A Ciclosporina A (CsA) faz parte de um grupo de oligopeptidios cíclicos e hidrofóbicos, produzida naturalmente por fungos. Este composto além de ser um potente imunossupressor pode também apresentar uma série de outros efeitos fisiológicos como atividade antiinflamatória e antialérgica, ou mesmo efeitos anti fúngicos e antiparasitários. Partimos de uma genoteca genômica de L. (L.) major cepa Friedlin A1 (LmFA1) construída no cosmídio cLHYG, que teve o seu DNA transfectado em promastigotas para em seguida as células serem submetidas aos experimentos de superexpressão gênica em presença de concentrações crescentes de CsA. Foram selecionados dois loci capazes de conferir resistência a CsA. Um desses loci (contendo cerca de 30 - 40 kb) foi mapeado e caracterizado após análises do perfil de digestão com diferentes enzimas de restrição, e da transfecção de algumas deleções em células LmFA1, que após amplificação gênica, foram submetidas a testes funcionais em presença de CsA. Apesar de valores baixos dos índices de resistência obtidos com os testes funcionais, foi possível identificar nesse locus um gene que após seqüenciamento parcial de nucleotídeos e análises comparativas no banco genômico de leishmânia, revelou a presença de uma fase aberta de leitura contendo 1 844 aminoácidos que codifica para uma proteína de membrana pertencente a família das transportadoras ABC e que parece estar relacionada com a resistência a CsA. Essa proteína, denominada LmABC-CR1, possui alta identidade com uma transportadora ABC de L. (L.) tropica (95,5%), e baixa identidade (27,2%) com uma outra transportadora ABC de LmFA1 isolada por nosso grupo e relacionada com a resistência a Pentamidiana (PRP1). A análise molecular dos DNAs das espécies, L. (L.) amazonensis, L. (V.) braziliensis, L. (L.), chagasi e L. (L.) major demonstrou um relativo polimorfismo do gene LmABC-CR1 nestas espécies. O papel dessa nova proteína na resistência a CsA frente a diferentes espécies de leishmânia deverá ser melhor estudado / Cyclosporin A (CsA) is a cyclic hydrophobic oligopeptide naturally produced by fungus. Besides this drug is usually known as a potent immunosupressor, it also presents a couple of other physiologic activities as anti-inflammatory, anti-allergic, or even acting as fungicidal and anti-parasitic. Starting from an L. (L.) major Friedlin A1 (LmFA1) genomic library constructed into the cLHYG shuttle vector, DNA was transfected on promastigotes, and cells submitted to over expression in the presence of increasing concentrations of CsA. Two loci were selected capable to render cells CsA resistance after transfection.One of those loci (containing about 30 - 40 kb) was mapped after analyses of the restriction enzymes pattern, and characterized by transfection of its deletions in LmFA1 cells, which after gene amplification, were submitted to functional tests in the presence of CsA. In spite of low of resistance indexes values after functional tests, it was possible to identify a gene that after partial nucleotides sequencing and comparison with leishmania genomic bank data indicated the presence of an open reading containing 1 844 amino acids codifying a membrane protein from the ABC transporter family that seems to be related with CsA resistance (LmABC-CR1). LmABC-CR1 presents high identity (95,5%) with a L. (L.) tropica ABC transporter protein, and low identity (27,2%) with another LmFA1 ABC transporter (PRP1) isolated by us, and related with Pentamidine resistance. Southern blot analysis with L. (L.) amazonensis, L. (V.) braziliensis, L. (L.), chagasi and L. (L.) major genomic DNA shown a relative polymorphism of LmABC-CR1 gene in this species. The role of this new protein on the CsA resistance in leishmania species should be further studied

Níveis sangüíneos de ciclosporina A (CSA) que minimizam a rejeição celular aguda (RCA) no transplante renal com o menor efeito tóxico vêm sendo o alvo de recentes pesquisas. A escolha de terapia imunossupressora com várias drogas permite o uso de doses mais baixas e com menores efeitos colaterais. Níveis de CSA necessários para evitar RCA podem variar com diferentes esquemas terapêuticos. Este estudo prospectivo realizado em um único centro avaliou a eficácia e segurança de dois diferentes níveis sangüíneos de CSA através da área sob a curva de doze horas (AUC 0-12). Cinqüenta e oito receptores de transplante renal foram randomizados para dois grupos, 25 para o grupo AUC0-12 alta (9000-11000 ng.h/mL) e 33 para o grupo AUC0-12 baixa (5000-7000 ng.h/mL). Após a introdução da CSA, a AUC foi avaliada nos dias 4, 7, 14, 21, 28, 42, 56, 70, 84 e 90. Os grupos foram comparáveis em idade, sexo, cor, tipo de doador, uso de indução e outras drogas imunossupressoras. Não houve diferença estatística na incidência de RCA. Foi realizada análise dos pacientes que apresentaram RCA em comparação com os pacientes livres de RCA. A análise de regressão logística mostrou que é necessária uma AUC 0-12 >- 9500 ng.h/mL com especificidade de 84% e sensibilidade de 76%, AUC 0-4 4000 ng.h/mL com especificidade de 91% e sensibilidade de 84% e C2 (concentração sangüínea na segunda hora pós- 6 dose) com especificidade de 92% e sensibilidade de 84% >- 1450 ng/ml, para predizer ausência de RCA. Quando utilizada terapia de indução, níveis mais baixos de AUC0-12, AUC0-4 e C2 (8160 3636 ng.h/ml, 3146 +- 262 ng.h/ml, 1043 +- 151 ng/mL, respectivamente) foram necessários para evitar RCA, em relação aos pacientes que não rejeitaram e não receberam indução (11072 +- 3809 ng.h/ml, 5403 +- 1782 ng.h/ml e 1816 +- 151ng/mL, respectivamente). Esses dados confirmam a necessidade de altos níves de CSA, na ausencia de indução para prevenção de RCA nos três primeiros meses pós-transplante renal e, o emprego de indução permite que níveis sangüíneos mais baixos de CSA sejam empregados com o intuito de prevenir RCA nos primeiros 90 dias após transplante renal / Multiple-drug therapy allows the use of lower doses with fewer side effects. Cyclosporin A (CSA) levels necessary to avoid rejection may vary with different drug combinations. To address this issue, fifty-eight kidney transplant recipients were randomized into two groups: 25 patients to the twelve-hour area under the curve (AUC0-12) high arm (9000-11000 ng.h/mL) and 33 to the AUC0-12 low arm (5000-7000 ng.h/mL). After CSA introduction, AUC0-12 was measured at days 4, 7, 14, 21, 28, 42, 56, 70, 84, and 90. The two groups were comparable regarding age, gender, race, donor type, induction therapy and other immunosuppressive drugs. There was no significant difference in the rate of acute cellular rejection episodes between the two groups. A retrospective analysis was carried out comparing rejectors to non-rejectors, related to induction therapy status. Logistic regression analysis revealed that an AUC0-12 >- 9000 ng.h/mL or AUC0-4 >-4000ng.h/mL or two-hour post-dose cyclosporin level (C2) of >- 1450 ng/mL predicted a rejection-free course. Lower levels of C2 and AUC 0-4 (1043 +-151 ng/mL and 3146 +- 262ng/mL, respectively) were required in non-rejecting patients when induction therapy was used

Este estudo teve como objetivo avaliar longitudinalmente a incidência e severidade do crescimento gengival (CG) induzido por agentes imunossupressores, tacrolimus (Tcr) e ciclosporina-A (CsA), na ausência de bloqueadores de canal cálcio, em indivíduos transplantados renais. Foram avaliados 49 sujeitos transplantados renais, divididos em: grupo CsA (n=25) e grupo Tcr (n=24). Os indivíduos foram avaliados em quatro momentos: prétransplante, 30, 90 e 180 dias após o transplante renal. Os dados demográficos, parâmetros clínicos (IP, JEC-MG, PCS, NCI, SS e ICG) foram coletados em todos os momentos. A média do índice de crescimento gengival (ICG) foi significativamente menor no grupo Tcr comparado com grupo CsA após 30 dias (p=0,03), 90 dias (p=0,004) e 180 dias (p=0,01) de terapia imunossupressora. Decorridos 180 dias após o transplante renal, o crescimento gengival clinicamente significante foi observado em 20% dos sujeitos do grupo CsA e 8,3% dos sujeitos grupo Tcr. Porém, essa diferença não foi estatisticamente significante (p = 0,41). Para os parâmetros clínicos periodontais houve uma redução, em relação ao tempo de terapia imunossupressora, para o IP e SS (p<0,001) em ambos os grupos. Apesar de não apresentar diferença estatística na incidência do crescimento gengival clinicamente significante após 180 dias de terapia imunossupressora, observou-se que para o grupo Tcr o crescimento gengival ocorreu de forma mais tardia e a severidade do crescimento gengival nos pacientes que faziam uso do Tcr foi menor que nos pacientes que faziam uso da CsA. / The aim of this study was to make a longitudinal evaluation of the incidence and severity of gingival overgrowth (GO) induced by immunosuppressive agents, such as tacrolimus (Tcr) and cyclosporin A (CsA), in the absence of calcium channel blockers, in renal transplant patients. This longitudinal study was conducted with 49 renal transplant patients, who were divided into: CsA group (n=25) and Tcr group (n=24). The individuals were assessed at four time intervals: before transplant, 30, 90 and 180 days after the renal transplant. The demographic data, clinical parameters (PI, CEJ-GM, PD, CAL, BOP and GOI) were collected at all times intervals. The gingival overgrowth index mean was significantly lower in Tcr group compared with CsA group after 30 days (p=0.03), 90 days (p=0.004) and 180 days (p=0.01) of immunosuppressive therapy. One hundred and eighty days after the renal transplant, clinically significant gingival overgrowth was observed in 20.0% of the individuals in CsA group and 8.3% of the individuals in Tcr group. However, this difference was not statistically significant (p = 0.41). There was a reduction of the periodontal clinical parameters as regards the time of immunosuppressive therapy for PI and BOP (p <0.001) in both groups. Although there was no statistical difference in the incidence of clinically significant gingival overgrowth after 180 days of immunosuppressive therapy, it was observed that for the Tcr group gingival overgrowth occurred later and the severity of gingival overgrowth in this group was lower than in patients who used CsA.

Este estudo teve como objetivo avaliar longitudinalmente a incidência e severidade do crescimento gengival (CG) induzido por agentes imunossupressores, tacrolimus (Tcr) e ciclosporina-A (CsA), na ausência de bloqueadores de canal cálcio, em indivíduos transplantados renais. Foram avaliados 49 sujeitos transplantados renais, divididos em: grupo CsA (n=25) e grupo Tcr (n=24). Os indivíduos foram avaliados em quatro momentos: prétransplante, 30, 90 e 180 dias após o transplante renal. Os dados demográficos, parâmetros clínicos (IP, JEC-MG, PCS, NCI, SS e ICG) foram coletados em todos os momentos. A média do índice de crescimento gengival (ICG) foi significativamente menor no grupo Tcr comparado com grupo CsA após 30 dias (p=0,03), 90 dias (p=0,004) e 180 dias (p=0,01) de terapia imunossupressora. Decorridos 180 dias após o transplante renal, o crescimento gengival clinicamente significante foi observado em 20% dos sujeitos do grupo CsA e 8,3% dos sujeitos grupo Tcr. Porém, essa diferença não foi estatisticamente significante (p = 0,41). Para os parâmetros clínicos periodontais houve uma redução, em relação ao tempo de terapia imunossupressora, para o IP e SS (p<0,001) em ambos os grupos. Apesar de não apresentar diferença estatística na incidência do crescimento gengival clinicamente significante após 180 dias de terapia imunossupressora, observou-se que para o grupo Tcr o crescimento gengival ocorreu de forma mais tardia e a severidade do crescimento gengival nos pacientes que faziam uso do Tcr foi menor que nos pacientes que faziam uso da CsA. / The aim of this study was to make a longitudinal evaluation of the incidence and severity of gingival overgrowth (GO) induced by immunosuppressive agents, such as tacrolimus (Tcr) and cyclosporin A (CsA), in the absence of calcium channel blockers, in renal transplant patients. This longitudinal study was conducted with 49 renal transplant patients, who were divided into: CsA group (n=25) and Tcr group (n=24). The individuals were assessed at four time intervals: before transplant, 30, 90 and 180 days after the renal transplant. The demographic data, clinical parameters (PI, CEJ-GM, PD, CAL, BOP and GOI) were collected at all times intervals. The gingival overgrowth index mean was significantly lower in Tcr group compared with CsA group after 30 days (p=0.03), 90 days (p=0.004) and 180 days (p=0.01) of immunosuppressive therapy. One hundred and eighty days after the renal transplant, clinically significant gingival overgrowth was observed in 20.0% of the individuals in CsA group and 8.3% of the individuals in Tcr group. However, this difference was not statistically significant (p = 0.41). There was a reduction of the periodontal clinical parameters as regards the time of immunosuppressive therapy for PI and BOP (p <0.001) in both groups. Although there was no statistical difference in the incidence of clinically significant gingival overgrowth after 180 days of immunosuppressive therapy, it was observed that for the Tcr group gingival overgrowth occurred later and the severity of gingival overgrowth in this group was lower than in patients who used CsA.

Este estudo teve como objetivos avaliar a ocorrência de crescimento gengival derivado da administração de duas drogas imunossupressoras ciclosporina-A (CsA) e tacrolimus, em indivíduos transplantados renais, e verificar as possíveis alterações dos parâmetros clínicos periodontais (IP, JEC-MG, PCS, NCI e SS) após o início da terapia imunossupressora. Foram avaliados dois grupos: grupo CsA que consistiu de 20 indivíduos que receberam o protocolo de imunossupressão composto por ciclosporina-A e o grupo tacrolimus que consistiu de 20 indivíduos que receberam tacrolimus. Ambos os grupos foram avaliados em três momentos: momento prétransplante , 30 dias após o transplante renal (momento 30 dias) e 90 dias após o transplante renal (momento 90 dias). Em todas as avaliações foram registrados os seguintes parâmetros clínicos: distância da junção esmalte-cemento à margem gengival (JEC-MG), profundidade clínica de sondagem (PCS), nível clínico de inserção (NCI), sangramento à sondagem (SS), índice de placa (IP) e índice de crescimento gengival (ICG). Foi observada redução significante do IP, em ambos os grupos, entre o momento pré-transplante e o momento 90 dias, mas não houve diferença significante entre os grupos nos três momentos avaliados. Com relação ao SS, foi observado no grupo tacrolimus uma redução significante entre o momento pré-transplante e o momento 30 dias (p=0,001) e entre o momento pré-transplante e o momento 90 dias (p<0,001). Também não houve diferença significante entre os grupos nos momentos avaliados. Não foi encontrada diferença significante entre os grupos com relação à JEC-MG e PCS nos três momentos. Quanto ao NCI, houve diferença significante entre os momentos pré-transplante e 30 dias (p=0,015), e entre os momentos pré-transplante e 90 dias (p=0,03), independentemente do grupo. Com relação ao ICG, foi observado no grupo CsA diferença significante entre os momentos pré-transplante e 30 dias (p<0,001), pré-transplante e 90 dias (p<0,001) e entre 30 dias e 90 dias. No grupo tacrolimus, foi observada diferença significativa no ICG entre os momentos pré-transplante e 90 dias (p=0,007) e entre 30 dias e 90 dias (p=0,007). Ainda com relação ao ICG, o grupo ciclosporina-A sempre apresentou médias superiores ao grupo tacrolimus e essa diferença foi significativa nos momentos 30 dias (p=0,03) e 90 dias (p=0,014). Os autores concluíram que ambos os grupos apresentaram crescimento gengival após 90 dias de terapia imunossupressora. Entretanto, a média do índice de crescimento gengival do grupo CsA foi significantemente maior que a média do grupo tacrolimus após 30 dias e 90 dias. Além disso, os parâmetros clínicos periodontais IP, SS, JEC-MG, PCS e NCI não apresentaram diferenças significativas entre os grupos durante o estudo. / The purpose of this study was to evaluate the occurrence of gingival overgrowth induced by cyclosporin-A (CyA) and tacrolimus, in kidney transplant patients, and to verify the possible changes of the periodontal parameters (plaque index, bleeding on probing, distance of the enamel-cement junction to gingival margin, probing depth and clinical attachment level) after the beginning of the immunosuppressant therapy. Two groups were evaluated: group CyA that consisted of 20 individuals who received CyA and the group tacrolimus that consisted of 20 individuals who received tacrolimus. Both groups were evaluated at three moments: pre-transplant moment, 30 days after the kidney transplant (30 days moment) and 90 days after the kidney transplant (90 days moment). In all these evaluations we registered the following parameters: plaque index (PI), bleeding on probing (SS), distance of enamel-cement junction to gingival margin (JEC-MG), probing depth (PD), clinical attachment level (CAL) and gingival overgrowth index (GO). It was observed a significant reduction of the PI in both groups, between the pre-transplant moment and the 90 days moment, but it was not observed any significant difference between the groups in the three evaluated moments. A significant reduction was found in the SS between the pretransplant moment and the 30 days moment (p=0,001), and between the pretransplant moment and the 90 days moment (p<0,001) for the group tacrolimus. Again it was not found any significant difference between the groups in the evaluated moments. It was not found any significant difference between the groups in the three moments of the study when the JEC-MG and PD were compared. About the CAL, it was found a significant difference between the pre-transplant moment and the 30 days moment, and between the pre-transplant moment and the 90 days moment, independently of the group compared. When we evaluated the GO in the CyA group we found a significant difference between the pre-transplant moment and 30 days moment (p<0,001), the pre-transplant moment and the 90 days moment (p<0,001) and between the 30 days moment and the 90 days moment. In the group tacrolimus, it was observed a significant difference in the GO between the pre-transplant moment and the 90 days moment (p=0,007) and between the 30 days moment and the 90 days moment (p=0,007). The group CyA always presented superior GO mean scores when compared to the group tacrolimus and this difference was significant at the 30 days moment (p=0,03) and 90 days moment (p=0,014). The authors concluded that both groups presented gingival overgrowth after 90 days of immunosuppressant therapy. However, the mean GO scores of the group CyA was significantly higher than the mean of the group tacrolimus after 30 days and 90 days. Moreover, periodontal clinical parameters PI, SS, JEC-MG, PD and CAL did not present significant differences between the groups during the study.

A proposta do nosso estudo foi comparar o número de células apresentadoras de antígenos (CAAs) presentes em biópsias de gengivite (G) e de hiperplasia gengival induzida por ciclosporina (HGIC). Vinte e oito biópsias de pacientes com G e 14 biópsias de HGIC foram analisadas no epitélio de revestimento bucal (ERB), epitélio sulcular (ES) e no tecido conjuntivo (TC). O número de macrófagos (CD68+), de células de Langerhans (CD1a+) e de células dendríticas intersticiais (CDIs) (FXIIIA+) foi investigado por técnica imunoistoquímica. Células CD1a+/mm2 foram significantemente aumentadas na G quando comparada com HGIC, no TC, no ES e no ERB (p<0,05). Em contrapartida, o número de células CD68+ no TC e no ERB, e o número de células FXIIIA+/mm2 no TC foram aumentadas no grupo de HGIC (p<0,05). Ciclosporina A está relacionada com a diminuição de células de Langerhans. Podemos sugerir que este fato aumenta as infecções oportunistas, conseqüentemente, um maior número de macrófagos é necessário para combater os microorganismos. / The aim of this study was to compare the number of antigen-presenting cells (APCs) observed in biopsies of gingivitis (G), and in cyclosporine-induced gingival overgrowth (CIGO). Twenty eight biopsies from patients with G, and 14 with CIGO were analyzed in oral epithelium (OE), sulcular/junctional epithelium (SJE), and connective tissue (CT). The number of macrophages (CD68+), Langerhans’cells (CD1a+), and interstitial dendritic cells (FXIIIA+) was investigated by immunohistochemistry. CD1a+ cells/mm2 were significantly increased in G when compared with CIGO, in CT, in SJE, and in OE (p<0.05). In contrast, the number of CD68+ in CT, and in OE, and FXIIIA+ cells/mm2 in CT were increased in CIGO group (p<0.05). Cyclosporine is related with the diminution of Langerhans’ cells. We can suggest that this fact increase opportunistic infections, consequently, a greater number of macrophages is necessary in order to combat the microorganisms.

A proposta do nosso estudo foi comparar o número de células apresentadoras de antígenos (CAAs) presentes em biópsias de gengivite (G) e de hiperplasia gengival induzida por ciclosporina (HGIC). Vinte e oito biópsias de pacientes com G e 14 biópsias de HGIC foram analisadas no epitélio de revestimento bucal (ERB), epitélio sulcular (ES) e no tecido conjuntivo (TC). O número de macrófagos (CD68+), de células de Langerhans (CD1a+) e de células dendríticas intersticiais (CDIs) (FXIIIA+) foi investigado por técnica imunoistoquímica. Células CD1a+/mm2 foram significantemente aumentadas na G quando comparada com HGIC, no TC, no ES e no ERB (p<0,05). Em contrapartida, o número de células CD68+ no TC e no ERB, e o número de células FXIIIA+/mm2 no TC foram aumentadas no grupo de HGIC (p<0,05). Ciclosporina A está relacionada com a diminuição de células de Langerhans. Podemos sugerir que este fato aumenta as infecções oportunistas, conseqüentemente, um maior número de macrófagos é necessário para combater os microorganismos. / The aim of this study was to compare the number of antigen-presenting cells (APCs) observed in biopsies of gingivitis (G), and in cyclosporine-induced gingival overgrowth (CIGO). Twenty eight biopsies from patients with G, and 14 with CIGO were analyzed in oral epithelium (OE), sulcular/junctional epithelium (SJE), and connective tissue (CT). The number of macrophages (CD68+), Langerhans’cells (CD1a+), and interstitial dendritic cells (FXIIIA+) was investigated by immunohistochemistry. CD1a+ cells/mm2 were significantly increased in G when compared with CIGO, in CT, in SJE, and in OE (p<0.05). In contrast, the number of CD68+ in CT, and in OE, and FXIIIA+ cells/mm2 in CT were increased in CIGO group (p<0.05). Cyclosporine is related with the diminution of Langerhans’ cells. We can suggest that this fact increase opportunistic infections, consequently, a greater number of macrophages is necessary in order to combat the microorganisms.

OBJETIVO: Avaliar a presença de dislipidemia em pacientes com dermatomiosite juvenil (DMJ) e seus possíveis fatores de risco. MÉTODO: 25 pacientes com DMJ foram comparados a 25 controles de acordo com dados demográficos, composição corporal, perfil lipídico, glicêmico, autoanticorpos e enzimas musculares. Foram avaliados os instrumentos de atividade da DMJ: Disease Activity Score (DAS), Childhood Myositis Assessment Scale (CMAS), Manual Muscle Testing (MMT), Myositis Disease Activity Assessment Analogue Scale (MYOACT) e Myositis Intention to Treat Activity Index (MYTAX). RESULTADOS: Perfil lipídico alterado foi encontrado em nove pacientes e quatro controles (36% vs. 16%, p=0,196). Os pacientes com DMJ demonstraram níveis significativamente mais elevados de triglicérides (TG) [80 (31-340) vs. 61 (19-182) mg/dl, p=0,011] e maior freqüência de baixos níveis de lipoproteínas de alta densidade (HDL) (28% vs. 4%, p=0,04) quando comparados aos controles. A mediana dos níveis de HDL foi significativamente menor nos pacientes com DMJ com dislipidemia comparados aos DMJ com perfil lipídico normal [29 (0-49) vs. 50 (39-72) mg/dL, p=0,0005], enquanto os níveis TG [128 (31-340) vs. 69 (46- 138) mg/dL, p=0,011] foram significativamente mais elevados no primeiro grupo. Foi observada uma maior freqüência de baixos níveis de HDL (77% vs. 0%, p=0,001) e de níveis elevados de TG (44% vs. 0%, p=0,01) e de colesterol total (CT) (33 vs. 0%, p=0,03) no grupo de pacientes com DMJ com dislipidemia. O anticorpo anti-LPL foi positivo em apenas um paciente com perfil lipídico alterado. Pacientes com DMJ com dislipidemia apresentaram níveis significativamente mais elevados de velocidade de hemossedimentação (VHS) (26 vs. 14,5 mm/1a hora, p=0,006), proteína C reativa (PCR) (2,1 vs. 0,4 mg/dL, p=0,01), DAS (6 vs. 2, p=0,008), MYOACT (0,13 vs. 0,01, p=0,012) e MYTAX 0,06 vs. 0, p=0,018) e escores mais baixos de CMAS (47 vs. 52, p=0,024) e MMT (78 vs. 80, p=0,001) comparados aos pacientes com DMJ sem dislipidemia. Os níveis de TG apresentaram correlações positivas com PCR (r=0,697, p=0,001), DAS (r=0,610, p=0,001), MYOACT (r=0,661, p=0,001) e MYTAX (r=0,511, p=0,008) e correlações negativas com CMAS (r= - 0,506, p=0,009) e MMT (r= - 0,535, p=0,005). Nenhuma diferença entre estes grupos foi encontrada em relação ao IMC, composição corporal, presença de lipodistrofia, anticorpos anti-LPL e terapêutica (doses atuais e cumulativas de prednisona, metotrexato e cloroquina) (p>0,05), exceto pela frequência significativamente mais elevada do uso de ciclosporina nos pacientes com DMJ dislipidêmicos (33% vs. 0%, p=0,03). CONCLUSÃO: A dislipidemia em pacientes com DMJ se caracterizou por elevação de níveis séricos de TG e diminuição de HDL, sendo a atividade da doença e o uso da ciclosporina os principais fatores associados a esta alteração metabólica / OBJECTIVE: To evaluate the presence of dyslipidemia in JDM and its possible risk factors. METHODS: 25 JDM patients were compared to 25 healthy controls according to demographic data, body composition, fasting lipoproteins, glycemia, insulin, antibodies and muscle enzymes. The following JDM scores were assessed: Disease Activity Score (DAS), Childhood Myositis Assessment Scale (CMAS), Manual Muscle Testing (MMT), Myositis Disease Activity Assessment Analogue Scale (MYOACT) and Myositis Intention to Treat Activity Index (MYTAX). RESULTS: Abnormal lipid profile was found in nine patients (36%) and four controls (16%) (p=0.196). JDM patients demonstrated significant higher levels of triglycerides (TG) [80 (31- 340) vs. 61 (19-182) mg/dL, p=0.011] and higher frequency of abnormal levels of high density lipoproteins (HDL) (28 vs. 4%, p=0.04) when compared to controls. JDM patients with dyslipidemia demonstrated significant lower median HDL levels compared to those without this condition [29 (0-49) vs. 50 (39-72) mg/dL, p=0.0005] and also had significant higher TG levels [128 (31- 340) vs. 69 (46-138) mg/dL, p=0.011]. Higher frequency of low HDL levels (77% vs. 0%, p=0.0001), and also a higher frequency of increased levels of TG (44% vs. 0%, p=0.01), and TC (33% vs. 0%, p=0.03) were observed in JDM patients with dyslipidemia. Positive anti-LPL antibody was detected in just one JDM patient with abnormal lipid profile. JDM with dyslipidemia had higher ESR (26 vs 14.5mm/1sthour, p=0.006), CRP (2.1 vs 0.4mg/dL, p=0.006), DAS (6 vs. 2, p=0.008), MYOACT (0.13 vs. 0.01, p=0.012), MYTAX (0.06 vs. 0, p=0.018), and lower scores of CMAS (47 vs. 52, p=0.024) and MMT (78 vs. 80, p=0.001) compared to JDM without dyslipidemia. Positive correlations were detected between TG levels and CRP (r=0.697, p=0.001), DAS (r=0.610, p=0.001), MYOACT (r=0.661, p=0.001), MYTAX (r=0.511, p=0.008), and negative correlations with CMAS (r=-0.506, p=0.009) and MMT (r=-0.535, p=0.005). No differences were found between these groups regarding body mass index, body composition, lipodystrophy, anti-LPL antibodies, and treatment (current and cumulative doses of prednisone, methotrexate and hydroxichloroquine) (p>0.05), except by higher frequency of cyclosporine use in patients with dyslipidemia (33 vs. 0%, p=0.03). CONCLUSIONS: Dyslipidemia in JDM patients was characterized by increased levels of TG and low levels of HDL, and disease activity and cyclosporine use were the mainly factors associated to these metabolic abnormalities

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-03-27T14:06:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AcaoCiclosporinaVia.pdf: 2732519 bytes, checksum: 299c6ad5712f735f6c982ebeac2cee32 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-04-06T13:43:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AcaoCiclosporinaVia.pdf: 2732519 bytes, checksum: 299c6ad5712f735f6c982ebeac2cee32 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-06T13:43:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AcaoCiclosporinaVia.pdf: 2732519 bytes, checksum: 299c6ad5712f735f6c982ebeac2cee32 (MD5) Previous issue date: 2016-08-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A Ciclosporina A é um imunossupressor químico com ação conhecida sobre células T do sistema imune. No sistema nervoso, a Ciclosporina A age inibindo a ação da Calcineurina, um importante segundo mensageiro da via de transdução de sinal do Fator de Crescimento de Nervo (NGF) resultando na hiperfosforilação do Fator Nuclear de Células T Ativadas (NFAT) e regulação negativa de NGF, TrkA e outros fatores que participam da via. As isoformas da família de NFAT1-4 são dependentes de calcineurina, enquanto a isoforma NFAT5 é independente. Já foi demonstrado o papel neuroprotetor da Ciclosporina A por via dependente ou independente de calcineurina. No presente trabalho, procuramos avaliar a ação da Ciclosporina A no sistema nervoso periférico, associando níveis de NGF, TrkA e o fator de transcrição independente de calcineurina, NFAT5 com a plasticidade de células neuronais oriundas de Gânglios da Raiz Dorsal (GRD) mantidas em culturas. Usamos culturas de GRD E10, suplementado com Meio Condicionado de Retina de E9, tratados com Ciclosporina A por 48 e 72 horas. Culturas enriquecidas de Neurônios foram confirmadas pelo método de imageamento de cálcio. A ação da Ciclosporina A sob a neuritogênese foi avaliada por microscopia de campo claro, a expressão de NGF, TrkA e NFAT5 foi realizada por RT-PCR e o acúmulo de NGF intracelular foi avaliado por Imunofluorescência, assim como a presença de TrkA em neurônios. O teste de viabilidade das culturas tratadas ou não com as concentrações de 1-40μM de Ciclosporina A foi realizado pelo método de MTT. Os resultados mostram aumento dos níveis de NGF em culturas mistas, e de receptor TrkA e NFAT5 em culturas enriquecidas em neurônios após o tratamento com a Ciclosporina A. Dada a importância da via de NGF no desenvolvimento e manutenção do SNP, o uso da Ciclosporina A, pode vir a ser usado na clínica como novo alvo para novas terapias. / A is an immunosuppressive drug with known action on T cells of the immune system used in organ transplantation and autoimmune diseases. In the nervous system, cyclosporin A acts by inhibiting the action of Calcineurin, an important second messenger from pathway of signal transduction Nerve Growth Factor (NGF), resulting in hyperphosphorylation of the nuclear factor of activated T cells (NFAT), and downregulation of NGF, TrkA and other factors that participating in this pathway. The NFAT1-4 family are dependent isoforms of calcineurin, while NFAT5 isoform is independent. It has been demonstrated the neuroprotective role of Cyclosporin A via calcineurin dependent or independent. In this study, we evaluate the action of Cyclosporine A in the PNS system, that could be associated with levels of NGF, TrkA and an independent of calcineurin transcription factor (NFAT5) that interplay the plasticity of neuronal cells derived from Dorsal root ganglia (DRG) maintained in cultures. We use E10 DRG cultures supplemented with medium conditioned E9 Retinal treated with Cyclosporin A for 48 and 72 hours. Cultures enriched neurons were confirmed by calcium imaging method. The action of Cyclosporine A in the neuritogenesis was assessed by bright field microscopy, expression of NGF, TrkA and NFAT5 was performed by RT-PCR, intracellular accumulation of NGF was evaluated by immunofluorescence and the presence of TrkA in neurons. The viability test of the cultures treated or not with the concentrations of 1-40μM Cyclosporine A was performed by MTT method. The results show an increase of NGF levels in mixed cultures, and TrkA receptor and NFAT5 in cultures enriched in neurons following treatment with cyclosporine A. Given the importance of NGF pathway in the development and maintenance of the SNP, the use of Cyclosporin A have activity in the peripheral nervous system cells, which might be used in the clinic with new target for new therapies.

OBJETIVO: Avaliar a presença de dislipidemia em pacientes com dermatomiosite juvenil (DMJ) e seus possíveis fatores de risco. MÉTODO: 25 pacientes com DMJ foram comparados a 25 controles de acordo com dados demográficos, composição corporal, perfil lipídico, glicêmico, autoanticorpos e enzimas musculares. Foram avaliados os instrumentos de atividade da DMJ: Disease Activity Score (DAS), Childhood Myositis Assessment Scale (CMAS), Manual Muscle Testing (MMT), Myositis Disease Activity Assessment Analogue Scale (MYOACT) e Myositis Intention to Treat Activity Index (MYTAX). RESULTADOS: Perfil lipídico alterado foi encontrado em nove pacientes e quatro controles (36% vs. 16%, p=0,196). Os pacientes com DMJ demonstraram níveis significativamente mais elevados de triglicérides (TG) [80 (31-340) vs. 61 (19-182) mg/dl, p=0,011] e maior freqüência de baixos níveis de lipoproteínas de alta densidade (HDL) (28% vs. 4%, p=0,04) quando comparados aos controles. A mediana dos níveis de HDL foi significativamente menor nos pacientes com DMJ com dislipidemia comparados aos DMJ com perfil lipídico normal [29 (0-49) vs. 50 (39-72) mg/dL, p=0,0005], enquanto os níveis TG [128 (31-340) vs. 69 (46- 138) mg/dL, p=0,011] foram significativamente mais elevados no primeiro grupo. Foi observada uma maior freqüência de baixos níveis de HDL (77% vs. 0%, p=0,001) e de níveis elevados de TG (44% vs. 0%, p=0,01) e de colesterol total (CT) (33 vs. 0%, p=0,03) no grupo de pacientes com DMJ com dislipidemia. O anticorpo anti-LPL foi positivo em apenas um paciente com perfil lipídico alterado. Pacientes com DMJ com dislipidemia apresentaram níveis significativamente mais elevados de velocidade de hemossedimentação (VHS) (26 vs. 14,5 mm/1a hora, p=0,006), proteína C reativa (PCR) (2,1 vs. 0,4 mg/dL, p=0,01), DAS (6 vs. 2, p=0,008), MYOACT (0,13 vs. 0,01, p=0,012) e MYTAX 0,06 vs. 0, p=0,018) e escores mais baixos de CMAS (47 vs. 52, p=0,024) e MMT (78 vs. 80, p=0,001) comparados aos pacientes com DMJ sem dislipidemia. Os níveis de TG apresentaram correlações positivas com PCR (r=0,697, p=0,001), DAS (r=0,610, p=0,001), MYOACT (r=0,661, p=0,001) e MYTAX (r=0,511, p=0,008) e correlações negativas com CMAS (r= - 0,506, p=0,009) e MMT (r= - 0,535, p=0,005). Nenhuma diferença entre estes grupos foi encontrada em relação ao IMC, composição corporal, presença de lipodistrofia, anticorpos anti-LPL e terapêutica (doses atuais e cumulativas de prednisona, metotrexato e cloroquina) (p>0,05), exceto pela frequência significativamente mais elevada do uso de ciclosporina nos pacientes com DMJ dislipidêmicos (33% vs. 0%, p=0,03). CONCLUSÃO: A dislipidemia em pacientes com DMJ se caracterizou por elevação de níveis séricos de TG e diminuição de HDL, sendo a atividade da doença e o uso da ciclosporina os principais fatores associados a esta alteração metabólica / OBJECTIVE: To evaluate the presence of dyslipidemia in JDM and its possible risk factors. METHODS: 25 JDM patients were compared to 25 healthy controls according to demographic data, body composition, fasting lipoproteins, glycemia, insulin, antibodies and muscle enzymes. The following JDM scores were assessed: Disease Activity Score (DAS), Childhood Myositis Assessment Scale (CMAS), Manual Muscle Testing (MMT), Myositis Disease Activity Assessment Analogue Scale (MYOACT) and Myositis Intention to Treat Activity Index (MYTAX). RESULTS: Abnormal lipid profile was found in nine patients (36%) and four controls (16%) (p=0.196). JDM patients demonstrated significant higher levels of triglycerides (TG) [80 (31- 340) vs. 61 (19-182) mg/dL, p=0.011] and higher frequency of abnormal levels of high density lipoproteins (HDL) (28 vs. 4%, p=0.04) when compared to controls. JDM patients with dyslipidemia demonstrated significant lower median HDL levels compared to those without this condition [29 (0-49) vs. 50 (39-72) mg/dL, p=0.0005] and also had significant higher TG levels [128 (31- 340) vs. 69 (46-138) mg/dL, p=0.011]. Higher frequency of low HDL levels (77% vs. 0%, p=0.0001), and also a higher frequency of increased levels of TG (44% vs. 0%, p=0.01), and TC (33% vs. 0%, p=0.03) were observed in JDM patients with dyslipidemia. Positive anti-LPL antibody was detected in just one JDM patient with abnormal lipid profile. JDM with dyslipidemia had higher ESR (26 vs 14.5mm/1sthour, p=0.006), CRP (2.1 vs 0.4mg/dL, p=0.006), DAS (6 vs. 2, p=0.008), MYOACT (0.13 vs. 0.01, p=0.012), MYTAX (0.06 vs. 0, p=0.018), and lower scores of CMAS (47 vs. 52, p=0.024) and MMT (78 vs. 80, p=0.001) compared to JDM without dyslipidemia. Positive correlations were detected between TG levels and CRP (r=0.697, p=0.001), DAS (r=0.610, p=0.001), MYOACT (r=0.661, p=0.001), MYTAX (r=0.511, p=0.008), and negative correlations with CMAS (r=-0.506, p=0.009) and MMT (r=-0.535, p=0.005). No differences were found between these groups regarding body mass index, body composition, lipodystrophy, anti-LPL antibodies, and treatment (current and cumulative doses of prednisone, methotrexate and hydroxichloroquine) (p>0.05), except by higher frequency of cyclosporine use in patients with dyslipidemia (33 vs. 0%, p=0.03). CONCLUSIONS: Dyslipidemia in JDM patients was characterized by increased levels of TG and low levels of HDL, and disease activity and cyclosporine use were the mainly factors associated to these metabolic abnormalities