Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Flávia Lombardi Lopes / Banca: Alexandra Ivo Medeiros / Resumo: A Leishmaniose Visceral (LV) no homem é uma doença crônica e frequentemente fatal se não tratada. A doença possui alta taxa de mortalidade e a região de Araçatuba concentra grande número de casos no estado de São Paulo. A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) constitui um grave problema de Saúde Pública, pois os animais infectados são potentes transmissores do parasita para humanos pelo vetor flebotomínio. O cão é, portanto, um alvo importante nas medidas de controle. A progressão da infecção canina é acompanhada por falha na imunidade celular com redução de linfócitos circulantes e citocinas que suprimem a função dos macrófagos. A função da célula T na indução da resposta celular é determinante para a eliminação do parasita no interior dos macrófagos. Embora a supressão imunológica já esteja caracterizada, os fatores determinantes são pouco conhecidos. Recentes estudos mostraram que a regulação da função efetora dos macrófagos e células T parece depender de microRNAs (miRNAs). Existem muitas evidências da função dos miRNAs na regulação da expressão de proteínas que são fundamentais para o desenvolvimento, função e diferenciação de vários tipos celulares do sistema imunológico. Uma desregulação da atividade dos miRNAs está envolvida em diversas doenças, incluindo a LV. Na LVC, devido a supressão imunológica celular ser determinante para a progressão da doença, o conhecimento de miRNAs associados a regulação imunológica pode ser importante para a mudança do padrão de resposta. / Abstract: Visceral Leishmaniasis (VL) in humans is a chronic and often fatal disease if left untreated. The disease has high mortality rate, and the region of Araçatuba concentrates a large number of cases in São Paulo state. Canine VL (CVL) is a serious public health problem, because infected animals are potent transmitters of the parasite to humans by the vector phlebotomine. Therefore, dogs are important targets in the control measures. The progression of canine infection is accompanied by a failure of cellular immunity with reducing of circulating lymphocytes and cytokines that suppress the macrophage function. The role of T cells in the induction of cellular response is crucial to the elimination of the parasite in macrophages. Although immunosuppression is already characterized, the determining factors are not well known. In the last decade studies have shown that regulation of effector function of macrophages and T cells appears to depend on microRNAs (miRNAs). There are many evidences of function of miRNA in regulating of the expression of proteins that are primordial for the development, function and differentiation of various cell types of the immune system. A deregulation of miRNA expression is involved in a variety of disorders including VL. In CVL, due to cell immune suppression be determinant of disease progression, knowledge of miRNAs associated with immune regulation may be important for change the response pattern. / Mestre

Orientador: Adolorata Aparecida Bianco Carvalho / Coorientador: Ceres Berger Faraco / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Carlos Augusto Donini / Resumo: No Brasil, embora a raiva urbana esteja controlada na maioria dos estados, são elevados os números de tratamentos humanos pós-exposição. Isto preocupa, particularmente, o Ministério da Saúde, devido aos altos custos que essa ação acarreta. Por este motivo, o presente estudo teve como objetivo propor medidas de intervenção para a melhoria do atendimento a pessoas envolvidas em agravos com animais no Município de Jaboticabal, São Paulo, visando a redução do número de tratamentos antirrábicos humanos pós-exposição. Foram propostas, como ferramentas de intervenção no atendimento antirrábico, a ficha de referência de atendimento à agressão animal e a ficha de visita zoossanitária. Também foram realizadas visitas domiciliares com a finalidade de auxiliar nas investigações dos casos notificados e analisar o comportamento dos animais envolvidos. Entre os meses de setembro de 2012 e agosto de 2013, foram notificados 226 casos de agravos e realizadas 185 visitas. A espécie de maior participação nos agravos foi a canina (86%), seguida da felina (11,5%) e de outras espécies, como roedores, primatas e bovino (2,5%). Dos cães e gatos observados durante os 10 dias pós- acidente, 65,5% eram domiciliados, 57,5% vacinados contra a raiva e 88% permaneceram sadios ao final do período. As áreas anatômicas mais afetadas foram as mãos (40,5%) e os membros inferiores (34%). No total foram utilizadas 316 doses de vacina antirrábica. Com base nos dados das fichas e na análise das visitas zoossanitárias, constatou-se que 248 doses poderiam ter sido dispensadas, o que representa uma economia de mais de 3 mil dólares, somente considerado o custo com imunobiológicos no município de estudo; se fossem computados todos os gastos diretos e indiretos, este valor triplicaria. A inclusão da Análise de Conteúdo para interpretar as descrições feitas pelas vítimas sobre como os agravos ... / Abstract: In Brazil, although urban rabies is controlled in most states, the costs with human post-exposure prophylactic treatment are very high. This concerns particularly the Ministry of Health. Therefore, this study aimed propose strategic measures to improve the medical service to people involved with animals attacks, in Jaboticabal, São Paulo, reducing the number of rabies post-exposure treatments. Were used as tools, two new records, the record of Reference for Animal Aggression and the record of Zoossanitaries Visits. Home visits with the purpose of assisting in investigations of reported cases and analyze the behavior of the animals involved were also performed. Between the months of September 2012 and August 2013, 226 cases of injuries were reported and made 185 visits. The species of greatest interest in aggravations was the canine (86%), followed by feline (11,5%) and other species such as rodents, primates and cattle (2.5%). Dogs and cats observed during the 10 days after the accident, 65,5 % were domiciled, 57,5% vaccinated against rabies and 88% remained healthy until the end of the period. The anatomic areas most affected were hands (40,5%) and lower limbs (34%). In total 316 doses of rabies vaccine were used. Based on the data of the chips and analysis of animal health visits, it was found that 248 vaccines could have been dispensed, which represents a saving of over $3.000,00, only considered the cost immunobiological. If were computed all direct and indirect expenses, this number could triple. The inclusion of content analysis occurred, to interpret the descriptions given by the victims about how the injuries, allowed a more accurate assessment of the circumstances involved and the real reasons that led to aggression by animals. The project involved the public and the employees of the Health Department of the Municipality studied, seeking greater integration of medical and veterinary ... / Mestre

Orientador: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Banca: Alberto Consolaro / Banca: Luis Ronaldo Picosse / Banca: Edgard Franco Moraes Júnior / Resumo: A reabsorção óssea associada à perda dos dentes por vezes impossibilita a instalação imediata de implantes dentários. Nesta circunstância, pode ser necessária a reconstrução óssea prévia, realizada por meio de enxertos ósseos autógenos. A compreensão dos fenômenos iniciais da reparação dos enxertos é fundamental para favorecer sua consolidação clínica. Neste estudo, foram realizados enxertos ósseos autógenos em bloco ou em partículas na mandíbula de 6 cães, bilateralmente. Os leitos receptores foram preparados, os blocos foram rigidamente fixados e os enxertos em partículas foram adaptados e condensados. Três animais foram sacrificados após 7 dias e os outros 3, após 14 dias. Os espécimes foram submetidos a análise microscópica. Após 7 dias, os enxertos em bloco exibiram desvitalização, com canais vasculares vazios e interface enxerto-leito constituída por um tecido conjuntivo vascularizado e rico em fibras colágenas. As partículas, desvitalizadas, foram completamente envolvidas por tecido conjuntivo, com áreas de reabsorção osteoclástica. Aos 14 dias, os blocos já eram invadidos por canais de reabsorção, e os canais vasculares de Havers e Volkmann eram alargados e revascularizados junto ao leito. As partículas foram quase completamente reabsorvidas e o tecido conjuntivo circundante já exibia áreas de neoformação óssea. As perfurações do leito e a região adjacente ao parafuso de fixação foram sede de início de osteogênese. Os resultados mostraram que a reparação inicial dos enxertos em bloco caracteriza-se por lenta revascularização a partir do leito receptor, que requer alargamento dos canais vasculares préexistentes, enquanto as partículas são rapidamente reabsorvidas. / Abstract: Sometimes, bone resorption in association with loss of teeth makes it impossible to immediately perform dental implants. Under this circumstance, previous bone reconstruction would be necessary, through autogenous bone grafts. The understanding of the initial phenomena involved with bone grafting repair is fundamental for a clinical success. In this study, block or particulate autogenous bone grafts were placed bilaterally in mandibles of dogs. The host sites were prepared, the blocks rigidly fixated, and the particulate graft s were adapted and condensed. Three animals were sacrificed after 7 days, and the other 3, after 14 days. The samples were processed for microscopic analysis. After 7 days, the grafted blocks showed devitalization and empty vessel canals. The interface between the host site and the graft presented a vascularized connective tissue rich in collagen fibers. The grafted particles were devitalized and totally embedded in connective tissue. Areas of osteoclastic resorption were noticed in this group. At 14 days, resorption lacunae could be seen in the blocks. Harvers and Volkmann canals were elongated and revascularized at the host site. The particles had already been almost resorbed, and the surrounding connective tissue presented areas of new bone formation. The perforations of the host site and the region adjacent to the fixation screw represented areas where there was a beginning of osteogenesis. The results showed that the initial repair of block grafts was characterized by slow revascularization, starting from the host site, which required enlargement of pre-existing vascular canals. On the other hand, particulate bone grafts were rapidly resorbed and replaced by areas of forming bone. / Doutor

Orientador: Julio Carlos Canola / Banca: Áureo Evangelista Santana / Banca: Georgea Bignardi Jarretta / Resumo: No presente estudo foi analisado o parênquima hepático com características homogêneas e ecogenicidade difusa reduzida (G1), aumentada (G2) e normal (G3), em relação ao perfil dos animais, dimensão do fígado e achado bioquímico e hematológico. Amostras de sangue obtidas por punção venosa da jugular ou da cefálica do antebraço foram encaminhadas para realização de hemograma e dosagem sérica de ALT, FA, proteínas totais, albumina, globulina, uréia e creatinina. Dos 30 cães que compuseram o G1, 30 (100%) apresentaram evidência das paredes portais e da vesícula biliar, 23 (76,67%) fígado com dimensão preservada e bordos em ângulos agudos, 15 (50%) faixa etária entre 1 e 6 anos de idade e 8 (26,67%) eram da raça lhasa apso. Não houve predisposição quanto ao sexo, assim como não foram identificadas alterações significativas nos exames bioquímicos e hematológicos dos cães do G1. Quanto aos diagnósticos clínicos atribuídos para estes cães, houve maior prevalência de gastrinterite (43,33%). Dos 30 cães do G2, 27 animais (90%) apresentaram hepatomegalia e arredondamento dos bordos hepáticos, 18 (60%) tinham idade superior a 9 anos, 16 (53,33%) eram fêmeas e 9 (30%) eram da raça poodle. Houve elevação da atividade sérica de FA e elevação de ALT, redução nos níveis de proteínas séricas totais, albumina, globulinas, eritrócitos e volume globular, além de leucocitose por neutrofilia, com desvio à esquerda, eosinopenia, linfopenia e monocitose nos cães do G2. Neste grupo houve prevalência de doenças metabólicas (54%), como diabetes mellitus e hiperadrenocorticismo, além das hepatopatias crônicas (17%), atribuídas ao uso contínuo e prolongado de corticóide e drogas anticonvulsivantes. Dos 30 cães do grupo controle (G3), 22 (73,33%) apresentaram... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study evaluated the liver with homogeneous parenchyma in dogs, with diffuse reduced echogenicity (G1), increased echogenicity (G2) and normal echogenicity (G3) by ultrasound examination associating the findings on animal profile, liver size and hematology and biochemistry results. Blood samples obtained by cephalic or jugular venipunture were submitted for hemogram and ALT, ALP, total proteins, albumin, globulin, urea and creatinine analysis. Among the 30 dogs in G1, 30 (100%) presented portal venous and gall bladder wall clarity, 23 (76.67%) presented normal liver size and edges, 15 (50%) were from 1 to 6 years old and 8 (26.67%) belonged to the lhasa apso breed. No predispositions were found according to gender, as well as no significant alterations in biochemical and hematological exams were observed in G1. The most prevalent disease found in this group was gastroenteritis (43.33%). Among the 30 dogs in G2, 27 (90%) presented hepatomegaly and rounded hepatic edges, 18 (60%) were over 9 years old, 16 (53.33%) were female and 9 (30%) belonged to the poodle breed. The laboratorial findings related to this group were increased ALT and ALP serum activity, decreased levels of total protein, albumin, globulin, erythrocytes and hematocrit, as well as leukocytosis with neutrophilia and a left shift, eosinopenia, lymphopenia and monocytosis. The most prevalent diseases found in this group were metabolic disorders (54%), such as diabetes mellitus and hyperadrenocorticism, and chronic hepatopathies (17%) due to prolonged and continuous use of corticoid and anticonvulsive drugs. Among the 30 dogs in the control group (G3), normal liver size and edges were presented in 22 (73.33%). In this group, no alterations were seen in laboratorial exams. / Mestre

Orientador: José Luiz Laus / Banca: Fabricio Vilella Mamede / Banca: Paola Castro Moraes / Resumo: A pesquisa foi desenvolvida visando-se a se avaliarem alterações nas dimensões de estruturas do bulbo de olho de cães da raça cocker spaniel inglês, machos e fêmeas, com e sem catarata, à ultrasonografia transcorneal nos modos A e B. Dezesseis pacientes (n = 16, 32 olhos, 10 machos, 6 fêmeas) com catarata e idade superior a 8 anos e um grupo controle sem catarata (n =7, 14 olhos, 2 manchos, 5 fêmeas) foram avaliados. Realizou-se ultrasonografia transcorneal nos modos A e B com transdutor de 10 MHz. Os dados referentes à ecobiometria, foram avaliados estatisticamente ao teste ANOVA de via única e os resultados expressos em média e desvio padrão (±DP). A incidência de catarata entre gênero foi avaliada estatisticamente ao teste de Fisher's. O comprimento axial do bulbo do olho dos pacientes com catarata e dos do grupo controle respectivamente, foi de 19.909 ± 1,103 mm; 19,958 ± 1,050mm. Para a câmara anterior, encontraram-se 3,041 ± 0,828 mm; 3,373 ± 1,040mm, respectivamente. Para o diâmetro lenticular foram de 6,817 ± 1,117 mm; 7,062 ± 0,477mm, respectivamente, e para o segmento posterior foram 10,056 ± 0,754mm; 9,523 ± 0,705mm. Não se encontraram diferenças significativas entre olhos com catarata e os controles, tampouco entre machos e fêmeas com e sem catarata. Tampouco foi encontrada diferença em quanto à incidência das cataratas entre ambos os sexos (P > 0.05). / Abstract: The present study was conceived to evaluate A- and B-mode ultrasonographic changes in the thickness of various structures of the eyeball in male and female English Cocker Spaniel dogs with and without cataracts. Sixteen dogs with cataracts (36 eyes, 10 males, 6 females), and seven normal dogs (14 eyes, 2 males, 5 females) older than eight years were selected. A- and B-mode ultrasonography was performed with a 10 MHz transducer. Echobiometry values were evaluated statistically by one way ANOVA. Incidence of cataract among gender was assessed by Fisher's excat test. Mean and standard deviations of various ocular structures for dogs with and without cataracts were, respectively, anterior chamber: 3.041 ± 0.828 mm, 3.373 ± 1.040 mm; lens: 6.817 ± 1.117 mm, 7.062 ± 0.477 mm; vitreous: 10.056 ± 0.754 mm, 9.523 ± 0.705 mm; and axial length: 19.909 ± 1.103 mm; 19.958 ± 1.050 mm. Ocular measurements between right and left eyes, males and females, as well as in eyes with and without cataract were not significantly different. Incidence between gender were not significantly (P > 0.05). / Mestre

Resumo: Com o objetivo de caracterizar pelo método histológico e imunoistoquimíco o câncer de mama de cadelas sem raça definida (SRD) foram estudados 40 animais com distribuição uniforme nos estágios I, II, III e IV da doença. Todos os animais foram submetidos a anamnese, exame físico e complementares (Citopatológico, Raio x, Ultra Som) para o estadiamento clínico do câncer (TNMc), amostra histológica da lesão para caracterização do tipo de tumor e amostra imunoistoquímica para determinação molecular das células em apoptose (caspase 3) e proliferação (PCNA). A amostra foi caracterizada com predominância de idade acima de seis anos (92,5%), obesos (57,5%) com ingestão de dieta mista (80%) caseira-industrial. 80% das cadelas já tiveram cria, apresentando pseudogestação (40%), tumoração das mamas inguinais (70%), em ambas as cadeias, com nódulos multicêntricos (82,5%) de incidência bilateral (60%), prevalecendo nódulos de tamanho inferior a 2cm de diâmetro (37,5%). Prevaleceu o carcinoma simples (70%) em relação ao carcinoma complexo (30%). Os animais com carcinoma simples apresentaram características de porte grande (50%), obesidade (57%), cios regulares (89%) e multíparas (82%) e prevalência idêntica entre os estadiamentos clínico (70%). O estadio mais grave (IV) esteve associado aos animais com idade média de 8 anos, ausência de obesidade (60%). A imunomarcação de PCNA e caspase-3 não apresentou diferença significativa entre os tipos de tumor, suas características clínicas e grau histológico, no entanto a caspase-3 teve associação significativa entre o estadiamento clínico (I<III e II<III) e presença de ulceração tumoral (P<0,049) / Abstract: The severity of breast cancer in mongrel animals is not defined yet in its clinical, histologic and imunoistoquimical associative aspects. With the aim to establish that characterization we studied 40 bitches, 3-15 years old, mixed breed attended at the U. Vet. Hospital ambulatories in compliance with current ethical and pathological rules. The animals were alloted according to their clinical stage in groups stage I, II, III and IV with 10 animals each. After physical examination and lifestyle records. The tumor nodules were evaluated macro-and-microscopically, the later through histopathologicaly and imunoistopathologicaly. From these data the animals were classified as predominantly up to six years old (92,5%), obese (57,5%), presenting simple carcinoma (CS) more frequent (70%) than complex carcinoma type (30%). 80% of the animals wasanþt nuliparus, showing pseudopregnancies (40%), having multicentric nodules (82,5%) sizing less than two cm diameter (37,5%), located inguinally (70%) in both side mammary chains. The immunohistochemistry label for PCNA and caspase-3 were not associated with tumors type, clinical aspects and histological grade, however only caspase-3 had significant association with clinical stage (I<III and II<III) and tumors ulceration (P<0,049) / Orientador: Enio Pedone Bandarra / Coorientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Luiz Henrique do Araujo Machado / Banca: Paulo César Maiorka / Banca: Andrigo Barbosa de Nardi / Doutor

Made available in DSpace on 2014-03-18T17:13:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 carla_honse_ipec_mest_2008.pdf: 692967 bytes, checksum: eadada79ac6bb425b22a8acdfd310d3a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013-11-21 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Foram estudados 35 cães adultos, sem raça definida, divididos em 2 grupos: LVC (leishmaniose visceral canina; n=11) e CNCP (cães negativos em cultura parasitológica; n=24). Um terceiro grupo (sadio, n=18) foi utilizado como parâmetro de referência dos testes de coagulação sanguínea. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de alterações hemostáticas em cães naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi provenientes de inquéritos sorológicos para LVC realizados pela Secretaria Municipal de Saúde do Rio de Janeiro. A hemostasia primária foi avaliada através da contagem de plaquetas e mensuração do tempo de sangramento; a hemostasia secundária, através da mensuração dos tempos de protrombina e tromboplastina parcial ativada; e a fibrinólise, através da detecção dos produtos de degradação da fibrina em teste de aglutinação em látex Adicionalmente, foram realizados o hemograma e detecção de anticorpos contra Ehrlichia canis e Borrelia burgdorferi e antígenos de Dirofilaria immitis de todos os animais. De acordo com os resultados obtidos, não foi observada diferença significativa (p>0,05) entre o grupo LVC e o grupo CNCP, ainda que ambos apresentassem alterações na hemostasia primária, secundária e/ou fibrinólise. Em virtude da co-infecção de alguns animais do grupo LVC por Ehrlichia canis, não foi possível atribuir as alterações encontradas exclusivamente ao agente Leishmania (Leishmania) chagasi, sendo necessária a realização de novos estudos para melhor compreensão sobre a patogenia desta doença / Thirty five adult mongrel dogs were divided into two groups: CVL (canine visceral leishmaniasis; n=11) and DNPC (dogs with negative parasitological culture; n=24). A third group (healthy, n=18) was used as a reference in the coagulation tests. The purpose of this study was to evaluate the occurrence of haemostatic changes in dogs naturally infected by Leishmania (Leishmania) chagasi from the VL serological surveys done by Secretaria Municipal de Saúde do Rio de Janeiro. The primary haemostasis was evaluated by the platelet count and measurement of the bleeding time; the secondary haemostasis was evaluated through the measurement of the prothrombin time and the activated parcial thromboplastin time; and the fibrinolysis through the detection of the fibrin degradation products by latex agglutination test. In addition to that, the blood count and detection of antibodies against Ehrlichia canis and Borrelia burgdorferi , as well as antigens of Dirofilaria immitis were carried out in all the animals. According to the results, no significant difference (p>0,05) was observed among the CVL group and DNPC group, even though both presented changes in the primary and secondary haemostasis and/or the fibrinolysis. Due to the co-infection of some animals from the CVL group by Ehrlichia canis , it was not possible to attribute the alterations to agent Leishmania (Leishmania) chagasi exclusively. Hence, further studies are necessary for a better comprehension of the pathogeny of the disease.

REIS, A. C. M. Fatores de virulência e produção de biofilme de Bacteroides fragilis isolados da microbiota intestinal de cães. 2013. 87 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Carolinda Oliveira (ppgmm@ufc.br) on 2017-07-27T12:53:54Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_acmreis.pdf: 83159321 bytes, checksum: 8a4f3a15527a5e48751e49ec6d7dbc42 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-07-27T15:17:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_acmreis.pdf: 83159321 bytes, checksum: 8a4f3a15527a5e48751e49ec6d7dbc42 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-27T15:17:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_acmreis.pdf: 83159321 bytes, checksum: 8a4f3a15527a5e48751e49ec6d7dbc42 (MD5) Previous issue date: 2013-01-08 / Bacteroides fragilis is part of the fecal microbiota of animals, yet it is the most pathogenic species of the genus Bacteroides. The transformation these microrganisms commensals in pathogens agents is mainly due to its virulence factors. This microorganism has been isolated from several infections in dogs. Considering the pathogenic potential of B. fragilis and its importance in veterinary medicine, this study was designed to evaluate the virulence factors and biofilm formation of Bacteroides fragilis isolated from fecal samples from dogs. The samples used in this study were collected at the Veterinary Clinic of the State University of Ceará and processed at the Laboratory of Bacteriology of the Federal University of Ceará. Were phenotypically analyzed the virulence factors (production of hemolysins and hemagglutinins, hydrophobicity, the presence of the enzyme β-lactamase and capsule) and biofilm production of 13 strains of B. fragilis. To determine the pattern of sensitivity to clindamycin, metronidazole, chloramphenicol and penicillin was used in agar dilution technique. In vitro assays for detection of biofilms were performed by the methods Congo Red agar and Accession in microplates. All strains of B. fragilis showed capsule and produced no haemolysis. Regarding the production of hemagglutinin, 38% of the strains showed hemagglutination when used canine blood and 15% in human blood (A+). Of the strains studied, 7% had a cell surface hydrophobic. In total, 61% of the strains showed β-lactamase test positive. As regards the production of biofilm was observed by the method of strokes that 12 (92.3%) of the biofilm producers were isolated by the method and Adhesion microplates, it was found that eight (61.5%) strains were able to produce biofilm. All isolates were susceptible to metronidazole and resistant to penicillin and chloramphenicol. The rate of clindamycin resistance was 69.2%. This study showed that species B. fragilis isolated from normal canine microflora showed major virulence factors for pathogenicity, they possess the ability to form biofilms and show a high rate of resistance to clindamycin. / Bacteroides fragilis faz parte da microbiota fecal de animais, contudo é a espécie mais patogênica do gênero Bacteroides. A sua transformação de um microrganismo comensal para agente patogênico deve-se principalmente aos seus fatores de virulência. Este micro-organismo tem sido isolado de diversas infecções em cães. Considerando o potencial patogênico de B. fragilis e sua importância na medicina veterinária, o presente trabalho foi elaborado com o objetivo de avaliar os fatores de virulência e formação de biofilme de Bacteroides fragilis isolados de amostras fecais de cães. As amostras utilizadas neste estudo foram coletadas na Clinica Veterinária da Universidade Estadual do Ceará (UECE) e processadas no Laboratório de Bacteriologia da Universidade Federal do Ceará (UFC). Foram analisadas fenotipicamente os fatores de virulência (produção de hemolisinas e hemaglutininas, hidrofobicidade, presença da enzima - lactamase e cápsula) e produção de biofilme de 13 cepas da espécie B. fragilis. Para determinação do perfil de sensibilidade a clindamicina, metronidazol, cloranfenicol e penicilina foi utilizada a técnica de diluição em Agar. Os ensaios in vitro para detecção de biofilme foram realizados pelos métodos Agar Vermelho Congo (AVC) e Adesão em microplacas. Todas as cepas de B. fragilis apresentaram cápsula e não produziram hemólise. Com relação à produção de hemaglutininas, 38% das cepas são capazes de aglutinar sangue canino e 15% em sangue humano (A+). Das cepas estudadas, 7% apresentaram uma superfície celular hidrofóbica. No total, 61% das cepas produziram teste da - lactamase positivo. Quanto a produção de biofilme, foi observado pelo método do AVC que 12 (92,3%) dos isolados eram produtores de biofilme e por meio do método de Adesão em Microplacas, verificou-se que 8 (61,5%) cepas foram capazes de produzir biofilme. Todos os isolados foram sensíveis ao metronidazol e cloranfenicol e resistentes à penicilina. A taxa de resistência à clindamicina foi de 69,2%. Esse estudo mostrou que espécies de B. fragilis isolados da microbiota normal de cães apresentaram fatores de virulência importantes para sua patogenicidade, possuem a capacidade de formar biofilme e demonstram uma alta taxa de resistência a clindamicina.

Made available in DSpace on 2014-09-05T18:31:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 69296.pdf: 2396150 bytes, checksum: 6453587a423516cefeb368c7db601724 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-05T15:56:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 isabele_santos_ipec_dout_2011.pdf: 2396150 bytes, checksum: 6453587a423516cefeb368c7db601724 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2014-09-05 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Pesquisa Clínica Evandro Chagas, Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose é uma doença infecto-parasitária que acomete seres humanos e animais, causada por protozoários do gênero Leishmania. As leishmanioses são importante problema de saúde pública em vários países e estão incluídas entre as seis endemias de maior relevância mundial. Classicamente a leishmaniose visceral canina (LVC) se caracteriza por caquexia progressiva, anemia, febre intermitente, linfadenomegalia generalizada, sinais oculares (conjuntivite, ceratoconjuntivite, uveite) e lesões cutâneas (dermatite exfoliativa, úlceras e alopecia). Para a confirmação do diagnóstico da LVC, é necessária a demonstração do agente etiológico nas amostras biológicas obtidas de lesões, aspirados de fígado, baço, medula óssea, pele íntegra ou de gânglios linfáticos. O presente estudo avaliou os exames citopatológico, histopatológico, imunohistoquímico e imunocitoquímico no diagnóstico da LVC, utilizando como padrão de referência a cultura parasitológica. Oitenta e um cães foram avaliados, foram incluídos no estudo 44 cães com isolamento em cultura parasitológica e caracterização de Leishmania (Leishmania) chagasi, isolada a partir de amostras de pele íntegra da orelha e/ou baço e/ ou lesão cutânea. Os cães foram submetidos à eutanásia e posteriormente a coleta de amostras biológicas para a realização do exame citopatológico (CP), exame histopatológico (HP), reação de imunocitoquímica (ICQ) e reação de imuno-histoquímica (IHQ). A maioria dos cães era do sexo masculino (61,3%; n=27) Treze cães (29,5%) foram provenientes do município do Rio de Janeiro e 70,5% (n=31) do município de Bauru-SP. A maioria dos cães apresentava bom estado geral (47,7%; n=21); 38,6% (n=17) estado geral ruim; 11,3% (n=5) estado geral regular. A presença de lesão cutânea foi observada em 11 (25%) animais. No CP foi possível à visualização de formas amastigotas em 29,5% (n=13) de raspados da escápula, 29,5% (n=13) de raspados da orelha; em 29.5% (n=13) de raspados do focinho; 45,5% (n=20) nos aspirados de medula óssea, 25% (n=11) nos aspirados de linfonodo cervical e 52,7% (n=23) nos aspirados do linfonodo poplíteo. No HP formas amastigotas foram observadas em 45,5% (n=20) de amostras de pele íntegra da escápula, 65,9% (n=29) do focinho e 52,3% (n=23) da orelha. Na ICQ formas amastigotas foram observadas em 47,8% (n=21) das amostras provenientes de pele íntegra da escápula, 68,2% (n=30) pele íntegra do focinho; 56,8% (n=25) pele íntegra da orelha; 63,6% (n=28) nos aspirados de medula óssea, 36,7% (n=16) nos aspirados de linfonodo cervical e 68,2% (n=30) nos aspirados do linfonodo poplíteo. Na IHQ formas amastigotas foram observadas em 52,3% (n=23) das amostras provenientes de pele íntegra da escápula, 88,6% (n=39) do focinho e 72,7% (n=31) da orelha. A IHQ dos fragmentos de pele íntegra do focinho apresentou maior sensibilidade quando comparado com CP e de raspados de pele íntegra da orelha, focinho, escápula e de lesões cutâneas e de aspirados de linfonodos e medula óssea e ao HP dos fragmentos de pele íntegra da escápula, do focinho e da orelha. A boa sensibilidade da IHQ em amostras biológicas obtidas de fragmentos de pele íntegra do focinho sugere a utilização desta técnica no diagnóstico parasitológico da leishmaniose canina, apesar do custo mais elevado, quando comparada ao CP e ao HP / Leishmaniasis is a parasitic infectious disease caused by pr otozoa of the genus Leishmania, that affects humans and animals. In many countries Leishmaniasis are important public health problem and are included among the six world's most significant endemic diseases. According to literature canine visceral leishmaniasis (CVL) is usuall y characterized by progressive emaciation, anemia, intermittent fever, generalized lymphadenopathy, eye signs (conjunctivitis, keratitis, uveitis) and skin lesions (exfoliative dermatitis, alopecia and ulcers). To grant CVL diagnosis, the identification o f the etiologic agent in biological samples obtained from lesions is primal. S ampling can be obtained from aspirates of liver, spleen, bone marrow, intact skin or lymph nodes. The aim of this study was to compare the cytopathological, histopathological, im munohistochemical and immunocytochemical diagnosis of leishmaniasis in dogs, using as reference the standard parasitological culture. Forty - four dogs with parasitological culture isolation and characterization of Leishmania (Leishmania) chagasi isolated an d from samples of intact skin of the ear and / or spleen and / or skin lesion, were included in the study. Subsequently the animals were euthanized and collection of biological samples for citopahatol ogy test (CP), histopathology ( H P ), immunocytochemistry (ICC) and immunohistochemistry (IHC). Most dogs were male (61.3%, n = 27). Thirteen dogs (29.5%) were from Rio de Janeiro and 70.5% (n = 31) from Bauru, Brazil. There were 47.7%, ( n = 21) intact dogs, 38.6% (n = 17) dogs in poor general health condition and 11.3% (n = 5) in regular general health state. S kin lesions were observed in 11 (25%) animals. In the C P was possible to identify the amastigotes in 29.5% (n = 13) from scapula scrapings, 29.5% (n = 13) of ear scrapings, 29.5% (n = 13) from snouts scra pings, 45.5% (n = 20) in bone marrow aspirates, 25% (n = 11) in cervical lymph node aspirates and 52.7% (n = 23) in the popliteal lymph node aspirates. In H P amastigotes were detected in 45.5% (n = 20) samples of shoulders , 65.9% (n = 29) snout and 52.3% ( n = 23) the ear healthy skin. In ICQ amastigotes were observed in 47.8% (n = 21) samples from shoulder intact skin, 68.2% (n = 30) intact snout skin, 56.8% (n = 25) intact ear skin , 63.6% (n = 28) in bone marrow aspirates, 36.7% (n = 16) in cervical lymph node aspirates and 68.2% (n = 30) in the popliteal lymph node aspirates. In IHC amastigotes were placed in 52.3% (n = 23) samples from shoulder healthy skin, 88.6% (n = 39) of snout and 72.7% (n = 31) of the ear. IHC from fragments of intact snout skin sho wed higher sensitivity when compared with CP and shaved intact skin of the ear, nose, scapula and skin lesions and lymph node aspirates and bone mar row and also compared with the H P fragments of intact shoulder skin, muzzle and ear . The good sensitivity o f IHC in biological samples obtained from fragments of intact snout skin suggests the use of this technique in parasitological diagnosis for canine leishmaniasis, despite th e higher cost compared to the CP and HP

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Belo Horizonte, MG, Brasil / No Novo Mundo, as leishmanioses constituem um grupo de doenças negligenciadas, com alta prevalência mundial e que podem assumir formas graves. Elas são transmitidas ao homem pela picada de flebotomíneos, existindo uma gama de reservatórios, sendo o cão o principal hospedeiro urbano. Neste contexto, as leishmanioses, principalmente a forma visceral zoonótica, tem se urbanizado no Brasil e em várias partes do mundo. O objetivo do presente trabalho foi estudar alguns aspectos epidemiológicos das leishmanioses e o conhecimento da população sobre a doença no município de Formiga, MG. Estes aspectos se referem principalmente à fauna flebotomínica e à infecção canina. Para se conhecer a fauna flebotomínica, foram realizadas coletas sistemáticas mensais entre maio 2012 e abril 2013 utilizando armadilhas luminosas HP em 24 peridomicílios. Os exemplares foram identificados e sua densidade relacionada a fatores climáticos e ambientais. O estudo da frequência da leishmaniose canina foi realizado através da coleta de sangue de 570 cães e posterior análise sorológica (DPP® e ELISA) e molecular (LnPCR). As amostras positivas no LnPCR foram submetidas ao sequenciamento e PCR-RFLP a fim de determinar a espécie de Leishmania. Todos os locais de captura entomológica e os endereços dos cães positivos foram georreferenciados sobre a malha urbana do município e correlacionados aos casos humanos e a fatores ambientais locais. A população foi entrevistada a partir de um questionário quantitativo validado que abordou conceitos relevantes sobre a doença e sobre as condições do peridomicílio. Foram capturados 224 flebotomíneos de 10 espécies diferentes, sendo Lutzomyia longipalpis (35,3%), Lutzomyia cortelezzii (33,5%) e Lutzomyia whitmani (18,3%) as mais abundantes. Foi observada correlação estatisticamente significativa (p<0,05) entre a densidade total de flebotomíneos e a precipitação e temperatura. Em relação aos cães, a taxa de infecção encontrada, considerando os testes sorológicos e o molecular, foi de 19,1%. O sequenciamento e a PCR-RFLP permitiram identificar as espécies Leishmania infantum e Leishmania braziliensis infectando os cães. As análises espaciais demonstraram que L. whitmani (99,8%) se concentra nas proximidades de extensas áreas verdes e em distâncias de até 200m da vegetação. Lutzomyia longipalpis está mais associado à rede hidrográfica, se concentrando, principalmente, nas faixas distantes até 400m de um curso d’água. Para o município, flebotomíneos, cães positivos e casos humanos estão geograficamente relacionados, embora com pouca sobreposição de suas áreas de ocorrência. O estudo sobre o conhecimento da população revelou que os moradores de Formiga desconhecem completamente a doença (93%) e que 95% deles estão sob algum fator de risco. A existência de flebotomíneos comprovadamente vetores de leishmaniose visceral e tegumentar associado ao fato de existirem cães infectados com espécies, tanto dermotrópicas quanto viscerotrópicas do parasito, sugerem que no município está ocorrendo um ciclo de transmissão de leishmanioses visceral. Além disso, pode ocorrer um possível surgimento de casos humanos de leishmaniose tegumentar. Dessa forma, fica evidente que medidas de vigilância e controle precisam ser urgentemente estabelecidas na cidade para se evitar a dispersão e os óbitos por leishmaniose na região. / Leishmaniases in the New World are neglected diseases with high prevalence worldwide and may assume severe forms. They are transmitted to humans by the bite of sand flies and exhibit a range of wild and domestic reservoirs including the dog as the main urban host. In this context, especially zoonotic visceral leishmaniasis form has urbanized in Brazil and around the world. The aim of this work was to study some epidemiological aspects of leishmaniasis and the population’s knowledge about the disease in Formiga, Minas Gerais State. Those aspects are mainly related to the phlebotomine fauna and canine infection. To determine the sand fly fauna, monthly systematic collections were performed between May 2012 and April 2013 using HP light traps in 24 peridomicile. Specimens were identified and their density related to climatic and environmental conditions. The study of the frequency of canine leishmaniasis was performed by collecting blood samples from 570 dogs and subsequent serologic (DPP and ELISA) and molecular (LnPCR) analysis. The LnPCR positive samples were subjected to sequencing and PCR-RFLP to determine the Leishmania species. All the entomological capture sites and addresses of positive dogs were georeferenced on the urban grid of the city and correlated to human cases and local environmental factors. The population was interviewed using a validated quantitative questionnaire addressing relevant concepts about the disease and the conditions of the peridomicily. Two hundred twenty-four phlebotomines from 10 different species were captured, where Lutzomyia longipalpis (35.3%), Lutzomyia cortelezzii (33.5%) and Lutzomyia whitmani (18.3%) were the most abundant. Statistically significant correlation (p <0.05) was observed between total sandfly density and precipitation and temperature. Regarding the dogs, the rate of infection found by considering the serologic and molecular assays was 19.1%. Sequencing and PCR-RFLP allowed the identification of the species Leishmania infantum and Leishmania braziliensis infecting dogs. The spatial analysis showed that L. whitmani (99.8%) is concentrated close to green areas and up to a distance of 200m from vegetation. Lutzomyia longipalpis is most associated with the hydrographic network, concentrating mainly on the distances up to 400m alongside the water. For the Formiga city, phlebotomines, positive dogs and human cases are geographically related, although poor overlap of their occurrence areas has been observed. The study on the knowledge of the population revealed that the residents of Formiga are completely unaware of the disease (93%) and that 95% of them are under some risk factor. The existence of proven sandflies vectors of visceral and tegumentary leishmaniasis and the existence of infected dogs - with both dermotrophic as visceral species - suggest that the city is experiencing a cycle of transmission of visceral leishmaniasis. Besides, the city may be also iin risk of an outbreak of tegumentary human cases. It is clear that surveillance and control measures need to be urgently established in the town to avoid dispersion and deaths per leishmaniasis in the region.