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Dinâmica do crescimento de espumas molhadasFortuna, Ismael January 2010 (has links)
O estudo dos sistemas que apresentam padrões celulares é motivado pela frequência com que são encontrados na natureza, bem como sua grande aplicabilidade tecnológica. Sistemas celulares biológicos, sólidos policristalinos, espumas, entre outros, têm em comum uma estrutura formada por domínios, e diferentes regimes estruturais e de dinâmica para diferentes frações entre as fases envolvidas. A maioria dos trabalhos publicados até hoje se limitou aos casos limites de diluição entre as fases do sistema, ou seja, ao limite em que a fase celular está muito diluída, caracterizando o Amadurecimento de Ostwald (ou do inglês, Ostwald Ripening), e o limite oposto, quando os domínios estão em contato direto entre si, e que o seu crescimento é descrito pela lei de von Neumann-Mullins. Este trabalho compila os conhecimentos sobre a estrutura e a dinâmica desta classe de sistemas, e explora os efeitos decorrentes das frações entre as fases. Também apresenta os resultados obtidos pelas simulações realizadas utilizando o modelo GGH, para diversas frações entre fases e que reproduzem os resultados conhecidos para os casos limites, bem como mostram que o crescimento em escala não é algo específico destes limites. E, por final, apresenta uma tentativa de escrever uma expressão matemática para a taxa de crescimento dos domínios que conecte as teorias limites, como sendo apenas função de variáveis relacionadas à sua geometria. / The study of systems that exhibit cellular patterns is motivated not only by the frequency with which they are found in nature, but also by their wide application in technology. Biological systems, policrystal solids, soap froth, and others, have in common a structure formed by domains, and different structural and dynamic regimes for different fractions between the phases in the system. Most studies have been limited to the limit cases where the dilution between the phases of the system, i.e., the threshold at which cell phase is very dilute, featuring Ostwald Ripening, and the opposite limit, when the domains are in direct contact with each other, and where its growth is described by the law of von Neumann-Mullins. This work compiles the knowledge of the structure and dynamics of this class of systems, and explores the effects of the different fractions between the phases. It also presents the results obtained by simulations using the GGH model for these various fractions between regimes and reproducing the known results for the limiting cases and showing that the scale growth is not specific to these limits. Yet, it presents, an attempt to write a mathematical expression for the rate of growth of the areas that connect the limit theories through a function of the variables related to the system geometry.
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Dinâmica do crescimento de espumas molhadasFortuna, Ismael January 2010 (has links)
O estudo dos sistemas que apresentam padrões celulares é motivado pela frequência com que são encontrados na natureza, bem como sua grande aplicabilidade tecnológica. Sistemas celulares biológicos, sólidos policristalinos, espumas, entre outros, têm em comum uma estrutura formada por domínios, e diferentes regimes estruturais e de dinâmica para diferentes frações entre as fases envolvidas. A maioria dos trabalhos publicados até hoje se limitou aos casos limites de diluição entre as fases do sistema, ou seja, ao limite em que a fase celular está muito diluída, caracterizando o Amadurecimento de Ostwald (ou do inglês, Ostwald Ripening), e o limite oposto, quando os domínios estão em contato direto entre si, e que o seu crescimento é descrito pela lei de von Neumann-Mullins. Este trabalho compila os conhecimentos sobre a estrutura e a dinâmica desta classe de sistemas, e explora os efeitos decorrentes das frações entre as fases. Também apresenta os resultados obtidos pelas simulações realizadas utilizando o modelo GGH, para diversas frações entre fases e que reproduzem os resultados conhecidos para os casos limites, bem como mostram que o crescimento em escala não é algo específico destes limites. E, por final, apresenta uma tentativa de escrever uma expressão matemática para a taxa de crescimento dos domínios que conecte as teorias limites, como sendo apenas função de variáveis relacionadas à sua geometria. / The study of systems that exhibit cellular patterns is motivated not only by the frequency with which they are found in nature, but also by their wide application in technology. Biological systems, policrystal solids, soap froth, and others, have in common a structure formed by domains, and different structural and dynamic regimes for different fractions between the phases in the system. Most studies have been limited to the limit cases where the dilution between the phases of the system, i.e., the threshold at which cell phase is very dilute, featuring Ostwald Ripening, and the opposite limit, when the domains are in direct contact with each other, and where its growth is described by the law of von Neumann-Mullins. This work compiles the knowledge of the structure and dynamics of this class of systems, and explores the effects of the different fractions between the phases. It also presents the results obtained by simulations using the GGH model for these various fractions between regimes and reproducing the known results for the limiting cases and showing that the scale growth is not specific to these limits. Yet, it presents, an attempt to write a mathematical expression for the rate of growth of the areas that connect the limit theories through a function of the variables related to the system geometry.
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Dinâmica do crescimento de espumas molhadasFortuna, Ismael January 2010 (has links)
O estudo dos sistemas que apresentam padrões celulares é motivado pela frequência com que são encontrados na natureza, bem como sua grande aplicabilidade tecnológica. Sistemas celulares biológicos, sólidos policristalinos, espumas, entre outros, têm em comum uma estrutura formada por domínios, e diferentes regimes estruturais e de dinâmica para diferentes frações entre as fases envolvidas. A maioria dos trabalhos publicados até hoje se limitou aos casos limites de diluição entre as fases do sistema, ou seja, ao limite em que a fase celular está muito diluída, caracterizando o Amadurecimento de Ostwald (ou do inglês, Ostwald Ripening), e o limite oposto, quando os domínios estão em contato direto entre si, e que o seu crescimento é descrito pela lei de von Neumann-Mullins. Este trabalho compila os conhecimentos sobre a estrutura e a dinâmica desta classe de sistemas, e explora os efeitos decorrentes das frações entre as fases. Também apresenta os resultados obtidos pelas simulações realizadas utilizando o modelo GGH, para diversas frações entre fases e que reproduzem os resultados conhecidos para os casos limites, bem como mostram que o crescimento em escala não é algo específico destes limites. E, por final, apresenta uma tentativa de escrever uma expressão matemática para a taxa de crescimento dos domínios que conecte as teorias limites, como sendo apenas função de variáveis relacionadas à sua geometria. / The study of systems that exhibit cellular patterns is motivated not only by the frequency with which they are found in nature, but also by their wide application in technology. Biological systems, policrystal solids, soap froth, and others, have in common a structure formed by domains, and different structural and dynamic regimes for different fractions between the phases in the system. Most studies have been limited to the limit cases where the dilution between the phases of the system, i.e., the threshold at which cell phase is very dilute, featuring Ostwald Ripening, and the opposite limit, when the domains are in direct contact with each other, and where its growth is described by the law of von Neumann-Mullins. This work compiles the knowledge of the structure and dynamics of this class of systems, and explores the effects of the different fractions between the phases. It also presents the results obtained by simulations using the GGH model for these various fractions between regimes and reproducing the known results for the limiting cases and showing that the scale growth is not specific to these limits. Yet, it presents, an attempt to write a mathematical expression for the rate of growth of the areas that connect the limit theories through a function of the variables related to the system geometry.
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A MANIPULAÇÃO DA PROLE DURANTE O PERÍODO LACTACIONAL MODIFICA A MORFOFISIOLOGIA MATERNACancian, Cláudia Regina Capriglioni 27 February 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-02-27 / The excess of adipose tissue associated to pathological states, characterizes obesity and overweight. Recent studies have pointed out that the obesity might originate from hormonal and/or neural changes occurred in critical periods of development. Lactation is considered an
important developmental window; nutritional changes in this phase might program the offspring metabolism to determine the installation of obesity in adult life. Within this context, few studies have explored the mother adjustments to the offspring changes. Objective: The objective of this present study was to investigate the mother’s morpho-physiological adaptations promoted by the offspring obesity induced in the lactation period. Methodology: Mothers of two kinds of obesity
obtained during lactation were studied. In the hyper-nutrition model of lactation the number of offsprings was manipulated 3 days after birth forming a reduced-litter (NR, 3 offsprings) and normal-litter (NN, 9 offsprings). In the hypothalamic obesity model the offsprings received
monosodium glutamate (MSG, 4g/Kg) or saline (CON, control) from the 2nd day after birth for five
consecutive days. Thus, 4 groups of mothers were evaluated: Mothers-NR x Mothers-NN;Mothers-MSG x Mothers-CON. All groups had body weight and food intake monitored throughout the lactation period. The litter weight was also evaluated during this period. On the 21st day of lactation, after weaning, the rats were anesthetized and received a dose of oxytocin (5U/I) to
stimulate milk ejection. Then the milk was collected and aliquots used for the analysis of composition by the creamatocrit and proteins. Next, the rats were sacrificed and the blood collected for biochemical analysis and the fat deposits were extracted and weighed. Mammal
tissue samples, white adipose tissue (WAT), brown adipose tissue (BAT) and pancreas were all
submitted to histological procedures, dyed with H&E and analyzed through microscopy. The milk leukocytes content was also evaluated through the histological technique. Data were expressed as mean ± standard error of the mean (sem) and evaluated through the Student t test (p<0,05). Results and Discussion: Mothers-NR presented about 36% reduction in the consumption of food and water. 10% reduction in food intake, without changes in water consumption was observed with the Mothers-MSG. There was no alteration of body weight. However, Mothers-NR and Mothers-MSG presented increase of about 56% and 40%, respectively, in ovary fat content.
These changes were followed by retroperitoneal fat adipose hypertrophy, (Mothers-NR 67%, Mothers-MSG 22%). The Mothers-NR presented ovary fat hypertrophy (30%), also presented 28% increase in the number of BAT adipose. Biochemical measurements of plasma revealed that both groups presented increase in glucose (Mothers-NR 33%, Mothers-MSG 35%) triglycerides
(Mothers-NR 43%, Mothers-MSG 73%) and insulin (Mothers-NR 46%, Mothers-MSG 69%) when compared to the control groups. However, only the Mothers-NR presented changes followed by increase in the milk calories (32%) and fat content (44%). The Mothers-MSG’s milk presented only increase in the amount of leukocytes (54%). The mammal gland in both groups presented
increase in adipose content (Mothers-NR 1215%, Mothers-MSG 41%). Morphological changes were also observed in the endocrine pancreas of both groups. Mothers-MSG’s pancreatic islets presented hypertrophy (69%), while the Mothers-NR’s pancreatic islets presented hypotrophy (24%) in relation to the control groups. Morpho-physiological adjustments observed in this data
are probably related to the lower energy demand, promoted by the reduction in the number of offsprings, in the case of Mothers-NR and due to changes of suction provoked in the MSG offsprings by the hypothalamic lesion induced by MSG. Conclusion: Data analysis shows that
the offspring manipulation promoted the following mother adaptations: i) increase in body fat content and changes in the lipid profile and mother plasma carbohydrates. ii) changes in the milk composition, with increase in the caloric content. These changes were followed by alteration of the mammal gland morphology. iii) changes in the endocrine pancreas histo-morphology, increasing insulin circulating levels. / O acúmulo excessivo de tecido adiposo associado à estados patológicos, caracteriza a obesidade e sobrepeso. Estudos recentes apontam que a obesidade pode ser oriunda das alterações hormonais e/ou neurais ocorridas em períodos críticos do desenvolvimento. A
lactação é considerada uma importante janela do desenvolvimento, alterações nesta fase podem programar o metabolismo do filhote e determinar a instalação de obesidade na vida adulta. Dentro deste contexto, poucos estudos exploram os ajustes maternos frente a de modificações da prole. Objetivo: Deste modo, o objetivo do presente estudo foi investigar as adaptações morfofisiológicas maternas promovidas pela obesidade da prole induzida no período lactacional. Metodologia: Progenitoras de dois modelos de obesidade obtidos durante a lactação foram estudadas. No modelo de hipernutrição lactacional o número de filhotes da prole
foi manipulado no 3º dia após o nascimento, formando Ninhada-Reduzida (NR, 3 filhotes) e Ninhada-Normal (NN, 9 filhotes). No modelo de obesidade hipotalâmica, os filhotes receberam no 2º dia após o nascimento glutamato monossódico (MSG, 4g/Kg) ou salina (CON, controles)
durante 5 dias consecutivos. Assim, 4 grupos de mães foram avaliadas: Mães-NR versus Mães-NN; Mães-MSG versus Mães-CON. Para todos os grupos foi acompanhado o peso corporal e a ingesta alimentar durante a lactação. O peso das ninhadas também foi avaliado neste período.
No 21º de lactação, as ratas foram anestesiadas e receberam uma dose de ocitocina (5U/I) para estimular ejeção do leite. Posteriormente, o leite foi coletado e alíquotas usadas para análises da composição pelo crematócrito e dosagens das proteínas. Em seguida, as ratas foram sacrificadas, o sangue coletado para análises bioquímicas e os depósitos de gordura retirados e pesados. Amostras do tecido mamário, tecido adiposo branco (TAB), tecido adiposo marrom (TAM) e do pâncreas foram submetidas a procedimentos histológicos, coradas com hematoxilina e eosina (H&E) e analisadas sob microscópio de luz. O teor de leucócitos do leite também foi
avaliado por técnica histológica. Os dados foram expressos como média ± erro padrão médio (epm) e avaliados pelo teste t de Student (p<0,05). Resultados e Discussão: Mães-NR apresentaram redução de aproximadamente 36% no consumo de ração e água. Redução de 10% na ingesta alimentar, sem alterar o consumo de água também foi observado nas Mães-
MSG. Em ambos, o peso corporal não foi afetado. Todavia, Mães-NR e Mães-MSG apresentaram aumentos de aproximadamente 56% e 40%, respectivamente no teor de gordura ovariana. Estas alterações foram acompanhadas de hipertrofia dos adipócitos da gordura
retroperitoneal, (Mães-NR 67%, Mães-MSG 22%). As Mães-NR apresentaram hipertrofia (30%) na gordura ovariana e também apresentaram aumento de 28% no número de adipócitos do TAM. Análises bioquímicas do plasma demonstraram que em ambos os grupos ocorreu aumento de glicose (Mães-NR 33%, Mães-MSG 35%), triglicerídeos (Mães-NR 43%, Mães-MSG 73%) e insulina (Mães-NR 46%, Mães-MSG 69%), comparados aos respectivos grupos controles. Todavia, apenas nas Mães-NR estas alterações foram acompanhadas de aumento das calorias do leite (32%) e do teor de gorduras (44%). O leite de Mães-MSG apresentou apenas aumento na quantidade de leucócitos (54%). A glândula mamária de ambos os grupos apresentou aumento no teor de adipócitos (Mães-NR 1215%, Mães-MSG 41%). Alterações morfológicas também foram observadas no pâncreas endócrino de ambos os grupos. Ilhotas pancreáticas de Mães-MSG apresentaram hipertrofia (70%), enquanto ilhotas pancreáticas de Mães-NR
apresentaram hipotrofia (24%), em relação aos grupos controles. Os ajustes morfofisiológicos observados em nossos dados provavelmente estão relacionados a menor demanda energética, promovida pela redução do número de filhotes da prole, no caso de Mães-NR e por alterações
na sucção provocadas nos filhotes MSG pela lesão hipotalâmica induzida pelo MSG. Conclusão: A análise dos dados demonstra que as manipulações da prole, promoveram as seguintes adaptações maternas: i) Elevação do teor de gordura corporal e alteração do perfil
lipídico e de carboidratos do plasma materno. ii) Modificação da composição do leite, aumentando o teor calórico. Estas mudanças são acompanhadas das alterações na morfologia da glândula mamária. iii) alteração da histomorfologia do pâncreas endócrino, elevando os níveis circulantes de insulina.
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Investiga??o da variabilidade gen?tica em bagres de interesse comercial e para conserva?Moraes Neto, Americo 25 September 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-09-25 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / Currently, studies of aspects of evolutionary biology in neotropical fishes diversity are still lacking, despite the strong environmental impact caused by human action that has
had a negative effect in native species, many of which probably still unknown to science. The knowledge of genetic variability within and between populations is of utmost importance for planning of both fish breeding and conservation of natural populations. In the present study we have analyzed, especially through molecular cytogenetics techniques, 29 specimens of Pseudoplatystoma reticulatum (Paraguay river, state of Mato Grosso do Sul), 14 specimens of Pimelodus britskii (Igua?u river, state of Paran?), 6 specimens of Sorubim lima (Paraguay river, state of Mato Grosso do Sul) and 10 specimens of Steindachneridion parahybae (Para?ba do Sul river, state of S?o Paulo). Results indicate 2n = 56 chromosomes for all species, a distinct
karyotype formula composed mainly of biarmed chromosomes. Other particular features were found, regarding the location for Ag+NORs and fluorescent in situ hybridization with 5S and 18S probes. Except P. britskii, which showed NORs in the
terminal region of the long arm, all species showed Ag+NORs in the terminal position of the short arm. Another peculiar feature of this fish was the co-localization of one of the 5S and 18S rDNA sites, which could be considered an apomorphy to the others Pimelodidae studied. The present work aims to contribute to the collection of data on the cytogenetics studies of Siluriformes, considering that much of the here presented information are the first characterization of the karyotype macro-struture of analysed fishes. / Considerando-se a diversidade ictiofaun?stica neotropical, estudos sobre aspectos de biologia evolutiva s?o ainda pouco expressivos. Em contraste, o forte impacto ambiental causado pela a??o humana tem refletido negativamente sobre as esp?cies nativas, muitas ainda desconhecidas da ci?ncia. O conhecimento da variabilidade gen?tica intra e inter populacional ? de extrema import?ncia para o planejamento tanto da piscicultura quanto para a conserva??o das popula??es naturais. No presente trabalho foram analisados citogeneticamente, sobretudo aplicando t?cnicas de
citogen?tica molecular, 29 exemplares de Pseudoplatystoma reticulatum (rio Paraguai, MS), 14 esp?cimes de Pimelodus britskii (rio Igua?u, PR), 6 indiv?duos de Sorubim lima (rio Paraguai, MS), e 10 exemplares de Steindachneridion parahybae (rio Para?ba do Sul, SP). Os dados obtidos revelaram 2n = 56 cromossomos para todas as esp?cies analisadas, f?rmulas cariot?picas distintas, compostas basicamente de cromossomos de dois bra?os e caracter?sticas pr?prias em rela??o ? localiza??o das RONs atrav?s da impregna??o pelo ?on Ag+ e pela hibrida??o fluorescente in situ com sondas de DNAr 5S e 18S. Com exce??o de P. britskii, que apresentou RONs na regi?o terminal do bra?o longo, todas as outras esp?cies apresentaram marca??es
das Ag+RONs em posi??o terminal no bra?o curto. Outra caracter?stica peculiar de P. britskii foi a localiza??o sint?nica de um dos s?tios de DNAr 5S e o 18S em cromossomos subteloc?ntricos, atributo que pode ser considerado uma apomorfia em rela??o a outros pimelod?deos estudados. O presente estudo visa contribuir com o acervo de dados citogen?ticos a respeito dos Siluriformes em estudo, considerandose que muitas das informa??es correntes tratam-se das primeiras caracteriza??es da macroestrutura cariot?pica das esp?cies de peixes analisadas.
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Evolução da diferenciação cromossômica entre os sexos no Gênero Gymnotus (Gymnotiformes, Gymnotidae )Silva, Maelin da 12 March 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-03-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The order Gymnotiformes ranges the electrical fish. It’s distributed by South and Central America. Family Gymnotidae show two genus; Gymnotus and Eletrophurus, the last one was recently included in this family. Genus Gymnotus is the most widespread and show 33 species and present great number of cytogenetics studies. Our objectives in the present study were analyse the meiotic behaviour of multiple sexual chromosomes system X1X1X2X2/X1X2Y of G. pantanal, isolate sequences of repetitive DNA from three species of Gymnotus; G. sylvius, G. paraguensis and G. pantanal, inhabiting in simpatry at Piquiri River - PR – BR, verify the association of these sequences with sexual chromosomes and mapping the rDNA 5S gene at G. paraguensis and G. pantanal. Meiotic analysis of G. pantanal presented one trivalent in pachytene of profase I formed by X1, X2 and Y chromosomes, totally paired characterizing a recent sexual chromosomes system. In the metaphase II was visualized cells 18+Y and 18+X1X2 chromosomes with normal disjunction of sexual chromosomes and balanced gametes. The mapping of repetitive DNA sequences, isolated by Cot1, presented location in centromeric and Nucleor Organization Regions (NORs) of all analyzed species, included the sexual chromosomes of G. pantanal, standard similar of heterocromatin obtained by C banding. Hybridization with rDNA 5S probes presented a standard unique for all species analyzed. Our data suggest a recent origin for sex chromosomes of G. pantanal and a differentiate evolutionary dynamic for the distribution of rDNA 5S in the karyotype of species analyzed, suggesting that character can be broadly utilized among the Gyminotidae as cytotaxonomic marker. / A ordem Gymnotiformes compreende os peixes elétricos, que estão amplamente distribuídos pelas Américas Central e do Sul. A família Gymnotidae possui apenas dois gêneros Gymnotus e Eletrophurus, sendo que este último foi recentemente incluído à família. O gênero Gymnotus é o mais especioso da ordem com 33 espécies, e é também o que comporta maior número de estudos citogenéticos. O presente trabalho teve por objetivos analisar o comportamento meiótico do sistema de cromossomos sexuais múltiplo X1X1X2X2/X1X2Y em G. pantanal. Isolar sequências de DNA repetitivo das três espécies que habitam em simpatria o rio Piquiri – Paraná – Brasil: G. sylvius, G. paraguensis e G. pantanal, e neste último a possível associação dessas sequências aos cromossomos sexuais. E mapear o DNAr 5S em G. paraguensis e G. pantanal. A Análise meiótica revelou a formação de um trivalente no estágio de paquíteno da Prófase I em G. pantanal formado pelos cromossomos X1, X2 e Y, pareados complementarmente caracterizando um sistema de determinação sexual recente. A metáfase II apresentou células com 18+Y e 18+X1X2 cromossomos, caracterizando uma disjunção típica dos cromossomos sexuais, dando origem a gametas balanceados. O mapeamento de sequências de DNA repetitivos isolados por C0t – 1 apresentou localização em região centromérica e na região das regiões organizadoras de nucléolos de todas as espécies analisadas, inclusive nos cromossomos sexuais de G. pantanal, padrão coincidente com blocos heterocromáticos. A hibridização com sondas de DNAr 5S revelou padrão de marcação próprio em todas as espécies analisadas. Nossos dados sugerem uma origem recente para os cromossomos sexuais de G. pantanal e uma dinâmica evolutiva diferenciada para distribuição do DNAr 5S no cariótipo das espécies analisadas. Sugerindo que este caráter possa ser mais amplamente utilizado entre os Gymnotidae como marcador citotaxonômico.
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Produção recombinante e caracterização de uma desintegrina da peçonha de Rhinocerophis alternatus (antiga Bothrops alternatus) com atividade antimetastática visando o desenvolvimento de um novo fármacoPontes, Carmen Lucia Salla 28 June 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-06-28 / Universidade Federal de Sao Carlos / This work presents the study of the effects of an RGD disintegrin from Rhinocerophis alternatus (ancient Bothrops alternatus) in key steps of the metastatic cascade. Disintegrins are cysteine-rich peptides, which have several biological activities related to cell-cell interaction and cell adhesion. The correct pairing of disulfide bonds exposes the adhesive motif which confers binding specificity of disintegrins. These molecules selectively blocks the adhesive function of integrins, which directly participate in various physiological and pathological processes. In the first part of this work, we use the DisBa-01, a disintegrin from B.alternatus in fusion with 6 histidines in pET28a expression vector. The DisBa-01 in the flow system inhibited adhesion of B16F10 melanoma cells and platelets to type I collagen and activated the adhesion of B16F10 melanoma cells to type III collagen. In transmigration and adhesion of breast cancer cells MDA-MB-231, the DisBa-01 had the tendency to reduce these stages of metastatic cascade. The disintegrins have been instrumental in the development of molecules with potential therapeutic application and the effects produced by DisBa-01 in this work as well as others from our laboratory, led us in the second part of this work, the production of the disintegrin B.alternatus without the fusion peptide (called ATN) which conferred increased solubility of the disintegrin. ATN was isolated by two molecular exclusions chromatography and ion exchange chromatography and biological characterization was directed to the anti-metastatic effect of this molecule. In this sense, the ATN was unable to promote the adhesion of human erythroleukemia K562 cells, but inhibited the adhesion of tumor cells K562, B16F10 and MDA-MB-231 to fibronectin had no effect in fibroblasts. ATN is not able to detach the fibroblasts adhered to fibronectin but promotes the detachment of K562 and B16F10 cells previously adhered to fibronectin. However, it does not induce fragmentation of cellular DNA, showing no pro-apoptotic effect. In cell proliferation, the ATN has negative effect with 48 hours of incubation with B16F10 tumor cells, but fibroblasts and MDA-MB-231 this effect was not observed. By flow cytometry we observed the interaction of ATN with αvβ3 integrin. The MDA-MB-231 Tx migration was inhibited by ATN and changed the actin cytoskeleton of these cells. However, an increased activity of MMP-9 was observed in MDA-MB-231 treated with ATN and the invasion of MDA-MB-231 was induced by the RGD disintegrin. These results encourage further studies with this disintegrin in seeking the best concentração of the disintegrin, the identification of cytotoxic activity as well as the best method of distribution of this molecule in vivo. / Este trabalho apresenta o estudo dos efeitos de uma desintegrina RGD de Rhinocerophis alternatus (antiga Bothrops alternatus) nas principais etapas da cascata metastática. Desintegrinas são peptídeos ricos em cisteína, os quais apresentam diversas atividades biológicas relacionadas à interação célula-célula e adesão celular. O pareamento correto das pontes de dissulfeto expõe o motivo adesivo, o qual confere a especificidade de ligação das desintegrinas. Estas moléculas seletivamente bloqueiam a função adesiva das integrinas, as quais participam diretamente de diversos processos fisiológicos e patológicos. Na primeira parte deste trabalho utilizamos a DisBa-01, uma desintegrina de B.alternatus fusionada com 6 histidinas em sequência referente ao peptídeo de fusão presente no vetor pET28a. A DisBa-01 em sistema de adesão sob fluxo inibiu a adesão de células de melanoma B16F10 e de plaquetas ao colágeno tipo I e ativou a adesão das células de melanoma B16F10 ao colágeno tipo III. Na transmigração e na adesão das células de câncer de mama MDA-MB-231 pelas células endoteliais, a DisBa-01 apresentou a tendência à redução destas etapas da cascata metastática. As desintegrinas têm sido instrumentos no desenvolvimento de moléculas com potencial aplicação terapêutica e juntamente com esses efeitos apresentados pela DisBa-01 neste trabalho assim como em outros de nosso laboratório, nos conduziu para a segunda parte deste trabalho, a produção da desintegrina de B.alternatus sem o peptídeo de fusão (ATN) que conferiu aumento de solubilidade da desintegrina. A ATN foi isolada através de duas cromatografias de exclusão molecular e uma cromatografia de troca de iônica e a caracterização biológica foi direcionada ao papel anti-metastático desta molécula. Neste sentido, a ATN não foi capaz de promover a adesão das células de eritroleucemia humana (K562), mas inibiu a adesão das células tumorais K562, B16F10 e MDA-MB-231 à fibronectina, mas não apresentou efeito sobre os fibroblastos. A ATN não desadere os fibroblastos aderidos à fibronectina mas, promove o descolamento das células K562 e B16F10 previamente aderidas à fibronectina. No entanto, não induz fragmentação do DNA celular, não apresentando efeito pró-apoptótico. Na proliferação celular, a ATN apresenta efeito com 48 horas de incubação com células tumorais B16F10 mas, em fibroblasto e células MDA-MB-231 esse efeito não foi observado. Por citometria de fluxo verificamos a interação da ATN com a integrina αvβ3. A migração das células MDA-MB-231 Texas foi inibida pela ATN assim como alterou o citoesqueleto de actina destas células. No entanto, um aumento da atividade da MMP-9 foi observado nas células MDA-MB-231 tratadas com ATN assim como a invasão das células MDA-MB-231 foi induzida por esta desintegrina-RGD. Estes resultados incentivam a continuação dos estudos com esse peptídeo no sentido de buscar a melhor concentração desta desintegrina, a identificação de atividade citotóxica assim como melhor método de distribuição desta molécula in vivo.
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Efeito do tratamento com as drogas antipsic?ticas haloperidol e clozapina sobre a infec??o de toxoplasma gondii em cultura de c?lulas retinianas embrion?riasSilva, Val?ria Palheta da 27 April 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-04-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / T. gondii is an obligate intracellular protozoan and the main cause of retinochoroiditis
in humans. The aim of this study was to evaluate the effect of the antipsychotic drugs
haloperidol and clozapine on the course of infection by T. gondii of cultured
embryonic retinal cells. Embryo retinas of Gallus gallus domesticus (E12) were used
for the preparation of mixed monolayer cultures of retinal cells. Cultures were
maintained on plates of 96 and 24 wells by 37?C in DMEM medium supplemented
with 5% fetal bovine serum for 2 days. After this period, cultures were simultaneously
infected with tachyzoites of T. gondii and treated with the antipsychotics haloperidol
and clozapine for 48 hours. Treatment effects were determined by both assessing
cell viability with the MTT method and evaluating infection outcomes in slides stained
with Giemsa. The treatment with haloperidol and clozapine cells infected with T.
gondii resulted in higher viability of these cells, suggesting a possible prevention of
neuronal degeneration induced by T. gondii. Additionally, intracellular replication of
this protozoan in cells treated with haloperidol and clozapine were significantly
reduced, possibly by modulation of the parasite s intracellular calcium concentration / T. gondii ? um protozo?rio intracelular obrigat?rio e a principal causa de
retinocoroidite em humanos. Este estudo foi conduzido para avalia??o do efeito do
tratamento com as drogas antipsic?ticas haloperidol e clozapina sobre a infec??o de
T. gondii em cultura de c?lulas retinianas embrion?rias. Retinas de embri?es de
Gallus gallus domesticus de doze dias (E12) foram usados para prepara??o de
culturas mistas de c?lulas retinianas em monocamada. As culturas foram mantidas
em placas de 24 e 96 po?os ? 37?C em meio DMEM suplementado com 5% de soro
fetal bovino durante 2 dias. Ap?s este per?odo, as culturas foram simultaneamente
infectadas com taquiz?itas de T. gondii e tratadas com os antipsic?ticos haloperidol
e clozapina por 48 horas. Os efeitos dos tratamentos das drogas sobre a infec??o
deste parasito foram determinados pela avalia??o da viabilidade celular pelo m?todo
de MTT e avalia??o de par?metros de infec??o em l?minas coradas pelo m?todo de
giemsa. O tratamento com clozapina e haloperidol de c?lulas infectadas com T.
gondii resultou em menor preju?zo da viabilidade destas c?lulas, o que sugere uma
poss?vel preven??o de degenera??o neuronal induzida por estes antipsic?ticos.
Adicionalmente, a replica??o intracelular deste protozo?rio, em c?lulas tratadas com
clozapina e haloperidol foi significantemente reduzida, possivelmente pela
modula??o da concentra??o intracelular de c?lcio deste parasito
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Nanocompósitos biocompatíveis de poliuretana com hidroxiapatita e nanoceluloseArantes, Thaís Moraes 02 April 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018-04-02 / Polyurethane nanocomposites were prepared with nanoparticles of hydroxyapatite and/or
nanocellulose in order to obtain biocompatible materials. The nanocelluloses were obtained
from sugarcane bagasse, seeking to evaluate their use as a source of cellulose nanofibers.
The conditions of extraction and separation of the nanocelluloses were investigated. The
effect of time and concentration of sulfuric acid was studied, resulting in particles with
reduced size and homogeneity in the size distribution without cellulose degradation. The
cellulose nanocrystals that presented the best results regarding suspension staining,
crystallinity index, thermal properties, particle size and Zeta potential were those hydrolyzed
in 50% H2SO4 at 45 ° C for 2 hours. For the synthesis of the hydroxyapatite (HA)
nanoparticles, a multivariate statistical analysis was carried out using a factorial design with
resolution 23
. From which an empirical model was created that allows the control of the shape
and size of the hydroxyapatite nanoparticles. HA nanoparticles with sizes varying from 8 nm
to 600 nm were formed by oriented coalescence growth mechanism. The structure was
confirmed by images of Electron Transmission Electron Microscopy and Scanning Electron
Microscopy. The hydroxyapatite nanoparticles presented a well-defined nanorod shape with a
narrow size distribution. It was observed that the model was statistically significant and the
main parameter for the growth of crystals in the hydrothermal process was the temperature.
Polyurethanes derived from castor oil were synthesized without residues of their monomers.
The insertion of the nanoparticles into the polymer matrix improved the thermal stability of
the composite. Finally, the cell viability assay showed that polyurethane nanocomposites with
hydroxyapatite are biocompatible and in this way can be used as biomaterial. / Foram preparados nanocompósitos de poliuretana com nanopartículas de hidroxiapatita e/ou
nanocelulose buscando obter materiais biocompatíveis. As nanoceluloses foram obtidas do
bagaço de cana-de-açúcar, buscando avaliar a sua utilização como fonte de nanofibras de
celulose. Foram investigadas as condições de extração e separação das nanoceluloses.
Estudou-se o efeito do tempo e da concentração de ácido sulfúrico, que resultassem em
partículas com tamanho reduzido e homogeneidade na distribuição de tamanho, sem que
houvesse degradação da celulose. Os nanocristais de celulose que apresentaram os melhores
resultados quanto à coloração da suspensão, índice de cristalinidade, propriedades térmicas,
dimensão das partículas e potencial Zeta foram aqueles hidrolisados em H2SO4 50%, a 45 °C
por 2 horas. Para a síntese das nanopartículas de hidroxiapatita (HA) foi realizada uma
análise estatística multivariada usando um planejamento fatorial com resolução 23
. A partir
do qual criou-se um modelo empírico que permite o controle da forma e tamanho das
nanopartículas de hidroxiapatita. Foram sintetizadas nanopartículas de HA com tamanhos
variando entre 8 nm e 600 nm, formados por mecanismo de crescimento por coalescência
orientada. A estrutura foi confirmada por imagens de Microscopia Eletrônica de Transmissão e
Microscopia Eletrônica de Varredura. As nanopartículas de hidroxiapatita apresentaram
formato de nanorod bem definidas e com estreita distribuição de tamanho. Observou-se que
o modelo foi estatisticamente significativo e o parâmetro principal para o crescimento de
cristais no processo hidrotérmico foi à temperatura. Poliuretanas derivadas do óleo de
mamona foram sintetizadas sem resíduos de seus monômeros. A inserção das nanopartículas
na matriz polimérica melhorou a estabilidade térmica do compósito. Por fim, o ensaio de
viabilidade celular mostrou que nanocompósitos de poliuretana com hidroxiapatita são
biocompatíveis e desta forma podem ser utilizados como biomaterial.
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Implicações clinicopatológicas da proteína epCAM no carcinoma ductal infiltrante de mama / Clinicopathological implications of EpCAM protein in invasive ductal carcinoma of breastCAIXETA, Gustavo Nogueira 31 July 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-07-31 / Breast cancer is the second most common tumor in the world and the first among women. In the past two decades, several breast cancer studies focused on the expression and on the possible routes of cellular signaling for the epithelial cell
adhesion molecule (EpCAM). This molecule was found to be overexpressed in various malignant tissues of epithelial origin, including breast cancer. The importance of EpCAM protein in tumor cells is still controversial. First, because it is believed that the cell adhesion role of EpCAM reduces the ability of metastasis. On the other hand, replacing the strong cell adhesion performed by cadherins instead of weak homophilic
adhesion of EpCAM may be associated with the promotion of invasion and tumor metastasis. The aim of our study was to analyze the implications of EpCAM in breast ductal carcinoma infiltration. By using immunohistochemistry methods, we noticed the absence of EpCAM expression in 10 case (10,2%), low EpCAM levels expression in 45 cases (45,9%) and overexpression in 43 cases (43,9%). Unlike other published
studies, the overexpression of the EpCAM protein did not correlate with the five-year overall survival of breast cancer patients, even those with axillary lymph node involvement. Similarly, there was no correlation between EpCAM s protein expression and classical prognostic factors, including the size of the tumor, axillary lymph node involvement, hormone receptors, c-erbB-2 overexpression and p53 immunodetection.
The presence of distant metastasis , reported in 26 cases (26,5%), did not correlate significantly with the overexpression of EpCAM / O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais freqüente no mundo e o primeiro entre as mulheres. Há cerca de duas décadas, diversos estudos sobre câncer de mama enfocaram a expressão e as possíveis rotas de sinalização celular da molécula de adesão celular epitelial (EpCAM). Esta molécula foi encontrada hiperexpressa em vários tecidos neoplásicos de origem epitelial, incluindo o câncer de mama. A importância da proteína EpCAM no suporte celular de tumores é controversa. Por um lado, acredita-se que a função de adesão celular de EpCAM reduza a capacidade de metastatização, mas por outro lado, a substituição da forte adesão celular de caderinas
pela fraca adesão homofílica de EpCAM estaria associada à promoção de invasão tumoral e metástase. Nosso estudo consiste na análise das implicações clínicopatológicas da proteína EpCAM no carcinoma ductal infiltrante de mama. Utilizando técnicas de imuno-histoquímica, observamos a ausência da expressão de EpCAM em 10 casos (10,2%), baixa expressão em 45 casos (45,9%) e superexpressão em 43 casos (43,9%). Diferentemente de outros estudos, a superexpressão da proteína EpCAM não se correlacionou com a sobrevida global das pacientes em cinco anos, nem mesmo
naquelas com comprometimento de linfonodos axilares. Da mesma forma, não houve correlação da expressão da proteína EpCAM com nenhum dos fatores prognósticos analisados, entre eles tamanho do tumor, linfonodos axilares, receptores hormonais, cerbB-2 e p53. A presença de metástase à distância, relatada em 26 casos (26,5%) não correlacionou-se significativamente com a superexpressão de EpCAM
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