Submitted by Karina Calciolari null (karinaveterinaria@hotmail.com) on 2016-04-18T19:09:55Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Karina Calciolari.pdf: 3537872 bytes, checksum: 25bdb76342a16861139075d0c9e32394 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-04-19T17:12:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 calciolari_k_me_jabo.pdf: 3537872 bytes, checksum: 25bdb76342a16861139075d0c9e32394 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-19T17:12:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 calciolari_k_me_jabo.pdf: 3537872 bytes, checksum: 25bdb76342a16861139075d0c9e32394 (MD5) Previous issue date: 2016-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As afecções do sistema respiratório são a segunda causa de queda de desempenho e afastamento dos equinos do esporte ou trabalho, as quais estão atrás somente das desordens musculoesqueléticas. A estabulação e alimentação a base de fenos predispõe os equinos a inalação de grande número de agentes irritantes as vias aéreas. No intuito de mensurar a influência dos tipos de cama utilizado em baias de equinos nas respostas alérgicas das vias aéreas estudou-se 3 grupos com 5 equinos cada sendo dois mantidos em cocheiras com diferentes tipos de forração à base de madeira (maravalha de pinus autoclavada-MA e serragem-SE) e por último um grupo controle à pasto por 45 dias com avaliações quinzenais (D0, D15, D30 e D45). Foi realizado nestes momentos o exame físico, coleta de amostras de sangue venoso e arterial para realização de hemograma e hemogasometria respectivamente, lavado broncoalveolar com análise citológica e mensuração de fosfatase alcalina, além de amostras das camas (limpa e suja) e feno pré-secado para análise micológica. No exame físico foi notado tosse e espirros em maior intensidade e número nos equinos do grupo SE. A análise hematológica permaneceu dentro dos padrões de normalidade. Já nos achados hemogasométricos os maiores valores de pH foram observados nos equinos à pasto (7,47 ± 0,02). Nos grupos embaiados foi observado valores de pressão parcial de dióxido, de D15 à D45, inferiores (valores entre 38,3 a 43,7 mmHg) ao grupo a pasto (valores entre 43,7 a 46,5 mmHg), sendo os valores de pressão parcial de oxigênio inversamente proporcionais (MA e SE: valores entre 103,6 a 127,78 mmHg e à pasto: 88,2 a 103,6 mmHg). Os principais achados no lavado broncoalveolar basearam-se na contagem de células nucleadas totais no que apresentou maiores valores em todos os momentos nos animais à pasto (251,0 a 336,8 x 103/ µL), seguido do grupo SE (197,0 a 248,6 x 103/ µL) e por último o MA (140,6 à 270,2 x 103/ µL). Dentre as células nucleadas os macrófagos representaram maior porcentagem seguidos dos linfócitos (51,2 a 80,8% e 6,6 a 33,2% respectivamente). Um padrão inesperado foi observado na população de neutrófilos, os quais com os passar dos momentos houve decréscimo, com excessão do grupo MA que apresentou um pico no D30 (35%), relacionado ao pico de fosfatase alcalina (27,6 ± 14,98 UI/L) neste mesmo momento. Foram identificados cerca de 12 gêneros fúngicos em ambas camas e 17 no alimento volumoso, sendo neste último encontrado gêneros patogênicos como Aspergillus (0,85 ± 2,2%), Fusarium (5,35 ± 9,23%) e Penicílium (4,81 ± 9,53%), porém em baixas porcentagens. A principal diferença entre as camas baseou-se na capacidade da produção e dispersão de partículas finas passíveis de inalação, a qual foi maior para a serragem (MA: 15,29 % e SE: 18,28%). Concluiu-se que a cama de maravalha além de ter manejo mais fácil, apresentou menor capacidade irritativa das vias aéreas superiores do que a serragem. As condições de manejo e estabulações utilizadas foram ideais, servindo de modelo quanto a ventilação e higienização das baias. / Horse respiratory diseases is second most commom cause of poor performance and premature retirement, which the one are musculoskeletal disorders. The stabling and poor quality feedings may the favor predispose of diseases in airways. In order we measure the influence of the types of bedding used in the horse stalls about responses allergic airway. Three groups of five horses each are formated, two groups kept in stables but each group with a different type of bedding (autoclaved wood- MA shaving and sawdust-SE) . The third group is the control and stays at pasture. The groups remained in this condition for 45 days with biweekly reviews (D0, D15, D30 and D45). It was realize the physical examination, venous and arterial blood samples collection to realize hemogram and hemogasometry analysis, the bronchoalveolar lavage samples was colected to realize the cytological analysis and to measure alkaline phosphatase. In addition, samples of the beds (clean and dirty) and haylage was collected to realize mycological analysis. In the physical examination was noticed higher intensity of coughing and sneezing at SE group. Hematological analysis remained within the normal standards. Findings of hemogasometric analysis were observed the biggest pH values at horses to pasture (7.47 ± 0.02). At stables horses was observed smaller values of partial pressure dioxide (D15 to D45), (values between 38.3 to 43.7 mmHg) to horses to pasture (values between 43.7 to 46.5 mmHg). The values oxygen partial pressure it was inversely proportional to partial pressure dioxide (MA and SE: values between 103.6 to 127.78 mmHg and pasture: 88.2 to 103.6 mmHg). It was observate higher values of nucleated cells of bronchoalveolar lavage, at all times, in animals to pasture (251.0 to 336.8 x 103 / mL), followed by the SE group (197.0 to 248.6 x 103 / mL) and finally MA group (140.6 to 270.2 x 103 / mL). The macrophages cells represented the biggest percentage of nucleates cells on bronchoalveolar lavage followed by lymphocytes (51.2 to 80.8% and 6.6 to 33.2% respectively). An unexpected pattern was observed in percentange of neutrophils cells, that it was a decrease over the time. One exception it was with MA group that had the biggest percentage values in D30 (35%), it was related to alkaline phosphatase peak at same time (27.6 ± 14.98 IU / L). Were identified about 12 fungi genres in both beds and 17 fungi genres at haylage. We indentified pathogenic genres in haylage as Aspergillus (0.85 ± 2.2%), Fusarium (5.35 ± 9.23%) and Penicillium (4 , 81 ± 9.53%), however in lower percentages. It was observate a difference production capacity and fine particle dispersion between the bed, that the biggest it was notice at sawdust (MA: 15.29% and SE: 18.28%). It was concluded that wood shavings bed is easier to use and showed less irritative capacity upper airway to que sawdust. As management and stabling conditions used were ideals and it was a ideal model of stables.

A pneumonia nosocomial é a principal causa de infecção nosocomial em unidades de tratamento intensivo e possui alta morbi/mortalidade. A incidência cumulativa varia, conforme os autores, entre limites amplos desde 8% até 51%, dependendo do tipo de paciente e do uso de instrumentação das vias respiratórias. Nos casos específicos das pneumonias de má resolução e da pneumonia associada à ventilação mecânica, o diagnóstico é problemático devido à ausência de uma padronização definitiva, decorrente não só da grande variabilidade fisiopatológica como também da pouca acurácia dos critérios clínicos, microbiológicos e radiológicos. Estes fatos ensejaram a utilização progressiva de técnicas invasivas sofisticadas para coleta de amostras respiratórias endobrônquicas. Entretanto, a validação dessas técnicas para uso sistemático depende ainda de estudos que avaliem não só o seu custo/benefício em cenários clínicos diversos como também a comparação de seu desempenho para o diagnóstico com um padrão-ouro histopatológico. Além disso, o rendimento das técnicas invasivas é freqüentemente limitado quando são aplicadas em pacientes sob antibioticoterapia, que constituem a maioria dos casos em unidades de cuidados intensivos. A otimização desses testes, discutindo suas indicações e avaliando sua capacidade técnica para a confirmação ou exclusão de pneumonia, é justificada pela necessidade da instituição precoce e correta do tratamento, pois disto resulta menor mortalidade, redução de custos e permanência no hospital. Entre os testes que podem auxiliar no diagnóstico encontra-se o exame direto do lavado broncoalveolar, que proporciona resultados precoces e úteis para a tomada de decisão, mas não suficientemente testados em diferentes situações clínicas ou experimentais. Com o objetivo de avaliar o rendimento diagnóstico do exame direto precoce e das culturas quantitativas obtido por lavado broncoalveolar, estudou-se sua utilização em um modelo experimental de pneumonia provocada através de inoculação bacteriana intrabrônquica em ratos. O estudo comparou a acurácia do exame direto e dos exames culturais em três grupos de animais: Grupo A com pneumonia pneumocócica (37 animais); Grupo P com pneumonia por P. aeruginosa (26 animais) e Grupo B controle (10 animais), utilizando a histopatologia dos pulmões como teste de referência para o diagnóstico. Os Grupos A e P foram ainda randomizados em dois subgrupos cada, para tratamento ou não com antibióticos, usando penicilina no grupo pneumococo e amicacina no grupo Pseudomonas. Como resultado, observou-se que nos animais com pneumonia e ausência de antibióticos a pesquisa de bactéria fagocitada (BIC) no exame direto mostrou um rendimento elevado para o diagnóstico, sendo superior ao das culturas quantitativas. No grupo com pneumonia pneumocócica a BIC mostrou: S:94,4% a 100%, E:100%, VPP:100% e VPN:100%; e as culturas quantitativas mostraram: S:77,8%, E:100%, VPP:100%, VPN:40%. Nos com pneumonia por Pseudomonas a BIC obteve: S: 69%, E:100%; VPP:100% e VPN:71,4%); e as culturas quantitativas mostraram valores muito baixos: S:28,6%, E:100%, VPP:100% e VPN:50%). Nos animais com pneumonia pneumocócica sob tratamento antibiótico havia uma queda acentuada de sensibilidade das culturas quantitativas (S:21%) e, em menor grau da BIC (S:57,9%), mas sem perda da especificidade de ambos os exames. Ao contrário, nos animais com pneumonias por Pseudomonas sob tratamento não havia alteração no rendimento dos dois exames, cujos resultados foram semelhantes aos dos animais sem tratamento. Não havia diferenças de leitura da BIC para o diagnóstico, contando a sua positividade em macrófagos ou em neutrófilos infectados. A avaliação global dos casos estudados, reunindo todos os grupos (tratados e não-tratados) em ambos os modelos de pneumonia, mostrou que a acurácia do exame direto, representado pela pesquisa da BIC, foi superior (66%) ao das culturas quantitativas (53%). As conclusões principais do estudo foram: 1) o exame direto do lavado broncoalveolar (LBA) mostrou-se um teste útil e de alto rendimento para o diagnóstico de pneumonia quando realizado na ausência de antibióticos; 2) o LBA feito na vigência de antibióticos efetivos para a pneumonia perde mais de 50% de sua acurácia, mas não é afetado quando o antibiótico for ineficaz ou houver resistência ao mesmo; 3) a pesquisa de BIC no LBA é um exame de resultado precoce, de alta especificidade e com melhor rendimento do que as culturas quantitativas. / Nosocomial pneumonia is the main cause of nococomial infection infection in Intensive Care Units and it presents a high degree of morbi/mortality. The cumulative incidence varies, according to the authors, between the wide limits from 8% to 51%, depending on the type of patient and on the use of instrumentation of the respiratory tract. In the specific cases of non-resolving pneumonias and of the mechanical ventilation associated-pneumonias. The diagnosis is problematic due to the absence of definite standardization, resulting not only from the great physiopathological variability, but also from the little accuracy of the clinica, microbiological and radiological criteria. These facts led to the progressive use of sophisticated invasive techniques to collect respiratory samples. However, the validation of these techniques for a systematic use still depends on studies which evaluate not only their cost/benefit in the diverse clinical settings , as well as on the comparison of its performance for the diagnosis with a histo-pathological gold-standard. Moreover, the results of the invasive techniques are often limited when they are applied to patients under antibiotic therapy. The acquirements of the utmost which these tests may provide, discussing their indications and evaluating their technical capacity to confirm or exclude pneumonia is justified by the necessity of a precocious and correct administration of the treattment, because this will result in a lower rate of mortality, reduction of costs, and a shorter stay in hospital. Among the controversial tests which may help in the diagnosis is the direct exam of the bronchoalveolar lavage, which provides precocious and useful results to make a decision but not sufficiently tested in different clinical or experimental situations. Having the aim of evaluating the diagnostic value of the direct precocious exam and of the quantitative cultures obtained through broncoalveolar lavage, we studied their use in an experimental model of pneumonia provocated through intrabronchial bacterial inoculation in rats. The study compared the accuracy of the direct examination and of the quantitative cultures in three groups of animals: Group A with pneumococal pneumonia (37 animals), Group P with P. aeruginosa pneumonia (26 animals), and Group B, controls without pneumonia (10 animals), using the histopathology of the lungs as the reference test for the diagnosis. Groups A and P above were each one of them randomized into two subgroups, for treatment or not with antibiotics, using penicilin in the pneumococal group and amikacin in the Pseudomonas group. As results it was observed that in the animals with pneumonia and absence of antibiotics the research for intracelular bacteria (ICO) in the direct exam revealed high sensitive diagnosis, superior to that of the quantitative cultures. In the group with pneumococal pneumonia the ICO revealed (S: 94.4% to 100%; E: 100%; PPV: 100%; PNV: 100% ), and the quantitative cultures (S: 77.8%; E: 100%; PPV: 100%; PNV: 40%). In those with Pseudomonas pneumonia, ICO with (S: 69%; E: 100%; PPV: 100%; NPV: 71.4%) and the cultures with (S: 28.6%; E: 100%: VPP: 100%; VPN: 50%). In the animals with pneumococical pneumonia under penicilin there was a significant fall of the sensibility of yhe quantitative cultures (S: 21%) and also of the ICO, although in a lower degree (S: 57.9%), but without loss of the specificity of both exams. On the contrary, in the animals with Pseudomonas pneumonia under amikacin treatment there was no change in the sensibility of the two exams, whose results were similar to those of the animals without treatment. These were no difference in the reading of the ICO in relation to the diagnosis counting its positiveness according to infected macrophages or neutrophiles. The global evaluation of the cases studied, putting together all the groups (treated and not treated) in both models of pneumonia showed that the accuracy of the direct exam represented by the ICO research was superior (66%) to that of the quantitative cultures (53%). The main conclusions of the study were: 1) the direct exam of the bronchoalveolar lavage revealed it self a useful test of great effectiveness for the diagnosis of pneumonia when performed without antibiotics; 2) the bronchoalveolar lavage performed with the use of antibiotics effective for the pneumonia loses more than 50% of its accuracy, but does not suffer any change when the antibiotic is ineffecient or there is resistance to it; 3) the research of ICO in the bronchoalveolar lavage is an examination of precociuos result, of high specificity with better accuracy than the quantitative cultures.

A pneumonia nosocomial é a principal causa de infecção nosocomial em unidades de tratamento intensivo e possui alta morbi/mortalidade. A incidência cumulativa varia, conforme os autores, entre limites amplos desde 8% até 51%, dependendo do tipo de paciente e do uso de instrumentação das vias respiratórias. Nos casos específicos das pneumonias de má resolução e da pneumonia associada à ventilação mecânica, o diagnóstico é problemático devido à ausência de uma padronização definitiva, decorrente não só da grande variabilidade fisiopatológica como também da pouca acurácia dos critérios clínicos, microbiológicos e radiológicos. Estes fatos ensejaram a utilização progressiva de técnicas invasivas sofisticadas para coleta de amostras respiratórias endobrônquicas. Entretanto, a validação dessas técnicas para uso sistemático depende ainda de estudos que avaliem não só o seu custo/benefício em cenários clínicos diversos como também a comparação de seu desempenho para o diagnóstico com um padrão-ouro histopatológico. Além disso, o rendimento das técnicas invasivas é freqüentemente limitado quando são aplicadas em pacientes sob antibioticoterapia, que constituem a maioria dos casos em unidades de cuidados intensivos. A otimização desses testes, discutindo suas indicações e avaliando sua capacidade técnica para a confirmação ou exclusão de pneumonia, é justificada pela necessidade da instituição precoce e correta do tratamento, pois disto resulta menor mortalidade, redução de custos e permanência no hospital. Entre os testes que podem auxiliar no diagnóstico encontra-se o exame direto do lavado broncoalveolar, que proporciona resultados precoces e úteis para a tomada de decisão, mas não suficientemente testados em diferentes situações clínicas ou experimentais. Com o objetivo de avaliar o rendimento diagnóstico do exame direto precoce e das culturas quantitativas obtido por lavado broncoalveolar, estudou-se sua utilização em um modelo experimental de pneumonia provocada através de inoculação bacteriana intrabrônquica em ratos. O estudo comparou a acurácia do exame direto e dos exames culturais em três grupos de animais: Grupo A com pneumonia pneumocócica (37 animais); Grupo P com pneumonia por P. aeruginosa (26 animais) e Grupo B controle (10 animais), utilizando a histopatologia dos pulmões como teste de referência para o diagnóstico. Os Grupos A e P foram ainda randomizados em dois subgrupos cada, para tratamento ou não com antibióticos, usando penicilina no grupo pneumococo e amicacina no grupo Pseudomonas. Como resultado, observou-se que nos animais com pneumonia e ausência de antibióticos a pesquisa de bactéria fagocitada (BIC) no exame direto mostrou um rendimento elevado para o diagnóstico, sendo superior ao das culturas quantitativas. No grupo com pneumonia pneumocócica a BIC mostrou: S:94,4% a 100%, E:100%, VPP:100% e VPN:100%; e as culturas quantitativas mostraram: S:77,8%, E:100%, VPP:100%, VPN:40%. Nos com pneumonia por Pseudomonas a BIC obteve: S: 69%, E:100%; VPP:100% e VPN:71,4%); e as culturas quantitativas mostraram valores muito baixos: S:28,6%, E:100%, VPP:100% e VPN:50%). Nos animais com pneumonia pneumocócica sob tratamento antibiótico havia uma queda acentuada de sensibilidade das culturas quantitativas (S:21%) e, em menor grau da BIC (S:57,9%), mas sem perda da especificidade de ambos os exames. Ao contrário, nos animais com pneumonias por Pseudomonas sob tratamento não havia alteração no rendimento dos dois exames, cujos resultados foram semelhantes aos dos animais sem tratamento. Não havia diferenças de leitura da BIC para o diagnóstico, contando a sua positividade em macrófagos ou em neutrófilos infectados. A avaliação global dos casos estudados, reunindo todos os grupos (tratados e não-tratados) em ambos os modelos de pneumonia, mostrou que a acurácia do exame direto, representado pela pesquisa da BIC, foi superior (66%) ao das culturas quantitativas (53%). As conclusões principais do estudo foram: 1) o exame direto do lavado broncoalveolar (LBA) mostrou-se um teste útil e de alto rendimento para o diagnóstico de pneumonia quando realizado na ausência de antibióticos; 2) o LBA feito na vigência de antibióticos efetivos para a pneumonia perde mais de 50% de sua acurácia, mas não é afetado quando o antibiótico for ineficaz ou houver resistência ao mesmo; 3) a pesquisa de BIC no LBA é um exame de resultado precoce, de alta especificidade e com melhor rendimento do que as culturas quantitativas. / Nosocomial pneumonia is the main cause of nococomial infection infection in Intensive Care Units and it presents a high degree of morbi/mortality. The cumulative incidence varies, according to the authors, between the wide limits from 8% to 51%, depending on the type of patient and on the use of instrumentation of the respiratory tract. In the specific cases of non-resolving pneumonias and of the mechanical ventilation associated-pneumonias. The diagnosis is problematic due to the absence of definite standardization, resulting not only from the great physiopathological variability, but also from the little accuracy of the clinica, microbiological and radiological criteria. These facts led to the progressive use of sophisticated invasive techniques to collect respiratory samples. However, the validation of these techniques for a systematic use still depends on studies which evaluate not only their cost/benefit in the diverse clinical settings , as well as on the comparison of its performance for the diagnosis with a histo-pathological gold-standard. Moreover, the results of the invasive techniques are often limited when they are applied to patients under antibiotic therapy. The acquirements of the utmost which these tests may provide, discussing their indications and evaluating their technical capacity to confirm or exclude pneumonia is justified by the necessity of a precocious and correct administration of the treattment, because this will result in a lower rate of mortality, reduction of costs, and a shorter stay in hospital. Among the controversial tests which may help in the diagnosis is the direct exam of the bronchoalveolar lavage, which provides precocious and useful results to make a decision but not sufficiently tested in different clinical or experimental situations. Having the aim of evaluating the diagnostic value of the direct precocious exam and of the quantitative cultures obtained through broncoalveolar lavage, we studied their use in an experimental model of pneumonia provocated through intrabronchial bacterial inoculation in rats. The study compared the accuracy of the direct examination and of the quantitative cultures in three groups of animals: Group A with pneumococal pneumonia (37 animals), Group P with P. aeruginosa pneumonia (26 animals), and Group B, controls without pneumonia (10 animals), using the histopathology of the lungs as the reference test for the diagnosis. Groups A and P above were each one of them randomized into two subgroups, for treatment or not with antibiotics, using penicilin in the pneumococal group and amikacin in the Pseudomonas group. As results it was observed that in the animals with pneumonia and absence of antibiotics the research for intracelular bacteria (ICO) in the direct exam revealed high sensitive diagnosis, superior to that of the quantitative cultures. In the group with pneumococal pneumonia the ICO revealed (S: 94.4% to 100%; E: 100%; PPV: 100%; PNV: 100% ), and the quantitative cultures (S: 77.8%; E: 100%; PPV: 100%; PNV: 40%). In those with Pseudomonas pneumonia, ICO with (S: 69%; E: 100%; PPV: 100%; NPV: 71.4%) and the cultures with (S: 28.6%; E: 100%: VPP: 100%; VPN: 50%). In the animals with pneumococical pneumonia under penicilin there was a significant fall of the sensibility of yhe quantitative cultures (S: 21%) and also of the ICO, although in a lower degree (S: 57.9%), but without loss of the specificity of both exams. On the contrary, in the animals with Pseudomonas pneumonia under amikacin treatment there was no change in the sensibility of the two exams, whose results were similar to those of the animals without treatment. These were no difference in the reading of the ICO in relation to the diagnosis counting its positiveness according to infected macrophages or neutrophiles. The global evaluation of the cases studied, putting together all the groups (treated and not treated) in both models of pneumonia showed that the accuracy of the direct exam represented by the ICO research was superior (66%) to that of the quantitative cultures (53%). The main conclusions of the study were: 1) the direct exam of the bronchoalveolar lavage revealed it self a useful test of great effectiveness for the diagnosis of pneumonia when performed without antibiotics; 2) the bronchoalveolar lavage performed with the use of antibiotics effective for the pneumonia loses more than 50% of its accuracy, but does not suffer any change when the antibiotic is ineffecient or there is resistance to it; 3) the research of ICO in the bronchoalveolar lavage is an examination of precociuos result, of high specificity with better accuracy than the quantitative cultures.

Há diversas evidências epidemiológicas de correlações positivas entre indicadores de morbidade e mortalidade pulmonar e cardiovascular e aumentos na concentração atmosférica de MP2,5 (material particulado fino). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da exposição subcrônica de MP2,5 sobre o tônus cardíaco autonômico, a inflamação pulmonar e sistêmica; o estresse oxidativo e a homeostase sanguínea, após oito semanas de repetidas instilações nasais de suspensão aquosa de MP2,5 da cidade de São Paulo em concentração ambiental. Dividiram-se os animais em dois grupos: salina e MP2,5 e avaliaram-se os seguintes parâmetros: frequência cardíaca (FC), variabilidade da frequência cardíaca (VFC), pressão arterial sistólica (PA), hemograma, contagem de plaquetas e reticulócitos, fibrinogênio plasmático, tempo de protrombina (TP), tempo de tromboplastina parcialmente ativada (TTPA), mielograma, citologia do lavado broncoalveolar (LBA), análise histopatológica e imuno-histoquímica (15-F2tisoprostano e -actina) de pequenas arteríolas pulmonares e coronarianas. Não houve alterações na FC e na PA (p > 0,05). Houve interação estatisticamente significante entre grupos e semanas em relação à VFC. O SDNN (desvio padrão dos intervalos R-R normais), a r-MSSD (raiz quadrada da média dos quadrados das diferenças sucessivas entre intervalos R-R normais adjacentes) e a AF (alta frequência) do grupo MP2,5 aumentaram significativamente na 7ª semana em comparação à 1ª semana (p < 0,05), enquanto a BF (baixa frequência) não se alterou (p > 0,05). A porcentagem de macrófagos no LBA do MP2,5 diminuiu significativamente (p < 0,05). Não se observaram alterações no sangue, mielograma e análise histopatólogica e imuno-histoquímica dos vasos (p > 0,05). Concluiu-se que a exposição subcrônica pela instilação nasal de suspensão aquosa de MP2,5 em concentração ambiental causou inflamação pulmonar tênue e alterou o equilíbrio cardíaco autonômico / There are several epidemiological evidences of positive correlation between indicators of pulmonary and cardiovascular morbidity and mortality and increases of PM2.5 (fine particulate matter) air concentration. The aim of this experiment was to evaluate the effects of subchronic exposure of PM2.5 on cardiac autonomic tone, pulmonary and systemic inflammation, oxidative strees and blood homeotasis of healthy rats after eight weeks of repeated nasal instillations of suspended PM2.5 from Sao Paulo city in environmental concentration. Rats were divided in two groups: saline and PM2.5. The following parameters were evaluated: heart rate (HR), heart rate variability (HRV), systolic blood pressure (BP), hemogram, platelets and reticulocytes count, plasmatic fibrinogen, prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (APTT), bone marrow cells, bronchoalveolar lavage cells (BAL), histopathological and immunohistochemical analysis (15-F2tisoprostane and -actin) of pulmonary and coronary small arterioles. No changes were detected in HR and BP (p > 0.05). There were a statistically significant interaction between groups and weeks in relation to HRV. SDNN (standard deviation of normal RR intervals), r-MSSD (square root of the mean of the squared differences between adjacent normal RR intervals) and HF (high frequency) of PM2.5 group significantly increased on 7th week compaired to 1st week (p < 0.05), while LF (low frequency) did not alter (p > 0.05). BAL macrophages porcentage of PM2.5 group significantly decreased (p < 0.05). No alterations were observed in blood, bone marrow cells, histopathological and immunohistochemical analysis of vessels (p > 0.05). We concluded that subchronic exposure by nasal instillation of aquous suspension of PM2.5 in environmental concentration caused tenuous pulmonary inflammation and altered cardiac autonomic balance

Este trabalho teve por objetivo avaliar as alterações respiratórias e neurológicas resultantes da infecção por via intranasal das diferentes estirpes nacionais do herpesvírus equino tipo 1 (EHV-1) em hamsters comparando sua susceptibilidade com estudos sobre infecção do EHV-1 em camundongos e equinos. Para isso, hamsters sírios machos, três semanas de idade, foram infectados por via intranasal com as estirpes do EHV-1 obtidas a partir de fetos abortados e potro neonato infectados (A4/72, A9/92, A3/97 e Iso/72). Os animais foram pesados e examinados diariamente em busca de sinais clínicos e neurológicos. Conforme os sintomas neurológicos apareceram, grupos de cinco hamsters foram eutanasiados por overdose de isoflurano na primeira etapa do projeto, e, de cetamina/xilazina por via intraperitoneal na segunda etapa. Na necropsia, sistema nervoso central (SNC), pulmão, fígado, baço e timo foram coletados para isolamento viral em cultura de células E-dermal e para análise histopatológica. Na segunda etapa do projeto, a lavagem broncoalveolar (LBA) com 3 ml de PBS por hamsters foi realizada para determinar a resposta inflamatória pulmonar através da contagem total e diferencial de leucócitos. Similar aos experimentos com camundongos, hamsters desafiados com as estirpes virais A4/72 e A9/92 apresentaram manifestações clínicas severas no terceiro dia pós-inoculação (dpi), tais como perda de peso aguda, dispnéia, desidratação, decúbito e morte. Observou-se também sinais neurológicos como hiperexcitabilidade, paralisia, espasmos, perda de propriocepção, andar em círculos e convulsões. Ao contrário dos camundongos, que não desenvolveram a doença; hamsters inoculados com as estirpes virais A3/97 e Iso/72 manifestaram sintomas respiratórios e neurológicos agudos entre quarto e quinto dpi, sendo as alterações respiratórias as mais evidentes, principalmente hemoptise e conjuntivite. O isolamento do vírus a partir do SNC foi positivo em todos os animais infectados; no entanto, todas as amostras de pulmões foram positivas apenas nos grupos infectado pelas estirpes virais A9/92 e A4/72. Todas as estirpes do EHV-1 foram isoladas a partir do baço, no entanto, a partir do timo foram isoladas apenas as estirpes A9/92 e A4/72, e, de fígado somente a estirpe viral Iso/72 não foi isolada. No LBA, a contagem total de leucócitos não demonstrou diferenças de valores significativas entre os grupos experimentais, sendo apenas evidente a presença de eritrócitos, macrófagos e neutrófilos na maioria dos esfregaços dos hamsters infectados. Porém, na contagem diferencial de leucócitos observou-se um aumento significativo de neutrófilo com consequente diminuição significativa de macrófagos nos hamsters infectados pelas estirpes virais A3/97, Iso/72 e A4/72 quando comparados ao grupo controle. Os hamsters infectados pela estirpe viral A9/92 mantiveram valores próximos aos do grupo controle. Ao avaliar microscopicamente o SNC, fígado e pulmão dos hamsters infectados foi observado infiltrado inflamatório, necrose e manguito perivascular em SNC; leucocitose e necrose no parênquima hepático com discreta pericolangite e proliferação de ducto biliar; e em pulmão observou inflamação, necrose, edema e hemorragia em bronquíolos e alvéolos. Concluindo, os resultados apontaram o hamster como a espécie mais susceptível à infecção pelo EHV-1 servindo como um modelo experimental complementar para estudos de doenças respiratória e neurológica provocadas por este agente em equinos / This study aimed to evaluate the respiratory and neurological disorders resulting from intranasal infection with different national strains of equine herpesvirus type 1 (EHV-1) in hamsters comparing their susceptibility to studies about EHV-1 infection in mice and horses. Therefore, male Syrian hamsters, three weeks of age, were infected via intransal with EHV-1 strains obtained from aborted fetuses and neonatal foal infected (A4/72, A9/92, A3/97 and Iso/72). The animals were weighed and examined daily for clinical search and neurological signs. As neurological symptoms appeared five hamsters groups were euthanized by isoflurane overdose in the first stage of the project, and ketamine/xylazine via intraperitoneal in the second stage. At necropsy, central nervous system (CNS), lung, liver, spleen and thymus were collected for virus isolation in E-dermal cell culture and histopathological analysis. In the second stage of the project, bronchoalveolar lavage (BAL) with 3 ml of PBS per hamsters was performed to determine the pulmonary inflammatory response through the total and differential leukocyte count. Similar to the experiments with mice, hamsters challenged with viral strains A4/72 and A9/92 had severe clinical manifestations in the third day post-inoculation (dpi), such as acute weight loss, dyspnea, dehydration, recumbency, and death. It was also observed neurological signs such as hyperexcitability, paralysis, spasms, loss of proprioception, circling and convulsions. Unlike mice, which did not develop disease; hamsters inoculated with viral strains A3/97 and Iso/72 showed acute respiratory and neurological symptoms between fourth and fifth dpi, and the most evident respiratory distress was hemoptysis and conjunctivitis. The virus isolation from CNS was positive in all infected animals; however, all lung samples were positive only in groups infected by A9/92 and A4/72 viral strains. All EHV-1 strains were recovered from spleen, however, only A9/92 and A4/72 viral strains were recovered from thymus, but only Iso/72 viral strain was not recovered from liver. BAL total leukocyte count showed no significant differences in values between the experimental groups but the presence of erythrocytes, macrophages and neutrophils were evident in most smears of infected hamsters. However, in the leukocyte differential count it was observed a significant increase in neutrophils with consequent significant reduction of macrophages in hamsters infected by viral strains A3/97, Iso/72 and A9/92 when compared with the control group. Hamsters infected with the A9/92 viral strain maintained values similar to the control group. When evaluating microscopically the CNS, liver and lungs of infected hamsters it was observed inflammatory infiltrate, necrosis and perivascular cuff in CNS; leukocytosis and necrosis in the liver parenchyma with discrete pericholangitis and bile duct proliferation; and inflammation, necrosis, edema and hemorrhage in the bronchioles and alveoli. Concluding, the results showed the hamster as the most susceptible species to EHV-1 infection serving as a complementary experimental model for studies of respiratory and neurological diseases caused by this agent in horses

Estudamos o efeito do tratamento com salbutamol em dois regimes: diário (DS) e administrado a intervalos de 96 horas (IS) em camundongos balb/c sensibilizados com injeções intraperitoneais de uma solução de ovoalbumina (OVA) adsorvida em hidróxido de alumínio, e desafiada com inalações de ovoalbumina a 1%. O grupo controle SAL recebeu injeções i.p. de salina e desafios inalatórios de sallina. A partir do 34o dia, os animais OVA foram tratados com salbutamol via inalatória 10 mg/ml durante 15 minutos nos dois regimes descritos. Os animais foram sacrificados no 60o dia, que corresponde a 48 horas após o último desafio antigênico. Após os camundongos serem anestesiados com pentobarbital sódico via i.p., eles foram traqueostomizados e entubados e sacrificados com secção da Aorta abdominal. Então, procedeu-se com a coleta do lavado broncoalveolar para a quantificação de leucócitos. Coletamos os tecidos pulmonares para a avaliação do processo inflamatório por quantificação de células linfomononucleares (LMN) e eosinófilos EPO+, essa última com marcação citoquímica. Além disso, estudamos a influência do tratamento adrenérgico sobre o IgE anafilático. O modelo de inflamação (grupo OVA) produziu significativo aumento do número de células totais, de eosinófilos e de neutrófilos observados na avaliação de lavado broncoalveolar. Além disso, houve nesse grupo processo inflamatório na parede de vias aéreas, caracterizada por um infiltrado linfomononuclear e com presença de eosinófilos. O nosso processo de indução de inflamação também recrutou eosinófilos para o septo alveolar. O tratamento com salbutamol diário produziu uma queda significativa do processo inflamatório no BAL, principalmente de neutrófilos e eosinófilos, enquanto que o tratamento intermitente produziu redução significativa apenas de neutrófilos. O tratamento com salbutamol a cada 96 horas (IS) promoveu uma queda significativa de células LMN quantificadas no septo alveolar, mas não atingindo valores do grupo salina (NS). Ambos os tratamentos com salbutamol produziu redução significativa de células EPO+ no parênquima pulmonar (P < 0,05). Apesar das alterações no processo celular, o salbutamol não influenciou na expressão de anticorpos IgE anafiláticos a OVA. Assim, podemos concluir que o salbutamol apresenta atividade imunomoduladora, observada por redução de eosinófilos no BAL e no parênquima pulmonar, apesar de não atingir valores semelhantes aos animais do grupo salina / We studied the effects of salbutamol treatment in two regimen: diary (DS) and at interval of 96 hours (IS) in ovalbumin sensitized (OVA) balb/c mice. The control group (NS) received i.p. injections and aerosol challenge with normal saline. Starting at day 34 the OVA animals were treated with 10mg/ml salbutamol by inhalation during 15 minutes per day in both regimen: DS and IS. The mice were sacrificed at day 60 that corresponded the fourthly eight hours after last OVA and/or salbutamol exposure. At experimental day, mice were anesthetized with i.p. injection of sodium pentobarbital, tracheostomized, entubed and the abdominal aorta sectioned. We followed with collecting of bronchoalveolar lavage (BAL) and lungs to histopathology studies. In the BAL, total cells and differential leukocytes were quantified, while in the lung sections, the EPO+ and LMN in airways wall and parenchyma septa were evaluated. Also, we sampled the blood to evaluate the effects of salbutamol on anaphylactic IgE antibodies expression. The inflammatory model (OVA animals) produced a significant increase of BAL total cells, BAL eosinophils and neutrophils, and LMN cells and EPO+ eosinophils in the airways and in the parenchyma. Diary salbutamol treatment decrease significantly BAL eosinophils and neutrophils, while the IS group showed a diminution of BAL neutrophils and LMN cells in the alveolar septum. Both salbutamol treatments produced significant decline of EPO+ cells in the lung parenchyma. Despite the changes in the cellular patterns, the salbutamol did not affect the IgE antibodies expression. So, we can concluded that salbutamol present an immunomodulatory activity observed by reduction of eosinophils in the BAL and lung parenchyma, but did not achieve the values of saline control group

Introdução: A tuberculose (TB) é uma das infecções mais prevalentes na humanidade, sendo o comprometimento pulmonar a principal causa de morbimortalidade. A cultura é o padrão de referência para diagnóstico, porém apresenta baixa sensibilidade. Das formas extrapulmonares, a TB pleural é a mais comum e apresenta diagnóstico confirmatório difícil por ser paucibacilar e conter interferentes intrínsecos na amostra. A reação em cadeia da polimerase (PCR), por amplificar o DNA da micobactéria, apresenta-se como teste mais sensível que a cultura, sendo positivo em amostras que apresentam a partir de 102 UFC/mL (unidades formadoras de colônia por mL) de M. tuberculosis (MTB). Entretanto, quando utilizada em amostras de escarro, lavado broncoalveolar e/ou líquido pleural pode ter seu desempenho comprometido pela presença de inibidores intrínsecos da amostra (variáveis pré-analíticas) e pelas técnicas de amplificação e detecção (variáveis analíticas) utilizadas na reação. Objetivo: Avaliar a influência de variáveis pré-analíticas (concentração de células, hemácias e proteínas) na detecção do DNA do M. tuberculosis em amostras de escarro, lavado broncoalveolar (LBA) e líquido pleural (LP), utilizando combinações de métodos de extração/detecção. Métodos: Amostras de escarro, lavado broncoalveolar e líquido pleural de pacientes não infectados pelo M. tuberculosis foram obtidas através de indução à expectoração, broncoscopia respiratória e/ou toracocentese, respectivamente, em volumes suficientes para o estudo. Para testar o limiar de detecção do M. tuberculosis, as amostras foram preparadas \"in vitro\" de maneira a conter concentrações variadas dos interferentes pré-analíticos e de UFC/mL da micobactéria. Para a técnica de PCR, o DNA foi extraído pelo método de extração QIAamp® DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) e pelo AMPLICOR® Respiratory Specimen Preparation (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ, USA) e amplificado e detectado por três métodos: 1) COBAS® TaqMan® MTB Test (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ, USA); 2) MTB Q - PCR Alert Kit (Nanogen Advanced Diagnosis, Trezzano, Italy) e 3) \"in-house\" ou caseiro. Desta maneira, foram testadas as seguintes combinações: Extração Roche/detecção Roche (R/R); Extração Roche/detecção Nanogen (R/N); Extração Roche/detecção \"in house\" (R/IH); Extração Qiagen/detecção Roche (Q/R); Extração Qiagen/detecção Nanogen (Q/N) e Extração Qiagen/detecção \"in house\" (Q/IH). Resultados: Em amostras de escarro, a quantidade de células e de hemácias não interferiu na detecção do M. tuberculosis, com exceção do método de extração/detecção Roche. Nas amostras de LBA, médias e altas concentrações de células e altas concentrações de hemácias contribuíram para menor detecção do MTB quando utilizado o método de detecção Roche, enquanto que no líquido pleural, a concentração de hemácias foi a variável que mais interferiu na detecção do agente. Em ambas as situações a menor detecção foi obtida com a combinação Q/N. Conclusão: A qualidade pré-analítica das amostras biológicas recebidas no laboratório clínico pode interferir no desempenho diagnóstico dos testes moleculares. A escolha dos métodos de extração e detecção é de fundamental importância na sensibilidade analítica do teste, para garantia de melhores resultados, especialmente quando trabalhamos com amostras paucibacilares que contém potenciais inibidores da reação / Introduction: Tuberculosis (TB) is one of the most prevalent infections in humanity, and pulmonary compromise is the leading cause of morbidity and mortality. Culture is the reference standard for diagnosis, but has low sensitivity. Of the extrapulmonary forms, pleural TB is the most common and presents difficult confirmatory diagnosis due to be paucibacillary and to contain intrinsic interfering in the sample. The polymerase chain reaction (PCR), for amplifying DNA of the mycobacterium, appears as more sensitive test than the culture, with positive results from 102 CFU/ml (colony forming units per ml) of M. tuberculosis (MTB). However, when used in sputum samples, bronchoalveolar lavage and/or pleural fluid, this test can also have its performance compromised by the presence of intrinsic sample inhibitors (pre-analytical variables) and by the amplification and detection techniques (analytical variables) used in the reaction. Objective: To evaluate the influence of pre-analytical variables (concentration of cells, red blood cells and proteins) in DNA detection of M. tuberculosis from sputum, bronchoalveolar lavage (BAL) and pleural fluid (PF) samples by using combinations of extraction/detection methods. Methods: Samples of sputum, bronchoalveolar lavage and pleural fluid of patients not infected with M. tuberculosis were obtained by inducing sputum, respiratory bronchoscopy and/or thoracentesis, respectively, in sufficient volumes for the study. To test the detection threshold of M. tuberculosis, samples were prepared \"in vitro\" to contain variable concentrations of pre-analytical interfering and CFU/mL of mycobacteria. For PCR, DNA was extracted by two methods: the QIAamp® DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Germany) and Respiratory Specimen Preparation Amplicor (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ, USA) and amplified and detected by three methods: 1) COBAS® TaqMan® MTB Test (Roche Molecular Systems, Inc., Branchburg, NJ, USA); 2) MTB Q - PCR Alert Kit (Nanogen Advanced Diagnosis, Trezzano, Italy) and 3) \"in-house\". Thus, the following combinations were tested: Roche extraction and detection (R/R); Roche extraction and Nanogen detection (R/N); Roche extraction and \"in house\" detection (R/IH); Qiagen extraction and Roche detection (Q/R); Qiagen extraction and Nanogen detection (Q/N) and Qiagen extraction and \"in house\" detection (Q/IH). Results: In sputum samples, the amount of cells and red blood cells did not interfere with M. tuberculosis detection, an exception for Roche extraction/detection method. In BAL samples, medium and high cell concentrations and high concentrations of red blood cells contributed to lower detection of MTB when using the Roche detection method, while in the pleural fluid, the concentration of red blood cells was the variable that most interfered with the MTB detection. In both situations, the smallest detection was obtained with the combination Q/N. Conclusion: The pre-analytical quality of biological samples received in the clinical laboratory can interfere with the performance of molecular diagnostic tests. The choice for the extraction/detection methods is of fundamental importance in the analytical sensitivity of PCR, in order to guarantee better results, especially when working with paucibacillary samples containing potential reaction inhibitors

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 423010.pdf: 5093899 bytes, checksum: 94708bfc488359788a7d9860dabeeeb3 (MD5) Previous issue date: 2010-03-09 / Introdu??o: a busca de novos f?rmacos para o tratamento da asma al?rgica deve objetivar a preven??o prim?ria ? doen?a. Os produtos bacterianos parecem inibir a resposta inflamat?ria de forma potente, por?m o momento de exposi??o com maior efeito e seus mecanismos de a??o ainda n?o foram claramente identificados. Objetivo: estudar o efeito do extrato bacteriano OM-85 no desenvolvimento de resposta pulmonar al?rgica a ovalbumina em um modelo murino, avaliando particularmente o fator temporal da exposi??o. M?todos: camundongos BALB/c f?meas foram expostas a lisado bacteriano (OM-85) por gavagem em diferentes momentos da vida (neonatal e pr?-sensibiliza??o), com um grupo controle positivo e um negativo. Ap?s exposi??o ao OM-85, foram realizados contagem total de c?lulas e exame citol?gico diferencial no lavado broncoalveolar, e ensaio de peroxidase eosinof?lica (EPO) e an?lise histopatol?gica em tecido pulmonar. Resultados: o extrato bacteriano OM-85 n?o apresentou efeito inibidor da resposta pulmonar al?rgica em camundongos. No grupo com interven??o precoce, houve redu??o somente do n?mero de eosin?filos no lavado broncoalveolar (p=0,001). Os n?veis de EPO e as altera??es histopatol?gicas observadas nos tecidos pulmonares n?o foram diferentes entre os grupos. Conclus?o: A exposi??o ao extrato OM-85, no per?odo neonatal e pr?-sensibiliza??o na idade adulta, por via oral, n?o inibe a resposta pulmonar al?rgica em camundongos. Esse resultado n?o exclui a possibilidade de um efeito inibidor neste modelo com doses mais altas do OM-85 ou outras vias de administra??o.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 438704.pdf: 1089872 bytes, checksum: 26e9b82adb7d51a185543e38c2cdc8d2 (MD5) Previous issue date: 2011-12-20 / BACKGROUND: Due to meconium's obstructive effect on the airways and its inhibitory action over the surfactant system, treatment with bronchoalveolar lavage and surfactant replacement are currently under evaluation. OBJECTIVE: To evaluate, in an experimental model, the effect on the arterial blood gases and pulmonary mechanics of the treatment of meconium aspiration syndrome with exogenous surfactant, preceded or not of bronchoalveolar lavage with diluted surfactant in low volumes. DESIGN/METHODS: 21 newborn piglets were mechanically ventilated with predetermined settings. Meconium aspiration syndrome was induced by instillation of 5 ml/kg of meconium 20% diluted in isotonic saline, and afterwards the piglets were randomly allocated to: group I (n=7) - control; group II (n=7) - surfactant (Curosurf?) 200mg/kg; group III (n=7) - bronchoalveolar lavage with diluted surfactant 5mg/ml (15 ml/kg in 2ml aliquots), followed by a supplementary dose of surfactant 125mg/kg. Arterial blood gases, compliance, resistance, and tidal volume were measured five times at specific intervals during the six hours of the study. RESULTS: After instillation of meconium, before treatment, the PaO2 fell to a mean of 50mmHg and the PaCO2 increased to 76mmHg (no statistically difference among groups). Mean PaO2 (mmHg) in groups I, II and III were 72, 106 and 172 (p=0,01); 70, 95 and 198 (p<0.01); 79, 110 and 217 (p=0.01) at 30 minutes, 3 and 6 hours after treatment, respectively. Mean PaCO2 (mmHg) in Groups I, II and III were 81, 65 and 35 (p=0.01); 82, 59 and 37 (p=0.01); 82, 75 and 32 (p<0.01) at 30', 3 and 6 hours after treatment, respectively. Mean Compliance (ml/cmH2O) in Groups I, II, III were 0.76, 1.01 and 1.57 (p<0.05); 1.02, 0.69, e 1.79(p<0.05) at 30 minutes and 6 hours after treatment, respectively. Mean resistance (cmH2O/L/S) in Groups I, II, III were 422.57, 385.29 and 268.86 (p<0.05); 408.83, 564.86 e 248.43(p<0.05) at 30 minutes and 6 hours after treatment, respectively. CONCLUSIONS: Bronchoalveolar lavage with diluted surfactant, with low volumes and small aliquots, followed by a supplementary dose of surfactant, significantly improved arterial blood gases and pulmonary function measurements when compared to the administration of a single dose of surfactant in an experimental model of meconium aspiration syndrome. / INTRODU??O: devido ao efeito obstrutivo do mec?nio nas vias a?reas e a a??o inibit?ria sobre o sistema surfactante, o lavado broncoalveolar e a reposi??o de surfactante est?o sendo avaliados nos ?ltimos tempos para o tratamento da s?ndrome da aspira??o de mec?nio. OBJETIVO: Avaliar, em modelo experimental, o efeito sobre os gases sangu?neos arteriais e a mec?nica pulmonar do tratamento da s?ndrome de aspira??o de mec?nio grave com surfactante ex?geno, precedido ou n?o de lavado broncoalveolar com surfactante dilu?do em pequenos volumes. M?TODOS: 21 porcos rec?m-nascidos eram ventilados mecanicamente com par?metros respirat?rios predeterminados. Para induzir a s?ndrome de aspira??o de mec?nio foi instilado 5ml/kg de mec?nio dilu?do a 20% em solu??o salina isot?nica. Ap?s, os porcos foram randomizados em 3 grupos: grupo I (n=7) - controle; grupo II (n=7) - surfactante (Curosurf?) 200mg/kg; grupo III (n=7) - lavado broncoalveolar com surfactante dilu?do 5mg/ml (15ml/kg em al?quotas de 2ml) seguido de uma dose suplementar de surfactante 125mg/kg. Gases arteriais sangu?neos, complac?ncia, resist?ncia e volume corrente foram avaliados durante as 6 horas do estudo em 5 momentos espec?ficos. RESULTADOS: ap?s a instila??o de mec?nio, antes do tratamento, a PaO2 caiu para uma m?dia em torno de 50mmHg e a PaCO2 aumentou para uma m?dia em torno de 76mmHg, n?o havendo diferen?a significativa entre os grupos. Ap?s o tratamento a m?dia da PaO2(mmHg) nos grupos I, II e III aos 30 minutos, 3 e 6 horas foi de 72, 106 e 172 (p=0,01) - 70, 95 e 198 (p<0,01) e 79, 110 e 217 (p=0,01), respectivamente. A m?dia da PaCO2 (mmHg) nos grupos I, II e III foi 81, 65 e 35 (p=0,01) - 82, 59 e 37 (p=0,01) e 83, 75 e 33 (p<0,01), respectivamente. Ap?s o tratamento a m?dia da complac?ncia (ml/cmH2O) aos 30 minutos e 6 horas nos grupos I, II, III foi de 0,76, 1,01 e 1,57(p<0,05) e de 1,02, 0,69 e 1,79 (p<0,05), respectivamente. A m?dia da resist?ncia (cmH2O/L/S) nos grupos I, II e III foi de 422,57, 385,29 e 268,86(p<0,05) e de 408,83, 564,86 e 248,43 (p<0,05) aos 30 minutos e 6 horas, respectivamente. CONCLUS?O: o lavado broncoalveolar com surfactante dilu?do, com baixos volumes e pequenas al?quotas, seguido por uma dose suplementar de surfactante, melhorou significativamente os gases sangu?neos arteriais e a mec?nica pulmonar quando comparado com uma dose de surfactante sem lavado broncoalveolar e com um grupo controle, em um modelo experimental de s?ndrome de aspira??o de mec?nio.

Este trabalho teve por objetivo avaliar as alterações respiratórias e neurológicas resultantes da infecção por via intranasal das diferentes estirpes nacionais do herpesvírus equino tipo 1 (EHV-1) em hamsters comparando sua susceptibilidade com estudos sobre infecção do EHV-1 em camundongos e equinos. Para isso, hamsters sírios machos, três semanas de idade, foram infectados por via intranasal com as estirpes do EHV-1 obtidas a partir de fetos abortados e potro neonato infectados (A4/72, A9/92, A3/97 e Iso/72). Os animais foram pesados e examinados diariamente em busca de sinais clínicos e neurológicos. Conforme os sintomas neurológicos apareceram, grupos de cinco hamsters foram eutanasiados por overdose de isoflurano na primeira etapa do projeto, e, de cetamina/xilazina por via intraperitoneal na segunda etapa. Na necropsia, sistema nervoso central (SNC), pulmão, fígado, baço e timo foram coletados para isolamento viral em cultura de células E-dermal e para análise histopatológica. Na segunda etapa do projeto, a lavagem broncoalveolar (LBA) com 3 ml de PBS por hamsters foi realizada para determinar a resposta inflamatória pulmonar através da contagem total e diferencial de leucócitos. Similar aos experimentos com camundongos, hamsters desafiados com as estirpes virais A4/72 e A9/92 apresentaram manifestações clínicas severas no terceiro dia pós-inoculação (dpi), tais como perda de peso aguda, dispnéia, desidratação, decúbito e morte. Observou-se também sinais neurológicos como hiperexcitabilidade, paralisia, espasmos, perda de propriocepção, andar em círculos e convulsões. Ao contrário dos camundongos, que não desenvolveram a doença; hamsters inoculados com as estirpes virais A3/97 e Iso/72 manifestaram sintomas respiratórios e neurológicos agudos entre quarto e quinto dpi, sendo as alterações respiratórias as mais evidentes, principalmente hemoptise e conjuntivite. O isolamento do vírus a partir do SNC foi positivo em todos os animais infectados; no entanto, todas as amostras de pulmões foram positivas apenas nos grupos infectado pelas estirpes virais A9/92 e A4/72. Todas as estirpes do EHV-1 foram isoladas a partir do baço, no entanto, a partir do timo foram isoladas apenas as estirpes A9/92 e A4/72, e, de fígado somente a estirpe viral Iso/72 não foi isolada. No LBA, a contagem total de leucócitos não demonstrou diferenças de valores significativas entre os grupos experimentais, sendo apenas evidente a presença de eritrócitos, macrófagos e neutrófilos na maioria dos esfregaços dos hamsters infectados. Porém, na contagem diferencial de leucócitos observou-se um aumento significativo de neutrófilo com consequente diminuição significativa de macrófagos nos hamsters infectados pelas estirpes virais A3/97, Iso/72 e A4/72 quando comparados ao grupo controle. Os hamsters infectados pela estirpe viral A9/92 mantiveram valores próximos aos do grupo controle. Ao avaliar microscopicamente o SNC, fígado e pulmão dos hamsters infectados foi observado infiltrado inflamatório, necrose e manguito perivascular em SNC; leucocitose e necrose no parênquima hepático com discreta pericolangite e proliferação de ducto biliar; e em pulmão observou inflamação, necrose, edema e hemorragia em bronquíolos e alvéolos. Concluindo, os resultados apontaram o hamster como a espécie mais susceptível à infecção pelo EHV-1 servindo como um modelo experimental complementar para estudos de doenças respiratória e neurológica provocadas por este agente em equinos / This study aimed to evaluate the respiratory and neurological disorders resulting from intranasal infection with different national strains of equine herpesvirus type 1 (EHV-1) in hamsters comparing their susceptibility to studies about EHV-1 infection in mice and horses. Therefore, male Syrian hamsters, three weeks of age, were infected via intransal with EHV-1 strains obtained from aborted fetuses and neonatal foal infected (A4/72, A9/92, A3/97 and Iso/72). The animals were weighed and examined daily for clinical search and neurological signs. As neurological symptoms appeared five hamsters groups were euthanized by isoflurane overdose in the first stage of the project, and ketamine/xylazine via intraperitoneal in the second stage. At necropsy, central nervous system (CNS), lung, liver, spleen and thymus were collected for virus isolation in E-dermal cell culture and histopathological analysis. In the second stage of the project, bronchoalveolar lavage (BAL) with 3 ml of PBS per hamsters was performed to determine the pulmonary inflammatory response through the total and differential leukocyte count. Similar to the experiments with mice, hamsters challenged with viral strains A4/72 and A9/92 had severe clinical manifestations in the third day post-inoculation (dpi), such as acute weight loss, dyspnea, dehydration, recumbency, and death. It was also observed neurological signs such as hyperexcitability, paralysis, spasms, loss of proprioception, circling and convulsions. Unlike mice, which did not develop disease; hamsters inoculated with viral strains A3/97 and Iso/72 showed acute respiratory and neurological symptoms between fourth and fifth dpi, and the most evident respiratory distress was hemoptysis and conjunctivitis. The virus isolation from CNS was positive in all infected animals; however, all lung samples were positive only in groups infected by A9/92 and A4/72 viral strains. All EHV-1 strains were recovered from spleen, however, only A9/92 and A4/72 viral strains were recovered from thymus, but only Iso/72 viral strain was not recovered from liver. BAL total leukocyte count showed no significant differences in values between the experimental groups but the presence of erythrocytes, macrophages and neutrophils were evident in most smears of infected hamsters. However, in the leukocyte differential count it was observed a significant increase in neutrophils with consequent significant reduction of macrophages in hamsters infected by viral strains A3/97, Iso/72 and A9/92 when compared with the control group. Hamsters infected with the A9/92 viral strain maintained values similar to the control group. When evaluating microscopically the CNS, liver and lungs of infected hamsters it was observed inflammatory infiltrate, necrosis and perivascular cuff in CNS; leukocytosis and necrosis in the liver parenchyma with discrete pericholangitis and bile duct proliferation; and inflammation, necrosis, edema and hemorrhage in the bronchioles and alveoli. Concluding, the results showed the hamster as the most susceptible species to EHV-1 infection serving as a complementary experimental model for studies of respiratory and neurological diseases caused by this agent in horses