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Análise de celulases e xilanases por fungo isolado a partir do bioma cerrado / Analysis of fungal cellulases and xylanases isolated from cerrado biomePereira, Douglas Endrigo Perez 06 May 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-05-06 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lignocellulosic biomass is constituted by cellulose, hemicellulose and lignin in the
plant cell walls. The conversion of lignocellulose to fermentable sugars mainly depends
on the action of a complex of enzymes that hydrolyze cellulose and hemicellulose. This
study was to analyze the production of cellulases and xylanases by fungi isolated from
soil and decaying material in Cerrado. Initially, the fungi were analyzed for cellulase
production capacity among the fungal cellulase-producing fungus capable of producing
the highest levels of cellulase was selected for the experiments of xylanase and cellulase
production by submerged fermentation and biochemical analysis of the enzyme
secreted. Among the isolated fungi, fungus called IFBMD01 was that higher activity of
cellulase in the supernatant when cultivated with wheat bran as carbon source. This was
identified as Aspergillus cf niger. The enzymes studied with their respective results
were: FPase with better production time of 7 days, showing activity of 0.10 U / mL,
optimum pH 5.5, optimum temperature of 60 ° C; CMCase with better time production
6 days, showing activity of 8.19 U / mL, pH optimum of 5, optimum temperature of 70 º
C; Avicelase with better production time of 9 days, showing activity of 0.01 U / mL, pH
optimum of 5.5 and optimum temperature of 60 ° C; xylanase, with better production
time 3 days, showing activity of 35.5 U / mL, and the optimum pH of 5 and the
optimum temperature of 50 ° C, the β-Glycosidase, with higher production on the sixth
day showing activity of 0.98 U / mL, with the optimum pH 5 and optimum temperature
of 60 ° C. The activity of β-glucosidase showing in the culture supernatant was
influenced by the ions Mn2 +, NH4, K +, Mg2 +, Ca2 +, Ba2 +, Al3 +, Na +, and Co2+, as
well as EDTA, glucose, xylose and cellobiose. In the culture supernatant of the fungus
A. niger IFBMD01 grown on FT for 3 and 6 days protein bands were visualized with
activity against xylan and CMC molecular weight be 30 to be 66 kDa. / A biomassa lignocelulósica é constituída pela celulose, hemicelulose e lignina,
presentes na parede das células vegetais. A xilana é o principal componente da fração de
hemicelulose da lignocelulose. A conversão da lignocelulose à açúcares fermentáveis é
realizada por um complexo de celulases e xilanases: enzimas que hidrolisam as frações
de celulose e xilana. O objetivo deste trabalho foi analisar a produção de celulases e
xilanases por fungos isolados a partir de solo e material em decomposição do Bioma
Cerrado. Inicialmente, os fungos foram analisados quanto à capacidade de produção de
celulases por atividade em placa, neste experimento, os fungos produtores de maiores
níveis de celulases foram selecionados para os experimentos de produção de celulases e
xilanases por fermentação submersa utilizando meio suplementado com resíduos
lignocelulósicos como fonte de carbono. Dentre os fungos analisados, o isolado
IFBMD01 apresentou maior atividade de celulases e xilanases no sobrenadante de
cultura do fungo cultivado em meio com farelo de trigo, sendo que o pico de produção
FPAses, CMCases, Avicelases e xilanases foram obtidos após 7, 6, 9 e 3 dias de cultivo
respectivamente. A caracterização bioquímica das celulases e xilanases produzidas pelo
isolado IFBMD01 demonstrou que: as enzimas com atividade de FPase apresentaram
atividade de 0,10 U/mL, pH e temperatura ótimos de 5,5e 60ºC; as CMCases
apresentaram atividade de 8,19 U/mL, pH ótimo de 5 e temperatura ótima de 70ºC; as
Avicelases apresentaram atividade de 0,01 U/mL, pH ótimo de 5,5 e temperatura ótima
de 60ºC; as xilanase apresentaram atividade de 35,5 U/mL, sendo o pH ótimo de 5 e a
temperatura ótima de 50ºC e as β-glicosidases apresentaram atividade de 0,98 U/mL,
com o pH ótimo de 5 e temperatura ótima de 60ºC. A atividade de β-glicosidase
presente no sobrenadante de cultura foi influenciada pelos íons Mn2+, NH4, K+, Mg2+,
Ca2+, Ba2+, Al3+, Na+ e Co2+, assim como por EDTA, glicose, xilose e celobiose. No
sobrenadante de cultura do isolado IFBMD01 cultivado em FT por 3 e 6 dias foram
visualizadas bandas de proteínas com atividade contra xilana e CMC, com massa
molecular aproximada de 30 a 66 kDa. A identificação morfológica e molecular do
isolado IFBMD01 demonstrou que é um isolado de Aspergillus cf niger.
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[en] STUDY OF THE INTERACTION OF PHTHALOCYANINE-DERIVED PHOTOSENSITIZERS WITH DRUG DELIVERY SYSTEMS FOR PHOTODYNAMIC THERAPY / [pt] ESTUDO DA INTERAÇÃO DE FOTOSSENSIBILIZANTES DERIVADOS DE FTALOCIANINAS COM SISTEMAS DE DISTRIBUIÇÃO DE FÁRMACOS PARA TERAPIA FOTODINÂMICAMARIA PAULINA ROMERO OBANDO 10 September 2012 (has links)
[pt] A Terapia Fotodinâmica (PDT) consiste na irradiação com luz visível de um
tecido após a aplicação de um fotossensibilizante. São produzidas diferentes
espécies reativas, em especial oxigênio singleto, que desencadeiam uma série de
eventos que resultam na inativação ou morte celular. O desenvolvimento de
fotossensibilizantes e o estudo de sua distribuição aos locais das lesões são
importantes para ampliar as aplicações de PDT. O objetivo deste trabalho foi
avaliar as propriedades de ftalocianinas associadas a surfactantes que facilitassem
a distribuição e atividade fotocatalítica desse tipo de fotossensibilizante. Foram
utilizadas as propriedades espectroscópicas de absorção e fluorescência dos
fotossensibilizantes. Numa primeira etapa, foi avaliada a ftalocianina de zinco
(ZnPc) em formulações com diferentes surfactantes iônicos (SDS, CTAB, HPS) e
não iônicos (Tween 20, Tween 80, Pluronic F-68, PF-127, Triton X-100).
Encontrou-se que soluções concentradas de ZnPc e surfactante em DMF ou
DMSO formam nanoemulsões instáveis em solução aquosa. No início, ZnPc
apresenta-se monomérica nessas nanoemulsões, mas sofre agregação com o passar
do tempo, diminuindo sua eficiência como sensibilizante. A cinética de agregação
mostrou que HPS e CTAB formam as nanoemulsões mais estáveis, com tempos
característicos de formação de agregados superiores a dois dias. Em seguida foi
avaliado um novo derivado mentolado de ftalocianina, MentaZnPc, sintetizado
por K. Oliveira e colaboradores, em micelas dos surfactantes acima, além dos
polioxietilenos C12E9 e Brij 30, 35, 97 e 98. A presença dos grupos mentol como
substituintes diminuiu a tendência de empilhamento e produziu maior solubilidade
no compartimento hidrofóbico das micelas. Foram avaliados rendimentos
quânticos de fluorescência, de produção de oxigênio singleto, usando DPBF como
sonda, e fotobranqueamento dos fotossensibilizantes nos meios
microheterogêneos. As melhores condições para a geração de 1O2 por ZnPc foram
encontradas em nanoemulsões de HPS. Por outro lado, MentaZnPc apresentou ótimo rendimento quântico de oxigênio singleto em micelas não iônicas,
especialmente em PF-127, já utilizado amplamente na indústria farmacêutica. / [en] Photodynamic Therapy (PDT) involves irradiation of a tissue with visible
light after application of a photosensitizer. Different reactive species are
produced, which initiate events that result in inactivation or cell death. The
development of photosensitizers and the study of their delivery to sites of the
lesions are important to broaden the applications of PDT. The objective of this
study was to evaluate the properties of phthalocyanines associated with
surfactants that facilitate the distribution and photocatalytic activity of this type of
photosensitizer. The spectroscopic properties of absorption and fluorescence were
used. In a first step, zinc phthalocyanine (ZnPc) was evaluated in formulations
with different ionic (SDS, CTAB, HPS) and nonionic surfactants (Tween 20,
Tween 80, Pluronic F-127 and F-127, Triton X-100). It was found that
concentrated solutions of the surfactants with ZnPc in DMF or DMSO form
unstable nanoemulsions in aqueous solution. At first, ZnPc is monomeric in the
nanoemulsions, but aggregates in the course of time, reducing its efficiency as a
sensitizer. The kinetics of aggregation showed that HPS and CTAB form the more
stable nanoemulsions with aggregation lifetimes greater than two days. Then, a
new menthol phthalocyanine derivative, MentaZnPc, synthesized by K. Oliveira
et al., was evaluated in micelles of the surfactants above, and of several
polyoxyethylenes. The presence of menthol groups as substituents decreased the
stacking tendency and produced a greater solubility in the hydrophobic
compartment of the micelles. Fluorescence, singlet oxygen quantum yields and
photobleaching of the photosensitizers were evaluated in the microheterogeneous
media. The best conditions for 1O2 generation by ZnPc were found in HPS
nanoemulsions. MintZnPc presented an excellent singlet oxygen quantum yield in
non-ionic micelles, especially in Pluronic F-127, which has been widely used in
the pharmaceutical industry.
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[en] STEADY STATE AND TIME RESOLVED FLUORESCENCE STUDIES OF LOCAL ANESTHETICS AND FLUOROQUINOLONE ANTIBIOTICS / [pt] ESTUDOS DE FLUORESCÊNCIA ESTACIONÁRIA E RESOLVIDA NO TEMPO DE ANESTÉSICOS LOCAIS E DE ANTIBIÓTICOS DA CLASSE DAS FLUOROQUINOLONASFABRICIO CASAREJOS LOPES LUIZ 28 May 2010 (has links)
[pt] Durante as últimas décadas tem-se acentuado o desenvolvimento de técnicas de
fluorescência e suas aplicações em biociências e biotecnologia. Dada sua alta
sensibilidade de detecção, tais técnicas têm-se tornado ferramentas importantes em muitas
áreas de pesquisa tais como diagnósticos médicos, análise genética, mapeamento
estrutural de células, estudos de fármacos, caracterização de complexos de fármacos com
metais, análise da interação de fármacos com proteínas, lipídeos e DNA. Os anestésicos
locais são fármacos que bloqueiam reversivelmente a condução nervosa quando aplicados
a uma região circunscrita do corpo. Entretanto, possuem uma variedade de efeitos nos
sistemas biológicos que não somente os efeitos de anestesia. Os antibióticos
fluorquinolonas são agentes antimicrobianos sintéticos utilizados clinicamente há mais de
30 anos. Além de sua atividade antibacteriana, algumas fluorquinolonas vêm sendo
aplicadas no desenvolvimento de drogas anticancerígenas e anti-HIV. O pH local de
muitos meios biológicos tem grande influência nas propriedades espectroscópicas de
muitos fármacos. Suas constantes de ionização, pKa, podem ser obtidas
experimentalmente através de medidas espectroscópicas tais como absorbância,
intensidade de fluorescência e parâmetros da fluorescência resolvida no tempo. Neste
trabalho estudamos a partir da técnica de fluorescência estacionária e fluorescência
resolvida no tempo os anestésicos locais dibucaína e tetracaína. Estudamos também os
antibióticos norfloxacina e levofloxacina e seus respectivos complexos com ouro.
Determinamos os tempos de vida de fluorescência e descrevemos ainda como as
propriedades espectrais de fluorescência que se alteram em função do pH. Nos estudos de
decaimento da fluorescência, desenvolvemos expressões para os fatores pré-exponenciais
e as intensidades fracionárias de fluorescência como função do pH para amostras
fluorescentes que sofrem transição ácido-base. Mostramos que os valores de pKa são
aparentemente deslocados e obtivemos as expressões para o deslocamento.
Determinamos as constantes de ionização, pKa, a partir da fluorescência estacionária e de
parâmetros associados aos tempos de vida e testamos as expressões teóricas nos
resultados experimentais. Os valores obtidos foram coerentes para as constantes de
ionização dos fármacos dibucaína, levofloxacina e norfloxacina. Acredita-se que a ação
dos anestésicos locais deve-se à interação das moléculas do anestésico com lipídeos e/ou
proteínas de membrana. Uma análise desta interação mostra-se necessária para se
investigar a difusão do anestésico na membrana e seu efeito na organização e dinâmica
dos lipídeos e proteínas que constituem a membrana. Investigamos a interação da
dibucaína e tetracaína com membranas enriquecidas em Na,K-ATPase e a incorporação
do fármaco à membrana. Determinamos as constantes de associação. O valor obtido para
a dibucaína foi de 0.91 × 10(3) M(-1) e para a tetracaína 0.77 × 10(3) M(-1). Estudamos a
acessibilidade dos triptofanos por supressão de fluorescência do triptofano pela dibucaína,
obtivemos uma acessibilidade de 90% para os triptofanos e uma constante de supressão
dinâmica de 4.3 × 10(4) M(-1). / [en] During the last decades the development of fluorescence techniques and their
applications in bioscience and biotechnology has been accentuated. Due to high
sensitivity, such techniques have become important tools in many research areas such as
medical diagnosis, genetic analysis, structural mapping of cells, drug investigation,
characterization of drug-metal complexes, analysis of drugs interaction with proteins,
lipids and DNA. The local anesthetics are drugs that reversibly block the nervous impulse
when applied to a limited region of the body. However, they possess a variety of
additional effects in the biological systems. The fluoroquinolone derived antibiotics are
synthetic antimicrobial agents that have been used clinically for more than 30 years. In
addition to their antibacterial activity, some fluoroquinolones have been applied in the
development of anticancer drugs and anti-HIV. The local pH of many biological
environments has great influence in the spectroscopic properties of many drugs, including
local anesthetics and fluoroquinolones. The ionization constants of the drugs, pKa, can be
experimentally obtained via spectroscopic parameters such as absorbance, fluorescence
intensity, and time-resolved fluorescence parameters. In this work we studied the local
anesthetics dibucaine and tetracaine using steady state and time resolved fluorescence
techniques. We also studied the antibiotics norfloxacin and levofloxacin and their
complexes with gold. We determined the fluorescence lifetimes and described how the
spectral fluorescence properties alter as a function of the pH. In the studies of
fluorescence decay, we developed expressions for the pre-exponential factors and the
fractional fluorescence intensities as a function of the pH for a fluorophore undergoing an
acid-base transition. We showed that the pKa values are apparently shifted and obtained
the expressions for the pK shifts. We determined the ionization constants, pKa from
steady state fluorescence and from parameters associated with the lifetimes, and we tested
the theoretical expressions using the experimental results. The observed pK shifts for
dibucaine, levofloxacin and norfloxacin were found to agree with the theoretical
expressions. The action of local anesthetics is believed to involve the interaction of the
anesthetic molecules with lipids and/or membrane proteins. An analysis of this interaction
is necessary to examine the anesthetic diffusion in the membrane and its effect in the
organization and dynamics of the membrane lipids and proteins. We investigated the
interaction of dibucaine with Na,K-ATPase enriched membranes, and the incorporation
of the drug in the membrane. We determined the binding constants. The obtained values
were 0.91 × 10(3) M(-1) for dibucaine and 0.77 × 10(3) M(-1) for tetracaine. We also studied the
accessibility of the tryptophan residues using the fluorescence quenching by dibucaine.
We obtained a dynamic quenching constant of 4.3 × 10(4) M(-1).
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DETECÇÃO DA MT1-MMP NA MUCOSA INTESTINAL DE RATOS E GALINHAS AO LONGO DO DESENVOLVIMENTO PRÉ E PÓS-NATALCamargo, Kamila Caroline 26 March 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013-03-26 / Membrane type I MMP (MT1-MMP) is involved in cellular adhesion, proliferation, migration and cell death during organogenesis and adult phase of vertebrates. However, its role in the development of the small intestinal has not been established. We formulated the hypothesis that this metalloproteinase would play a relevant role in the development of the intestinal mucosa. To assess this hypothesis was detected the labeling of MT1-MMP by immunohistochemistry in the intestinal mucosa along the pre-and postnatal development of rats and chickens so that from a comparative analysis, it were possible infer about the role of this metalloproteinase.In thepre natal phase of rats, the labeling of MT1-MMP correlates with events that lead to morphogenesis of villi and establishment of the tecidual homeostasis. In the pre natal phase of chickens, the labeling of MT1-MMP correlates with events that lead to growth of the intestine. In the postnatal phase of rats and chickens, the labeling of MT1-MMP was maintained in the intestinal mucosa, which led us to suggest that this metalloproteinase have a relevant role in the tecidual homeostasis throughout adulthood.We suggest that the role of that MT1-MMPin the remodeling and growth of the intestinal mucosa of rats and chickens is related with adhesion, proliferation, migration and death of epithelial cells and migration of mesenchymalcells. This is the first work that evidence the MT1-MMP in the small intestine of vertebrates during development, making it possible that further studies willclarify its role in the formation of this important organ. / A metaloproteinase de membrana 1 (MT1-MMP) é envolvida em processos de adesão proliferação, migração celular e morte celular durante a organogênese e na fase adulta de vertebrados. Entretanto, o seu papel no desenvolvimento do intestino delgado de vertebrados ainda não foi estabelecido. Nós formulamos a hipótese de que essa metaloproteinase de membrana teria um papel relevante no processo de desenvolvimento da mucosa intestinal. Para avaliar essa hipótese, detectou-se a marcação da MT1-MMP por imunohistoquímica na mucosa intestinal ao longo do desenvolvimento pré e pós-natal de ratos e galinhas para que, a partir de uma análise comparativa, fosse possível inferir a respeito do papel dessa metaloproteinase. No período pré-natal de ratos, a marcação da MT1-MMP correlaciona com eventos que levam à morfogênese das vilosidades e estabelecimento da homeostase tecidual. No período pré-natal de galinhas, a marcação da MT1-MMP correlaciona com eventos que levam ao crescimento do intestino. No período pós-natal de ratos e galinhas, a marcação da MT1-MMP foi mantida no epitélio intestinal, o que nos levou a sugerir que essa metaloproteinase tem um papel importante na homeostase tecidual durante toda a vida adulta.Nós sugerimos que o papel da MT1-MMPna remodelação e crescimento da mucosa intestinal de ratos e galinhas está relacionado com adesão, proliferação, migração e morte de células epiteliais e migração de células mesenquimais. Esse é o primeiro trabalho que evidencia a MT1-MMP no intestino delgado de vertebrados durante o desenvolvimento, possibilitando estudos subsequentes que venham a esclarecer o papel dessa metaloproteinase na formação desse importante órgão.
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Investigação de danos visuais em pacientes diagnosticados com meningite criptocócica não associada à imunossupressãoLACERDA, Eliza Maria da Costa Brito 20 March 2014 (has links)
Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-06-26T12:01:48Z
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Previous issue date: 2014 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / FINEP - Financiadora de Estudos e Projetos / A meningite criptocócica é uma severa doença infecciosa causada pelo Cryptococcus spp. que apresenta alta letalidade e deixa nos sobreviventes uma série de sequelas sensoriais, entre as
quais estão as alterações visuais. O objetivo deste estudo foi descrever as perdas visuais sofridas por pacientes, sem história de imunossupressão, diagnosticados com meningite criptocócica, de
forma a indicar um possível mecanismo e fatores de risco para essas sequelas visuais. O trabalho foi composto de um estudo de série de casos de pacientes com meningite criptocócica sem história de imunossupressão (n = 7 pacientes, n = 14 olhos) e um estudo transversal analítico de
todos os casos de meningite criptocócica sem história de imunossupressão notificados em 14
anos num hospital de referência do Pará (n = 113 casos). No estudo de série de casos, as funções visuais de uma amostra de pacientes foi cuidadosamente analisada por meio de avaliação
oftalmológica, testes psicofísicos e eletrofisiológicos. No estudo transversal analítico, foi realizada análise de dados de prontuário com enfoque nas alterações visuais. Observou-se que os
pacientes estudados na série de casos apresentaram grave diminuição da acuidade visual e
mesmo em pacientes sem queixa visual houve alteração na percepção de cor, na percepção de
contraste de luminância em diferentes frequências espaciais e no campo visual. Os testes indicam
comprometimento da retina central como principal desencadeadora de uma cascata de alterações
que impedem o normal processamento da imagem no córtex visual. Sugere-se que lesões do
nervo óptico não foram as únicas responsáveis pelas alterações visuais observadas. Os principais
fatores de risco para as alterações visuais observados pelo estudo transversal analítico foram o tempo de doença antes do início do tratamento e a resposta imunológica do paciente. / Cryptococcal meningitis is a severe infectious disease caused by Cryptococcus spp., which has
high lethality and causes sensorial sequels. The most important sequels are visual impairments.
The aim of this study was to describe the visual losses suffered by patients without
immunosupression history, diagnosed with cryptococcal meningitis in order to indicate a
possible mechanism and risk factors for the visual sequels. The work was composed by a case
series study with cryptococcal meningitis without immunosupression history (n =7 patients, 14 =
eyes) and an epidemiological study of all the cases of cryptococcal meningitis without
immunosupression history notified during 14 years in the reference hospital of Para State (n =
113 cases). In the case series study, the visual functions of a sample of patients were studied by
ophthalmological, psychophysical, and electrophysiological evaluation. The epidemiological
study analyzed the medical records data focusing on visual impairment. It was observed that the
studied patients in the case series study had visual acuity impairment. Even in patients without
clinical complaints, color discrimination, luminance contrast sensitivity, and visual field were
impaired. The results indicated central retina commitment as the principal responsible for a
cascade of alterations that prevented the normal upstream image processing, at the visual cortex
level. It is suggested that the observed visual dysfunction was due not only to optic nerve
damage. The principal risk factors for the visual alterations observed in the epidemiological
study were disease time before the beginning of the treatment and patient immunological
response.
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Variação genética em Salminus hilarii (Valenciennes, 1849) na região do Alto Rio São Francisco, MG e contribuições para a conservação do grupoNunes, Aline Galindo 26 November 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-11-26 / Financiadora de Estudos e Projetos / The São Francisco river comprises one of the largest and most important river basins of Brazil and one of its main characteristics is the variety of fish species. The genus Salminus (Characiformes: Characidae) constitutes a group of migratory fish with great economic importance in fishing and gastronomy. Within this genus, Salminus hilarii (tabarana), due to its high degree of selectivity for the environment and to occupy the top of the food chain, of great importance to the ecosystem and a good indicator of environmental impacts. Many studies on conservation and population genetics have been conducted using molecular markers such as microsatellites, which can provide data on the genetic processes that are acting in a given population. These markers have relatively conserved flanking sequences, which allows the use of primers that were originally designed for other phylogenetically related species. In this study, nine polymorphic microsatellite loci isolated from Salminus franciscanus were used to assess the genetic variation of S. hilarii collected in three localities in the upper São Francisco river basin, aiming to evaluate the level of genetic variation and identify evidence of population structure, providing support for conservation of this group of fish and contributing effectively to maintain the biodiversity of this ecosystem. The cross amplification results were efficient and were able to identify a relatively high level of genetic variation. Moreover, it was possible to observe the absence of genetic structure between populations, suggesting the occurrence of gene flow between them enough to maintenance of the genetic homogeneity of this populations. These results are important tools, since they can provide information for understanding the behavior and biology of these fish to fisheries management and conservation programs. / O Rio São Francisco compõe uma das maiores e mais importantes bacias hidrográficas do território brasileiro e uma de suas principais características é a variedade da ictiofauna. O gênero Salminus (Characiformes: Characidae), constitui um grupo de peixes migradores com grande importância econômica, na pesca esportiva e na gastronomia. Dentro desse gênero, destaca-se Salminus hilarii (tabarana), devido ao seu alto grau de seletividade pelo ambiente e por ocupar o topo da cadeia alimentar. Isso confere à espécie uma grande importância para o ecossistema e a coloca na posição de uma boa indicadora de impactos ambientais. Muitos estudos sobre genética da conservação e de populações têm sido realizados utilizando marcadores moleculares, tais como os microssatélites, capazes de fornecer dados sobre os processos genéticos que estão atuando em uma determinada população. Esses marcadores possuem sequências flanqueadoras relativamente conservadas, o que permite a utilização de primers que foram desenhados originalmente para outra espécie em espécies filogeneticamente próximas. Assim, utilizando nove locos polimórficos de microssatélites isolados de Salminus franciscanus, o objetivo do presente estudo foi analisar a variação genética de S. hilarii coletados em três localidades na bacia do alto São Francisco e identificar evidências de estruturação populacional, produzindo conhecimentos genéticos aos estudos de conservação deste grupo de peixes e contribuindo de maneira efetiva para a manutenção da biodiversidade desse ecossistema. Os resultados obtidos evidenciaram que a amplificação heteróloga foi eficiente e permitiu identificar uma variação genética relativamente alta na espécie em estudo. Além disso, foi possível observar a ausência de estrutura genética entre as populações, indicando a ocorrência de fluxo gênico entre as populações suficiente para manter a homogeneidade genética entre elas. Esses resultados constituem ferramentas importantes, uma vez que contribuem para o entendimento do comportamento e biologia desses peixes, e para programas de manejo de pesca e conservação da tabarana.
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Análise estrutural cristalográfica de protótipos de fármacos derivados de N-fenilpiperazina e de N-acilidrazona / Crystal structure analysis of pharmaceutical prototypes of N-phenylpiperazine and N-acylhydrazone derivativesCastro, Rosane de Paula 26 March 2012 (has links)
Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-01-15T17:06:54Z
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Previous issue date: 2012-03-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In this work will be done initially, a review of the fundamentals of crystallography, besides
the description of Direct Methods, commonly used in structural determination of small molecules,
and the process of refinement of the obtained structure. The techniques for crystal growth will be
presented and also a discussion about the process of data collection in the CAD4 diffractometer.
Next, the process of obtaining single crystals and the crystallographic analysis of five novel compounds,
which were synthesized by the Laborat´orio de Avaliac¸ ˜ao e S´ıntese de Substˆancias Bioativas
(LASSBio) of Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ), are presented. These compounds
are analogues of drugs, derivatives of N-phenylpiperazine and N-acylhydrazones, fragments that
have important biological activities. The crystallographic structures of the following derivatives
of N-phenylpiperazine were elucidated : LASSBio-1597, very active as anti-inflammatory, and an
inclusion complex of the antipsychotic prototype, LASSBio-579, a dopamine receptor agonist, in β-
cyclodextrin. The other compounds elucidated by X-ray crystallography are the N-acylhydrazones
derivatives LASSBio-1606 analogue of Piroxicam, and compounds LASSBio-1586 polymorph I
and LASSBio-1586 polymorph II , combretastatin-A4 analogue having potent anti-cancer activity,
whose crystallographic analysis aimed to verify the existence of polymorphism suggested by DSC
analysis (Differential scanning calorimetry). / Neste trabalho será feita, inicialmente, uma revisão dos fundamentos de cristalografia, além
da descrição dos Métodos Diretos, correntemente utilizados na determinação estrutural de pequenas
moléculas, e do processo de refinamento da estrutura obtida. Serão apresentadas técnicas de crescimento
de cristais e, também, uma discussão sobre o processo de coleta de dados no Difratômetro
CAD4. Posteriormente, serão apresentados o processo de obtenção dos monocristais e as análises
cristalográficas de cinco compostos inéditos, que foram sintetizados pelo Laboratório de Avaliação
e Síıntese de Substâncias Bioativas (LASSBio) da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ).
Estes compostos são análogos de fármacos, derivados de N-fenilpiperazina e de N-acilidrazona,
fragmentos que apresentam importantes atividades biológicas. Foram elucidadas as estruturas cristalográficas dos seguintes derivados de N-fenilpiperazina: LASSBio-1597, bastante ativo como antiinflamatório, e o complexo de inclusão do protótipo antipsicótico, LASSBio-579, um agonista do
receptor de dopamina, em β-ciclodextrina. Os outros compostos elucidados por cristalografia de
raios X foram os derivados de N-acilidrazona LASSBio-1606, análogo do medicamento Piroxicam,
e os compostos LASSBio-1586 polimorfo I e LASSBio-1586 polimorfo II, análogos da Combretastatina
- A4 com potente atividade citotóxica tendo aplicações no tratamento de câncer, cuja análise
cristalográfica teve como objetivo verificar a existência do polimorfismo sugerido pela análise de
DSC (Differential scanning calorimetry).
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Entropia conjunta de espaço e reqüência espacial estimada através da discriminação de estímulos espaciais com luminância e cromaticidade moduladas por funções de Gábor: implicações para o processamento paralelo de informação no sistema visual humanoSILVEIRA, Vladímir de Aquino 06 December 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / FAPESPA - Fundação Amazônia de Amparo a Estudos e Pesquisas / FADESP - Fundação de Amparo e Desenvolvimento da Pesquisa / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo deste estudo foi estimar a entropia conjunta do sistema visual humano no domínio do espaço e no domínio das freqüências espaciais através de funções
psicométricas. Estas foram obtidas com testes de discriminação de estímulos com
luminância ou cromaticidade moduladas por funções de Gábor. A essência do método
consistiu em avaliar a entropia no domínio do espaço, testando-se a capacidade do sujeito
em discriminar estímulos que diferiam apenas em extensão espacial, e avaliar a entropia no
domínio das freqüências espaciais, testando-se a capacidade do sujeito em discriminar
estímulos que diferiam apenas em freqüência espacial. A entropia conjunta foi calculada,
então, a partir desses dois valores individuais de entropia. Três condições visuais foram
estudadas: acromática, cromática sem correção fina para eqüiluminância e cromática com
correção para eqüiluminância através de fotometria com flicker heterocromático. Quatro
sujeitos foram testados nas três condições, dois sujeitos adicionais foram testados na
condição cromática sem eqüiluminância fina e um sétimo sujeito também fez o teste
acromático. Todos os sujeitos foram examinados por oftalmologista e considerados
normais do ponto de vista oftálmico, não apresentando relato, sintomas ou sinais de
disfunções visuais ou de moléstias potencialmente capazes de afetar o sistema visual. Eles
tinham acuidade visual normal ou corrigida de no mínimo 20/30. O trabalho foi aprovado
pela Comissão de Ética em Pesquisa do Núcleo de Medicina Tropical da UFPA e obedeceu
às recomendações da Declaração de Helsinki. As funções de Gábor usadas para modulação
de luminância ou cromaticidade compreenderam redes senoidais unidimensionais
horizontais, moduladas na direção vertical, dentro de envelopes gaussianos bidimensionais
cuja extensão espacial era medida pelo desvio padrão da gaussiana. Os estímulos foram
gerados usando-se uma rotina escrita em Pascal num ambiente Delphi 7 Enterprise. Foi
utilizado um microcomputador Dell Precision 390 Workstation e um gerador de estímulos
CRS VSG ViSaGe para exibir os estímulos num CRT de 20”, 800 x 600 pixels, 120 Hz,
padrão RGB, Mitsubishi Diamond Pro 2070SB. Nos experimentos acromáticos, os
estímulos foram gerados pela modulação de luminância de uma cor branca correspondente
à cromaticidade CIE1931 (x = 0,270; y = 0,280) ou CIE1976 (u’ = 0,186; v’= 0,433) e
tinha luminância média de 44,5 cd/m2. Nos experimentos cromáticos, a luminância média
foi mantida em 15 cd/m2 e foram usadas duas series de estímulos verde-vermelhos. Os
estímulos de uma série foram formados por duas cromaticidades definidas no eixo M-L do
Espaço de Cores DKL (CIE1976: verde, u’=0,131, v’=0,380; vermelho, u’=0,216,
v’=0,371). Os estímulos da outra série foram formados por duas cromaticidades definidas
ao longo de um eixo horizontal verde-vermelho definido no Espaço de Cores CIE1976
(verde, u’=0,150, v’=0,480; vermelho, u’=0,255, v’=0,480). Os estímulos de referência
eram compostos por redes de três freqüências espaciais diferentes (0,4, 2 e 10 ciclos por
grau) e envelope gaussiano com desvio padrão de 1 grau. Os estímulos de testes eram
compostos por uma entre 19 freqüências espaciais diferentes em torno da freqüência
espacial de referência e um entre 21 envelopes gaussianos diferentes com desvio padrão
em torno de 1 grau. Na condição acromática, foram estudados quatro níveis de contraste de
Michelson: 2%, 5%, 10% e 100%. Nas duas condições cromáticas foi usado o nível mais
alto de contraste agregado de cones permitidos pelo gamut do monitor, 17%. O
experimento consistiu numa escolha forçada de dois intervalos, cujo procedimento de
testagem compreendeu a seguinte seqüência: i) apresentação de um estímulo de referência
por 1 s; ii) substituição do estímulo de referência por um fundo eqüiluminante de mesma
cromaticidade por 1 s; iii) apresentação do estímulo de teste também por 1 s, diferindo em
relação ao estímulo de referência seja em freqüência espacial, seja em extensão espacial,
com um estímulo sonoro sinalizando ao sujeito que era necessário responder se o estímulo
de teste era igual ou diferente do estímulo de referência; iv) substituição do estímulo de
teste pelo fundo. A extensão espacial ou a freqüência espacial do estímulo de teste foi
mudada aleatoriamente de tentativa para tentativa usando o método dos estímulos
constantes. Numa série de 300 tentativas, a freqüencia espacial foi variada, noutra série
também de 300 tentativas, a extensão espacial foi variada, sendo que cada estímulo de
teste em cada série foi apresentado pelo menos 10 vezes. A resposta do indivíduo em cada
tentativa era guardada como correta ou errada para posterior construção das curvas
psicométricas. Os pontos experimentais das funções psicométricas para espaço e
freqüência espacial em cada nível de contraste, correspondentes aos percentuais de acertos,
foram ajustados com funções gaussianas usando-se o método dos mínimos quadrados. Para
cada nível de contraste, as entropias para espaço e freqüência espacial foram estimadas
pelos desvios padrões dessas funções gaussianas e a entropia conjunta foi obtida
multiplicando-se a raiz quadrada da entropia para espaço pela entropia para freqüência
espacial. Os valores de entropia conjunta foram comparados com o mínimo teórico para
sistemas lineares, 1/4π ou 0,0796. Para freqüências espaciais baixas e intermediárias, a
entropia conjunta atingiu níveis abaixo do mínimo teórico em contrastes altos, sugerindo
interações não lineares entre dois ou mais mecanismos visuais. Este fenômeno occorreu em
todas as condições (acromática, cromática e cromática eqüiluminante) e foi mais acentuado
para a frequência espacial de 0,4 ciclos / grau. Uma possível explicação para este
fenômeno é a interação não linear entre as vias visuais retino-genículo-estriadas, tais como
as vias K, M e P, na área visual primária ou em níveis mais altos de processamento neural. / The objective of this study was to estimate the joint entropy of the human visual
system in the domains of space and spatial frequency by using psychometric functions. The
psychometric functions were obtained from stimulus discrimination that had luminance or
chromaticity modulated by Gábor functions. The method consisted in evaluating the
entropy in the space domain by testing subject capacity to discriminate stimuli that differed
only in their spatial extent and in evaluating the entropy in the spatial frequency domain by
testing subject capacity to discriminate stimuli that differed only in their spatial frequency.
The joint entropy was then estimated from these two individual entropy values. Three
visual conditions were studied: achromatic, chromatic without fine tuning correction of
equiluminance, and chromatic with full equiluminance correction by using heterochromatic
flickker photometry. Four subjects were tested in all conditions, two additional subjects
were tested in the chromatic condition without fine equiluminance adjustment and a
seventh subject also performed the acrhomatic test. All subjects were examined by an
ophthalmologist, their eyes and visual system were considered normals, and presented no
report, symptoms or signs of visual dysfunctions or diseases that could have affected their
visual system. The subjects had their normal or corrected visual acuity of 20/30 minimum.
The work was approved by the Comissão de Ética em Pesquisa (Núcleo de Medicina
Tropical, UFPA) and followed the recomendations of the Helsinki Declaration. The Gábor
functions used for luminance or chromaticity modulation comprised unidimensional
horizontal sinusoidal gratings, modulated in the vertical direction, with bidimensional
Gaussian envelopes whose spatial extent was measured by their standard deviation. Stimuli
were generated by using a software written in Pascal in a Delphi 7 Enterprise environment.
A Dell Precision 390 Workstation was used together with a CRS VSG ViSaGe stimulus
generator to display the stimuli in a CRT monitor, 20”, 800 x 600 pixels, 120 Hz, RGB,
Mitsubishi Diamond Pro 2070SB. In the achromatic experiments, the stimuli were
generated by white luminance modulation (CIE1931: x = 0.270, y = 0.280; CIE1976: u’ =
0.186, v’ = 0.433), 44,5 cd/m2 mean luminance. In the chromatic experiments, mean
luminance was kept in 15 cd/m2, and two series of red-green stimuli were used. In the first
series, two chromaticities defined on the M-L axes of the DKL color space were used
(CIE1976: green, u’=0.131, v’=0.380; red, u’=0.216, v’=0.371). In the second series, two
chromaticities were defined along a red-green horizontal axis across the CIE1976 color
space (CIE1976: green, u’=0.150, v’=0.480; red, u’=0.255, v’=0.480). Throughout the
experiment, the reference stimuli comprised gratings with three different spatial
frequencies (0.4, 2, and 10 cycles per degree) and a Gaussian envelope with 1 degree
standard deviation. The test stimuli comprised 19 different spatial frequencies in the region
of the reference spatial frequency and 21 different Gaussian envelopes in the region of the
reference standard deviation. In the achromatic condition, four levels of Michelson contrast
were studied: 2%, 5%, 10% e 100%. In the two chromatic conditions, the highest level of
pooled cone contrast allowed by the CRT gamut was used, 17%. The procedure consisted
of a two interval forced choice with the following steps: i) 1 s display of the reference
stimulus; ii) 1 s replacement of the reference stimulus by a background with the same
luminance and chromaticity; iii) 1 s display of the test stimulus which differed from the
reference stimulus either in spatial frequency or spatial extent, together with a beep to tell
the subject that it was now neccessary to provide a response if the two stimuli were equal
or different; iv) replacement of the test stimulus by the background. The spatial extent or
spatial frequency of the test stimulus was randomly changed from trial to trial by usind the
method of constant stimuli. In a series comprising 300 trials, the spatial frequency was
changed while in another series also comprising 300 trials, the spatial extent was changed,
each test stimulus in each series being displayed at least 10 times. The subject response in
every trial was stored as correct or incorrect for further use to estimate the psychometric
function. The experimental data of the psychometric functions for spatial extent and spatial
frequency at each contrast level, which corresponded to percent of correct responses, were
fitted with Gaussian functions using the Least Square Method. For each contrast level, the
spatial extent entropy and spatial frequency entropy were estimated from the standard
deviations of these Gaussian functions. The joint entropy was then calculated by
multiplying the square root of the spatial extent entropy by the spatial frequency entropy.
The joint entropy values were compared with the theoretical minimum predicted for linear
systems, 1/4π or 0.0796. For low and intermediate spatial frequencies at high contrasts, the
joint entropy reached very low levels, below this minimum, suggesting that there were
nonlinear interactions between two or more visual mechanisms. This phenomenon
occurred in all conditions (achromatic, chromatic, and chromatic with fine equiluminance
adjustment) and was more pronounced for spatial frequency 0.4 cycles / degree. A possible
explanation for this phenomenon is the occurrence of nonlinear interactions between the
retino-geniculo-striate visual pathways, such as the K, M, and P pathways, in the primary
visual area or in higher levels of neural processing of visual information.
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Aspectos morfológicos comparativos entre neurônios da camada I do córtex visual de duas espécies de roedores: Cavia porcellus e Rattus norvegicusMOREIRA, Thayana de Nazaré Araújo 20 August 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A camada I tem como característica principal a baixa quantidade de neurônios e uma alta densidade de fibras nervosas. A morfologia dos neurônios da camada I ainda é pouco estudada, tanto que nos estudos que avaliaram a morfologia desses neurônios não se chegou ainda a um consenso sobre as formas e funções desses neurônios. Este estudo avaliou a morfologia dos neurônios da camada I do córtex visual de duas espécies de roedores: Cavia porcellus, popularmente conhecido no Brasil como porquinho-da-índia e Rattus norvegicus, que é o rato e foi utilizada a linhagem Wistar, comumente usado nas pesquisas científicas. O porquinho-da-índia é um modelo animal muito estudado, utilizado em diversos segmentos da ciência. Apesar dessa espécie ser bem estudada, trabalhos na camada I desse animal são relativamente raros, especialmente em relação à morfologia e eletrofisiologia dos neurônios dessa região cortical. Pesquisas em ratos sobre os neurônios da camada I são mais frequentes, tanto em relação a morfologia quanto a eletrofisiologia. Para discriminar as possibilidades de diferenças na morfologia dos neurônios da camada I do córtex visual do porquinho-da-índia e do rato, este estudo classificou esses neurônios de acordo com a trajetória de seus dendritos e analisou as medidas dendríticas utilizando a técnica de injeção intracelular de biocitina. Após a classificação dos neurônios as comparações foram feitas entre os mesmos tipos celulares de cada roedor. Foram utilizados 35 porquinhos-da-índia da variedade Dunkin-Hartley de pêlo curto de ambos os sexos com idades de 4 a 5 dias de vida pós-natal. Quanto aos ratos, foram utilizados 30 ratos da variedade Wistar, de ambos os sexos com idades de 14 a 21 dias de vida pós-natal. Os animais foram anestesiados e tiveram seus encéfalos removidos, hemisférios separados e foram realizados cortes no plano coronal na região occipital onde se localiza a área visual dos roedores. As fatias foram mantidas em líquido cérebro-espinhal artificial e em seguida levadas ao microscópio para injeção de biocitina e posteriormente foram fixadas e tratadas para montagem em lâmina e contracoradas com Nissl para melhor visualização. Os neurônios encontrados foram classificados como: horizontais, ascendentes, descendentes e radias. Foram analisadas as seguintes medidas dendríticas: área do campo receptor, comprimento dendrítico total e médio, área total do corpo celular, número de dendritos, distância da pia-máter e análise da distribuição de Sholl. Dos resultados obtidos os mais notáveis foram o alcance dos ramos dendríticos e o tamanho do corpo celular dos neurônios da camada I do porquinho-da-índia quando comparados aos do rato. Isso sugere que, nessa espécie, um maior número de microcircuitos neurais podem ser estabelecidos, e por conseguinte maior taxa metabólica, justificada pelo maior tamanho do corpo celular. / The layer I has as main characteristic the low number of neurons and a high density of nerve fibers. The morphology of neurons of layer I is still understudied, so that in studies evaluating the morphology of these neurons has not yet reached a consensus on the forms and functions of these neurons. This study evaluated the morphology of neurons in layer I of the visual cortex of two rodent species: Cavia porcellus, popularly known in Brazil as a guinea pig and Rattus norvegicus, which is the rat and the Wistar strain was used, commonly used in scientific research. The guinea pig is a widely studied animal model used in several areas of science. Although this species is well studied, works on layer I of this animal are relatively rare, especially in relation to morphology and electrophysiology of neurons in this cortical region. Research in rats on neurons of layer I are more frequent, both in relation to morphology and electrophysiology. To discriminate the potential for differences in the morphology of neurons in layer I of the visual cortex of the guinea pig and mouse, this study classified these neurons according to the trajectory of their dendrites and dendritic measures analyzed using the technique of intracellular injection of biocytin. After classification of neurons comparisons were made between the same cell types of each rodent. 35 guinea India Dunkin-Hartley variety of short-haired of both sexes aged 4-5 days of postnatal life were used. As for the rats, 30 rats of Wistar variety of both sexes aged 14 to 21 days of postnatal life were used. The animals were anesthetized and had their brains removed, separated hemispheres and sections were made in the coronal plane in the occipital region where is located the visual area of rodents. Slices were maintained in artificial cerebrospinal fluid and then brought to the microscope to inject biocytin and subsequently were fixed and treated for mounting on slides and counterstained with Nissl for better viewing. Neurons found were classified as horizontal, ascending, descending and radial. The receptive field area, total and average dendritic length, total area of the cell body, dendrites number, distance from the pia mater and distribution analysis Sholl: The following dendritic measures were analyzed. Results of the most notable were the extent of dendritic branches and the size of the cell body of neurons of layer I of the guinea pig compared to rat. This suggests that in this species, a larger number of neural microcircuits can be established, and therefore greater metabolic rate justified by the size of the cell body.
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Incompatibilidade cinemática, imersão de domínios e modelagem constitutiva de multiescala : nexo com a modelagem do sistema cardiovascularPablo Javier Blanco 05 June 2008 (has links)
O objetivo do presente trabalho é estabelecer bases teóricas bem fundadas, dentro do contexto variacional, a fim de dar unificação a diversos conceitos que surgem nas seguintes áreas: (i) a modelagem empregando modelos cinematicamente incompatíveis, (ii) a modelagem da interação fluido-estrutura usando métodos de domínios imersos e (iii) a modelagem constitutiva de materiais por meio de técnicas de multiescala. A motivação para abordar cada uma destas problemáticas, e o ponto em comum entre elas, é a modelagem do sistema cardiovascular humano. Portanto, a tese está dividida em três partes.
Em primeiro lugar, estabelecem-se as bases variacionais para abordar de forma sistemática a formulação do problema de acoplamento de modelos que possuem cinemáticas incompatíveis. Esta maneira de tratar o problema permite estender os conceitos de forma direta para lidar com o acoplamento de modelos de diferente dimensão. Logo, estes conceitos são aplicados em duas situações, no acoplamento de modelos estruturais com diferentes cinemáticas subjacentes e, principalmente, no acoplamento de modelos de fluidodinâmica de diferente dimensão visando a modelagem do escoamento do sangue no sistema cardiovascular humano. Diversos exemplos e situações são contemplados neste último caso.
Em segundo lugar, trata-se o problema de interação fluido-estrutura empregando idéias de imersão de domínios. Sempre dentro de um marco variacional claro e construtivo, colocam-se os princípios variacionais que governam a interação de um fluido com sólidos de forma arbitrária e com sólidos que podem ser caracterizados como estruturas delgadas. Assim, por um lado desenvolve-se o denominado método de domínios imersos que generaliza o método de elementos finitos imersos e o método de domínios fictícios. Por outro lado, constrói-se o método de cascas imersas que generaliza o conhecido método de contornos imersos. Apresentam-se também diversos exemplos numéricos de interação entre um fluido e corpos rígidos.
Em terceiro e último lugar, trabalha-se com a modelagem constitutiva empregando técnicas de multiescala, novamente empregando o ferramental variacional. Aqui revisita-se a base teórica existente e realiza-se uma extensão das idéias usando princípios variacionais duais. Além disso, fornecem-se diversas implementações computacionais, as quais são usadas para apresentar dois exemplos, o primeiro na modelagem de materiais porosos e o segundo na modelagem do tecido biológico encontrado na conformação da parede arterial.
Em todos os casos, o objetivo não é só prover uma forma final para a formulação de um problema, mas também desvendar o processo de construção que há por trás dos modelos, mostrando passo a passo as considerações utilizadas assim como as conseqüências de tais hipóteses. Com isto procura-se obter um ganho no entendimento dos conceitos teóricos envolvidos, assim como uma maior facilidade na aplicação destas idéias a novas situações.
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