Las infecciones nosocomiales (IN) provocan una elevada morbilidad y mortalidad, una gran carga de trabajo para el personal y un elevado coste económico. El uso eficaz de los biocidas, antisépticos y desinfectantes, junto con la desinfección de los dispositivos médicos y de superficies, el lavado de manos y las técnicas de barrera, constituyen las medidas de prevención de dichas IN. El desarrollo de estudios sobre la actividad antimicrobina, que permitan la selección de productos biocidas eficaces puede suponer una importante mejora en la lucha contra las IN. Se estudió in vitro la actividad antimicrobiana del ácido peracético al 0.26% (Perasafe®) en comparación con el glutaraldehído alcalino al 2% (Cidex®), frente a Mycobacterium avium- Mycobacterium intracelulare (MAI), Mycobacterium tuberculosis H37Rv, Mycobacterium fortuitum y Mycobacterium chelonae. Perasafe® fue micobactericida y tuberculocida (factor de reducción ? 5 log10) en 20 min. de contacto; mientras que Cidex® lo fue en 30 min. de exposición. MAI fue la micobacteria más resistente. También demostramos la eficacia de Perasafe® en comparación con Cidex® para la desinfección de broncoscopios contaminados experimentalmente con M.tuberculosis H37Rv y MAI. Ambos productos consiguieron un factor de reducción ?5 tras 10 min. de contacto frente a M.tuberculosis, y tras 20 min. frente a MAI. Así pues, como demuestran los estudios in vitro y de "uso simulado", Perasafe®, es un desinfectante de alto nivel efectivo frente a micobacterias y constituye una posible alternativa al glutaraldehído alcalino al 2% en la desinfección de broncoscopios.Se evaluó la actividad antimicrobiana frente a M.tuberculosis H37Rv, MAI, M.kansasii y M.chelonae de Korsolex® AF. La concentración del 1% fue eficaz frente a todas las micobacterias ensayadas en 60 min. de contacto. Estos datos sugieren que los productos biocidas que contienen aminas podrían ser útiles en la desinfección intermedia y de alto nivel de los dispositivos médicos. Acinetobacter baumannii destaca por su habilidad para desarrollar y transmitir resistencias antimicrobianas y por ser un patógeno nosocomial emergente difícil de erradicar. Se estudiaron 9 cepas multirresistentes, con adquisición progresiva de la resistencia a los antibióticos betalactámicos aisladas en el transcurso de un brote epidémico. Para ello, se realizó un estudio de suspensión cuantitativo según el European Standard EN 1040. Todas las cepas de A.baumannii fueron sensibles a todos los antisépticos (Sterillium®, 2 formulaciones alcohólicas no comercializadas, Hibiscrub® y Clorina®) y desinfectantes evaluados (Virkon® e Instrunet superficies®). Se comprobó que la resistencia a múltiples antibióticos betalactámicos en cepas de A.baumannii no se asocia a resistencia o descenso de sensibilidad a los biocidas.Por otro lado, hemos analizado el espectro de actividad antimicrobiana de Virkon siguiendo las normativas AFNOR. Los resultados obtenidos demuestran que Virkon® al 1% es un desinfectante de bajo nivel por ser un biocida con efecto antimicrobiano rápido (5 min.) frente a bacterias vegetativas (gramnegativas y grampositivas), levaduras, virus y micobacterias no tuberculosas en ensayos cuantitativos de suspensión, pero únicamente bactericida en los ensayos con portagérmenes. Finalmente, se evaluó la eficacia de un compuesto clorado (Solprogel®) frente al VIH-1 y VHB. La actividad virucida del VIH-1 se estableció mediante un ensayo de infectividad en células MT-2 y la del VHB midiendo la inhibición de la actividad de la DNA polimerasa (DNA-P). En ambos casos, la actividad antimicrobiana de Solprogel® se comparó con la del dicloroisocianurato sódico (NaDCC). Solprogel® y NaDCC, a una concentración de 120 ppm y 100 ppm de cloro disponible, respectivamente, inhiben el VIH-1 en 5 min. de contacto. La DNA-P del VHB fue sensible a la inhibición por los dos desinfectantes, requiriendo 960 y 1.000 ppm de cloro disponible para Solprogel® (16%) y NaDCC, respectivamente y un tiempo de exposición mínimo de 2 min. / Nosocomial infections (NI) lead to a high morbidity and mortality, significant staff work-loads and a high economic cost. The effective use of biocides, antiseptics and disinfectants along with the disinfection of surfaces and medical devices, hand washing and barrier techniques make up the means of prevention of NI.The development of studies in antimicrobial activity, which allow for the selection of effective biocidal products, could lead to an important improvement in the fight against IN.In vitro studies were made of the antimicrobial activity of peracetic acid at 0.26% (Perasafe®) in comparison to the 2% alkaline glutaraldehyde (Cidex®) against Mycobacterium avium- Mycobacterium intracelulare (MAI), Mycobacterium tuberculosis H37Rv, Mycobacterium fortuitum and Mycobacterium chelonae. Perasafe® was mycobactericidal and tuberculocidal (reduction factor ? 5 log10) after 20 minutes of contact. For Cidex®, 30 minutes of exposure was required. MAI was the most resistant mycobacterium.We also demonstrated the effectiveness of Perasafe® compared to Cidex® for the disinfection of bronchoscopes experimentally contaminated with M. tuberculosis H37Rv and MAI. Both products achieved a reduction factor ? 5 after 10 minutes contact with M. tuberculosis and after 20 minutes with MAI. So, as demonstrated in in vitro studies and in simulated use, Perasafe® is a disinfectant with a high level of effectiveness against mycobacteria and would be a possible alternative to 2% alkaline gluteraldehyde for the disinfection of bronchoscopes.The antimicrobial activity of Korsolex® AF against M.tuberculosis H37Rv, MAI, M.kansasii and M. chelona was evaluated. After 60 minutes contact the 1% concentration was effective against all the mycobacteria studied. These data suggest that biocidal products that contain amines could be useful in the intermediate and high level disinfection of medical devices.Acinetobacter baumannii is noted for its ability to develop and transmit antimicrobial resistances and has become an emerging pathogenic nosocomial infection that is difficult to eradicate. Nine multi-resistant strains were studied. These had progressive acquisition of resistance to betalactamate antibiotics and were isolated during an epidemic outbreak. In this case, a quantitative suspension study according to European Standard EN 1040 was performed. All the strains of A. baumannii showed sensitivity to all the studied antiseptics (Sterillium®, two non-commercialised alcoholic formulations, Hibiscrub® and Clorina®) and disinfectants (Virkon® and Instrunet superficies®). This proved that resistance to multiple betalactamate antibiotics in strains of A. baumannii is not associated with resistance or decrease in sensitivity to biocidals.On the other hand, we also analysed the antimicrobial activity spectrum of Virkon® according to the AFNOR regulations. The results obtained demonstrate that Virkon® at 1% concentration is a poor disinfectant to be a rapid antimicrobial effect biocide (5 minutes) against vegetative bacteria (gram negatives and gram positives), yeasts, viruses and non-tuberculoid mycobacteria in quantitative suspension studies. It was only bactericidal in the studies using the germ-carrier method.Finally, the efficacy of a chloride compound (Solprogel®) against VIH-1 and VHB was evaluated. The virucidal activity against the VIH-1 was established by means of an infectivity study in MT-2 cells and for that of the VHB by measuring the inhibition of the DNA polymerase (DNA-P) activity. In both cases, the antimicrobial activity of Solprogel® was compared to that of sodium dichloroisocyanurate (SDIC). Solprogel® and SDIC at respective concentrations of 120 ppm and 100 ppm of available chlorine inhibited VIH-1 after 5 minutes of contact. The DNA-P of the VHB was sensitive to inhibition by both disinfectants, requiring 960 and 1,000 ppm of available chlorine for 16% Solprogel® and SDIC respectively, and a minimum exposure time of 2 minutes.

La presente tesis doctoral se enmarca dentro de esta línea de investigación, que agrupa diferentes disciplinas como la psicología de la actividad física y la psicología de la salud, la neurociencia cognitiva y la psicología de la vejez. Con la utilización de una de las técnicas de neuroimagen menos invasivas y con mayor resolución espacio-temporal, la magnetoencefalografía, se han estudiado los efectos de la práctica regular de actividad física en la actividad cerebral, en una muestra de personas mayores. Las técnicas de neuroimagen han sido previamente utilizadas para evaluar a la gente mayor en función del nivel de práctica físico-deportiva (Cotman y col., 2007; Ge y col., 2007; van Praag, 2008). Sin embargo, la magnetoencefalografía, a pesar de ser una técnica útil para el diagnóstico de lesiones u otro tipo de patologías a nivel cerebral, hasta nuestro conocimiento no ha sido utilizada para evaluar a una muestra de gente mayor con diferentes niveles de actividad física. En este trabajo, la técnica se ha utilizado con el fin de investigar los patrones de actividad electromagnética en gente mayor, durante la realización de dos tipos de tareas cognitivas diferentes, una tarea de atención selectiva y otra de memoria de trabajo. El capítulo 1 del trabajo se centra en la Introducción al ámbito del envejecimiento y las perspectivas socio-demográficas que acompañan a la población actualmente y en los próximos 15-20 años. El capítulo 2 trata de los cambios metabólicos que sufrimos las personas a medida que vamos envejeciendo y cómo el ejercicio físico puede actuar contra estos cambios paliando los efectos negativos propios del proceso de envejecer. En el capítulo 3 veremos los cambios neuroanatómicos que se producen específicamente en el cerebro a medida que envejecemos, dando lugar al progresivo declive cognitivo. Asimismo veremos las hipótesis compensatorias que han ido surgiendo para dar explicación al buen rendimiento cognitivo que pueden mostrar las personas mayores a pesar de este declive cognitivo. Puesto que la práctica regular de actividad física puede influir en la mejora de ciertos procesos cognitivos, en el capítulo 4 veremos los principales beneficios respecto a la salud, el bienestar físico y psicológico, y las relaciones sociales, que pueden conseguir las personas que mantienen un estilo de vida físicamente activo. El capítulo 5 muestra los fundamentos de la variabilidad de la frecuencia cardiaca como sistema para analizar la función autonómica de las personas mayores, la cual repercute en la funcionalidad y la salud cardiovascular. El capítulo 6 repasa las principales técnicas de neuroimagen empleadas para el estudio de los procesos cerebrales. La técnica de magnetoencefalografía se presenta de manera más detallada ya que ha sido escogida para realizar la investigación. Los capítulos 7 y 8 corresponden al planteamiento y los objetivos de la investigación, así como al método empleado para llevarla a cabo, respectivamente. Finalmente, los capítulos 9 y 10 muestran los resultados encontrados así como su discusión.

IntroducciónLas b(l 3)(l 4) glucanasas son enzimas de gran interés biotecnólogico tanto en la industria cervezera como en la de fabricación de piensos. Los objetivos de esta tesis han sido: rediseñar la glucanasa de bacillus licheniformis con objeto de tratar de mejorar la actividad enzimática y determinar la función del lazo mayor del centro activo en dicho proceso, así como analizar y rediseñar la estabilidad térmica del enzima, en particular determinar la influencia del lazo mayor en la desnaturalización térmica, relacionándolo con el proceso y tipo de plegamiento.Análisis de los mutantes de saturación en la posición 58 de glucanasas1. La reducción de volumen de la cadena lateral aumenta la actividad, aumentado la constante catalítica kcat, si bien disminuye la Km. El mutante M58G presenta la actividad más alta, hasta 6 veces más que el silvestre, y el mutante M58A presenta más de 4 veces la actividad del silvestre, ambos, en términos de kcat/Km. 2. Los residuos hidrófilos disminuyen la actividad. 3. Unicamente en mutantes aromáticos como M58F y M58W, se aprecia una disminución de valores de Km, respecto al enzima silvestre. El análisis de la termorresistencia1. Con respecto al medio, serían claves el pH (por pérdida de interacciones pH dependientes), el tampón (por su posible papel quelante),y la presencia de sustrato (porque estabilizaría).2. Con respecto a la estructura serían claves los aminoácidos del lazo y la coordinación del Ca++. La coordinación del Ca++ puede ser mejorada introduciendo una nueva interacción entre el catión y la beta 15, como en el caso del mutante N236D. 3. Finalmente, la termoinactivación de la glucanasa de Bacillus licheniformis, en todos los mutantes estudiados, siguen un patrón bifásico. Su análisis cinético permite justificar el efecto de diversos mutantes y el comportamiento del enzima frente a la temperatura. / IntroductionThe (l-3)(l-4) glucanases are enzymes of great biotechnologyc interest in the brewery industry and in the manufacture of fodder. One objective of this thesis is to redesign the glucanase of bacillus licheniformis trying to improve its enzymatic activity to determine the function that the big loop, situated in the active centre, in this process. Another objective is to analyse and redesign the thermal stability of the enzyme, determining, in particular, the influence of the big loop in the thermal denaturation, and the relation with the process and type of folding.Analysis of the saturation at position 58 of glucanase 1. The reduction of volume of the lateral chain increases the activity, increasing the catalytic constant kcat, although the Km diminishes. Mutant M58G shows the highest activity, up to 6 times more than the wild type, and mutant M58A shows more than 4 times the activity of the wild type, both, in terms of kcat/Km. 2. Hydrophilic residues diminish the activity. 3. Only in the aromatic mutants, like M58F and M58W, we can observe that the Km values diminish, with respect to the wild enzyme. The analysis of the thermoresistance 1. Some factors of the buffer are essential: pH (by loss of pH dependent interactions ), the buffer composition (by its possible chelant action) and the substrate presence (it would stabilize the enzyme).2. Regarding to structure, the amino acids of the loop and the coordination of the Ca++ would be key elements. The coordination of the Ca++ can be improved introducing a new interaction between the cation and beta 15, as in the case of mutant N236D. 3. Finally the thermoinactivation, of the glucanase of Bacillus licheniformis, in all of the mutants studied, follows a two-phases pattern. The kinetic analysis justifies the effect of several mutants and the behaviour of the enzyme versus the temperature.

Introducción.Entre las acciones técnicas más realizadas en gimnasia deportiva, cabe destacar la recepción sobre la colchoneta, la cual se realiza desde elevadas alturas, generando fuerzas de impacto entre 10 y 18 veces el peso corporal (McNitt-gray. 1993). Pese a la existencia de normas que establecen los criterios a cumplir por una colchoneta, las lesiones durante la recepción tras un salto o salida de un aparato no disminuyen. En este sentido, el Objetivo de esta tesis doctoral fue el de analizar los mecanismos de lesión en gimnasia y su relación con los criterios normativos de las colchonetas. Material y métodos. Los diferentes tipos de estudios planteados fueron: - Estudio de opinión, empleando la metodología QFD ("Quality Fuction Deployment") y herramientas como los paneles de usuarios, que han permitido analizar las propiedades y características más importantes de las colchonetas. - Estudio mecánico según norma EN 12503, que han permitido analizar las propiedades de una muestra de colchonetas seleccionadas. - Estudio biomecánico y de percepción de la recepción tras un "drop jump" modificado en distintos tipos de colchonetas, el cual ha permitido analizar diferentes variables cinéticas y cinemáticas, mediante el empleo de diversas técnicas instrumentales de: electrogoniometría, dinamometría, acelerometría y presurometría. Resultados y discusión.Entre los aspectos más valorados en una colchoneta destacan los materiales rígidos (8.74%) y absorbentes (8.74%), la velocidad de recuperación de la colchoneta (7.57%), y el comportamiento areaelástico de la superficie (6.89%). En los ensayos mecánicos se observa como el comportamiento general de las colchonetas tiende a reducir deceleración y devolución de energía a medida que la deformación aumenta. En los estudios biomecánicos se observa como, siendo los principales mecanismos de lesión las elevadas fuerzas de impacto y la inestabilidad sobre la colchoneta, los resultados mostraron como una deficiente amortiguación de la colchoneta implica al gimnasta realizar una recepción con menores rangos de movimiento articular, soportar elevadas fuerzas de impacto y elevadas magnitudes en las aceleraciones registradas en tibia y cabeza, así como una mayor posibilidad de caída debido al impacto inicial del talón sobre la colchoneta. Ante la falta de estabilidad durante la recepción, asociada con una mayor deformación de la colchoneta, se observa como pese a reducirse las fuerzas de impacto y las aceleraciones en tibia-cabeza, el riesgo de sufrir una lesión se relaciona con el aumento del tiempo empleado por el gimnasta para finalizar la recepción con una mayor presión, flexión y torsión en la zona delantera del pie.Conclusión.Los resultados muestran como no todos los aspectos importantes son analizados por las normas, y como las propiedades de una colchoneta afectan a la cinética y cinemática del gimnasta durante la recepción. La consideración del análisis biomecánico de la recepción por parte de distintas normas podría reducir el elevado número de lesiones asociadas a la inestabilidad en la colchoneta y las elevadas fuerzas de impacto, mejorando a su vez el rendimiento deportivo del gimnasta. / Introduction.Among the most frecuent skills performed in gymnastics, landing is one of the most importants. Landing from high heights, could generate impact forces between 10-18 body weight (McNitt-gray. 1993). Despite actual mats standards criteria, injuries during landing doesn´t reduce. In this sense, the objective of this doctoral thesis has been to analyze the injury mechanisms in gymnastic and it is relation with mats standards criteria.Material and MethodsThe different types of studies considered were:- Subjective Study; using QFD (Quality Fuction Deployment) methodology and tools like "user´s panel", wich has allowed us to analyze the properties and more important characteristics of mats.- Mechanical study; based on EN 12503, that has allowed us to analyze the properties of a selected sample of mats.- Biomechanical study and the landing percepction after a modified drop jump in diferent mats, wich has allowed us to analyze several instrumental techniques like: Electrogoniometry, dinamometry, accelerometry and pressurometry.Results and discussionResults show that same of the most important characteristics in landing mats are: rigid (8.74%) and absorvents (8.74%) materials, recovery speed (7.57%) and areaelastic behavior surface (6.89%). In normative tests, it is observed that as mats deceleration and energy return is reduced, deformation increases. In landing biomechanical studies, it is observed that inestability and high impact forces are main mechanisms of injury. The results show that a deficient mat deformation implies smaller articular range of motion, high impact forces and accelerations in tibia and head, as well as a greater possibility to fall. Landing inestability, due to a greater deformation of landing mats injury risk is related with the increase of time used by gymnasts to complete the landing, with a greater preassure, flexion and torsion in the forefoot, instead these reduced impact forces and tibial and head accelerationsConclusionsNot all important mat aspects are analyzed by the standarized test, because mats properties affect gymnasts kinetic and kinematic during landing. The inclusion of biomechanical landing studys in standard test, could contribute to reduce the high number of injuries associated to inestability and high impact forces during landing, improving gymnasts sport live as well.

Esta investigación analiza los efectos de un Programa deIntervención Docente aplicado desde el plan de estudios de Magisterio,especialidad Educación Física y su repercusión sobre los ambientesmotivacionales en clases de Educación física en Escuelas de EducaciónPrimaria.El marco conceptual que se ha utilizado en este estudio es el de laperspectiva de las metas de logro (Ames, 1984, 1992; Dweck, 1986;Maehr, 1984; Maehr y Nicholls, 1980; Nicholls, 1984a, 1984b, 1989,1992). En el ámbito de la Educación Física ha habido muchasintervenciones (Ames, 1992; Ames y Archer, 1989; Treasure, 1993;Treasure y Roberts, 2001) que sirven de precedente para el presentetrabajo. Treasure (1993) demostró que las disposiciones personales puedenquedar anuladas en los niños cuando los criterios y señales del entorno sonlo suficientemente fuertes para pretender crear un clima motivacional deaprendizaje apropiado.El estudio se realizó sobre una muestra de 17 alumnos de magisteriodel grupo experimental y 18 del grupo control, mas 731 niños de 6º cursode Educación Primaria (n = 354 gr. experimental y n = 377 gr. control). Enel grupo experimental se aplicó un Programa de Intervención Docentebasado en la aplicación del TARGET (Ames, 1992) caracterizado por serlongitudinal e interdisciplinar, se aplicó desde diferentes asignaturas ydurante los 3 cursos de los estudios de magisterio. Tras la intervención, losniños que recibieron clases de los alumnos de magisterio sometidos a laintervención, demostraron mayor percepción de los criterios de éxito ymayor implicación motivacional a la tarea, así como un mayor nivel desatisfacción/concentración que los niños del grupo control. La mayorsatisfacción/concentración la manifestaron los niños con alta implicaciónmotivacional a la tarea y baja al ego. El efecto de la intervención fuepositivo, aquellos alumnos de magisterio que fueron formados de maneraintegral para crear climas motivacionales de tarea, fueron capaces demanipular el clima motivacional de tal forma que la percepción de loscriterios de éxito por parte de los niños fue la esperada. Los resultadostambién revelaron que la intervención fue más efectiva sobre los niños quesobre las niñas. La formación tanto de maestros como de licenciados enEducación Física debería contemplar la necesidad de capacitar a los futuroseducadores en esta línea de actuación docente, capaz de captar el interés,mantener la motivación y generar estados de satisfacción en el alumnado. / This research analyzes the effects of a teaching intervention programmeexecuted by the University Department of Education, in the Physical education field, aswell as its repercussion on motivational climate during the physical education classes inPrimary Schools.The conceptual field used for this research is that provided by the achievementgoal perspective (Ames, 1984, 1992; Dweck, 1986; Maehr, 1984; Maehr y Nicholls,1980; Nicholls, 1984a, 1984b, 1989, 1992). There have been a lot of interventions in thephysical education field (Ames, 1992; Ames y Archer, 1989; Treasure, 1993; Treasure yRoberts, 2001) which precede the present research. Treasure (1993) showed thatchildren´s personal attitudes can actually be overridden when the environment criteriaas well as signals are strong enough to create a motivational climate for proper learning.This research was executed upon an experimental random group of 17 teachingstudents together with another control group of 18 teaching students, 731 children ontheir sixth year of Primary Schools (n = 354 experimental group and n= 377 controlgroup). In the experimental group a teaching intervention programme based on theTARGET format was implemented. This format, which is particularly longitudinal andinterdisciplinary, was implemented by different subjects all over the three-year teachingtaught by the university teaching students who had taken part in it, proved to havegreater perception concerning success criteria, improved motivational involvementtowards task and achieved a higher level of satisfaction/concentration than the childrenin the control group. The children with the highest levels of satisfaction/concentrationwere the ones with high motivational involvement towards task and low ego. The effectof this intervention was positive as those university teaching students who had beencompletely instructed in order to create task motivational climates were able to handlemotivational climate so the children´s perception of success criteria was what theyexpected. The training of both Primary and Secondary School teachers of PhysicalEducation should consider the need to instruct teachers in this direction, able to gaininterest, maintain motivation and generate satisfaction in pupils.

Las fluoroquinolonas se han convertido en agentes importantes en quimioterapia, especialmente en pacientes con infecciones graves que requieran fármacos potentes administrados por vía oral. Sin embargo, la aparición de resistencias a las quinolonas ha conducido a la búsqueda de nuevas moléculas, principalmente incluyendo modificaciones en el núcleo base de la benzopiridona, lo que ha llevado al hallazgo y comercialización de nuevas quinolonas, más activas pero, en muchos casos, más tóxicas, hasta el punto de que algunas han dejado de utilizarse o han sido retiradas del mercado tras haberse demostrado su peligrosidad a medio o largo plazo.En este contexto, el ciprofloxacino es una de las quinolonas más clásicas y de uso más extendido por su amplio espectro de acción, su eficacia, su excelente tolerancia y por permitir su administración tanto por vía parenteral como por vía oral, si bien presenta el problema de poseer una biodisponibilidad oral relativamente baja e irregular. Por este motivo y tomando esta quinolona como referencia de actividad, se han sintetizado nuevos derivados homólogos pertenecientes a dos series: 4'N-alquilciprofloxacino y 3'metil,4'N-alquilciprofloxacino que podrían mejorar la biodisponibilidad y la actividad. En esta línea se incluye el Proyecto de Investigación SAF 96-1710 titulado "Predicción de la biodisponibilidad en los estudios de desarrollo de fármacos: nuevas quinolonas" que pretende comprobar si el aumento de biodisponibilidad esperado en los derivados afecta a la actividad antimicrobiana.En resumen, se ha estudiado y comparado la actividad de estos homólogos con la del ciprofloxacino. Para ello, se ha determinado la CMI de los derivados, sobre 160 cepas bacterianas de origen clínico, utilizando el método de diluciones dobles seriadas en MHA según las especificaciones del NCCLS.Se demuestra que la adición del sustituyente alquílico en 4'N no altera el espectro de acción del patrón utilizado. Sin embargo, los compuestos sintetizados presentan diferente actividad frente a los gérmenes ensayados. En1conjunto los más activos son 4'N-metilciprofloxacino, 4'N-etilciprofloxacino, 3'metilciprofloxacino(97-100) y 3'metil,4'N-metilciprofloxacino (97-101).De forma general, se puede afirmar que respecto a la serie 4'N-alquilciprofloxacino, los compuestos con un radical metilo o etilo son los más activos: 4'N-metilciprofloxacino es el más activo frente a los Gram negativos (a excepción de E. coli) y 4'N-etilado el más activo frente a los Gram positivos. No obstante, 4'N-propilciprofloxacino también presenta mejor actividad que el patrón en los microorganismos Gram positivos (a excepción de E. faecalis), y en A. calcoaceticus. 4'N-butilciprofloxacino no presenta mejor actividad que el compuesto de referencia en ningún caso, si bien en los microorganismos ya mencionados la actividad es la misma.Respecto a la serie 3'metil, 4'N-alquilciprofloxacino, se puede colegir que los compuestos 97-100 y 97-101 son los más activos. En resumen, el derivado 97-101 presenta la mayor actividad frente a A. calcoaceticus, M. catarrhalis, S. aureus, SCN y S. pneumoniae. Por otro lado, 97-100 es el más activo frente a Achromobacter spp. No obstante, 97-102 y 97-103 también presentan mejor actividad que el ciprofloxacino en los microorganismos A. calcoaceticus, S. aureus y S. pneumoniae. El derivado 97-104 no presenta mejor actividad que el patrón en ningún caso, si bien en los microorganismos ya mencionados la actividad es la misma.En lo que se refiere a los heterólogos estudiados, en general, el grepafloxacino es el compuesto más activo. El ofloxacino y el sarafloxacino presentan una actividad muy similar a la del ciprofloxacino, y el flumequino es el menos activo.También se ha estudiado la cinética de letalidad de algunos de estos compuestos en Staphylococcus aureus ATCC 25923. Este estudio proporciona una serie de parámetros de gran interés en lo que se refiere al mecanismo de acción. Los resultados obtenidos demuestran que la dinámica de crecimiento y letalidad que presentan los homólogos es la misma que su patrón, siguen la misma cinética bactericida y muestran un efecto paradógico similar. Si se2considera la concentración absoluta, el antibiótico con mayor velocidad de letalidad es el 97-101. Se planteó si el grupo metilo adicional que presenta este derivado en posición 3' con respecto a ciprofloxacino y los compuestos de la otra serie, podría ser el responsable de su mayor letalidad. Dado que la selección de la girasa como primera diana por parte de las quinolonas se asocia con un aumento en la velocidad de letalidad, se determinó la diana de primera elección para este derivado. Se comprobó que la mayor letalidad de este compuesto no se debe a un cambio en la selección de la diana intracelular; pues se demostró, mediante estudios de CMI sobre cepas mutantes, que la topoisomerasa IV es su primera diana en S. aureus, al igual que para el ciprofloxacino.Por otro lado, debido a que los antibióticos estudiados pertenecen a series homólogas, se ha estudiado la relación entre la lipofilia, como parámetro estructural, y la inversa de la media geométrica de la CMI, como índice de actividad. Esta correlación proporciona ajustados bilineales y permite identificar el coeficiente de reparto óptimo para una especie dada, que es en general más bajo para los microorganismos Gram negativos que para los Gram positivos.Además, se ha investigado acerca del mecanismo de acción de estas quinolonas a nivel molecular. En concreto, la investigación se ha centrado en Streptococcus pneumoniae, determinando los efectos de inhibición de las quinolonas ensayadas en la girasa y topoisomerasa IV bacteriana in vitro, con el propósito de conocer la diana específica de los derivados alquilados en comparación con el ciprofloxacino, proporcionar información acerca del modo de acción de estos compuestos y comprobar si ello permite explicar las diferencias en la actividad observadas sobre este microorganismo. Esta parte del trabajo se ha desarrollado en el St. George's Hospital Medical School, University of London, bajo la dirección del Dr LM Fisher.3Se demostró por estudios de CMI sobre cepas mutantes de S. pneumoniae que los homólogos mantienen la diana principal en Topoisomerasa IV, como el patrón. Por otra parte, la determinación de la CC25 mediante electroforesis en gel de agarosa demuestra que los compuestos estudiados no provocan mayor formación del complejo ternario ni con la topoisomerasa IV ni con la girasa. Sólo con el derivado 97-100 éste es igual que ciprofloxacino, lo que indica que la alquilación en 4'N del anillo piperacínico del ciprofloxacino no es favorable, si bien afecta a las interacciones entre fármaco y enzima. El efecto del sustituyente en C7 sobre la bomba de secreción PmrA no se conoce puesto que los resultados de este estudio no fueron concluyentes. No se puede descartar, pues, la penetración intracelular como posible responsable de la diferencia de actividad de los homólogos, debido a que para un microorganismo dado, este parámetro está bajo el control de las propiedades fisicoquímicas de la quinolona.Por último, al considerar el equilibrio actividad-biodisponibilidad oral comparada para la selección de los candidatos, existen tres compuestos que presentan las mejores propiedades en conjunto: 4'N-metilciprofloxacino, compuesto de elección en todos los microorganismos Gram negativos a excepción de E. coli. 4'N-etilciprofloxacino, muy eficaz frente a los microorganismos Gram positivos, entre los que es el derivado de elección en todos los casos, y además presenta buenas propiedades en los microorganismos Gram negativos. 3'-metilciprofloxacino (97-100) presenta una eficacia en general mejor a la del patrón en todas las especies estudiadas, sin embargo sólo resulta el candidato de primera elección en E. coli, en el que la mayoría de compuestos son menos activos que el ciprofloxacino.No obstante, aunque estos tres compuestos son los candidatos de elección, los demás derivados también podrían resultar de interés en algunos de los microorganismos estudiados como A. calcoaceticus, S. aureus y S. pneumoniae. / The thesis entitled "In vitro antimicrobial activity of new 6-fluoroquinolones for oral administration. Structure-activity relationship" is a part of the research Project SAF 96-1710 "Bioavailability prediction in drug development studies: new quinolones". In this study, we have synthesized new ciprofloxacin homolog derivatives belonging to two series: 4'N-alkylciprofloxacin and 3'methyl,4'N-alkylciprofloxacin, whose antimicrobial activity (minimum inhibitory concentration, MIC) we have studied and compared with that of ciprofloxacin against 160 bacterial strains from clinical sources. MICs were determined by the standard NCCLS, M7-A5 method. The results showed that 4'N alkyl substitution does not modify the reference drug antibacterial spectrum. Nevertheless, the synthesized compounds present different activity against the assayed microorganisms.Time-kill kinetics of some homolog compounds against Staphylococcus aureus ATCC-25923 were determined. These derivatives present the same lethality kinetics than ciprofloxacin. The 3'methyl,4'N-methylciprofloxacin derivative shows the quickest lethality, which is not due to a change in the primary target selection, as topoisomerase IV is its primary target for S. aureus, as it is for ciprofloxacin.Furthermore, we have studied the relationship between the lipophilicity, as a structural parameter, and the inverse of the geometric mean MIC, as an activity index. The activity-lipophilicity correlations can be fitted to a bilineal equation and allow the selection of the optimum partition coefficient for each species studied. This optimum tends to be lower for gramnegative microorganisms than for grampositive ones.We have also studied the mechanisms of action of these quinolones by determining the in vitro inhibition effects through Streptococcus pneumoniae gyrase and topoisomerase IV (carried out in St. George's Hospital Medical School, London). Topoisomerase IV is the primary target of ciprofloxacin homologs for S. pneumoniae. Ciprofloxacin C7 substitution affects drug-enzyme interaction. The cleavage through gyrase or topoisomerase IV is low, suggesting that 4'N ciprofloxacin alkylation is not favourable.Finally, the activity-bioavailability balance has been considered, in order to select the best drug candidates. Three compounds are pointed out: 4'N-methylciprofloxacin and 3'methylciprofloxacin against gramnegative microorganisms and 4'N-ethylciprofloxacin against grampositive ones. These finding are consistent with the established activity-lipophilicity correlations and the selected candidates against gramnegatives are more hydrophilic than those against grampositives.

Desde hace algunos años es conocido que el ejercicio físico regular y no agotador tiene efectos beneficiosos. Se sabe que es importante en el tratamiento de la diabetes mellitus o la cardiopatía isquémica, que mejora el perfil lipídico del plasma, y puede ayudar a perder peso. Sin embargo los beneficios del ejercicio desaparecen con el agotamiento y la falta de entrenamiento. Durante el ejercicio físico agotador se genera tal cantidad de especies reactivas del oxígeno (ERO) que las defensas antioxidantes se ven incapaces de prevenir el daño que éstas inducen. Sin embargo son cada vez más los trabajos que apuntan hacia el papel de las ERO en la señalización celular y en las adaptaciones musculares al ejercicio físico. En la presente tesis nos planteamos estudiar el papel de los radicales libres derivados de la xantina oxidasa en la activación de la vía de las MAPKinasas, en la cascada de señalización que conduce a la activación de NF-B y en la expresión de genes involucrados en las adaptaciones al ejercicio físico (MnSOD, iNOS y eNOS)Los resultados obtenidos confirman que las especies reactivas del oxígeno producidas durante el ejercicio físico actúan como señales que regulan procesos moleculares importantes para las adaptaciones de las células musculares al ejercicio físico. La prevención del estrés oxidativo asociado al ejercicio físico, con la administración de antioxidantes orales, puede llegar a ser perjudicial al condicionar la respuesta adaptativa. Por tanto la tan extendida prescripción del uso de suplementos antioxidantes entre los deportistas, debe ser revisada. Los antioxidantes orales, aunque recomendables antes de la competición deportiva, cuando el ejercicio se espera sea realizado hasta el agotamiento, puede no ser tan apropiada durante los periodos de entrenamiento. / The beneficial effects of regular, nonexhaustive physical exercise have been known for a long time. Exercise is part of the treatment of common diseases such as diabetes mellitus or coronary heart disease. It improves plasma lipid profile, increases bone density, and helps to lose weight. However, the beneficial effects of exercise are lost with exhaustion and with lack of training. Indeed, it is well known that exhaustive exercise causes muscle damage, for instance evidenced as an increase in the plasma activity of cytosolic enzymes such as creatin kinase or lactate dehydrogenase. Some of this damage is due to the production of reactive oxygen species (ROS) and it may be prevented by optimising nutrition, particularly by increasing the dietary content of nutritional antioxidants.However recent evidences support the idea that ROS play a role in cell signalling and in the adaptations of skeletal muscle to physical exercise. In this thesis we estudied the role of free radicals, derived from the xanthine oxidase, in the activación of the MAPKinases pathway, in the signalling cascade that leads to the activation of NF-κB and in the expression of the genes involved in adaptations to physical exercise (MnSOD, iNOS and eNOS).The results obtained confirm that ROS produced during physical exercise act as signals that are important in muscle cell adaptation to exercise in animals and in humans.Preventing oxidative stress associated with exercise by oral antioxidant administration could be detrimental by hampering the adaptive response. The usual practice of recommending antioxidant supplements before exercise should be seriously questioned. Oral antioxidant supplementation is probably useful before competition when exercise is likely to be exhaustive and damaging, but it may not be so suitable when training.

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La educación terapéutica es un proceso continuo e indispensable para optimizar los resultados del tratamiento y de esta forma prevenir posibles complicaciones asociadas a la diabetes. Los campamentos para niños con diabetes representan una experiencia de vida en donde las posibilidades de enseñanza-aprendizaje son favorecidas ya que se desarrollan en un ambiente distendido, seguro y en compañía de otros niños y adultos que comparten la misma afección. Las vivencias del campamento ayudan al niño a desarrollar independencia, autoconfianza y una actitud responsable y participativa dentro de su tratamiento. El programa de educación terapéutica debe incluir a otras personas del entorno del niño, especialmente al adulto familiar, ya que la responsabilidad del autocuidado diario debe ser compartida hasta la adolescencia. El éxito de la educación puede verse limitado por factores psicosociales que juegan un importante rol en el control de la diabetes.