Made available in DSpace on 2016-06-02T19:32:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4173.pdf: 1140916 bytes, checksum: 20dfe79f655af716f14bb7ff0f256252 (MD5) Previous issue date: 2012-02-13 / Universidade Federal de Minas Gerais / Planktonic bacteria play important role in the organic matter decomposition, nutrient cycling and as food for organisms of higher trophic levels such as flagellates and ciliates, thus representing fundamental components in planktonic food webs. This study analyzed the microbial community structure and evaluated the importance of heterotrophic nanoflagellates (HNF) and ciliates bacterivory in a subtropical environment predominantly mesotrophic (Lobo-Broa reservoir, Brazil) by the quantification of their ingestion rates during one year period. The in situ experiments using fluorescently labelled bacteria (FLB) were conducted on the surface of two sampling points that have different trophic degrees. In parallel, physical, chemical and biological water variables were also evaluated. The ciliates showed a higher specific ingestion rate of bacteria (3,3 x 103 bact ind-1 h-1) than HNF (79,7 bact ind-1 h-1) due to differences in size and food acquisition among the two protozoans. The ingestion rates for both ciliates and HNF were always higher in the point 2 (P2) probably due to the higher water temperatures, which accelerate the protozoans metabolism, and higher bacterial densities. Concerning total protozoan bacterivory, the HNF populations had the greatest grazing impact (60%) on the reservoir bacterial community, especially the HNF smaller than 5 μm. The data showed that HNF grazing, in addition to regulation the bacteria abundance, probably also induced changes in the bacterial community structure, such as increasing bacterial filaments numbers and size. The ciliates contributed significantly to the bacterivory, especially in P2, where high densities and ingestion rates were verified. The main ciliate consumers of bacteria were from Spirotrichea, Peritrichia, Haptoria and Scuticociliatia groups. The bottom-up control was more important in the dry season and the top-down control was more important in the rainy one. Thus, in an annual basis, the resource availability and protozoan predation are equally important to the bacterial abundance regulation in the Lobo reservoir. / Bactérias planctônicas desempenham importante papel na decomposição da matéria orgânica, na reciclagem de nutrientes e como alimento para organismos de níveis tróficos superiores tais como flagelados e ciliados, representando, assim, componentes fundamentais nas teias alimentares. Este estudo analisou a estrutura da comunidade microbiana e avaliou a importância da bacterivoria por nanoflagelados heterotróficos (NFH) e ciliados em um ambiente subtropical predominantemente mesotrófico (reservatório do Lobo-Broa, Brasil) pela quantificação de suas taxas de ingestão durante o período de um ano. Os experimentos in situ utilizando bactérias marcadas fluorescentemente (FLB) foram realizados na superfície de dois pontos de coleta que apresentam graus de trofia diferentes. Em paralelo foram avaliadas variáveis físicas, químicas e biológicas da água. Os ciliados apresentaram taxa de ingestão individual de bactérias maior (3,3 x 103 bact ind-1 h-1) do que a dos NFH (79,7 bact ind-1 h-1) devido às diferenças de tamanho e forma de obtenção de alimento entre os dois protozoários. As taxas de ingestão, tanto para os ciliados quanto para os NHF, foram sempre maiores no ponto 2 (P2) devido provavelmente as maiores temperaturas da água, que aceleram o metabolismo dos protozoários, e as maiores densidades de bactérias. Em relação à bacterivoria total por protozoários, as populações de NFH causaram maior impacto de predação (60%) sobre a comunidade bacteriana do reservatório, principalmente os NFH menores que 5μm. Os dados indicaram que a predação por NFH, além de regular a abundância de bactérias, provavelmente também induziu modificações na estrutura da comunidade bacteriana, como o aumento do tamanho e da quantidade de filamentos bacterianos. Os ciliados contribuíram significativamente para a bacterivoria, principalmente no P2, onde apresentaram altas densidades e taxas de ingestão. Os principais grupos de ciliados consumidores de bactérias foram os Spirotrichea, Haptoria, Peritrichia e Scuticociliatia. O controle bottom-up teve maior importância no período seco e o controle top-down maior importância no período chuvoso. Assim, em uma base anual, a disponibilidade de recursos e a predação são igualmente importantes na regulação da abundância bacteriana no reservatório do Lobo.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:32:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4841.pdf: 3194348 bytes, checksum: a8688ceb426964afd650a13ef65be763 (MD5) Previous issue date: 2012-11-19 / Universidade Federal de Sao Carlos / Cladocerans occupy an important position in freshwater food webs, acting like a bacteria consumer; being relatively non-selective filter feeders they can exert a strong impact on reducing microbial population. This study aimed to analyze the microbial community structure and evaluate the grazing potential in different life stages of three species of cladoceran socurring in tropical and subtropical climate (Ceriodaphnia silvestrii, Ceriodaphnia cornuta and Daphnia gessneri), using a microscopic study of their filter structures and quantifying the grazing rates, the latter experiments were performed in vitro and in situ using fluorescently labeled bacteria (FLB). The in situ experiments were performed in a predominantly mesotrophic subtropical environment (Lobo-Broa Reservoir, Brazil) on two sampling points with different trophic degrees.In parallel, physical, chemical and biological water variables were also evaluated. The bacterial densities and biomass were similar to those found in freshwater environments. For the morphotypes, there was a dominance of coccobacilli and cocci (78.5% of total). In thein vitro experiments, the lowest values found for individual ingestion rates (IIR) and removal (RR) were respectively 1,1 x 105 Bact.ind -1 h-1 and 0,1 mL.ind -1 h-1 in primiparous C. silvestrii, and the highest values were, respectively, 4,4 x 105 Bact.ind -1 h-1 e 0,4 mL.ind-1 h-1, observed in adult D. gessneri. Neonate sof all species showed relatively high ingestionand removal rates. During the in situ experiments, C.silvestrii, had the highest individual ingestion rates (IIR) 27, 7 x 104 bact ind-1 h-1. In populational terms, the studied daphnids distinguished themselves by consuming large amounts of bacteria in the rainy season. The daphnids grazing for this environment may have contributed to induce changes in the structure of bacterial communities, such as increasing the size and amount of bacterial filaments. Therefore, we noted that the bottom-up control had greater importance during the dry season and the top-down control larges timportance in the rainy season; the availability of resources and predationare also importantin the regulation of bacterial abundancein the Lobo reservoir. The studied species showed a sufficiently narrow mesh network to retain bacteria, the largest average distance between setulaewas found in primiparous C.cornuta (0.39μm), and the smallest in neonate D.gessneri (0.11μm). Although the three species have thinmeshes, the changes in its meshes occur differently for each species. / Dentre os diversos consumidores de bactérias nas teias alimentares de ambientes dulcícolas, os cladóceros ocupam uma posição relevante, sendo filtradores relativamente não seletivos, podendo exercer forte impacto na redução populacional microbiana. Este estudo teve como propósito analisar a estrutura da comunidade microbiana e avaliar o potencial bacterívoro em diferentes fases de vida de três espécies de cladóceros de ocorrência tropical e subtropical (Ceriodaphnia silvestrii; Ceriodaphnia cornuta e Daphnia gessneri) através do estudo microscópico de suas estruturas filtradoras e da quantificação de suas taxas de ingestão em experimentos de bacterivoría in vitro e in situ, utilizando-se bactérias marcadas fluorescentemente (FLB). Os experimentos in situ foram realizados em um ambiente subtropical predominantemente mesotrófico (reservatório do Lobo-Broa, Brasil) em 2 pontos de coleta que apresentam graus de trofia diferentes. Em paralelo foram avaliadas variáveis físicas, químicas e biológicas da água. Os valores de densidade e de biomassa bacteriana obtidos foram semelhantes aos encontrados em outros ambientes de água doce. Quanto aos morfotipos, houve a dominância de cocobacilos e de cocos (78,5% do total bacterioplanctônico). Nos experimentos in vitro, os valores obtidos para as taxas de ingestão individual (TII) variaram de 1,1 x 105 Bact.ind-1 h-1 a 4,4 x 105 Bact.ind-1 h-1 e para as taxas de remoção (TR) de 0,1 mL.ind-1 h-1 a 0,4 mL.ind-1 h-1. Neonatas de todas as espécies estudadas apresentaram taxas relativamente altas de ingestão e remoção. Nos experimentos in situ, C. silvestrii, apresentou a maior taxa de ingestão individual (TII) média. Em termos populacionais, os dafinídeos estudados se destacaram por consumirem grande quantidade de bactérias no período chuvoso. A bacterivoría por dafinídeos neste ambiente pode ter contribuído para a indução de modificações na estrutura da comunidade bacteriana, como o aumento do tamanho e da quantidade de filamentos bacterianos. Deste modo, nota-se que o controle bottom-up teve maior importância no período seco e o controle top-down maior importância no período chuvoso; a disponibilidade de recursos e a predação são igualmente importantes na regulação da abundância bacteriana no reservatório do Lobo. As espécies estudadas mostraram ter uma rede de malhas suficientemente estreitas para reter bactérias, a maior distância média entre cérdulas foi encontrada em primíparas de C. cornuta (0,39 μm), e a menor em neonatas de D. gessneri (0,11 μm). Embora as três espécies apresentem malhas finas, as mudanças em suas malhas ocorrem de forma diferente para cada espécie.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:32:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissFPPR.pdf: 2166377 bytes, checksum: e236f2b096f8ae23ef8e7556eed399e4 (MD5) Previous issue date: 2004-12-03 / The morphology and size of bacterial cells taken from three reservoirs in different trophic state (Barra Bonita eutrophic, Broa mesotrophic and Lagoa Dourada - oligotrophic), were analysed through images acquired by epifluorescence microscopy (with DAPI fluorescent stain). In these water-bodies, the relative frequencies were calculated for each bacterial morphotype (coccus, coccobacillus, bacillus, vibrio, filament and spirillum) and biovolume. The relative frequencies of biovolumes and morphotypes were converted into indexes of size diversity (SDI) and morphological diversity (MDI) using the Shannon Index for calculations, and population densities (D) were also estimated. These values were compared with the mean trophic state index (mTSI) calculated for each environment. Among the physical and chemical variables, total phosphorus discriminated most clearly between different trophic states during the studied period, while among biological variables, bacterial population density was the most significant indicator of the trophic state of the environments. The MDI proved to be significantly different between the eutrophic and oligotrophic environments, as well as between the mesotrophic and oligotrophic reservoirs, but not consistently so between the eutrophic and mesotrophic, possibly because of the similarity of the trophic state in the last two. The SDI was found to differentiate significantly between the eutrophic and oligotrophic environments, but not between either of these and the mesotrophic. In the oligotrophic environment there was an extremely significant negative linear correlation (r = - 0.9735, p = 0.001) between mTSI and MDI; this correlation was especially significant with chlorophyll concentration (Chla) but not significant with the other components of the mTSI. / A análise da morfologia e do tamanho de células bacterianas de três reservatórios em diferentes estados tróficos (Barra Bonita eutrófico, Broa mesotrófico e Lagoa Dourada oligotrófico) foi feita com imagens obtidas por microscopia de epifluorescência (coloração com DAPI). Em cada ambiente foram estimadas as freqüências relativas de cada morfotipo estudado (coco, cocobacilo, bacilo, víbrio, filamento e espirilo) assim como dos biovolumes dos organismos. As freqüências relativas dos biovolumes e dos morfotipos foram transformadas em índices de diversidade de tamanho (IDT) e de diversidade morfológica (IDM), respectivamente, calculados pelo índice de Shannon e foram estimadas as densidades populacionais (D). Estes valores foram comparados com os índices de estado trófico médios (IETm) calculados para os ambientes. Entre as variáveis físicas e químicas, o fósforo total representou o mais claro divisor de estado trófico dos ambientes, no período estudado, enquanto entre as variáveis biológicas a densidade populacional bacteriana foi o indicador mais significativo do estado de trofia dos ambientes. O IDM revelou-se um indicador significativo entre o ambiente eutrófico e o oligotrófico, e entre o mesotrófico e o oligotrófico, mas não tão consistente entre o eutrófico e o mesotrófico, possivelmente devido à proximidade do estado trófico entre eles. O IDT revelou-se um indicador significativo entre o ambiente eutrófico e oligotrófico mas não entre cada um desses e o mesotrófico. No ambiente oligotrófico constatou-se uma correlação linear negativa, extremamente significante (r = - 0,9735 e P = 0,001), entre IET e IDM; esta correlação mostrou-se significativa com a concentração de cloforila a e não significativa com os demais componentes do IETm.

Na Odontologia, existe uma grande preocupação com a formação de placa bacteriana ou biofilme devido ao seu potencial cariogênico. Essa atenção se estende à ortodontia, devido ao acúmulo de biofilme formado nos aparelhos ortodônticos, tanto nos aparelhos removíveis quanto nos aparelhos fixos. É muito comum a presença de lesões brancas após a remoção dos bráquetes, em torno de 50 a 75% dos pacientes, provocadas pela presença do biofilme. É necessário um controle químico e mecânico rigoroso, a fim de se evitar alterações irreversíveis nos dentes e periodonto. O controle mecânico se dá pela escovação adequada, pelo correto uso de fio dental e pela frequência desses hábitos, além, claro, de um acompanhamento profissional periódico. O controle químico pode ser viabilizado pelo uso de enxaguatórios bucais, nos quais residem alguns efeitos indesejáveis e contraindicações relacionadas ao uso e à idade dos pacientes. Este estudo tem como objetivo avaliar comparativamente dois enxaguatórios bucais, um de natureza comercial (Cepacol®), e outro não comercial, elaborado com extratos hidroalcoólicos das plantas Nasturtium officinale (agrião), Rosmarinus offinalis (alecrim), Tabebuia impetiginosa (ipê roxo), Achillea millefolium (mil folhas) e Plantago major (tanchagem), desenvolvido na Faculdade de Ciências Farmacêuticas/UNESP Araraquara. Foram selecionados 40 pacientes, jovens e adultos, entre 18 e 45 anos, usuários de aparelho ortodôntico corretivo (fixo), divididos em dois grupos, o grupo do Cepacol e o grupo do Enxaguatório base de plantas. Foram coletadas amostras nos períodos de 0, 7, 15 e 21 dias e analisadas observando-se as Unidades Formadoras de Colônia (UFC) de cada amostra. Houve uma queda significativa da quantidade de bactérias após o uso do Enxaguatório à base de plantas, revelando um produto de extrema utilidade no auxílio do controle do biofilme bacteriano nas superfícies dentárias. / In dentistry, there is a great concern with the formation of plaque or biofilm, due to its cariogenic potential. This attention extends to orthodontics due to the accumulation of biofilm on orthodontic appliances, removable appliances as much in the brackets. It is very common the presence of white spots after removal of the brackets, around 50 to 75% of patients, which are caused by biofilms. It takes a rigorous mechanical and chemical control in order to avoid irreversible changes in the teeth and periodontium. The mechanical control is by proper brushing, correct flossing and also the frequency of these habits, besides, of course, a periodical professional monitoring. Chemical control can be achieved by the use of mouthwashes, home to some undesirable effects and contraindications related to the use and age of patients. This study aimed to assess two mouthwashes, a commercial type (Cepacol ®) and other non-commercial, made with hydroalcoholic extracts of plants Nasturtium officinale (watercress), offinalis Rosmarinus (rosemary), Tabebuia impetiginosa ( purple ipe), Achillea millefolium (thousand leaves) and Plantago major (plantain), developed at the Faculty of Pharmaceutical Sciences / UNESP Araraquara. We selected 40 patients, young and adults between 18 and 45 years, users of orthodontic appliance (fixed), divided into two groups, the Cepacol group and the group of herbal mouthwash. Samples were collected during periods of 0, 7,15 and 21 days and analyzed by observing the Colony Forming Units (CFU) of each sample. There was a significant decrease in the amount of bacteria after using herbal mouthwash, revealing a product of the utmost use in aiding the control of bacterial biofilms on tooth surfaces.

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissGRRMS.pdf: 1511728 bytes, checksum: 7d61e2ac2b83bcccf28d5a1ace492dca (MD5) Previous issue date: 2007-02-27 / Financiadora de Estudos e Projetos / Cysteine proteases are enzymes found in many organisms and are characterized by the presence of cysteine residue in their active site. These proteases play an important role in the organism metabolism. In pathogenic organisms, for example, cysteine proteases may be involved in the pathogenicity process by unbalancing of the biological functions of the host (biochemical and physiological regulation). Since they are involved in several diseases, these enzymes have been considered of great interest for many researchers. The current work aims to express in E. coli a recombinant form of an ORF XAC2853 predicted to be a cysteine protease by annotation of the genome of Xanthomonas axonopodis pv citri. This bacterium is responsible for citrus canker, an infection affecting citrus species which can be evidenced by superficial lesions and early fall of leaves and fruits, thus resulting in significant losses to world agriculture. After expression, the protein was purified by nickel column affinity chromatography and inclusion body solubilization, inasmuch as this protein is almost fully insoluble. The purified protein was used to investigate the activity against such synthetic substrates as Z-FR-MCA and Z-RR-MCA, and no proteolytic activity was found. However, studies in vivo using clones of E. coli expressing the recombinant protein evidenced proteolytic activity against casein. In an attempt to demonstrate the involvement of this probable protease in the pathogenicity of Xac, the knockout of the cromossomal gene in Xac was performed. A mutant having the disrupted gene was obtained and characterized. The assays of the mutant growth, when compared with the wild strain, indicate that the cysteine protease may be involved in the pathogenicity of Xac, since the inactivation of its gene by the transposon insertion resulted in a less virulent strain. In this sense, this protein may be a promising target for the combat of citrus canker. / As cisteíno proteases são enzimas presentes nos diferentes organismos e são caracterizadas pela presença de um resíduo de cisteína em seu sítio ativo. Essas proteases apresentam relevante papel no metabolismo desses organismos. No caso de organismos patogênicos, por exemplo, podem estar envolvidas no processo de patogenicidade por gerar o desequilíbrio das funções biológicas do hospedeiro (regulação bioquímica e fisiológica). Por esta razão, essas enzimas tem sido alvo de grande interesse por parte dos pesquisadores, uma vez que se encontram envolvidas em diversas doenças. Neste trabalho visamos à expressão em E. coli da forma recombinante de uma ORF XAC2853 predita como uma cisteíno protease na anotação do genoma de Xanthomonas axonopodis pv citri. Esta bactéria é responsável pelo cancro cítrico, uma infecção que afeta citros, caracterizando-se pelo aparecimento de lesões superficiais e queda precoce de folhas e frutos, resultando em grandes perdas para a agricultura mundial. Uma vez expressa a proteína, a mesma foi purificada por afinidade em coluna de níquel assim como pela solubilização dos corpos de inclusão, pois esta proteína encontra-se quase que exclusivamente insolúvel. A proteína purificada foi utilizada nos estudos de atividade contra os substratos sintéticos Z-FR-MCA e Z-RR-MCA não sendo verificada atividade proteolítica. No entanto, estudos de atividade realizados in vivo, com clones de E. coli expressando a proteína recombinante, demonstraram atividade proteolítica contra a caseína. Na busca de demonstrar o envolvimento desta provável protease na patogenicidade de Xac, foi realizado o nocaute do gene cromossomal que a codifica na bactéria. Um mutante com o gene inativado pela inserção de um transposon foi obtido e caracterizado, e os ensaios de crescimento desse mutante, comparado com o crescimento da linhagem selvagem, permitem concluir que a cisteíno protease estudada pode estar envolvida na patogenicidade de Xac, uma vez que a inativação do seu gene pela inserção do transposon gerou uma linhagem menos virulenta. Desta forma, esta proteína pode ser um alvo promissor para o combate ao cancro cítrico.

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Arquivototal.pdf: 1368925 bytes, checksum: 229a007e6b4c42250855b2df7b5870dd (MD5) Previous issue date: 2011-09-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The term milk drink has broad sense and can encompass a range of products made from milk and whey, between these fermented dairy beverages with added fruit pulps. In these products the use of whey, a waste product of cheese production, contributes to improving the nutritional value and reduces environmental pollution problems. In this work, the goal was to develop fermented dairy beverages with different concentrations of whey (20%, 30% and 40%), and pineapple flavors graviola, comparing the products obtained with the trademark through sensory tests, for selection of the best formulations, one for each flavor. Then, it was verified that the selected products met the requirements physicochemical and microbiological established in legislation. The sensory tests applied were accepted by hedonic scale of nine points and intention to use, and also performed the calculation of the index of acceptability. In physicochemical analyzes, were determined pH, acidity, fat, protein, lactose, water, ash, calcium and phosphorus in the microbiological total and fecal coliforms and total count of lactic bacteria. In all tests, the samples were analyzed 24 hours after the processing, being maintained under refrigerated storage at 8 ± 2 ° C until the time of analysis. The microbiological evaluation was also repeated after 14 and 28 days of storage. The fermented dairy drink containing 30% whey flavor in pineapple flavor and 40% soursop, Featured in sensory tests, met the requirements physicochemical and microbiological established in legislation, with lactic acid bacteria remained viable in these products during the storing measured, yielding values exceeding 106 CFU / mL. The addition of up to 30% whey in fermented milk drink formulation with pineapple pulp afforded a product as well as sensorially acceptable trademark evaluated in the same flavor. In product made with soursop pulp, could add up to 40% of whey, having presented the same appearance and taste better than the commercial product with best performance among brands in sensory testing. Therefore, the addition of whey in fermented dairy beverage formulation is presented as an alternative to the better utilization of proteins and minerals, in addition to preventing problems like pollution of wastewater resulting from their disposal and can be applied by agribusiness. / O termo bebida láctea tem sentido amplo e pode englobar uma série de produtos fabricados com leite e soro de leite, entre estes as bebidas lácteas fermentadas adicionadas de polpas de frutas. Nestes produtos, o aproveitamento do soro de leite, resíduo da produção de queijos, contribui com a melhoria no valor nutricional e reduz problemas de poluição ambiental. Neste trabalho, o objetivo foi elaborar bebidas lácteas fermentadas com diferentes concentrações de soro de leite (20%, 30% e 40%), nos sabores abacaxi e graviola, comparando os produtos obtidos com os de marcas comerciais, por meio de testes sensoriais, para fins de seleção das melhores formulações, sendo uma para cada sabor. Em seguida, foi verificado se os produtos selecionados atendiam aos requisitos físico-químicos e microbiológicos estabelecidos na legislação. Os testes sensoriais aplicados foram aceitação por escala hedônica de nove pontos e intenção de consumo, sendo também realizado o cálculo do índice de aceitabilidade. Nas análises físico-químicas, foram determinados pH, acidez, gordura, proteínas, lactose, umidade, cinzas, cálcio e fósforo e nas microbiológicas coliformes totais e termotolerantes e contagem total de bactérias lácticas viáveis. Em todos os testes, as amostras foram analisadas 24 horas após o processamento, sendo mantidas sob estocagem refrigerada a 8± 2° C, até o momento das analises. A avaliação microbiológica também foi repetida após 14 e 28 dias de estocagem. As bebida lácteas fermentadas contendo 30% de soro de leite no sabor abacaxi e 40% no sabor graviola, selecionadas nos testes sensoriais, atenderam aos requisitos físico-químicos e microbiológicos estabelecidos na legislação, tendo as bactérias lácticas permanecido viáveis nestes produtos durante o período de estocagem avaliada, obtendo-se valores superiores a 106 UFC/mL. A adição de até 30% de soro de leite na formulação da bebida láctea fermentada com polpa de abacaxi permitiu obter um produto tão bem aceito sensorialmente quanto o de marca comercial avaliado, no mesmo sabor. No produto elaborado com polpa de graviola, foi possível acrescentar até 40% de soro de leite, tendo o mesmo apresentado melhor sabor e aparência que o produto comercial com melhor desempenho entre marcas no teste sensorial. Logo, a adição de soro de leite na formulação de bebidas lácteas fermentadas apresenta-se como uma alternativa para o melhor aproveitamento de suas proteínas e minerais, além de evitar problemas como poluição de águas residuais resultante de seu descarte, podendo ser aplicada pela agroindústria.

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 735178 bytes, checksum: 968afb8a739940705597ba86834ec161 (MD5) Previous issue date: 2014-03-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lactic acid bacteria can produce bacteriocins and have been explored for applications as natural preservatives in foods. Bacteriocins are peptides and proteins with antimicrobial activity and can inhibit the growth of pathogenic bacteria such as Listeria monocytogenes and other spoilage microorganisms. L. monocytogenes can be present in many types of food due to its ability to survive in a wide temperature range, and causes listeriosis by ingestion of contaminated food. This study aimed at the isolation and identification of lactic acid bacteria (LAB) with bacteriocinogenic potential, the characterization of the cell-free supernatants (CFS) regarding: the antimicrobial activity; the spectrum of action; thermal stability and at different pHs; resistance to chemicals and NaCl concentrations; the mode of action of the bacteriocins produced; the adsorption capacity to the target cells in different temperatures, pH and concentrations of chemicals and NaCl; perform the molecular identification of the LAB. Three strains (LS1, LS2 and LS3) bacteriocinogenic of raw goat's milk with anti-listeria activity were isolated. In particular Lactococcus lactis (LS2), which produced bacteriostatic, active bacteriocin at low pH and 4 ° C to 80 ° C, which can be an alternative for the control of Listeria in fermented dairy products. / Bactérias láticas podem produzir bacteriocinas e têm sido exploradas em aplicações como conservadores naturais nos alimentos. Bacteriocinas são peptídeos e proteínas com atividade antimicrobiana e podem inibir a multiplicação de bactérias patogênicas como Listeria monocytogenes e micro-organismos deterioradores. L. monocytogenes pode estar presente em diversos tipos de alimentos, devido à sua capacidade de sobreviver em ampla faixa de temperatura e causar a listeriose através da ingestão de alimentos contaminados. Este estudo objetivou o isolamento e identificação de bactérias láticas (BAL) com potencial anti-Listeria de leite de cabra cru, a caracterização dos sobrenadantes livres de células (SLC) quanto: à atividade antimicrobiana; ao espectro de ação; à estabilidade térmica e em diferentes valores de pH; à resistência a agentes químicos e a diferentes concentrações de NaCl; ao modo de ação; à capacidade de adsorção à listeria em diferentes condições de temperatura, pH e na presença de agentes químicos. Também visou realizar a identificação molecular dos isolados a fim de aplicar as BAL ou as bacteriocinas por elas produzidas como estratégia de bioconservação de alimentos. Foram isoladas três culturas (LS1, LS2 e LS3) bacteriocinogênicas de leite de cabra cru com atividade anti-listeria. Em particular Lactococcus lactis (LS2), que produziu bacteriocina bacteriostática, ativa em pH baixo e em temperatura de 4 °C a 80 °C, que pode ser uma alternativa para o controle de listeria em produtos lácteos fermentados.

Made available in DSpace on 2015-04-17T14:49:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 649364 bytes, checksum: bf1a9bf925244349fb276f68b5a427fb (MD5) Previous issue date: 2010-09-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The search for a healthy diet consisting of vegetables consumed "in natura" just exposing the population to the risk of infections by bacteria and intestinal parasites. This study aimed to assess the bacteriological and parasitological of lettuce (Lactuca sativa) commercialized in supermarkets and public markets in João Pessoa-PB, comparing the quality of which are sold in supermarkets with the public markets. In this study 40 heads of lettuce, including 20 from four supermarkets and 20 from four public markets were submitted to two washes with sterile water, and subjected to bacteriological and parasitological analysis. Analyses showed that all samples had total coliforms but did not have Salmonella that 30% had fecal coliform above 1x102 MPN/g, and that intestinal parasites were present in 85% of vegetables, including Strongyloides spp., Giardia spp., E. histolytica / E. dispar. In public markets were found higher levels of bacterial contamination than the supermarkets (p > 0,05), but these two establishments showed no significant difference in the contamination with intestinal parasites. Due high contamination observed becomes necessary to establish laws limiting the presence of these contaminants so that the lettuce does not serve as a vehicle disseminator of disease by bacteria and intestinal parasites. / A busca por uma alimentação saudável composta por verduras consumidas in natura acaba expondo a população ao risco de contrair infecções por bactérias e enteroparasitas. Este trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade bacteriológica e parasitológica de alface crespa tradicional (Lactuca sativa), comercializada em supermercados e mercados públicos de João Pessoa-PB, comparando a qualidade das que são comercializadas em supermercados com as de mercados públicos. Nesta pesquisa 40 pés de alface, dos quais 20 provenientes de 4 supermercados e 20 de 4 mercados públicos foram submetidos a duas lavagens com água estéril, e submetidos a análise bacteriológica e parasitológica. As análises mostraram que em todas as amostras havia coliformes totais sem, no entanto haver Salmonella, que 30% apresentaram coliformes termotolerantes acima de 2x102 NMP/g, e que os enteroparasitas estiveram presentes em 85% das hortaliças estudadas, entre os quais Strongyloides spp., Giardia spp., E. histolytica / E. díspar. Nos mercados públicos foram verificados níveis mais elevados de contaminação bacteriana do que nos supermercados (p > 0,05), porém estes dois estabelecimentos não demonstraram diferença significativa quanto à contaminação por enteroparasitas. Devido à elevada contaminação observada, torna-se necessário o estabelecimento de leis que limitem a presença de contaminantes para que desta forma a alface crespa não sirva como veículo disseminador de doença por bactérias e enteroparasitas.

Orientador: Ricardo Antonio Polanczyk / Banca: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: Roberto Marchi Goulart / Resumo: Spodoptera albula é uma praga polifaga e cosmopolita sendo que no Brasil não existem produtos registrados para o seu controle embora recentemente alguns agricultores tenham relatados surtos desta espécie em lavouras de soja no estado do Mato Grosso. Desta forma, é de extrema importância o desenvolvimento de táticas de controle eficientes para esta praga e que ao mesmo tempo sejam pouco agressivas ao meio ambiente e à sociedade. Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria entomopatogênica altamente eficiente no controle de lepidópteros praga e apresenta toxicidade para várias espécies do gênero Spodoptera. A atividade tóxica de isolados e bioinseticidas à base de Bt foi avaliada utilizando lagartas de segundo instar de S. albula em bioensaios de mortalidade e virulência, bem com os efeitos subletais do Bt nas lagartas sobreviventes aos tratamentos. Os bioinseticidas Agree, Xentari e Dipel SC foram selecionados para os bioensaios de virulência, sendo que o primeiro foi o mais virulento e, portanto o mais promissor para o manejo desta praga. Também foi observada diferença na toxicidade entre as formulações do Dipel. Entre os isolados nenhum se destacou no controle desta praga e o isolado Bt05 afetou o desenvolvimento das lagartas resultando em menor peso de pré-pupa e pupa em relação a testemunha / Abstract: Spodoptera albula is a polyphagous and cosmopolitan pest and in Brazil there are no products registered for their control although some farmers have recently been reported outbreaks of this specie in soybean in the Mato Grosso state. Thus, it is extremely important to developing effective tactics to control this pest that are less harmful to the environment and society. Bacillus thuringiensis (Bt) is a highly efficient entomopathogenic bacterium in lepidopterous pest control and it is toxic to several species of Spodoptera genus. The toxic activity of Bt isolates and Bt biopesticides was evaluated using S. albula second instar larvae in mortality and virulence bioassays, and evaluating the sublethal Bt effects on larvae surviving to treatment. The biopesticides Agree, Xentari and Dipel SC were selected for bioassay virulence. Agree was the most virulent and therefore the most promising for the S. albula management. It was also observed differences in toxicity between Dipel formulations. All Bt isolates tested were not good for the control of this pest and the isolate BT05 affected the development of larvae resulting in lower weight of pre-pupa and pupa compared to control / Mestre

Orientador: Kátia Cristina Kupper / Banca: Fabio Augusto / Banca: Alessandra Sussulini / Banca: Antonio de Góes / Banca: Jackson Antonio Marcondes de Souza / Resumo: O setor citrícola é o maior produtor de frutos no mundo, porém, encontra-se ameaçado por diversos patógenos, dentre esses, o fungo Phyllosticta citricarpa, agente causal da mancha preta dos citros. Como alternativa à utilização de fungicidas sintéticos para o controle do patógeno, o controle biológico, utilizando bactérias do gênero Bacillus, apresenta destaque. Tais microrganismos possibilitam o biocontrole pela produção de compostos orgânicos voláteis ou não voláteis. Sendo assim, este trabalho teve por objetivos: identificar os isolados de Bacillus spp. por meio de técnicas moleculares; avaliar a produção de compostos orgânicos voláteis produzidos por Bacillus spp. em diferentes meios de cultura; verificar os seus efeitos na evolução dos sintomas da doença em frutos de laranja, na morfologia de P. citricarpa em lesões de mancha preta e na indução de resistência, identificar os compostos voláteis por cromatografia gasosa unidimensional e finalmente, avaliar o efeito de diferentes meios de cultura no antagonismo e metabolismo secundário dos isolados de Bacillus. Os isolados bacterianos foram identificados como pertencentes às espécies de Bacillus subtilis, B. amyloliquefaciens e B. methylotrophicus. Os resultados mostraram que houve maior controle do patógeno, em decorrência da produção de voláteis, quando se utilizou os meios triptona de soja ágar (TSA) e caldo de triptona (TSB) para cultivo da bactéria, apresentando valores de inibição da colônia do fungo de até 73%. Com r... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The citrus sector is the largest producer of fruits in the world, but it is threatened by several pathogens, among them Phyllosticta citricarpa fungus, causal agent of the citrus black spot. As an alternative to the use of synthetic fungicides to control the pathogen, the biological control, using bacteria of the genus Bacillus, is highlighted. Such microorganisms enable biocontrol by the production of volatile or non-volatile organic compounds. Therefore, this work had as objectives: to identify the isolates of Bacillus spp. by means of molecular techniques; to evaluate the production of volatile organic compounds produced by Bacillus spp. in different culture media; to verify its effects on the evolution of orange disease symptoms, P. citricarpa morphology in black spot lesions and induction of resistance, to identify the volatile compounds by one-dimensional gas chromatography and, finally, to evaluate the effect of different culture in the antagonism and secondary metabolism of Bacillus isolates. The bacterial isolates were identified as belonging to the species of Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens and Bacillus methylotrophicus. The results showed that there was greater control of the pathogen, due to the volatile production, when tryptone broth (TSA) and tryptone broth (TSB) were used to culture the bacteria, presenting inhibition values of the fungus colony up to 73%. With regard to the effect of volatile compounds on the evolution of disease symptoms, the best results in terms of inhibition (86%) of freckles that progressed to hard spots were obtained with ACB-65 and ACB-73, when cultured in TSB culture medium. Such antagonists have caused deformations in the hyphae of the pathogen, which may explain the non-evolution of the disease symptoms, as previously reported. The volatiles of Ba... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor