Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2012-10-23T07:20:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 243330.pdf: 6559914 bytes, checksum: f3b0dd598eea3893fb7d88104436ff42 (MD5) / Estudos etnobotânicos têm demonstrado que a espécie Lippia alba (Miller) N. E. Brown Ex Britt. & Wils, família Verbenaceae, é uma das plantas mais utilizadas no Brasil, principalmente na forma de infuso. Popularmente, esta planta é conhecida como melissa, erva cidreira, erva cidreira de arbusto, entre outros. Na medicina popular é utilizada em problemas digestivos e como calmante. Esta dissertação dá sequência a uma série de trabalhos realizados anteriormente com L. alba, visando isolar e identificar substâncias oriundas da fração n-butanólica, para a qual foram relatadas atividades sedativa e anticonvulsivante. Assim, o objetivo deste trabalho é dar continuidade ao isolamento de saponinas, rever a elucidação estrutural da saponina LA3 realizada por Correa (2005), elucidar a estrutura da substância LA4. Partindo-se de um extrato hidroalcoólico das folhas do material vegetal, seguido de partição com solventes de polaridade crescente, utilizou-se a fração n-butanólica para o estudo. Após purificação das subfrações, foi possível isolar as substâncias: verbascosídeo, LA3, LA4 e uma pró-sapogenina. O verbascosídeo e a substância LA3 foram caracterizados por CCD e/ou UV. A pró-sapogenina foi obtida a partir da fração n-butanólica, submetida à cromatografia em coluna hidrostática, cromatografia líquida de alta eficiência e, finalmente, a uma hidrólise alcalina. A pró-sapogenina foi identificada como o ácido 3-O-ß-D-glicopiranosil-16a,23-diidroxi-olean-12-en-28-óico por meio de espectrometria de RMN mono e bidimensionais, além de uma hidrólise ácida. A substância LA4 foi obtida por meio de uma seqüêcia de cromatografias em colunas hidrostáticas e foi identificada como o éster glicosídico 28-O-a-L-ramnopiranosil-(1?3)-ß-D-xilopiranosil-(1?4)-a-L-ramnopiranosil-(1?3)-a-L-arabinopiranosídeo do ácido 3-O-ß-D-glicopiranosil-16-a,23-diidróxi-olean-12-en-28-óico. A estrutura da saponina LA4 foi elucidada por RMN mono e bidimensionais e espectrometria de massas. Desta forma, a espécie L. alba se mostrou fonte de glicosídeos, sobre as quais há poucos trabalhos na literatura, além de derivados do ácido caféico, tipo verbascosídeo. Ethnopharmacological studies have demonstrated that Lippia alba (Miller) N. E. Brown Ex Britt. & Wils, Verbenaceae, is one of the most widely utilized plants in Brazil, mainly in infusion form. In folk medicine it is used in the treatment of digestive disorders and as a calmant. This dissertation seeks to continue a series of experiments previously conducted with L. alba, and aims to isolate and identify substances deriving from the n-butanolic fraction, to which sedative and anticonvulsivant activities were related. Therefore, the objects of this work are: to continue to isolate L. alba saponins, to check the structural elucidation of saponin LA3 done by Correa (2005), and to elucidate the structure of the LA4 saponin. Starting with the hydroalcoholic extract from the leaves of the vegetal material, followed by partition with a higher polarity solvent, the n-butanolic fraction was used for the study. After the purification of the subfractions, the substances verbascoside, LA3, LA4 and a prosapogenin were isolated. Verbascoside and the substance LA3 were characterized via thin layer chromatography (TLC) and/or ultraviolet (UV) spectroscopy. The prosapogenin was obtained by the submission of the n-butanolic fraction to a hydrostatic chromatography column, then to high-performance liquid chromatography (HPLC) and finally to alkaline hydrolysis. The prosapogenin was identified as the 3-O-ß-D-glucopyranosyl-16a,23-dihydroxy-olean-12-en-28-oic acid and was elucidated by mono- and bidimensional nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, together with acid hydrolysis. The LA4 saponin was obtained by a sequence of hydrostatic chromatographic columns and was identified as 3-O-ß-D-glucopyranosyl-28-O-(a-L-rhamnopyranosyl-(1?3)-ß-D-xylopyranosyl-(1?4)-a-L-rhamnopyranosyl-(1?3)-a-L-arabinopyranosyl)-16a,23-dihydroxy-olean-12-en-28-oic acid. Its structural elucidation was carried out by mono- and bidimensional NMR and mass spectrometry. Thus, the L. alba species is a source of glycosides and also of caffeic acid verbascoside-type derivatives.

Orientador: Sebastião Laroca / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas (Entomologia) / Resumo: A comunidade de abelhas silvestres (Hymenoptera, Apoidea) de uma área restrita de Mata Atlântica, no município de Morretes, Paraná, sul do Brasil, foi estudada com relação à composição de espécies, abundância relativa, diversidade e visitação às flores. Os resultados obtidos foram comparados, em algumas análises, aos de outras localidades pertencentes a esse domínio florestal, nos estados do Paraná e São Paulo. Foram capturados 1194 exemplares pertencentes a 111 espécies das seis famílias que ocorrem no Brasil. Destas, Apidae foi a mais abundante, com 45,6% do total de indivíduos amostrados, seguida por Halictidae (32,9%), Anthophoridae (14,2%), Megachilidae (5,7%), Colletidae (1,1%) e Andrenidae (0,5%). Halictidae mostrou-se a mais rica em espécies (36,0% do total}, seguida de Anthophoridae (27,0%), Apidae (16,2%), Megachilidae (13,5%), Colletidae (4,5%) e Andrenidae (2,7%). O período de maior atividade de espécies e de indivíduos de Apoidea compreendeu os meses de novembro a abril, que coincide com a estação chuvosa, temperaturas elevadas, dias longos (mais horas de luz) e grande oferta de recursos florais. Halictidae e Apidae mantiveram-se em atividade o ano todo, embora em menor número no inverno. Megachilidae interrompeu seu vôo durante este período. Anthophoridae só não foi capturada em agosto; Colletidae esteve presente nas amostras de agosto a março e Andrenidae foi coletada apenas nos meses de novembro, dezembro e fevereiro. As abelhas foram capturadas sobre flores de 78 espécies de plantas, distribuidas entre 34 famílias. Asteraceae foi a mais procurada, seguida de Myrtaceae, Melastomataceae, Lamiaceae, Verbenaceae e Polygonaceae. A análise da amplitude de plantas visitadas revelou que há uma grande variação na quantidade de itens explorados pelas diferentes espécies, e que, em sua maioria, as abelhas, em Morretes, são generalistas quanto ao uso dos recursos florais. Observações sobre a biologia floral de Stachytarpheta max.imiliar1i (Verbenaceae) indicam que esta espécie tem um período de floração que se estende de setembro a maio, antese diurna (das 5:30h às l 7:00h, aproximadamente) e oferta de néctar e pólen praticamente durante todo o período de antese. Suas flores são visitadas por diferentes espécies de coleópteros, dípteros, hemípteros, himenopteros e lepidópteros, em busca de néctar e pólen, sendo que abelhas e lepidópteros são os mais freqüentes. Um complexo de características florais, incluindo flores de cor violeta-azulada, sem odor perceptível, corola infundibuliforme (longa e afilada), néctar não exposto, com alta concentração de açúcar, acumulado na porção inferior do tubo da corola, constitui um elemento selecionador de visitantes. Tais características se enquadram nas síndromes de melitofilia e psicofilia. / Abstract: The wild bees fauna (Hymenoptera, Apoidea) in a Brazilian Atlantic rain forest site was studied in terms of composition, relative abundance, diversity and flower visits. This investigation was conducted at the Experimental Station, of the Instituto Agronômico do Paraná, located in Morretes, State of Paraná, Brazil. The inforrnations were compared with data from other sites in the Atlantic rain forest. A total of 1194 individuais of 111 species was captured. Apidae is the most abundant family (45,6%), followed by Halictidae (32,9%), Anthophoridae (14,2%), Megachilidae (5,7%), Colletidae (1,1%), and Andrenidae (0,5%). High species diversity is observed in Halictidae (36,0%), followed by Anthophoridae (27,0%), Apidae (16,2%), Megachilidae (13,5%), Colletidae (4,5%), and Andrenidae (2,7%). The phenologic analysis shows that bees were more active between November and April, during the rainy season, with daily high temperatures, on shiny days and in the presence of abundant floral resources. Halictidae and Apidae are active during ali year, while Megachilidae ceases their activities in the winter; Anthophoridae was not captured only in August; Colletidae was sampled from August to March, while Andrenidae was collected in November, December and February. Bees were captured on 78 flowering plant species, distributed in 34 families. Among the families, Asteraceae was the most visited, followed by Myrtaceae, Melastomataceae, Lamiaceae, Verbenaceae and Polygonaceae. The spectrum of plant flowers used by the bees was large, and revealed that the majority of species was generalist in resource utiliz.ation. Observations on the pollination biology of the Verbenaceae Stachytarpheta maximiliani, indicate that their flowering period is from September though May. Anthesis occurs from 5:30 a.m. to 5:00 p.m. and nectar and pollen are available during all the anthesis. Many species of beetles, hemipterans, flies, wasps, bees and butterflies visit their flowers, but bees and butterflies are the most frequent and constant visitors. A complex of floral characteristcs, like violet-blue color of flowers, long floral tubes, without scents, nectar not exposed, high concentration of sugar in nectar, allowed identification of floral syndromes (melittophily and psicophily) and function for each visitor.

Orientadores: Silmara Marques Allegretti, Vera Lúcia Garcia Rehder / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-20T03:21:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Frezza_TarsilaFerraz_D.pdf: 7085818 bytes, checksum: efda178c131c2fccfeccdf3495083418 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: A esquistossomose mansônica, doença parasitária debilitante causada pela espécie de trematódeo Schistosoma mansoni mata cerca de 280.000 pessoas ao ano. Atualmente, os fármacos empregados para tratamento (praziquantel - PZQ - e oxaminiquina) apresentam casos de tolerância e resistência, sendo necessária a criação de novos medicamentos. Nesse contexto, pesquisas com plantas medicinais consistem numa alternativa viável. Este trabalho se destinou a avaliar a ação de Cordia verbenacea sobre S. mansoni, por meio de testes in vitro e in vivo. Os testes in vitro foram realizados com 4 concentrações (50, 100, 200 e 400 ?g/mL) de óleo essencial (OE), fração aquosa (FAEE) e fração orgânica (FOEE), obtidas das partes aéreas da planta, com refracionamentos da FOEE e com o composto artemetina. A FOEE apresentou maior atividade esquistossomicida com as concentrações mais altas e foi refracionada. Do seu refracionamento, a fração 3 (F3) foi a que apresentou maior mortalidade. Ambas foram escolhidas para os testes in vivo nos quais camundongos Balb/c, infectados 45 ou 60 dias antes, receberam concentrações diferentes das frações (40, 100, 200 ou 300 mg/kg), em dose única por via oral. A avaliação da atividade das frações foi feita com base nos seguintes parâmetros: ação sobre os vermes adultos, ovos eliminados ao ambiente, oograma, formação das reações granulomatosas, hepatoesplenomegalia e ação sobre o tegumento dos vermes recuperados nos testes in vivo por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Obteve-se redução de vermes de até 31% com a FOEE, na concentração de 40 mg/kg, administrada 45 dias após a infecção (o PZQ não apresentou redução nessa concentração); redução de ovos por grama de fezes de até 85,1% para 200 mg/kg de FOEE, administrada no 60º dia, enquanto o PZQ apresentou 20,5%; grande quantidade de ovos mortos no oograma para a F3, a partir de 100 mg/kg, seguindo o mesmo padrão apresentado pelo PZQ, 300 mg/kg; menor quantidade de granulomas por fígado analisado (média de 3,0 granulomas por órgão) para a FOEE, 300 mg/kg, administrada aos 45 dias de infecção, sendo que o PZQ, nesse mesmo esquema de tratamento, apresentou 9,6 granulomas em média; diminuição da hepatomegalia com 200 mg/kg de ambas as frações, no 60º dia de infecção. Imagens obtidas pela MEV mostraram extensas alterações no tegumento dos vermes machos submetidos a ambas as frações, sendo essas maiores que as provocadas pelo PZQ. Esses resultados indicam que C. verbenacea apresenta atividade tanto contra S. mansoni quanto contra a patologia provocada por esse helminto. Tais resultados foram por vezes superiores aos do PZQ, que se trata de uma substância pura. Os dados obtidos em relação à diminuição da patologia pode ter sido uma conseqüência das propriedades anti-inflamatória que a espécie possui / Abstract: The trematode Schistosoma mansoni is responsible for causing a form of schistosomiasis that kills around 280,000 people each year. Since there are cases of tolerance and resistance to the drugs currently used in the treatment for this disease, namely praziquantel (PZQ) and oxamniquine, there is a need for new schistosomicidal drugs. In that regard, the research with medicinal plants is a viable alternative. The purpose of this work was to evaluate the activity of Cordia verbenacea on S. mansoni by means of both in vitro and in vivo tests. The in vitro tests were performed using 4 concentrations (50, 100, 200, and 400 ?g/mL) of essential oil (OE), aqueous fraction (FAEE) and organic fraction (FOEE), obtained from aerial parts of the plant; fractions of the organic fraction; and artemitin. The FOEE showed stronger schistosomicidal activity with the higher concentrations, and it was fractionated. Among the resulting fractions, fraction 3 (F3) yielded the highest mortality of worms. Therefore, both fractions were chosen for the in vivo tests, in which Balb/c mice, infected 45 or 60 days before, received different concentrations of the fractions (40, 100, 200, or 300 mg/kg), administered orally in a single dose. The activity of the fractions was evaluated based on the following parameters: activity on adult worms, eggs released in the environment, egg count, formation of granulomatous reactions, hepatosplenomegaly, and activity on the tegument of worms retrieved from the in vivo tests by scanning electron microscopy (SEM). Administered 45 days after the infection at 40 mg/kg, the FOEE provided a reduction of up to 31% of the worms (PZQ did not result in any reduction at that concentration); administered 60 days after the infection at 200 mg/kg, the FOEE provided a reduction of 85.1% of eggs per gram of faeces, whereas PZQ reached 20.5%; fraction 3, at 100 mg/kg, resulted in a large quantity of dead eggs in the egg count, the same happening for PZQ at 300 mg/kg; administered 45 days after the infection at 300 mg/kg, the FOEE resulted in less granulomas per liver (average of 3.0 granulomas per organ), whilst PZQ, under the same treatment conditions, resulted in an average of 9.6 granulomas; on the 60th day of infection and at 200 mg/kg, both fractions caused a reduction of hepatomegaly. Images obtained by SEM showed large changes on the tegument of male worms subjected to both fractions, such changes being larger than those caused by PZQ. These results indicate that the plant C. verbenacea presents activity against both S. mansoni and the disease caused by this helminth. In some cases C. verbenacea provided better results than PZQ, which is a pure substance. The data related to the reduction of the pathology can be a consequence of the anti-inflammatory properties of the plant / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Parasitologia

Submitted by GABRIELA BRASIL ROMÃO null (gabibromao@yahoo.com.br) on 2016-08-02T16:22:32Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Versão Final (GABRIELA BRASIL ROMAO).pdf: 4722088 bytes, checksum: 45c94484a90edf6dfe782f335f396a2e (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-08-02T17:18:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 romao_gb_me_arafcf.pdf: 4722088 bytes, checksum: 45c94484a90edf6dfe782f335f396a2e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T17:18:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 romao_gb_me_arafcf.pdf: 4722088 bytes, checksum: 45c94484a90edf6dfe782f335f396a2e (MD5) Previous issue date: 2016-07-04 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A erva-baleeira, Cordia verbenacea DC., é uma espécie de planta originária do Brasil, encontrada principalmente na Floresta Tropical Atlântica. É largamente utilizada na medicina tradicional por apresentar, principalmente, ação anti-inflamatória. Dados recentes da literatura mostraram que esta ação está relacionada à presença de compostos fenólicos, flavonoides e sesquiterpenos, além de ser constatada a atividade antioxidante em diferentes extratos de C. verbenacea. Epécies reativas de oxigênio e nitrogênio são produzidas constantemente no organismo, podendo causar danos ou benefícios aos sistemas biológicos. Estão altamente relacionadas com o processo de envelhecimento do organismo, e, consequentemente, do envelhecimento cutâneo. A busca e pesquisa de cosméticos com ativos naturais com propriedades antioxidantes tem aumentado significativamente. Este estudo teve como objetivo avaliar a ação do extrato hidroetanólico 70 % de folhas de C. verbenacea (EtOH 70 %) em diferentes espécies reativas de oxigênio de importância biológica, para uma possível aplicação na prevenção do envelhecimento cutâneo. Inicialmente, foram comparados os extratos etanólico, hidroetanólico 70 % e aquoso de folhas de C. verbenacea a fim de selecionar o extrato com maior teor de compostos fenólicos totais e flavonoides totais, além de maior atividade antioxidante. O extrato EtOH 70 % foi selecionado para avaliação da atividade antioxidante in vitro frente a diferentes espécies reativas (radicais modelo ou sistemas biológicos modelo envolvendo estas espécies) como também avaliar a citotoxicidade, os perfis cromatográficos em CCD e CLAE-DAD e desenvolver uma formulação fitocosmética contendo o extrato para avaliar o fator de proteção solar (FPS). O extrato EtOH 70 % apresentou resultados promissores em relação à atividade antioxidante comparado aos resultados dos padrões utilizados e aos dados da literatura disponíveis para extratos vegetais similares. Com relação ao FPS, este não apresentou valor considerável. Na linhagem celular HepG2 o extrato EtOH 70 % não apresentou citotoxicidade nas concentrações testadas, porém, na linhagem HaCat, apresentou baixa citotoxicidade. O extrato EtOH 70 % apresentou teor de compostos fenólicos totais e flavonoides totais de 14,0 e 4,0 % (m/m), respectivamente; os valores de CE50 obtidos para os ensaios de análise antioxidante pelo DPPH•, ABTS+•, O2―•, descoramento da crocina (ROO•), HOCl e H2O2 foram de 13,44, 7,02, 196,61, 10,93, 3,49 e 302,17 μg/mL, respectivamente; os perfis cromatográficos mostraram-se complexos contendo substâncias de média e alta polaridade, sugerindo a presença de flavonoides e triterpenos pelos espectros no UV e sendo confirmada pela quantificação das substâncias 4',5-diidroxi-2',3,5',6,7-pentametoxiflavona, cordialina A e outro triterpeno análogo à cordialina A com teores de 0,66, 0,67 e 0,12 % (m/m), respectivamente. Com os resultados obtidos foi possível comprovar a eficácia do extrato EtOH 70 % quanto à sua pronunciada atividade antioxidante frente a diferentes espécies reativas, possivelmente, devido às substâncias fenólicas e flavonoides, o que pode ter também relação com a sua atividade anti-inflamatória. / Erva-baleeira, Cordia verbenacea DC., is a native Brazilian plant species, mainly found at the Atlantic Forest. It is widely used in traditional medicine mostly for its anti-inflammatory properties. Literature data shows that this activity is related to the presence of phenolic compounds, flavonoids and sesquiterpenes, it was also verified the antioxidant activity for different extracts of C. verbenacea. Reactive oxygen and nitrogen species are constantly produced in the organism and might cause damage or benefits on biological systems. They are highly related to the ageing process of the body and, consequently, to skin ageing. The research for natural cosmetics drugs with antioxidant properties has had a significant increase and, therefore, the aim of this study was to evaluate the antioxidant activity of an hydroethanolic extract of C. verbenacea leaves (EtOH 70 %) on different reactive oxygen species of biological importance. Initially, the ethanolic, hydroethanolic (70 %) and aqueous extracts of C. verbenacea leaves were compared to select the extract with a higher total phenolic content and total flavonoid content, as well as higher antioxidant activity. The EtOH 70 % extract was selected for in vitro evaluation of its antioxidant activity against different reactive species (radicals model or bioprocess model involving these species), but also to evaluate its cytotoxicity, the chromatographic profiles in TLC and HPLC and to develop a phytocosmetic contaning the extract, to evaluate its sun protection factor (SPF). The EtOH 70 % extract showed promising results concerning the antioxidant activity compared to the standard substances used and to the available literature data for similar plant extracts. Regarding to the SPF, the extract did not present a considerable value. In HepG2 cell line, the extract did not show cytotoxicity on the tested concentrations, but, in HaCat cell line, it showed low cytotoxicity. The EtOH 70 % extract exhibited total phenolic content and total flavonoid content of 14.0 and 4.0 % (w/w), respectively; the EC50 values obtained from the antioxidant activity tests by DPPH• , ABTS+• , O2 ―• , crocin bleaching (ROO• ), HOCl and H2O2 assays were 13.44, 7.02, 196.61, 10.93, 3.49 and 302.17 μg/mL, respectively; the chromatographic profiles demonstrated to be complex containg substances of medium and high polarity, suggesting the presence of flavonoids and triterpenes by UV spectra, which were confirmed by the quantification of 4',5-dihydroxy-2',3,5',6,7-pentamethoxiflavone, cordialin A and another triterpene similar to cordialin A with the content of 0,66, 0,67 e 0,12 % (w/w), respectively. From the obtained results, it was possible to prove the effectiveness of EtOH 70 % extract regarding its pronounced antioxidant activity against different reactive species, possibly, due to the phenolics and flavonoids and, also, the relation with its anti-inflammatory activity.

Submitted by Raquel Popolo Silveira Capaz null (rpsilveira@hotmail.com) on 2017-04-01T18:25:55Z No. of bitstreams: 1 DissertaçãoRaquelCapaz com ficha ok.pdf: 1412751 bytes, checksum: 78a889b357b85545b83afc6c7b671bc2 (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-04-07T14:30:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 capaz_rps_me_bot.pdf: 1412751 bytes, checksum: 78a889b357b85545b83afc6c7b671bc2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-07T14:30:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 capaz_rps_me_bot.pdf: 1412751 bytes, checksum: 78a889b357b85545b83afc6c7b671bc2 (MD5) Previous issue date: 2017-02-10 / O presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da rebrota na produtividade de biomassa e teor de alfa-humuleno em populações cultivadas de Varronia curassavica Jacq. (Boraginaceae), em diferentes latitudes, nos municípios de Parnaíba, estado do Piauí e Botucatu, estado de São Paulo. Ambas foram cultivadas a partir de sementes da mesma origem. Em Parnaíba, PI, esta avaliação foi realizada em função de adubação orgânica e diferentes tempos de rebrota. O experimento foi instalado em área agrícola do Grupo Centroflora, em condições de campo, sendo o delineamento experimental adotado em blocos casualizados, em esquema fatorial 4 x 2, sendo os fatores adubação (com ou sem adubação) e rebrota (60, 90, 120 e 150 dias de rebrota). Foram utilizadas 50 plantas úteis por tratamento. O espaçamento utilizado foi de 0,60m entre plantas e 2,70m entre linhas, seguindo o padrão de espaçamento já utilizado na produção em escala. Para obtenção das amostras a serem avaliadas, a altura de corte foi padronizada 0,30m acima do solo. As colheitas foram realizadas a partir do corte de uniformização seguido pelos diferentes tratamentos de avaliação de rebrota. A extração do óleo essencial foi realizada imediatamente após cada colheita, por arraste a vapor, sendo o tempo de extração padronizado em duas horas. As análises de determinação de teor de alfa-humuleno foram realizadas por Cromatografia Gasosa (CG). Os resultados encontrados no experimento de Parnaíba sugerem que a adubação orgânica não propiciou maior produtividade em biomassa e teor de alfa-humuleno. No experimento realizado em Botucatu, SP, o delineamento experimental adotado foi de 4 tratamentos, em 5 blocos casualizados, sendo as coletas realizadas 60, 90, 120 e 150 dias após corte inicial de uniformização. O experimento foi realizado a partir de população previamente existente, com plantas adultas (2 anos e três meses de idade), sendo espaçamento entre plantas e entre linhas de 0,60m x 1,80m. Foram utilizadas 10 plantas por tratamento, sendo a coleta das amostras padronizada a 0,90m de altura acima do solo. As extrações de óleo e análises foram padronizadas com o experimento de Parnaíba. A análise de variância, através de regressão quadrática, mostrou diferença significativa para produtividade e teor de alfa-humuleno ao nível de 1% de probabilidade (p<0,01), nos diferentes tempos de rebrota. Em ambos experimentos (Parnaíba, PI e Botucatu, SP), houve a tendência de aumento de produtividade em biomassa conforme o aumento da idade da rebrota. No entanto, os teores de alfa-humuleno foram maiores nos materiais coletados aos 60 dias de rebrota. Os experimentos sugerem que o melhor tempo de rebrota é o de 120 dias, ponto de equilíbrio entre produtividade em biomassa e rendimento de teor de alfa-humuleno. A composição química das diferentes populações, obtida de amostras de óleo essencial com 90 dias de rebrota, apresentou diferenças nas substâncias.

Submitted by JUHAN AUGUSTO SCARDELATO PEREIRA null (juhan_01@yahoo.com.br) on 2017-05-02T14:37:47Z No. of bitstreams: 1 TESE - Juhan.pdf: 6743117 bytes, checksum: 50e774d88c707774b6f0ab9bbb9969f8 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-05-03T20:25:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pereira_jas_dr_arafcf.pdf: 6743117 bytes, checksum: 50e774d88c707774b6f0ab9bbb9969f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-03T20:25:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pereira_jas_dr_arafcf.pdf: 6743117 bytes, checksum: 50e774d88c707774b6f0ab9bbb9969f8 (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cordia verbenacea DC. pertence à família Boraginaceae, a qual contém aproximadamente 100 gêneros com mais de 2.000 espécies. Ocorre ao longo de todo litoral brasileiro, sendo comum na Floresta Tropical Atlântica e possuindo vários nomes populares, sendo o mais comum erva-baleeira. É utilizada tradicionalmente para tratar vários processos inflamatórios. O laboratório Aché® desenvolveu um medicamento fitoterápico anti-inflamatório tópico à base do óleo essencial de C. verbenacea (Acheflan®) e a espécie está presente no Formulário Nacional de Fitoterápicos da Farmacopeia Brasileira. Considerando a relevância de estudos de variabilidade química para espécies medicinais e a ausência destes dados na literatura para C. verbenacea propomos realizar um estudo da dinâmica do metabolismo da espécie focado nas variações sazonal, circadiana e populacional. As folhas de C. verbenacea foram coletadas, secas, trituradas e submetidas à maceração com etanol (1:15 m/v). Posteriormente, foi realizada uma extração em fase sólida com o extrato etanólico seco obtendo-se 10 frações, as quais foram analisadas por CCD e CLAE-UV. A fração 4.1 foi escolhida para cromatografia em coluna originando 120 subfrações, das quais três estavam semipurificadas. Utilizando a técnica de CLAE preparativa foram purificadas quatro substâncias, sendo três obtidas com mais de 95 % de pureza (CLAE-UV). As substâncias foram analisadas por técnicas espectrométricas (UV, IV e RMN), sendo identificados os triterpenos cordialina A e cis-cordialina A e dois flavonoides, 4’,5-diidroxi-2’,3,5’,6,7-pentametoxiflavona ou 2’,5-diidroxi-4’,3,5’,6,7-pentametoxiflavona e a artemetina. Um método por CLAE-DAD foi desenvolvido e aplicado na análise dos extratos etanólicos dos estudos populacional, circadiano e sazonal, incluindo a obtenção de seus perfis cromatográficos e a quantificação das substâncias purificadas. Os estudos populacional, circadiano e sazonal evidenciaram diferenças quantitativas em relação as substâncias majoritárias após a análise cromatográfica, sendo a substância diidroxipentametoxiflavona encontrada em maior quantidade no espécimen 13II4 do estudo populacional, já no estudo circadiano o horário das 04:30 h apresentou maior rendimento e no estudo sazonal maior tendência de produção deste flavonoide no período de janeiro a março de 2015/2016, enquanto que para os triterpenos o espécimen 3IV1 apresentou maior rendimento no estudo populacional e os espécimens 2II5 e 3II5 maior rendimento no estudos circadiano e sazonal, sendo os períodos de março a maio de 2015 e janeiro a março de 2016 os de maior tendência de produção desses triterpenos. A análise quimiométrica evidenciou uma diferença quantitativa dos metabólitos não voláteis entre os espécimens. A análise estatística utilizando ANOVA evidenciou que o rendimento do extrato e o teor dos triterpenos e flavonoide são afetados pelos períodos do ano. Foram obtidos os óleos essenciais dos 27 espécimens do estudo populacional e dos sete espécimens dos estudos circadiano e sazonal. O teor de óleo essencial na droga vegetal e sua coloração (amarelo claro, amarelo, esverdeado e azul) variaram entre os espécimens analisados. A análise por CCD também evidenciou diferenças significativas entre eles. Os dados obtidos por CCD dos 27 espécimens do estudo populacional foram utilizados em análises por PCA e HCA, observando-se agrupamento dos espécimes de óleo de cor azul/esverdeados em relação aos demais óleos de cor amarela. Esses agrupamentos também foram verificados nas PCA e HCA obtidas com dados por CG-EM, evidenciando que a amostra do óleo essencial do espécimen 13I5 possui maior tendência de produção do trans-cariofileno e do α-humuleno. Os óleos de cor azul/esverdeados evidenciaram a presença de três substâncias específicas: elemeno, camazuleno e espatulenol. A análise estatística utilizando ANOVA evidenciou que o rendimento do óleo essencial e o teor de seus componentes são afetados pelos períodos do ano, mas não pelo ritmo circadiano. / Cordia verbenacea DC. belongs to the Boraginaceae family which contains about 100 genera with more than 2,000 species. C. verbenacea is popularly named erva-baleeira and occurs throughout the Brazilian coast including the Atlantic Rainforest. It is traditionally used to treat various inflammatory processes and was employed by Aché® laboratory for the development of Acheflan®, an anti-inflammatory topical medicine containing the essential oil of C. verbenacea. Considering the relevance of chemical variability studies for medicinal plants we propose to develop a study of the metabolism dynamics focused on seasonal, circadian and population variations. The leaves of C. verbenacea were collected, dried, crushed and macerated with ethanol (1:15 m/v). The solid phase extraction with ethanolic extract yielded 10 fractions which were analyzed by TLC and HPLC. Fraction 4.1 was selected for column chromatography yielding 120 subfractions. Four compounds were isolated using preparative HPLC-UV and three compounds presented high purity (≤95 %; HPLC-UV) and were analyzed by spectrophotometric techniques (UV, IR, NMR). Compounds were identified as the triterpenes cordialin A and cis-cordialin A and the flavonoides 4',5-dihydroxy-2',3,5',6,7-pentametoxiflavone or 2',5-dihydroxy-4',3,5',6,7-pentametoxiflavone and artemetin. An HPLC-DAD method was developed for the analysis of the ethanolic extract. The ethanolic extracts of seasonal, circadian and population studies were analyzed by HPLC-DAD. All these studies showed quantitative differences in relation to the majority compounds, being the substance dihydroxypentamethoxyflavone found in a larger quantity in specimen 13II4 of the population study, already in the circadian study the time of 04:30 h had a higher yield and in the seasonal study a greater trend of production of this flavonoid in the period from january to march of 2015/2016, while for the triterpenes the specimen 3IV1 presented higher yield in the population study and the specimens 2II5 and 3II5 greater yield in the circadian and seasonal studies, being the periods of march to may of 2015 and january to march of 2016 the ones of greater tendency of production of these triterpenes. The statistical analysis using ANOVA showed that the yield of the extract and the content of triterpenes and flavonoid were affected by the periods of the year. Essential oils were obtained from the 27 specimens from the population study and the seven specimens from the circadian and seasonal studies. The essential oil content in the plant drug and its color (light yellow, yellow, green and blue) differed among the specimens. The TLC analysis also showed significant differences among the oils. Data obtained by TLC analyzes of the 27 specimens of the population study were used in PCA and HCA analyzes that showed two groups of oils - blue / green oil specimens and yellow color oil specimens. These clusters were also verified in PCA and HCA obtained with GC-MS data, evidencing that the sample of the 13I5 of the specimen has a greater trend of production of trans-caryophyllene and α-humulene. The blue/green oils showed the presence of 3 specific compounds: elemene, camazulene and spatulenol. The statistical analysis using ANOVA showed that the yield of the essential oil and the content of its components were affected by the periods of the year, but not by circadian rythm. / FAPESP: 2013/24298-9

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O estado de Roraima é dividido em três grandes sistemas ecológicos: floresta, campinas-campinarana e savanas ou cerrados e está localizado no extremo norte da Amazônia brasileira. Apesar da grande variedade de plantas existem poucas informações sobre plantas aromáticas da região. Lippia microphylla Cham., pertence à família Verbenaceae e ao gênero Lippia, e conhecida popularmente em Roraima como salva do campo, sendo encontrada nos lavrados roraimenses. Esta planta pode ser encontrada com facilidade ao longo da BR 174 que liga Boa Vista a Santa Elena de Uairén, na Venezuela. O objetivo desse trabalho foi avaliar a constituição química do óleo essencial de Lippia microphylla Cham. em épocas e horários diferentes e analisar sua atividade antioxidante. As amostras foram coletadas no município de Boa Vista, Roraima, em três horários diferentes (8,12 e 18 horas) nos meses de maio 2009, 2010 e 2011. As folhas extraídas por hidrodestilação com auxílio de um aparelho de clevenger e os óleos foram analisados por cromatografia gasosa com auxílio da espectrometria de massas. Para determinação da atividade antioxidante do óleo essencial foi utilizado o método de capacidade sequestrante do radical livre DPPH. Os maiores rendimentos de óleos foram registrados em maio de 2011, mês que registrou maior precipitação, mas não choveu no dia da coleta. A análise da constituição do óleo revelou que o timol, carvacrol, E-cariofileno, nerolidol e o óxido de cariofileno foram os principais constituintes, sendo o carvacrol majoritário em quase todas as análises. O óleo de melhor capacidade antioxidante foi extraído do material coletado ao meio dia e contem maior concentração de timol (9,22%) e carvacrol (19,80%). Observamos que os óleos coletados nos diferentes anos apresentam diferenças significativas quanto a sua composição química e ao seu rendimento. A chuva do dia da coleta foi mais relevante do que o volume de precipitação no mês. A atividade antioxidante desses óleos pode ser atribuída principalmente à presença dos dois isômeros fenólicos. / The state of Roraima is divided into three major ecological systems: forests, meadow-campinarana and savannas, and are located in the extreme north of the Brazilian Amazon. Despite the wide variety of plants there is little information on herbs of the region. The Lippia microphylla Cham., belongs to the family Verbenaceae and the genus Lippia, popularly known as salva-do-campo being found in the Roraima savannas. This plant is easily found along the margins of the BR 174, the route Boa Vista, Brazil, to the Santa Elena de Uairén, Venezuela. The aim of this study was to evaluate the chemical composition of essential oil of Lippia microphylla Cham. Collected at different times and schedules and analyze their antioxidant activity. The samples were collected in Boa Vista, Roraima, at three different times ( 8, 12 and 18 hours ) in May 2009, 2010 and 2011, for realization of antioxidant activity the samples were collected in the month of March 2011. The leaves were extracted by hydrodistillation with the assistance of a Clevenger apparatus and the oils analyzed by Gas chromatography coupled with mass spectrometry, GC-MS. To determine the antioxidant activity of the essential oil the method of sequestering ability of the free radical DPPH was used. The highest yields of oils were recorded in May 2011, which recorded highest rainfall month, but it did not rain on the day of collection. The analysis of the constitution of the oils revealed that thymol, carvacrol, E-caryophyllene, nerolidol and caryophyllene oxide were the main constituents of which the majority carvacrol was in almost all analyzes. The best antioxidant capacity oil was extracted from material collected at noon containing higher concentration of thymol ( 9.22% ) and carvacrol ( 19.80% ). We observed that the oils collected in different years showed significant differences in their chemical composition and yield. The rain on the day of collection was more important than the volume of rainfall in the month. The antioxidant activity of these oils can be attributed mainly to the presence of two phenolic isomers.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-06Bitstream added on 2014-06-13T20:04:01Z : No. of bitstreams: 1 montanarijunior_i_dr_botfca.pdf: 1131496 bytes, checksum: 0a7962bc58e62cb2a1d6049912fcf8d6 (MD5) / Este trabalho avaliou agronômica e quimicamente 37 progênies de meios irmãos de Cordia verbenacea DC., espécie nativa de importância medicinal por causa de sua ação antiinflamatória. O objetivo desta pesquisa foi o de identificar progênies e indivíduos de C. verbenacea com boas características agrícolas e químicas, iniciando assim o processo de domesticação da espécie, visando promover seu cultivo, de modo a oferecer uma nova opção agrícola aos produtores rurais, contribuindo para a preservação da espécie e para utilização dos seus benefícios terapêuticos. Através de um ensaio agrícola em blocos casualizados, com 4 repetições, foram avaliadas o comportamento de progênies de meios irmãos em três colheitas. As características analisadas foram: a produção de biomassa verde, de folhas secas, o índice de colheita, a produção de óleo essencial e a produção de alfa humuleno. A partir dos dados obtidos foi estimada a variabilidade disponível para o melhoramento, a herdabilidade das características analisadas, o progresso esperado com a seleção, a eficiência do método de seleção empregado e as correlações genéticas, ambientais e fenotípicas entre as características analisadas. Concluiu-se que as progênies possuíam ampla variação genética e que esta variação poderia ser explorada para fins de melhoramento. As herdabilidades calculadas para massa de folhas secas, porcentagem de óleo essencial e massa de óleo essencial foram de 0,52, 0,69 e 0,78 respectivamente, considerando-se as três colheitas. Calculando-se os ganhos por seleção, concluiu-se que podem ser esperados ganhos expressivos selecionando-se as melhores plantas dentro das melhores progênies. O método de seleção entre e dentro de progênies de meios irmãos empregado neste trabalho mostrou-se significantemente mais eficiente que os métodos de seleção entre progênies... / This dissertation evaluated agronomically and chemically 37 progenies of half-sib families of Cordia verbenacea DC., a native medicinal species important for its anti-inflammatory action. The objective of this research was to identify C. verbenacea individuals with good agricultural and chemical characteristics to start a domestication process, aiming at promoting cultivation and offering a new agricultural option to rural producers, thus contributing to preserve the species and to the use of its therapeutic properties. An agricultural experimental design of randomized blocks with four repetitions evaluated the behavior of half-sib families in three harvests. The characteristics analyzed were: fresh biomass and dry leaves production, harvest index, essential oil production, and alpha humulene production. The available variability for breeding, the heritability of the analyzed characteristics, the progress expected from selection, the efficiency of the chosen selection method, and the genetic, environmental, and phenotypic correlations between the characteristics analyzed were estimated from the collected data. It was concluded that the progenies had a broad genetic variability that could be explored for breeding. The heritabilities calculated for dried leaf biomass, essential oil percentage, mass of essential oil were, respectively, 52%, 0,69% and 0,78%, considering the three harvests. On estimating the gain from selection, the conclusion was that significant gain can be expected from the selection of the best plants between and within the best progenies. The selection method between and within half-sib families employed in this research proved to be considerably more efficient than methods such as selection between progenies, and mass and stratified mass selection. The correlations study shows that oil and alpha humulene production is closely related to biomass production, demonstrating... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Norberto da Silva / Banca: Lin Chau Ming / Banca: Eduardo Pagani / Banca: Joaquim Adelino de Azevedo Filho / Banca: Walter José Siqueira / Resumo: Este trabalho avaliou agronômica e quimicamente 37 progênies de meios irmãos de Cordia verbenacea DC., espécie nativa de importância medicinal por causa de sua ação antiinflamatória. O objetivo desta pesquisa foi o de identificar progênies e indivíduos de C. verbenacea com boas características agrícolas e químicas, iniciando assim o processo de domesticação da espécie, visando promover seu cultivo, de modo a oferecer uma nova opção agrícola aos produtores rurais, contribuindo para a preservação da espécie e para utilização dos seus benefícios terapêuticos. Através de um ensaio agrícola em blocos casualizados, com 4 repetições, foram avaliadas o comportamento de progênies de meios irmãos em três colheitas. As características analisadas foram: a produção de biomassa verde, de folhas secas, o índice de colheita, a produção de óleo essencial e a produção de alfa humuleno. A partir dos dados obtidos foi estimada a variabilidade disponível para o melhoramento, a herdabilidade das características analisadas, o progresso esperado com a seleção, a eficiência do método de seleção empregado e as correlações genéticas, ambientais e fenotípicas entre as características analisadas. Concluiu-se que as progênies possuíam ampla variação genética e que esta variação poderia ser explorada para fins de melhoramento. As herdabilidades calculadas para massa de folhas secas, porcentagem de óleo essencial e massa de óleo essencial foram de 0,52, 0,69 e 0,78 respectivamente, considerando-se as três colheitas. Calculando-se os ganhos por seleção, concluiu-se que podem ser esperados ganhos expressivos selecionando-se as melhores plantas dentro das melhores progênies. O método de seleção entre e dentro de progênies de meios irmãos empregado neste trabalho mostrou-se significantemente mais eficiente que os métodos de seleção entre progênies... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This dissertation evaluated agronomically and chemically 37 progenies of half-sib families of Cordia verbenacea DC., a native medicinal species important for its anti-inflammatory action. The objective of this research was to identify C. verbenacea individuals with good agricultural and chemical characteristics to start a domestication process, aiming at promoting cultivation and offering a new agricultural option to rural producers, thus contributing to preserve the species and to the use of its therapeutic properties. An agricultural experimental design of randomized blocks with four repetitions evaluated the behavior of half-sib families in three harvests. The characteristics analyzed were: fresh biomass and dry leaves production, harvest index, essential oil production, and alpha humulene production. The available variability for breeding, the heritability of the analyzed characteristics, the progress expected from selection, the efficiency of the chosen selection method, and the genetic, environmental, and phenotypic correlations between the characteristics analyzed were estimated from the collected data. It was concluded that the progenies had a broad genetic variability that could be explored for breeding. The heritabilities calculated for dried leaf biomass, essential oil percentage, mass of essential oil were, respectively, 52%, 0,69% and 0,78%, considering the three harvests. On estimating the gain from selection, the conclusion was that significant gain can be expected from the selection of the best plants between and within the best progenies. The selection method between and within half-sib families employed in this research proved to be considerably more efficient than methods such as selection between progenies, and mass and stratified mass selection. The correlations study shows that oil and alpha humulene production is closely related to biomass production, demonstrating... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Vera Lucia Garcia Rehder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-09T03:16:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_JucemarySimplicio_M.pdf: 4127878 bytes, checksum: eb074da9b053d63e3abe078302afb0c6 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Cordia verbenacea, (Boraginaceae), planta medicinal nativa do Brasil, apresenta em seu óleo essencial compostos com atividade antiinflamatória. Devido às suas propriedades terapêuticas, existe umgrande interesse na ampliação de estudos sobre a planta. O presente estudo investigou o efeito da nutrição mineral e do ácido jasmônico (AJ) no desenvolvimento da planta, na produção, composição química e teores de a-humuleno do OE. As plantas foram submetidas a tratamentos nutricionais com solução de Hoagland completa, omissão de N, K, P, B e suplemento de P e N. Durante o experimento foram observadas características de sintomas de deficiência nutricional. Após 90 dias de tratamento algumas características foram avaliadas como a altura das plantas e a área foliar, as plantas foram coletadas, o óleo essencial foi extraído por hidrodestilação e submetido à cromatografia a gás e espectrometria de massa. A deficiência em N foi mais limitante ao crescimento da planta. Sob esta deficiência a planta apresentou uma maior relação raiz/parte aérea, o que sugere uma maior alocação de recursos para a raiz numa situação de carência de N. A produção de folhas foi equivalente para a maioria dos tratamentos, com redução significativa no tratamento -P, suplemento de P (60 mg/L) e uma redução mais severa em -N. A omissão de B e K causou uma diminuição da absorção de P, provocando também um comprometimento nas estruturas de sustentação da planta. As plantas submetidas à omissão de P possivelmente apresentaram modulação dos sistemas de absorção deste nutriente, pois em um meio com maior escassez de P apresentaram maiores concentrações foliares deste elemento que nos tratamentos -B e -K. O suplemento de P (60 mg/g), foi o único tratamento nutricional em que se verificou um aumentou na produção de OE. Nos tratamentos com omissão no fornecimento de nutrientes esta produção foi menor. O percentual de a-humuleno foi equivalente entre a maioria dos tratamentos, contudo, o suplemento de P (60 mg/g), apesar do aumento do rendimento de OE, ocasionou uma queda no teor de a-humuleno. Duas horas após a aplicação de AJ foi verificado um aumento na produção de OE com a detecção de uma série de compostos ausentes no grupo controle, no entanto, os teores de a-humuleno não se alteraram. A escassez de estudos nutricionais sobre C. verbenacea não permite o estabelecimento de um estado nutricional adequado para a espécie, contudo, a planta aparentemente apresenta eficiência na absorção e utilização de nutrientes, pois mesmo em uma situação de omissão de nutrientes seu crescimento, produção de matéria seca, e taxa de crescimento relativo foram, em geral, pouco comprometidos / Abstract: The essential oil of Cordia verbenacea, a native Brazilian medicinal plant, presents anti-inflammatory properties. Due to its therapeutic properties, there is great interest in expanding research on it. The present study investigates the effect of mineral nutrition and jasmonic acid application on this plant's development, yield, chemical composition, and essential oil a-humulene concentration. The plants were submitted to nutritional treatments with Hoagland complete solution, N, K, P and B omission and P and N supplement. Nutritional deficiency symptoms were observed in the course of the experiment. After 90 days of treatment, some characteristics were evaluated, such as the plants' height and foliar area, plants were collected, and essential oil was extracted via hydrodestillation and submitted to gas chromatography and mass spectrometry. N deficiency was the most limiting factor in the plant growth. This deficiency presented a higher relation rate (root/shoot), suggesting that the lack of N affected shoot development. Lack of N showed a higher allocation of resources to the root rather than to the shoot. Leaf production was equivalent for most treatments, with significant reduction in -P treatment, P supplement (60 mg/L) and a more severe reduction in -N. B and K omission possibly caused a reduction in P absorption, also provoking alteration in the plant's sustaining structures. The plants submitted to P omission probably presented modulation in the nutrient absorption systems because in an environment with higher P scarcity, the nutrient presented higher foliar concentration levels of this element than in ¿B and -K treatments. The P supplement (60 mg/g) was the only nutritional treatment in which an essential oil yield increase was observed. The yield was lower in treatments with omission of nutrients. The percentage of a-humulene was equivalent among most treatments, yet the P supplement (60 mg/g), despite the increase in the essential oil yield, caused a decrease in the a-humulene content. Two hours after the AJ application, an increase in the production of essential oil was observed, with the detection of several compounds absent in the control group. Yet, the a-humulene percentage was not altered. The shortage of nutritional studies on C. verbenacea does not allow for the establishment of an adequate nutritional outline for this species. Nevertheless, the plant seems to present efficiency in the absorption and use of nutrients, for even in a situation of nutrients omission, its growth, dry mass production, and relative growth rate were not, in general, significantly compromised. / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Biologia Vegetal