O uso de produtos anti-inflamatórios e antioxidantes sintéticos representa uma grande preocupação nos dias atuais para a população. Importante destacar alguns aspectos relevantes quanto às dificuldades encontradas no tratamento, como o aumento da resistência aos fármacos e os efeitos colaterais da terapia convencional, que apresenta como consequência o desencadeamento de doenças graves, prejudicando e comprometendo a saúde humana. Os óleos voláteis têm sido alvo na busca de novas substâncias, por apresentarem como potencial fonte de novos agentes antioxidantes e anti-inflamatórios. Dentre as espécies vegetais caracterizadas pela produção deste metabólito secundário, estão aquelas pertencentes ao gênero Schinus, da família Anacardiaceae, de ampla ocorrência do Rio Grande do Sul. Nesse contexto, o presente trabalho objetivou analisar e identificar a composição química e avaliar as atividades biológicas a partir da extração do óleo volátil das espécies de Schinus weinmannifolius e Schinus polygamus, nativas do Rio Grande do Sul. Assim, o óleo volátil foi obtido por hidrodestilação de diversas coletas de folhas e frutos de S. weinmannifolius e folhas de S. polygamus. A análise química, realizada por cromatografia à gás acoplada à espectrometria de massas (CG-EM), demonstrou grande variedade de compostos presentes nas amostras, com predominância dos sesquiterpenos β-cariofileno, germacreno D, biciclogermacreno, germacreno A, δ-cadineno, espatulenol, óxido de cariofileno e α-cadinol para folhas e frutos de S. weinmannifolius e predominância do composto alifático n-nonano para S. polygamus. Os óleos obtidos foram submetidos aos ensaios de reação com 2,2-difenil-1-picrilidrazila (DPPH) e substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) para avaliação da atividade antioxidante, sendo esta ação apenas observada para as amostras de folhas de S. weinmannifolius coletadas no outono e inverno de 2016 pelo ensaio de TBARS. No método de DPPH as amostras de folhas de S. weinmannifolius coletadas no outono de 2015 e 2016 apresentaram baixa atividade antioxidante, na concentração de 100 μg/mL. A ação anti-inflamatória foi inicialmente avaliada pela técnica in vitro da câmara de Boyden, nas concentrações de 0,001 a 10 μg/mL. Todas as amostras apresentaram inibição significativa da migração leucocitária em relação ao controle, avaliada no ensaio de antiquimiotaxia. A avaliação da atividade anti-inflamatória in vivo, realizada pelo método de edema de pata, foi conduzida apenas para a amostra que melhor resultado obteve no ensaio in vitro, folhas de S. weinmannifolius, verificando-se inibição significativa do edema na segunda hora de tratamento, na dose de 100 mg/kg. Os resultados encontrados suportam o uso tradicional dos óleos de Schinus como agentes anti-inflamatórios. / The use of synthetic anti-inflammatory and antioxidant products represents a major worry these days for the population. It is important to highlight some aspects relevant concerning the difficulties of the treatment, such as the increase in drug resistance and the side effects of conventional medication, leading to the development of serious diseases, impairing and compromising human health. Volatile oils have been the target of this search for new substances, as they are potential sources of new antioxidant and anti-inflammatory agents. Among the plant species characterized by the production of this chemical group, are those belonging to the Schinus genus, from the Anacardiaceae family, of large occurrence in Rio Grande do Sul. In this context, the present work aimed to analyze and identify the chemical composition and to evaluate the biological activities from the extraction of volatile oil from species of Schinus weinmannifolius and Schinus polygamus, native from Rio Grande do Sul. Thus, the volatile oil was obtained by hydrodistillation of several leaves and fruit collections of S. weinmannifolius and S. polygamus leaves. The chemical analysis, performed by gas chromatography coupled with mass detector (GC-MS), demonstrated great variety of compounds present in the samples, with predominance β-caryophyllene, germacrene D, bicyclogermacrene, germacrene A, δ-cadinene, espatulenol, caryophyllene oxide and α-cadinol for leaves and fruits of S. weinmannifolius and predominance of the compound aliphatic n-nonane for S. polygamus. The obtained oils were submitted to the reaction with 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assays to evaluate the antioxidant activity, being this action only observed for leaves samples of S. weinmannifolius collected in autumn and winter of 2016 by the TBARS assay. In the DPPH method, leaves samples of S. weinmannifolius collected in the autumn of 2015 and 2016 presented low antioxidant activity at the concentration of 100 μg/mL. The anti-inflammatory potential was initially performed by the in vitro technique of the Boyden chamber, at concentrations 0,001 to 10 μg/mL. All samples showed significant inhibition of leukocyte migration in relation to the control, evaluated in the antichemotactic assay. The evaluation of in vivo anti-inflammatory activity by the paw edema method was conducted only for the sample that obtained the best result in the in vitro test, S. weinmannifolius oil, with significant inhibition of edema in the second hour of treatment, at dose 100 mg/kg. The results found support the traditional use of Schinus oils as anti-inflammatory agent.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Os representantes do gênero Arachis são conhecidos como amendoim, e suas sementes possuem grande quantidade de óleos e proteínas, podendo ser consumidas cruas. A espécie mais cultivada do gênero é Arachis hypogaea, que possui grande importância comercial. Outras espécies são também utilizadas para controle das ervas daninhas e cobertura do solo, assim como ornamentais e na alimentação. Arachis repens, popularmente conhecida como grama amendoim, é utilizada como planta ornamental, na formação de pastagens, como forragem e para cobertura do solo em substituição a várias espécies comuns de grama. Diversas substâncias bioativas têm sido identificadas em A. hypogaea. Contudo, estas substâncias ainda não foram descritas em outras espécies do gênero. O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de sistemas de cultivo in vitro para Arachis repens, visando à micropropagação e à análise comparativa da produção de resveratrol em extratos alcoólicos dos materiais produzidos in vitro, em comparação com as plantas in vivo. Segmentos nodais, internodais e foliares foram excisados de plantas in vitro e inoculados em meio MS suplementado com diferentes concentrações de BAP, TDZ, AIA e KIN, utilizados isoladamente ou em combinação. Os explantes apresentaram respostas distintas de acordo com o regulador de crescimento utilizado. Na presença de BAP foi observada a formação de calos compactos, com formação de brotos em diferentes taxas. Na presença de TDZ, segmentos nodais e internodais formaram calos compactos em todas as concentrações. Segmentos nodais cultivados na presença de diferentes concentrações de AIA em combinação com KIN apresentaram a formação de calogênese. Foi também realizada uma avaliação da atividade antioxidante e a presença de fenóis totais em extratos de diferentes materiais in vivo e produzidos in vitro. Nas análises por meio de CLAE, foi possível detectar a presença de resveratrol tanto nos materiais in vivo, quanto os produzidos in vitro. Dessa forma, o trabalho forneceu resultados preliminares sobre as possibilidades de utilização de A. repens para a produção de metabólitos especiais. / Arachis species are known as groundnut and their seeds display high oil and protein contents, being consumed in natura. The most common commercially cultivated species of the genus is Arachis hypogaea. Other Arachis species can also be used as food, ornamental, ground cover and provide weed control. Arachis repens, commonly known as grama amendoim, is used as an ornamental, forage legume and ground cover in substitution of common grass species. Different bioactive substances have been identified in A. hypogaea. However, these substances have not been described in other species of the genus. The goal of this work was the establishment of in vitro culture for Arachis repens, aiming at the micropropagation and the comparative analysis of the resveratrol production in ethanolic extracts of the in vitro produced material, in comparison to in vivo plants. Nodal, internodal and leaf segments were excised from in vitro plants and inoculated on MS medium supplemented with different concentrations of BAP, TDZ, IAA and KIN, used alone or in combination. Explants showed distinct responses in according to the growth regulator used. In the presence of BAP, compact calluses were formed, with the production of shoots in different frequencies. In the presence of TDZ, nodal and internodal segments formed compact calluses in response to all concentrations. Nodal segments cultivated in the presence of different IAA concentrations in combination with KIN showed callogenesis The evaluation of antioxidant activity and the presence of total phenolics in extracts of different in vivo and in vitro materials was also evaluated. The HPLC analysis detected the presence of resveratrol in the materials produced in vivo and in vitro. Therefore, this work provided preliminary results about the possible use of A. repens for the production of special metabolites.

The identification of bioactive compounds in Brazilian fruit is extremely important for bioprospecting of natural substances with potential pharmacotherapeutic. Likewise, evaluations of profiles of antioxidant activity and toxicity are part of the initial processes of exploitation of plant extracts, being included in the efficacy and safety parameters. The Amazonian fruits have been noted for its excellent therapeutic potential in several experimental tests. Within this context is the tucumã, an Amazon fruit comes from a palm (Astrocaryum aculeatum), widely used in the state of Amazonas to the manufacture of candy, ice cream, liqueur or fresh consumption. Studies have shown the presence of a large amount of carotenoids in the fruit pulp. However, the fruit lacks information related to the antioxidant properties and presence of other chemical constituents. The objective of this study was to evaluate the ethanol extracts of the pulp and peel tucumã for the presence of bioactive compounds, antioxidant activity and cytotoxicity. The identification of bioactive compounds and total polyphenols were performed using High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Folin-Ciocalteau method, respectively. The antioxidants evaluations were made by the scavenger method of radical 2,2 - diphenyl-1-picril-hydrazyl (DPPH) and Total Reactive Antioxidant Potential (TRAP) test. The cytotoxicity assays were performed by the techniques of 3 - (4,5)-dimetiltialzolil difeniltetrazólio -2.5 (MTT) and by trypan blue exclusion. The results showed the presence of a large amount of polyphenols in the peel (790.9 ± 43.65 mg/100 g) and pulp (663.9 ± 92.40 mg/100 g) of the fruit. In addition, we detected the presence of important bioactive compounds such as flavonoids (peel = 77.9 ± 0.02 mg/100 g; pulp = 40.6 ± 0.06 mg/100 g), tannin (peel = 26.4 ± 0.01 mg/100 g; pulp = 6.4 ± 0.05 mg/100 g) and alkaloids (peel = 1.3 ± 0.29 mg/100 g; pulp = 0.7 ± 0.05 mg/100 g). Among the compounds identified were beta-carotene, rutin, quercetin, gallic acid, caffeic acid and chlorogenic acid, with higher concentrations in the peel in relation to the pulp (except the gallic acid). The extracts showed high antioxidant activity, with IC50 values corresponding to 8.98 ± 0.39 mg / ml (peel) and 11.24 ± 0.461 mg / ml (pulp) for the TRAP method, and 102.38 ± 4.8 ng / ml (peel) and 224.57 ± 3.9 (pulp) for the DPPH method. However, at concentrations above 100 μg / ml, both extracts showed cytotoxic effects. The results suggest that the ethanol extracts of the pulp and peel tucumã have high antioxidant activity in the presence of bioactive compounds that show great potential pharmacotherapeutic. / A identificação de compostos bioativos em frutos brasileiros é de extrema importância para a bioprospecção de substâncias naturais com potenciais farmacoterapêuticos. Da mesma forma, as avaliações de perfis de atividade antioxidante e de toxicidade fazem parte dos processos iniciais da exploração de extratos vegetais, sendo incluídos nos parâmetros de eficácia e segurança. Os frutos amazônicos têm se destacado por seus excelentes potenciais terapêuticos em diversos ensaios experimentais. Dentro desse contexto encontra-se o tucumã, um fruto amazônico oriundo de uma palmeira (Astrocaryum aculeatum), amplamente utilizado no estado do Amazonas para a fabricação de doces, sorvetes, licores ou para o consumo in natura. Estudos demonstram a presença de uma grande quantidade de carotenoides na polpa do fruto. No entanto, o fruto carece de informações relacionadas às propriedades antioxidantes e à presença de outros constituintes químicos. O objetivo deste trabalho foi avaliar os extratos etanólicos da polpa e da casca de tucumã quanto à presença de compostos bioativos, atividade antioxidante e citotoxicidade. A identificação de compostos bioativos e de polifenóis totais foram realizadas por meio de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e método de Folin-Ciocalteau, respectivamente. As avaliações antioxidantes foram feitas pelo método de sequestro de radicais 2,2- difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) e teste de Total Reactive Antioxidant Potential (TRAP). Os ensaios de citotoxicidade foram realizados pelas técnicas de 3-(4,5)-dimetiltialzolil -2,5 difeniltetrazólio (MTT) e exclusão por azul de Tripan. Os resultados demonstraram a presença de uma grande quantidade de polifenóis na casca (790,9 ± 43,65 mg/100g) e na polpa (663,9 ± 92,40 mg/100g) do fruto. Além disso, foi verificada a presença de compostos bioativos importantes, como flavonoides (casca = 77,9 ± 0,02 mg/100g; polpa = 40,6 ± 0,06 mg/100g), taninos (casca = 26,4 ± 0,01 mg/100g; polpa = 6,4 ± 0,05 mg/100g) e alcaloides (casca = 1,3 ± 0,29 mg/100g; polpa = 0,7 ± 0,05 mg/100g). Dentre os compostos identificados estavam beta-caroteno, rutina, quercetina, ácido gálico, ácido cafeico e ácido clorogênico, com concentrações superiores na casca em relação à polpa (com exceção do ácido gálico). Os extratos apresentaram alta atividade antioxidante, com valores de IC50 correspondentes a 8,98 ± 0,39 μg/ml (casca) e 11,24 ± 0,461 μg/ml (polpa), para o método de TRAP, e 102,38 ± 4,8 ng/ml (casca) e 224,57 ± 3,9 (polpa) para o método de DPPH. No entanto, em concentrações superiores a 100 μg/mL, ambos os extratos apresentaram efeitos citotóxicos. Os resultados sugerem que os extratos etanólicos da polpa e da casca de tucumã apresentam alta atividade antioxidante, com a presença de compostos bioativos que demonstram excelentes potenciais farmacoterapêuticos.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-03Bitstream added on 2014-06-13T18:26:30Z : No. of bitstreams: 1 hubinger_sz_me_arafcf.pdf: 587255 bytes, checksum: b03c3e7b85db3173658c19db95bdb575 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As plantas têm sido uma valiosa fonte de produtos naturais para a manutenção da saúde e da beleza humana. Diante do conhecimento da potencial atividade antioxidante dos flavonóides presentes nos frutos de Dimorphandra mollis Benth. (Leguminosae), popularmente conhecida como faveiro, pretendeu-se desenvolver um fitocosmético antienvelhecimento. Os frutos de D. mollis foram coletados na Faculdade de Ciências Farmacêuticas da UNESP- Araraquara- SP e sua identificação foi realizada pelo Herbário do Instituto de Biociências da UNESP- Rio Claro- SP, onde está depositada a exsicata. Após coleta, os frutos foram secos e pulverizados em moinho de facas, sendo este material utilizado para realização dos ensaios de controle de qualidade físico-químicos. Os resultados indicaram que o material vegetal encontra-se dentro dos padrões de qualidade estabelecidos para materiais vegetais. Foi, também, otimizada a condição de extração dos flavonóides presentes nos frutos de D. mollis, preparando-se extratos por turboextração e utilizando-se etanol em diferentes graduações como líquido extrator. Estes extratos foram submetidos ao doseamento por espectrofotometria e avaliados quanto a sua composição química utilizando-se a técnica de Cromatografia em Camada Delgada Comparativa (CCDC). O extrato preparado com etanol absoluto apresentou o maior teor de flavonóides e foi analisado por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), confirmando a presença de rutina e quercetina. A partir deste extrato, foram realizadas avaliações da propriedade antioxidante, que mostrou atividade ligeiramente menor que o padrão cisteína, e da citotoxicidade. A emulsão contendo 0,15% do extrato etanólico absoluto, analisada quanto à contaminação microbiológica e quanto à estabilidade, não apresentou sinais de toxicidade dérmica... / The plants have been a valuable source of natural products for the maintenance of human health and beauty. Throw the antioxidant potential of the flavonoids present in Dimorphandra mollis Benth. (Leguminosae), it was developed an antiaging phytocosmetic. The fruits of D. mollis, popularly known as ‘faveiro’, were collected in the Faculdade de Ciências Farmacêuticas da UNESP- Araraquara- SP and its identification was done by Herbário do Instituto de Biociências da UNESP- Rio Claro- SP, where voucher specimen was deposited. After the collect, the fruits were dried and powdered in a knives mill and this material was used for the physico-chemical quality control techniques. The results indicate that the vegetal material was according to established standards of quality established for plant drugs in general. It was also optimized the conditions of extraction of flavonoids from the fruits of D. mollis, preparing the extracts by turbolysis, using ethanol in different degrees as extractor liquid. The flavonoid content was determinated by spectrophotometer method and this chemical composition was evaluated by Comparative Thin Layer Chromatography. The extract prepared with absolute ethanol presented a high level of total flavonoids and it was analyzed by High Performance Liquid Chromatography, confirming the presence of rutin and quercetin. From this extract, it was carried out the evaluation of antioxidant and citotoxicity activities. The extract was incorporated in a cosmetic formulation (oil/water cream) that was analyzed as the microbiological contamination, stability and dermal toxicity.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-02-23Bitstream added on 2014-06-13T18:53:25Z : No. of bitstreams: 1 ocanha_jpp_me_arafcf.pdf: 7360831 bytes, checksum: 3178fcd0c169f554fd800f0b4acc8ecb (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A família Eriocaulaceae é amplamente distribuída no Brasil, popularmente são conhecidas como “sempre viva” porque, mesmo após o corte e secagem, conservam a cor e forma por vários anos. O objetivo deste trabalho foi determinar o potencial biológico de P. geniculatus, estudando a atividade antimicrobiana, antioxidante e a motilidade intestinal dos extratos diclorometânico, metanólico e hexânico. Para determinação da atividade antimicrobiana foram utilizadas as técnicas de difusão em ágar e microdiluição. Para determinação do potencial antioxidante foram realizados os ensaios espectrofotométricos: radical ABTS●+, DPPH, determinação dos teores de fenóis e flavonóides totais, utilizando como padrões a quercetina e ácido gálico. Na técnica de difusão em ágar, 100\L de suspensão bacteriana a concentração de 108 UFC/mL foram semeadas em ágar Muller Hinton e ágar Sabouraud. Discos de papel foram embebidos com 25\L das amostras vegetais e dispostos na superfície das placas de Petri. Após incubação a 37ºC por 24 horas em aerobiose foram feitas as leituras dos halos de inibição de crescimento ao redor dos discos (mm). No teste de microdiluição os orifícios das microplacas foram preenchidos com 80\L de caldo de Muller Hinton, 100\L de soluções da amostra vegetal diluída seriadamente de 1000 a 7,81\g/mL e 20\L da cultura a concentração de 107 células/mL para as bactérias e 103 células/mL para as leveduras. As microplacas foram incubadas a 37ºC durante 24 horas sob condições de aerobiose e posteriormente determinou se a CBM e CFM. Na avaliação da motilidade intestinal, foram utilizados os extratos de escapos e capítulos no solvente diclorometano e metanólicos (250mg/kg), um controle positivo (cloridrato de loperamida, 5mg/kg), controle negativo (solução fisiológica), controle do solvente (Tween 80 a 20% de metanol). Após 45 minutos... / The family Eriocaulaceae is distributed over several parts of Brazil, are popularly known as evergreen because even after cutting and drying, retain their color and shape for many years. This work was to determine the biological potential of P. geniculatus, studying the activity antimicrobial, antioxidant and assess the motility of the extracts dichloromethanic, methanolic and hexanic. For activity determination as techniques were used antibacterial ágar diffusion and microdilution against Gram positive and Gram negative bacterium and yeasts. To determine the potential antioxidant spectrophotometric assays were performed: radical ABTS●+ , DPPH, determining the levels of phenolics and flavonoids, using standards as quercetin and gallic acid. In the diffusion technique , 100 mL of bacterial suspension concentration of 108 CFU/mL were seeded in Muller Hinton ágar and Sabouraud broth with Drigalski loop. Discs paper with 10 mm in diameter soaked with 25\L of vegetation samples were arranged on the surface of the plates. After incubation at 37 ° C for 24 hours under aerobic conditions were the readings of the inhibition of growth around the disks, measured in millimeters. In test microdilution holes of the microplate were filled with 80\L Muller Hinton broth , 100 mL of sample solutions of serially diluted plant 1000 to 7,81 \g/mL and 20\L of bacterial culture concentration of 107 cells/mL and 103 cells/mL for yeasts. The microplates were incubated at 37 ° C for 24 hours under aerobic conditions and subsequently became the technique of CBM and CFM. In the evaluation of intestinal motility, were used extracts of scapes and chapters in dichloromethane solvent and methanol (250mg/kg), a positive control (loperamide hydrochloride, 5mg/kg), negative control (saline solution), control of the solvent (Tween 80 to 20% methanol). After about 45 minutes the animals received a suspension activated... (Complete abstract click electronic access below)

Aproximadamente vinte espécies do gênero Hypericum (Guttiferae) têm ocorrência natural no Brasil, e concentram-se principalmente na região Sul do País. Considerando a importância deste gênero como fonte de substâncias com variadas atividades biológicas, tais como analgésica, antidepressiva, antimicrobiana, antiviral, antiproliferativa, entre outras, o presente trabalho teve como objetivos analisar a constituição química e o potencial antioxidante de espécies de Hypericum, desenvolver protocolos para manutenção de algumas espécies nativas através de culturas de tecidos e células e validar metodologia para quantificação de benzopiranos em H. polyanthemum proveniente de cultivo a campo, in vitro e aclimatizado. Utilizando-se métodos cromatográficos e espectroscópicos, foram isolados e identificados o ácido fenólico ácido 5-O-cafeoil-1-metoxi-quínico e os flavonóides 3,7-dimetil-quercetina, 3-Ometil- quercetina, I3,II8-biapigenina, guaijaverina, isoquercitrina e hiperosídeo, todos derivados da quercetina e obtidos da fração acetato de etila das partes aéreas de H. ternum. Ainda desta espécie, porém da fração n-hexano das raízes, obteve-se o derivado de floroglucinol uliginosina B. De H. myrianthum foram isolados e identificados os flavonóides quercetina e hiperosídeo, da fração metanólica das partes aéres, bem como os derivados de floroglucinol japonicina A e uliginosina B, fração n-hexano das raízes. Através do método colorimétrico de Folin-Ciocalteau, foram quantificados os teores de fenólicos totais das espécies H. caprifoliatum, H. carinatum, H. myrianthum e H. polyanthemum, verificando-se teores variando entre 37,40 a 228,36 mg EQ/g de extrato seco. Utilizando as técnicas de TRAP (Total Radical-trapping Antioxidant Parameter), ORAC-PGV (Oxygen Radical Absorbance Capacity) e reação bioautográfica e espectrofotométrica com radicais DPPH• (2,2 difenil-1-picril-hidrazil) evidenciou-se que extratos brutos metanólicos, e frações metanólicas e n-hexânicas das espécies H. caprifoliatum, H. carinatum H. myrianthum e H. polyanthemum, bem como produtos isolados de espécies de Hypericum nativas do Estado apresentam potencial antioxidante. A regeneração in vitro foi obtida em meio Murashige & Skoog modificado (MΔ) para as espécies H. campestre, H. caprifoliatum, H. carinatum, H. myrianthum, H. polyanthemum e H. ternum utilizando diferentes combinações e concentrações dos reguladores de crescimento 6-benzilamino-purina (BAP), ácido naftaleno-acético (ANA) e ácido 2,4 dicloro-fenóxi-acético (2,4-D). Plântulas dessas espécies foram posteriormente aclimatizadas com sucesso, sendo cultivadas a campo. As espécies micropropagadas demonstraram perfis químicos qualitativamente similares aos apresentados pelas plantas desenvolvidas no campo, de modo que o cultivo in vitro apresenta-se como uma alternativa interessante aos métodos convencionais de produção de biomassa para extração de metabólitos secundários bioativos. Culturas de calos foram estabelecidas em meio MΔ para H. myrianthum, H. polyanthemum e H. ternum, utilizando diferentes combinações e concentrações dos reguladores de crescimento cinetina (CIN), BAP, ANA e 2,4-D. Considerando-se as importantes atividades biológicas de produtos obtidos de H. polyanthemum foi estabelecida uma metodologia para quantificação, através da técnica de CLAE, de benzopiranos no extrato apolar desta planta, espécie de ocorrência restrita. A validação analítica foi avaliada conforme o preconizado por normas reconhecidas internacionalmente, com análise dos parâmetros linearidade, seletividade, precisão (repetibilidade e precisão intermediária), exatidão e limites de detecção e quantificação, demonstrando resultados coerentes com os exigidos pela legislação vigente. Foram evidenciadas variações no teor de benzopiranos na planta micropropagada, aclimatizada e desenvolvida a campo, provavelmente devido a fatores, que vão desde a regulação endógena de processos fisiológicos até variações sazonais no cultivo. / Approximately twenty species of Hypericum genus (Guttiferae) are native of Brazil, occurring mainly in the South region. Considering the importance of the genus as a source of compounds with different biological activities, such as analgesic, antidepressant, antimicrobial, antiviral, antiproliferative, among others, the objectives of this work were to evaluate the phytochemistry and antioxidant potential of some Hypericum species, to develop protocols for the maintenance of the species through in vitro cultures and to validate a technique to quantify the benzopyrans in H. polyanthemum grown in field, in vitro and acclimatized plants. Chromatographic and spectroscopic techniques were used for the isolation and identification of the phenolic acid 5-O-caffeoyl-1-methyl ester-quinic acid and the flavonoids quercetin 3,7-dimethyl ether, quercetin 3-methyl ether, I3,II8-biapigenin, guaijaverin, isoquercitrin and hyperoside, all of them quercetin derivatives and obtained from ethyl acetate fraction of H. ternum aerial parts. From n-hexane fraction of the roots of this species the phloroglucinol derivative uliginosin B was obtained. The flavonoids quercetin and hyperoside (from aerial parts of methanolic fraction), and the phloroglucinol derivatives japonicin A and uliginosin B (from n-hexane fraction of roots) were isolated from H. myrianthum. Total phenol concentration ranging from 37.40 to 228.36 mg QE/g dry extract (Folin–Ciocalteu colorimetric method) in H. caprifoliatum, H. carinatum, H. myrianthum and H. polyanthemum was measured. The antioxidant potential of the extracts obtained from H. caprifoliatum, H. carinatum, H. myrianthum and H. polyanthemum and isolated compounds was determined using TRAP (Total Radicaltrapping Antioxidant Parameter), ORAC-PGR (Oxygen Radical Absorbance Capacity) and bioautographic and spectrofotometric reaction with DPPH• (2,2-diphenyl-1- picrylhydrazyl radical techniques. In vitro regeneration of H. campestre, H. caprifoliatum, H. carinatum, H. myrianthum, H. polyanthemum and H. ternum was obtained in Murashige & Skoog modified medium (MΔ) supplemented with differents combinations and concentrations of the growth regulators 6-benzylaminopurine (BAP), α-naphthalene acetic acid (ANA) and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D). Plantlets were acclimatizated and transferred to open field. The micropropagated species showed chemical pattern qualitatively similar to field grown plants, demonstrating that the in vitro cultures are an alternative to conventional methods for biomass production of bioactive secondary metabolites. Callus cultures of H. myrianthum, H. polyanthemum and H. ternum were established in MΔ medium using different combinations and concentrations of kinetin (CIN), BAP, ANA and 2,4-D. Considering the important biological activities of the benzopyrans isolated from H. polyanthemum, an HPLC quantification methodology was established. Analytical validation was performed according to international rules (linearity, selectivity, precision, accuracy, detection and quantitation limits) showing results coherent with those required by the current legislation. Variation of the benzopyrans concentration was observed among the micropropagated plantlet, acclimatizated and field grown plants, probably due to factors as endogenous regulation of physiological process and seasonal variation of the culture.

As doenças neurodegenerativas tais como as doenças de Alzheimer, Parkinson e desordens cerebrovasculares constituem-se em uma das principais causas de morbidade e de mortalidade na vida adulta. Além disso, o desequilíbrio entre os sistemas de geração e de proteção antioxidante celulares, chamado de estresse oxidativo, desempenha um papel importante nos danos neuronais causados pelos processos isquêmicos, provocando alterações funcionais em macromoléculas e promovendo a lipoperoxidação de membranas. Substâncias com dupla atividade anticolinesterásica e antioxidante vêm sendo consideradas como uma nova abordagem terapêutica para o tratamento farmacológico da doença de Alzheimer, incentivando a investigação e o estudo de produtos naturais para o desenvolvimento de fármacos novos e eficientes. Nesse estudo empregamos um modelo in vitro de fatias hipocampais de ratos, submetidas à privação de oxigênio e glicose (POG) e os métodos de avaliação da toxicidade dos alcalóides empregados foram a liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH) citosólica e redução do MTT (viabilidade mitocondrial). Os alcalóides boldina e vincamina promoveram um aumento de 40 % na liberação de LDH nas fatias que sofreram POG na concentração de 100 μM, além de aumentos significativos na liberação desta enzima também nas fatias controles. Psicolatina e reserpina também tiveram efeitos neurotóxicos. Foi verificado que a POG em fatias hipocampais promove uma diminuição nas medidas do potencial antioxidante total (TRAP) e reatividade antioxidante total (TAR), de 63 % e 16,5 %, respectivamente, além de causar um aumento nos níveis de malonodialdeído liberado pelas fatias, detectado pelo ensaio de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS). Entretanto, este efeito foi revertido pela presença de boldina nas concentrações de 10 μM e de 50 μM. Este mesmo alcalóide, com reconhecida atividade antioxidante, também demonstrou ser um seqüestrador de radicais peroxila mais potente que o padrão Trolox. Além disso, os alcalóides indólicos monoterpênicos coronaridina, venalstonina, andrangina, vincadiformina e voacristina, além da boldina, exibiram potentes atividades antioxidante e anticolinesterásica em ensaios autobiográficos in vitro. / Neurodegenerative disorders, such as Alzheimer, Parkinson and cerebrovascular diseases are one of the major causes of morbidity and mortality in the middle aged and the elderly. Also, the imbalance between the activity of free radicals generation and scavenging systems, called oxidative stress, plays a important role in the neuronal damages caused by ischemia, leading to functional alterations in macromolecules and promoting lipoperoxidation in membranes. Acetylcholinesterase inhibitors and antioxidant compounds have been extensively investigated as new pharmacological strategies for the symptomatic treatment of Alzheimer disease. In this way, natural products are potentially important in an attempt to develope newer and safer drugs. In the present study, we selected the in vitro model of oxygen and glucose deprivation (OGD) in hippocampal slices and the methods used to assess the neurotoxicity of the alkaloids were cellular lactate dehydrogenase (LDH) release and reduction of MTT salt (mitochondrial activity). Both alkaloids boldine and vincamine 100 μM promoted a 40 % increase in LDH release in POG slices, as well as significant increases in the activity of this enzyme in control slices. Psychollatine and reserpine had also neurotoxic effects. It was also verified that OGD decreased the measurements of total antioxidant potential (TRAP) in 63 % and the total antioxidant reactivity (TAR) levels in 16.5 %, as well as an increase in the malondialdehyde levels by slices, which was detected by thiobarbituric acid-reactive substances (TBA-RS). However, this effect was prevented by the presence of boldine 10 μM and 50 μM. This alkaloid is a known antioxidant and it displayed a potent scavenger activity for peroxyl radicals, when compared with Trolox. Another finding is that the monoterpene indole alkaloids coronaridine, venalstonine, andrangine, vincadifformine, voacristine and also boldine exhibited both potent antioxidant and acetylcholinesterase inhibitor activities in in vitro autobiographic assays.

Submitted by JULIA DIETSCHE MONFARDINI null (juliadm@iq.unesp.br) on 2016-04-01T16:52:10Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Julia Dietsche Monfardini.pdf: 10246419 bytes, checksum: dff6716d7f1e0f36c408ba7afeff1e25 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-04-05T18:12:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 monfardini_jd_me_araiq_par.pdf: 807325 bytes, checksum: 9a9635608b6709f23a60f0fd6f5e676e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-05T18:12:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 monfardini_jd_me_araiq_par.pdf: 807325 bytes, checksum: 9a9635608b6709f23a60f0fd6f5e676e (MD5) Previous issue date: 2016-03-10 / Os micro-organismos têm demonstrado serem valiosas fontes de princípios ativos de uso clínico, no qual a penicilina é o exemplo mais conhecido de metabólito secundário, de importância medicinal, produzido por fungos. A espécie vegetal Eugenia jambolana Lam., popularmente conhecida como Jambolão, é utilizada na medicina popular brasileira, principalmente no tratamento de diabetes. O fungo Botryosphaeria parva, isolado das folhas da E. jambolana (L.) e codificado como Ej_F01, foi cultivado em escala ampliada em três meios de cultivo: Czapek®, PDB e Milho. Após o período de fermentação do endófito no meio de milho, foi feita uma extração direta com MeOH, seguida de filtração e evaporação do solvente. O extrato obtido foi solubilizado em AcOEt e fez-se três partições líquido-líquido com H2O, após a evaporação do solvente orgânico, o extrato foi dissolvido em CH3CN e foi feita uma nova partição líquido-líquido com Hexano, após a evaporação da CH3CN, foi obtido o extrato de interesse. Após o período de fermentação do endófito nos meios líquidos (PDB e Czapek®), a suspensão micelar foi filtrada a pressão reduzida, separando os micélios dos meios fermentados. Em seguida, os filtrados aquosos foram submetidos a três partições líquido-líquido com AcOEt, e após a evaporação do solvente orgânico, foram obtidos os extratos brutos de interesse. Todos os extratos foram fracionados utilizando técnicas cromatográficas, como Cromatografia em Coluna e/ou Cromatografia Líquida de Alta Eficiência preparativa. Após o fracionamento dos extratos brutos, foi possível obter sete substâncias oriundas do extrato do milho, seis substâncias do extrato do Czapek®, e uma do extrato de PDB, que foram submetidas a análises espectrométricas (EM, RMN de 1H, 13C, 1D e 2D) para a determinação/identificação estrutural. As substâncias 05, 08, 09 e 11 foram identificadas como 5-hidroximeleina, rel. (3S, 4S)-4-hidroximeleina, meleina e rel. (3S, 4R)-4-hidroximeleina, respectivamente, pertencentes à classe das isocumarinas; as substâncias 01, 03, 06 e 07 foram identificadas como botryosphaerin A, 13,14,15,16-tetranorlabd-7-eno-19,6β:12,17-diolídeo, CJ-14445 e oidiolactona E, respectivamente, pertencentes à classe dos diterpenos tetranorlabdanos; a substância 12 foi identificada como botryosphaerona D, pertencente à classe das naftalenonas. A substância 02, inédita, foi nomeada como rel. (4S, 5R, 6R, 10S)-18-hidroxi-13,14,15,16-tetranorlabd-7,9-dieno-19,6β:12,17-diolídeo, codificada como botryosphaerin I. Os estudos relacionados ao B. parva têm como finalidade verificar sua produção metabólica em diferentes meios de cultivo, bem como a avaliação do potencial biológico dos extratos brutos, frente aos ensaios antioxidante, antifúngico e anticolinesterásico. / Microorganisms have proven to be valuable sources of active principles for clinical use, wherein the penicillin is the best known example of a secondary metabolite of medicinal importance, produced by fungi. The plant species Eugenia jambolana Lam., commonly called Black Plum, is used in traditional Brazilian medicine, especially in the treatment of diabetes. The Botryosphaeria parva fungus, isolated from leaves of E. jambolana (L.) encoded as Ej_F01, was grown on an enlarged scale in three different culture media: Czapek®, PDB and corn. After the fermentation period in the corn media, a direct extraction was done with MeOH followed by filtration and evaporation of the solvent. The extract was disolved in AcOEt and made three liquid-liquid partition with H2O, after evaporation of the organic solvent, the extract was dissolved in CH3CN and was made a new liquid-liquid partition with Hexane, after evaporation of the CH3CN, it was obtained extract of interest. After the fermentation period in liquid media (PDB and Czapek®), the micellar suspension was filtered under reduced pressure, separating the mycelium from the fermented broth. Then, the aqueous filtrates were subjected to three liquid-liquid partition with AcOEt, and after evaporation of the organic solvent, there were obtained the crude extracts of interest. All extracts were fractionated using chromatographic techniques such as column chromatography and/or preparative High Performance Liquid Chromatography efficiency. After the fractioning of crude extracts, it was possible to obtain seven substances derived from corn extract, six substances obtained from Czapek extract, and a substance obtained from the PDB extract, which were submitted to spectrometric analysis (MS-ESI, NMR 1H, 13C, 1D and 2D) for determining and structural identification. The substances 05, 08, 09 and 11 were identified as 5-hydroxymelein, rel. (3S, 4S)-4-hydroxymelein, Melein and rel. (3S, 4R)-4-hydroxymelein, respectively, belonging to the class of isocoumarins; the substances 01, 03, 06 and 07 were identified as botryosphaerin A, 13,14,15,16-tetranorlabd-7-ene-19,6β:12,17-diolide, CJ-14445 and oidiolactone E, respectively, belonging to the class of tetranorlabdanes diterpenoids, and substance 12 was identified as botryosphaerone D, belonging to the class of naftalenones. A new tetranorlabdane diterpenoid was obtained, substance 02, named rel. (4S, 5R, 6R,10S)-18-hydroxy-13,14,15,16-tetranorlabd-7,9-dien-19,6β:12,17-diolide and encoded botryosphaerin I. These studies related to the B. parva are intended to verify your metabolic production in different culture media as well as the evaluation of the biological potential of extracts compared to antioxidant, antifungal and anticholinesterase trials.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present study aims to evaluate the functional compounds dietary fibre and fractions, antioxidants, minerals, and antioxidant activity of barley cultivars, and a concentrated extract made from whole grains of barley through methodologies in vitro and to investigate the influence of the growing region and climatic factors on the content of functional compounds of cultivars. The work is divided into three chapters dealing respectively with: Literature review on barley (Hordeum vulgare L.) addressing the anatomical characteristics of barley grain, functional components of barley grain (dietary fibre, β-glucans, minerals, flavonoids), identification and functions of the phenolic compounds (rutin, caffeic acid, ferulic acid, myricetin, gallic acid, catechin, tannic acid, p-coumaric acid), analytical methods for detection and quantitation of phenolic compounds (High-liquid chromatography (HPLC), Mass spectrometry electrospray ionization (ESI-MS/MS), Folin- Ciocalteau s method, antioxidant activity in vitro (determination of antioxidant capacity by capturing the free radical DPPH, determination of reactive oxygen species (ANCOMROS), and superoxide anion radical); Development (subdivided in the form of thematic chapters, according to the standards published by the National Institute of Industrial Property (INPI) and scientific journals in the area) and the final considerations from the author about their her findings. / O presente trabalho tem por objetivo avaliar os compostos funcionais fibra alimentar e frações, antioxidantes, minerais, bem como a atividade antioxidante de cultivares de cevada, e de um extrato concentrado obtido a partir de grãos integrais de cevada por meio de metodologias in vitro e investigar a influência da região de cultivo e dos fatores climáticos no conteúdo dos compostos funcionais das cultivares. O trabalho está dividido em três capítulos tratando respectivamente de: Revisão de literatura sobre cevada (Hordeum vulgare L.) abordando as características anatômicas do grão de cevada, componentes funcionais do grão de cevada (fibra alimentar, β-glicanas, minerais, flavonóides), identificação e funções dos compostos fenólicos (rutina, ácido caféico, ácido ferúlico, miricetina, ácido gálico, catequina, ácido tânico, ácido p-cumárico), metodologias analíticas para detecção e quantificação de compostos fenólicos (Cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE), Espectrometria de massas com ionização electrospray (ESI-MS/MS), método de Folin-Ciocalteau, atividade antioxidante in vitro (determinação da capacidade antioxidante pela captura do radical livre DPPH, determinação de espécies reativas de oxigênio (ANCOMROS) e radical ânion superóxido); Desenvolvimento (subdividido na forma de capítulos temáticos, conforme as normas de publicação do Instituto Nacional da Propriedade Industrial (INPI) e revistas científicas da área) e das considerações finais da autora sobre os seus achados.

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-04T13:20:40Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1164967 bytes, checksum: 332512ca6a2aeedf157cf9480454d7f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T13:20:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1164967 bytes, checksum: 332512ca6a2aeedf157cf9480454d7f8 (MD5) Previous issue date: 2017-06-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Colostrum from the first secretions of the mammary glands is considered an essential food for the development of newborns due to its high content of proteins, antimicrobial peptides, macro and micronutrients. The serum is considered na important coproduct for the dairy industry, configuring about 85-90% of the total milk volume, its proteins are recognized by their biological properties, since they have an excellent composition and bioavailability of essential amino acids. The present study had as objective to characterize the serum protein profile of goat colostrum produced by goats Created in Paraíba and to evaluate possible biological activities. The serum (SR) was obtained by acid precipitation in pH 4.1 and fractionated by ammonium sulfate precipitation to obtain the fractions 0-30% (SF1), 30- 60% (SF2) and 60-90% (SF3). The analysis of the protein profile was verified by SDS-PAGE and total amino acids. The biological properties of the samples were verified with the analysis of antioxidant, DNA protection and antibacterial activities. It was verified that colostrum serum presents proteins with molecular masses between 12-160kDa and an excellent profile of amino acids. From the obtained results it is possible to affirm that all the fractions were able to sequester the radicals ABTS and DPPH. For the DNA protection test, the concentracion of 10μg of SF3 conferred a greater integrity to the molecule. The samples presented inhibitory activity for both gram-negative and gram-positive bacteria. Colostrum serum proteins have biological properties with potential biotechnological application and pharmaceutical interest / O colostro oriundo das primeiras secreções das glândulas mamárias é considerado um alimento essencial para o desenvolvimento dos recém-nascidos, devido seu elevado teor de proteínas, peptídeos antimicrobianos, macro e micronutrientes. O soro é considerado um coproduto importante para a indústria leiteira, configurando cerca de 85–90% do volume total do leite. Suas proteínas são reconhecidas pelas propriedades biológicas, uma vez que possuem uma excelente composição e biodisponibilidade de aminoácidos essenciais. O presente estudo teve como objetivo caracterizar o perfil proteico do soro de colostro caprino produzido por cabras criadas na Paraíba e avaliar possíveis atividades biológicas. O soro (SR) foi obtido por precipitação ácida em pH 4,1 e fracionado por precipitação com sulfato de amônio para obtenção das frações 0-30% (SF1), 30-60% (SF2) e 60-90% (SF3). A análise do perfil proteico foi verificado por SDS-PAGE e aminoácidos totais. As propriedades biológicas das amostras foram verificadas com as análises das atividades antioxidante, proteção ao DNA e antibacteriana. Verificou-se que o soro do colostro apresenta proteínas com massas moleculares entre 12-160kDa e um excelente perfil de aminoácidos. A partir dos resultados obtidos é possível afirmar que todas as frações foram capazes de sequestrar os radicais ABTS e DPPH. Para o teste de proteção ao DNA, a concentração de 10μg de SF3 conferiu uma maior integridade à molécula. As amostras apresentaram atividade inibitória tanto para as bactérias gramnegativas quanto para gram-positivas. As proteínas do soro do colostro apresentam propriedades biológicas com potencial aplicação biotecnológica e de interesse farmacêutico.