da matéria-prima e produtos de transformação foram validados de forma satisfatória. O procedimento de separação/purificação empregando resina de poliestireno demonstrou resultados robustos e reprodutíveis e permitiu a separação de frações ricas em compostos fenólicos, alcalóides e triterpenos. Em outro plano, foi possível constatar a isomerização dos alcalóides pentacíclicos em meio aquoso por efeito do processo de secagem empregando elevadas temperaturas. O método de análise para a quantificação de polifenóis foi discriminatório quando aplicado aos extratos obtidos de diferentes órgãos de U. tomentosa. As frações fenólica e alcaloídica foram capazes de diminuir a porcentagem de células viáveis das linhagens de glioma C6 e U138-MG após período de tratamento de 48 e 72 h, respectivamente. Complementarmente, estas frações não afetaram as células não-tumorais na mesma extensão em que afetam as células cancerosas. No tocante à avaliação da atividade imunoadjuvante, um pequeno efeito foi observado apenas na resposta imune dos animais imunizados com a fração triterpênica. / Uncaria tomentosa (Willd) DC. is a climbing tree native from Central and South America, where is commonly known as “uña-de-gato” or “cat’s claw”. Its bark is widely used in traditional medicine for the treatment of gastritis, asthma and arthritis. Concerning its chemical composition is worth mentioning the presence of indole and oxindole alkaloids, phenolic compounds and quinovic acid derivatives. This work aims to obtain enriched fractions of the three main chemical groups of Uncaria tomentosa above described using solid phase extraction procedure, as well as the validation of specific assay methods. In parallel, potential antiproliferative effect against glioma cell lines and imunoadjuvant activity using BoHV-5 viral vaccine are evaluated by in-vitro and in-vivo models, in that order. All analytical methods required for monitoring and end-process quality control were validated satisfactorily. The separation/purification procedure using a polystyrene resin gave promising results and allowed the separation of phenolics, alkaloids and triterpenes fractions. Fractions yield were in all satisfactory and the processes were robust and reproducible. It could confirm the alkaloid isomerization in aqueous milieu by effect of the temperature process. The LC method for assay of polyphenols was discriminatory when applied to extracts from different organs of U. tomentosa. The fractions of phenolic and alkaloids compounds were able to decrease the percentage of cells in C6 and U138-MG glioma lineages after a 48h and 72h-treatment, respectively. Moreover, these fractions did not affect non-tumoral cells to the extent that they affect tumor cells. With regard to the imunoadjuvant activity evaluation a moderate effect was detected on immune responses of immunized animals with triterpenes fraction.

A espécie Uncaria tomentosa (Rubiaceae) é reconhecida por diversos povos sul-americanos, devido a sua importância etnofarmacológica. Na sua maioria, os estudos realizados com U. tomentosa empregam como matéria prima vegetal a casca, devido à fração rica em alcalóides. Entre os constituintes químicos relatados para a espécie destacam-se os flavonóides, triterpenos e alcalóides, aos quais é atribuído um número significativo de propriedades terapêuticas. A escassez de metodologias analíticas para o doseamento do teor de alcalóides de U. tomentosa motivou a realização do presente trabalho, que visa à validação de metodologia analítica para matéria prima vegetal (DVSM), extrato seco (ESC) e cápsulas contendo extrato seco de Uncaria tomentosa DC. O estudo propôs a utilização de metodologia espectrofotométrica e cromatográfica para a quantificação de teores totais de alcalóides. Para fins de identificação da espécie foram utilizados métodos cromatográficos por CCD, preconizados para flavonóides e alcalóides. O perfil por CCD encontrado para a DVSM, liofilizado e ESC foi diferente do relatado na bibliografia. O teor de alcalóides do extrato seco comercial (ESC), utilizando método espectrofométrico foi de 8,41 mg/g, apresentando uma taxa de recuperação de 100,45%. Paralelamente, foi desenvolvido e validado um método de análise por CLAE para o ESC, que permitiu a quantificação da fração alcaloídica, expressa como isomitrafilina. O teor de alcalóides totais encontrado foi de 14,58 mg/g e apresentou taxa de recuperação de 99,95 a 100,44%. No teste de robustez do método analítico por CLAE, o ESC apresentou variações significativas com a variação do pH e da temperatura. O ESC contido em cápsulas de gelatina foi testado quanto à estabilidade térmica, por um período de 90 dias, a 50 ± 2 ºC e 90 ± 5% de umidade relativa. O perfil de alcalóides totais foi obtido por CLAE e ao ser comparado com o ESC, não exposto a condições extremas, apresentou teores equivalentes, porém, com mudança no perfil da fração alcaloídica, o que pode caracterizar produtos de degradação. Um perfil similar foi observado quando o ESC foi exposto à luz UVC por 90 dias. / Uncaria tomentosa DC (Rubiaceae; cat’s claw) is a climbing bush widespreads in the tropical South American countries, in which its etnopharmacological importance is largely recognized. The main phytochemical studies on U. tomentosa revealed a meaningful alkaloid fraction in its aerial parts and especially on its bark. Besides that, other relevant components were also isolated from its bark, including flavonoids and triterpenes, to which several pharmacological properties were formerly ascribed. Notwithstanding the crescent importance in the research of novel drugs, it is to denote the lack of official and validated analytical methods intended for the determination of the alkaloids content in U. tomentosa. Thus, the aim of this work was the development and validation of analytical method which allow the analysis and content determination of the main alkaloids in the vegetal raw material (DVSM), a commercial dry extract as well as in gelatin hard capsules containing it. For this purpose, a spectrophotometric method and a chromatographic one were developed and afterwards validated. In both cases the total alkaloids content was expressed as isomitraphiline (reference standard). The identification by CCD analysis was carried out on basis to several methods related earlier in the literature for flavonoids and alkaloids. In general, the comparison from CCD profiles of genuine samples of U. tomentosa bark depicted in the literature, DVSM, dry extract and ESC profiles led to partial dissimilar results, which reinforce the need of additional efforts in this way. The alkaloids content calculated spectrophotometrically for the commercial dry extract (ESC) was 8,41 mg/g, with a recover of 100,45%. For the HPLC method, the total alkaloids content correspond to the sum of the area under the peaks previously characterized as alkaloids. The alkaloids content calculated for the same extract by HPLC was 14.58 mg/g, with a recover rate of 99,95 to 100,44%. The method as a whole fulfills the usual ICH validation requirements. The stability test under stress conditions of pH and temperature for the ESC presented a significant variation of the individual area of some peaks. The original peaks assigned to isomitraphiline, pteropodine and isopteropodine showed a decrease in intensity and a concomitant appearance of new peaks, originated from breakdown process presumably. A similar profile was observed by exposing ESC samples to the wave short UV radiation during 90 days. There are also evidences in favor of degradation signals in non-treated ESC samples.