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Caracterização e avaliação in-vitro de biovidro experimental em microparticulas para o tratamento da hipersensibilidade dentinária cervical / Characterization and In-vitro evaluation of an experimental Microparticulate Bioglass for treatment of cervical dentinal

Acevedo, Luisa Fernanda Alegria 22 February 2016 (has links)
Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-05-23T17:29:40Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luisa Alegria Acevdo.pdf: 94001775 bytes, checksum: 540980ac516efddf6a2f2d366044e20b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T17:29:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Luisa Alegria Acevdo.pdf: 94001775 bytes, checksum: 540980ac516efddf6a2f2d366044e20b (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O biovidro tem-se mostrado com um material que por sua bioatividade com organismo pode ser utilizado em diferentes condições clinicas, como é a hipersensibilidade dentinária cervical (HDSC). Os objetivos deste trabalho foram caracterizar as propriedades físicas, químicas, biológicas e redução da permeabilidade dentinária in vitro, de biovidros experimentais em micropartículas. Os biovidro com formulação 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6%P2O5 (Bv1) e suas diferentes composições, 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6%P2O5- K2CO3 (Bv2); 2Na2O.1CaO.3SiO2-6%P2O5-SrO (Bv3), sintetizados pelo método de fusão. Os biovidro comerciais 45S5® (Bv4) e o Biosilicato®(Bv5) foram usados como controle. Todos os biovidros foram caraterizados em microscopia eletrônica de varredura por efeito de campo, espectrofotometria no infravermelho com transformação de Fourier, difração de raio X e espectroscopia de micro-Raman para confirmar sua composição química, a cristalinidade e formato das micropartículas. Nos testes biológicos em cultura de células com fibroblastos 3T3; os biovidros foram colocados em contato com o meio de cultura em 3 concentrações (100, 10 e 1 mg/mL) e foi usado o sobrenadante como meio de cultura nas placas de 96 poços, avaliou se a proliferação celular em presença dos matérias. O efeito antimicrobiano foi avaliado com as amostras dos patógenos Staphylococcus aureus ATCC® 25923, Escherichia coli ATCC® 25922, Pseudomona aeruginosa ATCC 27853. Foi realizado o teste de microdiluição e avaliou-se a concentração inibitória mínima (CIB) e concentração bactericida mínima (CBM). Na redução da permeabilidade dentinária foi usado dentina bovina. Foi avaliada a permeabilidade mínima, permeabilidade máxima (após aplicação EDTA 24%) e permeabilidade final (após aplicação do materiais). As amostras foram armazenadas em estufa (37ºC) em placas de 24 poços com saliva artificial, sendo submetidas ou não à escovação simulada. Os testes mostraram que todos os materiais presentavam características compatíveis com o biovidro. Na cultura celular houve uma aumento na proliferação, com uma diferencia significativa (P<0,0001) entre os grupos Bv1–10 e 1 mg/mL, Bv4 – 10 mg/mL e Bv5 – 1 mg/mL. Os biovidro Bv3 apresentou efeito antimicrobiano, no entanto não foi estatisticamente significativo comparado ao controle positivo (clorexidina 0,12%). Todos os materiais conseguiram reduzir a porcentagem de permeabilidade dentinária (diferença significativa) considerando os fatores grupo (biovidros) e tratamento (com e sem escovação simulada). Conclui-se que os biovidros não foram citotóxicos em baixas concentrações, não apresentaram grande potencial antimicrobiano. Os biovidros apresentaram redução da permeabilidade dentinária. / Bioglass has been shown as a bioactive material, in contact with human body. It can be used in several clinical dental conditions, such as cervical dentine hypersensitivity (CDHS). The objectives of this present study were to characterize the physical, chemical, biological behavior and dentin permeability reduction. The bioglass powder formulation: 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6% P2O5 (BV1) and their different compositions, 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6% P2O5- K2CO3 (BV2); 2Na2O.1CaO.3SiO2- 6% P2O5-SrO (Bv3) were synthesized by the melt method. Commercial bioglass 45S5® (BV4) and Biosilicate® (BV5) were used as controls positive. All bioactive glasses were characterized by scanning electron microscopy by field effect, infrared spectroscopy with Fourier transform, X-ray diffraction and spectroscopy micro-Raman to confirm the crystallinity and microstructure and chemical composition. Biocompatibility test: cell culture (3T3 fibroblasts); the bioactive glasses were placed in culture medium in three concentrations (100, 10 and 1 mg/mL) and the supernatant was used to evaluate cell proliferation. The antimicrobial effect was evaluated with Staphylococcus aureus (ATCC® 25923), Escherichia coli (ATCC® 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) were tested by microdilution, minimum inhibitory concentration (CIB) and minimum bactericidal concentration (MBC). The dentin permeability reduction was evaluated on bovine dentine in 3 stages: minimum permeability, maximum permeability (after EDTA 24%) and permeability final (after biomaterial). The samples were stored in 24-well plates (37.5oC) in artificial saliva with and no simulated brushing. The results showed all biomaterials had similar bioglass characteristics. In cell culture there was an increase in proliferation (significant difference between the Bv1-10 groups and 1 mg / ml, BV4 - 10 mg / ml and BV5 - 1 mg / ml. The bioglass Bv3 presented antimicrobial effect not statistically significant compare to the positive control (0.12% chlorhexidine). All biomaterials were promoted dentin permeability reduction, however there was a significant difference considering the group factors (bioactive glasses) and treatment (with and without brushing simulated). Considering the results it can be conclude that bioactive glasses were not cytotoxic; not show a broad spectrum antimicrobial however should be carried out other methodologies, all experimental bioglasses show dentin permeability reduction. !
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Biocompatibilidade de poli(ácido lático) (PLA) e blenda PLA/poli(e-caprolactona) (PCL) implantados em equinos /

Carvalho, Júlia Ribeiro Garcia January 2019 (has links)
Orientador: Guilherme de Camargo Ferraz / Resumo: Os biomateriais são projetados para interagir com sistemas biológicos, podendo ser sintéticos como o metal, ou naturais como biopolímeros. O desenvolvimento de novas tecnologias a partir de fontes renováveis é amplamente empregado nas diferentes áreas do conhecimento devido à grande preocupação com a preservação do meio ambiente. Na Medicina Veterinária, observa-se interesse para o desenvolvimento de formulações medicamentosas de longa duração, sendo os biopolímeros alternativas viáveis para desempenhar o papel de carreador, além da sua utilização como arcabouços para regeneração óssea, fios de sutura, parafusos, pinos e placas para cirurgias ortopédicas. Objetivou-se avaliar a biocompatibilidade do poli(ácido lático) (PLA) e da nova blenda PLA/poli(ε-caprolactona) (PCL) implantados pela via subcutânea em equinos. Utilizaram-se 6 equinos, 3 machos e 3 fêmeas, sem raça definida, com idade entre 10 e 18 anos e peso médio de 405 kg ± 37. O experimento foi composto por quatro grupos experimentais: grupo controle (C), grupo implante negativo (IN), grupo PLA e grupo PLA/PCL, sendo que os dois últimos foram submetidos à implantação de PLA puro ou da blenda PLA/PCL, respectivamente. Os equinos foram submetidos a procedimento cirúrgico para a implantação dos biomateriais no tecido subcutâneo, na face lateral do pescoço. Os polímeros permaneceram implantados durante 6 meses, sendo realizadas avaliações nos momentos antes, 6, 12, 24, 48, 72, 96, 120, 144, 168 h, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 16 ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Biomaterials are designed to interact with biological systems, which may be synthetic as metal, or natural as biopolymers. The development of new technologies from renewable sources is widely used in the different areas of knowledge due to the great concern with the preservation of the environment. In veterinary medicine, there is interest in the development of long-lasting drug formulations, with biopolymers being feasible alternatives to play the role of carrier, as well as their use as scaffolds for bone regeneration, sutures, screws, pins and plates for orthopedic surgeries. The objective of this study was to evaluate the biocompatibility of poly(lactic acid) (PLA) and PLA/poly(ε-caprolactone) (PCL) new blends implanted subcutaneously in horses. Six equine, 3 male and 3 female, cross-breed, aged between 10 and 18 years and mean weight of 405 kg ± 37 were used. The experiment was composed of four experimental groups: control group (C), negative implant group (IN), PLA group and PLA/PCL group, being that the last two were submitted to the implantation of pure PLA and the PLA/PCL blends, respectively. The horses were submitted to a surgical procedure for implantation of the biopolymers in the subcutaneous tissue, on the lateral side of the neck. The polymers remained implanted for 6 months, and evaluations were performed before, 6, 12, 24, 48, 72, 96, 120, 144, 168 h, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 16 and 24 weeks after implantation. The physical examination consisted of evaluation of... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Avaliação do peptídeo LL-37 em contato com células-tronco da polpa dentária / Evaluation of LL-37 Peptide in contact with stem cells from dental pulp

Milhan, Noala Vicensoto Moreira [UNESP] 16 January 2017 (has links)
Submitted by NOALA VICENSOTO MOREIRA MILHAN null (noalinha@gmail.com) on 2017-03-14T15:32:19Z No. of bitstreams: 1 TESE_FINAL_biblioteca_pdf_com ficha..pdf: 9569489 bytes, checksum: 1675ea8facc1f735605660b0b01b8cad (MD5) / Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2017-03-20T22:29:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 milhan_nvm_dr_sjc.pdf: 9569489 bytes, checksum: 1675ea8facc1f735605660b0b01b8cad (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-20T22:29:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 milhan_nvm_dr_sjc.pdf: 9569489 bytes, checksum: 1675ea8facc1f735605660b0b01b8cad (MD5) Previous issue date: 2017-01-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O peptídeo LL-37 (catelicidina derivada de humano), é liberado por algumas células humanas e capaz de neutralizar os tecidos com lipopolissacarídeo (LPS), além de atrair células da polpa, e induzir a angiogênese, características que o tornam um possível adjunto para a regeneração do complexo dentino-pulpar. O objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a biocompatibilidade do peptídeo LL-37 nas concentrações de 5 e 10 μg/mL, e sua possível atuação na diferenciação de células-tronco da polpa dentária (DPSC) para odontoblastos- like. Com esse propósito, foram avaliados: (a) a citotoxicidade, pelo teste MTT; (b) a genotoxicidade, através do ensaio do micronúcleo; (c) a produção e quantificação de óxido nítrico; (d) as fases do ciclo celular, por citometria; (e) a expressão de alguns genes associados à formação de tecido mineralizado, através do teste qRT-PCR; (f) o conteúdo de proteína total; (g) a atividade de fosfatase alcalina (ALP); e (h) a produção de sialofosfoproteína dentinária (DSPP), pelo ensaio imunoenzimático ELISA. Foi observado que as concentrações de 5 e 10 μg/mL de LL-37 não foram citotóxicas e ainda aumentaram, em geral, a viabilidade celular (p<0,05), sendo que os maiores valores de absorbância foram observados no 3° dia de contato. As concentrações testadas também não induziram genotoxicidade, após 7 dias de contato, tendo sido genotóxico apenas o grupo controle positivo (EMS) (p<0,05). Ainda, não foi observado diferença estatisticamente significativa na produção de nitrito, pelas células expostas ao LL-37 após 7 dias, em ambas as concentrações. A análise do ciclo celular, evidenciou maior porcentual de células na fase G0/G1, em todos os grupos (p<0,05). Quando estes foram comparados, foi observado maior quantidade de células na fase G0/G1 na concentração de 10 μg/mL de LL- 37 comparada ao grupo controle (p<0,05). Por outro lado, o grupo controle exibiu mais células na fase G2 e em mitose (M) que os grupos tratados com 5 e 10 μg/mL de LL-37 (p<0,05), e mais células na interfase (S) que o grupo tratado com 10 μg/mL de LL-37 (p<0,05). A análise da expressão gênica demonstrou que não houve aumento de expressão dos genes fosfatase alcalina, osteocalcina, osteopontina e Runx2 após tratamento com ambas as concentrações do peptídeo, no 3° dia. Além disso, não foi observado diferença estatisticamente significativa na ALP nos grupos tratados e controle, após 3 e 14 dias, enquanto o conteúdo de proteína total foi maior aos 14 dias nos grupos tratados com LL-37 (p<0,05). Ainda, aos 3 dias, a produção da proteína DSPP foi maior no grupo tratado com 10 μg/mL de LL-37 (p<0,05). Com base nesses resultados, pode-se concluir que o LL-37 é biocompatível nas concentrações testadas nesse trabalho, e ainda aumenta o número de células viáveis, principalmente em período inicial. Além disso, aos 3 dias, na concentração de 10 μg/mL, ele retarda o ciclo celular e aumenta a expressão da proteína DSPP, além de aumentar a síntese proteica aos 14 dias, o que indica que esse peptídeo pode desempenhar algum tipo de função na diferenciação odontoblástica. / The LL-37 peptide (human derived cathelicidin) is released by some human cells and able of neutralizing the tissues that present lipopolysaccharide (LPS), as well as, attracts pulp cells and induces angiogenesis; characteristics that makes it a possible adjunct for regeneration of the dentin-pulp complex. The aim of this study was evaluate in vitro the biocompatibility of LL-37 in the concentrations of 5 and 10 μg/mL, and its possible performance in the differentiation of dental pulp stem cells (DPSC) into odontoblasts-like cells. For this purpose, it was evaluated: (a) the cytotoxicity by MTT assay; (b) the genotoxicity by the micronucleus test; (c) the production and quantification of nitric oxide; (d) the cell cycle, by flow cytometry; (e) the expression of genes associated with the mineralization by qRT-PCR; (f) the total protein content; (g) the alkaline phosphatase activity (ALP); and (h) the production of dentine sialofosfoprotein (DSPP) by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). It was observed that the concentrations of 5 and 10 μg/ml of LL-37 were not cytotoxic, in addition to they increased, in general, the cell viability (p<0,05). Moreover, higher absorbance values were observed on 3rd day of contact. After 7 days, the tested concentrations also did not induce genotoxicity, (p<0,05); only the positive control group (EMS) was genotoxic (p<0.05). Furthermore, there was not statistical significance in the nitrite production by the cells exposed to LL-37 for 7 days, in both concentrations. The cell cycle test showed higher percentage of cells in the phase G0/G1 in all groups (p<0.05). When they were compared, it was noticied that concentration of 10 ug/ml of LL-37 arrested the cells in G0/G1 compared to the control group (p<0.05). On the other hand, the control group, exhibited higher amount of cells in G2 and mitosis (M) than the others (p<0.05) and also higher number of cells in interfase (S) than the group treated with 10 μg/mL of LL-37 (p<0.05). On the 3rd day, the analysis of gene expression demonstrated no increase in the expression of the genes alkaline phosphatase, osteocalcin, osteopontin and Runx2, after treatment with both peptide concentrations. Furthermore, it was not observed statistical significance in the ALP in the treated and control groups after 3 and 14 days, while total protein content was higher in the groups treated with LL-37, at 14 days (p<0.05). On the 3rd day, the production of DSPP protein was higher in the group treated with 10 μg/mL of LL-37 (p<0.05). Based on these results, it can be concluded that LL-37 is biocompatible at these concentrations and increases the number of viable cells, especially in the initial period. Moreover, on the 3rd day, the concentration of 10 μg/mL arrests the cell cycle, and increases the expression of DSPP protein, in addition to raising the protein content at 14 days, which indicates that this peptide may present some kind of function in the odontoblastic differentiation.
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Influência de Equisetum giganteum e Punica granatum sobre os fibroblastos gengivais humanos: manutenção da viabilidade / Influence of Equisetum giganteum and Punica granatum on fibroblasts: maintenance of viability

Eliane Ferraz da Costa 24 February 2017 (has links)
Estudos relataram a atividade antimicrobina de Equisetum giganteum e Punica granatum, reduzindo o risco do desenvolvimento da estomatite protética, doença relacionada principalmente à colonização das próteses pelo fungo Candida albicans. Diante disso, é necessário que essas plantas sejam bem toleradas pelos tecidos bucais e, se possível, auxiliem no processo de reparo. Objetivo: Realizar um estudo fitoquímico de substâncias potencialmente ativas de Equisetum giganteum e Punica granatum e avaliar a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos frente a diferentes concentrações destas plantas, após diferentes períodos in vitro. Material e Métodos: Após a identificação dos compostos das plantas por HPLC-PAD, foram selecionadas as frações com melhor atividade antifúngica perante Candida albicans. Os extratos brutos e frações selecionadas de P. granatum e E. giganteum foram testados em diferentes concentrações (0.23, 0.47, 0.94, 1.88, 3.75, 7.5, 15 e 30 mg) e períodos (12, 24, 36 e 60 h) sobre fibroblastos gengivais humanos (FGH), para a avaliação de suas citotoxicidades através da análise da viabilidade dos FGH, pelo ensaio LIVE/DEAD. Por meio desse ensaio, analisamos quantitativamente a viabilidade celular através das leituras das unidades relativas de fluorescência (URF) e qualitativamente por meio da analise da morfologia e da densidade observadas pela microscopia invertida de fluorescência, após três experimentos independentes para cada período de avaliação. Os resultados quantitativos paramétricos foram representados como média e desvio padrão (SD) com análise de Variância ANOVAOne- Way, seguida da análise comparativa pelo teste de Tukey HSD. Os resultados quantitativos não paramétricos foram apresentados como mediana e quartis e foram submetidos ao teste de Kruskal-Wallis, seguido de análise comparativa pelo teste de Dunn, de acordo com as análises de normalidade (Teste de Kolmogorov-Smirnov). Valores de p< 0.05 foram indicativos de significância estatística. Conclusões: Foram identificados compostos fenólicos, como flavonoides e taninos em E.giganteum e P. granantum, respectivamente. Identificamos uma citotoxicidade concentração-dependente para as duas plantas testadas, independente do tempo. Sob as menores concentrações das plantas a viabilidade e a morfologia dos FGH foram preservadas. Dentro deste contexto, acreditamos na possibilidade de se utilizar essas plantas como terapia alternativa em diversas áreas de saúde, porém em concentrações biocompatíveis. / Studies have reported the antimicrobial activity of Equisetum giganteum and Punica granatum, reducing the risk of development of denture stomatitis, a disease mainly related to the colonization of prostheses by the fungus Candida albicans. In view of this, it is necessary that these plants be well tolerated by the oral tissues and, if possible, assist in the repair process. Objective: To carry out a phytochemical study of potentially active substances of E. giganteum and P. granatum and to evaluate the viability of human gingival fibroblasts against different concentrations of these two plants, after different periods in vitro. Material and Methods: After the identification of the plant compounds by HPLC-PAD, the fractions with the best antifungal activity against Candida albicans were selected. The crude extracts and selected fractions of P. granatum and E. giganteum were tested at different concentrations (0.23, 0.47, 0.94, 1.88, 3.75, 7.5, 15 and 30 mg) and periods (12, 24, 36 and 60 h) against human gingival fibroblasts (FGH), for the evaluation of their possible cytotoxicity through the analysis of the viability of FGH by the LIVE/DEAD assay. By means of this assay we quantitatively analyzed the cell viability through the readings of the relative units of fluorescence (URF) and qualitatively by analysis of the cellular morphology and density using inverted fluorescence microscopy, after three independent experiments. The parametric quantitative results were represented as mean and standard deviation (SD) with ANOVA-One-Way Variance analysis, followed by comparative analysis by the Tukey HSD test. The non-parametric quantitative results were presented as medians and quartiles and were submitted to the Kruskal-Wallis test, followed by comparative analysis by the Dunn test, according to normality tests (Kolmogorov-Smirnov test). Values of p <0.05 were indicative of statistical significance. Conclusions: Phenolic compounds, such as flavonoids and tannins, were identified in E. giganteum and P. granantum, respectively. We identified a concentration-dependent cytotoxicity for the two plants tested, regardless of the time. Under the lowest concentrations of plants the viability and morphology of FGH were preserved when compared to the control. Within this context, we believe in the possibility to use these plants as alternative therapy in several health areas, but in biocompatible concentrations.
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Materiais obturadores de canais radiculares de dentes decíduos: avaliação da atividade antibacteriana in vitro e da compatibilidade tecidual in vivo / Root canal filling materials for primary yeeth: evaluation of the in vitro antibacterial activity and in vivo tissue compatibility

Alexandra Mussolino de Queiroz 29 August 2008 (has links)
Avaliou-se a atividade antibacteriana e a compatibilidade tecidual dos seguintes materiais obturadores de canais radiculares de dentes decíduos: cimento de óxido de zinco e eugenol, pasta Calen® espessada com óxido de zinco, cimento Sealapex® e cimento EndoREZTM. A atividade antibacteriana foi avaliada in vitro, por meio do teste de difusão em ágar, frente a 5 microrganismos indicadores (Kocuria rizophila, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Escherichia coli e Staphylococcus aureus), sendo os resultados submetidos à análise de variância (ANOVA) e ao pósteste de Tukey. A compatibilidade tecidual foi avaliada in vivo, por implantação subcutânea, em camundongos isogênicos BALB/c, de tubos de polietileno contendo os materiais obturadores. Foram efetuadas análises descritiva e semi-quantitativa do fibrosamento e do infiltrado inflamatório e quantitativa da área e maior espessura do tecido reacional granulomatoso. Os resultados foram submetidos à análise estatística por meio dos testes de Kruskal-Wallis, análise de variância (ANOVA) e pós-teste de Tukey. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à atividade antibacteriana, evidenciaram-se diferenças estatisticamente significantes (p<0,0001) entre os halos de inibição ocasionados pelos diferentes materiais, para todos os microrganismos avaliados. A Kocuria rizophila foi inibida mais eficazmente pelo cimento de óxido de zinco e eugenol (p<0,05), enquanto que o Enterococcus faecalis foi inibido mais eficazmente pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco (p<0,05). O Streptococcus mutans foi inibido pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco, cimento Sealapex® e cimento de óxido de zinco e eugenol na mesma intensidade (p>0,05). A Escherichia coli foi inibida mais eficazmente pelo cimento de óxido de zinco e eugenol, seguido pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco e pelo cimento Sealapex® (p<0,05). O Staphylococcus aureus foi inibido pela pasta Calen® espessada com óxido de zinco e pelo cimento de óxido de zinco e eugenol na mesma intensidade (p>0,05), e menos intensamente pelo cimento Sealapex® (p<0,05). O cimento EndoREZTM apresentou atividade antibacteriana apenas frente a Kocuria rizophila e ao Staphylococcus aureus. Com relação à compatibilidade tecidual, não observou-se diferença entre os materiais, com relação ao fibrosamento e à maior espessura do tecido reacional granulomatoso (p>0,05). A pasta Calen® espessada com óxido de zinco foi o material que apresentou infiltrado inflamatório de menor intensidade (p<0,05). A área do tecido reacional granulomatoso foi menor para a pasta Calen® espessada com óxido de zinco e para o cimento Sealapex® (p>0,05) em comparação aos cimentos EndoREZTM e óxido de zinco e eugenol (p<0,05). Com base nos resultados obtidos nas metodologias empregadas pôde-se concluir que: 1- A atividade antibacteriana, in vitro, em ordem decrescente foi: cimento de óxido de zinco e eugenol, pasta Calen® espessada com óxido de zinco, cimento Sealapex® e cimento EndoREZTM; 2- A pasta Calen® espessada com óxido de zinco foi o material que apresentou a melhor compatibilidade tecidual, seguido pelos cimentos Sealapex® e de óxido de zinco e eugenol. O cimento EndoREZTM apresentou resposta tecidual insatisfatória. / This study evaluated the antibacterial activity and tissue compatibility of the following root canal filling materials for primary teeth: zinc oxide and eugenol cement, Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer and EndoREZTM sealer. The antibacterial activity of these materials against 5 indicator microorganisms (Kocuria rizophila, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans, Escherichia coli and Staphylococcus aureus) was evaluated in vitro using the agar diffusion test. The results were analyzed statistically by the analysis of variance (ANOVA) and Tukeys post-hoc test. Tissue compatibility was evaluated in vivo by the implantation of polyethylene tubes containing the root canal filling materials in the subcutaneous tissue of isogenic BALB/c mice. Descriptive and semi-quantitative analyses of the rate of fibrosis and the inflammatory infiltrate were performed, as well as a quantitative analysis of the area and the greater thickness of the granulomatous reactionary tissue. The results were analyzed statistically by the Kruskal-Wallis test, ANOVA and Tukeys post-hoc test. For all tests, the significance level was set at 5%. Regarding the antibacterial activity, there were statistically significant differences (p<0.0001) among the zones of inhibition of microbial growth produced by the different materials for all target microorganisms. Kocuria rizophila was inhibited more effectively by the zinc oxide and eugenol cement (p<0.05), while Enterococcus faecalis was inhibited more effectively by the Calen® paste thickened with zinc oxide (p<0.05). Streptococcus mutans was inhibited by the Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer and zinc oxide and eugenol cement in the same intensity (p>0.05). Escherichia coli was inhibited more effectively by the zinc oxide and eugenol cement, followed by the Calen® paste thickened with zinc oxide and Sealapex® sealer (p<0.05). Staphylococcus aureus was inhibited by the Calen® paste thickened with zinc oxide and by the zinc oxide and eugenol cement in the same intensity (p>0.05), and was less effectively inhibited by Sealapex® sealer (p<0.05). EndoREZTM sealer presented antibacterial activity only against Kocuria rizophila and Staphylococcus aureus. Regarding tissue compatibility, there was no statistically significant difference among the materials with respect to the rate of fibrosis or the greater thickness of the granulomatous reactionary tissue (p>0.05). The Calen® paste thickened with zinc oxide produced the inflammatory infiltrate with lowest intensity of all materials (p<0.05). The area of the granulomatous reactionary tissue was smaller for the Calen® paste thickened with zinc oxide and Sealapex® sealer (p>0.05) compared to EndoREZTM sealer and the zinc oxide and eugenol cement (p<0.05). Based on the results obtained with the methodologies employed in the present study, it may be concluded that: 1- The in vitro antibacterial activity in a decreasing order was: zinc oxide and eugenol cement, Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer and EndoREZTM sealer; 2- The in vivo tissue compatibility in a decreasing order was: Calen® paste thickened with zinc oxide, Sealapex® sealer, zinc oxide and eugenol cement and EndoREZTM sealer. The Calen® paste thickened with zinc oxide permitted the occurrence of an adequate tissue response, while Sealapex® sealer and the zinc oxide and eugenol cement produced a fair tissue response. EndoREZTM sealer did not induce tissue repair.
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Tratamento t?rmico do tit?nio e suas consequ?ncias sobre as propriedades f?sico-qu?micas e de biocompatibilidade

Macedo, Haroldo Reis Alves de 03 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:07:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HaroldoRAM_TESE.pdf: 4102900 bytes, checksum: e74f8a9122bb5cd84cbeadae3a476ce1 (MD5) Previous issue date: 2012-02-03 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The titanium and titanium alloys are widely used as biomaterial in biomedical device and so research have been developed aiming to improve and/or better to understand interaction biomaterial/biological environment. The process for manufacturing of this titanium implants usually involves a series of thermal and mechanical processes which have consequence on the final product. The heat treatments are usually used to obtain different properties for each application. In order to understand the influence of these treatments on the biological response of the surface, it was done, in this work, different heat treatments in titanium and analyzed their influence on the morphology, adhesion and proliferation of the pre-osteoblastic cells (MC3T3-E1). For such heat-treated titanium disks were characterized by optical microscopy, contact angle, surface energy, roughness, microhardness, X-ray diffraction and scanning through the techniques (BSE, EDS and EBSD). For the analysis of biological response were tested by MTT proliferation, adhesion by crystal violet and &#946;1 integrin expression by flow cytometry. It was found that the presence of a microstructure very orderly, defined by a chemical attack, cells tend to stretch in the same direction of orientation of the material microstructure. When this order does not happen, the most important factor influencing cell proliferation is the residual stress, indicated by the hardness of the material. This way the disks with the highest level state of residual stress also showed increased cell proliferation / O tit?nio e suas ligas s?o amplamente utilizados como biomaterial em dispositivos biom?dicos e devido a isso pesquisas t?m sido desenvolvidas visando aperfei?oar e/ou compreender melhor a intera??o biomaterial/meio biol?gico. O processo de fabrica??o desses dispositivos de tit?nio geralmente envolve uma s?rie de processos t?rmicos e mec?nicos e que t?m consequ?ncias no produto final. Os tratamentos t?rmicos s?o usualmente utilizados para obten??o de propriedades diferenciadas para cada aplica??o. Com o intuito de entender a influ?ncia desses tratamentos sobre a resposta biol?gica da superf?cie, foram realizados, no presente trabalho, diferentes tratamentos t?rmicos em tit?nio e analisadas suas influ?ncias na morfologia, ades?o e prolifera??o de c?lulas pr?-osteobl?stica (MC3T3-E1). Para tanto os discos de tit?nio tratados termicamente foram caracterizados por microscopia ?tica, ?ngulo de contato, energia de superf?cie, rugosidade, microdureza Vickers, difra??o de raios-X e microscopia eletr?nica de varredura atrav?s das t?cnicas de EBS, EDS e EBSD. Para an?lise da resposta biol?gica foram realizados teste de prolifera??o por MTT, ades?o por cristal violeta e express?o da integrina &#946;1 por citometria de fluxo. Foi verificado que na presen?a de uma microestrutura muito ordenada, definida atrav?s de um ataque qu?mico, as c?lulas tendem a se alongar no mesmo sentido da orienta??o microestrutural do material. Quando essa ordem n?o acontece, o fator mais importante a influenciar na prolifera??o celular ? a tens?o residual, indicada pela dureza do material. Deste modo os discos que apresentaram maior estado de tens?o residual apresentaram tamb?m maior prolifera??o celular
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Efeito biológico de uma fonte de luz halógena e de um LED na sobrevivência de culturas de Escherichia coli / A biocompatibility study of two light curing unit (LED and halogen light) upon the survival of Escherichia coli strains

Nathália Chacur Juliboni 17 December 2007 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A diversificação das fontes de luz empregadas para fotopolimerização de compósitos e o seu extenso uso nas diversas aplicações odontológicas, torna necessária a investigação da biocompatibilidade das mesmas. A conseqüente exposição dos tecidos durante estes procedimentos, sugere fortemente que mais investigações sobre os efeitos biológicos da luz com comprimentos de onda correspondentes ao da luz azul são necessárias. O efeito positivo provocado pela evolução dos aparelhos fotopolimerizadores desviou a atenção das possíveis alterações fototóxicas sobre o profissional e o paciente. Além disso, o aumento da temperatura causado por estes aparelhos fotopolimerizadores de maiores densidades de potência pode ser prejudicial ao tecido pulpar. Da mesma maneira, a presença de um corante no meio bucal e sua conseqüente exposição à luz azul poderia levar à formação de radicais livres, o que em situações de estresse oxidativo, poderia causar danos aos tecidos adjacentes. Este fenônemo é denominado Ação Fotodinâmica. O objetivo deste estudo foi avaliar em cepas de Escherichia coli (E. coli): (i) o potencial citotóxico de duas fontes de ativação utilizadas em procedimentos odontológicos durante 40 e 80 s de exposição; (ii) o efeito biológico do enxaguatório bucal da marca Plax Classic, contendo corante vermelho; (iii) o efeito biológico da associação das fontes de luz ao enxaguatório bucal da marca Plax Classic, contendo corante vermelho (ação fotodinâmica), durante 40 e 80 s de exposição; (iv) medir a emissão de calor gerada pelas fontes de luz. Foram utilizadas suspensões bacterianas de E.coli AB1157 (proficiente em mecanismos de reparo de lesões no DNA) e de E. coli BW9091 (deficiente no gene xthA-, envolvido no reparo por excisão de bases), irradiadas por um aparelho de luz halógena e um LED, que apresentam comprimentos de onda correspondentes ao da luz azul e densidades de potência de 430 mW/cm2 e 1669 mW/cm2, respectivamente. As medições da potência foram realizadas através de um lediômetro, para o LED, o Hilux LEDMAX, e um radiômetro acoplado ao próprio aparelho de luz halógena, Optilux 501. A partir dos resultados deste estudo, pôde-se constatar que: (i) as fontes de luz nas densidades de potência utilizadas e nos tempos de exposição realizados, não foram capazes de alterar a sobrevivência celular; (ii) o enxaguatório bucal isoladamente reduziu a sobrevivência das cepas de E. coli BW9091 e não causou efeito nas cepas de E. coli AB1157; (iii) quando o enxaguatório bucal foi associado às fontes de luz observamos que não houve diminuição da sobrevivência para as duas cepas bacterianas nos dois períodos de exposição, porém, na cepa mutante, BW9091, houve uma proteção contra o efeito citotóxico do enxaguatório bucal tanto em 40 quanto em 80 s para as duas fontes de luz; (iv) o aumento da temperatura das duas fontes de luz durante a fotoativação não foi capaz de reduzir a sobrevivência das cepas bacterianas. As fontes de luz utilizadas neste trabalho não apresentaram letalidade às cepas de E. coli. O enxaguatório bucal apresentou efeito biológico para a cultura de E. coli BW9091, possivelmente pela sua natureza antimicrobiana. A associação dos agentes físico e químico neste estudo não pareceu causar um estresse oxidativo nas células a ponto de reduzir a sobrevivência das culturas bacterianas, contrariamente, pareceu ativar mecanismos de proteção celular na cepa de E. coli BW9091 e mantê-la mais resistente à ação antimicrobiana do enxaguatório bucal. A variação da temperatura, apesar de elevada, parece ter sido dissipada pelo meio aquoso que continha a cultura bacteriana. / The diversity of light curing units (LCUs), its large use on variety dental applications, and its function as an activator of dental composites polymerization make necessary a study of its biocompatibility. The consequent exposure of tissues during photo activation, strongly suggests that more investigations about the biological effects of blue light are needed. The positive effect promoted by the LCUs evolution biased the attention of possible phototoxic effects on professionals and patients. In addition, the temperature rise caused by these LCUs with higher power densities may be harmful to the pulp tissue. On the same way, the presence of a photosensitizer upon oral environment and its consequent exposure to blue light could lead the formation of free radicals, in which oxidative stress outcome could damage the adjacent tissues. This phenomenon is called Photodynamic Action. The aim of this study was to evaluate in Escherichia coli (E. coli) strains: (i) the cytotoxic effect of two LCUs used in dental procedures during 40 and 80 seconds of irradiation times; (ii) the biological effect of a mouth rinse with a red photosensitizer, Plax Classic; (iii) the biological effect of the association of the LCUs to a mouth rinse, with a red photosensitizer, Plax Classic, during 40 and 80 seconds of irradiation times; (iv) measurement of the LCUs thermal emission. Suspensions of E. coli AB1157 (proficient in all DNA repair mechanisms) and E. coli BW9091 (gene xthA- deficient, related to DNA damage repair), were irradiated by a halogen light and a LED (light emitting diode), that presents intervals of wavelength correspondents with blue light and power densities of 430 mW/cm2 and 1669 mW/cm2, respectively. The power density for the LED LCU was measured on a Hilux LEDMAX power meter, and for the halogen LCU, on the Optilux 501 power meter. The results indicated that: (i) the LCUs used with these power densities and these irradiation times, were not capable in altering the cellular survival rate; (ii) the mouth rinse itself reduced the survival rate of E. coli strain BW9091 and did not caused effect in E. coli strain AB1157; (iii) when the mouth rinse was associated to the LCUs, we observed that there was no reduction of the survival rate to both E. coli strains in both irradiation times; however, in the mutant strain, BW9091, a protection against the citotoxic effect of the mouth rinse was observed in 40 and 80 seconds of irradiation times to both LCUs; (iv) the temperature rise of both LCUs during photo activation, despite being elevated, was not capable in reducing the bacterial strains survival rate. The LCUs used in this study did not present lethal effect to the E. coli strains. The mouth rinse presented a biological effect to the E. coli strain BW9091, possibly because its antimicrobial nature. Although the association of the physical and chemical agents did not seem to cause an oxidative stress that could reduce the bacterial survival rate of E. coli strains, it seemed to activate mechanisms of cellular protection in E. coli BW9091 that kept them more resistants to the antimicrobial nature of the chemical agent. The temperature rise seemed to be dissipated by the aquous solution that contained the bacterial culture.
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A MEMBRANA DE LÁTEX COMO IMPLANTE PARA CORREÇÃO DE DEFEITOS MUSCULARES EM CÃES E COELHOS / LATEX MEMBRANE USED LIKE IMPLANT TO CORRECT MUSCLES DEFECTS IN DOGS AND RABBITS

Zimmermann, Marina 17 January 2007 (has links)
This dissertation presents an implant model of natural latex to be used on partial canine diaphragm replacement. The implant could be used in cases of diaphragmatic hernias, or significant loss of the diaphragm integrity disabling its reconstitution. For such, seven different membranes had been tested, six of them had been produced experimentally and one is a commercial model in use, for several applications. Firstly, the biocompatibility was evaluated in rabbits. Membranes were implanted between the cutaneous and the oblique abdominal sternum muscles by the means of a surgical procedure and the reactions of hipersensibility and rejection were evaluated. Mechanical traction tests were performed in control membranes to measure deformation and resistance. Results pointed that the membranes are incompatible, and not able to substitute muscular sheath in rabbits. New tests were made in dogs. The membranes were regrouped and three of then were tested in a similar way, in abdomen straight muscle. Two membranes were selected, for use in the canine diaphragm, and being tested in front a control group, without membrane. A rectangular defect (4 cm in length and 3 cm in width) was created in the diaphragm muscle, which was substituted, in groups 1 and 2, by the implantation of the corresponding latex membrane. The animals were evaluated radiographically, by blood count, video-surgery, and histopathology study. The results showed that the membrane made of natural latex, vulcanizants mixture and formic acid, were efficient in the correction of the diaphragm defect, promoting repair and local neovascularization, capable to keep the respiratory function and movements of the diaphragm without causing rejection during the evaluated period. / Esta dissertação apresenta um modelo de implante à base de látex natural para a substituição parcial de diafragma canino. Este poderá ser utilizado em casos de hérnias diafragmáticas, ou situações em que haja perda da integridade do diafragma, impossibilitando sua reconstituição. Para tal, foram testadas sete diferentes membranas, das quais seis foram produzidas experimentalmente e um modelo comercial em uso no mercado, para diferentes fins. Foram realizados testes de resistência para verificar a deformação e elasticidade das membranas. A biocompatibilidade foi avaliada primeiramente em coelhos, nos quais as membranas foram fixadas através de procedimento cirúrgico na bainha do músculo oblíquo externo do abdome e avaliadas quanto a reações de hipersensibilidade e rejeição. Os resultados contra-indicam o uso destas em coelhos. Novos testes foram realizados em cães. As membranas foram reagrupadas e três delas testadas de maneira semelhante, no músculo reto do abdome verificando-se biocompatibilidade com essa espécie. Foram selecionadas duas membranas para a utilização no diafragma canino, sendo testadas frente a um grupo controle, sem membrana. Foi criado um defeito retangular no músculo diafragma, com 4 cm de comprimento e 3 cm de largura, que no grupo 1 e 2 foi substituído pelo implante de membrana de látex correspondente. A avaliação foi feita através de análise do hemograma, por estudo radiográfico, por vídeocirurgia e estudo histopatológico. Pode-se inferir dos resultados que a membrana constituída de: látex natural, mistura vulcanizante e ácido fórmico, foi eficiente na correção do defeito no diafragma canino, promovendo a reparação tecidual e neovascularização local, capaz de manter a função do diafragma e movimentos respiratórios sem causar rejeição durante o período de avaliação.
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Fabricação e caracterização estrutural de filmes de materiais poliméricos visando a aplicação como biomateriais

Simões, Rebeca Delatore [UNESP] 14 August 2009 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-14Bitstream added on 2014-06-13T18:42:35Z : No. of bitstreams: 1 simoes_rd_dr_bauru.pdf: 3657789 bytes, checksum: 0f75cbf5a9ed07aa12a486e70e6189f6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Filmes auto-sustentáveis de polifluoreto de vinilideno (PVDF) e de polifluoreto de vinilideno com trifluoretileno (P(VDF-TrFE)) contendo amido de milho e/ou látex da borracha natural foram produzidos visando à obtenção de blendas biocompátiveis. Estas blendas foram produzidas pela técnica de prensagem a quente a qual não necessita fazer uso de solventes orgânicos para dissolver os polímeros sintéticos (PVDF e P(TrFE)). Tal processamento, além de não utilizar solventes tóxicos, possibilita a fabricação de filmes auto-sustentáveis com propriedades físicas e químicas apropriadas para aplicações como um material biocompatível. Os filmes de PVDF ou P(VDF-TrFE) com os polímeros naturais (amido e/ou látex de borracha natural) foram caracterizados através das técnicas de espectroscopia vibracional (absorção no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) e espalhamento Raman), análise termogravimétrico (TG), calorimetria exploratória diferencial (DSC), análise dinâmico-mecânica (DMA), microscopia ótica (MO), microscopia ótica (MO), microscopia eletrônica de varredura (MEV), difração de raios-X, densidade, índice de fluidez (MFI), dureza e condutividade térmica. Os resultados que os polímeros naturais estão bem dispersos na matriz de PVDF ou P(VDF-TrFE) em nível micrométrico e não interagem quimicamente com os polímeros sintéticos. As blendas apresentaram elevada estabilidade térmica, cujo módulo de elasticidade está na mesma ordem de grandeza do osso humano. Entretanto, observou-se que a adesão dos polímeros naturais é melhor para as blendas com P(VDF-TrFe). Adicionalmente, as estruturas cristalinas do PVDF-α e do P(VDF-TrFE) ferroelétrico são mantidos em todas as blendas. A densidade, a dureza, o índice de fluidez e os valores de condutividade térmica das blendas seguiram o que deve se esperar de misturas físicas... / Films of poly(vinylidene fluoride), PVDF, and poly(vinylidene fluoride - trifluoroethylene), P(VDF-TrFE), containing corn starch and latex of natural rubber were produced visioning to obtain biocompatible blends. These blends were produced by compressing/annealing, which discards the necessity of using organic solvents to dissolve the synthetic polymers (PVDF and P(VDF-TrFE)). This process, besides discarding the use of toxic solvents, allows obtaining self-standing films with suitable physical and chemical properties considering their application as biocompatible materials. The PVDF or P(VDF-TrFe) films with different percentage of the natural polymers (starch and/or latex of natural rubber) were characterized using thermogravimetry (TG), differential scanning calorimetry (DSC), and dynamicalmechanical analysis (DMA). Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and Raman scattering, optic microscopy, scanning electric microscopy, scanning electric microscopy (SEM), X-ray diffraction, density, melt flow index, hardness, and thermal conductivity. The results showed that the natural polymers are well dispersed within the matrix of PVDF or P(VDF-TrFE) at micrometer level and do not interact chemically with the synthetic polymers. The blends present high thermal stability with elasticity modulus at the same order of magnitude of the bone. However, it was observed that the adhesion of the natural polymers is better for the blends of P(VDF-TrFE). Besides, the crystalline structures of the α-PVDF and ferroelectric P(VDF-TrFE) are kept in the blends. The density, hardness, melt flow index and thermal conductivity values of the blends followed what shoud be expected from physical mixtures. The tests of biocompatibility for these materials were carried out implanting the films at the subcutaneous region of rats the results showed histological characteristics favorable to the compatibility in vivo...(Complete abstract click electronic access below)
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Avaliação da resposta tecidual e citotoxicidade dos cimentos: Ângelus MTA cinza e CPM . cimento Portland modificado

Faria, Max Douglas [UNESP] 25 August 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-25Bitstream added on 2014-06-13T20:04:51Z : No. of bitstreams: 1 faria_md_dr_araca.pdf: 3031883 bytes, checksum: 4078289b037109052634322a53fe9c3d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta tecidual do tecido subcutâneo de rato ao implante de tubos de polietileno preenchidos com CPM ® (Cimento Portland Modificado) comparado com Ângelus MTA ® . Estes materiais foram colocados em tubos de polietileno e implantados no tecido conjuntivo dorsal de ratos Wistar por 7, 15, 30, 60 e 90 dias. Os espécimes foram preparados para serem corados com HE, Von Kossa ou não corados para luz polarizada. Foi realizada análise qualitativa e quantitativa da reação inflamatória. Os materiais CPM ® e Ângelus MTA ® causaram reação moderada no tempo experimental de 7 dias que diminuiu com o tempo. A resposta foi similar entre os grupos Controle, CPM ® e Ângelus MTA ® no tempo experimental de 30 dias. Aos 60 e 90 dias todos os grupos foram semelhantes ao Controle. Mineralizações e granulações birrefringentes à luz polarizada foram observadas com ambos os materiais. Podese concluir que o CPM ® apresentou resposta tecidual semelhante ao Ângelus MTA ® inclusive com estimulação de formação de tecido mineralizado / The aim of this study was to evaluate the tissue response of rat subcutaneous tissue implantation of polyethylene tubes filled com CPM® (Portland Cement Modified) compared with Angelus MTA ®. These materials were placed in polyethylene tubes and implanted into dorsal connective tissue of rats by 7,15,30,60 and 90 days. The specimens were prepared to be stained with HE, Von Kossa staining or without starning for polarized light. It were performed qualitative and quantitative analysis of reactions inflammatory. CPM materials ® and Angelus MTA ® caused a moderate reaction in the experimental period of 7 days decreased with time. The response was similar between control, CPM® and Angelus MTA ® in the experimental time of 30 days. At 60 and 90 days all groups were similar to control. Mineralization and granulations birefringent to polarized light were observed with all materials. It was possible that CPM® presented similar tissue response to Angelus MTA ® Iinduding with mineralized tissue stimulation

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