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NÍVEIS DE CONCENTRADO NA DIETA DE BOVINOS / CONCETRATE LEVEL IN BEEF CATTLE DIET

Missio, Regis Luis 26 February 2007 (has links)
The study was developed to evaluate the effect of the increment of concentrate in beef cattle diet, slaughtered with 14-16 months of age, on animal performance, economic evaluation, ingestive behavior and quantitative and qualitative characteristics of carcass and meat. Sixteen, not castrated Charolais-Nellore crossbred, steers were used and fed with 22, 40, 59 or 79% of concentrate in the diet (LC). The animals were randomly distributed and each treatment contained four. The average initial age and weight were of 9.32 months and 192.44 kg, respectively. The animals were feedlot fineshed until they reached 400 kg of body weight. The supplied diet was isoproteic and the used forage was the corn silage. The finals age and weight, neutral fiber detergent intake, feed conversion, month profit, feeding and rumination times, number of rumination bolus, neutral detergent fiber rumination efficiency and physiologic maturity decreased linearly with increase of concentrate in the diet. The dry matter intake in percentage of live weight and metabolic size presented a quadratic behavior, increasing until 67% of concentrate in diet. The digestible energy intake, average daily weight gain, idle time, dry matter feeding and rumination efficiencies, sawcut percentage, meat color and texture presented a linear increase with the increment of the concentrate level in diet. Beef cattle finishing of not castrated steers between 14-16 months of age and feedlot with final weight of 190 kg is economically feasible using a concentrate increment between 26 and 61% in diet. The major concentrate supply in diet increases the feeding and rumination efficiencies and improves meat visual aspect. / O estudo foi desenvolvido para avaliar o efeito do incremento de concentrado na dieta de bovinos de corte abatidos entre 14-16 meses de idade, através do desempenho, avaliação econômica, comportamento ingestivo e características quantitativas e qualitativas da carcaça e carne. Foram utilizados dezesseis bovinos mestiços Charolês-Nelore não castrados, alimentados em confinamento com 22, 40, 59 ou 79% de concentrado na dieta, distribuídos inteiramente ao acaso, com quatro repetições por tratamento. A idade e o peso médio inicial dos animais foram de 9,32 meses e 192,44 kg, respectivamente. Os animais foram abatidos quando atingiram aproximadamente 400 kg de peso vivo. A dieta fornecida aos animais foi isoproteica e o volumoso utilizado foi a silagem de milho. A idade final, o peso final, o consumo de fibra em detergente neutro, a conversão alimentar, a lucratividade mensal, o tempo destinado ao consumo de alimento e a ruminação, o número de mastigadas por bolo regurgitado, a eficiência de ruminação da fibra em detergente neutro e a maturidade fisiológica diminuíram com o aumento de concentrado na dieta. O consumo de matéria seca em percentagem do peso vivo e tamanho metabólico apresentaram comportamento quadrático, os quais aumentaram até 67% de concentrado na dieta. O consumo de energia digestível, o ganho de peso médio diário, o tempo destinado ao ócio, a eficiência na alimentação e ruminação da matéria seca, a percentagem de traseiro na carcaça, a coloração e textura da carne apresentaram aumentos lineares com o incremento do nível de concentrado na dieta. A terminação de bovinos inteiros entre 14-16 meses de idade e confinados com peso vivo médio de 192 kg é viável economicamente entre 26 e 61% de concentrado na dieta. O maior fornecimento de concentrado na dieta aumenta a eficiência alimentar, de ruminação de bovinos e melhora o aspecto visual da carne.
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Pesquisa de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos leiteiros da região sudoeste do estado de Mato Grosso /

Benetti, Ana Helena. January 2006 (has links)
Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Adjair Antonio do Nascimento / Banca: Gilson Pereira de Oliveira / Banca: Odilon Vidotto / Banca: Vanete Thomaz Soccol / Resumo: Considerando a importância da neosporose como interferente na produtividade animal, avaliou-se a freqüência de anticorpos anti-Neospora caninum em bovinos leiteiros, complementando os estudos com amostras sorológicas colhidas de caninos e humanos de convívio rural, inter-relacionando os resultados. Com o objetivo de investigar a possível transmissão vertical em bovinos, colheu-se também sangue de fêmeas e de seus respectivos fetos, abatidos em frigorífico, provenientes da região sudoeste do Estado de Mato Grosso. O total de 1076 soros correspondente a: 932 de fêmeas bovinas leiteiras, 37 de cães, 67 de humanos, provenientes de 24 propriedades da região sudoeste do Estado de Mato Grosso, 20 soros de fêmeas bovinas e 20 de seus respectivos fetos. Os soros examinados por meio da Imunofluorescência Indireta (IFI) revelaram a presença de anticorpos contra Neospora caninum em 499 bovinos (53,54%), 25 caninos (67,57%) e sete humanos (10,45%). Dos exames sorológicos de animais de abatedouro, duas fêmeas e seus respectivos fetos apresentaram positividade, com infecção caracterizada no terço médio da gestação. Ainda do mesmo grupo, três fêmeas mostraram-se positivas, em diferentes titulações, sem transmissão de anticorpos para os fetos, sendo duas analisadas em período gestacional correspondente ao terço final, e uma inicial. Os resultados obtidos permitem inferir que a infecção pelo protozoário encontra-se amplamente disseminada na região estudada. / Abstract: To determine the prevalence of anti-Neospora caninum antibodies, 932 samples of blood sera from female dairy cattle belonging to 24 farms in the southwest of the state of Mato Grosso were analyzed by means of the indirect immunofluorescent-antibody test (IFAT = 200). Serum samples from 37 dogs and 67 humans living in the same farms were tested for anti- N. caninum antibodies. From these, 499 (53,54%) of the cattle sera, 25 (67,57%) of the dog sera and seven from the human sera (10,45%) were positive for the infection. In order to determine the occurrence of vertical transmission of N. caninum in bovine, maternal and fetal sera obtained from 20 Killed pregnant heifers from the same region were analyzed. Antibodies were found in five heifers (25%) from which two fetuses (10%) showed positive results. Fetal antibodies were detected on mid gestation. These data suggest that neosporosis is present among dairy cattle in the studied geographic region. / Doutor
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Perfil lipídico do sêmen de touros Nelore (Bos taurus indicus) de alta e baixa resistência espermática à criopreservação

Zorzetto, Mariana Furtado. January 2016 (has links)
Orientador: Eunice Oba / Resumo: A composição dos lipídeos da membrana espermática e do plasma seminal estão entre os fatores que podem influenciar a capacidade fecundante do sêmen. Desta maneira, este estudo objetivou analisar as diferenças do perfil lipídico do ejaculado de bovinos da raça Nelore, resistentes e sensíveis à criopreservação. Foram utilizados 15 touros da raça Nelore para colheitas de sêmen utilizando eletroejaculador. Os ejaculados foram diluídos com meio convencional na concentração de 25x106 espermatozoides/palheta. Os animais foram divididos em dois grupos conforme a resistência pós-criopreservação, grupo A (Bad freezer, touros sensíveis à criopreservação) e grupo B (Good freezer, touros resistentes à criopreservação). O sêmen fresco foi analisado quanto morfologia realizada por microscopia de interferência diferencial (DIC), cinética espermática e integridade da membrana. Na pós-descongelação as amostras foram avaliadas quanto a cinética espermática, integridade das membranas plasmáticas e acrossomal, caspase ativa, peroxidação lipídica. A análise do perfil de lipídios foi realizada por espectrometria de massa MALDI-MS. Foi possível observar diferença no perfil lipídico dos espermatozoides e do plasma seminal entre os grupos, com maior abundância relativa dos íons m/z 704,59; m/z 804,59 e m/z 943,77 no grupo A nos espermatozoides. No plasma seminal houve maior abundância relativa de 34 íons lipídicos nos touros do grupo B. Assim sendo, conclui-se que existe diferença no perfil de lipídio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor
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Efecto de la administración de anabólicos en la expresión de marcadores celulares prostáticos en los bovinos

Fernández, Patricia Elena January 2003 (has links)
El dietilstilbestrol (DES) es aún utilizado como agente promotor del crecimiento corporal en el ganado, a pesar de su prohibición y efectos adversos. La glándula próstotica reacciona a la acción del DES con hiperplacia y metaplasia escamosa epitelial y cambios fibromusculares. El objetivo del presente trabajo se focalizó en la expresión y patrón de distribución de marcadores celulares en novillos normales y expuestos al DES. Se compararon muestras de próstata de novillos controles (NC), novillos con hiperplasia y metaplasia probablemente inducidas por estrógenos (NPTE), y novillos inoculados experimentalmente con DES y sacrificados luego de 21 días (NICP) ó 90 días (NILP). Las muestras fueron analizadad mediante el Test Prostático, inmunohistoquímica (IHQ), PAS, PAS-diastasas, Azul Alcián, lectinhistoquímica (LHQ), LHQ reversa, análisis de imágenes computarizado y análisis estadístico. Se observó que los cambios histológicos en NICP y NILP resultaron similares a los de NPTE. Se observó, además, que los novillos castrados a edad temprana carecen de tejido glandular mucoso, apareciendo éste luego del tratamiento con DES, tanto en los NICP y NILP como también en NPTE. Mediante IHQ se evidenciaron las citoqueratinas 13 y 16, vimetina y desmina, observándose que la proliferación inducida por DES comienza en los elementos basales de epitelio y está acompañada de un incremento relativo de los elementos mesenquimáticos de estroma glandular. Se hizo evidente una reversión de los cambios provocados por los estrógenos en el tejido, transcurridos 90 días de la administración de DES. La coloración de PAS fue positiva para todos los grupos en estudio. No se detectó la presencia de glucógeno mediante la técnica de PAS-diastasa pero sí la presencia de otros hidratos de carbono no degradados por las diastasad, mientras que la coloración con Azul Alcián, permitió evidenciar diversas mucinas ácidas. Mediante LHQ, las lectinas JAC, ConA, DBA, y sWGA permitieron reconocer los patrones de glicosilación de tejidos epiteliales prostáticos expuestos a DES, y en particular, DBA y sWGA tejidos que se encontraban en proceso de recuperación luego de 90 días de la administración de la droga. Estos resultados permitieron discriminar parcialmente entre los NC y los que habían incorporado sustancias estrogénicas, pero no diferenciaron a los NICP y NILP de NPTE. La técnica de LHQ reversa no resultó una herramienta de utilidad en el tejido prostático bovinoen las condiciones ensayadas. Las pruebas IHQ y LHQ pueden ser empleadas como herramientas complementarias al Test Prostático en la detección de administración ilegal de esteroides estrogénicos en novillos.
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Caracterização patológica e imunoistoquímica da infecção pelo vírus da diarréia viral bovina

Schmitz, Milene January 2006 (has links)
Foram testadas na imunoistoquímica (IHQ) para diarréia viral bovina (BVDV) 654 biópsias de tecidos cutâneos da orelha de bovinos e tecidos de 161 fetos bovinos abortados. Concomitantemente, foram avaliados pela necropsia, histologia e IHQ 19 casos ocorridos entre janeiro de 1996 e dezembro de 2003 e dois casos acompanhados entre janeiro de 2004 e agosto de 2005, remetidos ao Setor de Patologia Veterinária (SPV) da Universidade Federal do Rio Grande do Sul. No total, duas biópsias, seis bovinos e três fetos bovinos abortados apresentaram antígenos do BVDV na IHQ. As lesões macroscópicas desses animais ocorreram principalmente no trato digestivo, como enterite e ulcerações na cavidade oral, gengiva e língua. Atrofia de timo e linfadenomegalia também foram observadas. Histologicamente, hiperplasia linfóide e perda da estrutura folicular nos linfonodos, necrose das placas de Peyer, gliose e neuronofagia (cérebro) e nefrite e degeneração tubular renal foram algumas das lesões observadas. Na IHQ a marcação positiva do antígeno viral foi evidenciada principalmente na pele, cérebro, cerebelo, intestino delgado, linfonodos e baço. A prevalência de casos de BVDV em bovinos representou 23,8% do total de 21 bovinos suspeitos necropsiados entre janeiro de 1996 a agosto de 2005 e 1,86% dos fetos abortados examinados entre junho 1999 e maio 2004 no SPV-UFRGS.
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Obtenção e avaliação da proteína BYC (Boophilus Yolk pro-Cathepsin) recombinante em uma vacina contra o carrapato Boophilus microplus

Leal, Alexandre Trindade January 2006 (has links)
O carrapato Boophilus microplus é um ectoparasita hematófago que infesta os rebanhos bovinos de regiões tropicais e subtropicais, causando grande prejuízo à pecuária. O principal método de controle deste parasita baseia-se no uso de acaricidas, entretanto, o uso de vacinas tem sido estudado como um método de controle promissor. A Boophilus Yolk pro-Cathepsin (BYC) é uma aspártico proteinase presente no ovo do carrapato e envolvida na embriogênese que foi anteriormente testada como imunógeno vacinal. Neste estudo, o cDNA da BYC foi amplificado por PCR e clonado em dois vetores de expressão para produção de duas formas da proteína recombinante com cauda de histidina, rBYC e rBYC-Trx (fusionada com tioredoxina). As duas formas foram expressas em Escherichia coli na forma de corpúsculos de inclusão (CI) e comparadas quanto ao nível de expressão, solubilidade e rendimento na purificacão. Três agentes desnaturantes (N-lauroil sarcosina, hidrocloreto de guanidina e uréia) foram testados para solubilização dos CIs. Sarcosina foi o agente mais eficiente, solubilizando mais de 90 % de rBYC-Trx e rBYC. As duas proteínas recombinantes foram purificadas em cromatografia de afinidade por metal (Ni2+), sob condições desnaturantes. O rendimento na purificação da proteína solúvel foi de 84 % para r-BYC-Trx e 6 % para rBYC. As duas formas foram reconhecidas por soro de coelhos, camundongos e bovinos previamente imunizados com BYC nativa, demonstrando a existência de epítopos comuns entre a BYC nativa e as formas recombinantes expressas em E. coli. Para verificar o potencial vacinal da proteína recombinante, um grupo de bovinos Hereford foi imunizado com rBYC e desafiado com 20.000 larvas de B. microplus por animal. Os soros dos bovinos imunizados reconheceram a BYC nativa em ELISA e “Western blot”, com títulos entre 500 e 4.000. Os resultados do desafio mostraram uma proteção parcial contra a infestação, com 25 % de proteção global. O perfil de expressão de citocinas (IL-2, IL-4, IL-10, IFN-γ) foi verificado por RT-PCR, porém os resultados não permitiram identificar a polarização da resposta imune em Th1 ou Th2. Os resultados de imunoproteção obtidos com a BYC recombinante foram similares aos obtidos na imunização de bovinos com BYC nativa, indicando a possibilidade de uso da forma recombinante como imunógeno vacinal.
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Albumina do soro bovino como nanocarreador de curcumina / Bovine serum albumin as nanocarrier of curcumin

Hudson, Eliara Acipreste 17 February 2017 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-09T12:30:16Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 702746 bytes, checksum: ac87c3c253de5c77a4cbffc99874e9d5 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-09T12:30:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 702746 bytes, checksum: ac87c3c253de5c77a4cbffc99874e9d5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A curcumina exibe diversas atividades biológicas, mas suas características de baixa solubilidade e pouca estabilidade termodinâmica limitam sua biodisponibilidade. Portanto, é indispensável estudar sua interação com a albumina do soro bovino (BSA), que é conhecida por aumentar a solubilidade e estabilidade de compostos hidrofóbicos em diversas formulações. Neste trabalho estudou-se a interação entre a curcumina e a BSA em suas conformações nativa e desnaturada, em pH 7,0, por meio de diferentes técnicas analíticas, e avaliou- se a cinética de fotodegradação da curcumina na presença da BSA. Pela análise de espectroscopia de fluorescência (EF) e de calorimetria de titulação isotérmica (ITC) os valores da constante de ligação (K a ) entre a proteína e o composto bioativo obtidos foram na ordem de 10 5 L.mol -1 , enquanto que por ressonância plasmônica de superfície (RPS) esse valor foi 3,88x10 3 L.mol -1 . Essas diferenças são explicadas pelas limitações apresentadas por cada técnica. O experimento de competição realizado indicou que a curcumina compete com os marcadores utilizados pelos sítios I, II e III da BSA. Os valores obtidos para ΔH° por EF (-8,67 kJ.mol -1 ) e por ITC (-29,11 kJ.mol -1 ) indicaram que o processo de formação dos complexos foi exotérmico. Nos estudos com a BSA desnaturada houve um ligeiro aumento nos valores de K a (4,53x10 5 L.mol -1 e 2,00x10 6 L.mol -1 , obtidos por EF e ITC, respectivamente, a 25 °C), comparados aos valores encontrados com a BSA nativa, o que indicou que há outros locais na BSA para ligação da curcumina além dos mostrados no experimento de competição. O perfil termodinâmico foi semelhante ao obtido para a conformação nativa, mas ΔH° foi mais negativo (- 16,12 kJ.mol -1 e -42,63 kJ.mol -1 , por EF e ITC, respectivamente), indicando que a mudança de conformação da BSA proporcionou uma interação mais exotérmica. No experimento de fotodegradação, à medida que a concentração de BSA aumentou, os valores da constante de degradação (K d ) da curcumina diminuíram exponencialmente e seu tempo de meia-vida (t 1/2 ) aumentou linearmente, o que indicou que a BSA protege a curcumina da fotodegradação. Esse trabalho contribui para um conhecimento mais aprofundado da interação intermolecular entre curcumina e BSA por trazer resultados obtidos por técnicas com diferentes fundamentos e parâmetros cinéticos da degradação da curcumina na presença de diferentes concentrações de BSA, o que ainda era ausente na literatura, fornecendo informações importantes para o sucesso da aplicação tecnológica da curcumina em diferentes formulações. / Curcumin exhibits various biological activities, but its low solubility and stability characteristics limit its bioavailability. Therefore, it is indispensable to study its interaction with bovine serum albumin (BSA), which can increase the solubility and stability of several hydrophobic compounds in various formulations. Here, we studied the interaction between curcumin and BSA in its native and denatured conformations, at pH 7.0, was studied through different analytical techniques, and the kinetics of curcumin photodegradation was evaluated in the presence of BSA. By the analysis of fluorescence spectroscopy (FS) and isothermal titration calorimetry (ITC) the values of the binding constant (K a ) between the protein and the bioactive compound obtained were in the order of 10 5 L.mol -1 , whereas by surface plasmonic resonance (SPR), this value was 3.88x10 3 L.mol -1 . These differences are explained by the limitations presented by each technique. The competition experiment performed indicated that curcumin competes with the markers used by sites I, II and III of the BSA. The values obtained for ΔH ° by FS (-8.67 kJ.mol -1 ) and by ITC (-29.11 kJ.mol -1 ) indicated that the process of forming the complexes was exothermic. In the studies with denatured BSA there was a slight increase in K a values (4.53x10 5 L.mol -1 and 2.00x10 6 L.mol -1 , obtained by FS and ITC, respectively, at 298 K), compared to the values found with the native BSA, which indicated that there are other BSA sites for curcumin binding in addition to those shown in the competition experiment. The thermodynamic profile was like that obtained for the native conformation, but ΔH ° was more negative (- 16.12 kJ.mol -1 and -42.63 kJ.mol -1 , by FS and ITC, respectively), indicating that the change in conformation of the BSA provided a more exothermic interaction. In the photodegradation experiment, as the BSA concentration increased, the values of the curcumin degradative constant (K d ) decreased exponentially and its half-life (t 1/2 ) increased linearly, which indicated that BSA protected the curcumin from photodegradation. This work contributes to a more deepened knowledge of the intermolecular interaction between curcumin and BSA by bringing results obtained by techniques with different fundamentals and kinetic parameters of curcumin degradation in the presence of different BSA concentrations, which was still absent in the literature, providing important information to the success of the technological application of curcumin in different formulations.
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Aborto bovino por Neospora caninum: fatores associados ao resultado positivo da imunoistoquímica

Pescador, Caroline Argenta January 2005 (has links)
Um total de 237 fetos bovinos abortados foram enviados ao Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul entre junho de 1999 e maio de 2004. Tecidos destes fetos foram analisados através da histologia e imunoistoquímica (IHQ) anti-Neospora caninum. Destes, 72 apresentaram lesões histológicas sugestivas de infecção por protozoário, caraterizadas pela presença de miosite não-supurativa, miocardite não-supurativa, pneumonia intersticial mononuclear associada a focos de necrose e encefalite necrosante não-supurativa multifocal. O cérebro apresentava consistência líquida ou semi-líquida em 61,1% dos fetos, dificultando a obtenção de tecido para a análise histológica e IHQ. A IHQ revelou a presença de taquizoítos e raros cistos de N. caninum no cérebro de 33/47 (70,2%) dos fetos que apresentam lesões histológicas sugestivas de infecção por protozoário. No modelo final da análise multivariada, três variáveis estiveram associadas significativamente com resultado positivo na IHQ nos fetos abortados: consistência do cérebro (P=0,031), lesão no cérebro (P=0,028) e idade (P=0,189). As chances de um resultado positivo na IHQ de N. caninum foram 4,35 vezes maiores (OR=4,35; 95% CI:1,1320-2,8116) quando o feto apresentava cérebro com consistência considerada normal e 4,94 vezes maiores (OR=4,94; 95%CI: 0,1646-3,0313) na presença de lesão sugestiva de infecção por protozoário caracterizada por encefalite de intensidade variada. A probabilidade de resultado positivo na IHQ foi inversamente proporcional à idade fetal, cada mês adicional de gestação diminuíram as chances de um feto apresentar resultado positivo na imunoistoquímica por 0,41 (OR=0,41, 95%CI: 1,5982- 0,1436).
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Uso de Doppler Colorido na Avaliação funcional do corpo lúteo em bovinos

AREAS, V. S. 09 July 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6068_DISSERTAÇÃO - VAGNER SARMENTO.pdf: 7047236 bytes, checksum: c1c1143aa92a874e1b41fe7df24cafb2 (MD5) Previous issue date: 2012-07-09 / Objetivou-se avaliar o padrão vascular luteal entre o 12º e 20º dias pós-inseminação em bovinos e determinar a confiabilidade do uso de Doppler colorido para predizer animais não-gestantes 20 dias após a Inseminação artificial em tempo fixo (IATF), utilizando como único parâmetro a avaliação visual do fluxo sanguíneo no corpo lúteo (FSCL). Foram utilizadas vacas e novilhas mestiças de Holandês x Gir, submetidas a protocolo de IATF, em duas repetições. No primeiro estudo, os animais (n=115) foram monitorados no período de 12 a 20 dias após a primeira IATF, e o corpo lúteo (CL) avaliado a cada 48h utilizando-se um equipamento portátil de ultrasonografia equipado com a função Doppler colorido (MyLab30, Esaote, Italia) e probe linear retal de 7,5 MHz. Foi calculada a área total do CL (ACL), área da cavidade luteal (CCL), área de tecido luteal (ATL, ACL menos área da CCL, se presentes), área do sinal Doppler (AV) e proporção entre AV e ATL (PV). No D30, os animais foram submetidos ao diagnóstico de gestação. A atividade luteal foi monitorada pela determinação da concentração plasmática de progesterona (CPP) no sangue, coletado em todos os dias em que ocorriam os exames ultrassonográficos. Os valores de ACL, CCL, ATL, AV, PV e CPP entre o D12 e D20 foram comparados entre animais posteriormente classificados como gestantes ou não gestantes. Não houve efeito de dia nas variáveis ACL, CCL, ATL, AV, PV e CPP de animais posteriormente diagnosticados como gestantes (P>0,05). Nos animais não gestantes, houve redução (P<0,01) nos parâmetros luteais até o D20. Apesar das medidas realizadas com Doppler colorido (AV e PV) apresentarem elevados CVs (>50%), elas apresentaram diferenças significativas entre animais gestantes e não gestantes mais cedo em relação à ATL (diferenças a partir de D18), a CPP (D18) e ACL (D20). No experimento 2, foram consideradas as avaliações (n=208) realizadas nos animais nas duas baterias de IATF 20 dias após a inseminação (D20). Os animais tiveram o fluxo sanguíneo luteal avaliado por ultrasonografia Doppler, conforme descrito no primeiro experimento. Com base unicamente na avaliação visual e subjetiva do FSCL, os animais foram classificados como gestantes ou não gestantes. No D30, o mesmo operador realizou o diagnóstico de gestação (DG) final. O DG final foi comparado retrospectivamente com o diagnóstico baseado no FSCL e o resultado de cada animal classificado como correto ou incorreto. O número de verdadeiro-positivos (VP), verdadeiro-negativos (VN), falsopositivos (FP) e falso-negativos (FN) foram inseridos em uma tabela de contingência 2x2. A sensibilidade (SEN), especificidade (ESP), valor preditivo positivo (VPP), valor preditivo negativo (VPN) e acurácia/confiabilidade (ACC) do diagnóstico por FSCL foram calculados com as seguintes equações: SEN=VP/(VP+FN); ESP=VN/(FP+VN); VPP=VP/(VP+FP); VPN=VN/(FN+VN); e ACC=(VP+VN)/n total. Variáveis binomiais (taxa de gestação e proporções) foram analisadas pelo teste quiquadrado. Os parâmetros de desempenho do diagnóstico baseado no FSCL foram: SEN=97,1%; ESP=51,9%; VPP=66,9%; VPN=94,7%; e ACC=74,5%. A proporção de FP foi 24,0% (50/208) e a de FN foi 1,4% (3/208). Conclui-se que o uso do Doppler colorido pode resultar em diagnósticos mais precoces e mais acurados de alterações da função luteal no período de reconhecimento materno da gestação e que a avaliação visual do FSCL 20 dias após a IATF pode ser utilizada na identificação de animais não-gestantes para re-sincronização.
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Metabolômica para avaliação não invasiva de embriões bovinos produzidos in vitro

Santos, Érika Cristina dos January 2015 (has links)
Orientadora: Prof. Dra. Marcella Pecora Milazzotto. / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, 2015. / A bioenergia destaca-se como um substituto relevante para os combustíveis fósseis e os A capacidade de selecionar o embrião com maior viabilidade para transferência às receptoras é um componente crucial para o sucesso das técnicas de reprodução assistida. Atualmente, avaliações morfológicas são utilizadas para selecionar os embriões com maior potencial de implantação, e apesar de se tratar de um método não invasivo e relativamente bem sucedido, ainda apresenta uma série de limitações. Nos últimos anos, o desenvolvimento de novas tecnologias tem possibilitado análises quantitativas e qualitativas para determinação da viabilidade dos embriões para melhoria da seleção embrionária. Em especial as tecnologias espectroscópicas e espectrométricas permitiram o desenvolvimento de novos métodos para a caracterização embrionária e predição do potencial de estabelecimento da prenhez. Assim, o objetivo deste trabalho foi a caracterização não invasiva de embriões bovinos pela análise dos perfis espectroscópicos e espectrométricos dos meios de cultivo de embriões com diferentes cinéticas de desenvolvimento visando a obtenção de padrões específicos baseados no fenótipo embrionário. Para isso, embriões bovinos foram produzidos in vitro por protocolos convencionais. Os zigotos foram transferidos para meios de cultivo individualmente e classificados em dois grupos: rápido (4 células-40hpi) e lento (2 ou 3 células-40hpi). Os meios de cultura foram coletados às 40, 96 e 168 horas pós-inseminação (hpi), tranferidos para criotubos e congelados a -80ºC até o momento das análises. A análise do metaboloma embrionário foi realizada por espectroscopia Raman. Para tal, gotas de meios de cultura foram cobertas com óleo mineral, sendo escaneadas por um sistema Raman triplo. Os dados foram normalizados e analisados por Análises de Componentes Principais (PCA), de Agrupamentos (Clusters) e por Loading plot. A análise do secretoma embrionário foi feita por MALDI-MS-TOF, através da extração dos metabólitos, sendo os espectros adquiridos pelo espectrômetro em modo de ionização positiva. Foram feitas analises estatísticas univariadas e multivariadas pelo software online Metaboanalyst. Os resultados obtidos pela espectroscopia Raman e espectrometria de massas demonstram que embriões com diferentes cinéticas de desenvolvimento possuem diferentes perfis espectroscópicos e espectrométricos ao longo do desenvolvimento embrionário, indicando que estes embriões consomem e/ou produzem diferencialmente metabólitos nos meios de cultura. Com base em nossos resultados, propomos com este estudo que a análise dos meios de cultura por espectroscopia Raman pode ser utilizada para fins de diagnóstico embrionário, pois permite uma caracterização rápida e global dos perfis embrionários relacionados a cinética, enquanto a espectrometria de massas pode ser utilizada para caracterização qualitativa dos embriões, permitindo a identificação do secretoma de embriões durante o cultivo in vitro. / The ability to select embryo with greater viability to transfer to the receptors is a crucial component to the success of assisted reproduction techniques. Currently, morphological assessments are used to select embryos with the highest implantation potential, although it¿ s a noninvasive and relatively successful, has still a number of limitations. In recent years, the development of new technologies has enabled quantitative and qualitative analyzes for the determination of viability of embryos to improve embryo selection. In particular spectroscopic and spectrometric technologies have permitted the development of new methods for embryo characterization and prediction of potential establishment of pregnancy. The objective of this study was non-invasive characterization of bovine embryos by analysis of spectroscopic and spectrometric profiling of embryo culture media with different kinetics of development in order to obtain specific patterns based on embryonic phenotype. For this, bovine embryos were produced in vitro by standard protocols. The zygotes were transferred to individual culture medium and divided into two groups: Fast (4 cells-40hpi) and slow (2 or 3 cells-40hpi). The culture media were collected at 40, 96 and 168 hours post-insemination (hpi) tranfered to cryotubes and frozen at -80 until the time of analysis. The analysis of the metabolome embryo was made by Raman spectroscopy. For this, droplets of culture media were overlaid with mineral oil being scanned by a triple Raman system. The data were normalized and analyzed by Principal Component Analysis (PCA), clusters and Loading plot. Analysis of embryonic secretome was made by MALDI-TOF-MS, through the extraction of the metabolites, and the spectra acquired by the spectrometer in positive ionization mode. Analyzes were performed univariate and multivariate statistics by the online software Metaboanalyst. The results obtained by Raman spectroscopy and mass spectrometry demonstrated that the development of embryos with different kinetics have different spectroscopic and spectrometric profiles during embryonic development, indicating that these embryos consume and /or produce differentially metabolites in the culture media. Based on our results, we propose that the analysis of Raman spectroscopy culture media may be used for diagnostic purposes embryo, since it allows a fast and comprehensive characterization of embryonic profiles related to kinetics, while mass spectrometry can be used for qualitative characterization of the embryo, allowing the identification of secretome embryo during in vitro culture.

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