Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-06-28T11:53:19Z No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-28T12:25:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-28T12:25:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 flaviadelgaudioguimaraes.pdf: 1142633 bytes, checksum: 991f1b922805b3633df3551118ec22e9 (MD5) Previous issue date: 2013-07-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A crescente frequência de microrganismos resistentes nas instituições de saúde, têm evidenciado a necessidade pela busca de novas moléculas que possam permitir uma melhoria no tratamento de infecções por organismos patogênicos resistentes a profilaxias convencionais. As plantas aromáticas, bem como os respectivos óleos essenciais, são utilizadas há séculos como flavorizantes, na fabricação de cosméticos e perfumarias, e farmacologicamente com fins medicinais, o que tem estimulado a procura por substâncias biologicamente ativas e eficazes, especialmente contra microrganismos. Os óleos essenciais de plantas do gênero Cymbopogon e seus componentes são reconhecidos por apresentarem atividade antimicrobiana, antihelmíntica, antiparasitária, antiinflamatória, anticonvulsivante e antioxidante. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade biológica in vitro do óleo essencial da planta medicinal Cymbopogon winterianus Jowitt ex Bor, popularmente conhecida como citronela. Foram utilizados os métodos: teste de difusão em discos, concentração inibitória mínima e curva de crescimento bacteriano (método indireto) frente às cepas de referência da American Type Culture Collection (ATCC) - Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus simulans ATCC 27851, Entrobacter cloacaceae ATCC 23355, Proteus mirabilis ATCC 15290 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Serratia marcescens ATCC 14756, Escherichia coli ATCC 35211 - e cepa de isolado clínico - Staphylococcus aureus 53581, além dos ensaios de citotoxicidade pelo método de redução do corante tretazólio (MTT), utilizando células da linhagem Vero. O óleo de citronela apresentou atividade antibacteriana contra as cepas Gram-positivas testadas enquanto que as cepas Gram-negativas utilizadas neste trabalho mostraram-se resistentes. No estudo da citotoxicidade os resultados indicaram que a viabilidade celular, manteve-se superior a 100%, demonstrando que este óleo não apresentou citotoxicidade sobre as células em estudo, nas concentrações avaliadas. / The increasing frequency of resistant microorganisms in healthcare institutions, has shown the need for searching new molecules that may allow an improvement in the treatment of infections caused by pathogens resistant to conventional prophylaxis. Aromatic plants and their essential oils have been used for centuries as a flavoring in the manufacture of cosmetics and perfume, and pharmacologically for medicinal purposes, which has stimulated the search for biologically active substances and effective, especially on microorganisms. The essential oils plants of the genus Cymbopogon and its constituents are known for having antimicrobial activities, anthelmintic, antiparasitic, anti-inflammatory, anticonvulsant and antioxidant. Therefore, the aim of this study was to evaluate in vitro the biological activity of the essential oil of Cymbopogon winterianus medicinal plant, popularly known as citronella. The methods used were: disk diffusion test, minimum inhibitory concentration and bacterial growth curve (indirect method) against reference strains from the American Type Culture Collection (ATCC) - Enterococcus faecalis ATCC 29212, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Staphylococcus simulans ATCC 27851, Entrobacter cloacaceae ATCC 23355, Proteus mirabilis ATCC 15290 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Serratia marcescens ATCC 14756, Escherichia coli ATCC 35211 - and strain from clinical isolate - Staphylococcus aureus 53581, apart from cytotoxicity assays by the method of tretazólio dye reduction (MTT), using Vero cell line. The citronella oil presented antibacterial activity against Gram-positive strains tested whereas Gram-negative strains used in this study were resistant. In the study of cytotoxicity results indicated that cell viability remained above 100%, indicating that this oil had no cytotoxicity of the cells under study at the concentrations evaluated.

In this work, a method for the synthesis of a series of heterocyclic compounds that preserve the amino group of the starting material, is presented. For this study, a-oxoketene O,N-acetals were obtained from the reaction of b-oxothioxo ester and different primary amines. The reactivity of the elctrophilic centers of O,N-acetals was investigated through cyclization reactions using 1,2-dinucleophiles such as hydrazine and phenylhydrazine with the reaction carried out in solid support. The functionalized heterocycles 5(3)-amino substituted 3(5)-phenyl 1H-pyrazoles and 3-amino substituted 1,5-diphenyl pyrazoles, were obtained selectively. When 1,2-dinucleophiles such as hydrazine and phenylhydrazine hydrochloride were used, ethoxy pyrazoles 5(3)-ethoxy 1H-pyrazole, 3-ethoxy 1,5-diphenyl pyrazole and 5- ethoxy 1,3-diphenyl pyrazole, were obtained, demonstrating the influence of these salts in the formation of different substitution pattern. The investigation of the possible biological activity of the pyrazoles systems obtained was performed in vitro and was accomplished through the analysis of the antimicrobial activity by the Bioautography method and Minimal Inhibitory Concentration (MIC) front to a collection of different indicative microorganisms. The inhibitory activity of the acetylcholinesterase (AChE) enzyme was also investigated. / Neste trabalho, nós estudamos a obtenção de uma série de heterociclos que preservassem o grupo amino dos compostos de partida. Para tanto, obtivemos a-oxocetenos O,N-acetais a partir da reação entre b-oxotioxo éster e diferentes aminas primárias. A reatividade dos centros eletrofílicos dos O,N-acetais foi investigada em reações de ciclização usando 1,2-dinucleófilos como hidrazina e fenil hidrazina em reações com suporte sólido. Obteve-se seletivamente os heterociclos funcionalizados 5(3)-amino substituído 3(5)-fenil 1H-pirazóis e 3-amino substituído 1,5-difenil pirazóis. Quando utilizamos como 1,2-dinucleófilos os cloridratos de hidrazina e fenil hidrazina, obtivemos 5(3)-etóxi 1H-pirazol, 3-etóxi 1,5-difenil pirazol e 5-etóxi 1,3-difenil pirazol demonstrando a influência destes sais na formação de diferentes padrões de substituição. A investigação da possível atividade biológica in vitro dos sistemas pirazólicos obtidos foi realizada por meio da análise da atividade antimicrobiana pelo método de Bioautografia e Concentração Inibitória Mínima (CIM) frente a uma coleção de diferentes microrganismos indicadores; bem como análise da atividade da enzima acetilcolinesterase (AChE).

The successive use of pig slurry as a soil fertilizer on pasture areas is a common practice in southern Brazil. While there are economic benefits of reuse of waste, this practice poses serious environmental risks and can cause changes in the composition and activity of soil organisms. The soil organisms and microbiological soil quality indicators are very sensitive and allow the monitoring of the soil environment conditions. This work aimed to study the effect of the successive application of pig slurry in pasture areas on the composition, biological activity and microbiological soil quality. The study was conducted in Três Passos/RS in two harvest periods (winter and spring), in areas with use of manure 2 years ago (A2), 14 years (A14) and native forest (NF). In all areas we analyzed the composition of soil organisms through the use PROVID and TSBF, biological activity, using litter bags and bait blade test; was also evaluated the microbiological quality of the soil from the determination of carbon content in the microbial biomass, soil microbial respiration, metabolic quotient (qCO2) and activity of enzymes β Glycosidase, urease and Hydrolysis of Fluorescein diacetate (FDA). The successive use of pig slurry in the soil changed the biological characteristics, according to the same application time; influences the composition and diversity of soil fauna by increasing the total number of individuals, primarily springtails; the activity of soil biota is influenced by the collection time of the analysis and depth, and most especially up to 6 inches from the ground; the successive use of pasture in pig slurry does not influence the carbon biomass, microbial respiration and metabolic quotient were allowing the maintenance of the levels of microbiological soil quality in relation to native forest; the soil enzymatic activity was influenced by the use of pig slurry, and the urease and the hydrolysis of fluorescein diacetate (FDA) were sensitive to detect differences in the activity of soil microorganisms with the use of pig slurry while the enzyme β-glucosidase did not allow the differentiation between the studied areas. / O uso sucessivo de dejetos de suínos como fertilizante do solo em áreas de pastagem é uma prática comum na região sul do Brasil. Embora existam benefícios econômicos da reutilização dos dejetos, esta prática apresenta sérios riscos ambientais e pode causar alterações na composição e na atividade dos organismos do solo. Os organismos edáficos e os indicadores microbiológicos de qualidade do solo são bastante sensíveis e permitem o monitoramento das condições do ambiente edáfico. Este trabalho teve por objetivo estudar o efeito da aplicação sucessiva de dejetos de suínos em áreas de pastagem sobre a composição, atividade biológica e a qualidade microbiológica do solo. O estudo foi realizado em Três Passos/RS, em duas épocas de coleta (inverno e primavera), em áreas com uso de dejetos suínos há 2 anos (A2), há 14 anos (A14) e mata nativa (MN). Em todas as áreas foram analisadas a composição dos organismos do solo através do uso do PROVID e do TSBF, a atividade biológica, com o uso de litter bags e do ensaio lâmina bait e a qualidade microbiológica do solo a partir da determinação do teor de C na biomassa microbiana, respiração microbiana do solo, quociente metabólico (qCO2) e atividade das enzimas β Glicosidase, urease e Hidrólise do Diacetato de Fluoresceína (FDA). O uso sucessivo de dejetos de suínos no solo alterou as características biológicas, de acordo com o tempo de aplicação do mesmo; influencia a composição e a diversidade da fauna edáfica, aumentando o número total de indivíduos, principalmente de colêmbolos; a atividade da biota do solo é influenciada pela época de coleta das análises e pela profundidade, sendo maior especialmente até os 6 cm do solo; o uso sucessivo de dejetos de suínos em pastagem não influencia o carbono da biomassa, a respiração microbiana e o quociente metabólico do solo permitindo a manutenção dos níveis de qualidade microbiológica do solo em relação à mata nativa; a atividade enzimática do solo foi influenciada pelo uso de dejetos de suínos, sendo que a urease e a Hidrólise do Diacetato de Fluoresceína (FDA) foram sensíveis na detecção de diferenças na atividade dos microrganismos dos solos com uso de dejetos de suínos enquanto que a enzima β-Glicosidase não permitiu a diferenciação entre as áreas estudadas.

Chez les mammifères, la détermination du sexe est un processus moléculaire complexe impliquant une balance de gènes finement régulée entre la voie mâle et femelle. La formation de testicules est initiée par SRY en synergie avec SF1 par sur-activation de l'expression de SOX9 au delà d'un seuil critique, ce qui entraîne l'activation du programme de la voie mâle et la répression de la développement ovarien. Des erreurs dans ce processus peuvent entraîner des pathologies de dysgénésie gonadique (DSD). Bien que de nombreux gènes impliqués dans le développement des gonades, sont à présent identifiés, les mutations de ces gènes n'expliquent qu'une minorité de cas de DSD, et les mécanismes conduisant à un développement sexuel inapproprié restent encore largement méconnus.Nous avons identifié, pour la première fois, une mutation ponctuelle dans le gène DMRT1 humain, facteur crucial de la détermination du sexe chez différentes espèces, associée à une absence de développement testiculaire. Une série d'analyses fonctionnelles démontrent le mécanisme par lequel cette mutation pourrait être lie à un DSD et que, différemment de chez la souris, DMRT1 humain, est impliqué dans la détermination testiculaire primaire.Le séquençage d’exomes sur des patients présentant un DSD de type 46,XY ont permis d’identifier des mutations délétères chez SOX7 & SOX8, suggérant une possible redondance fonctionnelle parmi les gènes SOX dans la détermination du sexe; mais également des mutations chez GATA4 établissant un rôle pour ce gène comme cause de DSD. Nos résultats d’analyses fonctionnelles indiquent des changements dans l'activité biologique des protéines mutées, mais dans certains cas, ne révèlent pas les mécanismes impliqués dans l’apparition de DSD. Par conséquent, le développement de nouveaux modèles cellulaires in-vitro pourrait permettre d’élucider ces mécanismes. Notamment, l’utilisation de cellules souches embryonnaires de souris, nous permettra de développer un nouveau modèle cellulaire pour mieux comprendre l'effet biologique de ces mutations. / In mammals, sex determination and development is a complex process that involves genetic networks acting synergistically or antagonistically. Testis formation is initiated by SRY+SF1 up-regulation of SOX9 expression beyond a critical level, resulting in the activation of male-specific program and ovaries repression. In females, SRY absence results in the activation of ovarian development and testis repression. Errors in the process result in gonadal dysgenesis (DSD). Although, we begin to know the genes involved in gonad development, mutations in these genes explain only few DSD cases, and the mechanism leading to abnormal sexual development remain misunderstood. DMRT1 regulates sex-determination in different species. Its role in mammalian sex-determination is unclear. We identified the first point mutation in human DMRT1 associated with a lack of testis-determination. Functional analyses revealed the mechanism by which this mutation could lead to DSD. Showing that, differently to mouse, human DMRT1 is involved in primary testis-determination and that at molecular level sex-determination a very conserved process. Further studies using exome sequencing on patients with 46,XY DSD identify pathogenic mutations in 2 SOX genes: SOX7 & SOX8. Suggesting a possible functional redundancy amongst SOX genes in sex-determination. We identified mutations in GATA4 associated with 46,XY DSD, establishing a role for this gene as a DSD cause. The functional consequences of these mutations on their biological activity were assessed using classical approaches. Our results indicate changes in biological activity of the mutated proteins but in some cases don’t reveal the mechanisms involved in DSD. Therefore, the development of novel in-situ cellular models may provide a tool to identify these mechanisms. Using mouse embryonic stem cells we’re developing novel cellular models to understand the biological effect of these mutations in the appropriate environment.

Orientador: Hélia Harumi Sato / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-27T13:38:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Castro_RuannJanserSoaresde_D.pdf: 3791426 bytes, checksum: 08b166335935f4a40427f1ddea405399 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo utilizar a técnica de delineamento experimental de misturas como estratégia para a produção de proteases por Aspergillus niger LBA02 em fermentação semissólida utilizando formulações contendo diferentes resíduos agroindustriais e produção de hidrolisados proteicos com atividades biológicas e funcionais utilizando a hidrólise enzimática simultânea de proteínas de diferentes fontes. Efeitos sinérgicos e significativos entre as misturas quaternárias de farelo de trigo, farelo de soja, farelo de algodão e casca de laranja foram observados durante a fermentação de A. niger LBA02, atingindo aumentos de 33,7, 7,6, 30,8 e 581,7%, respectivamente, na produção de proteases em comparação com os substratos utilizados de forma isolada. O estudo das características bioquímicas das preparações enzimáticas mostrou que a linhagem de A. niger LBA02 foi capaz de secretar diferentes tipos de proteases em resposta a cada substrato. De um modo geral, as proteases apresentaram atividade ótima a 50 °C e na faixa de pH de 3 a 4. As maiores diferenças entre as preparações de proteases foram observadas para os parâmetros cinéticos e termodinâmicos de ativação e inativação térmica. Na hidrólise enzimática de misturas contendo proteína isolada de soja, proteínas do soro de leite e da clara de ovo utilizando a preparação comercial Flavourzyme® 500L foram observados efeitos sinérgicos entre as formulações contendo misturas binárias ou ternárias, para vários parâmetros. Para atividade antioxidante determinada pelo método DPPH, a mistura contendo proteínas do soro de leite e proteínas da clara de ovo apresentaram aumentos de 45,1 e 37,3% na atividade, quando comparada aos hidrolisados obtidos com as duas fontes de forma isolada, respectivamente. Entre as propriedades funcionais, a capacidade emulsificante foi a que apresentou maior efeito sinérgico, onde os hidrolisados contendo a mistura ternária de proteína isolada de soja, proteínas do soro de leite e da clara de ovo, alcançaram valores 2 a 12 vezes superiores, em relação aos hidrolisados obtidos de forma isolada. A determinação da atividade anti-adipogênica dos hidrolisados revelou que o tratamento de células pré-adipócitas 3T3-L1 com a mistura binária de proteínas do soro de leite e da clara de ovo na concentração de 1.200 ppm reduziu o acúmulo relativo de lipídeos nas células em até 47,9%. Em relação à atividade antimicrobiana, a linhagem de Staphylococcus aureus ATCC 6538 foi a única que apresentou inibição do crescimento quando cultivada em meio suplementado com uma mistura binária de proteína isolada de soja e proteínas da clara de ovo não hidrolisadas, resultando em inibição de 16,82%. Os hidrolisados obtidos com misturas binárias de proteínas do soro de leite e da clara de ovo ou proteína isolada de soja e soro de leite estimularam o crescimento de bactérias lácticas e probióticas, resultando em aumentos de 29,4 a 100% comparados aos meios não suplementados. A utilização de composições contendo diferentes preparações comerciais de proteases para hidrólise de proteína isolada de soja e estudo da atividade antioxidante mostrou diferentes resultados para cada método utilizado. Para inibição dos radicais DPPH, os hidrolisados obtidos com Flavourzyme® 500L combinada com Alcalase® 2.4L mostraram o maior efeito sinérgico, com aumentos de 10,9 e 13,2% da atividade antioxidante, em comparação aos hidrolisados produzidos com as enzimas isoladas. Os hidrolisados obtidos utilizando a mistura ternária de Flavourzyme® 500L, Alcalase® 2.4L e YeastMax® A apresentaram o maior poder de inibição da auto-oxidação do ácido linoleico / Abstract: This study aimed to use the mixture experimental design technique as a strategy to produce proteases by Aspergillus niger LBA02 under solid state fermentation, using formulations containing different agroindustrial wastes. It also aimed to produce protein hydrolysates with biological and functional activities using the simultaneous enzymatic hydrolysis of proteins from the different sources. Synergistic and significant effects between the quaternary mixtures of wheat bran, soybean meal, cottonseed meal and orange peel were observed during fermentation by A. niger LBA02, reaching increases of 33.7, 7.6, 30.8 and 581.7%, respectively, for the production of proteases as compared to the isolated substrates. The study of the biochemical properties of the enzyme preparations showed that the strain of A. niger LBA02 was able to secrete different types of proteases in response to each substrate. In general, the proteases showed optimal activity at 50 °C in the pH range from 3 to 4. The major differences between the protease preparations were observed for the kinetic and thermodynamic parameters of thermal activation and inactivation. In the enzymatic hydrolysis of mixtures containing soy protein isolate, bovine whey protein and egg white protein using the commercial preparation FlavourzymeTM 500L, synergistic effects were observed for various parameters between formulations containing binary or ternary mixtures,. For antioxidant activity as determined by the DPPH assay, the mixture containing bovine whey protein and egg white protein showed increases of 45.1 and 37.3% in their activities as compared to hydrolysates obtained with the isolated proteins, respectively. Of the functional properties, the emulsifying capacity showed the greatest synergistic effect, the hydrolysates containing the ternary mixture of soy protein isolate, bovine whey protein and egg white protein, showing increases ranging from 2 to 12-fold as compared to the hydrolysates obtained using isolated substrates. The determination of the anti-adipogenic activity of the hydrolysates indicated that the treatment of 3T3-L1 preadipocyte cells with 1200 ppm of the mixture containing bovine whey protein and egg white protein reduced the relative lipid accumulation to 47.9%. With respect to antimicrobial activity, the strain of Staphylococcus aureus ATCC 6538 was the only one which showed growth inhibition when cultivated in a medium supplemented with a non-hydrolyzed binary mixture of soy protein isolate and egg white protein, resulting in inhibition of 16.82%. The hydrolysates obtained with binary mixtures of bovine whey protein and egg white protein or soy protein isolate and bovine whey protein stimulated the growth of probiotic and lactic acid bacteria, reaching increases from 29.4 to 100% when compared to non-supplemented media. The use of formulations containing various commercial preparations of proteases for the hydrolysis of soy protein isolate and the study of antioxidant activities showed different results for each method. For DPPH radical scavenging, the hydrolysates obtained with FlavourzymeTM 500L combined with AlcalaseTM 2.4L showed greater synergistic effects, with increases of 10.9 and 13.2% in antioxidant activity as compared to the hydrolysates produced with individual enzymes. The hydrolysates obtained from ternary mixtures of FlavourzymeTM 500L, AlcalaseTM 2.4L and YeastMaxTM A showed the greatest power of inhibition of linoleic acid autoxidation / Doutorado / Ciência de Alimentos / Doutor em Ciência de Alimentos

Lectinas são proteínas cuja principal característica é a de se ligar específica e reversivelmente a carboidratos. BanLec é a lectina presente na polpa de bananas, que se liga especificamente a manose e glicose, e é capaz de induzir a proliferação de células T, podendo estimular a resposta imune. Existem indícios de que o teor de BanLec pode variar dependendo do estádio de amadurecimento e do tipo de cultivar, o que pode afetar a quantidade de BanLec existente na fruta quando consumida in natura e a possível resposta imune frente ao consumo de banana. Por este motivo, um dos objetivos desse trabalho foi determinar os teores e a atividade hemaglutinante de BanLec em extratos de farinha de banana verde, além de bananas das cultivares Pacovan, Figo, Terra, Mysore e Nanicão, nos estádios de maturação verde e maduro, e submetidas a tratamento com 1-MCP e baixa temperatura (para cv. Nanicão). Com vista a atender ao objetivo de avaliar seus efeitos imunomoduladores in vivo, a BanLec foi purificada da cultivar Nanicão e administrada por via oral a camundongos BALB/c. Os ensaios de atividade hemaglutinante dos extratos de banana apontaram para maior quantidade de BanLec no fruto maduro, quando comparado ao verde, e ausência dessa proteína na cultivar Figo. Os parâmetros imunológicos analisados após administração de BanLec aos camundongos demonstram que a resposta imune gerada após ingestão de BanLec é dose dependente, além disso, a administração de 50 µg de BanLec aos animais foi capaz de modular citocinas importantes na resposta imunológica, provavelmente causando um efeito que pode ser interpretado como mais protetor do que patogênico. Com base nos resultados obtidos, podemos concluir que existem diferenças nos teores de BanLec dependendo da cultivar e estádio de maturação analisado, sendo que essa proteína não está presente na polpa de todas as variedades de banana e finalmente, que ela tem grande potencial imunomodulador in vivo, uma vez que ativou citocinas de resposta anti-inflamatória. / Lectins are proteins which bind specifically and reversibly to carbohydrates. BanLec is the lectin present in banana pulp, and it binds to mannose and glucose, being capable of inducing T-cell proliferation, and to stimulate the immune response. There are some evidence that the amount of BanLec may vary depending on the maturation stage of the fruit and the cultivar (cv.), which may affect the amount of BanLec and the possible immune response after consumption of banana. Thus, this study aimed to evaluate the amount of BanLec and its hemagglutinating activity in crude extracts of bananas from cultivars Pacovan, Figo, Terra, Mysore and Nanicão, in both unripe and ripe maturation stage, and also fruits which were treated with 1-MCP and low temperature. In addition, in order to access their immunomodulatory effects in vivo, BanLec was purified by affinity chromatography and administered orally to BALB/c mice. The hemagglutinating activity assays indicate higher amount of BanLec in ripe fruit. Moreover, the possible was undetectable in the pulp of banana Figo. The immunological parameters of mice orally fed with BanLec showed that the immunological response is dependent on the amount of protein administrated, in agreement to previous in vitro studies. Besides, 50 µg of BanLec, were able to modulate some cytokines in immune response, causing an effect that seems to be more protective than pathogenic. We conclude that there are important differences in amount of BanLec depending on the cultivar and the maturation stage, and BanLec has a dose-dependent immunomodulatory effect in vivo.

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2016-09-27T22:26:12Z No. of bitstreams: 1 DISSERTA??O Val?ria Silva G?es.pdf: 1629398 bytes, checksum: 6e130737f6d57007b90ea3ae8de5042b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T22:26:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTA??O Val?ria Silva G?es.pdf: 1629398 bytes, checksum: 6e130737f6d57007b90ea3ae8de5042b (MD5) Previous issue date: 2015-03-31 / The Lamiaceae family has a great importance in the Brazilian semiarid region due to their species of pharmacological properties. Martianthus leucocephalus (Mart. Ex Benth.) JFB Pastore belongs to the Lamiaceae family and has had the antimicrobial activity of essential oil proven. However, this species lacks pharmacological studies that evaluate its biological potential. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect on the central nervous system, the acute toxicity, as well as investigate the antinociceptive and anti-inflammatory of Martianthus leucocephalus extract. The possible mechanism of action of species was also studied. The experiments were performed in the Chemistry Laboratory of Bioactive Natural Products and in the Laboratory of Pharmacology at the State University of Feira de Santana. The effect on the central nervous system was evaluated through Behavioral Pharmacological Screening by Rota Rod test. The acute toxicity was determined using the protocol Organization for Economic Cooperation and Development (OECD - 420/2001). The antinociceptive activity was investigated in the tests of acetic acid, formalin and hot plate. The mechanism of action was determined using the opioid antagonist naloxone in the hot plate model. The study of anti-inflammatory activity was performed using the paw edema induced by carrageenan tests and capillary permeability induced by acetic acid. The results were analyzed by analysis of variance (ANOVA). Martianthus leucocephalus showed no acute toxicity or muscle relaxant effects action on the motor system. The antinociceptive and anti-inflammatory properties were found significantly compared to the control group animals. / A fam?lia Lamiaceae tem uma grande import?ncia na regi?o do semi?rido brasileiro devido ?s suas esp?cies detentoras de propriedades farmacol?gicas. Martianthus leucocephalus (Mart. ex Benth.) J.F.B. Pastore pertence ? fam?lia Lamiaceae e j? teve a atividade antimicrobiana do seu ?leo essencial comprovada. No entanto, a referida esp?cie carece outros de estudos farmacol?gicos que avaliem seu potencial biol?gico. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito sobre o sistema nervoso central, a toxidade aguda, bem como investigar as atividades antinociceptiva e anti-inflamat?ria de extratos de Martianthus leucocephalus proveniente de cultivo. O poss?vel mecanismo de a??o da esp?cie tamb?m foi estudado. Os experimentos foram realizados no Laborat?rio de Qu?mica de Produtos Naturais e Bioativos e no Laborat?rio de Farmacologia da Universidade Estadual de Feira de Santana. O efeito sobre o sistema nervoso central foi avaliado por meio da Triagem Farmacol?gica Comportamental e pelo teste do Rota Rod. A toxidade aguda foi averiguada utilizando o protocolo Organization for Economic Cooperation and Development (OECD ? 420/2001). A atividade antinociceptiva foi investigada nos testes do ?cido ac?tico, formalina e placa quente. O mecanismo de a??o foi apurado utilizando o antagonista opioide naloxona no modelo da placa quente. O estudo da atividade anti-inflamat?ria foi realizado utilizando os testes do edema de pata induzido por carragenina e da permeabilidade capilar induzida por ?cido ac?tico. Os resultados obtidos foram analisados atrav?s da an?lise de vari?ncia (ANOVA). Martianthus leucocephalus n?o mostrou toxidade aguda nem a??o miorrelaxante sobre o sistema motor. As propriedades antinociceptiva e anti-inflamat?ria foram evidenciadas de forma significativa em rela??o aos animais do grupo controle.

<p>Kombuha je tradicionalni napitak koji se dobija fermentacijom zaslađenog crnog<br />ili zelenog čaja, fiziolo&scaron;kom aktivno&scaron;ću čajne gljive, koja predstavlja simbiozu<br />autohthonih vrsta kvasaca i bakterija sirćetnog vrenja. Cilj rada je bio da se ispita<br />biolo&scaron;ka aktivnost konzumnih kombuha napitaka (titrabilne kiselosti 3,5-4 g/L) od<br />crnog čaja (<em>Camellia sinensis</em> L), čaja ehinacee (<em>Echinacea purpurea</em> L.) i<br />rtanjskog čaja (<em>Satureja montana</em> L.). Za ispitivanje antimikrobne aktivnosti<br />kombuha napitaka upotrebljeni su sledeći sojevi bakterija, kvasaca i plesni:<br /><em>Pseudomonas aeruginosa</em>, <em>Staphylococcus aureus</em>, <em>Bacillus sp.</em>, <em>Salmonella<br />enteritidis, Proteus mirabilis, Escherichia coli, Sarcina lutea, Saccharomyces<br />cerevisiae, Candida pseudotropicalis, Rhodotorula sp., Penicillium<br />aurantiogriseum, Aspergillus niger i Aspergillus flavus</em>. Antioksidativna aktivnost<br />kombuha napitaka ispitana je na DPPH i OH radikale ESR spektralnom metodom.<br />Antiproliferativna aktivnost čajeva i kombuha napitaka od crnog i rtanjskog čaja<br />ispitana na tri ćelijske linije humanih karcinoma: HeLa (epitelni karcinom<br />cerviksa), MCF-7 (adenokarcinom dojke) i HT-29 (adenokarcinom debelog<br />creva). Pored istraživanja biolo&scaron;ke aktivnosti kombuha napitaka, cilj rada je bio da<br />se ispitaju i neki od osnovnih parametara kombuha fermentacije &ndash; optimalna<br />količina izvora ugljenika i azota u medijumu za kultivaciju, geometrijske<br />karakteristike fermentora, inokulacija starter kulturama. Definisanje kritičnih<br />parametara kombuha fermentacije je bio osnov za izvođenje matematičkog<br />modela za scale-up fermentativnog procesa.</p> / <p>Kombucha is a traditional beverage obtained by fermenting sweetned black or<br />green tea with tea fungus, which represents a symbiotic combination of acetic acid<br />bacteria and autochthonous yeast species. In this study, the antimicrobial,<br />antioxidative and antiproliferative activity of kombucha beverages (titratable<br />acidity 3,5-4 g/L) obtain from black tea (<em>Camellia sinensis</em> L), echinacea tea<br />(<em>Echinacea purpurea</em> L.) and rtanj tea (<em>Satureja montana</em> L.) were tested.<br /><em>Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus sp., Salmonella<br />enteritidis, Proteus mirabilis, Escherichia coli, Sarcina lutea, Saccharomyces<br />cerevisiae, Candida pseudotropicalis, Rhodotorula sp., Penicillium<br />aurantiogriseum, Aspergillus niger i Aspergillus flavus</em> were used as test<br />microorganisms for examination of antimicrobial activity. The antioxidant activity<br />of differently prepared kombucha beverages was examined agains DPPH and OH<br />radicals by ESR-spectrometry. Antiproliferative activity of black tea kombucha<br />and Satureja montana kokmbucka was measured by sulforhodamine B<br />colorimetric assay on HeLa (cervix epitheloid carcinoma), HT-29 (colon<br />adenocarcinoma), and MCF-7 (breast adenocarcinoma) cells line. Also, same<br />parametars of kombucha fermentation &ndash; optimal quantity of source of carbon and<br />nitrogen in cultivation medium, geometric characteristics of reactors and<br />inoculation by starter culture &ndash; were tested. Definition of critical parameters of<br />kombucha fermentation is important for derivation of mathematical model for<br />scaling-up fermentation process.</p>

V předložené práci byly testovány modifikované lignitické huminové kyseliny za účelem zjištění jejich schopnosti remediace zemědělské půdy. Před samotnou extrakcí jednotlivých huminových kyselin byl lignit modifikován jednou ze série deseti organických kyselin. Cílem modifikace byla simulace procesů vyskytujících se v rizosféře, tj. procesů, kdy malé organické molekuly způsobují změny ve struktuře půdní organické hmoty, během nichž dochází k produkci biologicky aktivních agregátů/molekul podílejících se na růstu rostlin. Prvním krokem této práce bylo zkoumání fyzikálně chemických vlastností vyprodukovaných huminových kyselin a jejich molekulové struktury prostřednictvím elementární analýzy, infračervené spektroskopie s Fourierovou transformací (FTIR), vysokoúčinné gelové chromatografie (HPSEC), metodou měření povrchového napětí a plynovou chromatografií s hmotnostní spektrometrií (GC-MS). Dalším krokem bylo studium parametrů biologické aktivity, získaných z experimentů zaměřených jak na vyšší rostliny, tak na remediaci mikrobiologické aktivity zemědělské půdy. Biologická aktivita vůči vyšším rostlinám byla zkoumána na základě experimentu s kukuřicí, byla měřena délka a hmotnost kořenů, rozvětvení jejich laterálních kořenů a obsah sacharidů a proteinů. Z experimentů cílených na půdu se jednalo o měření množství uvolněného CO2 při laboratorní inkubaci ošetřené půdy a půdní hydrofobicitu (metoda měření kontaktního úhlu). Na závěr byly výsledky podrobeny statistické analýze s využitím Pearsonova korelačního koeficientu s cílem nalézt vztahy mezi fyzikálně chemickými vlastnostmi a biologickou a povrchovou aktivitou studovaných huminových kyselin. Korelace byly zjištěny mezi biologickou aktivitou a fyzikálně chemickými vlastnostmi huminových kyselin. Naopak, nebyly zjištěny mezi povrchovými a fyzikálně chemickými vlastnostmi. Nejefektivnějším modifikačním činidlem z pohledu biologické aktivity byla 20% kyselina mravenčí, nejméně efektivním 20% kyselina propionová.

MSc (Chemistry) / Department of Chemistry