Orientadora: Márcia Rita Fernandes Machado / Banca: José Antonio Thomazini / Banca: Luiza da Silva Lopes / Banca: Áureo Evangelista Santana / Banca: Marcos Lania de Araujo / Resumo: Diversos estudos mostraram que a ingestão de dieta com níveis inadequados de ferro pode causar, no sistema nervoso central (SNC) de ratos, alterações morfológicas, bioquímicas e comportamentais no animal. Esses estudos têm ainda indicado que animais deficientes em ferro apresentam redução no número de lamelas de mielina e prejuízos na aprendizagem. A deficiência de ferro é uma das mais comuns desordens nutricionais em pacientes pediátricos e adultos e atinge cerca de 2,5 a 5 bilhões de pessoas em todo mundo. A consequência mais explícita da deficiência de ferro é a anemia. O ferro está relacionado ao desenvolvimento de fibras nervosas mielínicas, as quais constituem mais de 80% do nervo óptico. Objetivou-se, na presente investigação, avaliar com o auxílio de microscopia eletrônica de transmissão, os possíveis efeitos da anemia ferropriva na estrutura do nervo óptico de ratos Wistar durante os períodos de lactação e pós-lactação. Os animais foram divididos em 2 grupos: Controle e Anêmico. Os anêmicos receberam uma dieta com 4 mg de ferro/Kg, e os controle, uma dieta com 35 mg de ferro/Kg. Avaliações do peso corpóreo, hemoglobina e hematócrito foram feitas para checar os efeitos da deficiência de ferro. Os animais foram anestesiados com cloridrato de quetamina IM (22 mg/Kg) e então sacrificados por perfusão transcardíaca com PBS 0,05M, pH 7,4, seguido da mistura fixadora paraformaldeído 2% e glutaraldeído 1% diluída em tampão fosfato. Um segmento do nervo óptico foi retirado e pós-fixado em solução de tetróxido de ósmio a 1% por duas horas a 4ºC, desidratado em acetona e incluído em araldite. Cortes ultra-finos com 60 nanômetros de espessura foram montados em grades de cobre, contrastados com acetato de uranila e citrato de chumbo, observados e fotografados ao microscópio eletrônico de transmissão para detalhada análise ultraestrutural... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Several studies showed that ingestion of diets with inadequate iron levels can cause morphological, biochemical and behavioral changes in the central nervous system (CNS) of rats. These studies have also shown that iron-deficient animals have reduced number of myelin lamellae and prejudice on learning. Iron deficiency is one of the most common nutritional disorders in pediatric patients and adults and affects about 2.5-5 billion people around the world. The most explicit result of iron deficiency is anemia. The iron is related to the development of myelinated nerve fibers, which constitute more than 80% of the optic nerve. The aim of this research is to evaluate, with transmission electronic microscopy, the possible effects of iron deficiency anemia in Wistar rats optic nerve structure during lactation and pos-lactation period. The animals were divided into 2 groups: Control and Anemic. The anemic group received 4 mg iron/Kg, the control group received 35 mg iron/Kg. Evaluation of body weight, hemoglobin and hematocrit were made to check the iron deficiency effects. The animals were anesthetized with ketamine 22 mg/Kg and then sacrificed by transcardiac perfusion with PBS 0.05 M, pH 7.4, followed by paraformaldehyde fixative mixture 2% and 1% glutaraldehyde. An optic nerve segment was removed and post-fixed in a solution of osmium tetroxide for two hours at 4°C, dehydrated in acetone and embedded in Araldite. Ultrathin sections with 60 nanometers thick were mounted on copper grids, contrasted with uranyl acetate and lead citrate, observed and photographed by transmission electronic microscope for detailed ultrastructural analysis of nerve fibers, blood vessels and glial cells. Both hematological and body weight were smaller in the anemic group. The ultrastructural analysis showed damaged myelinated and unmyelinated fibers, and glial cells of the anemic animals when compared with... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Transtornos de humor tais como a depressão e a ansiedade estão entre as desordens psiquiátricas mais comuns na atualidade, com tendência de aumento do número de casos, assim como vêm ocorrendo nas últimas décadas. O Transtorno Depressivo Maior (TDM), uma desordem psiquiátrica dispendiosa e ameaçadora da vida, afeta profunda e negativamente a qualidade de vida dos indivíduos afetados e irá atingir até 20% da população em algum momento ao longo de sua existência. Porém, a descrição de sua patofisiologia segue incompleta e o principal pré-requisito para controlar a doença é entender de forma detalhada as alterações moleculares e comportamentais que a acompanham. O estresse social, como um dos principais indutores da depressão, tem sido alvo de estudos tanto clínicos quanto pré-clínicos, servindo também como um mecanismo laboratorial que auxilia pesquisadores a rastrear alterações moleculares e comportamentais dessa doença. Recentemente, sem deixar de lado as demais hipóteses, o sistema imunológico através de respostas inflamatórias, tem recebido atenção crescente e é investigado por ser potencialmente um indutor e/ou facilitador de estados depressivos, contribuindo para a patofisiologia da depressão. Além disso, considerando que o estresse não afeta a todos os indivíduos da mesma maneira, a compreensão das diferenças individuais que podem resultar em resiliência pode auxiliar pesquisadores quanto aos fatores que afetam o desenvolvimento ou não do transtorno na população. Esta tese é composta por dois artigos, e visa investigar em um modelo pré-clínico, a contribuição do estresse social por subordinação (do inglês, social defeat – SD) ao comportamento tipo-depressivo, relacionando-o com inflamação. No primeiro artigo foi revisada a literatura mais recente sobre a contribuição do SD para a ativação microglial, o principal elemento neuroinflamatório do sistema nervoso central (SNC), e sua relação com o desenvolvimento dos comportamentos tipo-ansioso e tipo-depressivo. No segundo artigo investigou-se o papel de um estressor social contínuo (21 dias consecutivos de derrota social crônica) em um grupo de ratos Wistar adultos, relacionando respostas comportamentais a alterações de marcadores imunológicos periféricos e a duas estratégias de coping. O modelo de estresse por derrota social tem sido utilizado em diversos estudos de transtornos psiquiátricos e é uma das principais formas de indução de estados tipo-depressivos em animais de laboratório. Ademais, vêm demonstrando ser útil na indução de alterações do sistema 11 imunológico, tanto centrais quanto periféricas. Exposição ao estresse por derrota social induz em células microgliais um estado de hiperativação que, dependendo do tempo de exposição, pode levar ao desenvolvimento de desordens psiquiátricas como a ansiedade e a depressão. Além disso, o protocolo de 21 dias de derrota social contínua revelou dois estilos comportamentais em ratos Wistar. As estratégias de coping passivo e ativo observadas estão relacionadas a vulnerabilidade e a resiliência, respectivamente, e foram correlacionadas com distintos perfis imunológicos periféricos. Animais resilientes apresentam comportamentos e perfil imunológico periférico que os protegem do desenvolvimento de psicopatologias associadas ao estresse. / Humor disorders such as depression and anxiety are among the currently most common disorders, with a trend to an increasing number of cases, like in the past few decades. Major Depressive Disorder (MDD) is an expensive and life-threatening psychiatric disorder that profoundly and negatively affects individual´s quality of life and will affect up to 20% of the population at some point throughout life. However, the pathophysiology of MDD remains incompletely described, and a detailed description of its molecular and behavioral alterations is one of the core prerequisites for disease control. Social stress, one of the main inducers of depression, has been the subject of both clinical and preclinical studies, and has been used as a laboratory tool to help researchers track molecular and behavioral changes of this disease. Recently, without leaving other hypotheses aside, the immune system through inflammatory responses has received increasing attention and is investigated as a potential contributor in the pathophysiology of depression. Furthermore, considering that stress does not affect all individuals to de same extend, understanding individual differences that can turn into resilience may help researchers unravel the factors that influence the development of this disorder in the population. The present dissertation is composed of two articles, aiming to investigate in a preclinical model the contribution of social defeat stress (SD) to depressive-like behavior and correlate it to inflammation. In the first article, we reviewed the most recent literature on the contribution of SD to microglial activation, the main neuroinflammatory element of the central nervous system (CNS), and its relation to the development of anxiety and depressive-like behaviors. In the second paper, we investigated the role of a continuous social stressor (21 consecutive days of chronic social defeat) in a group of adult male Wistar rats, relating behavioral responses and two different coping strategies to changes in peripheral immune markers. The social defeat stress model has been used in several studies of psychiatric disorders and is one of the main forms to induce depressive-like states in laboratory animals. Additionally, it has been shown to be useful in inducing central and peripheral immune alterations. Exposure to stress due to social defeat induces microglial cells into a state of hyperactivation that, depending on the time of exposure, can lead to the development of psychiatric disorders such as anxiety and depression. Furthermore, the 21-day protocol of continuous social defeat revealed two behavioral 13 styles in Wistar rats. The observed passive and active coping strategies are related to vulnerability and resilience, respectively, and have been correlated with different peripheral immunological profiles. Resilient animals present behaviors and a peripheral immune profile that protect them from the development of stress-associated psychopathologies.

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No. of bitstreams: 1 patriciamendoncadecastrobarra.pdf: 3313806 bytes, checksum: 1fadfbcc46e82ff9e1237f3a851d8791 (MD5) Previous issue date: 2014-01-31 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Um método alternativo para a análise simultânea dos ácidos graxos (AG) majoritários cis-trans: esteárico (C18:0), elaídico (C18:1t), oleico (C18:1c), palmítico (C16:0), linoleico (C18:2cc ) e linolênico (C18:3ccc ), foi proposto utilizando a técnica de eletroforese capilar de zona (CZE) com detecção indireta. A metodologia foi otimizada através do planejamento composto central rotacional 23 (23-CCD) e após estudos, juntamente com a Análise de Componentes Principais (PCA), chegou-se a um eletrólito com condições ótimas, composto por: 15,0 mmol L-1 de tampão NaH2PO4/Na2HPO4 com pH ≈ 6,86, 4,0 mmol L-1 de SDBS, 8,3 mmol L-1 de Brij 35, 45% v/v de acetonitrila e 2,1 % de 1-octanol. A quantificação dos AG em amostras reais foi realizada através do cálculo de fator de resposta (FR) com a posterior verificação da linearidade dos modelos matemáticos propostos. O método de CZE foi aplicado com sucesso e nenhuma diferença significativa foi encontrada dentro de intervalo de confiança de 95% quando comparado com a metodologia oficial por cromatografia à gás (GC) para as amostras alimentícias do tipo: azeite de oliva, óleo de soja, gordura vegetal hidrogenada, manteiga, margarina, requeijão e biscoito recheado. Além da utilização da metodologia para análise de amostras alimentícias, foi também aplicada na determinação AG no fígado de ratos Wistar de três grupos, que consumiram dietas, cuja fração lipídica era composta por óleo de soja utilizado por diferentes períodos de tempo em processos de fritura por imersão. Após 45 dias consumindo essas dietas, os ratos foram submetidos à eutanásia e o teor de AG no fígado foi monitorado por CZE. Os resultados obtidos foram comparados com o método oficial por cromatografia à gás e não foram observadas diferenças significativas no intervalo de confiança de 95% e/ou 99%. Os resultados dos eletroferogramas do fígado dos ratos foram avaliados por PCA, sendo possível obter um reconhecimento de padrão e discriminar o grupo final dos grupos intermediários e controle e, indicando que o tempo de exposição total de óleo submetido a processos de fritura pode ser considerado relevante para a avaliação da qualidade do óleo. Tendo observada diferença no teor de AG no fígado dos grupos de animais, buscou-se verificar possíveis biomarcadores para o metabolismo celular e, considerando que alguns elementos atuam como cofatores para a atividade enzimática, determinados minerais foram avaliados em amostras de fígado e fêmur dos ratos Wistar envolvidos no estudo supracitado, utilizando a técnica de espectroscopia de emissão atômica com plasma indutivamente acoplado (ICP OES). Sabe-se que todos os animais envolvidos neste estudo receberam a mesma quantidade de selênio e de mesma origem (Mix mineral). Entretanto, os animais pertencentes ao grupo final apresentaram uma diminuição considerável no teor de selênio quando comparados aos grupos controle e intermediário. Logo, pode-se dizer que a interação do selênio com outros componentes da dieta (AG) foi alterada, uma vez que os animais deste trabalho foram afetados distintamente pela dieta, apresentando uma grande dispersão nos valores de selênio no grupo final. A diminuição no teor de selênio do grupo final pode estar relacionada com a diminuição da função antioxidante, já que os processos de oxidação geram também compostos altamente reativos, que em excesso aumentam o estresse oxidativo de estruturas celulares. / An alternative method for the simultaneous analysis majority of cis/trans fatty acids (FA): stearic (C18:0), elaidic (C18:1 9t), oleic (C18:1 9c), palmitic (C16:0), linoleic (C18: 2 9c 12c) and linolenic (C18: 3 9c 12c 15c ) by Capillary Zone Electrophoresis (CZE) with indirect detection was proposed. The methodology was optimized through central composite rotational design 23 (CCD - 23) and after studies, along with the Principal Component Analysis (PCA) , the electrolyte with optimum conditions, consisted of 15.0 mmol L- 1 NaH2PO4/Na2HPO4 buffer at pH ≈ 6.86, 4.0 mmol L -1 SDBS , 8.3 mmol L -1 Brij 35, 45 % v/v acetonitrile and 2.1 % 1-octanol . The FA quantification in real samples was performed by calculating the response factor (Rf) with the subsequent linearity of the proposed mathematical models verification. The CZE method was successfully applied and no significant difference was found within the range of 95 % when compared with the official method by gas chromatography (GC) for food samples such as: olive oil, soybean oil, hydrogenated vegetable fat, butter, margarine, spreadable cheese and filled cookie. In addition to the use of the methodology for analysis of food samples was also applied to FA determination in the Wistar liver rat three groups and fed diets whose lipid fraction was composed of soybean oil used for different stages of time for deep frying processes. After 45 days consuming these diets, the rats were euthanized and the content of FA in liver was monitored by CZE. The results were compared with the official method by GC and no significant differences were observed in the range of 95 % and/or 99 % of confidence interval. The results of the rat liver electropherograms were evaluated by PCA, it was possible to obtain a recognition pattern and to discriminate the final group of the intermediate and control groups, indicating that total exposure time subjected to oil deep frying processes may be relevant for evaluating the quality of the oil. After detecting differences in the content of FA in the liver of animal groups, we required to verify potential biomarkers for cellular metabolism and, whereas some elements act as cofactors for enzyme activity, certain minerals were evaluated in samples of Wistar liver and femur rat involved in the study mentioned above, using the technique of Inductively Coupled Plasma Optic Emission Spectroscopy (ICP OES). It is known that all animals involved in this study received the same amount of selenium from the same origin (Mineral Mix). However, the animals belonging to the late group showed a significant decrease in selenium content in comparison with to the control and intermediate groups. Therefore, it is possible observe that the selenium interaction with other dietary components (FA) has been changed, since the animals in this study were distinctly affected by diet, with a broad dispersion in the values of selenium in the final group . The decrease in final group selenium content may be related to the decrease of antioxidant function , since oxidation processes also generate highly reactive compounds which excessive increase the oxidative stress of cell structures .

Transtornos de humor tais como a depressão e a ansiedade estão entre as desordens psiquiátricas mais comuns na atualidade, com tendência de aumento do número de casos, assim como vêm ocorrendo nas últimas décadas. O Transtorno Depressivo Maior (TDM), uma desordem psiquiátrica dispendiosa e ameaçadora da vida, afeta profunda e negativamente a qualidade de vida dos indivíduos afetados e irá atingir até 20% da população em algum momento ao longo de sua existência. Porém, a descrição de sua patofisiologia segue incompleta e o principal pré-requisito para controlar a doença é entender de forma detalhada as alterações moleculares e comportamentais que a acompanham. O estresse social, como um dos principais indutores da depressão, tem sido alvo de estudos tanto clínicos quanto pré-clínicos, servindo também como um mecanismo laboratorial que auxilia pesquisadores a rastrear alterações moleculares e comportamentais dessa doença. Recentemente, sem deixar de lado as demais hipóteses, o sistema imunológico através de respostas inflamatórias, tem recebido atenção crescente e é investigado por ser potencialmente um indutor e/ou facilitador de estados depressivos, contribuindo para a patofisiologia da depressão. Além disso, considerando que o estresse não afeta a todos os indivíduos da mesma maneira, a compreensão das diferenças individuais que podem resultar em resiliência pode auxiliar pesquisadores quanto aos fatores que afetam o desenvolvimento ou não do transtorno na população. Esta tese é composta por dois artigos, e visa investigar em um modelo pré-clínico, a contribuição do estresse social por subordinação (do inglês, social defeat – SD) ao comportamento tipo-depressivo, relacionando-o com inflamação. No primeiro artigo foi revisada a literatura mais recente sobre a contribuição do SD para a ativação microglial, o principal elemento neuroinflamatório do sistema nervoso central (SNC), e sua relação com o desenvolvimento dos comportamentos tipo-ansioso e tipo-depressivo. No segundo artigo investigou-se o papel de um estressor social contínuo (21 dias consecutivos de derrota social crônica) em um grupo de ratos Wistar adultos, relacionando respostas comportamentais a alterações de marcadores imunológicos periféricos e a duas estratégias de coping. O modelo de estresse por derrota social tem sido utilizado em diversos estudos de transtornos psiquiátricos e é uma das principais formas de indução de estados tipo-depressivos em animais de laboratório. Ademais, vêm demonstrando ser útil na indução de alterações do sistema 11 imunológico, tanto centrais quanto periféricas. Exposição ao estresse por derrota social induz em células microgliais um estado de hiperativação que, dependendo do tempo de exposição, pode levar ao desenvolvimento de desordens psiquiátricas como a ansiedade e a depressão. Além disso, o protocolo de 21 dias de derrota social contínua revelou dois estilos comportamentais em ratos Wistar. As estratégias de coping passivo e ativo observadas estão relacionadas a vulnerabilidade e a resiliência, respectivamente, e foram correlacionadas com distintos perfis imunológicos periféricos. Animais resilientes apresentam comportamentos e perfil imunológico periférico que os protegem do desenvolvimento de psicopatologias associadas ao estresse. / Humor disorders such as depression and anxiety are among the currently most common disorders, with a trend to an increasing number of cases, like in the past few decades. Major Depressive Disorder (MDD) is an expensive and life-threatening psychiatric disorder that profoundly and negatively affects individual´s quality of life and will affect up to 20% of the population at some point throughout life. However, the pathophysiology of MDD remains incompletely described, and a detailed description of its molecular and behavioral alterations is one of the core prerequisites for disease control. Social stress, one of the main inducers of depression, has been the subject of both clinical and preclinical studies, and has been used as a laboratory tool to help researchers track molecular and behavioral changes of this disease. Recently, without leaving other hypotheses aside, the immune system through inflammatory responses has received increasing attention and is investigated as a potential contributor in the pathophysiology of depression. Furthermore, considering that stress does not affect all individuals to de same extend, understanding individual differences that can turn into resilience may help researchers unravel the factors that influence the development of this disorder in the population. The present dissertation is composed of two articles, aiming to investigate in a preclinical model the contribution of social defeat stress (SD) to depressive-like behavior and correlate it to inflammation. In the first article, we reviewed the most recent literature on the contribution of SD to microglial activation, the main neuroinflammatory element of the central nervous system (CNS), and its relation to the development of anxiety and depressive-like behaviors. In the second paper, we investigated the role of a continuous social stressor (21 consecutive days of chronic social defeat) in a group of adult male Wistar rats, relating behavioral responses and two different coping strategies to changes in peripheral immune markers. The social defeat stress model has been used in several studies of psychiatric disorders and is one of the main forms to induce depressive-like states in laboratory animals. Additionally, it has been shown to be useful in inducing central and peripheral immune alterations. Exposure to stress due to social defeat induces microglial cells into a state of hyperactivation that, depending on the time of exposure, can lead to the development of psychiatric disorders such as anxiety and depression. Furthermore, the 21-day protocol of continuous social defeat revealed two behavioral 13 styles in Wistar rats. The observed passive and active coping strategies are related to vulnerability and resilience, respectively, and have been correlated with different peripheral immunological profiles. Resilient animals present behaviors and a peripheral immune profile that protect them from the development of stress-associated psychopathologies.

<p>Microbeam radiation therapy (MRT) is an experimental radiotherapy concept that has been primarily developed for the treatment of malignant brain tumours. MRT uses high flux synchrotron x-rays delivered as an array of parallel microbeams in high doses of irradiation in fractions of seconds. The aims of this study were to 1) investigate the induction of bystander effects after normal and tumour-bearing rat brains were exposed to MRT and homogenous radiation; 2) validate a brain bystander proteome by detecting protein expression throughout immunohistochemistry: and 3) to investigate whether communication of bystander signals can be produced between animals.</p> <p>Healthy and tumour-bearing Wistar rats were exposed to 17.5, 35, 70 or 350 Gy of MRT or homogenous field of synchrotron radiation to the right brain hemisphere. To study the communication of bystander effects between animals, irradiated rats shared the same cage with non-irradiated rats over a period of 48 hours. After euthanasia of the animals, brains and bladders were dissected, and samples for immunohistochemistry and bystander clonogenic assays were set up.</p> <p>Clonogenic survival of the reporter HPVG cells showed that bystander effects occurred in both the non-irradiated hemisphere and bladder of normal and tumour-bearing rats, while the irradiated hemisphere showed the direct effects of radiation. Moreover, communication of bystander signals was confirmed in the non-irradiated rats.</p> <p>In conclusion, the results suggest that the MRT and homogenous radiation of unilateral normal and tumour-bearing rat brains produce bystander signals that affect the whole organism and that those signals also can be transmitted to non-irradiated animals.</p> / Master of Science (MSc)

A ingestão de dieta deficiente em ferro pode causar alterações estruturais no Sistema Nervoso Central (SNC) bem como no nervo óptico por prejuízo no processo de mielinização. Essas alterações geradas pela anemia ferropriva pós-natal não são satisfatoriamente revertidas após a reposição de ferro. A estimulação tátil e o enriquecimento ambiental podem reduzir e/ou evitar os efeitos prejudiciais desta desnutrição sobre o SNC. O objetivo deste estudo foi avaliar estrutural e quantitativamente, o nervo óptico de ratos Wistar com anemia ferropriva submetidos à estimulação tátil e recuperação nutricional. Foram utilizados 4 grupos: Controle (C), Anêmico (A), Recuperado Não Estimulado (RN) e Recuperado Estimulado (E), compostos aleatoriamente por 1 rata mãe e 6 filhotes machos. Os grupos foram divididos de acordo com a variável dieta oferecida, pela quantidade de ferro/kg de dieta (com nível adequado em ferro (C), deficiente em ferro (A) e com recuperação do nível adequado de ferro (R)). O grupo C foi alimentado com dieta contendo 35 mg de ferro/kg de dieta, e o grupo A, com 4 mg de ferro/kg de dieta, e os grupos Recuperados (RN e RE), com 4 mg de ferro/kg de dieta do dia 0 ao 21º dia e, 35 mg de ferro/kg de dieta a partir do 22º dia. Os grupos Recuperados foram classificados de acordo com a variável estimulação: Estimulado (E), grupo submetido à estimulação tátil do dia 0 ao 32º dia, e Não Estimulado (N). Durante o período de amamentação, as ratas mães se alimentaram da dieta determinada para cada grupo, e no período pós lactação os filhotes receberam as mesmas dietas de suas respectivas mães. No 21º dia as ratas mães foram eutanasiadas e no 32º dia, todos os filhotes foram anestesiados e perfundidos via transcardíaca com uma solução de salina tamponada (PBS) 0,05M, pH 7,3, tendo seus nervos ópticos dissecados e os fragmentos selecionados refixados em tetróxido de ósmio a 1% em tampão fosfato 0,1 M, pH 7,3 e então processados para inclusão em araldite. Da área total da secção transversal do nervo óptico foram selecionadas 2 áreas que corresponderam aproximadamente 30% do nervo para a realização de análises morfológica e morfométrica. Na análise morfológica os animais do grupo RE mostraram um aspecto muito semelhante às características dos animais do grupo C, e com melhor aspecto em relação aos grupos A e RN, apresentando grande quantidade de fibras nervosas mielínicas, uniformemente distribuídas, bem agrupadas e compactadas, com espaço intersticial reduzido. Na análise morfométrica, em relação ao número de vasos sanguíneos, os fatores dieta, recuperação e estimulação não apresentaram interferência. Em relação ao número de astrócitos, a estimulação não interferiu, e em relação a dieta, o grupo A apresentou maior número que os grupos C e RN. Na avaliação do número de oligodendrócitos, em relação ao fator dieta, o grupo RN apresentou maior número que os grupos C e A, os quais não apresentaram diferença estatisticamente significante entre si. Já para o fator estimulação, o grupo RE apresentou menor número de oligodendrócitos quando comparado ao RN. Podemos concluir que: 1 - a dieta utilizada foi eficaz no desenvolvimento de anemia ferropriva leve nas ratas mães e severa nos filhotes; 2 - a associação das técnicas de estimulação tátil e recuperação nutricional resultou em uma reorganização estrutural do nervo óptico, semelhante ao grupo C e 3 - tal associação não interferiu no número de vasos sanguíneos, entretanto, resultou em uma normalização do número de astrócitos e de oligodendrócitos / Inadequate intake of dietary iron can cause structural changes in the Central Nervous System (CNS) and, thus, in the optic nerve with impaired myelination process. These changes generated by postnatal iron deficiency anemia are not satisfactorily reversed after replacement iron. The tactile stimulation and environmental enrichment can reduce and/or prevent the damaging effects of malnutrition on the CNS. The objective of this study was to evaluate structural and quantitatively the optic nerve of Wistar rats with iron deficiency anaemia submitted to tactile stimulation and nutritional recovery. We used 4 groups: Control (C), Anemic (A), Recovered Not Stimulated (RN) and Recovered Stimulated (R), randomly composed of 1 adult female rat and 6 male newborns. These groups were divided according to the variable diet provided, the amount of iron/kg in the diet (with appropriate levels of iron (C), deficient in iron (A) and with recovery of the appropriate level of iron (R)). The Control (C) group was fed with ration containing 35 mg iron/kg diet and the Anemic (A) group, with 4 mg iron/kg diet, and the Recovered groups (RN and RE) with 4 mg iron/kg diet from day 0 to day 21, and 35 mg iron/kg from day 22. The Recovered groups were classified according variable stimulation: Stimulated (E), group submitted to tactile stimulation from day 0 to day 32, and Not Stimulated (N). During the breastfeeding period, the mother rats fed the diet given to each group, and after lactation period the puppies received the same diets of their mothers. At day 21, the female rats were euthanized and at day 32 all juveniles were anesthetized and perfused transcardially with a buffered saline solution (PBS) 0,05M, pH 7,3, having their optic nerves dissected, and selected fragments were fixed in osmium tetroxide 1% and phosphate buffer 0,1 M, pH 7,3, and then processed for embedding in Araldite. Were selected 2 areas of the total area of optic nerve cross-section which approximately corresponded to 30% of the nerve to perform morphological and morphometric analysis. In the morphological analysis the optic nerve of the animals in RE group showed a very similar structural aspect to the characteristics of the optic nerves in group C, and looking better than in groups A and RN, with lot of myelinated nerve fibers well grouped and compacted and this organization was present uniformly across the nerve, resulting in reduced interstitial space. In the morphometric analysis, the number of blood vessels, dietary factors, recovery and stimulation showed no interference, since all groups showed no statistically significant difference. Regarding to the number of astrocytes, the stimulation did not influence it and, regarding to diet, the group A presented a higher number of cells than groups C and RN. In assessing the number of oligodendrocytes, in relation to diet factor, RN group had a greater number of oligodendrocytes that C and A groups, which showed no significant statistically difference between them. As for the stimulation factor, the RE group had fewer oligodendrocytes than the RN. With the results can be concluded that: 1- the used diet was effective in the development of mild iron deficiency anaemia in mothers and severe in young rats; 2- the association of tactile stimulation and nutritional recovery techniques resulted in a structural reorganization of the optic nerve, similar to C group and 3- this association did not affect the number of blood vessels, however it resulted in a normalization of the number of astrocytes and oligodendrocytes

A ingestão de dieta deficiente em ferro pode causar alterações estruturais no Sistema Nervoso Central (SNC) bem como no nervo óptico por prejuízo no processo de mielinização. Essas alterações geradas pela anemia ferropriva pós-natal não são satisfatoriamente revertidas após a reposição de ferro. A estimulação tátil e o enriquecimento ambiental podem reduzir e/ou evitar os efeitos prejudiciais desta desnutrição sobre o SNC. O objetivo deste estudo foi avaliar estrutural e quantitativamente, o nervo óptico de ratos Wistar com anemia ferropriva submetidos à estimulação tátil e recuperação nutricional. Foram utilizados 4 grupos: Controle (C), Anêmico (A), Recuperado Não Estimulado (RN) e Recuperado Estimulado (E), compostos aleatoriamente por 1 rata mãe e 6 filhotes machos. Os grupos foram divididos de acordo com a variável dieta oferecida, pela quantidade de ferro/kg de dieta (com nível adequado em ferro (C), deficiente em ferro (A) e com recuperação do nível adequado de ferro (R)). O grupo C foi alimentado com dieta contendo 35 mg de ferro/kg de dieta, e o grupo A, com 4 mg de ferro/kg de dieta, e os grupos Recuperados (RN e RE), com 4 mg de ferro/kg de dieta do dia 0 ao 21º dia e, 35 mg de ferro/kg de dieta a partir do 22º dia. Os grupos Recuperados foram classificados de acordo com a variável estimulação: Estimulado (E), grupo submetido à estimulação tátil do dia 0 ao 32º dia, e Não Estimulado (N). Durante o período de amamentação, as ratas mães se alimentaram da dieta determinada para cada grupo, e no período pós lactação os filhotes receberam as mesmas dietas de suas respectivas mães. No 21º dia as ratas mães foram eutanasiadas e no 32º dia, todos os filhotes foram anestesiados e perfundidos via transcardíaca com uma solução de salina tamponada (PBS) 0,05M, pH 7,3, tendo seus nervos ópticos dissecados e os fragmentos selecionados refixados em tetróxido de ósmio a 1% em tampão fosfato 0,1 M, pH 7,3 e então processados para inclusão em araldite. Da área total da secção transversal do nervo óptico foram selecionadas 2 áreas que corresponderam aproximadamente 30% do nervo para a realização de análises morfológica e morfométrica. Na análise morfológica os animais do grupo RE mostraram um aspecto muito semelhante às características dos animais do grupo C, e com melhor aspecto em relação aos grupos A e RN, apresentando grande quantidade de fibras nervosas mielínicas, uniformemente distribuídas, bem agrupadas e compactadas, com espaço intersticial reduzido. Na análise morfométrica, em relação ao número de vasos sanguíneos, os fatores dieta, recuperação e estimulação não apresentaram interferência. Em relação ao número de astrócitos, a estimulação não interferiu, e em relação a dieta, o grupo A apresentou maior número que os grupos C e RN. Na avaliação do número de oligodendrócitos, em relação ao fator dieta, o grupo RN apresentou maior número que os grupos C e A, os quais não apresentaram diferença estatisticamente significante entre si. Já para o fator estimulação, o grupo RE apresentou menor número de oligodendrócitos quando comparado ao RN. Podemos concluir que: 1 - a dieta utilizada foi eficaz no desenvolvimento de anemia ferropriva leve nas ratas mães e severa nos filhotes; 2 - a associação das técnicas de estimulação tátil e recuperação nutricional resultou em uma reorganização estrutural do nervo óptico, semelhante ao grupo C e 3 - tal associação não interferiu no número de vasos sanguíneos, entretanto, resultou em uma normalização do número de astrócitos e de oligodendrócitos / Inadequate intake of dietary iron can cause structural changes in the Central Nervous System (CNS) and, thus, in the optic nerve with impaired myelination process. These changes generated by postnatal iron deficiency anemia are not satisfactorily reversed after replacement iron. The tactile stimulation and environmental enrichment can reduce and/or prevent the damaging effects of malnutrition on the CNS. The objective of this study was to evaluate structural and quantitatively the optic nerve of Wistar rats with iron deficiency anaemia submitted to tactile stimulation and nutritional recovery. We used 4 groups: Control (C), Anemic (A), Recovered Not Stimulated (RN) and Recovered Stimulated (R), randomly composed of 1 adult female rat and 6 male newborns. These groups were divided according to the variable diet provided, the amount of iron/kg in the diet (with appropriate levels of iron (C), deficient in iron (A) and with recovery of the appropriate level of iron (R)). The Control (C) group was fed with ration containing 35 mg iron/kg diet and the Anemic (A) group, with 4 mg iron/kg diet, and the Recovered groups (RN and RE) with 4 mg iron/kg diet from day 0 to day 21, and 35 mg iron/kg from day 22. The Recovered groups were classified according variable stimulation: Stimulated (E), group submitted to tactile stimulation from day 0 to day 32, and Not Stimulated (N). During the breastfeeding period, the mother rats fed the diet given to each group, and after lactation period the puppies received the same diets of their mothers. At day 21, the female rats were euthanized and at day 32 all juveniles were anesthetized and perfused transcardially with a buffered saline solution (PBS) 0,05M, pH 7,3, having their optic nerves dissected, and selected fragments were fixed in osmium tetroxide 1% and phosphate buffer 0,1 M, pH 7,3, and then processed for embedding in Araldite. Were selected 2 areas of the total area of optic nerve cross-section which approximately corresponded to 30% of the nerve to perform morphological and morphometric analysis. In the morphological analysis the optic nerve of the animals in RE group showed a very similar structural aspect to the characteristics of the optic nerves in group C, and looking better than in groups A and RN, with lot of myelinated nerve fibers well grouped and compacted and this organization was present uniformly across the nerve, resulting in reduced interstitial space. In the morphometric analysis, the number of blood vessels, dietary factors, recovery and stimulation showed no interference, since all groups showed no statistically significant difference. Regarding to the number of astrocytes, the stimulation did not influence it and, regarding to diet, the group A presented a higher number of cells than groups C and RN. In assessing the number of oligodendrocytes, in relation to diet factor, RN group had a greater number of oligodendrocytes that C and A groups, which showed no significant statistically difference between them. As for the stimulation factor, the RE group had fewer oligodendrocytes than the RN. With the results can be concluded that: 1- the used diet was effective in the development of mild iron deficiency anaemia in mothers and severe in young rats; 2- the association of tactile stimulation and nutritional recovery techniques resulted in a structural reorganization of the optic nerve, similar to C group and 3- this association did not affect the number of blood vessels, however it resulted in a normalization of the number of astrocytes and oligodendrocytes