Resumo: As descobertas de que o vanádio é capaz de mimetizar a insulina e de que possui atividade antitumoral têm motivado o estudo de seus complexos com diferentes tipos de ligantes. A interação de espécies de vanádio com ligantes de baixa massa molecular, como os ácidos a-hidroxicarboxílicos tem motivado os estudos da química bioinorgânica deste elemento. Dentro desse contexto, este trabalho trata do estudo de compostos de coordenação obtidos pela reação de ácidos a-hidroxicarboxílicos ou do aspartame (ou de seus respectivos ânions) com vanádio na forma de óxido ou vanadato. Os ligantes apresentados nesta tese são o ácido glicólico, o ácido málico, o ácido mandélico, o ácido lático e o aspartame. Os complexos de vanádio sintetizados foram caracterizados através de técnicas de análises químicas (emissão atômica e análise elementar), espectroscopia vibracional na região do infravermelho, espectroscopia eletrônica na região do ultravioleta-visível, susceptibilidade magnética, ressonância paramagnética eletrônica, ressonância magnética nuclear, análise térmica, difração de raios-X de pó e de monocristal e voltametria cíclica. Os cristais obtidos nas sínteses com ácido glicólico foram caracterizados por difração de raios-X de monocristal como tendo as composições K2[VO(C2H2O3)(C2H3O3)2]H2O e K2[{VO2(C2H2O3)}2]H2O. No caso dos complexos obtidos com ácido málico, ácido mandélico, ácido lático e aspartame, vários estudos foram necessários para confirmar as propostas de estrutura dos complexos. Os complexos têm as seguintes fórmulas de coordenação K2[(VIVO)(C4H4O5)2]2H2O (ácido málico), Na4[(VIVO)2(C8H6O3)4]2,5H2O (ácido mandélico), KNH4[(VIVO)(C3H4O3)2] (ácido lático) e Na[VO2(C13H15N2O5)2]2CH3OH (aspartame). Foi realizado o estudo in vitro da atividade insulino-mimética em músculo sóleo, mas os complexos sintetizados não apresentaram resultados expressivos. / Abstract: Since the finding that vanadate ion has an insulin-like behavior and antitumor effects, several vanadium compounds have been studied with different species of ligands. The interaction of vanadium species with low molecular weight ligands, as a-hydroxycarboxilic acids, is relevant to the bioinorganic chemistry of this element. Then, inside this context, this work deals with the study of coordination compounds obtained by the reaction of a-hydroxycarboxylic acids or aspartame with vanadium in the form of oxide or vanadate. The ligands used in this work are glycolic, malic, mandelic and lactic acids and aspartame. The vanadium complexes were characterized by elemental analyses, FTIR, UV-Vis-NIR, EPR, 1H, 13C and 51V NMR, thermal analysis, magnetochemistry, powder X-ray diffraction, single-crystal Xray diffractometry and cyclic voltammetry. Crystals were obtained for the complexes with glycolic acid and characterized by single-crystals X-ray diffractometry as K2[VO(C2H2O3)(C2H3O3)2]H2O and K2[{VO2(C2H2O3)}2]H2O. In the case of the compounds obtained with malic acid, mandelic acid, lactic acid and aspartame, several studies were necessary to propose the structures for the complexes. The coordination formulas for the complexes are: K2[(VIVO)(C4H4O5)2] 2H2O (malic acid), Na4[(VIVO)2(C8H6O3)4]2,5H2O (mandelic acid), KNH4[(VIVO)(C3H4O3)2] (lactic acid) and Na[VO2(C13H15N2O5)2] 2CH3OH (aspartame). The results obtained of the studies concerning in vitro insulin-like activity of soleus muscle are also shown, but none of the complexes showed good results for this test. Biological analyses for evaluation of the potential cytotoxic effects of the complexes K2[VO(C2H2O3)(C2H3O3)2]H2O, K2[(VIVO)(C4H4O5)2]2H2O, KNH4[(VIVO)(C3H4O3)2], Na4[(VIVO)2(C8H6O3)4]2,5H2O and Na[VO2(C13H15N2O5)2]2CH3OH was performed using HeLa cells, a human cervix adenocarcinoma-derived cell line. / Orientador: Antonio Carlos Massabni / Coorientador: Luiz Antonio Andrade de Oliveira / Banca: Elizabeth Berwerth Stucchi / Banca: Vânia Martins Nogueira / Banca: Alzir Azevedo Batista / Banca: Ana Maria da Costa Ferreira / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:08Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:24:30Z : No. of bitstreams: 1 guilherme_lr_dr_araiq.pdf: 1754037 bytes, checksum: 80b0476d6b55e85669b3ba062796b7cc (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / As descobertas de que o vanádio é capaz de mimetizar a insulina e de que possui atividade antitumoral têm motivado o estudo de seus complexos com diferentes tipos de ligantes. A interação de espécies de vanádio com ligantes de baixa massa molecular, como os ácidos a-hidroxicarboxílicos tem motivado os estudos da química bioinorgânica deste elemento. Dentro desse contexto, este trabalho trata do estudo de compostos de coordenação obtidos pela reação de ácidos a-hidroxicarboxílicos ou do aspartame (ou de seus respectivos ânions) com vanádio na forma de óxido ou vanadato. Os ligantes apresentados nesta tese são o ácido glicólico, o ácido málico, o ácido mandélico, o ácido lático e o aspartame. Os complexos de vanádio sintetizados foram caracterizados através de técnicas de análises químicas (emissão atômica e análise elementar), espectroscopia vibracional na região do infravermelho, espectroscopia eletrônica na região do ultravioleta-visível, susceptibilidade magnética, ressonância paramagnética eletrônica, ressonância magnética nuclear, análise térmica, difração de raios-X de pó e de monocristal e voltametria cíclica. Os cristais obtidos nas sínteses com ácido glicólico foram caracterizados por difração de raios-X de monocristal como tendo as composições K2[VO(C2H2O3)(C2H3O3)2]H2O e K2[{VO2(C2H2O3)}2]H2O. No caso dos complexos obtidos com ácido málico, ácido mandélico, ácido lático e aspartame, vários estudos foram necessários para confirmar as propostas de estrutura dos complexos. Os complexos têm as seguintes fórmulas de coordenação K2[(VIVO)(C4H4O5)2]2H2O (ácido málico), Na4[(VIVO)2(C8H6O3)4]2,5H2O (ácido mandélico), KNH4[(VIVO)(C3H4O3)2] (ácido lático) e Na[VO2(C13H15N2O5)2]2CH3OH (aspartame). Foi realizado o estudo in vitro da atividade insulino-mimética em músculo sóleo, mas os complexos sintetizados não apresentaram resultados expressivos. / Since the finding that vanadate ion has an insulin-like behavior and antitumor effects, several vanadium compounds have been studied with different species of ligands. The interaction of vanadium species with low molecular weight ligands, as a-hydroxycarboxilic acids, is relevant to the bioinorganic chemistry of this element. Then, inside this context, this work deals with the study of coordination compounds obtained by the reaction of a-hydroxycarboxylic acids or aspartame with vanadium in the form of oxide or vanadate. The ligands used in this work are glycolic, malic, mandelic and lactic acids and aspartame. The vanadium complexes were characterized by elemental analyses, FTIR, UV-Vis-NIR, EPR, 1H, 13C and 51V NMR, thermal analysis, magnetochemistry, powder X-ray diffraction, single-crystal Xray diffractometry and cyclic voltammetry. Crystals were obtained for the complexes with glycolic acid and characterized by single-crystals X-ray diffractometry as K2[VO(C2H2O3)(C2H3O3)2]H2O and K2[{VO2(C2H2O3)}2]H2O. In the case of the compounds obtained with malic acid, mandelic acid, lactic acid and aspartame, several studies were necessary to propose the structures for the complexes. The coordination formulas for the complexes are: K2[(VIVO)(C4H4O5)2] 2H2O (malic acid), Na4[(VIVO)2(C8H6O3)4]2,5H2O (mandelic acid), KNH4[(VIVO)(C3H4O3)2] (lactic acid) and Na[VO2(C13H15N2O5)2] 2CH3OH (aspartame). The results obtained of the studies concerning in vitro insulin-like activity of soleus muscle are also shown, but none of the complexes showed good results for this test. Biological analyses for evaluation of the potential cytotoxic effects of the complexes K2[VO(C2H2O3)(C2H3O3)2]H2O, K2[(VIVO)(C4H4O5)2]2H2O, KNH4[(VIVO)(C3H4O3)2], Na4[(VIVO)2(C8H6O3)4]2,5H2O and Na[VO2(C13H15N2O5)2]2CH3OH was performed using HeLa cells, a human cervix adenocarcinoma-derived cell line.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-29Bitstream added on 2014-06-13T19:49:25Z : No. of bitstreams: 1 rossi_ca_me_rcla.pdf: 887311 bytes, checksum: 0aac6ef29470c2188c7f7d4a2bd7179d (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Uma preocupação atual consiste no uso indiscriminado de muitas substâncias sintéticas no controle de pragas na agricultura. Estudos atuais indicam que algumas dessas substâncias podem estar envolvidas em casos de intoxicação de insetos, como as abelhas, que são fundamentais em muitas culturas, devido à atividade de polinização realizada por elas. No Brasil, um dos inseticidas mais usados nas culturas de café, citrus, algodão e cana-de-açúcar é o imidaclopride, que apresenta ação neurotóxica para os insetos. Seus metabólitos circulam por todo o organismo e entram em contato com diversos órgãos. A exposição a doses subletais deste inseticida pode provocar mudanças na fisiologia e no comportamento das abelhas, sendo que tais alterações podem ser mais intensas ou não, dependendo do período de exposição. Dessa maneira, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da exposição crônica a doses subletais (DL50/100, DL50/50 e DL50/10) do inseticida imidaclopride, no cérebro, ventrículo e túbulo de Malpighi de Apis mellifera africanizada. Para isso os órgãos estudados das abelhas expostas e dos controles foram submetidos a análises morfológica, histoquímicas e imunocitoquímica, após 1, 3, 5, 7 e 10 dias de exposição. No cérebro das abelhas expostas foi possível observar alterações morfológicas, histoquímicas e imunocitoquímicas nos lobos ópticos de todos os grupos expostos, enquanto que nos corpos pedunculados observou-se tais alterações apenas no grupo exposto à DL50/10. Já nos lobos antenais as alterações não foram observadas. No ventrículo das abelhas de todos os grupos expostos ao inseticida, a análise morfológica permitiu observar de uma maneira geral um aumento na quantidade de células eliminadas no lúmen, na quantidade de secreção apócrina eliminada no lúmen e na quantidade de halos pericromatínicos nas células... / The indiscriminate use of synthetic chemicals to control pests in agriculture is not a new concern. Recent studies indicate that some of these substances are involved in cases of poisoning bees, which are fundamental in many cultures due to the activity of pollination. In Brazil, an insecticide widely used on crops of coffee, citrus, cotton and sugar cane, is imidacloprid, which is neurotoxic to insects. However, its metabolites circulate throughout the body and come into contacting with another organs. Exposure to sublethal doses of this insecticides causes changes in physiology and behavior of bees, and these changes can be more intense depending on exposure period. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of chronic exposure to sublethal doses (DL50/100, DL50/50 and DL50/10) of imidacloprid in the brain, midgut and the Malpighian tubules of africanized bees (Apis mellifera). For this, the organs of treated and untreated bees were subjected to morphological, histochemical and immunocytochemical techniques, dissecting the bees after 1, 3, 5, 7 and 10 days. In the brains of exposed bees it was possible to observe morphological, histochemical and immunocytochemical alterations on optic lobes of all bees, whereas in the mushroom bodies, alterations was observed only in the group exposed to DL50/10. The antennal lobe presented no alterations after the treatment in all doses. In the midgut of all exposed groups of bees, morphological analysis showed in general an increase in the number of digestive cells and apocrine secretion eliminated in the lumen and in the number of peripherical chromatin halos were also increased. The histochemical techiniques confirmed the presence of pyknotic nuclei, showing the presence of nuclear fragments and degenerated areas in cytoplasm of digestive cells. The immunocytochemical technique showed no presence of positive nuclei for Tunel reaction in ... (Complete abstract click electronic access below)

Estudamos a impostação de mãos sobre camundongos, avaliando parâmetros hematológicos e imunológicos. Nossos resultados demonstraram nos animais que receberam a impostação de mãos uma diminuição significativa do número de plaquetas, elevação do número de monócitos na leucometria específica, elevação da atividade citotóxica de células não-aderentes com atividade NK e LAK. Os grupos controle e placebo não mostraram qualquer alteração Os resultados encontrados nos levam a concluir que há uma alteração fisiológica decorrente à impostação de mãos e que há que se estudar por que ela ocorre / It has been investigated whether the hands imposition on male mice, produces physiological effects through hematological and immunological parameters. The results demonstrated that animals receiving hands imposition have presented a reduction of the platelet count, increase in monocytes count in specific white blood cells counts, increase in cytotoxic activity of non-adherent cell with NK and LAK activities.Control and placebo groups presented no response. The results found lead us to the conclusion that there is a physiological alteration due to the hands imposition and it should be investigated how it does occur

RESUMO O objetivo deste estudo foi comparar a citotoxicidade in vitro dos solventes utilizados em terapia de retratamento endodôntico: óleo de casca de laranja, eucaliptol, xilol, clorofórmio e halotano através da avaliação da citotoxicidade de cada solvente em diferentes concentrações finais e condições de contato com as células de fibroblastos de linhagem NIH 3T3. O experimento foi dividido em 4 etapas: etapa 1- os solventes foram misturados em meio de cultura (DMEM) nas concentrações finais de 0, 5, 10, 25, 50 e 100% e depositados sobre a cultura de células para o tempo de 5 minutos; etapa 2-os solventes foram misturados em meio de cultura nas concentrações finais de 0, 10 e 25% e depositados sobre a cultura de células para os tempos de 10 e 15 minutos; etapa 3a- os solventes foram depositados sobre as células de fibroblastos (contato direto) e acrescido de meio de cultura; etapa 3b-onde os fibroblastos receberam o meio de cultura e sobre este depositado os solventes testes (contato indireto) nas concentrações finais de 0, 5 e 10% para o tempo de 5 minutos; etapa 4- os solventes foram previamente solubilizados com o álcool absoluto na proporção de 1:1 e depois misturados ao meio de cultura na concentração final de 5% para o tempo de 5 minutos. A avaliação foi realizada pela contagem celular através de método de exclusão de células coradas pelo azul Trypan. Os resultados obtidos nos permitiram concluir que todos os solventes testados são citotóxicos in vitro, sendo que o óleo de laranja foi o menos tóxico, ao permitir alguma viabilidade celular. Observou-se ainda que o preparo prévio dos solventes influenciou no percentual de células viáveis. / SUMMARY The aim of this study was to compare in vitro solvents used in endodontic retreatment therapy: orange oil, eucalyptol, xylene, chloroform and halothane through cytotoxicity evaluation of each solvent in different final concentration and contact conditions to NIH 3T3 fibroblasts cells lines. The experiment was divided in four stages: stage 1- the solvents were mixed in culture medium (DMEM) in final concentrations of 0, 5, 10, 25, 50 and 100% placed on the cells in culture for periods of 5 minutes; stage 2- the solvents were mixed in culture medium in finals concentrations of 0, 10 and 25% placed on the cells in culture for periods of 10 and 15 minutes; stage 3a- the solvents were placed on the fibroblasts cells (direct contact) and added culture medium; stage 3b- the fibroblasts cells get first culture medium and after that solvents were placed (indirect contact), in bouth the finals concentrations were 0, 5 and 10% for periods of 5 minutes; stage 4- solvents were previously solubilized in absolut alcohol in 1:1 proportion and mixed in culture medium in 5% final concentration for periods of 5 minutes. The evaluation were achieved by cellular counting through dyed exclusion method-Trypan blue. The results showed that all solvents were toxic in vitro, and orange oil was less toxic and it allowed some cellular viability. And we could observe that a previous solvents preparation influenced in the viable cells percentage.

Peçonhas de serpentes são ricas em proteínas, peptídeos, compostos inorgânicos, lipídeos e carboidratos. Entre os principais constituintes protéicos podemos destacar as metaloproteases (SVMPs), responsáveis pelos processos hemorrágicos e inflamatórios, induzindo a formação de edema e infiltração de leucócitos. Da peçonha de Bothrops atrox, foi isolada uma metaloprotease denominada Batroxase. Esta SVMP foi isolada a partir de três passos cromatográficos, sendo duas exclusões moleculares, uma clássica e outra em FPLC, e uma troca aniônica utilizando CLAE. As SVMPs podem ser classificadas de acordo com os domínios existentes em sua estrutura. Entre as diversas classes, existem as SVMPs da classe PI, que possuem fraca atividade hemorrágica e baixo peso molecular. A Batroxase apresentou massa molecular de 27 kDa (dados não mostrados) e DHM de 10µg, podendo ser classificada como uma metaloprotease de classe PI. A atividade proteolítica da Batroxase foi avaliada sobre diferentes substratos presentes na matriz extracelular e em algumas proteínas presentes no plasma, responsáveis pela ativação da coagulação. Dos constituintes da matriz extracelular (MEC) avaliadas, a Batroxase apresentou atividade sobre o colágeno tipo IV e sobre a fibronectina, esta atividade facilita o processo hemorrágico, desde que estes substratos são encontrados na MEC de tecidos epiteliais e vasos sanguíneos. A atividade sobre proteínas presentes no plasma foi avaliada, evidenciando a capacidade de degradar o fibrinogênio e a fibrina, principalmente a cadeia . Esta atividade pode ser inibida na presença de inibidores de metaloproteases EDTA e EGTA, e na presença do redutor de proteínas -mercaptoetanol. A atividade sobre a fibrina e sobre o fibrinogênio interfere no processo de coagulação, dificultando a interrupção de processos hemorrágicos. Após a formação de um coágulo, a Batroxase foi capaz de dissolvê-lo completamente, capacidade esta, relacionada à sua atividade fibrinolítica. As plaquetas quando na presença da Batroxase não foram induzidas a se agregarem, e quando, na adição de ADP, não foi capaz de inibir a agregação. A atividade inflamatória foi elucidada, evidenciando a participação na formação de edema e hiperalgesia, bem como infiltração de leucócitos. Na avaliação farmacológica foi observada a participação de mediadores pró-inflamatórios como a histamina via receptores H1, a serotonina via receptores 5-HT1, e a formação de leucotrienos no edema e a histamina via receptores H1 e formação de leucotrienos na hiperalgesia. A infiltração de leucócitos observada foi mediada principalmente por neutrófilos nas primeiras horas, seguida do aumento de células mononucleares. A Batroxase possui citotoxicidade ausente ou baixa sobre as linhagens tumorais testadas, com análise significativa apenas para JURKAT, B16-F10, SK-BR3 em altas concentrações. Em células como EL-4 e PBMC sugerem que a Batroxase apresenta atividade imunorregulatória, induzindo proliferação celular em baixas concentrações e inibindo este crescimento em concentrações mais altas como observado em células JURKAT, A-20 e PBMC. É capaz de estimular a produção de citocinas próinflamatórias e antiinflamatórias de maneira distinta induzindo preferencialmente a produção de citocinas do padrão Th1 como IFN-, que, após adição de estímulo policlonal anti-CD3, apresentou atividade supressora na capacidade proliferativa de células T, inibindo a produção de citocinas do padrão Th1 como a IL-2 e IFN-, citocinas do padrão Th2 como a IL-4 e citocinas do padrão Th17 como a IL-17A. / Snake venoms are rich in components like proteins, peptides, lipids, carbohydrates and inorganic compounds. Among their main proteins components, the metalloproteinases (SVMPs) are responsible for hemorrhagic and inflammatory effects, edema formation and leucocytes recruitment. Batroxase, a new metalloproteinase isolated from Bothrops atrox snake venom, was purified using three chromatographic steps, namely: two molecular exclusion steps, one as classic chromatography and another as FPLC, and an anionic exchange in HPLC. SVMPs can be classified by specific domains in their structure. Among the various classes, there are SVMP PI, which has weak hemorrhagic activity and low molecular weight. Batroxase showed a molecular mass of 27 kDa (data not shown) and DHM of 10 µg. The proteolytic activity was evaluated on different substrates in the extracellular matrix and some plasma proteins, responsible for activation of coagulation. Batroxase was able to degrade extracellular matrix (ECM) components like, type IV collagen and fibronectin, inducing bleeding process, since these components are found in the ECM of epithelial tissues and blood vessels. The activity of proteins present in plasma was evaluated, demonstrating the ability to degrade fibrinogen and fibrin, especially the chain, which can be inhibited in the presence of metalloproteinase inhibitors as EDTA and EGTA, as well as with a reducing protein agent -mercaptoethanol. Activity on fibrin and fibrinogen interfere with the clotting process, making difficult to interrupt processes like bleeding. After clot formation, Batroxase was able to dissolve it completely, which is related to their fibrinolytic activity. The platelets in the presence of Batroxase were not induced to aggregate, and when, in addition to ADP, was not able to inhibit aggregation. Inflammatory activity has been elucidated, suggesting the participation in edema and hyperalgesia, as well as infiltration of leukocytes. Pharmacological evaluation was observed with participation of pro-inflammatory mediators such as histamine via H1 receptors, serotonin 5-HT1 receptor via, and the synthesis of leukotrienes and histamine on edema via H1 receptors and synthesis of leukotrienes in hyperalgesia. Infiltration of leukocytes was observed mainly mediated by neutrophils in the early hours, followed by the increase of mononuclear cells. Batroxase have absent or very low cytotoxicity on tumor cell lines tested, with significant only for Jurkat analysis, B16-F10, SK-BR3 in high concentrations. In EL-4 cells and PBMC, inducing cell proliferation at low concentrations and inhibiting this growth in higher concentrations as observed in Jurkat cells, A-20 and PBMC. It can stimulate production of proinflammatory and antiinflammatory cytokines, preferentially induces the production of Th1 cytokines such as IFN-, which, after addition of polyclonal anti-CD3 stimulation showed activity in suppressing proliferative capacity of T cells, inhibiting the production of Th1 cytokines such as IL-2 and IFN-, Th2 cytokines such as IL-4 and Th17 cytokine pattern as IL-17A.

Diante da presença de microrganismos resistentes à terapêutica endodôntica, novas formulações e alternativas medicamentosas têm sido investigadas. Desse modo, esse estudo teve como objetivo avaliar a citotoxicidade de diferentes medicações indicadas como medicação intracanal. Culturas de células de fibroblastos foram estimuladas de acordo com os seguintes grupos experimentais: Grupo I: controle; Grupo II: cloridrato de ciprofloxacina; Grupo III: cloridrato de clindamicina e Grupo IV: metronidazol. Para tal, as concentrações utilizadas para cada antibiótico foram de 5, 50, 150 e 300 mg/L, nos tempos experimentais de 24, 48, 72 e 96 horas. A citotoxicidade dessas substâncias foi avaliada usando a técnica de análise do MTT e leitura em espectrofotômetro de ELISA. Os resultados obtidos foram analisados pelo software BioEstat 4.0, por meio do teste de Kruskal-Wallis, complementado pelo teste de Dunn, com nível de significância de 5%. A viabilidade celular foi analisada diante da relação entre as diferentes concentrações e uma mesma concentração nos diferentes tempos experimentais. Diante dos resultados obtidos, foi possível concluir que: todos os antibióticos testados apresentaram citotoxicidade dosedependente. As concentrações de 5 e 50 mg/L, de todos os antibióticos, permitiram a viabilidade dos fibroblastos em todos os tempos avaliados. Independente da medicação avaliada, a viabilidade celular em 24 horas foi mais elevada em comparação aos demais tempos experimentais. A comparação entre os antibióticos nas mesmas concentrações, em diferentes tempos experimentais demonstrou que o gel de metronidazol apresentou menor citotoxicidade em 72 e 96 horas no confronto com os dois outros antibióticos, enquanto que o cloridrato de clindamicina apresentou maior viabilidade celular em relação ao cloridrato de ciprofloxacina em 72 horas. / New medicaments have been assessed due to the presence of resistantmicroorganism to therapeutic procedures. Thus, this study aimed to evaluate the citotoxicity of differents drugs indicated as intracanal medicament. The human gingival fibroblasts were estimulated according to the following experimental groups: Group I: control; Group II: Ciprofloxacin Hydrochloride; Group III: Clindamicin Hydrochloride and Group IV: Metronidazole. The concentration used for each drugs were 5, 50, 150, and 300 mg/L, in the experimental time of 24, 48, 72, and 96 hours. The citotoxicicty were evaluated with MTT analysis and ELISA spectrophotometer reading. The results were evaluated by BioEstat 4.0 software, according to Kruskal- Wallis test supplemented by Dunn test with significance level of 5%. Cell viability analysis has been assessed in different concentrations in each experimental period. According to the results, it is possible to conclude that: all the tested drugs showed dose-dependent citotoxicity. The concentrations of 5 and 50mg/L of all groups allowed fibroblast viability in all evaluated periods. The cell viability in 24 hours was higher than the others experimental periods. The comparing between the antibiotics at the same concentrations, in different times showed the gel metronidazole obtained lowest citotoxicity at 72 and 96 hours when compared with the others antibiotics, meanwhile, the Clindamicin Hydrochloride showed the highest cell viability compared to Ciprofloxacin Hydrochloride, at 72 hours.

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Resumo: Uma preocupação atual consiste no uso indiscriminado de muitas substâncias sintéticas no controle de pragas na agricultura. Estudos atuais indicam que algumas dessas substâncias podem estar envolvidas em casos de intoxicação de insetos, como as abelhas, que são fundamentais em muitas culturas, devido à atividade de polinização realizada por elas. No Brasil, um dos inseticidas mais usados nas culturas de café, citrus, algodão e cana-de-açúcar é o imidaclopride, que apresenta ação neurotóxica para os insetos. Seus metabólitos circulam por todo o organismo e entram em contato com diversos órgãos. A exposição a doses subletais deste inseticida pode provocar mudanças na fisiologia e no comportamento das abelhas, sendo que tais alterações podem ser mais intensas ou não, dependendo do período de exposição. Dessa maneira, o presente estudo teve como objetivo avaliar os efeitos da exposição crônica a doses subletais (DL50/100, DL50/50 e DL50/10) do inseticida imidaclopride, no cérebro, ventrículo e túbulo de Malpighi de Apis mellifera africanizada. Para isso os órgãos estudados das abelhas expostas e dos controles foram submetidos a análises morfológica, histoquímicas e imunocitoquímica, após 1, 3, 5, 7 e 10 dias de exposição. No cérebro das abelhas expostas foi possível observar alterações morfológicas, histoquímicas e imunocitoquímicas nos lobos ópticos de todos os grupos expostos, enquanto que nos corpos pedunculados observou-se tais alterações apenas no grupo exposto à DL50/10. Já nos lobos antenais as alterações não foram observadas. No ventrículo das abelhas de todos os grupos expostos ao inseticida, a análise morfológica permitiu observar de uma maneira geral um aumento na quantidade de células eliminadas no lúmen, na quantidade de secreção apócrina eliminada no lúmen e na quantidade de halos pericromatínicos nas células ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The indiscriminate use of synthetic chemicals to control pests in agriculture is not a new concern. Recent studies indicate that some of these substances are involved in cases of poisoning bees, which are fundamental in many cultures due to the activity of pollination. In Brazil, an insecticide widely used on crops of coffee, citrus, cotton and sugar cane, is imidacloprid, which is neurotoxic to insects. However, its metabolites circulate throughout the body and come into contacting with another organs. Exposure to sublethal doses of this insecticides causes changes in physiology and behavior of bees, and these changes can be more intense depending on exposure period. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of chronic exposure to sublethal doses (DL50/100, DL50/50 and DL50/10) of imidacloprid in the brain, midgut and the Malpighian tubules of africanized bees (Apis mellifera). For this, the organs of treated and untreated bees were subjected to morphological, histochemical and immunocytochemical techniques, dissecting the bees after 1, 3, 5, 7 and 10 days. In the brains of exposed bees it was possible to observe morphological, histochemical and immunocytochemical alterations on optic lobes of all bees, whereas in the mushroom bodies, alterations was observed only in the group exposed to DL50/10. The antennal lobe presented no alterations after the treatment in all doses. In the midgut of all exposed groups of bees, morphological analysis showed in general an increase in the number of digestive cells and apocrine secretion eliminated in the lumen and in the number of peripherical chromatin halos were also increased. The histochemical techiniques confirmed the presence of pyknotic nuclei, showing the presence of nuclear fragments and degenerated areas in cytoplasm of digestive cells. The immunocytochemical technique showed no presence of positive nuclei for Tunel reaction in ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Osmar Malaspina / Coorientador: Thaise C. Roat / Banca: Elaine Cristina Mathias da Silva Zacarin / Banca: Maria Aparecida Marin Morales / Mestre

Orientador: Márcia Carneiro Valera. / Banca: Samira Esteves Afonso Camargo / Banca: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Banca: Simone Helena Gonçalves de Oliveira / Banca: Luana Marotta Reis de Vasconcellos / Resumo: A proposta deste estudo foi avaliar a citotoxicidade dos peróxidos de hidrogênio (PH) e carbamida (PC), para uso caseiro e profissional, sobre cultura de fibroblastos de mucosa de tecido gengival humano (FMM1). As células utilizadas foram cultivadas em DMEM e após 24 horas foi colocado meio de cultivo condicionado com os agentes clareadores: G1- PC 35% sem fotoativação (SF); G2- PC 35% ativado por luz halógena; G3- PC 35% ativado por diodo emissor de luz (LED); G4- PC 37% SF; G5- PC 37% ativado por luz halógena; G6- PC 37% ativado por LED; G7- PH 3% SF; G8- PH 7,5% SF; G9- PH 9,5% SF; G10- PC 10% SF; G11- PC 15% SF e G12- PC 20% SF. Uma curva padrão de viabilidade celular foi obtida a partir de células que não receberam tratamento (controle). O ensaio com MTT foi realizado após 24 e 48 horas, para avaliar a viabilidade celular. Paralelamente, foi medido colorimetricamente a quantidade de PH liberado nas condições experimentais. Os dados da viabilidade celular obtidos foram analisados estatisticamente através dos testes ANOVA e Tukey, (p<0,05). Todos os grupos apresentaram diferença significativa em relação ao controle. Dentre os agentes clareadores para uso profissional o PC 37% apresentou maior citotoxicidade e quantidade de peróxido de hidrogênio liberada que o PC 35%. A ativação por luz halógena ocasinou maior citotoxicidade e maior quantidade de PH liberado. Dentre os agentes clareadores para uso caseiro a base de peróxido de hidrogênio houve uma maior taxa de sobrevivência celular na concentração mais baixa de peróxido de hidrogênio (PH 3%); nos clareadores a base de peróxido de carbamida houve uma maior taxa de sobrevivência celular na concentração mais baixa de peróxido de carbamida (PC 10%). A taxa de sobrevivência celular foi significantemente menor após 48 horas. Concluiu-se que a citotoxicidade foi proporcional à concentração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the citotoxicity of hydrogen peroxide (HP) and carbamide peroxide (CP) on fibroblasts from mucosa of human gingival tissue (FMM1). The cells were cultivated in DMEM and was placed in contact with conditioned medium with bleaching agents: G1- 35% CP without curing, G2-35% CP activated by halogen light; G3- 35% CP activated by light emission diode (LED); G4- 37% CP without curing; G5- 37% CP activated by halogen lamp; G6- 37% CP activated by LED; G7- 3% HP without curing; G8- 7.5% HP without curing; G9 - 9.5% HP without curing; G10- 10% CP without curing, G11-15% CP without curing, and G12- 20% CP without curing. A standard curve of cell growth and viability was obtained from cells that received no treatment (control). The MTT test was performed after 24 and 48 hours to assess the viability and cell growth. In parallel, was measured the amount of PH released under the experimental conditions. The data of cell viability were statistically analyzed by ANOVA and Tukey's tests (p <0.05). All groups showed significant differences in relation to the control group. Among the bleaching agents for office application, the 37% CP showed higher cytotoxicity and the 35% CP released the higher quantity of hydrogen peroxide. The activation by halogen light promoted the higher cytotoxicity and higher HP released. Among the home bleaching agents based on hydrogen peroxide there was a higher rate of cell survival in low concentration of hydrogen peroxide (3% HP); the bleaching based on carbamide peroxide had a higher cell survival rate in low concentration of carbamide peroxide (CP 10%). The cell viability was significantly lower after 48 hours. It was concluded that the cytotoxicity was related to the concentration of bleaching agent and the curing with halogen light increased the hydrogen peroxide release. / Doutor