Bromeliaceae é uma das mais diversas famílias de plantas, distribuída quase que exclusivamente nos Neotrópicos, com somente uma espécie no oeste da África. A família sofreu uma radiação adaptativa recente, ocorrendo em diferentes habitats. Dyckia é o segundo maior gênero da subfamília Pitcairnioideae, abrigando aproximadamente 145 espécies. Dyckia hebdingii, D. choristaminea e D. julianae são espécies saxícolas e endêmicas de afloramentos rochosos do sul do Brasil, podendo ocorrer em simpatria. Quando espécies relacionadas e com isolamento reprodutivo incompleto ocorrem em simpatria, pode ocorrer hibridação e, a longo prazo, especiação. Uma vez que 25% das espécies de plantas são conhecidas por cruzarem com outras espécies e este número aumenta em grupos de radiação adaptativa recente, como em Bromeliaceae, o presente trabalho tem como objetivo geral investigar a ocorrência de hibridação entre essas três espécies do gênero Dyckia e a possível origem híbrida de D. julianae. O DNA genômico total foi extraído de duas populações simpátricas e três alopátricas e, usando sete marcadores microssatélite nucleares e seis plastidiais, foram acessados os padrões de diversidade genética e estruturação populacional das três espécies. Além disso, foram realizados cruzamentos artificiais entre as espécies para testar a compatibilidade e fertilidade das mesmas. Os principais resultados obtidos com nuSSR revelaram uma heterozigosidade esperada alta, com 0,444 para D. hebdingii, 0,649 para D. choristaminea e 0,708 para D. julianae/híbridos, com déficit de heterozigotos, quando comparado com a heterozigosidade observada (0,281, 0,456 e 0,585, respectivamente). A riqueza alélica média foi de 4,6 para D. hebdingii, 7,7 para D. choristaminea e 6,7 para D. julianae/hibrido. O coeficiente de endogamia (FIS) foi alto para D. hebdingii, D. choristaminea e D. julianae/híbridos (0,274, 0,276 e 0,134, respectivamente). Os seis cpSSR proporcionaram a identificação de 12 haplótipos e a diversidade haplotípica (h) variou de 0,0 (um haplótipo) a 0,736 (cinco haplótipos). Apenas seis cruzamentos produziram frutos e sementes, nenhum deles entre D. hebdingii e D. choristaminea. Os dados moleculares e os cruzamentos artificiais sugerem que D. hebdingii e D. choristaminea são geneticamente diferentes e não cruzam entre si atualmente. Dyckia julianae tem tanto morfologia quanto perfil molecular intermediário e parece ser capaz de cruzar com as outras duas espécies, indicando uma possível origem híbrida entre D. hebdingii e D. choristaminea. / Bromeliaceae is one of the most diversity families of plants, distributed almost exclusively in Neotropics, with one species in west of Africa. Bromeliaceae have recent adaptive radiation, occoring in different habitats. Dyckia is the second major genus of subfamily Pitcairnioideae, comprising approximately 145 species. Dyckia hebdingii, D. choristaminea and D. julianae are saxicolous species, endemics to rock outcrops Southern of Brazil and may occur in sympatry. Speciation can occur by different mechanisms, but when different species with incomplete reproductive isolation meet each other again, may occur hybrid speciation, since 25% of plant species are known to cross with other species and this number increases in rapid radiations groups, as Bromeliaceae, the present study has the general objective to investigate the occurrence of hybridization in these three species and the hybrid origin of D. julianae. We extracted total genomic DNA from two sympatric and three allopatric populations and using seven nuclear and six plastid microsatellite loci, we accessed patterns of genetic diversity and population structure. Furthermore, we performed manual crosses between species to test compatibility and fertility of the three species. The major results obtained with nuSSR, indicate high expected heterozygosities, with 0.444 for D. hebdingii, 0.649 for D. choristaminea and 0.708 for D. julianae and hybrids, with a deficit of heterozygotes, when compared with observed heterozygosities (0.281, 0.456 and 0.585, respectively). Allelic richness showed a mean of 4.6 for D. hebdingii, 7.7 for D. choristaminea and 6.7 D. julianae/ hybrids. Inbreeding coefficient (FIS) was high for D. hebdingii, D. choristaminea, D. julianae/hybrid (0.274, 0.276 and 0.134, respectively). Six cpSSR identified 12 haplotypes and haplotype diversity (h) ranged from 0.0 (one haplotypes) to 0.736 (five haplotypes). Only six crosses generated fruits and seeds and none of them were between D. hebdingii and D. choristaminea. Molecular data and artificial crosses together suggest that D. hebdingii and D. choristaminea are genetically different and do not cross each other currently. However, D. julianae appears to be able to cross with both species. Dyckia julianae has intermediate morphology, intermediate molecular profile and seems to be able to cross with the other two species, indicating a possible hybrid origin between D. hebdingii and D. choristaminea.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2015-05-15T18:02:04Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Rodrigo_Oliveira_2012_CBiol.pdf: 2594061 bytes, checksum: 6a3318fa749532683f2f56edde3b47ec (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-15T18:02:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Rodrigo_Oliveira_2012_CBiol.pdf: 2594061 bytes, checksum: 6a3318fa749532683f2f56edde3b47ec (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / A família Bromeliaceae é uma das mais diversificadas no território brasileiro e conta com cerca de 1.200 espécies das quais 1.024 são endêmicas. Esses vegetais apresentam muitas associações ecológicas não observáveis em outros grupos de plantas, como a ocorrência de tanques na base de suas rosetas e a polinização primariamente por beija-flores ou morcegos. Encholirium spectabile Mart. Ex Schult. f. é uma bromélia que apresenta uma correlação direta com afloramentos rochosos do Nordeste Brasileiro. Esta espécie possui uma grande plasticidade morfológica regional, sendo tratada como um complexo específico, fato que resultou na descrição incorreta de outros binômios relacionados, como E. pernambucanum L.B.Sm. & Read e E. hoehneanum L.B. Sm. Plantas estritamente rupícolas são tratadas como modelos para estudos de irradiação adaptativa, bem como para correlações entre a vegetação e mudanças climáticas ocorrentes no passado. Vários marcadores moleculares têm sido aplicados nesse sentido, entre eles marcadores do tipo Fingerprinting de DNA, incluindo marcadores DAF (DNA Amplification Fingerprinting, Impressão Genômica do DNA Amplificado) e ISSR (Inter Simple sequence Repeat; Repetição Entre Sequências Simples). Indivíduos de nove populações de E. spectabile foram coletados, sendo distribuídos de norte a sul do Nordeste brasileiro, com populações nos estados da Paraíba, Pernambuco, Bahia e Sergipe. Nesse estudo 99 loci polimórficos foram gerados. A amostragem apresentou heterozigosidade total de 0,3417, semelhante à reportada para outras espécies de Encholirium como E. subsecundum Mez. Dois grupos genéticos foram encontrados a partir de uma análise Bayesiana de agrupamentos (k=2) distribuídos regionalmente, resultado também evidenciado pelo agrupamento gerado pelo método de Neighbor-joining. A análise da estrutura genética mostrou que existem diferenças significativas entre as populações (Fst = 0,3781), porém pouca correlação entre distância genética e distância geográfica foi observada (r = 0,3578, p >= 0,033), não sendo assim considerada. O compartilhamento de diversidade verificado pelo teste de AMOVA mostrou que a maior parte da diversidade está presente dentro das populações, o que é esperado para vegetais com reprodução clonal. A irradiação da espécie deve ter ocorrido do sul para norte, com dispersão em um modelo de ilhas. Este estudo concluiu que apesar da grande variação morfológica existente nesse complexo específico, E. spectabile compreende uma única espécie, onde cada morfotipo deve ser considerado como uma unidade para conservação in situ.

As inflorescências em angiospermas apresentam diferentes morfologias. O estudo da inflorescência não considera apenas sua morfologia básica, mas a posição de cada peça dentro do sistema. Em Bromeliaceae, poucos estudos detalham o desenvolvimento da inflorescência. Na subfamília Bromelioideae, alguns gêneros relacionados morfologicamente, chamados de gêneros nidularioides, compartilham a morfologia de suas inflorescências, geralmente congestas e acumulando diferentes volumes de água. As inflorescências nesses gêneros descritas na literatura como nidulares ou corimbosas são desprovidas de um conceito tipológico, não permitindo que sejam traçadas homologias entre as peças da inflorescência. Dessa forma, este trabalho busca descrever o desenvolvimento da inflorescência em uma espécie modelo para o grupo Nidularium innocentii, e ainda, descrever a organização da inflorescência em mais seis espécies dos gêneros nidularioides, contemplando uma espécie de cada gênero. As inflorescências foram tipificadas utilizando o sistema de Troll e Weberling. As análises foram realizadas ao microscópio de luz, estereomicroscópio e com microtomografia computadorizada de Raios-X. O desenvolvimento da inflorescência é politélico, com o eixo principal terminando em uma florescência, e nas espécies com inflorescências compostas, paracládios laterais de primeira e segunda ordem reconstroem a estrutura do eixo principal. As ramificações laterais se desenvolvem na axila de uma bráctea, que pode ser larga em Nidularium innocentii e N. procerum, Canistropsis billbergioides, Canistrum aurantiacum e Edmundoa lindenii, e estreita em Neoregelia johannis e Wittrockia superba, todas dispostas alternadamente. Não foram observados prófilos nem no eixo floral, nem no eixo da inflorescência, sugerindo que essa estrutura tenha se perdido nesse grupo. A reconstrução 3D feita para o tanque da inflorescência em N. innocentii mostrou um espaço vazio 2.4 vezes maior do que o espaço ocupado por material vegetal. Nesse grupo o tanque da inflorescência parece ter surgido pela combinação de três processos evolutivos: a disposição das brácteas e seu crescimento acima dos paracládios, o não alongamento dos entrenós e o achatamento dorsiventral dos paracládios. Nas espécies que apresentam as brácteas, largas o eixo da inflorescência é alongado e parece que o acúmulo de água ocorre nas brácteas, e nas espécies com o eixo da inflorescência curto a inflorescência se desenvolve dentro do tanque das folhas. O desenvolvimento dessas inflorescências, tão intimamente associadas com a água parece ter evoluído como um mecanismo de proteção de suas flores. / In angiosperms inflorescences have different morphologies. A study in inflorescence study not only considers its basic morphology, but the position of each element within the system. In Bromeliaceae few studies detail the development of the inflorescence. In Bromelioideae subfamily some morphologically related genera, called genera nidularioids, share morphology traits of their inflorescences, usually non-elongated and accumulating different amounts of water. The inflorescences in these genera described in literature as nidular or corymb are devoid of a typological concept, not allowing homologies to be drawn between the inflorescence parts. In this way, this work aims to describe the development of inflorescence in a model species for the group, Nidularium innocentii, and to describe the organization of the inflorescence in six species of the nidularioids, comprising a species of each genus. Inflorescences were described using Troll’s and Weberling’s system. The analyzes were performed under a light microscope, stereomicroscope and X-ray microcomputed tomography. The system is polythelic, the main axis ending in a florescence, and in species with compound inflorescences, lateral paraclades of first and second order reconstruct the structure of the main axis. The lateral branches develop in the axil of a bract, which can be large in Nidularium innocentii and N. procerum, Canistropsis billbergioides, Canistrum aurantiacum and Edmundoa lindenii, and narrow in Neoregelia johannis and Wittrockia superba, all alternately arranged. Prophylls were never observed in floral axes or in inflorescence branches, suggesting that this structure has been lost in this group. In the 3D reconstruction the tank-inflorescence in N. innocentii showed a space 2.4 higher than the plant material for the water accumulation. Tank-inflorescence development seems to have occurred by the combination of three processes: bract disposition and its overgrowth; failure in internode elongation; and paraclade flattening. In the species with large bracts the axis of the inflorescence is elongated and it seems that the accumulation of water occurs in the bracts, and in species with short inflorescence axis the inflorescence develops inside the tank of leaves. The development of these inflorescences so closely associated with water seems to have evolved as a mechanism of floral protection.

Orientador: Alcides Lopes Leão / Coorientador: Mario de Oliveira Neto / Banca: Fábio de Lima Leite / Banca: Walter Ruggeri Waldman / Banca: Germano Andrade Siqueira / Banca: Claudio Angeli Sansigolo / Resumo: As fibras de caroá contêm elevado teor de celulose (≈ 65%), podendo ser utilizada como fonte renovável de energia para a produção de nanocelulose e etanol de segunda geração (2G). Desse modo, objetivou-se com esta pesquisa obter nanocelulose e etanol a partir da fibra de caroá, por meio de uma metodologia capaz de gerar menor impacto negativo ao ambiente. Ensaios de pré-tratamento hidrotérmico (160, 170 e 180 oC) foram realizados visando à remoção da hemicelulose da fibra de caroá. Com base nos resultados, o material pré-tratado em banho hidrotérmico a 160 oC foi deslignificado com NaOH 1%, para obtenção da polpa de celulose. O método organossolve com o uso da relação de água/etanol (50/50) a 180 oC também foi testado. A eficiência desses processos foi avaliada por meio da caracterização química (teor de celulose, hemicelulose e lignina) e da difração de raios-X (DRX). Por ter fornecido o melhor rendimento de polpa de celulose, o pré-tratamento com banho a 160 oC e deslignificado com NaOH 1% foi o método selecionado. Esse material foi submetido a análises de termogravimetria (TG) e microscopia eletrônica de varredura (MEV). Por meio dessas técnicas, notou-se que houve a remoção da hemicelulose e da lignina da fibra de caroá. Em uma segunda etapa, a endoglucanase comercial E-CELTM foi utilizada para hidrolisar a polpa celulósica e gerar nanoestruturas de celuloses. A nanocelulose obtida foi caracterizada por microscopia de força atômica (AFM). Os dados de AFM evidenciaram a pr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The fiber of caroa plants has a high quantity of cellulose (≈ 65%) that can be used as a renewable energy source to produce nanocellulose and second-generation ethanol (2G). The aim of this research was to obtain nanocellulose and ethanol from caroa fiber using methods with minimal detrimental effects on the environment. Hydrothermal pretreatment trials (160, 170 and 180 oC) were carried out to remove the hemicellulose from caroa fiber. Based on the results, the pre-treated material at 160 °C in liquid hot water was delignified with 1% NaOH to obtain cellulose pulp. The organosolv method using water/ethanol ratio (50/50) at 180 oC was also studied. The efficiency of these processes was assessed by chemical characterization (content of cellulose, hemicellulose, and lignin) and by X-ray diffraction (XRD). The best yield of cellulose pulp was obtained from the pre-treated material using liquid hot water at 160 °C and delignified with 1% NaOH and was selected for further analysis. This material was submitted to thermogravimetric analysis (TGA) and scanning electron microscopy (SEM). After the material was pretreated a second process, commercial endoglucanase E-CELTM, was used to hydrolyze the cellulosic pulp and to produce cellulose nanostructures. The nanocellulose obtained was characterized by atomic force microscopy (AFM). The AFM data shows the presence of nanocellulose crystal with aspect ratio of 16 ± 5. The residual of these materials was used for a new hydrolysis with the... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

The Bromeliaceae is one of the largest and most ecologically diverse angiosperm families in the Neotropics. In recent years, this family has begun to emerge as a model system for the study of plant evolutionary ecology and physiology, and major advances have been made in understanding the factors involved in episodes of rapid diversification and adaptive radiation in specific bromeliad lineages. However, despite a long tradition of ecophysiological research on the Bromeliaceae, an integrative, evolutionarily-contextualised synthesis of the links between anatomical) physiological, and ecological aspects of bromeliad biology has hitherto been lacking. The overarching aim of this research project was therefore to use new quantitative data representing a wide range of bromeliad taxonomic and functional groups to elucidate how variation in leaf traits connected by structure-function relationships influences ecological differentiation among bromeliad taxa. Special emphasis was placed on hydraulic and water relations traits because of fast-paced contemporary developments in these fields. The methodologies employed included an assessment of the diversity of bromeliad hydrological habitat occupancy, quantification of key anatomical and physiological traits and their correlations, investigation of the links between vascular and extra-xylary anatomy and hydraulic efficiency and vulnerability, quantification of stomatal sensitivity to leaf-air vapour pressure deficit and stomatal kinetics, and a case study of trait-mediated niche segregation among congeneric epiphytic bromeliad species on the Caribbean island of Trinidad. The results highlight how divergences in a range of continuous and categorical anatomical traits underpin differences in physiological capacities and sensitivities, which in turn determine environmental relations and ecological distinctiveness. This research project therefore provides critical insights into the mechanistic basis of evolutionary diversification in a highly ecologically important family. It also represents the most comprehensive analysis of the significance of trait variation for ecological differentiation across any major radiation of herbaceous angiosperms.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-05-09T13:12:43Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 473798 bytes, checksum: 36309cb46ce305a2a74b1c1b0f6ef96d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T13:12:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 473798 bytes, checksum: 36309cb46ce305a2a74b1c1b0f6ef96d (MD5) Previous issue date: 2003-08-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A destruição dos ambientes naturais das bromeliáceas, aliada à coleta indiscriminada, tem levado muitas espécies nativas à extinção. No Estado de Minas Gerais já se encontram listadas 48 espécies ameaçadas. Diante disso foram selecionas três espécies nativas deste Estado (Acanthostachys strobilacea, Aechmea bambusoides e Quesnelia quesneliana) para o desenvolvimento de protocolos de propagação in vitro. No laboratório, as sementes passaram por um processo de desinfestação e foram estabelecidas in vitro. Na fase de multiplicação in vitro, para cada espécie foi feito um experimento, testando-se cinco concentrações de BAP (0, 10, 20, 40 e 80 μM) e duas concentrações dos sais minerais de MS (50% e 100%). Avaliou-se o número de brotações formadas, a altura média das brotações e a presença de raízes nas brotações. Em seguida, as brotações foram transferidas para meio de alongamento e enraizamento. Na fase de aclimatização, as plântulas foram submetidas a experimentos distintos. No caso de A. strobilacea as plântulas tiveram as raízes removidas e foram separadas em três grupos: 1 (10 a 20 mm), 2 (30 a 40 mm) e 3 (50 a 60 mm). As plântulas de A. bambusoides foram separadas em dois grupos: 1 (20 a 40 mm) e 2 (acima de 4,1 a 60 mm). Testou-se como substrato xaxim (Dicksonia sellowiana) e aguapé (Eichhornia crassipes) nessas duas espécies. Para Q. quesneliana, selecionadas com 20 a 30 mm de altura, testou-se xaxim, aguapé e a mistura destes (1:1). Verificou-se que o tratamento de desinfestação das sementes propiciou percentagem de contaminação menor que 1%, para as três espécies. O número de brotações formadas, na etapa de multiplicação, foi maior na concentração estimada de 26,8 μM de BAP para A. strobilacea; 26,11 μM para A. bambusoides e 22,15 μM para Q. quesneliana. No entanto, a altura média das brotações diminuiu com o aumento da concentração de BAP. A formação de raízes só foi observada na ausência de BAP, para todas as espécies estudadas. O meio MS com a metade da concentração dos sais foi eficiente na multiplicação, no alongamento e no enraizamento de A. strobilacea e Q. quesneliana. Para A. bambusoides melhores resultados foram conseguidos com o meio MS não modificado. O aguapé pode ser utilizado como substrato para aclimatização das três espécies, sendo que, para Q. quesneliana, o aguapé deve ser misturado com areia na proporção 1:1. / The destruction of the habitats of the bromeliaceae, together with the indiscriminate gathering, has threatened many native species to extinction level. Today In the state of Minas Gerais 48 species are listed as endangered. Considering this, three species (Acanthostachys strobilacea, Aechmea bambusoides and Quesnelia quesneliana) native to this state were selected for the establishment of in vitro propagation protocols. In the laboratory, the seeds underwent a disinfestation process and were established in vitro. In the in vitro multiplication phase an experiment was carried out with each one of the selected species for testing five BAP concentrations (0, 10, 20, 40 e 80 μM) and two concentrations of mineral salts in the MS culture medium (50% e 100%). Evaluations were made through the produced axillary shoots, considering their number, mean height and rooting. After these evaluations, the shoots were transferred to the elongation and rooting medium. In the acclimatization phase the plantlets underwent different experiments. In the case of A. strobilacea the plantlets had their roots removed, then separated in three groups: 1 (10 to 20 mm), 2 (30 to 40 mm) and 3 (50 to 60 mm). The plantlets of A. bambusoides were separated in two groups: 1 (20 to 40 mm) and 2 (41 to 60 mm). These two species were tested on two substrates: xaxim (Dicksonia sellowiana) and water- hyacinth (Eichhornia crassipes). For the experiment with Q. quesneliana, the plantlets utilized had 20 to 30 mm of height and the substrates tested were xaxim, water-hyacinth and a mix of these (1:1). It was verified that the disinfestation treatment of the seeds provided contamination less than 1%, in all species. The numbers of axillary shoots produced in the multiplication phase were greater in the estimated concentrations of BAP: 26,8 μM in A. strobilacea; 26,11 μM in A. bambusoides and 22,15 μM in Q. quesneliana. However, the mean height of axillary shoots decreased with increasing BAP concentration. In all species rooting occurred only in the absence of BAP. The MS medium with half of the salt concentrations was efficient in the multiplication, elongations and rooting of A. strobilacea and Q. quesneliana. For A. bambusoides the best results were obtained with the unmodified MS medium. The water-hyacinth may be utilized as substrate in the acclimatization of the three species, but in the case of Q. quesneliana this substrate must be mixed with sand in an 1:1 proportion.

Made available in DSpace on 2016-03-15T14:19:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 alessandra_siqueira_ioc_dout_2013.pdf: 5125105 bytes, checksum: 7996bd731234972da642d664ce7911db (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A asma é uma desordem de caráter alérgico que vem atingindo muitas pessoas por todo mundo. Embora existam muitos tratamentos para essa doença, novas terapias são necessárias, pois muitos dos tratamentos típicos causam efeitos colaterais para o paciente. Nidularium procerum (Np) é uma Bromeliaceae, encontrada principalmente no estado do Rio de Janeiro. Estudos realizados em nosso laboratório demonstraram que as folhas de Np, possuem atividade antialérgica, anti-inflamatória e antinociceptiva. No modelo de inflamação alérgica pulmonar, o extrato etanólico de N. procerum (NpEt) se mostrou eficiente em inibir a migração de eosinófilos para os pulmões em 58 % na dose de 1 mg/kg. Para verificar a real eficácia do extrato testamos esta dose no modelo de asma estabelecida. Após a instalação da doença, o tratamento (uma ou duas vezes ao dia) com NpEt, via oral, nas doses de 1 e 10 mg/kg não inibiu a migração de eosinófilos. O tratamento via aerolização com NpEt também não foi eficaz. Ao aumentarmos a dose para 100 e 500 mg/kg, observamos tendência de inibição da migração de eosinófilos, porém com pouca eficácia. Por isso, NpEt foi fracionado com solventes em doses crescentes de polaridade dando origem as frações hexânica (NpEtFH), diclorometânica (NpEtFHD), acetato de etila (NpEtFAe), butanólica (NpEtFB) e aquosa (NpEtFAq). Foram realizados experimentos in vitro com linfócitos T, mastócitos e eosinófilos. As frações NpEtFB e NpEtFAq não apresentaram efeito sobre os linfócitos T. NpEtFD inibiu todas as características estudadas, porém devido á sua toxicidade, conforme demonstrado no ensaio de apoptose. NpEtFAe foi a que inibiu a proliferação e liberação de citocinas, sem toxicidade. NpEt não impediu a proliferação destas células, mas modulou a liberação de IFN-\03B3 Com relação aos mastócitos, os extratos/subfrações não foram tóxicos para estas células, algumas frações modularam negativamente a liberação de IL-8, e todos inibiram a expressão de COX2, após 8h de cultura. Analisando os eosinófilos, observamos que todos foram capazes de inibir, nas doses de 10 \03BCg/mL e/ou 50 \03BCg/mL, a produção de corpúsculos lipídicos sem toxicidade. Visto que a subfração NpEtFAe foi a que modulou negativamente todas as células analisadas, testamos sua eficácia no modelo de asma estabelecida. Observamos que NpEtFAe foi capaz de inibir a migração de eosinófilos e a liberação de IgE, entretanto, NpEtFAe não interviu na hiperreatividade. Como NpEtFAe foi eficaz de impedir algumas das características da asma, mesmo com a mesma já instalada, testamos a mesma no modelo de asma crônica. O tratamento com NpEtFAe causou redução do número de eosinófilos (não foi significativo devido ao baixo número de animais), sem efeito na hiperreatividade, o que indica que outros experimentos são necessários, para melhor caracterização dos resultados. Com estes dados sugerimos que a fração NpEtFAe pode ser uma boa alternativa terapêutica para o controle da asma / Asthma is an alle rgic disorder that has incidence worldwide. Although many treatments are available, new therapies are necessary, because most of them cause strong side - effects to the patients. Nidularium procerum (Np) is a Bromeliaceae, lo calized mainly in Rio de Jan eiro state. Studies p erformed in our laboratory demonstrated that treatment with Np leaves in mice , inhibited allergy, inflammation and nociception. In the model of murine allergic inflammation, the ethanol extract of N. procerum leaves (NpEt) , v. o., was effective in inhibiting eosinophils migration to the lungs in 58 % at a dose of 1 mg/kg. To determine the true efficacy of the extract , we tested this dose in a model of established asthma . NpEt treatment with doses of 1 and 10 mg/kg (one or twice daily), after the onset of the disease, had no effect on eosinophil migration, the treatment with aerosolization were not effective either. I ncrea sing the dose to 100 and 500 mg /kg resulted in an indication of inhibition , but with low efficiency. So , NpEt was frac tionated using solvents of increasing polarity giving hexane ( NpEtFH ), dichloromethane ( NpEtFD ), ethyl acetate (NpEtFAe), butane (NpEtFB ) and aqueous ( NpEtFAq ) fractions . In vitro experiments were performed with T lymphocytes, mast cells and eosinophils. N pEtFB and NpEtFAq did not have effect on lymphocytes . NpEtFD inhibited all the studied aspects but due to its toxicity , demonstrated by apoptosis assay . NpEtFAe was the one which inhibited the prolifer ation and cytokine release, without toxicity. NpEt did not impair T cell proliferation , but it modulated negatively the release of IFN - γ. R egard ing to mast cells, neither the extract nor the fractions was toxic , some of them modulate d IL - 8 release and all inhibited the expression of COX2 in a 8 - h our culture . Analyzing eosinophils, we found that all fractions were able to inhibit lipid bodies production at 10 μg/mL and/or 50 μg/mL . Since NpEtFAe negatively modulated all the cells tested, we verified its efficacy in the model of established asthma . We observed that NpEtFAe was able to inhibit the migration of eosinophils and the release of IgE significantly, however, NpEtFAe did not interfere in hyperreactivity. As NpEtFAe was effective to prevent some asthma features , even in the established asthma, we tested it in the model of chronic asthma. NpEtFAe treatment decreased eosinophils number in the lungs (it was no significant due to animal number) and it had no effect on hyperreactivity . Other experiments are necessary to better elucidate the results. With this data, we suggest the NpEtFAe, can be a good alternative to asthma treatment.

A família Bromeliaceae apresenta importância ecológica e econômica, desta forma, o desenvolvimento de protocolos para a micropropagação de espécies dessa família, faz-se necessário, a fim de suprir sua demanda comercial e mesmo ecológica. A escolha do meio de cultura e do explante utilizado durante a micropropagação são fundamentais para um protocolo eficaz. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar as diferenças quantitativas e qualitativas no desenvolvimento de explantes de Neoregelia sp em meios de cultura e monitorar as vias morfogênicas dos propágulos obtidos em explantes foliares. Para tanto, brotos de microcepas e explantes foliares procedentes de um micro jardim clonal, foram transferidos para os meios de cultura de multiplicação MS, ½ MS e WPM, todos suplementados com 0,050 mg.L-1 ANA e 0,50 mg.L-1 de BAP, onde foram mantidos por 120 dias e submetidos a diversas análises morfofisiológicas. Paralelamente, explantes foliares foram mantidos em meio de cultura MS de multiplicação para o monitoramento das vias morfogênicas durante os processos regenerativos. Para os experimentos com brotos de microcepas verificou-se que o meio de cultura MS proporcionou a melhor taxa de multiplicação, maior crescimento dos brotos, obtendo os valores mais elevados de peso de matéria fresca e seca, além disso, apresentaram maior acúmulo de nitrogênio total e proteico. No entanto, os meios de cultura ½ MS e WPM promoveram uma taxa de multiplicação semelhante a do MS, mas com brotos menores e menos vigorosos, porém, mais homogêneos, com isso, na dependência do objetivo do cultivo in vitro, não deve ser desconsiderada a possibilidade de utilização dos meios de cultura ½ MS e WPM. Os explantes foliares não se desenvolveram bem no meio de cultura WPM, não havendo diferença entre os meios MS e ½ MS, visto que ambos apresentaram resultados satisfatórios. As análises histológicas e histoquímicas identificaram células parenquimáticas, que atuam como células-tronco, manifestando capacidade morfogênica para toti ou pluripotência, dando origem respectivamente a embriões somáticos e gemas adventícias, em resposta aos estímulos in vitro. / The Bromeliaceae family has an ecological and economic importance, therefore, the protocols development for micropropagation of species of this family becomes necessary in order to meet its business and even its ecological demand. The choice of culture medium and the explant used during micropropagation are essential for an effective protocol. Thus, the aim of this study was to evaluate the quantitative and qualitative differences in the explants development of Neoregelia sp in the culture media and monitor the morphogenetic pathways of obtained propagules from leaf explants. Consequently, shoots and leaf explants coming from microcloning garden were transferred to the MS, ½ MS and WPM multiplication culture media, all supplemented with 0.050 mg.L-1 NAA and 0.50 mg.L-1 BAP, where they were held for 120 days and submitted to morphological and physiological analysis. Therefore, leaf explants were kept on MS-medium multiplication for monitoring morphogenetic pathways during the regenerative processes. Furthermore, MS medium showed the best multiplication rate for the sprouts of the microstumps, increased growth of shoots, obtaining the highest values of fresh and dry matter weight, and also showed higher accumulation of total nitrogen and protein. However, the ½ MS and WPM culture media promoted a similar multiplication rate to the MS medium, with the development of the smaller and less vigorous shoots, but with greater homogeneity. This way, depending on the purpose of in vitro culture, their use in the micropropagation for this species should not be disregarded. The leaf explants are not well developed in WPM medium, and don\'t had significant difference between the MS and ½ MS culture medium, as both showed satisfactory results. The histological and histochemical analysis identified the presence of the parenchymatic cells, which act as stem cells, expressing morphogenic ability for toti or pluripotency, leading respectively to somatic embryogenesis or adventitious organogenesis in response to in vitro stimuli.

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The experiment was conducted at the School of Agronomy of the Federal University of Goiás, in Goiânia, GO, from September 2015 to September 2016. The seedlings from the tissue culture were grown in black plastic pots (1.3 L), with 50% shading and micro sprinkler irrigation. The experimental design was completely randomized, with five treatments and thirty repetitions. The treatments were: subsoil + sand; subsoil + substrate commercial; commercial substrate + sand; subsoil + substrate commercial + sand; and commercial substrate, in equal proportions (v/v). During 365 days, at intervals of 30 days, the leaf length was determined, external and internal diameters of leaf rosette, number of whole leaves, green, dry and total, and coloring of leaves. At the end of the period, were also determined the length of the largest root, diameter of the stem, wider leaf width, leaf area, root volume, of fresh and dry matter of shoots and roots, longer leaf length and leaf analysis. Substrate analyzes were performed at the beginning and end of the evaluation period. At 90 days of cultivation, the length of the aerial part of the treatment plants subsoil + sand + commercial substrate was statistically superior to the other treatments. Substrate subsoil + commercial substrate provided higher number of whole leaves, larger number of dryleaves and higher averages for the length of the larger leaf. In general, there was no significant difference in leaf color. At 365 days of cultivation, the treatments did not induce a significant effect on the accumulation of fresh root matter mass, broad leaf width, root length, dry shoot mass and total leaf area. The soil treatment of subsoil + sand + commercial substrate showed the greatest mass accumulation of the dry matter of the aerial part, as well as of the roots. The treatment of subsoil + sand presented the smallest stem diameters, and lower averages for fresh root matter mass, root length, shoot dry matter mass and root volume. It is concluded that the initial seedling cultivation of B. reversacantha can be carried out in almost all the mixtures of substrates proposed in the present study, especially in the mixtures of subsoil + commercial substrate. It is not recommended to use the mixture of subsoil + sand for the initial development of plants of this species. / A família Bromeliaceae possui plantas que impressionam por suas formas, pela gama de cores e variedade de flores. Entre as espécies de bromélias nativas do Cerrado com potencial ornamental, destaca-se a Bromelia reversacantha, planta terrestre, de solos arenosos e ambientes secos. Muitas espécies comercializadas são provenientes do extrativismo, e faltam informações técnicas a respeito da propagação e cultivo. Uma das dificuldades encontradas pelos produtores de bromélias é a determinação de um substrato adequado ao seu desenvolvimento. Objetivou-se avaliar odesenvolvimento inicial de plantas de B. reversacantha, cultivadas em diferentes composições de substrato. O experimento foi conduzido na Escola de Agronomia da Universidade Federal de Goiás, em Goiânia, GO, de setembro de 2015 a setembro de 2016. As mudas, provenientes da cultura de tecidos, foram cultivadas em vasos plásticos pretos (1,3 L), em telado com 50% de sombreamento e irrigação por microaspersão. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e trinta repetições. Os tratamentos foram: terra de subsolo + areia; terra de subsolo + substrato comercial; substrato comercial + areia; terra de subsolo + substrato comercial + areia; e substrato comercial, em proporções iguais (v/v). Ao longo de 365 dias, com intervalos de trinta dias, foram determinados comprimento da parte aérea, diâmetros externo e interno da roseta foliar, número de folhas inteiras, verdes, secas e total, e coloração das folhas. Ao final do período, foram determinados, ainda, o comprimento da maior raiz, diâmetro do caule, largura da folha mais larga, área foliar, volume de raízes, massa das matérias fresca e seca da parte aérea e das raízes, comprimento da maior folha e análise foliar. Fez-se análises dos substratos no início e no final do período de avaliação. Aos 90 dias de cultivo, o comprimento da parte aérea das plantas do tratamento terra de subsolo + areia + substrato comercial foi estatisticamente superior aos demais tratamentos. O substrato terra de subsolo + substrato comercial proporcionou maior número de folhas inteiras, maior número de folhas secas e médias superiores para o comprimento da maior folha. De forma geral, não houve diferença significativa para a cor das folhas. Aos 365 dias de cultivo, os tratamentos não induziram efeito significativo para a acumulação de massa da matéria fresca das raízes, largura da folha mais larga, comprimento da maior raiz, massa da matéria seca da parte aérea e área foliar total. O tratamento terra de subsolo + areia + substrato comercial apresentou o maior acúmulo de massa da matéria seca tanto da parte aérea, quanto das raízes. O tratamento terra de subsolo + areia apresentou os menores diâmetros de caule, e médias inferiores para a massa da matéria fresca da raiz, comprimento da maior raiz, massa da matéria seca da parte aérea e volume de raiz. Conclui-se que o cultivo inicial de mudas de B. reversacantha pode ser realizado em quase todas as misturas de substratos propostas no presente trabalho, especialmente nas misturas terra de subsolo + substrato comercial. Não se recomenda o uso da mistura de terra de subsolo + areia para o desenvolvimento inicial de plantas desta espécie.

A família Bromeliaceae apresenta importância ecológica e econômica, desta forma, o desenvolvimento de protocolos para a micropropagação de espécies dessa família, faz-se necessário, a fim de suprir sua demanda comercial e mesmo ecológica. A escolha do meio de cultura e do explante utilizado durante a micropropagação são fundamentais para um protocolo eficaz. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar as diferenças quantitativas e qualitativas no desenvolvimento de explantes de Neoregelia sp em meios de cultura e monitorar as vias morfogênicas dos propágulos obtidos em explantes foliares. Para tanto, brotos de microcepas e explantes foliares procedentes de um micro jardim clonal, foram transferidos para os meios de cultura de multiplicação MS, ½ MS e WPM, todos suplementados com 0,050 mg.L-1 ANA e 0,50 mg.L-1 de BAP, onde foram mantidos por 120 dias e submetidos a diversas análises morfofisiológicas. Paralelamente, explantes foliares foram mantidos em meio de cultura MS de multiplicação para o monitoramento das vias morfogênicas durante os processos regenerativos. Para os experimentos com brotos de microcepas verificou-se que o meio de cultura MS proporcionou a melhor taxa de multiplicação, maior crescimento dos brotos, obtendo os valores mais elevados de peso de matéria fresca e seca, além disso, apresentaram maior acúmulo de nitrogênio total e proteico. No entanto, os meios de cultura ½ MS e WPM promoveram uma taxa de multiplicação semelhante a do MS, mas com brotos menores e menos vigorosos, porém, mais homogêneos, com isso, na dependência do objetivo do cultivo in vitro, não deve ser desconsiderada a possibilidade de utilização dos meios de cultura ½ MS e WPM. Os explantes foliares não se desenvolveram bem no meio de cultura WPM, não havendo diferença entre os meios MS e ½ MS, visto que ambos apresentaram resultados satisfatórios. As análises histológicas e histoquímicas identificaram células parenquimáticas, que atuam como células-tronco, manifestando capacidade morfogênica para toti ou pluripotência, dando origem respectivamente a embriões somáticos e gemas adventícias, em resposta aos estímulos in vitro. / The Bromeliaceae family has an ecological and economic importance, therefore, the protocols development for micropropagation of species of this family becomes necessary in order to meet its business and even its ecological demand. The choice of culture medium and the explant used during micropropagation are essential for an effective protocol. Thus, the aim of this study was to evaluate the quantitative and qualitative differences in the explants development of Neoregelia sp in the culture media and monitor the morphogenetic pathways of obtained propagules from leaf explants. Consequently, shoots and leaf explants coming from microcloning garden were transferred to the MS, ½ MS and WPM multiplication culture media, all supplemented with 0.050 mg.L-1 NAA and 0.50 mg.L-1 BAP, where they were held for 120 days and submitted to morphological and physiological analysis. Therefore, leaf explants were kept on MS-medium multiplication for monitoring morphogenetic pathways during the regenerative processes. Furthermore, MS medium showed the best multiplication rate for the sprouts of the microstumps, increased growth of shoots, obtaining the highest values of fresh and dry matter weight, and also showed higher accumulation of total nitrogen and protein. However, the ½ MS and WPM culture media promoted a similar multiplication rate to the MS medium, with the development of the smaller and less vigorous shoots, but with greater homogeneity. This way, depending on the purpose of in vitro culture, their use in the micropropagation for this species should not be disregarded. The leaf explants are not well developed in WPM medium, and don\'t had significant difference between the MS and ½ MS culture medium, as both showed satisfactory results. The histological and histochemical analysis identified the presence of the parenchymatic cells, which act as stem cells, expressing morphogenic ability for toti or pluripotency, leading respectively to somatic embryogenesis or adventitious organogenesis in response to in vitro stimuli.