Introdução: O esôfago de Barrett é uma condição associada ao refluxo gastroesofágico e que predispõe ao surgimento de displasia e adenocarcinoma. Durante a endoscopia digestiva alta, a suspeita do esôfago de Barrett ocorre quando projeções de epitélio colunar são visualizados acima da junção esofagogástrica, e o diagnóstico somente é confirmado quando biópsias neste epitélio demonstram a presença de metaplasia intestinal. A metaplasia intestinal é definida pela observação de células caliciformes (goblet cells) à coloração de hematoxilina/eosina e com positividade para alcian blue ph 2,5. Entretanto, um tipo muito freqüente de células, as chamadas células colunares azuis (columnar blue cells), podem ser observadas durante o exame histológico. Estas células têm a aparência de células colunares gástricas à hematoxilina/eosina, mas ao contrário destas, coram-se positivamente com alcian blue. Alguns autores consideram que estas células podem representar um estágio transicional entre célula colunar e célula caliciforme. Porém, quando estão presentes, e na ausência de células caliciformes, não são consideradas para a definição do diagnóstico de esôfago de Barrett. Estudos recentes têm sugerido que certos padrões de expressão das citoqueratinas 7 e 20 podem ser usados como fator diferencial entre metaplasia intestinal do esôfago e da cárdia. Porém, a expressão destas citoqueratinas nas células colunares azuis ainda não foi caracterizada. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão imunohistoquímica das citoqueratinas 7 e 20 nas células caliciformes e nas células colunares azuis em pacientes com suspeita endoscópica de Esôfago de Barrett. Métodos: Após pesquisa nos arquivos de laudos endoscópicos e histopatológicos do Hospital de Clínicas de Porto Alegre, oitenta e seis casos, constituídos de biópsias oriundas de pacientes com suspeita de Esôfago de Barrett na endoscopia digestiva alta, foram incluídos no estudo. As lâminas coradas pela hematoxilina/eosina e alcian blue foram revisadas para identificação de células caliciformes e células colunares azuis, e posteriormente submetidos à técnica de imunohistoquímica para CK7 e CK20. Resultados: Células caliciformes estiveram presentes em 76 casos e células colunares azuis em 50 casos. O resultado da reatividade de cada citoqueratina demonstrou que a CK7 apresentou expressão em 77,3% dos casos com células caliciformes e em 86% daqueles com células colunares azuis (p=0,25), enquanto que a CK20 apresentou expressão nas células caliciformes em 89,3% e 62% nas células colunares azuis (p<0,001). Na análise da expressão conjunta destas citoqueratinas, o padrão CK7(+)/CK20(+) foi o mais freqüente em ambas células (p=0,19). Conclusões: A reatividade imunohistoquímica da CK7 e CK20 nas células colunares azuis e nas células caliciformes apresentam algumas características semelhantes, sugerindo que a célula colunar azul pode representar um estágio de transição para célula caliciforme, porém são necessários estudos comparativos com outros marcadores relacionados à diferenciação celular do epitélio metaplásico do EB para validar esta hipótese.

Introdução: O esôfago de Barrett é uma condição associada ao refluxo gastroesofágico e que predispõe ao surgimento de displasia e adenocarcinoma. Durante a endoscopia digestiva alta, a suspeita do esôfago de Barrett ocorre quando projeções de epitélio colunar são visualizados acima da junção esofagogástrica, e o diagnóstico somente é confirmado quando biópsias neste epitélio demonstram a presença de metaplasia intestinal. A metaplasia intestinal é definida pela observação de células caliciformes (goblet cells) à coloração de hematoxilina/eosina e com positividade para alcian blue ph 2,5. Entretanto, um tipo muito freqüente de células, as chamadas células colunares azuis (columnar blue cells), podem ser observadas durante o exame histológico. Estas células têm a aparência de células colunares gástricas à hematoxilina/eosina, mas ao contrário destas, coram-se positivamente com alcian blue. Alguns autores consideram que estas células podem representar um estágio transicional entre célula colunar e célula caliciforme. Porém, quando estão presentes, e na ausência de células caliciformes, não são consideradas para a definição do diagnóstico de esôfago de Barrett. Estudos recentes têm sugerido que certos padrões de expressão das citoqueratinas 7 e 20 podem ser usados como fator diferencial entre metaplasia intestinal do esôfago e da cárdia. Porém, a expressão destas citoqueratinas nas células colunares azuis ainda não foi caracterizada. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão imunohistoquímica das citoqueratinas 7 e 20 nas células caliciformes e nas células colunares azuis em pacientes com suspeita endoscópica de Esôfago de Barrett. Métodos: Após pesquisa nos arquivos de laudos endoscópicos e histopatológicos do Hospital de Clínicas de Porto Alegre, oitenta e seis casos, constituídos de biópsias oriundas de pacientes com suspeita de Esôfago de Barrett na endoscopia digestiva alta, foram incluídos no estudo. As lâminas coradas pela hematoxilina/eosina e alcian blue foram revisadas para identificação de células caliciformes e células colunares azuis, e posteriormente submetidos à técnica de imunohistoquímica para CK7 e CK20. Resultados: Células caliciformes estiveram presentes em 76 casos e células colunares azuis em 50 casos. O resultado da reatividade de cada citoqueratina demonstrou que a CK7 apresentou expressão em 77,3% dos casos com células caliciformes e em 86% daqueles com células colunares azuis (p=0,25), enquanto que a CK20 apresentou expressão nas células caliciformes em 89,3% e 62% nas células colunares azuis (p<0,001). Na análise da expressão conjunta destas citoqueratinas, o padrão CK7(+)/CK20(+) foi o mais freqüente em ambas células (p=0,19). Conclusões: A reatividade imunohistoquímica da CK7 e CK20 nas células colunares azuis e nas células caliciformes apresentam algumas características semelhantes, sugerindo que a célula colunar azul pode representar um estágio de transição para célula caliciforme, porém são necessários estudos comparativos com outros marcadores relacionados à diferenciação celular do epitélio metaplásico do EB para validar esta hipótese.

Introdução: O esôfago de Barrett é uma condição associada ao refluxo gastroesofágico e que predispõe ao surgimento de displasia e adenocarcinoma. Durante a endoscopia digestiva alta, a suspeita do esôfago de Barrett ocorre quando projeções de epitélio colunar são visualizados acima da junção esofagogástrica, e o diagnóstico somente é confirmado quando biópsias neste epitélio demonstram a presença de metaplasia intestinal. A metaplasia intestinal é definida pela observação de células caliciformes (goblet cells) à coloração de hematoxilina/eosina e com positividade para alcian blue ph 2,5. Entretanto, um tipo muito freqüente de células, as chamadas células colunares azuis (columnar blue cells), podem ser observadas durante o exame histológico. Estas células têm a aparência de células colunares gástricas à hematoxilina/eosina, mas ao contrário destas, coram-se positivamente com alcian blue. Alguns autores consideram que estas células podem representar um estágio transicional entre célula colunar e célula caliciforme. Porém, quando estão presentes, e na ausência de células caliciformes, não são consideradas para a definição do diagnóstico de esôfago de Barrett. Estudos recentes têm sugerido que certos padrões de expressão das citoqueratinas 7 e 20 podem ser usados como fator diferencial entre metaplasia intestinal do esôfago e da cárdia. Porém, a expressão destas citoqueratinas nas células colunares azuis ainda não foi caracterizada. O objetivo deste estudo foi investigar a expressão imunohistoquímica das citoqueratinas 7 e 20 nas células caliciformes e nas células colunares azuis em pacientes com suspeita endoscópica de Esôfago de Barrett. Métodos: Após pesquisa nos arquivos de laudos endoscópicos e histopatológicos do Hospital de Clínicas de Porto Alegre, oitenta e seis casos, constituídos de biópsias oriundas de pacientes com suspeita de Esôfago de Barrett na endoscopia digestiva alta, foram incluídos no estudo. As lâminas coradas pela hematoxilina/eosina e alcian blue foram revisadas para identificação de células caliciformes e células colunares azuis, e posteriormente submetidos à técnica de imunohistoquímica para CK7 e CK20. Resultados: Células caliciformes estiveram presentes em 76 casos e células colunares azuis em 50 casos. O resultado da reatividade de cada citoqueratina demonstrou que a CK7 apresentou expressão em 77,3% dos casos com células caliciformes e em 86% daqueles com células colunares azuis (p=0,25), enquanto que a CK20 apresentou expressão nas células caliciformes em 89,3% e 62% nas células colunares azuis (p<0,001). Na análise da expressão conjunta destas citoqueratinas, o padrão CK7(+)/CK20(+) foi o mais freqüente em ambas células (p=0,19). Conclusões: A reatividade imunohistoquímica da CK7 e CK20 nas células colunares azuis e nas células caliciformes apresentam algumas características semelhantes, sugerindo que a célula colunar azul pode representar um estágio de transição para célula caliciforme, porém são necessários estudos comparativos com outros marcadores relacionados à diferenciação celular do epitélio metaplásico do EB para validar esta hipótese.

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2003 / Inclui bibliografias / Este estudo teve por objetivo comparar a eficácia (por meio da observação de hifas e/ou pseudohifas) de dois métodos citológicos no diagnóstico de candidose bucal: a Citologia Esfoliativa em Base-Líquida (CEBL) e a Citologia Esfoliativa Convencional (CEC)

Orientador: Paola Castro Moraes / Coorientador: Sérgio Britto Garcia / Banca: Pâmela Rodrigues Reina Moreira / Banca: Annelise Carla Camplesi / Resumo: Devido ao aumento da expectativa de vida dos animais de estimação, o aparecimento de neoplasias tem se tornado uma importante afecção na Medicina Veterinária. As neoplasias gastrointestinais de cães são pouco diagnosticadas e sua etiologia é desconhecida. As localizações mais frequentes são o jejuno, cólon e reto. Objetivou-se avaliar a Cox-2 por meio de imunohistoquímica e a intensidade de PAS positivo nas amostras de intestinos de cães saudáveis (GS) e com neoplasia (GN). As neoplasias foram classificadas por análise histopatológica. As diferenças foram significativas quando P<0.05 (testes não paramétricos). Nas amostras neoplásicas observou-se imunodetecção acentuada de COX-2, quando comparadas aos cães saudáveis, com diferenças significativas entre os grupos. O mesmo ocorreu para a intensidade de PAS, onde se observou diminuição do número de células caliciformes e aumento na produção de muco nas amostras neoplásicas, enquanto nas amostras saudáveis observou-se marcação intensa nas células caliciformes. Com isso pode-se concluir que a COX está envolvida na capacidade do tumor evadir as defesas do sistema imunológico. Apesar da relação entre o processo inflamatório, mais especificamente o papel das prostaglandinas, e o desenvolvimento e propagação tumoral ser bastante claro, ainda muito se têm a ser esclarecido. / Abstract: Due to the increase in the life expectancy of the pets, the appearance of neoplasias has become an important affection in the Veterinary Medicine. Gastrointestinal neoplasms of dogs are poorly diagnosed and their etiology is unknown. The most frequent locations are jejunum, colon and rectum. The objective of this study was to evaluate Cox-2 by means of immunohistochemistry and the positive PAS intensity in intestinal samples from healthy dogs (GS) and neoplasia (GN). The neoplasms were classified by histopathological analysis. The differences were significant when P <0.05 (non-parametric tests). In the neoplastic samples, marked COX-2 immunodetection was observed when compared to healthy dogs, with significant differences between groups. The same was observed for PAS intensity, where a decrease in the number of goblet cells and an increase in the mucus production were observed in the neoplastic samples, while in the healthy samples intense marking was observed in the goblet cells. With this we can conclude that COX is involved in the ability of the tumor to evade the defenses of the immune system. Although the relationship between the inflammatory process, more specifically the role of prostaglandins, and tumor development and propagation is very clear, much remains to be elucidated. / Mestre

Pten est une protéine qui possède des activités lipides phosphatases et tyrosines phosphatases. Certaines de ses fonctions semblent être indépendantes de son activité phosphatase, mais simplement dû à ses interactions protéiques. Des mutations de Pten sont associées à plusieurs syndromes présentant des hamartomes et un risque accru de cancer tel le syndrome de Cowden. La perte d'un seul allèle de Pten entraîne la formation d'hyperplasie et de dysplasie du tractus gastro-intestinal ainsi que de nombreuses tumeurs. Cependant, les rôles de Pten exclusivement au sein de l'épithélium intestinale ne sont pas connus. Nos travaux ont révélé qu'une mutation de Pten exclusivement à l'épithélium intestinal n'est pas suffisante pour induire une tumorigénèse de l'intestin et que lorsque l'on amorce la tumorigénène avec une mutation dans la voie de Wnt, Pten n'entraîne pas d'avancement de la tumorigénène mais une exacerbation du phénotype. Dans l'épithélium intestinal, Pten se révèle être essentiel à la maturation des cellules de Paneth et des cellules caliciformes. Pten entraîne également une modification des cellules des sous populations endocriniennes de l'intestin. Ces dernières semblent être suractivées par la perte de Pten . Le métabolisme du glucose en est d'ailleurs altéré, nous constatons une absorption intestinale plus rapide du glucose avec une disparition sanguine accélérée par la perte de Pten. Nos résultats ont permis de voir que la perte de Pten au niveau de l'épithélium intestinal avait un impact sur l'expression des protéines des jonctions serrées et adhérentes et que certaines modifications des protéines de jonction sont probablement responsable des fusions et fissions des villosités intestinales. Il est probable même que cette modification soit responsable des quelques hamartomes observés dans les souris mutantes pour Pten et pour le phénotype général dés hamartomes dans les syndromes associé à la perte de Pten . Une délétion épithéliale de Pten a un impact important sur les cellules subépithéliales, entraînant une modification des populations cellulaires. Il y a également augmentation des plaques de Peyer et des facteurs associés à la formation des plaques de Peyer. En conclusion Pten , au sein de l'épithélium dans les modèles murins, est important pour la maturation et la différenciation des cellules de l'ensemble de l'intestin. La délétion de Pten influence le métabolisme du glucose dans l'organisme. Il aurait également une influence sur l'accumulation de cellules lymphocytaires dans l'intestin. Finalement, la perte de Pten n'induit pas la tumorigénèse, mais exacerbe le phénotype de celle déjà initiée.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do colostro bovino liofilizado (CBL), utilizado como fonte parcial da dieta protéica, sobre as características histológicas do epitélio intestinal de juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus) e dourado (Salminus brasiliensis). Os juvenis foram distribuídos num delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 3x2. Foram utilizadas dietas com três níveis de inclusão de CBL (0%, 10% e 20%) e dois períodos experimentais (30 e 60 dias), oferecidas duas vezes ao dia até a saciedade aparente. Para o estudo histológico, o intestino foi dividido em três segmentos, S1, S2 e reto para pacu e S1, S2 e intestino posterior para dourado. Foram avaliadas a espessura da camada muscular; o volume parcial da mucosa absortiva (Vv); o número das células caliciformes contendo mucinas ácidas e neutras e totais, e os subtipos ácidas - sialomucinas e sufomucinas. Nos juvenis de pacu, a inclusão de 20% de CBL alterou a distribuição das células caliciformes contendo as mucinas ácidas, neutras e totais, os subtipos sialomucinas e sulfomucinas, e a espessura da camada muscular, enquanto o Vv foi afetado apenas pelo período experimental. Nos juvenis de dourados, efeito de período experimental foi observado para células caliciformes contendo mucinas ácidas, neutras e totais e os subtipos sialomucinas e sulfomucinas, espessura da camada muscular e Vv. A adição de 10% de CBL afetou apenas o Vv no segmento S1. Considerando os aspectos avaliados no presente estudo, a presença do colostro bovino liofilizado na dieta influenciou, no período estudado, as características histológicas entéricas de juvenis de pacu, enquanto que nos juvenis de dourado influencia desta secreção láctea não foi observada. / The aim of this study was to evaluate the effect of lyophilized bovine colostrum (LBC), used as partial source of protein in the diet, on the histological characteristics of the intestinal epithelium of juvenile pacu (Piaractus mesopotamicus) and juvenile dourado (Salminus brasiliensis). Juveniles were distributed in a completely randomized design in a factorial scheme 3x2. Three diets were used with different levels of LBC inclusion (0%, 10% and 20%) and two experimental periods (30 and 60 days) offered twice daily until apparent satiation. For the histological study, the intestine was divided into three segments, S1, S2 and rectum to the pacu and S1, S2 and posterior intestine to the dourado. The muscle layer thickness; the mucosal absorptive volume (Vv); the number of goblet cells containing acidic and neutral mucins and the acidic subtypes - sialomucin and sulphomucin were evaluated. In juvenile pacu, the inclusion of 20% of LBC changed the distribution of goblet cells containing acidic, neutral and total mucins, the subtypes sialomucins and sulphomucins, and the thickness of the muscle layer, while the Vv was affected only by the experimental period. In juvenile dourado, effect of experimental period was observed for goblet cells containing acidic, neutral and total mucins and subtypes sialomucins, sulphomucins, thickness of muscle layer and Vv. The addition of 10% of LBC affected only Vv in the segment S1. Considering the aspects studied, the presence of lyophilized bovine colostrum in the diet influenced, in the period studied, the enteric histological characteristics of juvenile pacu, while the juvenile dourado influence of this lacteal secretion was not observed.

Les Hedgehogs (Hhs) sont des morphogènes indispensables au développement et à l'homéostasie de l'organisme, notamment dans la formation de l'intestin. La littérature y révèle l'importance d'Indian Hh dans le contrôle de la prolifération, de la différenciation des entérocytes et dans l'attraction des cellules immunitaires. Par contre, sa délétion ne récapitule pas l'inhibition de la voie Hh, soulevant ainsi l'hypothèse que Sonic Hh aurait des rôles complémentaires dans l'intestin. Nous avons donc voulu identifier les implications de Shh dans l'histologie, la prolifération et la différenciation de l'épithélium intestinal chez la souris adulte. Pour ce faire, nous avons utilisé le système de délétion conditionnelle Cre/loxP afin d'abolir l'expression de Shh au niveau de l'épithélium de l'intestin et du côlon, à l'aide du promoteur de la Villine . Des traitements au DSS sur 7 jours ont permis de simuler une colite ulcéreuse (CU) chez les animaux afin d'étudier les maladies inflammatoires intestinales (MII). Aucune anomalie histologique n'a été observée par coloration H&E, mais l'axe crypte-villosité était réduit de 16%. Une immunofluorescence dirigée contre PCNA relie ce résultat avec une réduction de 24% du nombre de cellules prolifératives dans l'iléon. Ensuite, Shh ne serait pas impliqué dans la différenciation des entérocytes et des cellules entéroendocrines, contrairement à Ihh. Par contre, les observations montrent une diminution de l'expression de Klf4 en qPCR et un défaut dans l'ultrastructure des vésicules de sécrétion des cellules caliciformes en microscopie électronique. La production des mucines acides et leur fucosylation sont aussi affectées par coloration. Il en résulte un défaut dans la sécrétion de la bicouche de mucus procurant une défense physique. Ensuite, une diminution de l'expression de Sox9 et de la taille des granules dans les cellules de Paneth est observée en absence de Shh. Une diminution de l'autophagie, associée à un réticulum endoplasmique relâché, semble être à la base de ce phénotype en immunobuvardage. Il en résulte un défaut dans la production des agents antimicrobiens, tels que le lysozyme et les a-défensines, en qPCR, suggérant un possible défaut dans la défense antimicrobienne. Bien que les altérations de la barrière intestinale laissent supposer un rôle dans l'inflammation, les souris expérimentales soumises au traitement DSS suggèrent que Shh ne module pas le développement de la CU mais pourrait avoir un rôle dans les étapes de restitution. Finalement, le niveau d'expression des effecteurs Hhs en qPCR lors des Mn et de la CU chez les souris de type sauvage révèle qu'Ihh et Glil sont fortement réduits dans ces pathologies. Les résultats obtenus démontrent que Shh et Ihh ont des rôles distincts dans l'intestin. Shh semble influencer positivement la prolifération et participe à la différenciation terminale des cellules caliciformes et de Paneth ainsi que dans le processus d'autophagie. Ensemble, les Hhs sont essentiels à l'homéostasie et sont impliqués dans la pathologie des MII.

Submitted by Fernanda Faquim Dos Santos (ferfachin@yahoo.com.br) on 2018-06-01T23:44:34Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO FERNANDA F.SANTOS.pdf: 1996897 bytes, checksum: 3f600e1895c2f870f15395cb5de30a1a (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-06-05T18:33:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_ff_me_jabo.pdf: 1996897 bytes, checksum: 3f600e1895c2f870f15395cb5de30a1a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-05T18:33:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_ff_me_jabo.pdf: 1996897 bytes, checksum: 3f600e1895c2f870f15395cb5de30a1a (MD5) Previous issue date: 2018-05-07 / Devido ao aumento da expectativa de vida dos animais de estimação, o aparecimento de neoplasias tem se tornado uma importante afecção na Medicina Veterinária. As neoplasias gastrointestinais de cães são pouco diagnosticadas e sua etiologia é desconhecida. As localizações mais frequentes são o jejuno, cólon e reto. Objetivou-se avaliar a Cox-2 por meio de imunohistoquímica e a intensidade de PAS positivo nas amostras de intestinos de cães saudáveis (GS) e com neoplasia (GN). As neoplasias foram classificadas por análise histopatológica. As diferenças foram significativas quando P<0.05 (testes não paramétricos). Nas amostras neoplásicas observou-se imunodetecção acentuada de COX-2, quando comparadas aos cães saudáveis, com diferenças significativas entre os grupos. O mesmo ocorreu para a intensidade de PAS, onde se observou diminuição do número de células caliciformes e aumento na produção de muco nas amostras neoplásicas, enquanto nas amostras saudáveis observou-se marcação intensa nas células caliciformes. Com isso pode-se concluir que a COX está envolvida na capacidade do tumor evadir as defesas do sistema imunológico. Apesar da relação entre o processo inflamatório, mais especificamente o papel das prostaglandinas, e o desenvolvimento e propagação tumoral ser bastante claro, ainda muito se têm a ser esclarecido. / Due to the increase in the life expectancy of the pets, the appearance of neoplasias has become an important affection in the Veterinary Medicine. Gastrointestinal neoplasms of dogs are poorly diagnosed and their etiology is unknown. The most frequent locations are jejunum, colon and rectum. The objective of this study was to evaluate Cox-2 by means of immunohistochemistry and the positive PAS intensity in intestinal samples from healthy dogs (GS) and neoplasia (GN). The neoplasms were classified by histopathological analysis. The differences were significant when P <0.05 (non-parametric tests). In the neoplastic samples, marked COX-2 immunodetection was observed when compared to healthy dogs, with significant differences between groups. The same was observed for PAS intensity, where a decrease in the number of goblet cells and an increase in the mucus production were observed in the neoplastic samples, while in the healthy samples intense marking was observed in the goblet cells. With this we can conclude that COX is involved in the ability of the tumor to evade the defenses of the immune system. Although the relationship between the inflammatory process, more specifically the role of prostaglandins, and tumor development and propagation is very clear, much remains to be elucidated.

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2003 / Inclui bibliografias / A citologia em base líquida é um aperfeiçoamento da citologia esfoliativa convencional, porém o uso desta tecnologia dentro da odontologia ainda é pequeno. Este trabalho teve por objetivo avaliar a citologia em base líquida em relação à citologia convenci