OBJETIVO: demonstrar as alterações histológicas secundárias ao uso de bevacizumabe na aorta descendente de suínos submetida à interrupção dos vasa vasorum. MATERIAIS E MÉTODOS: em doze suínos, divididos em grupos tratamento e controle (n=6 cada) foi realizada dissecção por 5 cm da aorta torácica, ligadura das artérias intercostais e cobertura com polivinil; o grupo tratamento recebeu uma dose endovenosa única de bevacizumabe. Após quinze dias, os animais foram sacrificados para retirada da artéria e preparo das lâminas histológicas dos grupos tratamento, controle e área não manipulada dos dois grupos. As lâminas foram analisadas com relação aos graus de angiogênese, injúria, inflamação e espessamento intimal. A análise estatística foi conduzida através da média e do desvio-padrão dos escores e as comparações entre os grupos foram realizadas pelo teste de Mann-Whitney. Para obtenção de intervalos de confiança de 95% para as médias das contagens dos escores utilizou-se a distribuição de Poisson, a fim de determinar o efeito estatístico. RESULTADOS: o bevacizumabe causou parefeitos em todos os suínos tratados, com um óbito. As variáveis analisadas através da Escala de Magnitude para Efeito Estatístico, demonstram tendência de redução da angiogênese e da injúria e de aumento da inflamação no limite do moderado. Não ocorreu modificação do espessamento intimal entre os grupos. CONCLUSÃO: a medicação utilizada na lesão da parede arterial induzindo hipóxia, mostrou tendência de redução da angiogênese e da injúria, mas não reduziu o processo inflamatório ou o espessamento intimal da parede arterial. O bevacizumabe mostrou toxicidade no modelo suíno. / OBJECTIVE: To demonstrate histological changes secondary to the use of bevacizumab in the descending aorta of pigs after interruption of vasa vasorum flow. METHODS: Twelve pigs were divided into control and treatment groups (n = 6 each). It was performed a 5-cm dissection of the thoracic aorta, ligation of the intercostal arteries and protection with polyvinyl chloride. Pigs in the treatment group received a single intravenous dose of bevacizumab. After 15 days, the animals were euthanized and the aorta removed. Histological slides were prepared for control and treatment groups and for the non-surgically manipulated part of the aorta in both groups. The slides were analyzed for the degree of angiogenesis, injury, inflammation, and intimal thickening. Data were expressed as mean (SD) of scores and groups were compared using the Mann-Whitney test. The Poisson distribution was used to calculate 95% confidence intervals for the mean scores in order to determine effect statistics. RESULTS: Bevacizumab had adverse effects on all treated pigs, leading to one death. The analysis using a scale of magnitudes for effect statistics showed a trend toward a decrease in angiogenesis and injury and an increase in inflammation for moderate effects. There was no change in intimal thickening in either group. CONCLUSION: The medication used for arterial wall injury inducing hypoxia showed a trend toward reduced angiogenesis and injury, but with no reduction in the inflammatory process or intimal thickening of the arterial wall. Bevacizumab showed toxicity in the porcine model.

Introdução A visão tradicional afirma que as células miointimais responsáveis pela hiperplasia intimal derivam das células musculares lisas da média e que, através da mudança de seu fenótipo para um estado proliferativo, migram para a região intimal Esta visão tem sido contestada em algumas publicações que tem demonstrado o importante papel da adventícia na fisiopatologia da hiperplasia intimal. Objetivo: Analisar as alterações da estrutura da parede da aorta abdominal de suínos secundária a ressecção dos VV presentes na adventícia e no tecido conetivo Peri aórtico e avaliar se estas alterações se modificam com um período mais prolongado de isquemia da parede arterial. Material e método: Trata-se de um estudo experimental com uma série de dez suínos da raça Landrace , com idade entre 8 e12 semanas, pesando em torno de 20Kg. A aorta abdominal foi abordada por incisão retro peritoneal, o tecido Peri - aórtico contento os vasa vasorum e tecido gorduroso foi ressecado e este segmento de 1 cm envolvido por pericárdio bovino. Um grupo de animais foi sacrificado após 4 semanas e outro após 8 semanas. Os cortes histológicos foram corados com hematoxilina e coloração Weigert para identificar melhor as fibras elásticas. Foram analisados o processo inflamatório, neovascularização e a degeneração da camada media assim como a presença de hiperplasia e fibrose subendotelial. Resultado: Em ambas as coortes havia espessamento importante de todo o tecido Peri aórtico e do endotélio. Na coloração com H/E se identificava processo inflamatório moderado a intenso junto ao pericárdio em todos os casos. No grupo de 04 semanas o processo inflamatório e a neovascularização envolvia apenas o 1/3 externo da média e não se observava hiperplasia endotelial ou fibrose subendotelial evidentes. Já no grupo de 8 semanas havia uma progressão do grau de inflamação e neovascularização acentuada envolvendo mais de 2/3 da camada média da artéria. Neste grupo de 08 semanas observa - se hiperplasia endotelial focal, fibrose subendotelial e desestruturação da camada media e duplicação da lamina elástica interna.Conclusão : em nosso estudo, confirmamos que a isquemia da parede vascular secundária a interrupção do fluxo pelos VV mesmo sem lesão da adventícia gerou uma desestruturação da camada média , neovascularização acentuada, fibrose subendotelial e hiperplasia intimal que progride ao longo das 8 semanas. Estes resultados tem implicações práticas para o cirurgião vascular e endovascular, podendo contribuir para um melhor entendimento das re-estenoses secundárias à dissecção arterial nas cirurgias abertas e lesão por estiramento da parede nos procedimentos endovasculares.

A novel technique for saphenous vein (SV) graft harvesting, the No-touch technique (NT), has been developed at the Dept. of Cardiovascular surgery, Örebro University hospital. With NT the SV is harvested with a pedicle of surrounding tissue. This avoids graft spasm and eliminates the need for distension. The surrounding tissue acts as a structural support and is a rich source of vaso-dilating agents. A randomized controlled trial (RCT) has shown a significantly higher patency rate for NT SV grafts compared to SV grafts harvested with conventional technique (CT). This thesis evaluates some of the properties of the surrounding tissue and compares patency rates between NT SV and radial artery (RA) grafts and patency rates for internal thoracic artery (ITA) grafts harvested with and without surrounding tissue. Paper I investigated vasa vasorum (VV) in SV grafts and showed that the NT preserves an intact VV whereas CT does not. This could be one of the mechanisms underlying the improved patency for NT SV grafts. Paper II evaluated VV and associated nitric oxide (NO) in SV and arterial grafts. SV grafts showed a higher number and larger VV, which correlated with NO production, compared to arterial grafts. NT SV grafts showed higher activity for e-NOS compared to CT SV grafts. Paper III is a RCT comparing patency rates between NT SV and RA grafts, three years after surgery, showing a significantly higher patency rate for NT SV grafts. Paper IV is a RCT comparing patency rates for ITA graft harvested with and without surrounding tissue and did not show any difference between graft preparations. In conclusion, the NT for SV graft harvesting preserves an intact vasa vasorum and associated NO production. NT SV grafts show a higher patency rate than RA grafts. Harvesting of ITA with or without surrounding tissue does not affect patency rate.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 batigalia_tese_parte1.pdf: 948858 bytes, checksum: b48f5591911812d8f298686183d84a2a (MD5) Previous issue date: 2003-03-14 / Sociedade de Cardiologia do Estado de São Paulo / Introduction: About half of the cases of atherosclerotic coronary disease (a mean of 15% of women deaths and 25% of men) cannot be explained by most of the known risk factors. Coronary vasa vasorum are associated with coronary artery disease; however, their anatomy and physiopathology are not well clear. Objective: The aim of this study was to carry out a post mortem stereological study of adventitial vasa vasorum in different histopathological degrees of coronary atherosclerosis intending to correlate vasa vasorum, myocardial infarction physiopathology and histopathological degrees of atherosclerosis. Method: Ten consecutive autopsies of adults (5 men, 5 women, from 35 to 83 years-old, frozen at 4o C) were performed. Six proximal, medium and distal biopsies of the anterior and posterior interventricular coronary branches (at intervals of 1.5 cm) were performed per autopsy (a total of 60 coronary biopsy fragments). Fragments were processed by histological routine technique and cut in 4 fragments of 4 mm thickness. The first two consecutive histological fragments were stained by hematoxylin-eosin, and the two remaining by Masson´s trichrome. The fragments were histopathologically analysed according to Stary´s coronary atherosclerosis classification and examined by Zeiss Jenaâ, a light microscope with a bright chamber attached a Zeissâ micrometer scale, to outline adventitial vasa vasorum as well as to measure the coronary intraluminal diameter and the medial thickness. Intersection points of vasa vasorum with Merzâ´s grille were manually counted. For all types of vasa vasorum, points on Merzâ´s grille were counted to obtain the following stereological parameters of vasa vasorum: diameter, wall thickness, volumetric and superficial density, and adventitial connective tissue density. Parametric data were analysed by Pearson s linear correlation and principal component analysis. Agreement in determining coronary atherosclerosis degree in laminas stained by hematoxylin-eosin or Masson´s trichrome was assessed by kappa statistics. Differences among variables at each atherosclerosis degree was assessed by analysis of variance or Kruskal-Wallis test. Results: Coronary intraluminal diameter correlated negatively with coronary medial thickness and number of adventitial vasa vasorum (r>0.50; P-value<0.05). These correlations may be explained by sex, age and coronary atherosclerosis degree (r>0.50; P-value<0.05). All stereological parameters of vasa vasorum correlated negatively with coronary intraluminal diameter and positively with medial thickness, both explained by sex and atherosclerosis degree (r>0.50; P-value<0.05). The size of all types of vasa vasorum augmented proportionally to atherosclerosis histopathological degree aggravation. Kappa statistics for hematoxylin-eosin and Masson´s trichrome presented agreements varying from substantial or good to almost perfect or fine . All variables presented significant differences since the degree II of atherosclerosis. Conclusions: Coronary medial thickness and number of vasa vasorum correlated negatively with coronary intraluminal diameter. These correlations may be explained by sex and coronary atherosclerosis degree. Stereological parameters of vasa vasorum (except coronary adventitial connective tissue density) correlated positively with number of adventitial vasa vasorum as well as medial thickness, and negatively with coronary intraluminal diameter. Both correlations were determined by degree of atherosclerosis. Venular rupture in vulnerable atherosclerotic plaques may be associated with myocardial infarction arising since the degree II of atherosclerosis. / Introdução: Cerca de 50% dos casos de doença arterial coronária aterosclerótica (15% das mortes masculinas e 25% femininas) não são explicados pelos clássicos fatores de risco. Vasa vasorum coronários podem associar-se à aterosclerose coronariana; contudo, sua anatomia e fisiopatologia não estão completamente elucidadas. Objetivos: Realizar estudo estereológico dos vasa vasorum da túnica externa de artérias coronárias autopsiadas buscando correlação entre vasa vasorum, fisiopatologia do infarto do miocárdio e graus histopatológicos de aterosclerose. Material e Método: Em dez autópsias consecutivas de adultos (5 homens, 5 mulheres, 35 a 83 anos, congelados a 4º C) efetuaram-se biópsias proximal, média e distal dos ramos interventriculares anterior e posterior em cada autópsia, a cada 1,5 cm, totalizando 6 biópsias por autópsia. Cada fragmento foi processado histologicamente com cortes sucessivos de 4 cm de espessura, totalizando 4 fragmentos (24 fragmentos por autópsia). Os dois primeiros fragmentos foram corados em hematoxilina-eosina e os dois últimos em tricrômico de Masson. Lâminas histológicas foram diagnosticadas histopatologicamente quanto ao grau de aterosclerose coronariana pela classificação de Stary e examinadas em microscópio de luz Zeiss Jena com câmara clara e escala micrométrica Zeissâ para delineamento dos vasa vasorum da túnica externa coronária e mensuração do diâmetro do lúmen coronário e da espessura da túnica média coronária. Pontos dos delineamentos dos vasa vasorum sobre a grade estereológica foram manualmente contados obtendo-se diâmetro do lúmen, espessura da parede e densidades volumétrica e superficial dos vasa vasorum, e densidade do tecido conectivo da túnica externa. Dados paramétricos foram analisados por correlação linear de Pearson e análise de componentes principais, concordância no diagnóstico do grau aterosclerótico pela estatística kappa, e diferenças entre valores das variáveis a cada grau aterosclerótico por análise de variância ou teste de Kruskal-Wallis Resultados: Diâmetro do lúmen coronário correlacionou-se negativamente com espessura da túnica média e número de vasa vasorum da túnica externa (r>0,50; valor-p<0,05), com correlações explicadas pelo sexo e grau de aterosclerose (r>0,50; valor-p<0,05). Parâmetros estereológicos dos vasa vasorum correlacionaram-se negativamente com diâmetro do lúmen coronário e positivamente com espessura da túnica média, com correlações explicadas pelo grau de aterosclerose (r>0,50; valor-p<0,05). Tamanho de todos os tipos de vasa vasorum aumentou proporcionalmente ao agravamento das lesões ateroscleróticas. Estatística kappa para lâminas histológicas coradas em hematoxilina-eosina ou em tricrômico de Masson apresentou concordâncias variando de substancial ou boa a quase perfeita ou ótima . Todas as variáveis envolvidas apresentaram diferenças significativas a partir do grau II de aterosclerose coronariana. Conclusões: Espessura da túnica média e número de vasa vasorum da túnica externa correlacionaram-se negativamente com diâmetro do lúmen coronário, com correlações explicadas pelo sexo e grau de aterosclerose. Parâmetros estereológicos (exceto densidade do tecido conectivo da túnica externa) variaram proporcionalmente com espessura da túnica média e com número de vasa vasorum, e inversamente com diâmetro do lúmen coronário, com correlações explicadas pelo grau histopatológico de aterosclerose. Tamanho de cada tipo de vasa vasorum aumentou proporcionalmente à progressão dos graus ateroscleróticos. Ruptura venular precoce em placas ateroscleróticas vulneráveis poderia propiciar infarto do miocárdio desde o grau II ou III de aterosclerose.

Dissertation Abstract Abdominalaortic aneurysm (AAA) is a serious disease. Its prevalence is in the developed countries about 3%. As an aneurysm is considered a dilatation of all layers of a vessel wall over 3 cm. Majority of AAA are small and asymptomatic, and although the risk of rupture increases with the size of aneurysm sack, even the small aneurysms rupture. The rupture mortaliry ranges about 70 %. Surgical treatment is indicated in the asymptomatic patients in diameter of AAA over 5 cm. The average speed of growth of AAA is 0.3 cm per year, e.g. in the early diagnosed patients there is a several years interval for a pharmacolocical influencing of the progression of this disease. Knowledge of pathogenesis is essential for any targeted pharmacological treatment. Our prospective, non-randomised studies are based on the application of the stereological methods for the histopathological assessment of the AAA samples. The acquired data enable the statistical analysis, including the null hypothesis testing. In our study analyzing the histopathology of AAA aortae of 65 patients (65 walls and 55 thrombi) and 6 normal abdominal aortae from the organ donors we assessed the following parameters: the area fractions of collagen and elastin, and the length density of elastin in intima and media, the area...

Dissertation Abstract Abdominalaortic aneurysm (AAA) is a serious disease. Its prevalence is in the developed countries about 3%. As an aneurysm is considered a dilatation of all layers of a vessel wall over 3 cm. Majority of AAA are small and asymptomatic, and although the risk of rupture increases with the size of aneurysm sack, even the small aneurysms rupture. The rupture mortaliry ranges about 70 %. Surgical treatment is indicated in the asymptomatic patients in diameter of AAA over 5 cm. The average speed of growth of AAA is 0.3 cm per year, e.g. in the early diagnosed patients there is a several years interval for a pharmacolocical influencing of the progression of this disease. Knowledge of pathogenesis is essential for any targeted pharmacological treatment. Our prospective, non-randomised studies are based on the application of the stereological methods for the histopathological assessment of the AAA samples. The acquired data enable the statistical analysis, including the null hypothesis testing. In our study analyzing the histopathology of AAA aortae of 65 patients (65 walls and 55 thrombi) and 6 normal abdominal aortae from the organ donors we assessed the following parameters: the area fractions of collagen and elastin, and the length density of elastin in intima and media, the area...