O Filo Microsporidia é composto por parasitas intracelulares obrigatórios que infectam de invertebrados a mamíferos. Alguns gêneros de microsporídeos entomopatogênicos são de extrema importância, visto que diversos estudos epizootiológicos indicam tais agentes como detentores de um papel fundamental na regulação da densidade populacional de seus hospedeiros. Além disso, esses patógenos são considerados como um dos principais obstáculos na manutenção da sanidade nas criações de insetos em laboratório. No Brasil, a partir de 1977, foram relatadas as primeiras ocorrências de nosemoses em criações de laboratório da broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabr.) (Lepidoptera: Crambidae). Este problema agravou-se no decorrer dos anos em função de alterações nas técnicas de criação da broca visando aumentar a escala produtiva deste inseto e do parasitoide Cotesia flavipes (Cam.) (Hymenoptera: Braconidae). Os objetivos deste trabalho consistiram na: (i) caracterização morfológica e molecular do patógeno, abordando ciclo de vida, patogenicidade a outros lepidópteros de importância agrícola e prevalência em populações de laboratório e campo de D. saccharalis e C. flavipes; (ii) determinação da virulência de Nosema sp. a D. saccharalis em laboratório; (iii) caraterização da propagação do patógeno nas lagartas e sua disseminação pelas fezes; (iv) efeitos da infecção na biologia de D. saccharalis e de C. flavipes e no desempenho do parasitoide quanto à seleção de hospedeiros infectados e não infectados; (v) transmissão do patógeno por C. flavipes a sua progênie e seus hospedeiros e (vi) controle de Nosema sp. em D. saccharalis por produtos antimicrobianos. Foi confirmado que o microsporídeo isolado de D. saccharalis pertence ao gênero Nosema, sendo patogênico à todas as espécies-praga avaliadas. A prevalência do patógeno em C. flavipes foi maior que a prevalência nas criações de D. saccharalis. Os esporos de Nosema sp. foram liberados nas fezes de D. saccharalis, variando o tempo até a liberação e a quantidade de esporos de acordo com o inóculo inicial de infecção. Embora Nosema seja considerado por muitos cientistas como enzoótico e com baixo potencial como agente de controle microbiano para ser usado de forma inundativa, a DL50 para D. saccharalis de 1º ínstar foi estimada em 5,6 esporos, demonstrando como as lagartas recém-eclodidas são muito suscetíveis ao microsporídeo. Infecções por Nosema sp. afetaram negativamente a biologia de D. saccharalis, exceto a duração da fase de pupa, sendo transmitido horizontal e verticalmente. Não foram observadas diferenças significativas na mortalidade de D. saccharalis infectadas por Nosema sp. tratadas com os antimicrobianos utilizados neste estudo em comparação à mortalidade do tratamento controle. Os parâmetros biológicos e o comportamento de C. flavipes sofreram alterações causadas pelo patógeno Nosema sp., que foi transmitido pelo parasitoide para o hospedeiro e por pelo menos quatro geraçõe de C. flavipes. Estes resultados ressaltam a relevância dos estudos sobre o impacto de Nosema sp. em D. saccharalis e C. flavipes, justificando esforços futuros no manejo da doença, dada a importância dessas espécies no agroecossistema da cana-de-açúcar. / The phylum Microsporidia consists of obligatory intracellular parasites that infect from invertebrates to mammalians. Some genera of entomopathogenic microsporidia are extremely important, considering that several epizootiological studies indicate that these agents as having a key role in density population regulating of their hosts. In addition, these pathogens are considered a major obstacle in maintaining healthiness in laboratory insect rearing. In Brazil occurrences of nosemoses were first reported in laboratory rearing of sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Fabr.) (Lepidoptera: Crambidae), in the 1977. This problem has worsened over the years due to changes in the rearing methods aiming to increase the production scale of this insect and the parasitoid Cotesia flavipes (Cam.) (Hymenoptera: Braconidae). The objectives of this project consisted of (i) morphological and molecular characterization of the pathogen, addressing life cycle, pathogenicity to other lepidopterans of agricultural importance and prevalence in D. saccharalis and C. flavipes in laboratory rearing and in sugarcane plantations in the State of São Paulo, (ii) virulence of Nosema sp. to D. saccharalis in laboratory, (iii) transmission of the pathogen in D. saccharalis larvae and their dissemination in feces, (iv) the effects of infection on D. saccharalis and C. flavipes biology and performance of the parasitoid on the selection of infected and uninfected hosts, (v) the transmission of the pathogen by C. flavipes to their progeny and their hosts and (vi) the control of Nosema sp. in D. saccharalis by antimicrobial products. It was confirmed that the microsporidium isolated from D. saccharalis belongs to the genus Nosema, being pathogenic to all pest species evaluated in the host specificity study. The prevalence of the pathogen in C. flavipes was higher than the one in the D. saccharalis rearing facilities. Nosema sp spores were disseminated in the feces of D. saccharalis, varying the time until their release and the quantity of spores according to the initial inoculum of infection. Although Nosema is considered by many scientists as enzootic and low potential as a microbial control agent to be used inundatively, the LD50 for 1st instar D. saccharalis was estimated as 5.6 spores, demonstrating how that the newly-hatched larvae are very susceptible to this pathogen. Nosema sp. infections negatively affected the biology of D. saccharalis, except in the duration of the pupal stage, being transmitted horizontally and vertically. There were no significant differences in mortality of D. saccharalis infected by Nosema sp. treated with the antibiotics used in this study compared with the mortality of the control treatment. The biological parameters and behavior of C. flavipes suffered adverse effects caused by the pathogen Nosema sp., which was transmitted to the host by the parasitoid and its progeny to four C. flavipes generation. These results underscore the relevance of studies on the impact of Nosema sp. in D. saccharalis and C. flavipes, justifying future efforts in managing the disease, given the importance of these species in the sugarcane ecosystem.

O controle de Hypothenemus hampei é realizado basicamente com uso de inseticidas químicos, especialmente aqueles a base de endossulfan, cuja comercialização será proibida no Brasil a partir de julho de 2013. Diante disso, outras estratégias devem ser integradas buscando-se o controle desta praga com menor impacto ao ambiente. Nesse contexto, o fungo Beauveria bassiana destacase como um dos agentes de controle biológicos mais promissores. Neste estudo, buscou-se a associação da técnica de impregnação de tecido têxtil com B. bassiana associado à armadilha contendo a mistura de alcoóis metanol: etanol (1:1 v/v) como atraentes químicos para H. hampei, visando a auto-inoculação e disseminação do fungo pelo inseto, visando o seu controle. Inicialmente foi determinado em laboratório, a virulência de nove isolados de B. bassiana, através da pulverização de suspensões de 107 conídios.mL-1, diretamente sobre adultos de H. hampei. Todos os isolados apresentaram baixa virulência ao inseto, com mortalidade máxima de 38,5%. O isolado ESALQ-PL63 foi escolhido para dar continuidade aos estudos por possuir registro de comercialização. Posteriormente, sete tecidos têxteis sintéticos foram avaliados quanto à produção do isolado selecionado sobre sua superfície em duas condições de luz (fotofase de 0 e 12 horas). O tecido sintético Lã \"Sherpa\" foi selecionado por permitir uma maior produção de conídios nas duas condições testadas, atingindo até 5,44 × 108 conídios.cm-2. A exposição de H. hampei ao tecido com o fungo por apenas 5 segundos foi suficiente para causar 88,5% de mortalidade dos insetos. Em área de café sombreado foram conduzidos dois experimentos para avaliar uma armadilha de auto-inoculação contendo o patógeno produzido sobre o tecido. Foram usadas duas armadilhas controle, sendo uma armadilha de autoinoculação sem fungo e uma armadilha de eficiência reconhecida (modelo IAPAR). A eficiência de coleta da armadilha de auto-inoculação com o fungo foi menor do que a armadilha IAPAR, mas esta se mostrou eficiente na contaminação e mortalidade dos insetos pelo fungo. No primeiro experimento, a mortalidade confirmada pelo patógeno no último dia de avaliação (151 dias) foi de 64,7%. A viabilidade dos conídios passou de 98,3%, logo após a montagem das armadilhas, para 86,9% após 65 dias. Após160 dias a viabilidade reduziu para 44,0%. No segundo experimento, a última avaliação foi realizada após 40 dias, sendo nesta data observada mortalidade confirmada de 89,9% e viabilidade dos conídios de 78,1%. Em ambos os experimentos a concentração de conídios reduziu-se ao longo do tempo. O sistema de auto-inoculação apresentou resultados promissores, mas sendo necessárias alterações na armadilha para aumentar a captura de insetos e estudos epizootiológicos para avaliar a capacidade de disseminação da doença no campo pelos insetos que passaram pela armadilha. / The control of Hypothenemus hampei is accomplished primarily with the use of chemical insecticides, mainly endossulfan, whose commercialization will be prohibited in Brazil in July 2013. Therefore, other strategies must be integrated seeking control of this pest with less impact on the environment. In this context, the fungus Beauveria bassiana stands out as one of the most promising biological control agents. In this study, we associated the technique of fabric impregnated with B. bassiana with a trap containing a mixture methanol: ethanol (1:1 v/v) as an attractive chemical for H. hampei, aiming the self-inoculation and fungus dissemination by the insect, therefore their control. Initially, we determined in the laboratory, the virulence of nine isolates of B. bassiana using a spray suspension of 107 conidia.mL-1 directly on adults of H. hampei. All isolates showed low virulence to insects, with maximum mortality of 38.5%. The isolate ESALQ-PL63 was chosen to continue the studies for having a market register. Subsequently, seven synthetic fabrics were evaluated for the production of the selected isolate on its surface under two light conditions (photofase of 0 and 12 hours). The synthetic fabric Lã \"Sherpa\" was selected because it allows greater conidia production under the two conditions tested, reaching 5.44 × 108 conidia.cm-2. Exposure of H. hampei to the fabric impregnated with the fungus for only 5 seconds was enough to cause 88.5% of insect mortality. In an area of shaded coffee, two experiments were conducted to evaluate a self-inoculation trap containing the pathogen. We used two control traps without fungus: one self-inoculation trap without the fungus and a widely recognized efficient trap (IAPAR model). The collection efficiency of the self-inoculation trap with the fungus was lower than that of the IAPAR trap, however, it proved effective in contamination and insect mortality caused by the fungus. In the first experiment, mortality caused by the pathogen at the last evaluation day (151 days) was 64.7%. The viability of the conidia surpassed 98.3% after the assembly of the traps and 86.9%, after 65 days. After 160 days, the viability decreased to 44.0%. In the second experiment, the last evaluation was performed after 40 days, when we observed mortality of 89.9% and conidia viability of 78.1%. In both experiments, the conidia concentration reduced over time. The self-inoculation system showed promising results, but changes are needed to increase insect catches and further epizootiological studies to assess the possibility of disease spread in the field by insects that crossed the trap.

A broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) vem se constituindo, em uma importante praga do milho, com relatos de surtos populacionais em diversas partes do país. Devido ao aumento de sua importância, em milho, nos últimos anos, a presente pesquisa teve como objetivos: (a) determinar os limites térmicos e a temperatura ótima de desenvolvimento de D. saccharalis; (b) validar as constantes térmicas (K), para fase de ovo e período lagarta-pupa estimadas em laboratório, nas condições de campo, levando-se em consideração as condições microclimáticas; (c) avaliar os danos e consequente perda na produção de grãos provocadas pelo ataque de diferentes densidades larvais de D. saccharalis em dois estádios fenológicos de milho e (d) determinar o raio e área de dispersão de Trichogramma galloi Zucchi, 1988 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) em milho visando ao controle de D. saccharalis. Os resultados obtidos mostram que o limiar térmico inferior de desenvolvimento (Tb) de D. saccharalis foi de14; 13 e 12°C para as fases de ovo, larva e pupa, respectivamente; as faixas de temperatura ótima de desenvolvimento (Topt), estimadas experimentalmente, foram de 30 a 32°C para as fases de ovo e larva e de 28 a 30°C para a fase de pupa; o limiar térmico superior (Tmáx) foi de 35,4ºC para a fase de larva, estimada pelo modelo de Logan-6 e que ficou dentro da faixa térmica determinada experimentalmente, que indicou também, para este parâmetro, a faixa térmica de 36 a 38ºC para a fase de ovo e de 32 a 34ºC para a fase de pupa. As previsões em campo de eclosão das lagartas e emergência dos adultos (período lagarta-pupa) podem ser feitas com as constantes térmicas (K) obtidas em laboratório [76,5 graus-dias (GD) para a fase de ovo e 476,2 GD para o período lagarta-pupa], desde que sejam utilizados os dados de temperatura obtidos com a estação meteorológica automática e dados de microclima, para a fase de ovo e período lagarta-pupa, respectivamente. Os danos e as perdas na produção provocado por D. saccharalis independem do estádio fenológico das plantas de milho, porém a redução na produção de grãos é proporcional ao número de lagartas por planta utilizadas nas infestações, sendo essas reduções de 11; 17; 28 e 39% para 50; 100; 150 e 200 lagartas por planta. O raio de dispersão de T. galloi foi de 11,8 e 12,1 m, sendo a área de dispersão de 176m2 e187m2, com as plantas de milho nos estádios v4-6 e v6-8, respectivamente. / The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) has become an important pest of corn in Brazil, with reports of outbreaks in many parts of the country in recent years. In view of this situation, this study aimed to: (a) determine the thermal limits of D. saccharalis; (b) determine the thermal constants (K) for the egg stage and caterpillar-pupa period estimated in field conditions, taking into consideration the microclimate conditions; (c) evaluate the damage and consequent production losses caused by infestation at different larval densities of D. saccharalis at two phenological stages of corn; and (d) determine the dispersal radius and area of Trichogramma galloi Zucchi, 1988 (Hymenoptera: Trichogrammatidae) in corn, aiming to control D. saccharalis. The results showed that the lower threshold temperature (Tt) of D. saccharalis was 14, 13 and 12 ºC for the egg, larval and pupal stages, respectively. Optimal temperature ranges (Topt), estimated experimentally, were 30 to 32 ºC for the egg and larval stages and 28 to 30 ºC for the pupal stage. The upper threshold temperature (Tmax) was 35.4 ºC for the larval stage estimated by the Logan-6 model. This was within the thermal range determined experimentally, which also indicated the thermal range for Tmax of 36 to 38 ºC for the egg stage and 32 to 34 ºC for the pupal stage. Larval hatching and adult emergence (caterpillar-pupa period) in the field can be predicted with thermal constants (K) obtained in the laboratory (76.5 degree-days) (DD) for the egg stage and 476.2 DD for the caterpillar-pupa period), provided that temperature data obtained from the automatic station and microclimate data for the egg stage and caterpillar-pupa period, respectively, are used. The damage caused by D. saccharalis was independent of the phenological stage of the corn plants, but the reduction in grain production was proportional to the number of larvae per plant used in the infestation, with reductions of 11, 17, 28 and 39% for 50, 100, 150 and 200 caterpillars per plant. The dispersal radius of T. galloi was 11.8 and 12.1 m, and the dispersal area was 176 m2 and 187 m2 with corn plants in the V4-6 and V6-8 stages, respectively.

Com o objetivo de analisar a fauna de himenópteros parasitoides (Hymenoptera:Chalcididae) e de coleobrocas (Coleoptera: Cerambycidae) associados à cultura de T. grandis, foram utilizadas 5 armadilhas de Malaise instaladas no interior da floresta plantada. As coletas foram realizadas, semanalmente, de outubro de 2009 a setembro de 2010, em área de reflorestamento situado no município de Cáceres, MT. Foram analisados os índices faunísticos de frequência, constância, abundância e dominância e também diversidade de espécies. Foram coletados 414 parasitoides; pertencentes às famílias Chalcididae e distribuídos em 3 gêneros e 16 espécies e 715 espécies de coleobrocas, pertencentes à família Cerambycidae e distribuídos em 2 subfamílias, 18 tribos, 33 gêneros e 36 espécies. As espécies de parasitoides mais abundantes foram Brachymeria pandora e Ceyxia ventrispinosa. As espécies mais abundantes de coleobrocas foram Neoclytus pusillus, Achryson surinamum, Chlorida festiva, Coleoxestia atrata, Cosmoplatidius abare, Hexoplon uncinatum e Megacyllene acuta. / This research deals with the association of parasitoids (Hymenoptera: Chalcididae) with wood borers (Coleoptera: Cerambycidae) in a commercial forest of Tectona grandis located in Cáceres, State of Mato Grosso, Brazil. The insects were collected by using five Malaise traps in different sites of the forest, from October 2009 to September 2010. The following indexes were analyzed: frequency, constancy, abundance, dominance and species diversity. A total of 414 Chalcididae parasitoids and 715 Cerambycidae wood borers were collected. The most abundant parasitoid species were Brachymeria pandora and Ceyxia ventrispinosa while the most wood borers ones were Neoclytus pusillus, Achryson surinamum, Chlorida festiva, Coleoxestia atrata, Cosmoplatidius abare, Hexoplon uncinatum and Megacyllene acuta.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-23T15:34:28Z No. of bitstreams: 1 Cynara Moura de Oliveira.pdf: 330011 bytes, checksum: a7231e2939568519f92e65261f2431a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-23T15:34:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cynara Moura de Oliveira.pdf: 330011 bytes, checksum: a7231e2939568519f92e65261f2431a3 (MD5) Previous issue date: 2013-02-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The tomato fruit borer, Neoleucinodes elegantalis is the major pest of tomato, which can reduce the production by over 50%. Chemical control is widely used, but the behavior of neonate larvae, which penetrate rapidly in fruits, hamper contact with insecticides. An alternative is the use of Integrated Pest Management, involving selective insecticides, environmental management practices and parasitoids of the genus Trichogramma. The study aimed: to evaluate the occurrence of species Trichogramma in Bezerros and Camocim de São Felix, Pernambuco; to evaluate the effect of density and egg age of N. elegantalis in tomato fruits and cards on biological aspects of T. pretiosum at different temperatures. The best results were reached in eggs exposed on tomato fruit. There was significant difference in sex ratio at densities of 25 and 35 eggs, between fruits and cards. The longevity presented significant difference in all egg densities in fruit and cards. The parasitism reduced when increased the egg age of N. elegantalis. Parasitized eggs 24-48 h allowed 98.75% of emergence. The egg age didn't influence sex ratio, but the adult longevity ranged from 2.96 to 4.23 days. With increase temperature occurred reduction in the periods of egg-pupa, pupa-adult and egg-adult of T. pretiosum. The egg parasitism on N. elegantalis ranged from 30.1% (33 °C) to 78.8 (25 °C). The temperature of 28°C allowed 100% of parasitoids emergence. The sex ratio was not affected in any temperature and longevity reduced with increase temperature. The lower threshold temperature for the period egg-adult of the parasitoid was 9.9 °C and its respective thermal constant of 155.5 degree days. / A broca-pequena, Neoleucinodes elegantalis é a principal praga do tomateiro, podendo reduzir a produção em mais de 50%. O controle químico é muito utilizado, porém o comportamento das larvas neonatas, que penetram rapidamente nos frutos, dificulta o contato com os inseticidas. Uma alternativa é a utilização do Manejo Integrado de Pragas, associando inseticidas seletivos, práticas de manejo ambiental e parasitoides do gênero Trichogramma. O trabalho teve como objetivos: avaliar a ocorrência de espécie (s) de Trichogramma em tomateiro nos Municípios de Bezerros e Camocim de São Félix, Pernambuco; avaliar o efeito da densidade e da idade de ovos de N. elegantalis em frutos de tomateiro e em cartelas, sobre aspectos biológicos de T. pretiosum; determinar as exigências térmicas e aspectos biológicos em diferentes temperaturas. Os melhores resultados foram obtidos em ovos expostos sobre frutos de tomateiro. Houve diferença na razão sexual nas densidades de 25 e 35 ovos, entre frutos e cartelas. A longevidade apresentou diferença em todas as densidades de ovos em frutos e cartelas. O parasitismo foi reduzido com o aumento da idade dos ovos de N. elegantalis. Ovos parasitados de 24-48 h proporcionaram emergência de 98,75%. A idade dos ovos não influenciou a razão sexual, porém a longevidade dos adultos variou de 2,96 a 4,23 dias. Com o aumento da temperatura ocorreu redução nos períodos de ovo-pupa, pupa-adulto e ovo-adulto de T. pretiosum. O parasitismo em ovos de N. elegantalis variou entre 30,1% (33 oC) a 78,8 (25 oC). A temperatura de 28ºC proporcionou emergência de 100% dos parasitoides. A razão sexual não foi afetada em nenhuma das faixas de temperatura e a longevidade foi reduzida com o aumento da temperatura. O limite térmico inferior de desenvolvimento (Tb) para o período de ovo-adulto do parasitoide foi de 9,9 °C e sua respectiva constante térmica (GD) de 155,5.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T12:13:06Z No. of bitstreams: 1 Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T12:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) Previous issue date: 2013-02-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The bacterium Bacillus thuringiensis (Berliner) presents remarkable aspects for the control of insect pests, such as its mode of action, specificity and selectivity. Thus, this study aimed to evaluate the toxic activity of B. thuringiensis isolates in larvae of Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) and determine the toxin gene contents for the very active isolates. The insects were maintained on artificial diet. Twenty four isolates were used, which were preserved in LB medium, 15% glycerol and 0.02% SDS and kept at -80 ° C. General and specific primers were used to survey for toxin genes. In pathogenicity tests with D. saccharalis and D. flavipennella, 16 and 18 isolates showed activity toward borers, respectively. The LC50 values among isolates for the population of D. saccharalis ranged from 0.08 x 105 (LIIT-0105) and 4104 x 105 (LIIT-2707) crystals + spores/mL. The isolated LIIT-0105 was 4,382 and 18.59 times more toxic than Btk and Btt, respectively. For D. flavipennella, the LC50 values between isolates ranged from 0.40 x 105 (LIIT-2707) and 542.75 x 105 (LIIT-2109) crystals + spores/mL. The isolate LIIT-2707 was 1,137 and 11.52 times more toxic than Btk and Btt, respectively. The isolate LIIT-0105 presented the lowest LC50 for D. saccharalis that harbored the genes cry1, cry2, cry8 cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2, cry9C. For the borer D. flavipennella, the isolated LIIT-2707 presented the lowest LC50 and the following genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 and cry2Ab2 were amplified. The results suggest that B. thuringiensis isolates present a great variability of genes for bioprospection, and thus potential for developing new products and insertion on plants to express Bt genes for the control of D. saccharalis and D. flavipennella. / A bactéria Bacillus thuringiensis (Berliner) apresenta características essenciais no controle de insetos-praga, tais como seu modo de ação, especificidade e seletividade. Dessa forma, esta pesquisa objetivou avaliar a atividade tóxica de isolados de B. thuringiensis em larvas de Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) e caracterizar quanto à presença de gene de toxinas os isolados tóxicos. Estas pragas foram mantidas em dieta artificial. Foram utilizados 24 isolados, preservados em meio LB, glicerol a 15% e SDS a 0,02% e mantidos a -80ºC. Para caracterização molecular foram utilizados iniciadores gerais e específicos. Nos testes de patogenicidade com D. saccharalis e D. flavipennella, 16 e 18 isolados mostraram-se ativos, respectivamente. Os valores de CL50 entre os isolados para a população de D. saccharalis variaram entre 0,08 x 105 (LIIT-0105) e 4104 x 105 (LIIT-2707) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-0105 foi 18,59 e 4382 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. Para D. flavipennella, os valores de CL50 entre os isolados variaram entre 0,40 x 105 (LIIT-2707) e 542,75 x 105 (LIIT-2109) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-2707 foi 11,52 e 1137 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. O isolado LIIT-0105 que teve a menor CL50 para D. saccharalis apresentou os genes cry1, cry2, cry8, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2 e cry9C e para D. flavipennella o isolado LIIT-2707 apresentou a menor CL50 amplificando para os genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 e cry2Ab2. Os resultados sugerem que isolados de B. thuringiensis apresentam grande potencial e variabilidade para bioprospecção desta bactéria, para o desenvolvimento de produtos ou transformação de plantas que expressem genes de Bt para o controle de D. saccharalis e D. flavipennella.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-01T14:23:37Z No. of bitstreams: 1 Eliana Maria dos Passos.pdf: 2439142 bytes, checksum: 5cc4ce23eb07068031e4913be088cd08 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-01T14:23:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Eliana Maria dos Passos.pdf: 2439142 bytes, checksum: 5cc4ce23eb07068031e4913be088cd08 (MD5) Previous issue date: 2013-02-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Lepidopteran larval parasitism by endoparasitoids is associated with immune suppression and manipulation of the host physiology. This study investigated if the immune response in Diatraea flavipennella (Box) is suppressed by Cotesia flavipes (Cam.) and if changes occur in biochemical profile, haemolymph, and fat body, cytochemistry of hemocytes to ensure parasitism. Levels concentration of nitric oxide, phenoloxidase, and protein was determined. Total number of hemocytes per microliter of hemolymph and the average percentage of these cells were verified. Capacity of melanization and encapsulation by injection and ultrastructural analysis of microbeads was evaluated. Presence of apoptotic cells in fat body was investigated using TUNEL technique. Levels of carbohydrate, lipid, and protein in hemolymph and fat body were quantified, as well as the proteic profile of hemolymph was characterized. Histological sections of stained caterpillars were obtained using PAS (Periodic acid/Schiff's) reaction. Marking of acidic polysaccharides, mucin, and lipids was investigated on hemocytes. Results showed reduction in nitric oxide production, phenol oxidase activity, and total number of hemocytes. In the differential count, increase in number of plasmatocytes and reduction of spherulocytes were observed. The encapsulation capacity was affected. Apoptosis in hemocytes and fat body was registered. Reduction of proteins and lipids occurred in hemolymph and protein; reduction of carbohydrate occurred in body fat. Cytochemistry of hemocytes was changed, reducing the acidic polysaccharides in prohemocytes and oenocytoids, mucin in plasmatocytes and granulocytes, and lipids in adipohemocytes, granulocytes, and prohemocytes. It was also observed a drastic body fat degeneration. The proteic profile showed presence of four specific proteins of parasitism in the hemolymph. It is concluded that C. flavipes is effective for controlling D. flavipennella by suppressing the immune, humoral, and cellular response, altering the biochemical profile of hemolymph, fat body, and cytochemistry of hemocytes. / As espécies Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) representam um problema para cultura da cana-de-açúcar, sendo o endoparasitoide Cotesia flavipes (Cam.) introduzido em 1974 para o controle destas pragas. Nos últimos 30 anos houve inversão na população destas espécies de brocas no estado de Alagoas e hoje há predominância de D. flavipennella nos canaviais nordestinos, surgindo entre os produtores à idéia de que C. flavipes não controla satisfatoriamente esta praga. Como o parasitismo de larvas de lepidópteros por endoparasitoides esta associada com a supressão da imunidade e manipulação da fisiologia, do hospedeiro, para aumentar a disponibilidade de nutrientes. Neste trabalho investigou se a resposta imune (níveis de óxido nítrico, atividade da fenoloxidase, contagem total e diferencial dos hemócitos, capacidade de encapsulação e apoptose) em D. flavipennella seria suprimida por C. flavipes e se alterações no perfil bioquímico, da hemolinfa e do corpo gorduroso (proteínas, carboidratos e lipídeos), bem como modificações na citoquímica dos hemócitos, ocorreriam para garantir o parasitismo. Os resultados mostraram redução na produção de óxido nítrico, na atividade da fenoloxidase e no número total de hemócitos. Na contagem diferencial, observou-se aumento no número de plasmatócitos e redução de esferulócitos. A capacidade de encapsulação foi afetada. Registrou-se apoptose nos hemócitos e corpo gorduroso. Ocorreu redução de proteínas e lipídeos na hemolinfa e proteína e carboidrato no corpo gorduroso. A citoquímica dos hemócitos foi alterada, tendo reduzido polissacarídeos ácidos nos prohemócitos e oenocitóides, mucina nos plasmatócitos e granulócitos e lipídeos nos adipohemócitos, granulócitos, e prohemócitos. Observou-se também uma drástica degeneração do corpo gorduroso. Já o perfil protéico revelou a presença de quatro proteínas específicas do parasitismo na hemolinfa. Conclui-se, então, que C. flavipes é eficiente no controle de D. flavipennella por suprimir a resposta imunológica, humoral e celular, alterar o perfil bioquímico da hemolinfa e corpo gorduroso e citoquímica dos hemócitos.

The Castniidae family is a group of Pantropical insects with about 150 species widely distributed mainly in the Malay Peninsula, Australia, South America and Central America. The caterpillars of species in this family are borer of cultures of the families Arecaceae, Bromeliaceae, Musaceae, Heliconiaceae, Orchidaceae and Poaceae. Among the species of pests Castniidae family is the borer crown leaf Eupalamides cyparissias Fab. (Lepidoptera: Castniidae), a major pest of palm trees in the Amazon region of Brazil, Ecuador, Colombia, Peru, Venezuela and Northern Panama. The damages are associated with Cocos nucifera L. (Arecales: Arecaceae) (coconut plants) and Elaeis guineensis Jacq. (Arecales: Arecaceae) (oil palm), major crops of economic importance to the state of Pará. This study aimed to observe the E. cyparissias behavior, identify glandular cells in the female ovipositors, distinguish the types of sensilla in the antennae of males and females and investigate the presence of sex pheromones in both sexes. Behavioral observations were carried out in laboratory and palm oil crops in the municipality of Moju, Pará. Histological sections of ovipositors were analyzed in light microscope (Olympus BX41). The antennas were analyzed by Scanning Electron Microscopy (SEM) using a Shimadzu, Model SSX-550 Superscan. For preparation of extracts of front and rear wings of male and female, ovipositor and male sexual organ, adults with 24 and 48 hours of age were used. For each pair of wings 300 uL of hexane (distilled HPLC grade) was used and each male sexual organ or female ovipositor 100 uL was used the same solvent, for 20 minutes, then the supernatant was transferred to a 2 ml vial. Evaluation of the bioactivity of the extracts was performed on GC-EAD and the separation and identification of compounds by GC and GC-MS. Field observations confirm that enabled moths in palm plantations in Pará are quite active in crepuscular time between 6:00 and 7:30 am and between 18:30 and 19:30 pm. Characteristic behaviors courtship as exposure of the ovipositor, clásperes exposure, ovipositor exposure and beating of wings, walk flapping, abdominal movements, guided walk to the opposite sex, antennation and contact have been observed. Histological analysis identified glandular cells located near the cuticle on the dorsal proximal region of the ovipositor. In the antennae of male and female five types of sensilla were observed: trichodea, chaetica, squamiformia, coeloconica, and auricillica. Characteristic behaviors observed and morphological structures allow us to infer chemicals mediating the communication between these insects. The specific compounds males were identified 7,11-hexadecadienal, 7,11-hexadecadien-1-ol, espringene, geranyl linalool and geranyl geraniol. Female specific compounds were identified α-coapaene, trans-caryophyllene, 1-hexadecanol, 9-Hexadecenoic acid, octadecyl ester and Hexadecanoic acid, octadecyl ester. GC-EAD analysis revealed female antenna activity for geranyl geraniol compounds, nonacosane and β-sitosterol present in the extracts of the rear wing of males. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A família Castniidae é um grupo de insetos com cerca de 150 espécies, e distribui-se na Península Malaia, Austrália, América do Sul e América Central. As lagartas de espécies desta família são brocas de culturas das famílias Arecaceae, Bromeliaceae, Musaceae, Heliconiaceae, Orchidaceae e Poaceae. Dentre as espécies-pragas da família Castniidae está a broca-da-coroa-foliar, Eupalamides cyparissias (Fabricius, 1776) (Lepidoptera: Castniidae), uma importante praga de palmeiras da região Amazônica do Brasil, Equador, Colômbia, Peru, Venezuela e norte do Panamá. Os prejuízos mais evidentes estão associados às plantas de Cocos nucifera L. (Arecales: Arecaceae) (coqueiro) e Elaeis guineensis Jacq. (Arecales: Arecaceae) (dendezeiro), principais culturas de importância econômica para o estado do Pará. Este trabalho teve por objetivo observar o comportamento de E. cyparissias, identificar células glandulares nos ovipositores de fêmeas, distinguir os tipos de sensilas nas antenas de machos e fêmeas e investigar a presença de feromônios sexuais em ambos os sexos. As observações comportamentais foram realizadas em laboratório e em culturas de dendê no município de Moju, Pará. Os cortes histológicos dos ovipositores foram analisados em microscópio de luz (Olympus, BX41). As antenas foram analisadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV) utilizando-se microscópio Shimadzu, modelo SSX-550 Superscan. Para preparação dos extratos das asas anterior e posterior de machos e fêmeas, do ovipositor e do órgão sexual dos machos foram utilizados adultos com 24 e 48 horas de idade. Para cada par de asas foi utilizado 300 μL de hexano (grau HPLC destilado) e para cada órgão sexual do macho ou ovipositor da fêmea utilizou-se 100 μL do mesmo solvente, permanecendo por 20 minutos, em seguida o sobrenadante foi transferido para um vidro de 2 mL. A avaliação da bioatividade dos extratos foi realizada por cromatografia gasosa acoplada ao detector eletroantenográfico (CG-EAD) e a separação e identificação dos compostos através do cromatógrafo gasoso (CG) e cromatografia gasosa acoplado à espectrometria de massas (CG-EM). Observações de campo permitiram confirmar que mariposas em plantios de dendê no Pará são bastante ativas em horário crepuscular entre as 6:00 h e 7:30 h e entre as 18:30 h e 19:30 h. Comportamentos característicos de corte como exposição do ovipositor, exposição de clásperes, exposição do ovipositor e bater das asas, caminhar batendo as asas, movimentos abdominais, caminhada orientada ao sexo oposto, antenação e contato foram observados. A análise histológica permitiu identificar células glandulares localizadas próximas a cutícula na região proximal dorsal do ovipositor. Nas antenas de machos e fêmeas cinco tipos de sensilas foram observadas: tricóide, caética, esquamiforme, coelocônica e auricílica. Comportamentos característicos observados e as estruturas morfológicas permitem inferir substâncias químicas mediando a comunicação entre esses insetos. Os compostos específicos de machos identificados foram, 7,11-hexadecadienal, 7,11-hexadecadien-1-ol, espringeno, geranil linalol e geranil geraniol. Como compostos específicos de fêmeas foram identificados α-coapaeno, trans-cariofileno, 1-hexadecanol, 9-hexadecenoato de octadecila e hexadecanoato de octadecila. Análise de CG-EAD revelou atividade antenográfica da antena da fêmea frente aos compostos geranil geraniol, nonacosano e β-sitosterol presentes nos extratos da asa posterior dos machos.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-25T13:53:41Z No. of bitstreams: 2 Tese - Jacqueline Barbosa Nascimento - 2015.pdf: 2440624 bytes, checksum: e9711ea5d1821679a63f94a9b2dda27a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-25T13:56:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Jacqueline Barbosa Nascimento - 2015.pdf: 2440624 bytes, checksum: e9711ea5d1821679a63f94a9b2dda27a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-25T13:56:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Jacqueline Barbosa Nascimento - 2015.pdf: 2440624 bytes, checksum: e9711ea5d1821679a63f94a9b2dda27a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The change in composition of the host-plants in the agricultural landscape can generate enough divergent natural selection to allow ecological adaptation that leads to specialization and subsequently to speciation in species of insect. The objective of this study was to determine the diversity of genetic and population structures of Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), which was collected in two hostplants using microsatellite markers. Samples of larvae of this stem borer were collected on rice and sugarcane in different fields during the harvest of 2012/2013 in the states of Tocantins, Goiás, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, and Rio Grande do Sul. A total of 127 alleles were found distributed among the eight loci in seventeen populations, with a total of 426 individuals. The loci were highly polymorphic, with average of 15,87 alleles. The expected heterozygosity (HE) and observed (HO) were 0,579 and 0,350, respectively. A lower total number of alleles (35) was found in population of Morrinhos, as opposed to Formoso do Araguaia which has the largest (62). The same way, the smallest and the largest average number of alleles per locus (Am) were observed in these populations (4,38 and 7,75). The population from the Formoso do Araguaia showed the highest value for the allelic richness (6,82). In all populations, the observed heterozygosity (HO) was lower than expected (HE). The average polymorphic information content (PIC) in populations of D. saccharalis was 0,530. The intrapopulational fixation indexes (f) estimated for each population showed positive values and significantly different from zero with a average value of 0,403. The coefficient of inbreeding species was 0,399. The estimates FIT and FST (θ) values were 0,437 and 0,062 respectively. These global estimates indicated that there is genetic structure among these populations. Despite global estimates had indicated genetic structure, the structuring (θ) among of populations of the sugarcane was not significant; in contrast with the populations of the rice which showed θ values significant. There was a significant correlation between genetic and geographic distances estimated using the Mantel’s test (r=0,76; p= 0,0033), in which there is an increase in pattern of genetic distance with the increase of geographic distance in cluster analysis and population structures observed with the formation of the two groups of populations. The first was formed by populations from the state of Goiás and the second was composed of populations of Mato Grosso, Mato Grosso do Sul and Rio Grande do Sul. The population of Formoso do Araguaia sampled in rice showed in an intermediate position to the two groups formed. These results indicate that the genetic diversity of D. saccharalis is structured in space and the plant-host, in this study, did not have a key role in the process of genetic divergence populations. / A mudança na composição das plantas-hospedeiras na paisagem agrícola pode gerar seleção divergente suficiente para permitir a adaptação ecológica que leva a especialização e subsequentemente à especiação de espécie de insetos. O objetivo deste estudo foi determinar a diversidade e estruturação genética de populações de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), coletadas em duas culturas hospedeiras, utilizando marcadores microssatélites. As amostras de lagartas foram coletadas em plantas de arroz e cana-de-açúcar em diferentes áreas de cultivo durante a safra 2012/2013, nos Estados de Tocantins, Goiás, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Rio Grande do Sul. No total, foram encontrados 127 alelos distribuídos entre oito locos em dezessete populações com um total de 426 indivíduos. Os locos foram polimórficos, com média de 15,87 alelos. Os valores de heterozigosidade média esperada (HE) e observada (HO) para os locos foram de 0,579 e 0,350, respectivamente. Um menor número de alelos (35) foi encontrado na população Morrinhos, em contraposição à população de Formoso do Araguaia que apresentou o maior (62). Da mesma forma, o maior e o menor número médio de alelos por locos (Am) foram observados nestas populações (7,75 e 4.38). A população oriunda de Formoso do Araguaia apresentou o maior valor médio para a riqueza alélica (6,82). A média do conteúdo de informação polimórfica (PIC) nas populações de D. saccharalis foi de 0,530. Os índices de fixação intrapopulacional (f) apresentaram valores positivos e significativamente diferentes de zero com valor médio de 0,403. O coeficiente de endogamia da espécie foi de 0,399. Os valores de FIT e FST (θ) estimados foram respectivamente 0,437 e 0,062. Estas estimativas globais indicaram que há estruturação genética entre estas populações. Apesar das estimativas globais terem indicado estruturação genética, a estruturação entre as populações (θ) em cana-de-açúcar não foi significativa, ao contrário das populações em arroz as quais os valores de θ foram significativos. Houve correlação significativa entre as distâncias genéticas e geográficas estimadas por meio do teste de Mantel (r=0,76; p= 0,0033) indicando um padrão de aumento da distância genética com o aumento da distância geográfica. Na análise de agrupamento e estruturação populacional, formaram-se dois grupos. O primeiro formado por populações oriundas do Estado de Goiás e o segundo composto pelas populações de Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Rio Grande do Sul. A população de Formoso do Araguaia, amostrada na cultura do arroz apresentou-se em uma posição intermediária aos dois grupos formados. Estes resultados indicam que a diversidade genética de D. saccharalis está estruturada no espaço e que a planta-hospedeira, neste estudo, não teve um papel fundamental no processo de divergência genética de populações.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-12-03T16:52:58Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carlos Alberto da Silva Ferreira - 2013.pdf: 3762874 bytes, checksum: 06ca5b93d3764e7a71a4973b9944d204 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-12-03T16:54:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carlos Alberto da Silva Ferreira - 2013.pdf: 3762874 bytes, checksum: 06ca5b93d3764e7a71a4973b9944d204 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-03T16:54:54Z (GMT). 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The borer’s association with microorganisms in the field results in the borer rot complex, a disease, responsible for significant agro industrial losses. So, the goal of this thesis was to evaluate the effects of the intensity of infestation of Diatraea saccharalis in the technological quality of varieties of sugarcane in the State of Goias. The experiment was conducted in the town of Goianesia, GO at the plantation field of Jalles Machado Plant during the period of April 2011 to May 2012, where was applied irrigation system with 50% of hydric necessity of culture. The experimental delimitation used was randomized blocks with the treatment being formed by sixteen variety: CTC2, CTC4, CTC9, CTC11, CTC15, CTC18, IAC87-3396, IAC91 -1099, IACSP94-3046, IACSP94- 2094, IACSP94-2101, IACSP95-5000, RB857515, RB92579, RB966928 e SP86-0042. There were two experiments conducted to measure the intensity of infestation of Diatraea saccharalis. The experiment one was randomly conducted in each portion, while the experiment two consisted of sugarcane grouped as plants with borer attacks, and those without signs of borer attacks. Thereafter, there were separatly technological analyses for both kinds of experiments. According to the results, the types highlighted the most were CTC9, CTC15, CTC11 e IAC91 -1099, showing high levels of technological quality and productivity. For interaction type versus borer there was not significant difference through the test F, which means the borer effects is independent of the type analysed. For the types studied 10,7% of samples with borer internodes resulted in the lowering of technological quality of sugarcane, due to reduction of brix broth, brix sugarcane, pol broth, pol sugarcane and recoverable total sugar. For every 1% of borer internodes, a loss of 0,26% of sugars and 0,25% in ATR occurs. For the chemical control using the product ALTACOR® (Chlorantraniliprole 35%), the control level of sugar cane borer is 3,29% of intensity of infestation, against 1% if using the Cotesia flavipes. / A broca da cana Diatraea saccharalis Fabr. (Lepidoptera: Crambidae) é uma das mais importantes pragas da cana-de-açúcar no Brasil. Os danos são ocasionados pelas lagartas que abrem galerias no interior dos colmos, provocando morte de grande número de perfilhos em canaviais jovens, e acentuada redução de produtividade em canaviais mais desenvolvidos, também é comum a entrada de fungos, que causam a “podridão vermelha”, com redução do teor de açúcar nos colmos devido à inversão da sacarose armazenada na planta. A associação da broca com micro-organismos presentes no campo resulta no complexo broca-podridão, responsável por significativas perdas agroindustriais. Assim, objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da intensidade de infestação de Diatraea saccharalis sobre a qualidade tecnológica de variedades de cana-de-açúcar em Goiás. O experimento foi conduzido no município de Goianésia, GO em área de plantio da Usina Jalles Machado, no período de abril de 2011 a maio de 2012, onde foram aplicadas lâminas de irrigação correspondente à 50% da necessidade hídrica da cultura. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso, sendo os tratamentos constituídos por 16 variedades: CTC2, CTC4, CTC9, CTC11, CTC15, CTC18, IAC87-3396, IAC91 -1099, IACSP94-3046, IACSP94-2094, IACSP94-2101, IACSP95-5000, RB857515, RB92579, RB966928 e SP86-0042. Foram realizadas dois tipos de amostragens para se medir a intensidade de infestação por Diatraea saccharalis. A amostragem 1 foi realizada aleatoriamente em cada parcela e, já amostragem 2, foram escolhidas canas com ataque por broca e canas sem sinais de ataques por broca. Consequentemente, foram realizadas análises tecnológicas separadamente para ambos os tipos de amostragens. De acordo com os resultados, as variedades que mais se destacaram foram CTC9, CTC15, CTC11 e IAC91 -1099, apresentando altos índices de qualidade tecnológica e de produtividade. Para interação variedade x broca, não houve diferença significativa pelo teste F, ou seja, o efeito da broca independe da variedade avaliada. Para as variedades estudadas, o índice de 10,7% de entrenós brocados resulta em diminuição na qualidade tecnológica da cana, devido à redução nos teores de brix caldo, brix cana, pol caldo, pol cana e açúcares totais recuperáveis. Para cada 1% de entrenós brocados, ocorrem perdas de 0,26% de açúcares e 0,25% em ATR. Para o controle químico utilizando o produto Altacor (Clorantraniliprole 35%), o nível de controle da broca-da-cana é de 3,29% de intensidade de infestação e de 1% quando se faz o uso de Cotesia flavipes.