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El presente trabajo está relacionado con la etapa inicial del desarrollo de los procesos enzimáticos, es decir el screening de actividades enzimáticas. El objeto de estudio lo constituyen un grupo de hongos filamentosos que fueron aislados por la Dra. Marta Cabello del Instituto Spegazzini (UNLP) de los suelos que constituyen el ecosistema de los bosques de tala (Celtis tala) y coronillo (Scutia buxifolia) situados en la región costera de la Provincia de Buenos Aires (partidos de Magdalena y Punta Indio). En estos suelos con alto porcentaje de carbonato de calcio y pH entre 7.2 y 9.0, habitan especies de la microbiota fúngica con capacidad de crecer en medios altamente alcalinos (pH 9-10). Esta capacidad adaptativa hace suponer que tengan la propiedad de segregar enzimas alcalino-tolerantes o alcalinoactivas, requeridas para la degradación de los sustratos presentes en el suelo. Hasta el momento no se han realizado estudios sobre qué tipo de enzimas producen estos microorganismos. Resultó por lo tanto de interés realizar un screening de actividades enzimáticas alcalinas focalizado principalmente en aquellas enzimas involucradas en la degradación de la pared celular vegetal, en particular las pectinasas, ya que las mismas presentan un potencial interés tecnológico. Para una mejor comprensión del presente trabajo, a continuación se describe la estructura de la pared celular vegetal, las enzimas involucradas en su degradación y sus potenciales aplicaciones tecnológicas. Del mismo modo, se hace referencia a los hongos implicados en el screening enzimático y su cultivo in vitro.

En el presente trabajo estudiaremos el fenómeno de compactación por vibración en medios granulares. Para ello, en el capítulo 1, presentaremos a los medios granulares y hablaremos de diversos fenómenos asociados a los mismos. En el capítulo 2 nos referiremos concretamente al fenómeno de compactación en medios granulares, comentando trabajos y resultados previos publicados sobre el tema. Expondremos en particular resultados publicados recientemente en un trabajo que estudia los medios granulares utilizando técnicas de simulación computacional. En tal trabajo se investiga la compactación por vibración de medios granulares en el límite de grandes intensidades de vibración. Inspirados en este trabajo hemos realizado un experimento en el Departamento de Física y Matemática Aplicada de la Universidad de Navarra (España). Dicho experimento, los resultados obtenidos y las perspectivas en relación al mismo serán expuestos en el capítulo 3. Finalmente, en el capítulo 4, utilizaremos técnicas de simulación por computadora para estudiar este fenómeno en un modelo simple tipo Ising frustrado.

A pesar de que la fuente tradicional de enzimas coagulantes de la leche para la fabricación de quesos ha sido el estómago de mamíferos lactantes, motivos económicos, nutricionales, culturales, religiosos y/o de disponibilidad de estómagos han hecho necesaria la búsqueda de sustitutos de origen vegetal, fúngico y bacteriano para la elaboración de quesos. Respecto a las enzimas de origen vegetal, sólo un reducido número de peptidasas han sido aisladas, caracterizadas y purificadas a partir de las plantas superiores. En este sentido es necesario destacar que sólo el uno por mil de las especies conocidas se han analizado con respecto a su contenido y perfil de peptidasas. En plantas que crecen en nuestro país se han aislado y caracterizado peptidasas serínicas y cisteínicas en algunas especies de Asclepiadaceae, Bromeliaceae y Moraceae. En cuanto a las peptidasas aspárticas, sólo se ha estudiado una enzima producida por discos de papa sometidos a estrés abiótico, no existiendo otros antecedentes de estudios sobre fitoproteasas aspárticas y ninguno sobre enzimas de plantas que coagulen la leche. En este trabajo de tesis se propone estudiar las peptidasas que poseen acción coagulante de la leche y que se encuentran presentes en Cynara scolymus L. ( alcaucil , alcachofa ), tanto en la planta cultivada a campo como en cultivos in vitro. Para lograr este objetivo general se plantearon los siguientes objetivos parciales: Estudiar la actividad proteinolítica y coagulante de la leche de los extractos crudos de las diferentes partes del alcaucil. Caracterizar la preparación enzimática cruda que presente las mejores condiciones caseinolíticas, de acuerdo a los resultados del ítem anterior. Purificar dicho extracto crudo y caracterizar las fracciones purificadas. Inducir la expresión in vitro de peptidasas coagulantes de la leche de Cynara scolymus L. mediante el agregado de diferentes reguladores de crecimiento. Realizar estudios comparativos entre las peptidasas coagulantes de la leche obtenidas de las plantas crecidas a campo y de las provenientes de cultivos in vitro. Elaborar y evaluar quesos con las enzimas estudiadas.

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Existen evidencias de que incluso una sola sesión de diálisis es capaz, en algunos pacientes de aumentar la masa ventricular. Cheol Whee Park y col. observaron en 2002 que los pacientes renales crónicos que presentaban incremento de PCR luego de una sola sesión de diálisis (respondedores) evidenciaban aumento de la masa del ventrículo izquierda (MVI). Kim y col. obtuvieron resultados similares. Debido a que no está completamente aclarada la relación entre los marcadores inflamatorios (PCR) y la masa ventricular en el caso particular de pacientes en hemodiálisis, surgió la necesidad de determinar en nuestros pacientes si el valor de PCR puede servir o no en la práctica clínica como un parámetro sencillo de aumento de masa ventricular (tal como se ha propuesto que lo es de lesión vascular aterosclerótica). Asimismo reforzaría la hipótesis de la relación de la enfermedad cardiovascular con procesos inflamatorios sustentando la posibilidad terapéutica con estatinas, inhibidores da la enzima de conversión (IECA), Vitamina E y aspirina, dado el inaceptable y desalentador elevado índice de estas complicaciones. El planteo de la hipótesis es tratar de determinar si existe relación entre el grado de la masa ventricular y los niveles de Proteína C, o sea si el mayor grado de respuesta inflamatoria se asocia a mayor masa miocárdica en pacientes con insuficiencia renal crónica terminal en hemodiálisis.