Tese de mestrado integrado. Engenharia Civil (Especialização em Estruturas). Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2009

Tese de mestrado. Engenharia Biomédica. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2012

Estágio realizado na Instituto Nacional de Saúde Doutor Ricardo Jorge, I.P. (INSA, I.P.). e orientado pelo Doutora Ana Margarida Heitor / Tese de mestrado integrado. Engenharia Química. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 2009

As atividades a serem realizadas na área do empreendimento RMB (Reator Multipropósito Brasileiro), cujas instalações e infraestrutura agregadas serão localizadas no estado de São Paulo, no município de Iperó, podem envolver a liberação de efluentes para o meio ambiente, seja de forma controlada ou não, do mesmo modo que qualquer outra instalação. Os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs) estudados neste trabalho apresentam comportamento ubíquo, são considerados compostos químicos com alta toxicidade, persistência no meio ambiente, potencial bioacumulativo e forte tendência de se biomagnificar. O objetivo desse trabalho foi determinar 14 dos 16 HPAs majoritários, classificados pela USEPA, nas amostras de águas superficiais e subterrâneas da área de instalação do RMB e seu entorno. Foram avaliados quatro períodos distintos utilizando uma metodologia já desenvolvida e validada por Brito (2009). Foi verificado o cenário atual em relação às concentrações dos HPAs nas águas da região que será construído o empreendimento, RMB, fornecendo uma visão geral do grau de contaminação ou não dos corpos hídricos, o que contribuirá com um banco de dados para pesquisas futuras. Paralelamente, foi validado e aplicado um método analítico já existente para avaliação de HPAs nos sólidos suspensos da coluna d\'água das amostras coletadas. A avaliação preliminar da área estudada demonstrou que o local do projeto RMB é preservado, mas alguns corpos d\'água ao redor da área, como o rio Sorocaba, apresentam concentrações significativas de HPAs, provavelmente em razão das atividades antropogênicas no entorno, indicando que a área precisa de uma maior atenção. Utilizando a técnica analítica de HPLC com detecção UV/vis, foram quantificados compostos como Acenaftileno Fluoreno e Fenantreno acima do valor legislado nas amostras de água. Foram observadas baixas concentrações de praticamente todos os compostos estudados no material em suspensão e alguns compostos como Fluoreno, Acenafteno, Acenaftileno e Benzo[b]fluoranteno, em concentrações mais altas, é necessário um programa de monitoramento constante, para que a partir dos dados obtidos, possa-se tomar decisões concisas de controle. / The activities to be carried out in the area of the RMB (Brazilian Multipurpose Reactor) project, whose aggregate facilities and infrastructure will be located in the state of São Paulo, in the municipality of Iperó, may release effluents into the environment, either in a controlled or not in the same way as any other installation. The polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) studied in this work are ubiquitous and considered chemical compounds with high toxicity, persistence in the environment, bio accumulative potential and strong tendency to bio magnify. The objective of this study was to determine 14 of the 16 major PAHs, classified by the USEPA, in the surface and groundwater samples of the RMB installation area and its surroundings. Four distinct periods were evaluated using a methodology already developed and validated. The current scenario was verified regarding the PAHs concentrations in the waters of the region that will be built the RMB, providing an overview of the degree of contamination of the water bodies, which will contribute to a database for future research. At the same time, an analytical method was validated and applied to evaluate PAHs in the suspended solids of the water column of the collected samples. The preliminary evaluation of the studied area demonstrated that the site of the RMB project is preserved, but some water bodies around the area, such as the Sorocaba River, present significant concentrations of PAHs, probably due to the anthropogenic activities in the surroundings, indicating that the area needs more attention. Using the analytical HPLC technique with UV/vis detection, compounds such as acenaphthylene, fluorene and phenanthrene were quantified above the legislated value in the water samples. Although low concentrations of practically all compounds studied in the suspended material have been observed and some compounds such as fluorene, acenaphthene, acenaphthylene, and benzo[b]fluoranthene at high concentrations, a constant monitoring program is required to that from the data obtained, one can make concise decisions of command and control.

Orientador: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: Marcelo Vasconcelo Meireles / Banca: Daniel de Jesus Cardoso de Oliveira / Banca: Andréa Fontes Garcia / Resumo: Esse estudo teve como objetivo a padronização de um ensaio imunoenzimático (ELISA) para a determinação das concentrações plasmáticas de IGF-I total, utilizando o sistema de amplificação biotina-estreptavidina peroxidase em um ensaio competitivo. O IGF-I foi extraído da IGFBP, utilizando o tampão glicina acidificado seguido de neutralização do pH com hidróxido de sódio. As microplacas foram sensibilizadas com anti IgG de coelho, e as dosagens realizadas utilizando duas abordagens, um método sem competição (incubação prévia das amostras com o anticorpo anti-h-IGF-I) e outro com competição (adição simultânea de IGF-I biotilinado e amostra). Os melhores resultados foram obtidos utilizando o método competitivo, com a sensibilização da placa com 0,25 μg/poço de IgG anti-coelho, o anticorpo específico na diluição 1:250.000 e 0,06 ng/poço de IGF-I biotinilado. O ensaio in house apresentou, um limite inferior de detecção de 50 ng/mL, uma correlação de 0.945 entre doses quando comparado à uma metodologia comercial. Além disso, após 33 ensaios (1114 amostras) a metodologia apresentou uma boa precisão, com coeficientes de variação inter-ensaio de 12,94% (345,8 ng/mL) para os controles alto e 20,71% (131,6 ng/mL) para o baixo. Dessa forma, conclui-se que a metodologia imunoenzimática para quantificação de IGF-I total utilizando o sistema de amplificação biotina-estreptavidina peroxidase em um ensaio competitivo está estabelecida e apresenta-se como uma ferramenta útil para estudos que vis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to standardize an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to determine plasma concentrations of total IGF-I using the amplification biotin-streptavidin peroxidase system in a competitive assay. The IGF-I was extracted from IGFBPs using the acidified glycine buffer followed by the pH neutralization with sodium hydroxide. The microplates were coated with anti-rabbit IgG, thereafter the measurements were carried out using two approaches, one without competition (prior incubation of samples with the anti-hIGF-I antibody) and another with competition (simultaneous addition of IGF-I and biotinylated sample). The best results were obtained using the competitive method, with the following combination of reagents: microplates were coated with 0.25 µg/well of anti-rabbit IgG, the specific antibody at a dilution of 1:250.000 and 0.06 ng/well of biotinylated IGF-I. The in house methodology showed sensitivity of detection limit of 50 ng/ml, a correlation between doses of 0.945 when compared to a commercial method. In addition, after 33 assays (quantification of 1114 samples) the proposed methodology presented a good precision, with interassay variation coefficients of 12.94% and 20.71% for the high and low controls, respectively. Finally, we concluded that ELISA method for the quantification of total IGF-I using the system biotin-streptavidin-peroxidase amplification in a competitive assay is established and is presented as a useful tool for studies aimed at monitoring ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-06Bitstream added on 2014-06-13T20:40:26Z : No. of bitstreams: 1 moreno_ah_dr_arafcf.pdf: 734221 bytes, checksum: 23d30186e23eb1eee2cdbb3e636c93ab (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A ceftazidima é uma cefalosporina semi-sintética de terceira geração com grande atividade antibacteriana, muito usada no tratamento de infecções bacterianas freqüentes, incluindo espécies de Proteus e Pseudomonas aeruginosa e foi considerada fármaco de escolha para infecções graves causadas por espécies de Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Providencia, Serratia e Haemophylus. Entre elas, infecções biliares, ósseas e nas articulações, fibrose cística (infecções do trato respiratório), endoftalmites, infecções em pacientes imunodeprimidos (neutropênicos), meningite, peritonite, pneumonia, septicemia, infecções da pele (queimaduras e ulcerações) e infecções do trato urinário. As propriedades favoráveis da ceftazidima são penetração eficiente na parede celular bacteriana, resistência à degradação enzimática pelas bactérias, amplo espectro de atividade, toxicidade muito baixa, extensa penetração nos tecidos, estabilidade metabólica e baixa taxa de ligação a proteínas plasmáticas. A ceftazidima é de administração injetável como sal sódico ou em solução com arginina, sendo amplamente distribuída nos tecidos e fluidos; ela atravessa a placenta e é distribuída no leite materno. A penetração no humor aquoso do olho é relativamente boa após administração sistêmcia de ceftazidima. Há algumas evidências de que concentrações suficientes para terapia de infecções oculares causadas por microrganismos gram-positivos ou gram-negativos podem ser obtidas após administração sistêmica. Apesar de a ceftazidima ser bem estudada no que se refere à atividade terapêutica e comercialização, há somente um método oficial farmacopéico para sua quantificação por cromatografia líquida de lata eficiência. / Ceftazidime is a semisynthetic cephalosporin of the third generation with high antibacterial activity, widely used in the treatment of commonly-occurring bacterial infections, including indole-positive Proteus species and Pseudomonas aeruginosa and have been considered to be the drugs of choice for serious infections caused by Klebsiella, Enterobacter, Proteus, Providencia, Serratia and Haemophylus species. They include biliarytract infections, bone and joint infections, cystic fibrosis (respiratory-tract infections), endophthalmitis, infections in immunocompromised patients (neutropenic patients), meningitis, peritonitis, pneumonia, septicaemia, skin infections (including burns, ulceration) and urinary-tract infections. The favorable properties of ceftazidime include efficient penetration of the bacterial cell wall, resistance to bacterial enzyme degradation, a broad spectrum of activity, very low toxicity, extensive tissue penetration, metabolic stability, and a low degree of serum protein binding. Ceftazidime is administrated by injection as the sodium salt or in solution with arginine and is widely distributed in body tissues and fluids; it crosses the placenta and is distributed into breast milk. Penetration into the aqueous humor of the eye is relatively good after systemic administration of ceftazidime. There is some evidence that concentrations sufficient for therapy of ocular infections due to gram-positive and certain gram-negative microorganisms can be achieved after systemic administration. Although ceftazidime has been studied in terms of therapeutic activity and commercialized, there is only one official pharmacopoeial monograph on its quantification by high performance liquid chromatography.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:37:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6425.pdf: 1787506 bytes, checksum: 7e67a9a8d64593938b64a4912b627c7e (MD5) Previous issue date: 2014-09-19 / The increased demand for chemical analysis and the growing concern with the environment implies in the urgency for more modern analytical methods of extraction and analysis to be developed and validated, seeking a significant reduction in solvent consumption and analysis time. In the present work it was purpose to make use of modern, cheaper and faster sample extraction techniques, as well as chromatographic system based on ultrafast chromatograph systems (UHPLC), using columns packet with reduced diameter of particles that enable to reduce significantly the time of analysis, solvent consumption and reagents, and coupling with mass spectrometry (LC-MS/MS). All developed methods were fully validated according to the RDC 27/2012 and the RDC 04/2012 in the case of pesticides. All results are within the parameters required for each standard validation. An average 50% reduction in analytical costs, increasing profitability, and the productive capacity of laboratories with the reduction of materials and analysis time where achieved. / O aumento na demanda de análises químicas e a crescente preocupação com o meio ambiente faz com que métodos analíticos mais modernos de extração e análise sejam desenvolvidos e validados, buscando uma redução significativa no consumo no solvente e no tempo de análise Este projeto tem como objetivo fazer uso de técnicas modernas, mais baratas e mais rápidas de extração de amostras, bem como utilizar sistemas cromatográficos ultrarrápidos (UHPLC), com o emprego colunas com diâmetro de partículas reduzidos que possibilitam reduzir significativamente o tempo da análise, o consumo de solventes e de reagentes, utilizando sistemas de cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS/MS). Todos os métodos desenvolvidos foram validados de acordo com a RDC 27/2012 e a RDC 04/2012 no caso de pesticidas. Todos os resultados obtidos estão dentro dos parâmetros exigidos de cada norma de validação. Com os resultados obtidos foi alcançada uma redução média de 50% nos custos das análises, aumentando a lucratividade e a capacidade produtiva dos laboratórios de análise com a redução de insumos e tempo de análise.

Orientador:Mario Jefferson Quirino Louzada / Co-orientador:Paulo Cesar Ciarlini / Banca:Tatiana de Sousa Barbosa / Banca:Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo:A determinação da capacidade antioxidante total (TAC) tem importância fundamental na avaliação do estresse oxidativo, tanto em humanos como em animais. Cada vez mais tem se tornado relevante o estudo de metodologias para determinar a TAC em várias áreas como em tecnologia e ciência de alimentos, laboratórios clínicos, nutrição animal e humana. Na espécie ovina esta determinação ainda não foi validada. Antes de iniciar qualquer tipo de análise da TAC, o método utilizado deve ser validado, pois a validação de métodos é um aspecto primordial da garantia da qualidade analítica. A validação é um processo dinâmico e constante, que se inicia na fase de seleção, desenvolvimento e otimização do método, qualidade dos instrumentos, materiais e analistas, permanecendo na fase de experimentos. Um processo de validação bem definido deve obedecer às características investigadas no processo de validação a fim de demonstrar o desempenho do método como: linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, precisão, exatidão, recuperação analítica e robustez. O método mais comumente utilizado para determinar a TAC é o método espectrofotométrico-colorimétrico que usa (ABTS˙+) 2,2'-azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-sulfonato). Apesar da existência de muitas técnicas modernas, o método espectrofotométrico tem demonstrado ser eficaz, além do baixo custo e de fácil manuseio. O método foi desenvolvido, padronizado e validado / Abstract:The determination of total antioxidant capacity (TAC) is important to evaluation of oxidative stress, in both humans and animals. The study of methodologies to the determination of TAC has become relevant in several areas such as technology and food science, clinical laboratory, animal and human nutrition. In sheep, this determination has not yet been validated. Before starting any type of analysis, the method used for TAC measurement must be validated, since method validation is a key aspect of analytical quality assurance. Validation is a dynamic and ongoing process that begins at the stage of selection, development and optimization of the method, the quality of the tools, materials and analysts, remaining in the experimental phase. A well defined process of validation must have the characteristics investigated in the validation process to demonstrate the performance of the method as: linearity, limit of detection, limit of quantification, accuracy, precision, analytical recovery and robustness. The most commonly used method used to determine the TAC is the spectrophotometric-colorimetry assay using the (ABTS˙+) 2,2'-azinobis (3- ethylbenzthiazoline-6-sulfonate). Despite the existence of many modern techniques, the spectrophotometric method has shown to be effective, in addition to lower cost and easy handling. The method was developed, validated and standardized / Mestre

A leflunomida é um pró-fármaco anti-reumático encontrado na forma de comprimidos revestidos com nome comercial ARAVA que, in vivo, é rápida e extensamente convertida a seu metabólito ativo A77 1726. Considerando a ausência de metodologia de controle de qualidade na literatura para a leflunomida, foram desenvolvidos métodos de caracterização e quantificação da leflunomida matéria-prima e na forma de comprimido, além de estudo preliminar de sua estabilidade. As técnicas de ponto de fusão, espectroscopia no IV, RMN 1H e 13C e CLAE associada a detector de arranjo de diiodos foram utilizadas para identificação e caracterização da leflunomida. O A77 1726 foi sintetizado e caracterizado pelas técnicas de espectroscopia no IV, RMN 1H e 13C, CLAE e DSC. Foi desenvolvido e validado método analítico para quantificação da leflunomida em comprimidos por CLAE utilizando coluna C18, ACN:água (50:50) como fase móvel e detecção em 254 nm. O método apresentou parâmetros cromatográficos adequados e parâmetros de desempenho analítico satisfatórios, com limite de detecção de 10 ng/mL. Método por espectroscopia derivada no UV foi desenvolvido e validado como alternativa para quantificação da leflunomida em comprimidos. A comparação do método por UV derivada com a CLAE, para determinação da leflunomida em comprimidos, mostrou que os métodos são intercambiáveis, creditando a técnica de UV para testes de controle de qualidade de rotina. Foram realizados estudos de degradação forçada dos comprimidos de leflunomida submetendo amostras à temperatura de 80 ºC ou exposição à radiação UV a 254 nm com lâmpada germicida. O principal produto de degradação encontrado foi o A77 1726. Além disso, outro produto de degradação, com tempo de retenção de 5,5 min (CLAE), apresentou quantidades significativas no estudo de degradação térmica.

Banca examinadora: Profª. Drª. Alzira Maria D´Avila Nery Guimarães - UFS (Orientadora); Profª Drª Ana Angélica Ribeiro de Meneses e Rocha - (ISC-UFBA); Profª Drª Isabela Cardoso de Matos Pinto - (ISC-UFBA). Data de defesa 15 de março de 2012. / Submitted by Maria Creuza Silva (mariakreuza@yahoo.com.br) on 2012-09-24T13:41:53Z No. of bitstreams: 1 Diss MP. Ademilde Andrade 2012.pdf: 575295 bytes, checksum: 1ed9a7766a1865b236470387d51d0aa8 (MD5) / Approved for entry into archive by Maria Creuza Silva(mariakreuza@yahoo.com.br) on 2012-09-24T14:06:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Diss MP. Ademilde Andrade 2012.pdf: 575295 bytes, checksum: 1ed9a7766a1865b236470387d51d0aa8 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-24T14:06:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Diss MP. Ademilde Andrade 2012.pdf: 575295 bytes, checksum: 1ed9a7766a1865b236470387d51d0aa8 (MD5) Previous issue date: 2012 / A visita domiciliar (VD) é um dos instrumentos mais relevantes do trabalho dos profissionais da Estratégia de Saúde da Família, pois possibilita conhecer os problemas, fragilidades e necessidades dos usuários no domicílio. Considerando a inexistência de um instrumento específico para registrar tal atividade, esta pesquisa tem o objetivo elaborar e validar um instrumento para acompanhamento das VDs, no trabalho das equipes de saúde da família, na rede da Atenção Primária à Saúde do município de Aracaju/SE, tendo como amostra representativa todos os profissionais da equipe mínima de saúde da família. No processo de avaliação da estrutura e conteúdo da ficha, utilizou-se a técnica de Delhpi, no constructo a consistência interna foi obtida por intermédio do coeficiente de fidedignidade de alfa Cronbach (α). Quando avaliados a estrutura e conteúdo, todos os itens da Ficha B-VD foram mantidos com algumas alterações, obtendo-se um consenso de 91,4% em dois ciclos de execução. O alfa Cronbach alcançou um coeficiente de 0,95 para o total dos itens e variou de 0,82 a 0,94 nas três dimensões avaliadas. Estes resultados indicam que o instrumento foi validado satisfatoriamente, possibilitando o acompanhamento e registro das famílias nas VDs, recomendando-se a sua inclusão na rotina das equipes de saúde da família do município de Aracaju. / Salvador