Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Coorientador: Raphaella Barbosa Meireles Bartoli / Banca: Cáris Maroni Nunes / Banca: luiz Augusto do Amaral / Resumo: Atualmente, no Brasil, a leishmaniose visceral (LV) é classificada como uma enfermidade reemergente, em processo de transição epidemiológica, juntamente com um aumento da incidência nas áreas endêmicas e presente em quatro das cinco regiões do território nacional. Assim, este trabalho objetiva analisar a evolução e a distribuição espacial da LV no Estado de São Paulo, desde o seu primeiro registro até o ano 2014, com vistas a fornecer subsídios para as autoridades de saúde pública para melhoria do programa de controle. Por meio de um estudo descritivo, dados secundários obtidos junto ao Centro de Vigilância Epidemiológica (CVE) e à Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) do Estado de São Paulo foram analisados e tratados em um sistema de informações geográficas (ArcGis 10.1), com confecção de mapas de distribuição. Observou-se que existem dois padrões distintos da distribuição da LV no estado: o da região oeste, definido pela ocorrência de casos humanos, alta prevalência de casos caninos e um maior número de municípios onde L. longipalpis está presente; e o da região leste, caracterizada pela ausência de notificação de casos humanos, até mesmo onde o flebotomíneo e casos caninos são presentes. Deduz-se que a expansão ocidental dos casos caninos e humanos seguindo a mesma rota de expansão do vetor não é coincidência, isso porque os registros do flebotomíneo precedem as notificações da doença no cão e, subsequentemente, no ser humano. A pesquisa ser... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Nowadays, in Brazil, visceral leishmaniasis (VL) is classified as a re-emerging disease, in a clear process of epidemiological transition, along with an increased incidence in endemic areas, and present in four of the five regions of the country. Therefore, this essay aims to analyze the evolution and spatial distribution of VL in São Paulo, since its first record until the year 2014, in order to provide information for public health authorities to improve the control program. By means of an ecological and descriptive study, secondary data obtained from the Centro de Vigilância Epidemológica (CVE) and the Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) of São Paulo were analyzed and treated in a geographic information system (ArcGIS 10.1), with confection distribution maps. It was observed that there are two distinct patterns of distribution of LV in São Paulo: one in the western region, defined by the occurrence of human cases, high prevalence of canine cases and a greater number of municipalities where sand fly is present; the other, represented by the eastern region, characterized by the absence of reporting human cases, even where the sand flies and canine cases are present. It follows that western expansion of canine and human cases following the same expansion route as the vector is not a coincidence, since the phlebotomine sandflies records precede the notifications of the disease in dogs and subsequently in humans. The research is the basis for fut... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadora: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Antônio Carlos Alessi / Banca: Valéria Marçal Félix de Lima / Resumo: A linfadenomegalia generalizada é um aspecto da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), mas existem poucos estudos enfocando alterações no linfonodo. O objetivo deste estudo foi analisar os linfonodos de cães com LVC, considerando a densidade de células apoptóticas. Utilizou-se 32 cães naturalmente infectados, de área endêmica para LVC, classificados nos grupos sintomático (S), assintomático (A) e oligossintomático (O). Os linfonodos foram colhidos para análise histopatológica. A avaliação da carga parasitária e porcentagem de apoptose foi feita pelo método de imunoistoquímica. Na avaliação histopatológica, no infiltrado dos linfonodos dos grupos O e S predominaram macrófagos e plasmócitos, envolvendo todas as regiões do linfonodo e causando distorção deste órgão pela presença de granulomas atípicos associados à atrofia linfóide nos casos crônicos. A carga parasitária e a densidade de células apoptóticas foram maiores nos cães sintomáticos, podendo estar associado à causa de atrofia linfóide, deixando-os mais susceptíveis a LVC. Os linfonodos subescapular e poplíteo foram os que apresentaram maior reatividade, porém a atrofia linfóide foi mais evidente neste último. Conclui-se que independente do quadro clínico, a resposta predominante foi granulomatosa e de plasmócitos. A associação entre a apoptose e a carga parasitária não foi significativa (P<0,05), mas parece ter importância biológica, já que cães (grupo S) com a maior carga parasitária, também tiveram o maior número de células apoptóticas, sugerindo um mecanismo de evasão imune do parasito, favorecendo sua sobrevivência e multiplicação no hospedeiro. / Abstract: The generalized lymphadenopathy is an aspect of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL), but there are few studies focusing on changes in the lymph node. The aim of this study was to examine the lymph nodes of dogs with CVL, considering the density of apoptotic cells. We used 32 dogs naturally infected in an endemic area for CVL, classified in groups symptomatic (S), asymptomatic (A) and oligosymptomatic (O). The lymph nodes were collected for histopathological analysis. The evaluation of parasite load and percentage of apoptosis was performed by immunohistochemistry. Histopathology, macrophages and plasma cells predominated in the infiltrate of the lymph nodes of groups O and S, involving all regions of the lymph node and forming granulomas associated with lymphoid atrophy in chronic cases. The parasite load and the density of apoptotic cells were higher in symptomatic dogs, which may be linked to causing lymphoid atrophy, leaving the dog more susceptible to LVC. The subscapular and popliteal lymph nodes were those with higher reactivity, but the lymphoid atrophy was most evident in the popliteal lymph node. It follows that regardless of the clinical picture, the predominant response was granulomatous and plasma cells. The association between apoptosis and the parasite load was not significant (P <0.05), but seems to have biological importance, since it was observed that dogs (group S) with the highest parasite load, also had the highest number of apoptotic cells, suggesting a mechanism for immune evasion of the parasite, promoting their survival and multiplication in the host. / Mestre

Orientador: Raul Borges Guimarães / Banca: José Eduardo Tolezano / Banca: Edilson Ferreira Flores / Resumo: A Geografia da saúde busca analisar padrões de morbimortalidade de acordo com a distribuição da doença no espaço. Através da análise espacial dos sistemas de saúde, equipamentos e serviços e sua utilização, considera a influência biogeográfica e antrópica, demonstrando a importância do meio geográfico no aparecimento e distribuição de doenças, visando fornecer bases seguras para os programas de saúde pública. Quando aliada ao uso de tecnologias do geoprocessamento, por exemplo, os Sistemas de Informação Geográfica (SIGs), tem oferecido importantes subsídios para a área da saúde, identificando fatores e condicionantes na ocorrência de uma doença. Tendo por base a abordagem geográfica da saúde, o objetivo deste trabalho foi analisar a evolução espacial e temporal dos casos de Leishmaniose Visceral Canina (LVC), bem como seus condicionantes, identificando padrões de comportamento no município de Presidente Prudente - SP. Para isso, elaboramos um banco de dados com os casos de LVC e do Inquérito Sorológico Canino (ISC) - dados do Centro de Controle de Zoonoses da Secretaria Municipal de Saúde de Presidente Prudente - e com as variáveis ambientais - com imagens de satélite e levantamentos de campo na área urbana. Aplicamos técnicas estatísticas, epidemiológicas e de estatística espacial e foi gerada uma coleção de mapas, interpretada e analisada conforme a espacialização de eventos pontuais e de área, de acordo com a necessidade de transposição de escalas. A Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença grave que atinge milhares de pessoas no mundo... / Abstract: The Geography of Health seeks to analyze patterns of morbidity and mortality according to disease distribution in the space. The spatial analysis of health facilities and services, and the systems they use, considers the biogeographic and anthropogenic influences, demonstrating the importance of the geographical environment in the appearance and distribution of diseases, aiming to provide a secure basis for public health programs. When combined with technology, for example, Geographic Information Systems (GIS), this has offered important insights into the area of health, identifying and conditioning factors in disease occurrence. Based on the geographical approach to health, the aim of this study was to analyze the spatial and temporal evolution of the cases of Canine Visceral Leishmaniasis (LVC) as well as their constraints, identifying patterns of behavior in the city of Presidente Prudente, São Paulo state, Brazil. For this, we developed a database with cases of LVC and Canine Serological Survey (ISC) - data from the Presidente Prudente's Centro de Controle de Zoonoses in Municipal Secretariat of Health - and with environmental variables - via satellite images and field surveys in an urban area. Using statistical techniques, epidemiological and spatial statistics were generated and a collection of maps (interpreted and analyzed as the spatial distribution of point events and area), according to the necessity of transposing scales... / Mestre

Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Hélio José Montassier / Banca: Hiro Goto / Resumo: O objetivo do estudo foi avaliar o papel imunomodulatório das citocinas TGF-ß1, IL-10 e INF-g nos extratos de baço e de fígado e no sobrenadante de cultura de células brancas esplênicas, em cães machos assintomáticos e sintomáticos, naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi. Trinta cães oriundos da cidade de Araçatuba, SP, área endêmica para leishmaniose visceral, selecionados por reação sorológica ELISA positiva para Leishmania sp. foram divididos em dois grupos: cães sem sintomas (n=15) que constituíram o grupo assintomático, e os cães com pelo menos três dos sinais clínicos característicos (febre, dermatites, linfoadenopatias, onicogrifose, perda de peso, caquexia, problemas de locomoção, conjuntivite, epistaxe, hepato-esplenomegalia, edema, apatia), que constituíram o grupo sintomático (n=15). Após a eutanásia, fragmentos de baço e de fígado foram coletados para quantificação de TGF-ß1, IL-10 e INF-g ex vivo. O TGF-ß1 ativo naturalmente produzido in vitro também foi avaliado no sobrenadante de cultura de células esplênicas. O extrato de baço e de fígado do grupo de cães assintomáticos apresentou níveis médios maiores de TGF-ß1, quando comparado ao grupo de cães sintomáticos. A citocina IL-10 foi detectada em altas concentrações no extrato de baço e, principalmente, de fígado dos dois grupos de cães avaliados. O INF-g foi encontrado no extrato de baço, do grupo de cães assintomáticos, e de fígado, do grupo de cães sintomáticos. Embora a citocina INF-g tenha sido detectada na infecção canina, os níveis médios de TGF-ß1 e IL-10 no extrato de baço e de fígado foram mais elevados, sugerindo que tanto em cães assintomáticos quanto em sintomáticos a resposta imune predominante foi do tipo Ta2. / Abstract: The aims of this study were to evaluate the immunomodulatory role of TGF-ß1, IL-10, & INF-g in spleen and liver extracts and supernatant cultures of white spleen cells from male symptomatic and asymptomatic dogs, naturally infected by Leishmania (Leishmania) chagasi. Thirty dogs from Araçatuba, SP, an endemic leishmaniasis area, were selected by positive ELISA serological reaction for Leishmania sp. and divided into two groups: asymptomatic (n=15), and symptomatic (n=15) consisting of animals with at least three characteristic signs (fever, dermatitis, lymphoadenopathy, onychogryphosis, weight loss, cachexia, locomotion problems, conjunctivitis, epistaxis, hepatosplenomegaly, edema, and apathy). After euthanasia, spleen and liver fragments were collected for ex vivo quantification of TGF-ß1, IL-10, and INF-g. Naturally active in vitro produced TGF-ß1 was also evaluated in spleen cell culture supernatant. Spleen and liver extract of asymptomatic dogs had higher mean TGF-ß1 levels than symptomatic dogs. High concentrations of IL-10 were found in spleen, and mainly in liver extract of both groups. Higher INF-g concentrations were found in spleen extracts of asymptomatic dogs, and in liver extracts of symptomatic dogs. Although INF-g is being produced in canine infection, mean levels of TGF-ß1 and IL-10 from spleen and liver extracts were much higher, suggesting that immune response in both asymptomatic and symptomatic dogs was predominantly type Th2. / Mestre

Orientador: José Rafael Modolo / Coorientador: Cassiano Vitória / Banca: Fábio Fernando Ribeiro Manhoso / Banca: Elma Pereira dos Santos Polegato / Acompanha anexo / Resumo: A leishmaniose é uma zoonose considerada um grande problema de saúde pública. A Organização Mundial da Saúde estima que 350 milhões de pessoas estejam expostas ao risco com registro aproximado de dois milhões de novos casos das diferentes formas clinicas ao ano. No Brasil, a importância da Leishmaniose Visceral Canina reside não somente na sua alta incidência e ampla distribuição, mas na possibilidade de assumir formas graves e letais quando associada ao quadro de má nutrição e infecções concomitantes. A crescente urbanização da doença ocorrida nos últimos 20 anos coloca em pauta a discussão das estratégias de controle empregadas. As medidas de controle da doença até agora implementadas foram incapazes de eliminar a transmissão e impedir a ocorrência de novas epidemias. Os conhecimentos sobre a circulação da LVC, assim como sua percepção pela população local, são de grande valia para o estabelecimento de campanhas de controle, pois mobiliza a comunidade em ações sanitárias. Busca avaliar comparativamente o conhecimento geral dos donos de cães sobre a LVC e obter informações para auxiliar na elaboração de uma proposta mais precisa e direcionada de educação continuada em saúde, no que se refere à LVC no Município de Lençóis Paulista - SP. Um inquérito foi desenvolvido para ser aplicado por 120 agentes comunitários de saúde, os quais receberam treinamento por uma equipe de profissionais da área e da UNESP de Botucatu - SP. O treinamento teve como base material especial de apoio apostilado desenvolvido de forma direcionada, contendo instruções gerais para orientar os entrevistadores no trabalho de campo, auxiliando-os na correta realização das entrevistas, de maneira a garantir a precisão das informações coletadas. Foram 390 participantes respondentes, distribuídos em cinco regiões do município, sendo: centro (46), Q1 (134), Q2 (60), Q3 (106), Q4 (38), abrangendo todos os 30km2 de área ... / Abstract: Leishmaniasis is a zoonosis considered a major public health issue. The World Health Organization estimates that 350 million people are exposed to it, with 2 million new infections, by the different forms of it, a year. In Brazil, the Visceral Canine Leishmaniasis (VL) is an important health issue not only because of its high incidence and transmission, but also because of the possibility of becoming life threatening when associated to poor nutrition and concomitant infections. There have been a growing number of urban outbreaks for 20 years. Rising up a discussion about the ways of control that have been used. These control measures have been incapable of both preventing and eliminating the transmission; they've also failed preventing new outbreaks. The knowledge about VL together with local population awareness is a key to establish control campaigns, mobilizing the whole community in sanitary campaigns. The present study evaluated the general knowledge of dog owners about VL and got information to help the establishment of a more accurate and better directed health education against VL in the city of Lençóis Paulista in São Paulo. The inquiry was made before the outbreak occurred in 2009 in the city and after it, by the 120 health agents that work for the city. These agents were trained by health experts both from the region and from UNESP in Botucatu/SP. Their training consisted on especially designed booklets developed to guide them during their fieldwork inquiry, helping them to make accurate interviews to guarantee precise information data collection. There were 390 interviews, divided in 5 city districts, as following: downtown (46), Q1 (134), Q2 (60), Q3 (106), Q4 (38), covering the whole 30km2 of urban area, each neighborhood keeping their actual proportion. The data collected was put in a database and was analyzed, with a frequency distribution, absolute and relative, and a percentage ... / Mestre

Orientador: José Rafael Modolo / Coorientador: Cassino Victória / Banca: Mara Cristina Pinto / Banca: Newton Gourlart Madeira / Resumo: As doenças transmitidas por vetores são um dos principais problemas de saúde pública atualmente. Nas últimas duas décadas, muitas dessas doenças reapareceram ou se espalharam para novas partes do planeta, como é o caso das leishmanioses, que são transmitidas por várias espécies de flebotomíneos. O acompanhamento sistemático da superfície do solo com a utilização de armadilhas de emersão tem identificação dos locais de desenvolvimento natural dos flebotomíneos e os estudos da biologia larval, auxiliam o desenvolvimento de possíveis medidas para o controle do vetor nesta fase, uma vez que existe dificuldade em se controlar o adulto. Nestas condições, o presente trabalho teve como objetivo identificar áreas de maior risco para criação e manutenção dos flebotomíneos baseado nas características ambientais, captura dos flebotomíneos por um modelo adaptado de armadilha de emersão e associadas aos resultados das análises de solo, em ambiente urbano. Foram instaladas 333 armadilhas em 2 municípios, no período de novembro de 2012 a janeiro de 2014, sendo possível observar 11.857 insetos, dos quais 9.239 pertenciam à Ordem Diptera. Entretanto, nenhum flebotomíneo de importância médico-veterinária foi capturado. As análises de solo revelaram que o solo da região amostrada caracteriza-se como arenoso, com baixo índice de acidez e alto teor de matéria orgânica. Notou-se a presença de animais como cão, gato, galinha, bovinos e equinos nos quintais, bem como vegetação tanto frutífera quanto ornamental. Não foi possível realizar a correlação entre características ambientais, do solo e presença de criadouros naturais de flebotomíneos pelo fato de não ter capturado nenhum exemplar em ambos os municípios. Entretanto, outras pesquisas devem ser realizadas, pois esse tipo de informação obtida é de extrema importância para o planejamento e desenvolvimento de medidas de controle para o vetor, já que as ... / Abstract: Currently, vector-borne diseases are a major public health problems. In last 20 years, many of these diseases have reappeared or spread to new parts of the planet, as leishmaniasis, which is transmitted by several species of sandflies. Systematic monitoring of the soil surface combined with emergence traps must identify sandflies natural breedings sites and studies of their larval biology, help to develop possible measures for vector control at this stage, since there is difficulty in to control adult sandfly. Accordingly , this study aimed to identify areas of greatest risk for the development and maintenance of sandflies based on environmental characteristics, to catch sandflies by an adapted emergence trap and analytical results of soil in urban environment . A total of 333 traps were placed in 2 municipalities from November 2012 to January 2014. Was possible to observe 11,857 insects, of which 9,239 belonged to the Order Diptera. However, no sandfly medical and veterinary importance was captured. Soil analysis revealed that the soil from the study area is characterized as sandy, with low acidity and high content of organic matter. The presence of animals like dog, cat, chicken, cattle and horses, as well as fruitful as both ornamental vegetation, were noted in backyards. Unable to perform the correlation between environmental characteristics , soil and presence of natural breeding sites of sandflies by not having captured no copy in both municipalities . However, other studies should be conducted, because this type of information is important for the planning and development of control measures for the vector, since the measures directed to reservoir (dog) , are not well accepted by population / Mestre

Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: Juan Carlos Duque Moreno / Banca: Paulo Sérgio Patto dos Santos / Resumo: Avaliaram-se os efeitos clínico e comportamental da injeção intravenosa do tramadol no controle da dor induzida experimentalmente, por obstrução intestinal extraluminal, com dreno de Pen Rose. Foram utilizados 24 cavalos distribuídos em quatro grupos: controle (GC, n=6); obstrução duodenal (GD, n=6); obstrução de íleo (GI, n=6) e obstrução de flexura pélvica (GFP, n=6). Após medicação pré-anestésica com a associação de acepromazina (0,025 mg.kg-1 IV), xilazina (0,5 mg.kg-1 IV) e meperidina (4 mg.kg-1 IM), o tramadol foi administrado nas doses de 1,0 mg.kg-1 e 1,5 mg.kg-1, por via intravenosa (IV), imediatamente após a obstrução intestinal, em três cavalos de cada grupo. Avaliaram-se as freqüências cardíaca (FC) e respiratória (f), temperatura retal (TºC), tempo de preenchimento capilar (TPC), motilidade intestinal, comportamento relacionado à dor (olhar para o flanco, cavar, deitar e rolar) hemograma e hemogasometria venosa, nos intervalos: M0 (basal) a cada 0,5 hora de M1 a M6 , na fase de obstrução, e até três horas após a reversão do processo obstrutivo (M7 a M12). Os resultados demonstraram que não houve diferença significativa entres as doses utilizadas dentro de cada grupo, assim como entre os grupos. Houve aumento da FC em M11 no GD e em M12 no GFP. Os sinais de dor abdominal e atonia intestinal iniciaram-se em M5 no GFP e em M6 no GI. Nos animais do GD, os sinais de desconforto não progrediram. No leucograma foi observado um quadro característico de estresse e na hemogasometria os animais do GD tendenciaram à alcalose metabólica com compensação respiratória. Clinicamente, observou-se que a dose de 1,5 mg.kg-1 de tramadol proporcionou melhor conforto para os animais, porem sem significado estatístico, quando comparado coma dose de 1,0 mg.kg-1... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The clinical and behavioral effects of the intravenous injection of tramadol were evaluated during the control of pain induced experimentally due to intestinal extraluminal obstruction using "Pen Rose" drain. A total of 24 horses were used and distributed in four groups: control (GC, n=6); duodenal obstruction (GD, n=6); ileum obstruction (GI, n=6) and pelvic flexure obstruction (GFP, n=6). After administration of pre-anesthetic medications using association of acepromazine (0.025 mg.kg-1 IV), xylazine (0.5 mg.kg-1 IV) and meperidine (4 mg.kg-1 IM), tramadol was administered at doses of 1.0 mg.kg-1 and 1.5 mg.kg-1 intravenously (IV), immediately after the intestinal obstruction in three horses of each group. Evaluations were performed, including heart rate (HR), respiratory rate (RR), rectal temperature (RT), capillary refill time (CRT), gut motility, pain-related behaviour (look for the sidewall, dig down and roll) and blood gases from venous blood at the time: M0 (baseline) and every 0.5 hours from M1 to M6, during obstruction process and also until three hours after the obstructive process be reverted (M7 to M12). The results showed no significant difference among the doses used in the same group as among groups. There was an increase in HR in the GD M11 and M12 of GFP. Signs of abdominal pain and intestinal atony began at M5 in GFP and at M6 in GI. In animals from GD, the discomfort signs did not showed progress. On the leucogram was observed a typical stress and on the blood gas analysis the animals from GD showed a tendency to metabolic alkalosis with respiratory compensation. Clinically, was observed that the dose of 1.5 mg.kg-1 of tramadol provided better comfort to the animals, but there was not statistical significance, compared with the dose 1.0 mg.kg-1... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Cáris Maroni Nunes / Banca: Mary Marcondes / Banca: Sonia Regina Pinheiro / Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é um importante problema de saúde pública e as medidas de prevenção preconizadas nem sempre são conhecidas pela população. Esta pesquisa avaliou, por meio da aplicação de um questionário, o conhecimento que a população de Três Lagoas, MS tem sobre esta zoonose. Dos 384 entrevistados, 100% afirmaram que já tinham conhecimento prévio da LV, 64,5% sabiam que é transmitida através do inseto vetor e 65,4% sabiam que a prevenção se dá evitando o criadouro deste. Observaram-se 93,5% de respostas para manutenção do quintal limpo como medida preventiva conhecida. Pelo menos um método de prevenção era utilizado no animal por 50,5% dos entrevistados e observou-se associação estatisticamente significante entre o grupo de proprietários cujos cães nunca apresentaram leishmaniose visceral canina e o grupo que fazia uso de alguma prevenção no animal (p=0,0006). / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL) is an important public health problem and the measures to prevent it are not always known by the population. This research evaluated the knowledge that the population of Três Lagoas, MS, Brazil has about this zoonosis. One hundred percent of the interviewed (384) had previous knowledge of the disease, 64.5% knew that a vector transmits it and 65.4% knew that the prevention is achieved by preventing vector's breeding sites. Maintenance of the backyard clean was informed by 93,5% as a known preventive measure. At least one preventive method was used in the animal by 51% of the interviewed ones and statically significant association between the group of owners whose dogs had never presented canine visceral leishmaniasis and owners that used some preventive method in the animal (p=0.0006) was observed. / Mestre

Orientador: Valéria Marçal Félix de Lima / Banca:Gisele Fabrino Machado / Banca: Hélio José Montassier / Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é causada por parasitas intracelulares do gênero Leishmania que afeta humanos e várias espécies de animais. Os cães são um dos principais reservatórios urbanos da Leishmania Infantum e desempenham um papel central no ciclo de transmissão para os seres humanos utilizando flebotomíneos. A apoptose de linfócitos está envolvida na regulação da resposta imune da LV, podendo contribuir para uma resposta imune ineficaz porque o mecanismo efetor não reduz a multiplicação do patógeno. Um importante regulador da apoptose é a proteína FAS (Cluster de diferenciação 95 CD95) e proteína ligante FAS-FASL (Cluster de diferenciação 178-CD178), sistema envolvido na baixa regulação de reações imunes mediadas por células T citotóxicas. A proteína FAS é um membro de receptor da superfamília fator de necrose tumoral (TNF) que pode ser expresso na forma transmembrana ou solúvel. Os níveis das proteínas solúvel FAS (sFAS), solúvel FASL (sFASL), e caspase 3 ativa, essa última relacionada a cascata apoptótica, foram determinados por ensaio de ELISA de captura nos extratos do baço de 19 cães sintomáticos apresentando LV moderada e em 6 cães saudáveis. A carga parasitária esplênica foi determinada por PCR em tempo real com amplificação do segmento intergênico espaçador transcrito interno 1 (ITS1) do gene de rRNA do parasita. Foi realizada a correlação entre os níveis de sFAS e sFAS-L com a carga parasitária explênica. Os cães com leishmaniose apresentaram menores níveis de sFAS (p<0,05) e elevados níveis de sFASL e caspase 3 ativa (p<0,05) no baço que os cães saudáveis. Além disso, foi observada correlação negativa entre a carga parasitária e os níveis de sFASL nos cães infectados. Conclui-se que o aumento do sFASL pode estar relacionado com o mecanismo envolvido na eliminação do parasita / Abstract: Visceral Leishmaniosis (VL) is caused by intracellular parasites of the genus Leishmania that affect humans and several animal species. Dogs are one of the main urban reservoirs of Leishmania infantum and play a central role in the transmission cycle to humans via sandflies. CD3+ cells apoptosis is involved in the immune response in VL. Dysregulation of apoptosis has been implicated in various disease states. An important regulator of apoptosis is the FAS-FAS-associated death domain protein (cluster of differentiation 95-CD95) and FASL-FAS ligand protein (cluster of differentiation 178-CD178) system involved in the down-regulation of immune reactions and in T cell-mediated cytotoxicity. FAS is a member of the tumor necrosis factor (TNF) receptor super family, which can be expressed in transmembrane or soluble forms. The soluble levels of FAS (sFAS), FASL (sFASL) and active Caspase-3, this last related to apoptotic cascade, were investigated in the spleen of 19 symptomatic dogs presenting moderate VL and 6 healthy dogs, determined by ELISA assay. The splenic parasite load was determined by real-time PCR monitoring of amplification of the intergenicinternal transcribed spacer (ITS1) gene of parasite rRNA. sFAS levels were lower (p <0.05) sFASL and active Caspase-3 levels were higher (p<0.05) in dogs with VL compared with controls. Negative correlation was observed between parasite burden and sFASL levels. The increase in sFASL could be related to the mechanism involved in the elimination of the parasite. / Mestre

Orientadora: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Marileda Bonafim Carvalho / Banca: Ana Maria Ferreira Roselino / Resumo: O cão é um importante reservatório do agente etiológico da leishmaniose visceral (LV). Este estudo compreendeu a avaliação de aspectos clínico-laboratoriais, histopatologia renal (cap. 2) e uso da PCR na identificação do agente infectante em baço, fígado, linfonodo e rins em cães com LV (cap. 3). No primeiro estudo, foram utilizados 34 cães soropositivos sintomáticos (caso), e 17 assintomáticos (controle), machos ou fêmeas, com raças e idades variadas, provenientes de Teresina-PI. Os cães foram submetidos a eutanásia. Após, foram coletados fragmentos de baço, fígado, linfonodo e rins. Fragmentos renais foram preparados por técnicas histológicas e corados com HE e PAS. Ao exame físico, foi freqüente hipertrofia de linfonodos (85,29%) e úlceras cutâneas (35,29%) no grupo caso. Verificou-se anemia em 55,88% dos cães no grupo caso e 11,76% no controle. A avaliação histopatológica renal no grupo caso, revelou que 61,76% dos cães apresentaram glomerulonefrite (GN) membranoproliferativa e, no controle, 17,65%. GN proliferativa mesangial ocorreu em 32,35% dos cães do grupo caso e em 64,70% do controle. Foram encontradas formas amastigotas de Leishmania em meio ao infiltrado inflamatório em um dos cães do grupo caso. No segundo estudo, utilizaram-se 25 cães soropositivos para LV sintomáticos (caso) e 15 assintomáticos (controle). As PCRs foram realizadas em termociclador automático, utilizando-se "primers" específicos para o gênero Leishmania. Os 25 cães do grupo caso, foram positivos nas PCRs de baço, ou fígado ou linfonodo, contra dois cães do grupo controle. Por meio das PCRs em rins, detectou-se DNA de Leishmania em oito animais (32%) do grupo caso. O estudo permitiu concluir que na LV canina, independentemente de haver sinais detectados ao exame físico, os rins freqüentemente estão acometidos e que a PCR é um exame mais preciso que a histopatologia convencional, na detecção da presença do parasita. / Abstract: The dog is an important reservoir of visceral leishmaniasis (VL) etiological agent. This study included clinical and laboratorial evaluation, renal histopathology (chapter 2) and the use of PCR in the identification of the infective agent on the spleen, liver, lynphonodes and kidney in dogs with VL (chapter 3). In the first study, it were used 34 symptomatic soropositives dogs (case), and 17 asymptomatic (control), male or female, with different breeds and ages, coming from Teresina-PI. The dogs were submitted to euthanasia. Right after, samples from spleen, liver, lymphonodes and kidneys were collected. Renal fragments were prepared using histological techniques and stained with HE and PAS. At physical exam, it was frequent lymphonodes hypertrophy (85.29%) and cutaneous ulcers (35,29%) in the case group. Anaemia was presented in 55.88% of the dogs from case group and 11.76% from control. The renal histopathology evaluation of the case group showed that 61.76% of the dogs presented membranoproliferative glomerulonephritis (GN) and, at the control group, 17.65%. Mesangial proliferative glomerulonephritis occurred in 32.35% of the dogs from case group and in 64.70% from control. In one of the dogs from case group, it was found amastigotes forms of Leishmania in the middle of the inflamatory infiltrated. In the second study, it were used 25 symptomatics soropositives dogs for VL (case) and 15 asymptomatic (control). PCRs were accomplished at an automatic termocycler using specific primers for Leishmania. All 25 dogs from case group were positives in PCRs of spleen, or liver or lymphonode, and only two from the control group. Through the PCRs of the kidneys, it was detected DNA of Leishmania in eight animals (32%) from case group... (complete abstract, access undermentioned eletronic address) / Mestre