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Investigação de genes de resistência a carbapenêmicos e aminoglicosídeos e tipagem molecular de amostras de Acinetobacter baumannii isoladas de pacientes internados em unidades de terapia intensiva de um hospital terciário

Polotto, Milena [UNESP] 12 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-12Bitstream added on 2015-04-09T12:47:20Z : No. of bitstreams: 1 000809517.pdf: 1406671 bytes, checksum: 300a5db1601aa75ec0cdf0efcca6e5bd (MD5) / O gênero Acinetobacter compreende bacilos Gram-negativos ubíquos na natureza e suas principais espécies, A. calcoaceticus, A. baumannii, A. pittii e A. nosocomialis, foram agrupadas no complexo Acinetobacter baumannii-Acinetobacter calcoaceticus (complexo ACB) por apresentarem alta similaridade genética e por serem de difícil diferenciação por métodos bioquímicos. As infecções mais causadas pelo complexo ACB são pneumonias e bacteremias e, para o tratamento destas, são muito utilizados os beta-lactâmicos, aminoglicosídeos e polimixinas. Entretanto, a resistência aos beta-lactâmicos e aminoglicosídeos tem aumentado em Acinetobacter spp., principalmente, devido à produção de enzimas chamadas beta-lactamases e enzimas modificadoras de aminoglicosídeos (EMAs). Neste contexto, os objetivos do estudo foram avaliar o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, investigar genes de carbapenemases (blaOXA-23like, blaOXA-51like, blaOXA-58like, blaOXA24-40like, blaOXA-143like, blaOXA-48like, blaKPC, blaGES,blaVIM, blaIMPe blaSPM), e de EMAs [aac(3)-Ia, aac(3’)-II, aaac(6’)-Ih, aph(3’)-VI, ant(2’)-Ia, aph(3’)-Ia e aac(6’)-Ib] por PCR e determinar a similaridade genéticados isolados de A. baumannii por REP-PCR. Cem isolados do complexo ACB resistentes aos carbapenêmicos provenientes de pacientes admitidos em unidades de terapia intensiva (UTIs) do Hospital de Base de São José do Rio Preto (HB) foram encaminhados ao laboratório de Microbiologia da Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP), onde foram realizadas a extração de DNA, a identificação da espécie, a investigação dos genes e a tipagem molecular por REP-PCR. Todos os isolados apresentaram fenótipo de multirresistência e foram identificados como pertencentes à espécie A. baumannii. Os genes blaOXA-23like e blaOXA-51like foram detectados em 100% dos isolados, e, em todos, ISAba1 estava localizado “upstream” ao gene blaOXA-23like ... / The Acinetobacter genus comprises ubiquitous Gram-negative bacilli and its main species, A. calcoaceticus, A. baumannii, A. pittii and A. nosocomialis were grouped in the the Acinetobacter baumannii - Acinetobacter calcoaceticus Complex (ACB Complex) due to their high genetic similarity and for their difficult differentiation by biochemical methods. Most infections caused by ACB complex are pneumonia and bacteremias, and, to treat these, beta-lactams, aminoglycosides and polymyxins are widely used. Nevertheless, beta-lactams and aminoglycosides resistance has been increasing in Acinetobacter spp., mainly, due to the enzymes production called beta-lactamases and aminoglycosides modifying enzymes (AMEs). Thus, the study objectives were to evaluate the antimicrobial susceptibility profile, investigate the carbapenemases gene (blaOXA-23like, blaOXA-51like, blaOXA-58like, blaOXA24-40like, blaOXA-143like, blaOXA-48like, blaKPC, blaGES, blaVIM, blaIMPand blaSPM), the AMEs genes [aac(3)-Ia, aac(3)-II, aac(6’)-Ih, aph(3’)-VI, ant(2’)-Ia, aph(3’)-Ia and aac(6’)-Ib], and to determine the genetic similarity by REP-PCR. One hundred carbapenem resistant isolates of ACB complex were sent to the Microbiology Laboratory of the Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto, where DNA extraction, species identification, PCRs and molecular typing by REP-PCR were carried out. All of the isolates showed multidrug resistance phenotype and were identified as A. baumannii. The genes blaOXA-23like and blaOXA-51like were present in 100% of the isolates andISAba1 was “upstream” to the blaOXA-23likegene. The AMES genes detected were aph(3')-VI (55%), aac(6')-Ib (46%), aac(3)-Ia (30%) and aph(3')-Ia (24%). The REP-PCR typing generated five groups (A, B, C, D and E) with 20 clusters. Of these, many were endemic clusters, because they were isolated during all the collection period and in all the HB´s ICUs. Furthermore, the horizontal transmission ...
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Resistência antimicrobiana e prevalência de sorovares de salmonella spp. isolados de fezes e linfonodos de suinos

Guerra Filho, João Bosco Pereira [UNESP] 21 November 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-11-21Bitstream added on 2015-05-14T16:58:56Z : No. of bitstreams: 1 000825975.pdf: 227328 bytes, checksum: 7940fcb185d63c21829bcedf51122296 (MD5) / O objetivo do presente trabalho foi avaliar a prevalência de Salmonella spp. e seu perfil de resistência a antibióticos em suínos abatidos em frigoríficos sob inspeção federal localizados no interior do estado de São Paulo. Para tanto foram utilizados diferentes tipos de amostras, tais como fezes e linfonodos mediastínicos, mesentéricos e submandibulares, sendo 50 amostras de cada tipo, possibilitando avaliar a relevância do tipo de material analisado em relação ao real status do animal frente à contaminação pelo patógeno. Com base nas amostras positivas foi realizada a sorotipagem das cepas e teste de resistência aos antibióticos. A prevalência do patógeno foi de 10% no total das amostras (20/200), sendo os maiores percentuais de positividade encontrados nos linfonodos submandibulares com 20% de positivos (10/50) e mesentéricos com 18% (9/50) e os menores valores encontrados nas fezes com 2% de positivos (1/50) e linfonodos mediastínicos com nenhuma amostra positiva. Os sorovares predominantes foram S. Typhimurium com 55% das amostras (11/20), seguido de S. enterica subspécie enterica 4,5,12:i:- com 35% (7/20) e os sorovares S. Brandenburg e S. Derby com 5% (1/20) cada. Todas as amostras isoladas apresentarem resistência frente a pelo menos um dos antimicrobianos testados, sendo que 90% (18/20) apresentaram resistência a pelo menos 4 drogas simultaneamente e 15% (3/20) foram enquadradas como multi drogas resistentes. Os maiores índices de resistência foram encontrados para Ciprofloxacina e Tetraciclina com 90% de resistentes (18/20) cada, seguido de Ácido Nalidíxico com 80% (16/20), Sulfonamidas com 75% (15/20), Cloranfenicol e Estreptomicina com 70% (14/20) cada, Sulfametoxazole- Trimetroprim com 65% (13/20), Ampicilina com 25% (5/20), Cefotaxime com 10% (2/10) e Ceftriaxona e Gentamicina com 5% (1/20) cada. As amostras resistentes à Ciprofloxacina foram testadas para a presença da enzima ESBL, sendo 100% ... / The objective of this study was to evaluate the prevalence of Salmonella spp. and their antibiotic resistance profiles in swine slaughtered in abattoirs under federal inspection located in the state of São Paulo. For both types of samples, such as feces and mediastinal, mesenteric and submandibular lymph nodes, 50 samples of each type being possible to evaluate the relevance of the type of material analyzed in relation to the actual status of the animal against the contamination by the pathogen were used. Based on positive samples, serotyping of the strains and antibiotic resistance test was performed. The prevalence of the pathogen was 10% of total samples (20/200) wich the highest positivity found in the submandibular lymph nodes with 20% positive (10/50) and mesenteric with 18% (9/50) and lower found in the feces with 2% positive (1/50) and mediastinal lymph nodes with no positive sample. The predominant serotypes were S.Typhimurium with 55% of the samples (11/20) followed by S. enterica subspecies enterica 4,5,12: i: -, 35% (7/20) and the serotypes S. Brandenburg and S. derby 5% (1/20) each. All isolates were resistant at least one of the antimicrobials tested, among them 90% (18/20) showed resistance to at least four drugs simultaneously and 15% (3/20) were classified as multi drug resistant. The highest rates were found for Ciprofloxacin and Tetracycline resistance with 90% (18/20) each, followed by Nalidixic Acid with 80% (16/20), Sulfonamides 75% (15/20), Chloramphenicol and Streptomycin with 70% (14/20) each, Trimethoprim-Sulfamethoxazole 65% (13/20), Ampicillin 25% (5/20), Cefotaxime 10% (2/10) and Ceftriaxone and Gentaminicine with 5% (1/20) each. Resistant to Ciprofloxacin samples were tested for the presence of ESBL enzyme, 100% of them considered negative
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Uso de probiótico e óleos essenciais na ração sobre a microbiota intestinal, atividade de enzimas digestivas e a expressão de genes relacionados aos processos de digestão e absorção de nutrientes em frangos

Fernandez Alarcon, Miguel Frederico [UNESP] 13 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-13. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:37Z : No. of bitstreams: 1 000830299.pdf: 772512 bytes, checksum: cced1cd5ada16b8ba16567307e576668 (MD5) / A hipótese do trabalho se baseou em que a adição de avilamicina (antibiótico promotor de crescimento), Bacillus subtilis (probiótico) e óleos essenciais (carvacrol, cinamaldeído, cineol e extrato de pimenta), elevam o desempenho zootécnico de frangos a partir de benefícios na mucosa intestinal e na microbiota a ela associada. No Capítulo 1 apresentamos uma revisão bibliográfica sobre o assunto, a qual nos permitiu desenhar a referida hipótese. Os objetivos específicos do presente estudo foram avaliar o efeito destes aditivos alimentares aos 7, 21 e 42 dias de vida sobre: 1) o desempenho zootécnico; 2) os níveis de RNAm dos genes SLC15A1, SLC5A1, SLC2A2, ATP1A1, (respectivamente codificadores de PepT1, SGLT1, GLUT2 e Na-K-ATPase) na mucosa do jejuno; 3) atividades de fosfatase alcalina, maltase e aminopeptidase nas membranas da borda em escova no jejuno; 4) absorção de glicose intestinal in-vitro. 5) número de cópias do 16S DNAr de grupos bacterianos de maior predominância na mucosa do íleo; 6) morfometria das vilosidades intestinais; Todos os dados foram avaliados em função do tempo, exceto os dados de desempenho. Para tanto, 1320 frangos foram divididos entre cinco tratamentos de acordo com a suplementação [dieta basal como controle (CON); Bacillus subtilis (BS); Bacillus-subtilis + óleo essencial (BS + OEs); óleos essenciais (OEs); avilamicina como controle positivo (AVI)]. Os resultados do Capítulo 2 demonstraram que a suplementação de AVI e OEs na ração de frangos de 1 a 42 dias de idade promove maior atividade de fosfatase alcalina intestinal e aminopeptidase, enquanto a adição de Bacillus subtilis promove maior quantidade de RNAm do gene codificador do transportador de peptídeos 1 (SLC15A1). No Capítulo 3 evidenciou-se que a suplementação com BS ou OEs promove alterações momentâneas na morfometria intestinal dos frangos. Os Lactobacillus predominam na mucosa do íleo, e sua maior ... / It was hypothesized that, when added to the feed, avilamycin (antibiotic growth promoter), Bacillus subtilis (probiotic) and essential oils (carvacrol, cinnamaldehyde, cineol and pepper extract) increase growth performance of broilers through benefits on intestinal mucosa and its microbiota. In Chapter 1 we present a literature review on the subject, which allowed us to draw such hypothesis. The specific objectives of this study were to evaluate the effect of these feed additives nat 7 21 and 42 days of life on: 1) the growth performance; 2) SLC15A1, SLC5A1, SLC2A2, ATP1A1 mRNA levels (respectively encoding PepT1, SGLT1, GLUT2 and Na-K-ATPase) in the jejunum; 3) activities of alkaline phosphatase, maltase and aminopeptidase from the brush border membranes of the jejunum; 4) intestinal glucose absorption of in vitro; 5) 16S rDNA copy numbers of the major bacterial groups in association with the ileum mucosa. 6) morphology of the intestinal villi; All data were also evaluated over the time course, except for the performance data. Therefore, 1320 broiler chickens were divided among five treatments, according to supplementation [basal diet as control (CON); Bacillus subtilis (BS); Bacillus subtilis + essential oils (BS + EOs); essential oils (EOs); avilamycin as positive control (AVI)]. The results of Chapter 2 demonstrated that supplementation of BS promoted greater expression of SLC15A1, while EOs and AVI increased the activities of both IAP and APN. Analysis over time revealed an increase in the amount of mRNA MGAM, SLC2A2, SLC15A1, SLC5A1 and SI from seven to 42 days. IAP was reduced after seven days, while MALT increased with age. Addition of Bacillus subtilis or essential oils in the diet induces changes in the expression of genes and activities of enzymes related to sugars and peptides utilization, but did not improve growth performance. In Chapter 3 it was shown that supplementation with BS or EOs supplementation promotes momentary ...
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Estudo comparativo do efeito da terapia fotodinâmica e uso de antibióticos em lesões podais (Bumblefoot) em pinguins de Magalhães (Spheniscus magellanicus) / Comparative study of photodynamic therapy and the use of antibiotics in foot lesions (bumblefoot) in Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus)

Nascimento, Cristiane Lassálvia [UNESP] 22 July 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:49Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-22. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:00Z : No. of bitstreams: 1 000831292.pdf: 3855958 bytes, checksum: f0eddfd2bd8c33b972b6c00be59dda5a (MD5) / O objetivo do estudo foi testar um protocolo de tratamento para pododermatite classe III em um grupo de Spheniscus magellanicus mantidos em cativeiro utilizando terapia fotodinâmica (TFD) e compará-lo com outro tratado com antibióticos (ATB). Todos os animais foram submetidos inicialmente à debridamento cirúrgico da área da lesão e em seguida aleatoriamente separados em um grupo TFD e outro ATB, contendo 11 lesões cada. No grupo ATB utilizou-se pomada antibiótica três vezes por semana e antibiótico e anti-inflamatório sistêmicos diariamente. No grupo TFD, terapia fotodinâmica foi aplicada três vezes por semana sem a utilização de medicação sistêmica. Fotografias da área da lesão, swab para cultura e antibiograma e sangue para hemograma e bioquímica sanguínea foram coletados no início e a cada 14 dias perfazendo um total de 84 dias. Os resultados reafirmaram a natureza recidivante dessas lesões que se iniciam a partir do ponto de apoio. A prevalência das bactérias ao longo do tempo não foi uniforme, sendo a realização de antibiogramas para escolha de uma droga apropriada necessário em diferentes momentos. Na comparação, o grupo TFD apresentou desempenho melhor com 63,62% de cura em um tempo médio de 42 dias, contra 9,09% de cura em um tempo médio de 70 dias no grupo ATB. Os achados do presente estudo atestam a eficácia da Terapia Fotodinâmica para o tratamento de pododermatite classe III para Spheniscus magellanicus / The aim of the study was to test a treatment protocol for pododermatitis class III in a group of captive Spheniscus magellanicus using photodynamic therapy (PDT) and compare it with another treated with antibiotics (ATB). All animals initially underwent surgical debridement of the lesion area and then they were randomly divided into one TFD and one ATB group, each containing 11 injuries. In the ATB group antibiotic ointment was used three times a week and systemic antibiotic and anti-inflammatory daily. In PDT group, photodynamic therapy has been applied three times a week without the use of systemic medication. Photos of the lesion area, swab for culture and sensitivity and blood for blood count and blood chemistry were collected on the first day and every 14 days for a total of 84 days. The results reaffirmed the relapsing nature of these lesions that begin from the point of support. The prevalence of bacteria over time was not uniform and there was need to carry out antibiograms at different times to select an appropriate drug. In comparison, the PDT group showed the best performance with 63.62% on an average healing time of 42 days, compared to 9.09% in an average healing time of 70 days in the ATB group. The findings of this study attest to the effectiveness of photodynamic therapy for the treatment of class III to pododermatitis Spheniscus magellanicus
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Análise químico-farmacêutica de preparações injetáveis de Aztreonam

Figueiredo, Andressa Leme de [UNESP] 13 March 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-13Bitstream added on 2014-08-13T18:01:20Z : No. of bitstreams: 1 000766261.pdf: 1622900 bytes, checksum: 48efb485a517af44deb1857272591c32 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / PADC-FCF-UNESP / O aztreonam é um antibiótico β-lactâmico, sintético, monocíclico, com atividade bactericida contra bactérias Gram negativas. Foi descoberto em 1978, sendo o primeiro antibiótico da família monobactâmica a ser terapeuticamente aprovado. Pode ser utilizado no tratamento de infecções do trato urinário, septicemia, meningite, infeções de pele, como feridas, úlceras, queimaduras, infecções intra-abdominais, tais como peritonite, endometrite, celulite pélvica e infecções respiratórias, como fibrose cística. Não é absorvido por via oral, apresenta meia-vida de 1-6 horas e biodisponibilidade de quase 100% por via intramuscular. Quanto ao mecanismo de ação, o aztreonam, assim como outros antibióticos β-lactâmicos, tem a capacidade de inibir o crescimento das bactérias ao interferir na síntese da parede celular. Apesar de ser uma substância bastante estudada com relação à sua atividade antimicrobiana, farmacocinética, farmacodinâmica e determinação em fluidos biológicos, há poucos estudos na literatura descrevendo o desenvolvimento de metodologia analítica para avaliação de aztreonam em pó liofilizado para solução injetável. Desta forma, este trabalho teve como objetivo principal o desenvolvimento de novos métodos analíticos para a análise de aztreonam na forma farmacêutica de pó liofilizado para solução injetável, que apresentem menor impacto ambiental e que sejam mais práticos, seguros e econômicos que os métodos já descritos. O aztreonam substância química de referência e amostra foram analisados qualitativamente quanto às características organolépticas, peso médio, ponto de fusão, umidade, cinzas sulfatadas, cromatografia em camada delgada indicativo de estabilidade, espectrofotometria de absorção na região do ultravioleta, espectrofotometria de absorção na região do infravermelho e cromatografia líquida de alta eficiência. Os métodos desenvolvidos foram validados segundo ... / Aztreonam is a β-lactam antibiotic, synthetic, monocyclic with bactericidal activity against Gram-negative bacteria. It was discovered in 1978, and it was the first antibiotic of the monobactam family to be therapeutically approved. It can be used in the treatment of urinary tract infections, sepsis, meningitis, skin infections, such as wounds, ulcers, burns, intra-abdominal infections, such as peritonitis and cellulitis pelvic endometritis, and respiratory infections, such as cystic fibrosis. It is not absorbed orally and has a half-life of 1-6 hours and the bioavailability of almost 100% for intramuscularly administration. Regarding the mechanism of action, aztreonam, like other β-lactam antibiotics, has the ability to inhibit bacterial growth by interfering at a specific stage of the cell wall synthesis. Despite being a substance is highly studied and researched in relation to its antimicrobial activity, pharmacokinetics and pharmacodynamics, analytical methods in biological fluids, there are few studies in the literature regarding the development of analytical methodology for aztreonam lyophilized powder for injectable solution. Thus, this study aimed to develop new analytical methods for the analysis of aztreonam in lyophilized powder for injectable solution, which have the lowest impact on the environment as possible and that be more convenient, safer for operators and more economical than the analytical methodologies already described. Aztreonam chemical reference and sample were analyzed qualitatively about the organoleptic characteristics, weight, melting point, moisture, sulphated ash, thin layer chromatography indicative of stability, ultraviolet spectrophotometry, infrared spectrophotometry and high performance liquid chromatography. The developed methods were validated according national and international guidelines. It was determined quantitatively by ultraviolet spectrophotometry at 292 nm, using water as a solvent, with ...
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Ação antibacteriana de associações de antimicrobianos: nisina, óleos essenciais e compostos majotitários

Alves, Fernanda Cristina Bérgamo [UNESP] 20 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-08-13T14:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-20Bitstream added on 2014-08-13T17:59:30Z : No. of bitstreams: 1 000776948_20160220.pdf: 572888 bytes, checksum: c92ba4f74569c8e1aa24ca36bae1a5d4 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-22T11:12:46Z: 000776948_20160220.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-22T11:13:40Z : No. of bitstreams: 1 000776948.pdf: 1889089 bytes, checksum: 7c9eec02b416b8ce6a60a27bd1c34c85 (MD5) / A pesquisa por novas drogas antimicrobianas tem aumentado, seja na indústria farmacêutica e também na indústria de alimentos. Isso acontece devido ao aumento no número de bactérias resistentes aos antimicrobianos, e a busca por conservantes alimentares que possibilitem o aumento na vida de prateleira dos alimentos. O interesse por alimentos mais saudáveis, especialmente aqueles sem adição ou com quantidades reduzidas de aditivos químicos, vem aumentando constantemente. Os produtos naturais, especialmente os de origem microbiana e de espécies vegetais são considerados fontes importantes para o desenvolvimento de novos antimicrobianos. O trabalho teve como objetivo avaliar a ação antibacteriana de óleos essenciais de plantas, seus compostos majoritários, a ação antibacteriana da nisina (bacteriocina produzida por Lactococcus lactis) e a ação antibacteriana da combinação desses compostos majoritários com a nisina em meio de cultura e no leite. Inicialmente foi avaliado o potencial antibacteriano com a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) dos óleos essenciais de orégano (Origanum vulgare), tomilho (Tymus vulgaris), cravo da índia (Syzygium aromaticum) e canela (Cinnamomun zeylanicum) e respectivos compostos majoritários carvacrol, timol, eugenol e cinamaldeído, e da nisina sobre cepas padrões ATCC de bactérias de importância na área de alimentos: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli O157 ATCC 43895, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterococcus faecalis ATCC 10100, Listeria monocytogenes ATCC 15313, Aeromonas hydrophila ATCC 7966 e Lactobacillus rhamnosus ATCC 9595 utilizando a metodologia da microdiluição em meio de Mueller Hinton Caldo (MHC). Em alguns casos a atividade inibidora dos óleos essenciais foi maior que a atividade do seu respectivo composto isolado, e em outros a atividade inibidora do composto isolado foi maior que ... / The research for new antimicrobial drugs has increased in a pharmaceutical industry as well as in the food industry. This happens due to the increase in the number of bacteria resistant to antimicrobial agents, and the search for food preservatives which make possible the increase in the shelf life of foods. The interest in healthier foods, especially those without addition or with reduced amounts of chemical additives is increasing constantly. The natural products, especially of microbial origin and plant species are considered important sources for the development of new antimicrobial. This study purpose to evaluate the antibacterial activity of essential oils from plants, their major compounds, the antibacterial action of nisin (bacteriocin produced by Lactococcus lactis) and the antibacterial activity of the combination of these major compounds with nisin in culture medium and in milk. First was evaluated antimicrobial activity with determination of minimum inhibitory concentration (MIC) of the essential oils of oregano (Origanum vulgare), thyme (Tymus vulgaris), clove (Syzygium aromaticum) and cinnamon (Cinnamomun zeylanicum) and their major compounds carvacrol , thymol, eugenol and cinnamaldehyde, and nisin on ATCC strains of bacteria of importance in the food industry: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli O157 ATCC 43895, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterococcus faecalis ATCC 10100, Listeria monocytogenes ATCC 15313, Aeromonas hydrophila ATCC 7966 and Lactobacillus rhamnosus ATCC 9595 using the microdilution method in Mueller Hinton Broth medium (MHC). In some cases the inhibitory activity of essential oils has been higher than the activity of the respective isolated compound, and in others the inhibitory activity of the compound isolate was greater than that of the respective essential oils, whereas nisin was active against Gram-positive bacteria and a lower inhibitory ...
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Detecção do operon ica da produção de biofilme, gene mecA de resistência à oxacilina e identificação de espécies de Staphylococcus spp. diretamente dos frascos de hemoculturas pela técnica de PCR multiplex

Rocchetti, Taisa Trevizani [UNESP] 19 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-19Bitstream added on 2014-11-10T11:58:27Z : No. of bitstreams: 1 000790238.pdf: 2127036 bytes, checksum: b9b9441469c5121308bed247ca78c0ac (MD5) / Na última década houve uma clara mudança na etiologia da sepse. Dados recentes do National Healthcare Safety Network (NHSN) mostram que os cocos Gram-positivos têm ultrapassado os bacilos Gram-negativos como os principais agentes etiológicos e os Estafilococos coagulase negativa (ECN) se tornaram os agentes mais frequentes. Entretanto a maioria dos laboratórios clínicos não identifica esses microrganismos a nível de espécies devido à necessidade de realização de uma série de provas bioquímicas. A aplicação de técnic as de biologia molecular, entre elas a reação em cadeia da polimerase (PCR) para a identificação de bactérias se mostrou uma técnica promissora devido a sua rapidez, acurácia e sensibilidade. Assim, este trabalho objetivou avaliar a eficiência, acurácia e sensibilidade da técnica de PCR multiplex para a detecção do gênero e de espécies de Staphylococcus spp. mais encontradas em hemoculturas, do operon ica de produção de biofilme e da presença do gene mecA de resistência à oxacilina diretamente dos frascos de hemocultivo. Foram analisadas 371 amostras de hemoculturas, positivas para o gênero Staphylococcus obtidas de pacientes atendidos no HC da Faculdade de Medicina de Botucatu (FMB). As amostras foram isoladas e identificadas por testes bioquímicos convencionais e simultaneamente o DNA bacteriano foi extraído diretamente das hemoculturas e destes realizou-se o PCR multiplex. Das 371 amostras estudadas 85 (23,0%) foram de S. aureus e 286 (77,0%) ECN. Dos ECN 152 (53,1%) foram identificados como S. epidermidis, 36 (12,6%) S. haemolyticus, 36 (12,6%) S. hominis, 23 (8,0%) S. capitis, 18 (6,3%) S. warneri, 7 S. caprae, 5 S. simulans, dois S. lugdunensis, dois S. cohnii, um S. saprophyticus, um S. schleiferi, um S. xylosus e concomitantemente um S. haemolyticus e S. hominis, e um S. haemolyticus e S. epidermidis. Das 85 amostras de S. aureus, 43 (50,6%) se mostraram resistentes à oxacilina pelo ... / A clear shift in the etiology of sepse has occurred in the last decade. Recent data from the National Healthcare Safety Network (NHSN) show that Gram-positive cocci have exceeded Gram-negative bacilli as the major etiological agents. In this respect, coagulase-negative staphylococci (CoNS) have become the most frequent. However, most clinical laboratories do not identify these microorganisms to species level due to the need for a series of biochemical tests. The application of molecular biology techniques, including the polymerase chain reaction (PCR), for bacterial identification proved to be promising due to their speed, accuracy and sensitivity. The aim of this study was to evaluate the efficiency, accuracy and sensitivity of multiplex PCR for the detection of Staphylococcus spp. frequently found in blood cultures, investigation of the ica operon involved in biofilm formation and the mecA gene encoding oxacillin resistance, and direct detection of major CoNS species in blood culture flasks. A total of 371 blood culture samples positive for Staphylococcus spp. obtained from patients seen at the Hospital of the Botucatu School of Medicine (FMB) were analyzed. The strains were isolated and identified by conventional biochemical tests. Simultaneously, bacterial DNA was extracted directly from the blood cultures for multiplex PCR. S. aureus was isolated from 85 (23%) of the 371 samples studied and CoNS from 286 (77%). Among the latter, 152 (53.1%) isolates were identified as S. epidermidis, 36 (12.6%) as S. haemolyticus, 36 (12.6%) as S. hominis, 23 (8%) as S. capitis, 18 (6.3%) as S. warneri, 7 as S. caprae, 5 as S. simulans, two as S. lugdunensis, two as S. cohnii, one as S. saprophyticus, one as S. schleiferi, and one as S. xylosus. S. haemolyticus and S. hominis were concomitantly identified in one sample and S. haemolyticus and S. epidermidis in another. Forty-three (50.6%) of the 85 S. aureus strains were resistant to oxacillin in ...
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Aditivos na alimentação de frangos de corte: desempenho, características morfométricas e funcionais

Alva, Juan Carlos Ríos [UNESP] 06 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-06Bitstream added on 2015-01-26T13:30:27Z : No. of bitstreams: 1 000803697.pdf: 1192982 bytes, checksum: c0997e6f3e6911ca00f77099e7a13fd7 (MD5) / Ácidos orgânicos e probióticos são considerados aditivos alternativos aos antibióticos promotores de crescimento (APC), e têm demonstrado contribuir no desempenho das aves e ter efeito positivo na morfometria do intestino. Dois experimentos foram conduzidos para avaliar o efeito da adição de dois probióticos (Paenibacillus sp. e Bacillus subtilis) e ácido cítrico no desempenho, morfometria intestinal, hepática e pancreática e atividade de enzimas pancreáticas. Para os dois experimentos, foram utilizados 400 pintinhos machos Ross 308 distribuídos em 20 boxes com cama reutilizada e alimentados com dieta à base de milho e farelo de soja (DB) contendo salinomicina. Os cinco tratamentos utilizados no primeiro experimento foram, dieta basal sem aditivos (DB) como controle negativo, dieta DB com lincomicina como controle positivo e dietas com 30, 45 e 60 ppm do probiótico Paenibacillus sp. Os mesmos controles positivo e negativo utilizados no primeiro experimento foram usados no segundo experimento com três outros tratamentos como resultado da adição de ácido cítrico, Paenibacillus sp. e Bacillus subtilis (GalliPro®). Em ambos experimentos, ganho de peso (GP), consumo de ração (CR), e conversão alimentar (CA) foram avaliados durante a fase inicial (1-21 d), crescimento (22 a 35 d), e final (36 a 42 d) e durante todo fase de criação (1 a 42 d e 1 a 49 d). Aos 14, 28 e 42 dias, amostra de intestino de uma ave por box foi coletada para avaliar o comprimento, largura e densidade das vilosidades e número de células caliciformes do duodeno, jejuno e íleo, assim como o número das células de Kupffer do fígado, ácinos serosos e ilhotas pancreáticas. Aos 28 e 42 dias de idade foram avaliadas a atividade da amilase, tripsina e quimotripsina do pâncreas. No primeiro experimento, os dados foram analisados em um delineamento inteiramente casualizado (DIC) com análise de regressão dos níveis do probiótico ... / Acidifiers and probiotics are considered alternative feed additives (FA) for growth promotant antibiotics, and these FA have been shown to improve broiler performance and affect gut morphometrics. Two experiments were conducted to evaluate the effects of the dietary addition of two probiotics (Paenibacillus sp. and Bacillus subtilis) and citric acid on broiler performance, intestinal, pancreatic and hepatic morphometrics and pancreatic enzyme activity. For both experiments, four hundred d-old male Ross 308 chicks were placed in 20 floor pens with reused litter and fed common corn-soybean basal diets (BD) that contained salinomycin. The five dietary treatments utilized in the first experiment resulted from using the BD without feed additives (WFA) as a negative control, adding a growth promotant antibiotic (lincomycin) as a positive control, and adding Paenibacillus sp. at 30, 45 and 60 ppm. The same positive and negative controls were used in the second experiment with three other dietary treatments resulting from the addition of citric acid, Paenibacillus sp. and Bacillus subtilis (GalliPro®) to the BD. In both experiments, BW, feed intake (FI) and FCR corrected for mortality were evaluated at the starter (1-21d), grower (22-35d) and finisher (36-42d) phases and the whole grow out. At 14, 28 and 42d intestinal samples of one chicken per pen were collected to evaluate villi height, density and width and goblet cells in the duodenum, jejunum and ileum. At 28 and 42d of age, pancreatic amylase, trypsin and chymotrypsin activities were evaluated. In the first experiment, data were analyzed in a CRD with regression analyses of Paenibacillus sp. levels and orthogonal contrasts with positive and negative controls. Data in the second experiment were analyzed in a CRD with orthogonal contrasts against the positive control. In the first experiment, no significant effects (P>0.05) of Paenibacillus sp. inclusion levels were observed on ...
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Efeitos da adição de piper cubeba na dieta de frangos de corte em substituição ao antibiótico melhorador de desempenho

Rubio, Marcela da Silva [UNESP] 21 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-03-03T11:52:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-21Bitstream added on 2015-03-03T12:06:31Z : No. of bitstreams: 1 000809717.pdf: 455660 bytes, checksum: a3606939ced14ae409d4ed7ef8bdb0c9 (MD5) / O objetivo dessa pesquisa foi avaliar os efeitos da utilização da Piper cubeba como aditivo fitogênico substituto ao antimicrobiano melhorador de desempenho sobre o desempenho e funções do organismo de frangos de corte. Foram realizados dois experimentos, simultaneamente, no Setor de Avicultura da UNESP de Ilha Solteira-SP. O primeiro experimento utilizou 160 pintos de corte da linhagem Cobb500® alojados em baterias experimentais no período de 1 a 21 dias. Os tratamentos utilizados foram: CP - controle positivo com adição do antibiótico melhorador de desempenho; CN - tratamento controle negativo sem adição de melhorador de desempenho; CN+0,17%EEP, CN+0,34%EEP e CN+0,52%EEP sendo CN com inclusão de extrato etanólico de Piper cubeba nas dosagens de 0,17%, 0,34% e 0,52%, respectivamente. No segundo experimento, foram utilizados 320 pintos de corte da linhagem Cobb500®, alojados em galpão experimental no período de 1 a 42 dias. Os tratamentos utilizados foram: CP - controle positivo com adição do antibiótico melhorador de desempenho; CN - tratamento controle negativo sem adição de melhorador de desempenho; CN+1%SSP, CN+2%SSP e CN+2%SSP sendo CN com inclusão de sementes secas de Piper cubeba nas dosagens de 1%, 2% e 3%, respectivamente. Os parâmetros analisados foram desempenho zootécnico, perfil bioquímico sorológico e biometria de órgãos. Os resultados obtidos demonstraram que perante o desempenho zootécnico e a sorologia, houve semelhança entre os tratamentos controle negativo e o com menor inclusão de pimenta, tendo os demais tratamentos sendo prejudicados pelas suas inclusões, no entanto esses achados não condizem com os descritos na literatura. Em conclusão, a inclusão de Piper cubeba nas concentrações acima de 0,17% de extrato e de 1% de sementes secas afetaram negativamente os parâmetros analisados e a ausência de desafio sanitário no lote proporcionou o melhor desempenho para o tratamento controle ... / The objective of this research was to evaluate the effects of the use of Piper cubeba as phytobiotic additive replacement for growth promoter antibiotic on the performance and functions of the body of broilers. Two experiments were conducted simultaneously, at UNESP’s Poultry Sector, in Ilha Solteira-SP. In the first experiment, it has been used 260 Cobb500® broiler chicks. The treatments used were: CP - positive control with the addition of growth promoter antibiotic, CN - negative control treatment without added growth promoter antibiotic, CN+0,17%EEP, CN+0,34%EEP and CN+0,52%EEP being CN with inclusion of ethanol extract of Piper cubeba in strengths of 0,17%, 0,34% and 0,52%, respectively. On the second experiment, it has been used 260 Cobb500® broiler chicks. The treatments used were: CP - positive control with the addition of growth promoter antibiotic, CN - negative control treatment without added growth promoter antibiotic, CN+1%SSP, CN+2%SSP and CN+3%SSP being CN with inclusion of ethanol extract of Piper cubeba in strengths of 1%, 2% and 3%, respectively. The parameters analyzed were growth performance, serological biochemical profile and biometric organs. The results showed that the performance and the serology, there was similarity between the negative control and the treatments with lower inclusion of pepper, having the other treatments being harmed by their inclusion, however this data don’t confirm the information in the literature. In conclusion, the inclusion of Piper cubeba concentration above 0,17% of extract and 1% of dry seeds negatively affected on the analyzed parameters and the absence of sanitary challenge in the lot provided the best performance for the negative control treatment
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Efeito do extrato de própolis sobre a composição e a qualidade do destilado alcoólico /

Halabi, Aline Figueiredo. January 2010 (has links)
Orientadora: Márcia Justino Rossini Mutton / Banca: Francisco Vicente Gaiotto Cleto / Banca: Flávia Cecílio Ribeiro Gregagnoli / Resumo: Atualmente o Brasil é o maior produtor mundial de cana-de-açúcar (Saccharum spp), sendo a região sudeste a maior responsável por esta produção. O estado de São Paulo encontra-se como o maior produtor, com aproximadamente 58,55% da produção total. Uma das maiores preocupações do setor sucroalcooleiro tem sido a qualidade da matéria-prima, a contaminação bacteriana dos processos fermentativos e a qualidade final do etanol. O setor utiliza antimicrobianos sintéticos e naturais na fermentação visando um produto final de qualidade. Objetivou-se nesse trabalho analisar a composição e a qualidade do destilado final, sob antibiótico natural própolis, comparado com o de uso convencional (o antibiótico sintético ampicilina) da fermentação proveniente de duas estirpes diferentes de levedura. Utilizou-se um esquema fatorial 3X2X6, com 3 tratamentos principais (mosto testemunha, mosto com adição de extrato etanólico de própolis e mosto com adição de ampicilina); 2 tratamentos secundários (estirpes selecionadas CAT 1 e PE 2) e 6 ciclos fermentativos, com três repetições. Foram realizadas análises tecnológicas e microbiológicas no mosto e nos destilados. Os resultados obtidos nesse trabalho mostraram que o uso de antibiótico natural própolis não afetou a microbiota das leveduras fermentativa e a composição e a qualidade do destilado. As estirpes de leveduras apresentaram o mesmo rendimento alcoólico. / Abstract: Brazil is highlighted as a big sugar cane producer, being the São Paulo State the biggest producer, having around 58.55% of the total Brazilian production. Among the sugar and alcohol sector's preoccupations, the raw material, quality, the fermentative process contamination and the ethanol final quality are the most important issues. This work aimed evaluates the composition and the distillate final quality when a natural antibiotic deviated from propolis compared to the ampicillin was used, using the CAT 1 and PE 2 strains. The factorial scheme 3x2x6 was used, being 3 main treatments (control, must + propolis ethanolic extract, and must + ampicillin); 2 secondary treatments (strains selected CAT1 and PE2), and 6 fermentative cycles, with 3 replications. Technologic and microbiologic analyses were done. Results showed that the propolis as natural biocide doesn't affected the fermentative microbiota and composition and quality of distillate. Yeasts strains CAT 1 e PE 2 didn't show differences to alcoholic yield. / Mestre

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