La contaminación ambiental debida a la utilización de plaguicidas ha hecho aumentar dramáticamente la presencia de estas sustancias tóxicas en el medio ambiente. Debido la problemática implícita en el uso de plaguicidas se hace necesario el estudio de los efectos tóxicos que tienen en los organismos no diana. Estas sustancias van a ejercer efectos tóxicos considerables sobre pequeños organismos, pertenecientes al zooplancton, que desempeñan un papel fundamental dentro de las cadenas tróficas acuáticas, por tanto un efecto negativo sobre estas poblaciones repercutirá considerablemente en eslabones superiores de la cadena trófica. Dentro del zooplancton, el crustáceo D. magna constituye una pieza clave en los estudios de toxicología acuática.En la Comunidad Valenciana se encuentra muy extendido el uso del acaricida Tetradifón en los cultivos de cítricos y el herbicida Propanil es ampliamente utilizado en los arrozales que rodean el parque natural de la Albufera.Para evaluar los posibles efectos de estos plaguicidas sobre la fisiología del crustáceo D. magna se han realizado los siguientes estudios: ensayos de toxicidad aguda, estudios de toxicidad crónica, efectos sobre el comportamiento filtrador y efectos sobre el metabolismo energético (niveles tisulares de glucógeno, lípidos, proteínas y contenido calórico tanto por individuo como por peso seco). Para ello se han utilizado concentraciones subletales de cada uno de los tóxicos evaluados, en el caso del metabolismo energético se realizaron estudios a diferentes tiempos de exposición.En los ensayos de toxicidad crónica se evaluó la reproducción, crecimiento y supervivencia de D. magna expuesta a diferentes concentraciones de Tetradifón y Propanil, estos parámetros sufrieron una disminución ante la presencia de los tóxicos en el medio, siendo la reducción directamente proporcional a la concentración de plaguicida presente en el medio. Las tasas de filtración e ingestión del alimento por parte de D. magna se vieron reducidas por la presencia del Tetradifón y el Propanil en el medio. Los niveles tisulares de glucógeno, lípidos y proteínas se vieron reducidos al aumentar la concentración de plaguicida presente en el medio así como al aumentar el tiempo de exposición. El descenso en el contenido calórico se debió al efecto que los plaguicidas tuvieron sobre el glucógeno, los lípidos y las proteínas. / The use of pesticides is increasing world-wide as the need for selective weed control becomes more important. Because there is considerable potential for the contamination of waterbodies with pesticides through spray drift, runoff and direct overspray, it is important to assess the adverse impacts that these chemicals have on nontarget organisms in aquatic ecosystems. Propanil and Tetradifon are pesticides widely used for plants protection, their application can produce adverse effects on aquatic ecosystems in areas nearby agricultural fields. Daphnids, especially Daphnia magna, have been used for many years in standard test of toxicity, because of their high sensitivity, easy handling and high reproduction rate.In the present study, several endpoints of Tetradifon and Propanil toxicological effects were observed in Daphnia magna. The first endpoint was determining reproduction and growth effects during 21 days, the criteria used for toxicity chronic studies are survival, body length and total number of progeny produced. The second endpoint evaluated feeding behaviour alterations, feeding behaviour of zooplankton is a physiological function. This could be considered as an important factor in the study of pollutants toxicity in aquatic organisms. The third endpoint was the study of biochemical indicators of stress in aquatic organisms, biochemical indicators of stress are potentially useful because they are sensitive to sublethal concentrations of chemicals and may provide the earliest possible warning of future adverse effects. The results indicated that reproduction, survival and body length, were significantly reduced when pesticides concentration increased in the medium. Feeding rates of Daphnia magna declined with increased pesticide concentrations. On the other hand, D. magna glycogen, lipids and proteins levels (as biochemical indicators) were determined after 24, 48, 72, 96 and 120 hr of pesticide exposure. The results showed that daphnids energy content decreased as Propanil and Tetradifón concentration increased in the medium specially after 96-120 hr exposure.

Este trabalho apresenta um estudo sobre o desenvolvimento do método de análise multiclasse/multirresíduo de pesticidas para ser aplicada às águas do Rio Caí, um dos formadores do Lago Guruba. A importância deste estudo se deve aos seguintes fatos: existe uma produção agrícola diversificada na bacia hidrográfica do Rio Caí, levando à utilização também diversificada de pesticidas (em tomo de 40 tipos); suas águas são utilizadas em várias cidades situadas na região e, além disso, Porto Alegre retira a água que consome do Lago Guaíba. Sendo assim, é necessário um controle permanente da qualidade dessas águas. O estudo consta da otimização de cada uma das duas etapas da análise: a pré-concentração, feita através da extração em fase sólida (SPE), e a análise propriamente dita feita através da cromatografia gasosa capilar com uma coluna apolar e outra medianamente polar, utilizando diferentes detectores (ECD, NPD, MSD). Na otimização da SPE foram estudados principalmente a técnica de empacotamento dos cartuchos, as fases sólidas, a adição de modificador de polaridade à amostra e o solvente de eluição. Foi feita a opção pelo empacotamento misto (seco e em seguida ressuspendido nos solventes de ativação e condicionamento), pela SPE em série (XAD-7 -> CI8 -> pNNPA), pela adição de metano I (solução 20%) como modificador de polaridade e pela eluição com uma solução binária de solventes (10% n-hexano em acetato de etila). Na otimização da análise cromatográfica foram estudados: o modo de injeção, o tempo de amostragem, a linearidade do detector, a faixa de linearidade, o LOD e o LOQ de cada pesticida O resultado mostrou que o método estudado permite a análise dos pesticidas citados, com resposta no ECD, com a faixa de recuperação entre 79,8 % para o forato e 120,2 % para a simazina, ficando abaixo apenas o mevinfós (60,2 %) e o folpet (67,0 %). Enquanto no GC-MSD a faixa de recuperação obtida foi de 71 % para a simazina a 127 % para o metolacloro. Ficaram fora da faixa de recuperação exigida os compostos que apresentam picos mal formados, o que leva a um alto desvio padrão relativo nas medidas das áreas, como malation, iprodiona, flumioxazin e cis-permetrina. O mevinfós e o acefato, que co-eluem, também têm a análise dificultada. Os LOD determinados estão em uma faixa que varia de 2,3 x 10-5 para o oxadiazon a 0,261 µg mL-¹ para a simazina, no GC-ECD e de 0,839 para o forato a 15,2 µg mL-¹ para a Iprodiona, no GC-MSD. Os LOQ variam de 7,8 x 10-5 para o oxadiazon a 0,868 para a simazina, no GC-ECD e de 2,8 para o forato a 50,6 µg mL-¹ para a iprodiona, no GC-MSD. As faixas de linearidade variaram de 5 a 25 ng mL-¹ para o oxadiazon até 297 a 990 ng mL-¹ para o mevinfós, no GC-ECD. Enquanto no GC-MSD as faixas encontradas foram de 593 a 5600 ng mL-¹ para o forato até a de 3370 a 6720 ng mL-¹ para a deltametrina. O método estudado e otimizado foi aplicado a uma amostra coletada no Rio Caí, em novembro de 2003. Embora esta amostra não tenha apresentado contaminação por resíduo dos pesticidas, nos níveis estudados, com a amostra real fortificada, analisada pela mesma metodologia, foram obtidas recuperações dentro dos níveis aceitáveis (entre 84,4 e 116,2%), na maioria dos pesticidas, para uma metodologia multiclasse-multirresíduo. As exceções foram metamidofós, mevinfós, acefato, captan, folpet e vamidotion (baixas recuperações) e ainda metalaxil e iprodiona (altas recuperações). / This work comprehends a study on the development of methodology for multiclasslmultiresidues pesticides analysis to be applied to the waters of Caí River, one of the main forming streams of Guaíba Lake (Rio Grande do Sul). The importance of this study is due to the following social-environmental characteristics: presence of a diversified and extensive farming activity along Caí Basin which in turn leads to a wide use of several pesticides (around 40 different types). Besides, 10081 ofthe towns located in the Caí Valley are supplied by water ftom Caí Rive, as well as Porto Alegre (state capital) which is supplied by water ftom Guatba Lake. Thus, it becomes necessary to bave a permanent and efficient control ofwater quality. This study encompass the optimization of two main steps in the analysis: (a) preconcentratio, done by solid phase extraction (SPE) and (b) final analysi, carried out by capillary gas chromatography, using one polar column and one medium polarity column and differents detectors, such as ECD, NPD and MSD. For the SPE optimizatio, the study focused on cartridge packing, the nature of the solid phases, the addition of a polarity modifier to the sample and the elution solvent. It was decided to choose mixed packing (dry, followed by resuspension in activating solvents and cond.itioning), tandem SPE (XAD-7-> CIS-> pNNP A), the addition of methanol (20% solution) as polarity modifier and elution with a binary solvent mixture (10% n-hexane in ethyl acetate). For the optimization of the chromatographic analysis the study focused on injection mode, sampling time, detector linear range, LOD LOQ and linear range for each pesticide under investigation. Experimental results pointed out that for ECD, the chosen methodology allows the analysis of the selected pesticides, with a recovery range between 79.8 % for phorate and 120.2 % for simazine. Mevinphos (60.2 %) e folpet (67.0 %) were below the minimum required value (70 %). For those with response on GC-MSD, the recovery ranges were: from 71 % for simazine to 127 % for metolachlor. Some pesticides, like malathio, iprodione, flumioxazin and cis-permethrin, gave values outside the required recovery range, because presented distorted peaks with a high RSD in the integration values. Mevinphos and acephate, exhibited co-elution. Experimental values for LOD were in the ranges of 2.3 x 10-5 for oxadiazon to 2.6 x 10-¹ µg mL-¹ for simazine, using GC-ECD, and of 8.4 x 10-¹ for phorate to 15.2 µg mL-¹ for iprodione, using GC-MSD. While values for LOQ ranged from 7.8 x 10-5 for oxadiazon to 8.7 x 10-¹ µg mL-¹ for simazine, using GC-ECD and from 2.8 for phorate to 50.6 µg mL-¹ for iprodione, using GC-MSD. The linearity ranges varied from 5 to 25 ng mL-¹ for oxadiazon, and up from 297 to 990 ng mL-¹ for mevinphos, using GC-ECD. However, for GC-MSD, the experimental values were 593 to 5,600 ng mL-¹ for phorate and up from 3,370 to 6,720 ng mL-¹ for deltamethrin. Afier optimization, the method was applied to a real sample from the Caí River, collected in November, 2003. Although this sample showed no contamination by residual pesticides, at the concentration leveI under investigation, with a fortified real sample, recovery ranges were within acceptable leveIs (between 84.4 to 116.2%), for most chosen pesticides, using a muhiclasslmuhiresidue methodology. Some exceptions were methamidophos, mevinphos, acephate, captan, folpet and vamidothion (lower recoveries) and meta1axil and iprodione (higher recoveries).

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-22T12:04:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1366175 bytes, checksum: 00cc01b4ddac360ee0bfecc0100266ec (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-22T12:04:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1366175 bytes, checksum: 00cc01b4ddac360ee0bfecc0100266ec (MD5) Previous issue date: 2003-03-31 / O presente trabalho teve como objetivos realizar o levantamento da flora polinífera que ocorreu na área de estudo; verificar se houve diferenças na produtividade da própolis, quando esta é produzida em apiários localizados em área sombreada e exposta ao sol e verificar se o pólen presente na própolis pode ser utilizado como indicativo de sua origem botânica. Os experimentos foram realizados com colônias de abelhas Apis mellifera (africanizadas), nas duas diferentes condições ambientais, no municíppio de Paula Cândido-MG. Foi realizado um levantamento florístico da região, coletando-se todas as plantas floridas durante o período experimental, para ser utilizado como acervo palinológico para identificação dos tipos polínicos encontrados no coletor e na própolis. Entre as espécies de plantas amostradas na região de Paula Cândido-MG, a família Asteraceae foi que contribuiu com o maior número, com 56 espécies com flores, durante o período experimental. Houve diferenças significativas entre as colônias, independente do local onde estavam instaladas, indicando a possibilidade de aumento na produção através de seleção, também houve diferenças significativas quanto à produtividade média entre as colônias, localizadas na sombra, talvez relacionada com o microclima. Observou-se que a produtividade média variou, nas colônias instaladas na sombra, mostrando resultados significativos; para as colônias instaladas no sol, os resultados não foram significativos, indicando que existem fatores ambientais influenciando na produção. Vinte e quatro tipos polínicos foram encontrados nos coletores de pólen das dez colônias, e todos os tipos foram encontrados na própolis. Somente estruturas vegetais de Baccharis dracunculifolia foram encontrados nos sedimentos da própolis. O pólen encontrado na própolis pode ser indicativo de contaminação, mas a metodologia utilizada não permite determinar, onde essa contaminação está ocorrendo, se ocorre na planta, durante o transporte, na manipulação pelas abelhas, ou dentro das colméias. / This work had the following goals: make a survey of pollen plants occurring in the area studied; verify if there were differences in propolis productivity, when the apiary is located in shadowed and sunny areas; and verify if the pollen present in propolis can be used as an indicative of botanical origin. The experiments were performed with colonies of africanized honeybees – Apis mellifera – in both the environmental conditions, in the city of Paula Candido- MG. A survey of the flora of the region was made, in which all plants that were flowering during the study were collected. These plants were used for the identification of the pollen types present in the pollen trap and in the propolis. Among the plants found in the region, the family Asteraceae had the greatest number, with 56 species with flowers during the study. There were significative differences in the capacity of production among colonies, independent of the local in which they were installed, indicating a possible increase in production using selection. There were also significative differences in the average productivity among colonies installed in shadowed areas, maybe related to the microclimate. The average productivity varied in the colonies installed in shadowed areas, generating significative results; for the colonies installed in sunny areas, the results were not significative, indicating that there are environmental factors influencing in productivity. Twenty four pollen’s traps of the 10 hives and all of them were found in the propolis. Only plant structures of Baccharis dracunculifolia were found in propolis. The pollen found in propolis can be a contamination, but the metodology used does not allow the identification of where this contamination occurs, if this occurs in the plant, during the transportation, during the manipulation by the bees or inside the hives. / Não foi localizado o cpf do autor.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-05T17:43:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 534556 bytes, checksum: dc4275325dac75946ba2e9fc416537bb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T17:43:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 534556 bytes, checksum: dc4275325dac75946ba2e9fc416537bb (MD5) Previous issue date: 2003-02-25 / Sementes dormentes escarificadas de estilosante (Stylosanthes humilis HBK), leguminosa tropical forrageira anual, germinaram em ambiente fechado devido ao acúmulo de etileno por elas produzido. O etileno acumulado fez aumentar a germinação e intensificou a sua produção. A adição de etileno à atmosfera interna dos frascos Erlenmeyers selados, às concentrações 0,5 mmol m -3 ou menores, promoveu um aumento na produção de etileno, em comparação ao etileno adicionado, caracterizando um efeito autocatalítico do regulador gasoso. A remoção do etileno da atmosfera dos frascos por solução de perclorato de mercúrio levou a diminuição da emanação do regulador gasoso pelas sementes dormentes e não- dormentes e também da germinação. Os inibidores da biossíntese do etileno, 2- aminoetoxivinilglicina mais Co(NO 3 ) 2 , bloquearam completamente a germinação das sementes dormentes, mas não das não-dormentes, possivelmente devido ao etileno residual produzido por estas. A combinação das duas técnicas, isto é, remoção do etileno da atmosfera dos frascos simultaneamente à embebição das sementes com a solução dos inibidores, promoveu uma inibição completa da produção de etileno por sementes dormentes e não-dormentes e da germinação. Com a Injeção de etileno na atmosfera dos frascos Erlenmeyer, a germinação das sementes não- dormentes foi estimulada sob concentrações bem menores do que as requeridas para a germinação das sementes dormentes, indicando que a sensibilidade ao regulador gasoso foi bem maior nas sementes não-dormentes. / Scarified dormant seeds of Townsville stylo (Stylosanthes humilis HBK), an annual tropical forage legume, germinated in closed environments in response to ethylene accumulation. This accumulation, caused an increased germination and also in ethylene production. Injection of ethylene, at concentrations 0.5 mmol m -3 or less into sealed Erlenmeyer flasks promoted an ethylene increase in their internal atmospheres, as compared to ethylene injected, demonstrating an autocatalytic production. In an ethylene-free atmosphere obtained with a mercuric perchlorate solution, emanation of the gaseous regulator from dormant and non-dormant seeds was drastically decreased as was also total germination. Germination of dormant seeds, but not of non-dormant ones, was completely blocked by ethylene biosynthesis inhibitors 2-aminoethoxyvinylglycine (AVG) plus Co(NO 3 ) 2 , likely due to the residual ethylene produced by non-dormant seeds. When both techniques were used, e.g., by removing ethylene form the flask atmosphere and simultaneously imbibing seeds in AVG plus Co 2+ solution, neither germination of nor ethylene production by dormant and non-dormant seeds occurred. Ethylene injected into this system promoted germination of non-dormant seeds at much lower concentrations than those required for germination of dormant seeds, demonstrating that in non- dormant seeds sensitivity to the gaseous regulator was higher than in dormant seeds. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-05T18:20:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1164453 bytes, checksum: fdbc208493b147756c7fd84726536d71 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-05T18:20:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1164453 bytes, checksum: fdbc208493b147756c7fd84726536d71 (MD5) Previous issue date: 2003-05-30 / Uma amostra de 172 clones de cacau (Theobroma cacao L.), provenientes de amostras coletadas em populações espontâneas de 16 bacias hidrográficas da Amazônia Brasileira, foi caracterizada por meio de microssatélites visando identificar genótipos, estimar a diversidade genética e estruturas genéticas das populações de origem. Foram detectados 187 alelos a partir de 30 locos microssatélites, dos quais 29 apresentaram polimorofismo, seletivamente neutros e independentes, permitindo identificar 169 (98,3%) genótipos distintos e apenas três genótipos repetidos (CAB 731, CAB 732 e CAB 734), oriundos da bacia do Rio Uatumã-AM. Os genótipos agrupararam-se segundo suas origens geográficas, com a dissimilaridade variando de 0,0 a 0,79 e média de 0,59. Foram identificados 68 alelos raros, dos quais 23 exclusivos, destacando-se as bacias do Acre e do Alto Amazonas com maior número de alelos privados, corroborando suas maiores riquezas alélicas. Todas as subpopulações apresentaram boa diversidade genética, exceto as de Rondônia que mostraram menor variabilidade para todos os indicadores utilizados. A diversidade genética total foi 0,658 contra uma heterozigosidade observada de 0,295, observando-se défict de heterozigosidade em todas as amostras, caracterizado por um coeficiente de endogamia de 0,408 e taxa de fecundação cruzada de 42 %. As subpopulações apresentaram forte estruturação, com significativa diferenciação (G ST = 0,292 e F ST = 0,290) e alto coeficiente de parentesco (R EL = 0,367) dos indivíduos dentro das subpopulações. A análise das amostras agrupadas (Acre, Alto Amazonas, Rondônia e Baixo Amazonas) mostra 66,6% da variabilidade genética dentro das subpopulações, 14,9 % entre subpopulações dentro dos grupos e 18,5% entre os quatro grupos. As populações do Alto Amazonas se destacaram em termos de contribuição relativa à diversidade e riqueza alélica total. No acre, a despeito da alta diversidade e riqueza alélica, apenas a bacia do Rio Tarauacá apresenta contribuição relativa positiva. As demais demonstram redundância na composição alélica, com contribuições relativas negativas. O dendrograma de distância genética D de Nei apresentou topologia mais robusta que δμ 2 e D L (-ln(1-F ST ), confirmando o agrupamento das subpopulações do Acre e Alto Amazonas e destacando a elevada divergência da bacia do Rio Jamari em relação às demais. Os resultados realçam a importância de novas coletas na bacias hidrográficas do Amazonas e Acre (especialmente a do rio Tarauacá) e a necessiade de agregar o máximo de novas bacias visando reunir o máximo de novos alelos, alelos raros e/ou exclusivos, de modo a enriquecer as coleções de germoplasma e a minimizar perdas por erosão genética. / A sample of 172 clonal genotypes of the cacao tree (Theobroma cacao L.) representing germplasm collections from natural subpopulations collected in 16 river basins of the Brazilian Amazon region was characterized using microsatellites to identify genotypes, assess genetic diversity and population structure. From 30 loci microsatellites analyzed 29 showed polymorphism revealing 186 alleles selectively neutral and independent, which allowed to identify 169 (98.3%) distinct genotypes and only three repeated ones (CAB 731, CAB 732 and CAB 734) from Uatumã (AM) river basin. The genotypes were clustered in accordance with their geographic origins, their dissimilarities varying from 0.0 to 0.79 and mean 0.59. Sixty eight rare aleeles were identified from which 23 privates ones, which places the basins from Acre and Upper Amazon with higher number of private alleles according to their greater allelic richness. All subpopulations showed relatively high genetic diversity except those from Rondonia that presented low variability to all indicators used. The Total diversity was 0.658 for an observed heterozigosity 0.295, a result of a heterozigosity deficit in every sample, characterized by an endogamy coefficient 0.408 and an outcrossing rate 42%. The subpopulations showed a strong structuring with a significant differentiation (G ST = 0.293 and F ST = 0.290) and relatedness (R EL = 0.367) of the individuals within of the subpopulations. Analyses of grouped samples (Acre, Upper Amazon, Rondonia and Low Amazon) shoed 66.6% of the genetic variability within the subpopulations, 14.9% among subpopulations within the groups and 18.5% among the four groups. Upper Amazon populations produced the most relative contributions to the total diversity and allelic richness. In the Acre group, in spite of the high diversity and allelic richness, only the Tarauaca river basin presented positive relative contributions; the other Acre subpopulations showed redundant allelic composition with negative relative contribution to total diversity and allelic richness. The Nei-based distance tree (D) showed more robust topology than δμ 2 and D L [-ln(1-F ST )] ratifying the clustering of the subpopulations from Acre and from Upper Amazon, emphasizing the high divergence between Jamari (RO) river basin and the others. The results highlight the importance of new germplasm collects in the river basins from Amazonas and Acre States (especially the Tarauaca river basin) and the need of aggregating the maximum number of new basins to assemble the maximum number of new alleles, rare and/or private alleles in order to increase the diversity of germplasm collections and minimize the loss by genetic erosion. / Tese importada do Alexandria

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-28T18:59:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2838960 bytes, checksum: 4e716025d4d440cfbc2b8871ea87b73d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-28T18:59:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2838960 bytes, checksum: 4e716025d4d440cfbc2b8871ea87b73d (MD5) Previous issue date: 2013-04-16 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo geral deste trabalho foi caracterizar fisiologicamente e identificar proteínas diferencialmente expressas e fosforiladas em raízes de genótipos de soja contrastantes para tolerância à seca, sendo um tolerante (Embrapa 48) e um sensível (BR 16), de forma a melhor entender os mecanismos de resposta e identificar proteínas candidatas no desenvolvimento de estratégias para aumento da tolerância à seca. As plantas foram avaliadas em condições de plena irrigação (controle) e sob déficit hídrico imposto pela suspensão da irrigação até que as plantas atingissem os potenciais hídricos na antemanhã (Ψam) de -1,0 MPa (moderado) e -1,5 MPa (severo). As análises fisiológicas mostraram que esses cultivares exibem mecanismos diferenciais em resposta ao déficit hídrico. O cultivar Embrapa 48 retardou a desidratação em dois dias, mantendo A, ETR e ΦPSII maior mesmo sob déficit. Este resultado não foi relacionado a alterações na gs ou na composição isotópica do 13C, sugerindo a importância na condutividade hidráulica nesta tolerância, e a uma maior indução do crescimento radicular sob deficiência hídrica. Além disso, em folhas, apresentou menor dano oxidativo e a análise de perfil metabólico evidenciou um maior ajuste osmótico pelo acúmulo de açúcares e aminoácidos. Nas raízes, apresentou maior acúmulo de ácidos orgânicos, intermediários da glicólise e Ciclo de Krebs, além de aminoácidos. O cultivar tolerante também apresentou maiores níveis foliares e radiculares de ABA. Houve uma manutenção do crescimento radicular no tolerante e redução do crescimento relativo da parte aérea. A enxertia recíproca confirmou a importância da condutividade hidráulica no mecanismo de tolerância do genótipo tolerante, indicando o sistema radicular como um dos principais fatores que contribuem para a maior tolerância nesse cultivar. As proteínas diferencialmente expressas e fosfoproteínas foram analisadas através de 2D-SDS PAGE e detectadas com CCB (proteínas diferenciais) e Pro-Q DPS (proteínas fosforiladas) associadas a identificação por MS. A análise diferencial das proteínas de raízes revelou mecanismos de tolerância ao déficit hídrico relacionado aos mecanismos de respiração, metabolismo antioxidativo, metabolismo secundário e metabolismo de aminoácidos, entrando em conformidade com as diferenças encontradas no perfil metabólico. O fosfoproteoma apresentou uma correlação com o proteoma diferencial na ausência e na presença de déficit severo com muitas proteínas comuns às duas abordagens. A respiração foi o grupo cuja fosforilação foi fortemente afetada em resposta à seca, sendo representada por 12 proteínas. Adicionalmente, várias enzimas da respiração, síntese de aminoácidos e mecanismo antioxidativo, tiveram aumento em sua fosforilação sem apresentar alterações em sua abundancia, providenciando mais evidencias para a resposta diferencial da respiração na tolerância a seca em soja. A análise conjunta somente no genótipo tolerante permitiu observar que o aumento da fosforilação de uma proteína pode ser transiente com o estresse. Os resultados também sugerem um papel adicional do ABA na resposta ao estresse hídrico, induzindo cascatas cinases e aumentando a respiração para permitir a menor redução crescimento radicular em resposta a seca, o que poderia explicar o maior volume radicular observado no cultivar tolerante sob seca. A fosforilação participa nas características do proteoma com maiores níveis na abundancia e na fosforilação em muitas proteínas no tolerante. Estes resultados reforçam a visão de que a tolerância à seca é uma herança quantitativa, onde vários mecanismos estão envolvidos. / The goal of this work was the physiological comparison and identification of proteins differentially expressed and phosphorylated in roots of soybean plants with contrasting tolerance to drought (Embrapa 48, tolerant, BR 16, sensitive) with the ultimate aim of improving our understanding of the mechanisms involved in water deficit responses and identifying candidate proteins for stress tolerance engineering. Plants were evaluated under irrigated conditions (control) and under water deficit imposed by the suspension of irrigation until plants reached pre-dawn water potentials (Ψam) of -1.0 MPa (moderate) or - 1.5 MPa (severe). Physiological analyses indicate that the two cultivars exhibit different responses to water deficit. The Embrapa 48 cultivar showed a two days delay in dehydration, maintaining greater values of A, ETR and ΦPSII even under water deficit. This result was not related to alterations in gs or in 13C isotope composition, suggesting that hydraulic conductivity and induction of root growth might be important factors for this tolerance. In addition, leaves of Embrapa 48 exhibited less oxidative damage and an adjustment in metabolite profile with a higher accumulation of sugars and amino acids. Metabolite profiling of roots indicated greater accumulation of organic acids, glycolytic and Krebs cycle intermediates as well as amino acids. The tolerant cultivar also presented increased levels of ABA in both leaves and roots. Induction of root growth occurred in the tolerant cultivar with a decrease in relative growth of the aerial parts of these plants. Reciprocal grafting experiments confirmed the importance of hydraulic conductance in the tolerance mechanism of Embrapa 48, indicating the root system as one of the major factors that contributes to the greater tolerance of this cultivar. Differentially expressed proteins and phosphoproteins were analysed using 2D-SDS-PAGE, detected using CCD (differentially expressed proteins) or Pro-Q DPS (phosphorylated proteins) and identified by mass spectrometry. Differential analysis of root proteins revealed a relationship between tolerance to drought and respiration, antioxidant metabolism, secondary metabolism and amino acid metabolism, in agreement with the metabolite profiling experiments. The phosphoproteomic analysis indicated a correlation with the differential proteomic approach in the absence and presence of severe water deficit with many proteins common to the two methods. Respiration was the group in which phosphorylation was strongly affected in response to lack of water, being represented by 12 proteins. Additionally, several enzymes of respiration, synthesis of amino acids and antioxidative mechanism, had increased in its phosphorylation without changes in their abundance, providing more evidence for differential response of respiration in drought tolerance without soybean. The combined analysis for the tolerant genotype indicated that the increase in phosphorylation of a protein can be transient with the stress. The results here suggest a new role for ABA in water deficit, inducing kinase cascades and inducing respiration in order to allow lower reductions in root system under drought. The phosphorylation participates in the characteristics of the proteome with higher levels in abundance and phosphorylation of many proteins in tolerant. Altogether, data reinforce the view that drought tolerance is a quantitative trait, where several mechanisms are involved. / Tese enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-04T17:50:18Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 149856 bytes, checksum: a4c093ceb44b920bf211aba810edaecc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T17:50:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 149856 bytes, checksum: a4c093ceb44b920bf211aba810edaecc (MD5) Previous issue date: 1999-03-05 / Com o objetivo de verificar se a deficiência de P é um sistema experimental adequado para o estudo da senescência, e se há redistribuição mais eficiente de P em cultivares melhoradas para menor requerimento, foi avaliado o metabolismo de N durante senescência foliar induzida por deficiência de P, em duas cultivares de Phaseolus vulgaris L. com diferentes requerimentos de P. Plântulas das cultivares POT 51 (baixo requerimento) e Pérola (alto requerimento) foram crescidas em solução nutritiva completa, e, em seguida, transferidas para soluções deficientes em P. Após uma semana de deficiência, foram medidos, a cada três dias, nos trifólios senescentes, os teores de clorofilas e proteínas solúveis e as atividades da NR, da GS e da NADH-GDH. Também foram determinados os níveis das isoformas citossólica (GS 1 ) e cloroplastídica (GS 2 ) de GS e os teores de N e P (medidos também no trifólio mais jovem completamente expandido). Nas duas cultivares, tanto em senescência natural quanto induzida, foi observada remobilização de N, sendo esta, acelerada após aplicação da deficiência. Os níveis de N se mantiveram nos trifólios jovens, enquanto os de P caíram, paralelamente aos dos trifólios senescentes. Nas duas cultivares, a indução de senescência acelerou o início da perda de clorofila, mas não da de proteínas solúveis. As atividades da GS e da NR caíram progressivamente, sendo a queda acelerada após aplicação da deficiência, nas duas cultivares. Tanto durante senescência natural quanto induzida, a queda da atividade da GS foi causada pela diminuição dos níveis de GS 2 . Os níveis de GS 1 aumentaram, sugerindo seu papel na remobilização de N. As atividades real e potencial da NR foram mais altas em Pérola que em POT 51, tanto em senescência natural quanto induzida. Apenas nos estádios mais avançados, as cultivares apresentaram atividades iguais. Durante senescência natural, a atividade da NR apresentou limitação por substrato nas duas cultivares. Em senescência induzida, a atividade foi limitada, possivelmente, pela concentração da enzima. Em Pérola, a atividade da NADH-GDH diminuiu durante a senescência natural e aumentou durante a induzida. Em POT 51, a atividade manteve-se constante e não houve efeito de tratamento. Durante a senescência induzida, a maioria dos parâmetros acompanhados apresentou perfis similares aos observados durante a natural. Conclui-se que a aplicação da deficiência de P é um sistema adequado para o estudo do metabolismo de N durante a senescência foliar em feijão. Não ficou claro se POT 51 é mais eficiente na remobilização de P. / The leaf N metabolism during senescence induced by P deprivation was evaluated in two cultivars of Phaseolus vulgaris L. differing in phosphorus requirement. Seedlings of POT 51 (low P requirement) and Pérola (high P requirement) were grown in hydroponic culture (Hoagland, half strength) for ten days, and then submitted to P deprivation. After one week of deprivation, total chlorophyll and soluble protein contents, and nitrate reductase (NR), glutamine synthetase (GS) and glutamate dehydrogenase (GDH) activities were determined every three days, in the oldest leaf. Changes in the levels of cytosolic (GS 1 ) and chloroplastic (GS 2 ) glutamine synthetase, and nitrogen and phosphate contents (determined in the completely expanded youngst leaf too) were also determined. After twenty days of culture on P deficient medium, shoot/root fresh mass ratio was reduced in Pérola, but not in POT 51. In both cultivars and treatments N remobilization was observed. P content in young leaves declined parallel to the decrease observed in the oldest ones. Both cultivars showed the same pattern of chlorophyll and protein contents. Total chlorophyll content declined continuously throughout induced senescence while soluble protein was not affected. Pérola reached higher chlorophyll values and, after twenty days of deprivation, the loss of total chlorophyll was greater than in POT 51. The overall enzymatic activity decreased in both cultivars and treatments. In POT 51, total GS activity decreased faster during P deprivation. Pérola showed the same pattern of total GS activity in both treatments, but the loss of activity was higher during deprivation. In both cultivars and treatments the loss of total GS activity was due to the decrease in GS 2 levels. In contrast, GS 1 polypeptides increased, which suggest a role in nitrogen remobilization during senescence. Pérola GDH activity decreased during natural senescence and increased during senescence induced by P deprivation. POT 51 GDH activity showed a little fluctuation but no treatment effect was observed. During the early phases of senescence (induced or not), both real and potential NR activity were higher in Pérola. In advanced stages no differences between the cultivars were observed. During natural senescence, NR activity was limited by nitrate availability, in both cultivars. During the deprivation, NR activity was probably limited by the low levels of NR. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-10T11:46:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 166093 bytes, checksum: f8f9fc84fe9c908a1600c9f05710c21b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T11:46:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 166093 bytes, checksum: f8f9fc84fe9c908a1600c9f05710c21b (MD5) Previous issue date: 2003-04-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da temperatura e de inibidores da ação do etileno sobre a longevidade, abscisão, produção de CO 2 e etileno nas inflorescências de esporinha (Consolida ajacis Nieuwl.). As flores foram padronizadas em tamanho e distribuídas ao acaso nos seguintes experimentos: 1, mantidas em água destilada nas câmaras com temperatura controlada em 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 e 40 oC. 2, tratadas com 1-MCP (1- metilciclopropeno), inibidor da ação do etileno, na concentração 0,125; 0,25; 0,5; 1,0 e 1,5 g m -3 de Ethylbloc (produto comercial), que corresponde a 175; 350; 700; 1400 e 2100 ng L -1 de 1-MCP, por 6 horas em câmaras lacradas; 3, mantidas em solução de ‘pulsing’ com 1mM de TSP (tiosulfato de prata), inibidor da ação do etileno, por (30 minutos); 4, ‘pulsing’ com sacarose (5%), por 6 horas; 5, ‘pulsing’ com 1mM de TSP, por 30 minutos combinado com sacarose (5%) por 6 horas; 6, aplicação de 1-MCP (0,5 g m -3 de Ethylbloc) em câmaras lacradas, durante 6 horas e controle; 7, pulverização de 30 em 30 minutos com solução de Ethrel à concentração 0,1; 1; 10; 100 e 1000 mg L -1 ; 8- pulverizadas com Ethrel (100 mg L -1 ) antes e/ou depois do tratamento com 1- MCP (0,5 gm -3 de Ethylbloc), durante 6 horas. Após, todos tratamentos as inflorescências foram transferidas para vasos contendo água destilada. Diariamente registrou-se a abscisão e o murchamento das flores e pétalas; a longevidade baseou-se no critério de 50% de abscisão ou murchamento das flores. A temperatura afetou diretamente a longevidade das flores; com a elevação ocorreu redução na vida em vaso das inflorescências. O tratamento com TSP foi o mais eficaz para prolongar a longevidade, seguido do tratamento com TSP em combinação com sacarose (5%). A sacarose aplicada isoladamente em ‘pulsing’ não teve efeito na manutenção da qualidade das inflorescências. O 1-MCP não foi tão eficiente em relação aos tratamentos que continham TSP na sua formulação, mas possibilitou resultados positivos em relação ao controle ou tratamento com sacarose. O 1-MCP foi eficaz em reverter à ação do etileno, aplicado antes ou depois do tratamento com Ethrel. / The present work had the objective to evaluate the effect of temperature and the inhibitors of ethylene action on longevity, abscission, respiration, ethylene production in inflorescences of Consolida ajacis Nieuwl. The flowers were standardized in length and distributed at random in various treatments: 1, maintained in distilled water in the chambers with controlled temperature at 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 and 40 oC; 2, treated with 1-MCP (1-methylcyclopropene), inhibitor action ethylene, at 0,125 ; 0,25; 0,5; 1,0 e 1,5 g m -3 de Ethylbloc (product commercial), that correspond at 175; 350; 700; 1400 e 2100 ng L -1 de 1-MCP, for 6 hours in sealed chambers. 3- maintained in pulsing solutions with 1 mM of STS (silver thiosulfate), for 30 minutes; 4, pulsing with sucrose at 5% for 6 hours; 5, pulsing solutions with 1 mM of STS, for 30 minutes combined pulsing with sucrose at 5% for 6 hours; 6, application of 1-MCP (0,5 g m -3 of Ethylbloc) in sealed chambers for 6 hours and control; 7-flowers were aprayed with Ethrel solution at concentration 0,1; 1; 10; 100 e 1000 mg L -1 ; during the period of 2 hours in interval of 30 minutes; 8, flowers were sprayed with Ethrel (100 mg L -1 ) before and/or after of treatment with 1-MCP (0,5 g m -3 de Ethylbloc), for 6 hours. Thereafter, all the treatments were transferred to vase containing distilled water. Daily registered abscission and flower wilting; the end longevity was based on the criteria of 50% of abscission or wilting of the flowers. The temperature affected the longevity of the flowers, reducing the vase life of inflorescences when elevated. The treatment with STS was effective on prolonging the longevity, following of STS treatment combined with 5% sucrose. The sucrose had no effect in maintaining the quality of the inflorescences. The 1-MCP was not as efficient as STS containing treatments, but allowed positive result when compared with the control or sucrose treatment. O 1-MCP was effective to revert the action of ethylene if applied before or after the Ethrel treatment. / Dissertação importada do Alexandria

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-17T13:19:58Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 23689415 bytes, checksum: 20395ffc8aa03a902210747a173ddd59 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T13:19:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 23689415 bytes, checksum: 20395ffc8aa03a902210747a173ddd59 (MD5) Previous issue date: 2005-07-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Poucos estudos enfatizam os sistemas reprodutores em insetos. Isto resulta em uma carência de informações que possibilitariam estabelecer padrões e relações entre os grupos. Os caracteres morfológicos do sistema reprodutor interno em machos se mostram promissores para estudos taxonômicos e filogenéticos. Além disso, apesar dos Meliponini serem bastante estudados, algumas questões, como as conseqüências da ausência das glândulas acessórias no trato reprodutivo masculino, precisam ser esclarecidas. Nesta tese, descrevemos aspectos estruturais e ultra-estruturais do epitélio dos ductos deferentes de Scaptotrigona xanthotricha a fim de identificarmos as principais modificações morfofisiológicas ocorridas nestes ductos durante o processo de maturação sexual dos machos. Para isto, utilizamos técnicas de microscopia de luz e microscopia de eletrônica de transmissão. Os resultados contribuíram para discussão de importantes questões sobre a biologia reprodutiva dos Meliponini, como a formação das espermátides atípicas e a compensação fisiológica da ausência das glândulas acessórias. / Few studies emphasize the reproductive systems in insects. This results in an carência of information that could make possible the establishment of patterns and relationships between groups. The morphological characters of the internal reproductive systems in males are promising to taxonomic and phylogenetic studies. Besides, although the Meliponini be a lot studied, some questions stay without answer as the absence of accessory glands in the male reproductive system. In this work we described the structural and ultrastructural features of the epithelium of the deferents ducts of Scaptotrigona xanthotricha in order to understand the main morphological modifications of the deferent ducts during the process of sexual maturation. For this we used techniques of light and electron transmission microscopy. The results contributed to the discussion of important questions about the reproductive biology of Meliponini, like the formation of atypical spermatides and the compensação fisiológica da ausência das glândulas acessórias.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-07T18:07:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1028816 bytes, checksum: 7c611c42a4faae74defef5875b3d765e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-07T18:07:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1028816 bytes, checksum: 7c611c42a4faae74defef5875b3d765e (MD5) Previous issue date: 2001-12-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram avaliados o processo de reparação tecidual e o comportamento do implante do polímero vegetal extraído do óleo de mamona com 40% de carbonato de cálcio, associado ou não à impregnação com medula óssea autógena, em falhas ósseas experimentais em rádios de 30 coelhos e em sítio heterotópico de seis animais. Em quinze coelhos, a falha óssea no rádio direito foi preenchida por cilindros de polímero de mamona (grupo P) com dimensões semelhantes às das falhas; o rádio direito dos outros coelhos recebeu aspirado de medula óssea autógena junto com o implante (grupo M). As falhas ósseas do membro esquerdo não receberam nenhum tratamento e serviram como controle. Cada um dos seis coelhos restantes recebeu seis implantes no músculo reto abdominal (sítio heterotópico), sendo que em três animais, os implantes estavam embebidos em aspirado de medula óssea autógena. Ambos os grupos apresentaram aumento da radiopacidade no local do implante, sem desvio de eixo ósseo ou reabsorção das extremidades ósseas receptoras. O grupo P apresentou áreas irregulares de calcificação na região periférica e sobre o polímero e o M apresentou um padrão de radiopacidade mais intenso, regular e precoce em relação ao P. Na avaliação histológica, foram observadas formação de tecido ósseo imaturo com tendência a organização, brotos isolados de formação de osso novo sobre o polímero em seus poros superficiais e nos poros internos que se comunicavam. O implante permitiu a ocorrência de osteogênese e osteocondução e a formação de osso novo foi progressiva e em maior quantidade quando associado ao aspirado medular; houve migração de capilares, tecidos perivasculares e células osteoprogenitoras entre os poros, com tecido fibrovascular invadindo a superfície do implante; a incorporação dos implantes deu-se de maneira lenta e estava incompleta até as nove semanas do estudo; o implante foi biocompatível no período avaliado. Em sítio heterotópico, o implante foi incapaz de induzir a formação óssea e histologicamente, em ambos os sítios de implantação, foram identificadas células gigantes e tecido fibroso envolvente. / In order to evaluate tissue repair after the use of castor oil polymer implant additioned with 40% calcium carbonate, isolated or associated to autogenous bone marrow in heterotopic site and in experimental bone gaps in radii of rabbits, 30 White New Zealand rabbits were submitted to bilateral radial ostectomy. In 15 rabbits the bone gap of the right side was filled with polymer cylinders (group P) of similar size of the gaps; the remaining rabbits received autogenous bone marrow with the implant (group M). The bone gaps of the left limb did not receive any treatment and served as control. Six rabbits received 6 implants in the Rectus abdominus muscle (heterotopic site) and in three of these rabbits the implants were associated with bone marrow. In the radiographic study both groups presented increased radiopacity at the implant site without bone axis deviation or resorption of the receptor bone ends. Group P presented irregular calcification areas at the peripheral region and over the polymer. Group M presented a more intense, regular and precocious radiopacity pattern in relation to group P. In microscopical evaluation there was evidence of immature bone tissue formation tending to organize itself, isolated buds of neoformed bone over the polymer and its superficial pores. It was concluded that the implant allows osteogenenesis and osteoconduction in bone gaps, and bone formation was progressive, especially when additioned with bone marrow aspirate; there was capillary, perivascular tissue and osteoprogenitor cells migrating into the pores, with fibrovascular tissue permeating the implant surface; implants incorporation was slow and was found incomplete until 9 weeks of the study; the implant was able to induce foreign- body reaction without toxic or secondary adverse reactions to its presence. In heterotopic and orthotopic sites, the implant was not able to induce bone formation, inciting mild foreign-body reaction with giant cells and surrounding fibrous layer. / Dissertação importada do Alexandria