Submitted by Gizele Lima (gizele.lima@inpa.gov.br) on 2017-11-06T14:02:07Z No. of bitstreams: 2 dissertaçao_Thailliny Moraes_2017.pdf: 16624371 bytes, checksum: a4d562352371a5381f5a9fcbf7623e33 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-06T14:02:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertaçao_Thailliny Moraes_2017.pdf: 16624371 bytes, checksum: a4d562352371a5381f5a9fcbf7623e33 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-06-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / Disjoint savannas found within the Amazon rainforest have been interpreted as biogeographic evidence of expansion and retraction of this type of dry vegetation as a consequence of climatic fluctuations during the Quaternary Period. Little is known, however, about the diversity of isolated savannas in the Amazon and how the gene flow between savannas isolated from the Amazon and continuous savannas from Central Brazil varied in time and geographical space. In this study, the genetic diversity and population structure of the arboreal species Roupala montana was investigated in savanna areas of Central Brazil and in isolated savanna enclaves in the Brazilian Amazon. For this, genetic variation at three microsatellite loci and two non-coding regions (psbA /trnH and trnG /trnS) of the chloroplast genome were analysed. In total, 170 individuals from 25 populations of R. montana were sampled. It was found high genetic diversity which was evidenced by the occurrence of 39 haplotypes for microsatellites and 26 haplotypes for non-coding regions of the cpDNA. For the microsatellite data, only eight haplotypes were shared between the core savannas in Central Brazil and isolated Amazonian savannas. For cpDNA sequencing data, no haplotype sharing was found between the savannas of these two regions. The results suggest, the occurrence of long-term isolation among the Amazonian savannas and also between these and the savannas of Central Brazil. A high number of exclusive haplotypes and high genetic differentiation was evidenced for the populations of R. montana sampled. The disjoint savannas in the Amazon seems to have been colonized by lineages of R. montana from the "core" Central Brazil savannas, emphasizing that, there was a connection between these regions which probably allowed the dispersion of the species. Each set of isolated savanna fragment in the Amazon are redoubts of unique genetic lineages and the patterns of distribution of genetic variability found may serve as a basis for the definition of conservation strategies for Brazilian savannas in general. / Áreas de savana disjuntas encontradas dentro da floresta amazônica têm sido interpretadas como evidências biogeográficas de um processo de expansão e retração deste tipo de vegetação seca durante as flutuações climáticas no Período Quaternário. Pouco se sabe, no entanto, sobre a diversidade das savanas isoladas na Amazônia e como o fluxo gênico com as savanas contínuas do Brasil Central variaram no tempo e no espaço geográfico. Neste estudo, a diversidade genética e estrutura populacional da espécie arbórea Roupala montana foi investigada em áreas de savanas do Brasil Central e em enclaves de savanas na Amazônia. Para tal foi analisada a variabilidade genética em três locos microssatélites e duas regiões não codificadoras do genoma do cloroplasto (psbA/trnH e trnG/trnS). Ao todo 170 indivíduos pertencentes a 25 populações de R. montana foram amostrados. Foi encontrada uma elevada diversidade genética, evidenciada pela ocorrência de 39 haplótipos para microssatélites e 26 haplótipos para regiões não codificantes do cpDNA. Apenas oito haplótipos foram compartilhados entre populações do cerrado-central e cerrados amazônicos para dados microssatélites, nenhum compartilhamento de haplótipos entre essas duas regiões foi encontrado para os dados de sequências. Os resultados sugerem um isolamento de longo prazo entre as savanas amazônicas e também delas em relação as savanas do Brasil Central. Um alto número de haplótipos exclusivos e elevada diferenciação genética foi evidenciado para as populações de R. montana amostradas. Os dados também demonstram que as savanas isoladas da Amazônia foram colonizadas por linhagens de R. montana oriundas da região “core” das savanas do Brasil Central, enfatizando que houve um conexão entre essas regiões o que provavelmente permitiu a dispersão da espécie. Cada conjunto de fragmento de savana isolado na Amazônia são redutos de linhagens genéticas únicas e os padrões de distribuição da variabilidade genética encontrados podem servir como embasamento para definição de estratégias de conservação para savanas brasileiras em geral.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6441_1.pdf: 1849456 bytes, checksum: c9c2e1c53ddbd4ffdfc8af66bdc971b9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / A Carapa guianensis (Meliaceae), árvore comum na região amazônica, é conhecida popularmente como Andiroba. O óleo de sua semente é utilizado como antiinflamatório, analgésico e repelente de insetos. Embora seja amplamente usada pela população, ainda não existem dados na literatura em relação à sua toxicidade. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi avaliar a segurança da administração do óleo da semente (OS) de C. guianensis em ratos Wistar. Para isto, realizou-se o teste de toxicidade aguda e avaliou-se a influência da administração subcrônica por via oral do OS, nas doses de 0,375, 0,75 e 1,5 g/kg, sobre os parâmetros bioquímicos, hematológicos e reprodutivos. Os resultados mostraram que na toxicidade aguda o OS não produziu morte dos animais em doses de até 5,0 g/kg. A administração por 30 dias do OS não alterou os parâmetros bioquímico e hematológico, exceto, para a alanina aminotransferase (ALT) que na maior dose induziu aumento de 29,3 ± 5,3% em relação ao grupo controle. Em adição, a massa relativa do fígado foi aumentada em respectivamente 19,1 ± 3,7 e 33,3 ± 4,2% para as doses de 0,75 e 1,5 g/kg. Na toxicidade reprodutiva em fêmeas, a administração do OS não modificou os índices reprodutivos no período de organogênese (7º ao 14º dia da prenhez) e no período integral da gestação (1º ao 21º dia). Contudo, nesse último período, observou-se aumento da atividade motora da prole proveniente de mães tratadas com OS 0,375 g/kg. Na performance reprodutiva, o tratamento por 45 dias com OS não induziu alterações nos índices reprodutivos, na massa relativa dos órgãos reprodutivos (epidídimo, vesícula seminal e ducto deferente), no número de espermatozóides dos testículos e na histologia do testículo e do epidídimo. Todavia, foi observada, em todas as doses usadas, redução significativa na massa relativa do testículo em respectivamente 15,1 ± 1,7, 21,9 ± 3,7 e 16,7 ± 3,3 % e apenas na maior dose, diminuição de 57,3 ± 12,3% no número de espermatozóides na cauda do epidídimo. Em conclusão, o óleo de Carapa guianensis apresentou baixa toxicidade por via oral em roedores. Contudo, o aumento na ALT e na massa do fígado, a modificação no desenvolvimento comportamental e a redução da massa do testículo e do número de espermatozóides no epidídimo apontam para possível toxicidade que deve ser analisada em maiores detalhes

Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-01T21:48:23Z No. of bitstreams: 1 Fausto Klabund Ferraris.pdf: 38480448 bytes, checksum: a28eecf79e0cd57527404faee9aba556 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-01T21:48:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fausto Klabund Ferraris.pdf: 38480448 bytes, checksum: a28eecf79e0cd57527404faee9aba556 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Carapa guianensis Aublet é u um membro da família das Meliaceae amplamen nte utilizada na medicina popular no Brasil e em outro os países que abrangem a floresta Amazônica. Nosso grupo descreveu previamente a atividade ant ti-inflamatória e antialérgica de um conjunto dde tetranortriterpenoides (TNTPs) contendo: 6a-acetooxigedunina, 7-deacetoxi-7-oxogedunina, andir robina, angolensato de metila e gedunina, isolados ddas sementes de C. guianensis. No presente e estudo, foram realizados estudos in vitro e in vivo na te entativa de elucidar os mecanismos pelo quais oss TNTPs apresentam os efeitos anti-inflamatório e anti ialérgico, identificando assim as substâncias bioa ativas presentes no óleo. Nós mostramos que a incuba ação in vitro de esplenócitos com o conjunto de TNTPs, bem como com cada um dos TNTPs isolados s foi capaz de inibir a ativação, proliferação e a p produção in vitro de IL-2, CCL11/Eotaxina e CCL5/RAN NTES em linfócitos T através do bloqueio da tran nslocação do fator NF.B. Além disso, a incubação in v vitro de eosinófilos com o conjunto de TNTPs, b bem como com cada um dos cinco TNTPs isolados, inibiu a adesão e quimiotaxia destas células. Consistente com estes dados, nós demonstramos qque a gedunina apresenta uma importante at ividade antialérgica em modelos in vivo de inflamaçãão alérgica (pleurisia alérgica e inflamação aguuda pulmonar alérgica). Descobrimos que a pleuris sia alérgica induzida por ovalbumina (OVA) eem camundongos pré- sensibilizados foi significativa amente reduzida com o pré-tratamento com geddunina; esta inibição foi principalmente devido ao blo oqueio do influxo de eosinófilos e de linfócitos T T. O pré-tratamento com gedunina diminuiu os níveis d de CCL2, CCL3, CCL5, CCL11, IL-5 e LTB4 na ccavidade pleural. O pré- tratamento in vivo com gedun nina reduziu o número de linfócitos T ativados n na pleura e no linfonodo torácico após 24 h do desafioo com OVA. O tratamento in vitro de linfócitos T T com gedunina inibiu a ativação, proliferação, produç ção de IL-2 e translocação de NF.B e de NFAT in nduzido por a-CD3 mAb. Notavelmente, o pós-tratme ento com gedunina reverteu a inflamação ag guda pulmonar alérgica induzida por OVA, diminuind do as contagens de linfócitos T e eosinófilos; e e níveis de mediadores eosinofilotáticos no lavado brroncoalveolar. Nosso grupo previamente demon nstrou que a endotelina (ET)-1 desempenha importan nte papel pró-inflamatório na resposta inflamatóri ia articular aguda. Desta forma, nós avaliamos os efeiittos anti-inflamatório e –nociceptivos da geduninaa na artrite induzida por zymosan e seu efeito biológic co na expressão de ET-1. A injeção intra-articula ar com zymosan induz a expressão de RNAm para ppreproET-1, levando a produção de TNF-a, LTBB4 e IL-6 resultando no influxo de neutrófilos, forma ação de edema e hiperalgesia. Pré-e pós-tra atamento com gedunina diminuiram o acúmulo de ne eutrófilos, inchaço na articulação do joelho, exp pressão de RNAm para preproET-1 e produção de mediadores inflamatórios. Além disso, o pré-ttratamento in vitro com gedunina inibiu a ativação e quimiotaxia de neutrófilos induzida por ET-1. Em m conclusão, o presente estudo mostrou que os TNTP Ps apresentam notável atividade anti-inflamatória e antialérgica inibindo a ativação e migração de leucóccitos; e bloqueando diferentes mediadores pró-in nflamatórios. / Carapa guianensis Aublet is aa member of the Meliaceae family widely used i n folk medicine in Brazil and other countries encompa assing the Amazon rainforest. Our group has p previously described the anti-inflammatory and anti-alllergic activities of a pooled fraction of tetran nortriterpenoids (TNTPs) containing: 6a-acetoxygedun nin, 7-deacetoxy-7-oxogedunin, andirobin, me ethyl angolensate and gedunin, isolated from the se eeds of C. guianensis. In the present study, we p performed in vitro and in vivo studies in order to elucidaate the mechanisms by which TNTPs present the eir anti-inflammatory and anti-allergic effects and to ide entify the bioactive compound(s) present in such fraction. Here, we show that in vitro incubation of espllenocytes with the pooled TNTP fraction, as well as with each one of the five isolated TNTPs were able e to inhibit T lymphocyte activation, proliferation a and in vitro production of IL-2, CCL11/Eotaxin and CCLL5/RANTES by impaired NF.B nuclear transloc ation. Moreover, in vitro incubation of eosinophils with h the pooled TNTP fraction, as well as with each h one of the five isolated TNTPs, inhibited the adhesio on and chemotaxis of eosinophils. In accordan nce with these data, we demonstrate that gedunin pr resents an important anti-allergic activity in in vivo models of allergic inflammation (allergic pleurisyy and acute lung allergic inflammation). We fou und that allergic pleurisy induced by ovalbumin (OVA) in presensitized mice was significantly diminish hed by the pre-treatment with gedunin; this inhibition w was primarily due to the impairment of eosinophil aand T lymphocyte influx. Pre-treatment with gedunin diiminished the levels of CCL2, CCL3, CCL5, CCL L11, IL-5 and LTB4 at the pleural cavity. In vivo pre-trea atment with gedunin reduced the numbers of act tivated T lymphocytes in the pleura and in the thorac cic lymph nodes 24 h after OVA -challenge. In vitro treatment of T lymphocytes with gedunin inh hibited a-CD3 mAb-induced activation, proliferatiion, IL-2 production and nuclear translocation of NF.BB and NFAT. Notably, post-treatment of mice with h gedunin reverted OVA- induced lung allergic inflamm mation by decreasing the T lymphocyte and eos sinophil counts; and the levels of eosinophilotactic mmediators in bronchoalveolar lavage fluid. Our group have previously demonstrated that endothellin (ET)-1 plays a pivotal pro-inflammatory role in acute articular inflammatory response. Thus,, we evaluated the anti-inflammatory and –nocice eptive effects of gedunin in zymosan-induced arthritis aand its effects on ET-1 expression and biologica al function. Intra-articular zymosan stimulation induced d preproET-1 mRNA expression, production of TNF-a, LTB4 and IL-6 resulting in neutrophil influx, , oedema formation and hyperalgesia. Gedunin n pre-or post-treatment decreased zymosan-induced d neutrophil accumulation, knee joint swellin ng, preproET-1 mRNA expression and production of inflammatory mediators. Moreover, in vitro gedunin pre-treatment inhibited neutrophil activation and chemotaxis ET-1-induced. In conclusion, thhe current results reveal that TNTPs presents remark kable anti-inflammatory and anti-allergic activity y by inhibiting leukocyte activation and migratio on; and blocking different pro-infla ammatory mediators.

Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-02-24T14:21:28Z No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 7731405 bytes, checksum: 68a495488b791e03507898e6666f5361 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-24T14:21:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivo total.pdf: 7731405 bytes, checksum: 68a495488b791e03507898e6666f5361 (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / The genus Piper is the largest the family Piperaceae, its species are distributed especially in neotropical region of the globe. The phytochemical research of Piper species originated numerous scientific papers in many parts of the world, which led to the isolation of many bioactive compounds such as kavalactones, lignoids, chromones, flavonoids and chalcones, terpenes, steroids, prenylated benzoic acids, aristolactams, phenylpropanoids and amides. Piper arboreum is an erect shrub with about 4.0 meters high. It is popularly known as “fruto de morcego”, “alecrim-de-Angola”, “pau-de-Angola” or “beto-preto” and used in Brazil, in the form of decoction for the treatment of rheumatism, bronchitis, flu and colds and used against venereal and urinary tract diseases. This work reports the phytochemical study of the leaves and stem of P. arboreum Aublet. Using usual chromatographic methods and spectroscopic techniques of IR, MS, 1H and 13C NMR and comparison with the literature data it was possible to isolate and identify from the leaves and stem of Piper arboreum, a mixture of steroids: β-sitosterol and stigmasterol, four aristolactams: Piperolactam A, Piperolactam B, Piperolactam C and Cefaronone B, three phenylpropanoids: 3,4,5-trimethoxyphenyl-propanoic acid, 3,4-dimethoxyphenyl-propanoic acid and 3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl-propanoic acid and three amides: Arboreumine, N-(12,14-dimethoxy-13-hydroxydihydrocinamoil)-3-pyridin-2-one and N-[12-(15,16-methylenedioxyphenyl)-8( E),10 (E) -heptadienoil-pyrrolidine. The last two compounds are being reported for the first time in the literature. / O gênero Piper é o maior da família Piperaceae, suas espécies estão distribuídas especialmente na região neotropical do globo terrestre. A investigação fitoquímica de espécies de Piper originou inúmeros trabalhos científicos em várias partes do mundo, o que levou ao isolamento de diversos compostos bioativos tais como cavalactonas, lignoides, cromonas, flavonoides e chalconas, terpenos, esteroides, ácidos benzoicos prenilados, aristolactamas, fenilpropanoides e amidas. Piper arboreum é um arbusto ereto de aproximadamente 4,0 metros de altura. Popularmente é conhecida como fruto de morcego, alecrim-de-Angola, pau-de-Angola ou beto-preto e utilizada no Brasil na forma de decocto para o tratamento de reumatismo, bronquite, gripe e resfriado e empregada contra doenças venéreas e do trato urinário. Este trabalho reporta o estudo fitoquímico das folhas e caule de P. arboreum Aublet. Utilizando-se métodos cromatográficos usuais e técnicas espectroscópicas de IV, EM e RMN de 1H e 13C uni e bidimensionais e a comparação dos dados com a literatura foi possível isolar e identificar das folhas o e do caule de Piper arboreum, uma mistura de esteroides: β-sitosterol e estigmasterol, quatro aristolactamas: Piperolactama A, Piperolactama B, Piperolactama C e Cefaronona B, três fenilpropanoides: Ácido 3,4,5-trimetoxifenil-propanóico, Ácido 3,4,-dimetoxifenil-propanóico e Ácido 3,5-dimetoxi-4-hidroxifenil-propanóico e três amidas: Arboreumina, N-(12,14-dimetoxi-13-hidroxidihidrocinamoil)-3-piridin-2-ona e N-[12-(15,16-metilenedioxifenil)-8(E),10(E)-heptadienoil-pirrolidina. Os dois últimos compostos estão sendo relatados pela primeira vez na literatura.

nÃo hà / Este trabalho relata o estudo fitoquÃmico de trÃs espÃcies de plantas da famÃlia Burseraceae: Protium hebetatum Daly (PHB), Protium heptaphyllum (Aublet) Marchand subsp. ulei (Swat) Daly (PHU) e o Protium heptaphyllum (Aublet) Marchand subsp. heptaphyllum (PHH), conhecidas, aleatoriamente, como breu, breu-branco ou almÃcega. As espÃcies foram coletadas no municÃpio de Cruzeiro do Sul, Acre, Brasil. Da resina do PHB, foram obtidos trÃs misturas binÃrias de triterpenos pentacÃclicos das sÃries oleanano/ursano: 3-oxoolean-12-eno e 3-oxours-12-eno; 3Ã-hidroxiolean-12-eno e 3Ã-hidroxiurs-12-eno; 3Ã,16Ã-dihidroxiolean-12-eno e 3Ã,16Ã-di-hidroxiurs-12-eno; e quatro triterpenos tetracÃclicos da sÃrie tirucalano: Ãcido 3-oxotirucala-8,24-dien-21-Ãico, Ãcido 3a-hidroxitirucala-8,24-dien-21-Ãico, Ãcido 3a-acetoxitirucala-8,24-dien-21-Ãico e o Ãcido 3a-hidroxitirucala-7,24-dien-21-Ãico. Da cera epicuticular das folhas do PHB foram obtidos misturas de trÃs hidrocarbonetos lineares, heptacosano, hentriacontano e tritriacontano, e mistura de Ãsteres etÃlicos, tendo como constituinte principal o hexadecanoato de etila. Da resina do PHU foram obtidas duas misturas binÃrias de triterpenos pentacÃclicos das sÃries oleanano/ursano: 3-oxoolean-12-eno e 3-oxours-12-eno; 3Ã-hidroxiolean-12-eno e 3a-hidroxiurs-12-eno; trÃs triterpenos tetracÃclicos da sÃrie tirucalano: Ãcido 3-oxotirucala-8,24-dien-21-Ãico, Ãcido 3ahidroxitirucala-8,24-dien-21-Ãico e Ãcido 3a-hidroxitirucala-7,24-dien-21-Ãico, e um triterpeno pentacÃclco da sÃrie friedelano, D:A-friedoolean-3-ona. Do Ãleo essencial do PHU foram isolados dois monoterpenos: o terpinoleno e o p-cimen-8-ol. O Ãleo essencial das resinas do PHB, PHU e PHH, apresentaram como constituintes principais, a-pineno (21,28%), terpinoleno (42,31%) e p-cimeno (31,50%), respectivamente. Esses Ãleos mostraram atividade biolÃgica frente aos microorganismos Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniar, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Nycobacterium phlei. Especificamente, o Ãleo essencial do PHB apresentou atividade contra larvas do mosquito Aedes aegypti, apresentado CL50 = 270,32 ppm, considerado insuficiente. Algumas reaÃÃes de derivatizaÃÃo foram realizadas com o intuito de comprovaÃÃo estrutural, como tambÃm, para destacar, em parte, a quÃmica propriamente dita. Finalmente, foi verificada a possibilidade de utilizaÃÃo das enzimas imobilizadas da resina do PHB como biocatalisador, em reaÃÃo de acetilaÃÃo. / This work presents study phytochemistry of three species of plants of the family Burseraceae: Protium hebetatum Daly (PHB), Protium heptaphyllum (Aublet) Marchand subsp. ulei (Swat) Daly (PHU) and the Protium heptaphyllum (Aublet) Marchand subsp. heptaphyllum (PHH), known, at random, as pitch, pitch-white and almÃcego. The species were collected in the municipal district of Cruzeiro do Sul, Acre, Brazil. Of the resin of PHB, were obtained three binary mixtures of triterpenes pentacyclics of the series oleanane/ursane: 3-oxoolean-12-ene and 3-oxours-12-ene; 3Ã-hydroxyolean-12-ene and 3Ã-hydroxyurs-12-ene; 3Ã,16Ãdihydroxyolean- 12-ene and 3Ã,16Ã-dihydroxyurs-12-ene; and four triterpenes tetracyclic of the series tirucallane: 3-oxotirucalla-8,24-dien-21-oic acid, 3a-hydroxytirucalla-8,24-dien-21-oic acid, 3a-acetoxytirucalla-8,24-dien-21-oic acid and the 3a-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid. Of the epicuticular wax of the leaves of PHB were extracted mixtures of three hydrocarbons: heptacosane, hentriacontane and tritriacontane, and mixture of ethyl ester, as main constituent, the ethyl hexadecanoate. Of the resin of PHU were obtained two binary mixtures of triterpenes pentacyclics of the series oleanane/ursane: 3-oxoolean-12-ene and 3-oxours-12-ene; 3Ã-hydroxyolean-12-ene and 3a-hydroxyurs-12-ene; three triterpenes tetracyclics of the series tirucallane: 3-oxotirucalla-8,24-dien-21-oic acid, 3ahydroxytirucalla- 8,24-dien-21-oic acid and the 3a-hydroxytirucalla-7,24-dien-21-oic acid and one triterpene pentacyclic of the series friedelane: D:A-friedoolean-3-one. From the essential oil of PHU, were isolated two monoterpenes: the terpinolene and the p-cymen-8-ol. The essential oil of the resins of PHB, PHU and PHH, presented as main constituent a-pinene (21.28%), terpinolene (42.31%) e p-cymene (31.50%), respectively. Those oils showed biological activity to the microorganism: Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniar, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Nycobacterium phlei. Specifically, the essential oil of PHB was analyzed his activity against larva of the mosquito Aedes aegypti, presenting CL50 = 270.32 ppm, considered donât activate. Some reactions were performed with the intention of structural proof, as well as, to detach, in part, the chemistry. Finally, was verified the possibility of using the immobilized enzymes of the resin of PHB as biocatalyst, in acetylation reaction.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PRISCILLA OLIVEIRA.pdf: 2800114 bytes, checksum: 0b6a9ea35227863ff51f73dff0623486 (MD5) Previous issue date: 2010-08-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The species Goupia glabra Aublet (Goupiaceae), popularly known as cupiúba is used in popular medicine against several diseases. Their barks are used as dental analgesic, as a vermifuge, to treat malaria, chickenpox and eczema. The leaves are used against syphilis, ocular disorders, migraine, smallpox and as healing. This study aimed to quantify the phenolic compounds and evaluate the antioxidant, inhibiting acetylcholinesterase, brine shrimp toxicity, antitumor and antimicrobial activities of extracts of leaves, thin and thick branches of cupiúba. The dry material was crushed and subjected to Soxhlet extraction using solvents in increasing order of polarity (hexane, ethyl acetate and methanol). The phytochemical screening was performed for different classes of metabolites, observed positive results for sterols in all extracts and terpenoids and some classes of flavonoids in the extracts obtained in ethyl acetate and methanol. The fractionation of the hexane extract of leaves (EHF) resulted in the isolation of a mixture composed by β-sitosterol and stigmasterol. From ethyl acetate extract of leaves (EAF) was isolated catechol, a simple phenol with restricted distribution in nature. The total phenolic content of extracts was determined using the Folin-Ciocalteau and the result was expressed as gallic acid equivalents (GAE). The antioxidant activity was assessed by the ability of capturing the stable radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH ), using quercetin as external standard, expressed as value of the effective concentration (EC50). We observed a positive correlation between total phenolics and EC50, ie as greater the amount of phenolics smaller is the EC50. The ethyl acetate extract of the leaves (EAF) presented the highest antioxidant potential [EC50 = 9.76 ± 0.42 μg/mL (quartz cuvette) and EC50 = 19.87 ± 0.31 μg/mL (microplate)]. The toxicity of the extracts was verified by bioassays with microcrustacea A. salina and expressed in percentual mortality of nauplius. Qualitative analysis of anticholinesterase activity was performed according to the method of Ellman (modified), presenting negative results. The antitumor activity was evaluated against four cell lines (leukemia, breast, colon and glioblastoma) using colorimetric analysis method based on conversion of salt 3-(4,5-dimethyl-2-thiazole)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazonium bromide (MTT) into blue formazam by the method of Mossman. The best results were observed for the ethyl acetate extracts, especially for cells HCT-8 (colon) that ranged from 58.35 to 77.12%. The ethyl acetate extract obtained from thick branches (EAGg) showed values of IC50 = 13.73 μg/mL for strain HL-60 (leukemia). This extract was fractionated and the fraction EAGg5 showed the percentage of cell growth inhibition of 85.37 and 101.37% for the lines SF-295 (glioblastoma) and MDAMB-435 (breast), respectively. The antimicrobial activity was conducted using the minimum inhibitory concentration (MIC) that was determined by microdilution in Mueller-Hinton broth for bacteria (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa) and in liquid Sabouraud for fungi (Candida albicans, C. tropicalis and C. parapsilosis). All extracts showed some degree of bacterial and fungicidal activity, especially the ethyl acetate extracts which showed moderate inhibition of microbial growth. The effect of extracts on growth of protozoa in vitro study was evaluated with promastigotes of Leishmania amazonensis and epimastigotes of Trypanosoma cruzi. EAGg extract showed antiproliferative activity against both L. amazonensis and T. cruzi, with IC50 values of 86 and 40 μg/mL, respectively. The significant antioxidant, antitumor and antimicrobial activities observed in the extracts of cupiuba detaches its high potential for obtaining of biotechnological products. / A espécie Goupia glabra Aublet (Goupiaceae), denominada popularmente como cupiúba, é utilizada na medicina popular contra diversas doenças. Suas cascas são utilizadas como analgésico dentário, como vermífugo, no tratamento de malária, catapora e eczema. As folhas são utilizadas contra sífilis, doenças oculares, enxaqueca, varíola e como cicatrizante. O presente trabalho teve como objetivo quantificar compostos fenólicos e avaliar as atividades antioxidante, inibidora de acetilcolinesterase, toxicidade em Artemia salina, antitumoral e antimicrobiana de extratos de folhas, galhos finos e galhos grossos de cupiúba. O material seco foi triturado e submetido à extração em aparelho de Soxhlet com solventes de polaridade crescente (Hexano, AcOEt e MeOH). A prospecção fitoquímica foi realizada para diferentes classes de metabólitos, sendo observados resultados positivos para esteróis em todos os extratos, triterpenóides e algumas classes de flavonóides nos extratos obtidos em acetato de etila e metanol. O fracionamento do extrato em hexano de folhas (EHF) resultou no isolamento de uma mistura de β-sitosterol e estigmasterol. Do extrato em AcOEt de folhas (EAF) foi isolado o catecol, um fenol simples de distribuição restrita na natureza. O conteúdo de fenólicos totais dos extratos foi determinado utilizando o reagente de Folin-Ciocalteau e o resultado foi expresso em equivalentes de ácido gálico (EAG). A atividade antioxidante foi avaliada através da capacidade seqüestrante do radical estável 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH ), utilizando quercetina como padrão externo, expressos como valores de Concentração eficiente (CE50). Foi observada uma correlação positiva entre os fenólicos totais e a CE50, ou seja, quanto maior a quantidade de fenólicos, menor a CE50. O extrato em AcOEt das folhas (EAF) foi o que apresentou maior potencial antioxidante [CE50=9,76 ± 0,42 μg/mL (cubeta) e CE50= 19,87 ± 0,31 μg/mL (microplaca)]. A toxicidade dos extratos foi verificada através de bioensaios com microcrustáceo A. salina e expressa em % de mortalidade das larvas. A análise qualitativa da atividade anticolinesterase foi realizada de acordo com o método de Ellman (modificado), com resultados negativos para inibição da enzima acetilcolinesterase. A atividade antitumoral foi avaliada contra quatro linhagens de células (leucemia, mama, cólon e glioblastoma) utilizando método de análise colorimétrica baseada na conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazonium (MTT) em azul de formazam segundo o método de Mossman. Os melhores resultados foram observados para os extratos obtidos em AcOEt, principalmente para células HCT-8 (cólon) que variaram de 58,35 a 77,12%. O extrato obtido em AcOEt dos galhos grossos (EAGg) apresentou valor de CI50 = 13,73 μg/mL para a linhagem HL-60 (leucemia). Esse extrato foi fracionado e a fração EAGg5 apresentou percentual de inibição de crescimento celular de 85,37 e 101,37% para as linhagens SF-295 (glioblastoma) e MDAMB-435 (mama), respectivamente. A avaliação da atividade antimicrobiana foi realizada pelo método da concentração inibitória mínima (MIC) que foi determinada pela técnica da microdiluição em caldo Müeller-Hinton para bactérias (Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa) e em meio líquido Sabouraud para fungos (Candida albicans, C. tropicalis e C. parapsilosis). Todos os extratos demonstraram algum grau de atividade bacteriana e fungicida, com destaque para os extratos obtidos em AcOEt que apresentaram inibição moderada de crescimento microbiano. Para avaliar o efeito dos extratos no crescimento dos protozoários foi realizado estudo in vitro com formas promastigotas de Leishmania amazonensis e epimastigotas de Trypanosoma cruzi. O extrato EAGg mostrou atividade antiproliferativa, tanto contra L. amazonensis quanto para T. cruzi, com valores de IC50 de 86 e 40 μg/mL, respectivamente. A significativa atividade antioxidante, antitumoral e antimicrobiana observada nos extratos de cupiúba destaca seu elevado potencial para a obtenção de produtos biotecnológicos.