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Bioecologia e manejo da broca-dos-citros Diploschema rotundicolle (Serville, 1834) (Coleoptera: Cerambycidae) / not availableLaerte Antonio Machado 08 May 1998 (has links)
O objetivo deste trabalho foi conhecer aspectos relacionados à bioecologia da broca-dos-citros, Diploschema rotundicolle, com a finalidade de estabelecer um sistema de manejo integrado, através da catação manual de ramos atacados pelo inseto na época da oviposição (controle cultural) associado ao fungo Metarhizium anisopliae (controle biológico). Para o estudo da bioecologia utilizou-se 32 plantas de citros, (Citrus sinensis, da variedade Natal com 18 anos de idade, nas quais consideraram-se 3 partes (baixa, média e alta), para verificar se havia preferência das fêmeas, na ocasião da oviposição, por uma destas partes do vegetal. Os levantamentos foram semanais, durante um período de 3 anos e todos os ramos retirados com os sintomas de ataques do inseto foram levados ao laboratório, onde foram abertos para a constatação da presença da larva e possíveis ocorrências de inimigos naturais. Comparou-se em 2 experimentos de campo, 1989 e 1990, a eficiência do controle cultural realizado pelo produtor com o da equipe de pesquisa, sempre associado ao controle biológico com M. anisopliae. No primeiro, o fungo foi aplicado mediante a introdução de lagartas de Galleria mellonella infectadas (inseto vetor), no interior do canal aberto pela larva da broca-dos-citros e no segundo, comparou-se o efeito do patógeno aplicado na forma de pó. Os estudos da flutuação populacional evidenciaram um período de oviposição para D. rotundicolle, com maior freqüência entre os meses de março a junho e que as fêmeas preferem as partes baixas e medianas da planta para ovipositar, sendo que nestes locais a espécie apresentou maior viabilidade larval. Os resultados das catações manuais realizadas pela equipe de pesquisadores, assim como o controle biológico mediante as 2 formas de aplicações do fungo, foram eficazes no controle de larvas de D. rotundicolle. Já o controle cultural realizado pelo citricultor não foi eficiente em nenhum dos experimentos. / not available
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Avaliação dos efeitos do inseticida-acaricida clorfenapir (Pirrole) sobre o ácaro da leprose, Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939), através de nova metodologia para bioensaios / not availableRubens Mazzilli Louzada 16 April 1998 (has links)
Com o objetivo de testar os efeitos de doses sub-letais inseticida-acaricida Clorfenapir (Citrex 24SC), pertencente ao novo grupo químico conhecido por Pirroles, sobre adultos, larvas, ninfas e ovos do ácaro de leprose Brenpalpus phoenicis (Geijskes, 1939), uma nova metodologia para a condução de bioensaios foi desenvolvida. Os bioensaios foram conduzidos em uma arena montada sobre o fruto da laranja. A água foi utilizada como barreira em substituição ao tanglefoot R o que proporcionou um ambiente estável e constante para o desenvolvimento dos ácaros, além de diminuir a mortalidade impedir a sua fuga de ácaros. Os frutos foram tratados com os acaricidas através de dois métodos distintos: imersão pulverização em Torre de Potter. A metodologia foi eficiente para a condução dos bioensaios e permitiu concluir que a dosagem de 1,92 g i.a/100 L, mesmo causando três semanas após a dos tratamentos, mortalidade média de fêmeas de 89% nos três bioensaios, foi a mais adequada para avaliar os efeitos do clorfenapir na população remanescente de B. phoenicis / not available
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Monitoramento da suscetibilidade de populações de Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) (Acari: Tenuipalpidae) a acaricidas organoestânicos em citros / not availableRoberto Hiroyuki Konno 18 October 2000 (has links)
principal objetivo do presente trabalho foi o de coletar informações básicas para a implementação de um programa de manejo da resistência de Brevipalpus phoenicis (Geijskes, 1939) a acaricidas organoestânicos em pomares de citros do Estado de São Paulo. Inicialmente, as linhas básicas de suscetibilidade aos acaricidas óxido de fenbutatin e cihexatin foram obtidas para uma população suscetível de referência de B. phoenicis através de um bioensaio de contato residual. Baseado na curva de concentração-resposta dessa população para os dois acaricidas, a concentração diagnóstica de 180 mg de [IA] / L de água destilada foi definida para ser utilizada em programas de monitoramento da suscetibilidade de populações de B. phoenicis a esses acaricidas. Posteriormente, foram realizados estudos de persistência de resíduos de óxido de fenbutatin em discos de folha de citros mantidos em diferentes condições de umidade relativa (30, 50, 70 e 90% de UR). Os resultados demonstraram que o fator umidade não apresentou efeito significativo na atividade desse acaricida para uma possível discriminação da resistência de B. phoenicis a óxido de fenbutatin. E por último, foi realizado um levantamento da suscetibilidade aos acaricidas óxido de fenbutatin e cihexatin em populações de B. phoenicis coletadas em pomares comerciais com diferentes regimes de uso de acaricidas organoestânicos nos últimos 5 anos. Todas as populações testadas apresentaram suscetibilidade a óxido de fenbutatin e cihexatin semelhante ao da população suscetível de referência, com exceção de uma população que apresentou uma porcentagem de sobrevivência a cihexatin (10,7%) significativamente maior do que a da população suscetível na concentração diagnóstica. Portanto, apesar do intenso uso de acaricidas organoestânicos para controle de B. phoenicis em citros no Estado de São Paulo, as populações desse ácaro ainda apresentam uma alta suscetibilidade a acaricidas ) óxido de fenbutatin e cihexatin. / not available
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Otimização da criação de Ageniaspis citricola Logvinovskaya, 1983 (Hymenoptera: Encyrtidae) em laboratório e sua adaptação no Estado de São Paulo / not availablePatrícia Milano 05 March 2002 (has links)
A pesquisa teve como objetivo otimizar a criação em laboratório de Ageniaspis citrícola Logvinovskaya, 1983, parasitóide específico de Phyllocnistis citrella Stainton, 1856, Lepidoptera - Gracillariidae, minador-dos-citros; bem como verificar a adaptação do parasitóide no Estado de São Paulo. Os bioensaios relacionados à otimização da criação de A. citrícola foram desenvolvidos no laboratório de Biologia de Insetos do Departamento de Entomologia, Fitopatologia e Zoologia Agrícola da Escola Superior de Agricultura"Luiz de Queiroz"(ESALQ), campus de Piracicaba da Universidade de São Paulo (USP). A adaptação do parasitóide no Estado de São Paulo foi verificada através de levantamentos realizados no período de novembro de 2000 a fevereiro de 2001, em 16 pomares pertencentes ao grupo FISCHER S/A Agropecuária. Na otimização da criação de A. citrícola, observou-se que a proporção de 2:1 (casais de P. citrella / planta) em tubetes foi a mais adequada para a obtenção de ovos para a criação do minador-dos-citros e do parasitóide. Em função dos resultados obtidos com mudas de citros de dois tamanhos, pode-se inferir que o sistema de produção de P. citrella em tubetes é mais econômico, ocupando menos espaço do que o sistema em mudas de 10 meses facilitando experimentos em condições controladas. O comportamento do minador foi variável entre variedades de citros, em testes de confinamento e de livre escolha. Não existiu diferença de parasitismo por A. citrícola entre ovos e lagartas de 1º ínstar de P. citrella. Considerando-se a média de pupas por hospedeiro, viabilidade pupal e a duração do ciclo de A. citrícola, deve ser recomendada a temperatura de 25 graus C para a criação do parasitóide em laboratório. Em liberações inoculativas, não houve diferenças na emergência de A. citrícola em copos plásticos ou tubetes mantidos no campo e nem na idade das pupas a serem liberadas. O parasitóide, três anos após sua introdução no Brasil, está completamente adaptado, especialmente nas regiões sul e centro do estado de São Paulo, predominando em relação à espécie mais abundante anteriormente à sua introdução, Galeopsomyia fausta LaSalle. / not available
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Dinâmica populacional de Phyllocnistis citrella Stainton (Lepidoptera: gracillariidae) e de parasitóides em pomares orgânicos de citros / Population dynamics of Phyllocnistis citrella stainton (lepidoptera: gracillariidae) and parasitoids in citrus organic orchardsEfrom, Caio Fabio Stoffel January 2006 (has links)
Avaliaram-se aspectos da dinâmica populacional do minador-doscitros, Phyllocnistis citrella (Lep.: Gracillariidae), e de seus parasitóides, por amostragens quinzenais, de julho/2003 a junho/2005, em dois pomares sob manejo orgânico, um de tangerineira ‘Montenegrina’ (Citrus deliciosa) e outro do tangoreiro ‘Murcott’ (C. sinensis x C. reticulata), em Montenegro (29°37’51” S, 51°28’10” W), RS. Em cada ocasião de amostragem, em 24 plantas sorteadas, examinaram-se todas as folhas contendo câmaras pupais do minador. Em laboratório, a porção da folha com a câmara foi individualizada em tubos de ensaio, mantidos em câmara climatizada até a emergência dos parasitóides ou de P. citrella. De julho/2004 a junho/2005, também coletaram-se oito brotos/planta, de 12 plantas de cada pomar e instalou-se 12 armadilhas/pomar para captura de adultos do minador. Dos brotos registrou-se o número de folhas, minas, ovos, lagartas e pupas de P. citrella e de parasitóides. Estimou-se, nos dois anos, o número de brotos das copas das plantas. O padrão de colonização e uso do recurso pelo minador foi semelhante nos pomares. No verão e outono, verificaram-se as maiores densidades de minas, ovos, lagartas e pupas de P. citrella. O número médio de adultos e imaturos de P. citrella foi semelhante entre as variedades. Registraram-se os parasitóides Ageniaspis citricola, Cirrospilus neotropicus, Cirrospilus floridensis, Elasmus sp. 1 e Chrysocharis vonones. A diversidade de parasitóides foi semelhante entre as variedades e diferente entre os anos. Cerca de 60% da brotação anual escapa do ataque do minador. A temperatura máxima teve maior influência sobre o minador e os parasitóides, mas após o estabelecimento, P. citrella também apresenta correlação com os fluxos de brotação. O parasitismo sobre P. citrella foi de 23,3% em ‘Montenegrina’ e 24,9% em ‘Murcott’. Os períodos de estiagens durante o trabalho, podem ter influenciado as populações do minador e de parasitóides. / Aspects of population dynamics of Phyllocnistis citrella (Lep.: Gracillariidae) the citrus-leaf-miner and its parasitoids were evaluated through fortnightly samplings from July/2003 to June/2005 in two orchards organically managed: one of tangerine cultivar Montenegrina (Citrus deliciosa) and the other of tangor Murcott (C. sinensis x C. reticulata), in Montenegro (29°37’51” S, 51°28’10” W), RS. At each sampling occasion, in 24 randomly selected trees, all leaves containing the leaf-miner pupal chambers were examined. In laboratory, the leaf portion containing the miner pupal chamber was individualized in a glass tube and kept in controlled conditions until the emergence of parasitoids or P. citrella. From July/2004 to June/2005, eight shoots per plant were collected from 12 plants in each orchard and 12 interception traps/orchard were installed to capture adults of P. citrella. The number of leaves, miners, eggs, larvae and pupae of P. citrella and parasitoids were registered in each shoot. The number of shoots per plant canopy was estimated in the two years. The colonization pattern and resource usage by the miner was similar in both orchards. The highest densities of mines, eggs, larvae and pupae of P. citrella were verified at summer and autumn. The average number of adults and immatures of P. citrella was similar among the cultivars. The parasitoids Ageniaspis citricola, Cirrospilus neotropicus, Cirrospilus floridensis, Elasmus sp. 1 e Chrysocharis vonones were registered. The parasitoids diversity was similar among the cultivars and different among years. About 60% of the annual flushing scape from leaf-miner attack. The maximum temperature had a greatest influence on the citrus-leaf-miner and its parasitoids, but after its establishment, the P. citrella shows correlation with the flushings. The parasitism attained 23,3% in Montenegrina and 24,9% in Murcott. The droughty periods along the study could be influenced the populations of the miner and parasitoids
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Produção de porta-enxertos cítricos em recipientes e ambiente protegido no Rio Grande do SulSchafer, Gilmar January 2004 (has links)
O objetivo deste trabalho foi o de verificar a influência de diversos substratos sobre o desenvolvimento vegetativo inicial de porta-enxertos cítricos; avaliar a influência do tamanho de tubetes no desenvolvimento inicial e depois da repicagem de porta-enxertos; testar dois sistemas de irrigação; avaliar dois métodos de propagação inicial de porta-enxertos; testar a influência de diferentes densidades de empacotamento nas características físicas dos substratos e na germinação de porta-enxertos; avaliar a eficiência de um método não destrutivo no monitoramento de pH e da salinidade do substrato, e verificar o desenvolvimento vegetativo de porta-enxertos cultivados em citropotes com o uso de fertirrigação.
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Detecção e caracterização de Xylella fastidiosa em pomares de citros no estado do Amazonas e em São PauloJansen, Tatiana da Costa 08 September 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008-09-08 / SUFRAMA - Superintendência da Zona Franca de Manaus / The Chlorosis Variegad of Citrus (CVC) popularly known as small yealow is a
disease that is attacking the Brazilian orchards since 1987, with the causal agent the
bacterium Xylella fastidiosa that colonizes the xilematic vessels mainly of sweet
oranges (Citrus sinensis). In the states of São Paulo and Minas Gerais the disease
has great impact especially in the north, northeastern state of Sao Paulo and Minas
Gerais triangle, regions of warm climate where the bacteria presents major conditions
for growth in xilematic vessels. There were isolated strains of X. fastidiosa of thirteen
municipalities between Sao Paulo and Minas Gerais. The strains of X. fastidiosa in
seedlings were inoculated in a greenhouse where there are differences in symptoms
of plants and bacterial virulence. Among those inoculated strains of the municipalities
Neves Paulista, Matão, Jeriquara and had greater frequency of symptoms, since the
municipality Capela do Alto, southern state of São Paulo had the lowest frequency of
symptoms. The CVC has been detected in several Brazilian states, but no reports of
the occurrence of CVC had been done to the state of Amazonas, where the
cultivation of citrus is being commercially exploited by at least three decades. An
evaluation sample was held in Manaus, President Figueiredo, Itacoatiara, Balbina
and Rio Preto da Eva, in the period August to December 2003, March to December
2004 and 2005 and January to March 2006. Were observed symptoms of CVC in
sheets, as chlorotic spots arranged in front of leaves and straw color injuries in the
back. Collected up 10 leafs of each plant for the isolation of the bacterium, extracting
DNA and PCR specific for the identification and confirmation of the occurrence of the
pathogen. According to the results presented were unable to detect the occurrence of
CVC of citrus orchards in the state of Amazonas. / A Clorose Variegada do Citros (CVC) popularmente conhecida como amarelinho é
uma doença que vem atacando os pomares brasileiros desde 1987, tendo como
agente causal a bactéria Xylella fastidiosa que coloniza os vasos xilemáticos
principalmente das laranjas doces (Citros sinensis). A doença apresenta grande
incidência principalmente nas regiões norte, nordeste do estado de São Paulo e
triangulo mineiro, regiões de clima quente onde a bactéria apresenta maiores
condições de crescimento nos vasos xilemáticos. Foram isoladas cepas de X.
fastidiosa de treze municípios entre São Paulo e Minas Gerais. As cepas de X.
fastidiosa foram inoculadas em seedlings em casa de vegetação onde verificou-se
diferenças na sintomatologia das plantas e na virulência bacteriana. Dentre as cepas
inoculadas as dos municípios de Neves Paulista, Matão e Jeriquara apresentaram
maior freqüência de sintomas, já o município de Capela do alto, sul do estado de
São Paulo apresentou a menor. A CVC já foi detectada em vários estados
brasileiros, mas nenhum relato da ocorrência da CVC havia sido feito para o estado
do Amazonas, onde a cultura do citros vem sendo explorada comercialmente por
pelo menos três décadas. Uma avaliação amostral foi realizada em Manaus,
Presidente Figueiredo, Itacoatiara e Rio Preto da Eva, no período de agosto a
dezembro de 2003, março a dezembro de 2004 e 2005 e janeiro a março de 2006.
Foram observados sintomas de CVC em folhas, como, manchas cloróticas dispostas
na parte anterior das folhas e lesões cor palha na parte posterior. Coletaram-se 10
folhas de cada planta para o isolamento da bactéria, extração de DNA e PCR
específico, para a identificação e confirmação da ocorrência do patógeno. Foram
encontrados sintomas de CVC em várias localidades do estado do Amazonas,
Manaus, Presidente Figueiredo e Rio Preto da Eva, as amostram sintomáticas foram
confirmadas por PCR e através do isolamento da bactéria X. fastidiosa. De acordo
com os resultados apresentados foi possível detectarmos a ocorrência de CVC nos
pomares de citros do estado do Amazonas.
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Sorção do Diuron e Sulfentrazone em diferentes tipos de materiais, usados como substrato, para produção de mudas de citros no estado do amazonasFerreira, Ajax de Sousa, 9299284-7345 29 June 2018 (has links)
Submitted by Ilvana Bentes (vovoquinha.ufam@gmail.com) on 2018-09-24T15:40:09Z
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Previous issue date: 2018-06-29 / The citrus cultivation is very important for the state of Amazonas and can generate jobs and
foreign exchange for the state. In this state, weed management has been one of the main
factors that increases the production cost of the crop. Currently, the use of chemical control by
the application of herbicides has been the most used in the control of weeds, however despite
the advantages of this method, it is necessary to know the interactions of these herbicides with
the properties of the soil. In the production of citrus seedlings the substrate is one of the
important inputs for the production of healthy and vigorous seedlings. This work aimed to
quantify the sorption of diuron and sulfentrazone herbicides in different substrates used in the
production of citrus seedlings. Two experiments were carried out in a completely randomized
design and 2x6x6 factorial arrangement was applied with four replicates, two herbicides
(diuron and sulfentrazone), six doses of each herbicide of diuron (0, 250, 500, 1,000, 2,000
and 4,000 g .ha-1 and sulfentrazone (0, 75, 150, 300, 600 and 1,200 g ha-1) and six substrates:
Coconut fiber; soil; black soil of Indian and to mixtures of these with washed sand, in the
first experiment. In the other experiment, a completely randomized design was used in a 2x7
factorial scheme with four replicates, two herbicides (diuron and sulfentrazone) and seven
doses of each herbicide. The same doses of both herbicides were used in the washed sand
substrate (diuron 0 2, 4, 8, 12, 16 and 20 g .ha-1 and sulfentrazone 0, 2, 4, 8, 12, 16 and 20 g
ha-1). The indicator plant used was the cucumber (Cucumis sativus var. Aodai). The evaluated
characteristics were the determination of the I50 value of the test plant for each substrate as a
function of the doses of each herbicide and the estimate of the amount of diuron and
sulfentrazone sorbed in each substrate. The results showed that coconut fiber was the
substrate that presented the highest sorption of the herbicides followed by black soil of
indium and soil and the organic matter contributed as important component of the soil in
sorption of herbicides. / O cultivo de citros representa grande importância para Estado do Amazonas e pode gerar
empregos e divisas para o estado. Neste estado, o manejo das plantas daninhas tem sido um
dos principais fatores que onera o custo de produção da cultura. Atualmente, o uso do controle
químico por meio da aplicação de herbicidas tem sido o mais utilizado no controle de plantas
daninhas, entretanto apesar das vantagens desse controle, há necessidade de se conhecer as
interações desses herbicidas com as propriedades do solo. Na produção de mudas de citros o
substrato é um dos insumos de grande importante para produção de mudas sadias e vigorosas.
Este trabalho objetivou quantificar a sorção dos herbicidas diuron e sulfentrazone em
diferentes substratos usados em produção de mudas de citros. Dois experimentos foram
realizados e adotou-se o delineamento inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2x6x6
com quatro repetições, sendo dois herbicidas (diuron e sulfentrazone), seis doses de cada
herbicidas de diuron (0; 250; 500; 1.000; 2.000 e 4.000 g do ia. ha-1) e sulfentrazone (0; 75;
150; 300; 600 e 1.200 g do ia. ha-1) e seis substratos: Fibra de coco; terriço; terra preta de
índio e a misturas destes com areia lavada, no primeiro experimente. No outro experimento
adotou-se o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x7, com quatro
repetições, sendo dois herbicidas (diuron e sulfentrazone) e sete doses de cada herbicida,
sendo as mesmas doses de ambos os herbicidas utilizados no substrato areia lavada (diuron 0;
2; 4; 8; 12;16 e 20 g do ia. ha-1 e sulfentrazone (0; 2; 4; 8; 12; 16 e 20 g do ia. ha-1). A planta
indicadora utilizado foi o pepino (Cucumis sativus var. Aodai). As características avaliadas
foram a determinação do valor de I50 da planta-teste para cada substrato em função das doses
de cada herbicida e a estimativa da quantidade de diuron e sulfentrazone sorvido em cada
substrato. Os resultados mostraram que a fibra de coco foi o substrato que apresentou maior
sorção dos herbicidas seguido pela terra preta de índio e terriço e a matéria orgânica
contribuiu como componente de importância do solo na sorção de herbicidas.
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\"Detecção precoce da morte súbita dos citros usando fluorescência\" / \"Precocious detection of sudden death citrus using fluorescence\"Jean Carlos Corte Terencio 14 November 2006 (has links)
Atualmente o diagnóstico da morte súbita dos citros (MSC) é realizado através de inspeção visual e coleta do material do porta-enxerto o que confere ao método elevado grau de subjetividade e imprecisão, além de demandar muito tempo para o levantamento de dados de infestação. Este trabalho pretende estudar as mudanças nas propriedades físicas e químicas acarretadas pela MSC em folhas e porta-enxertos de laranjeira doces (Citrus (L.) Osbeck), e desenvolver uma nova metodologia de diagnóstico da doença. Para tanto, folhas, porta-enxertos e seus extratos foram analisados através das seguintes técnicas espectroscópicas: absorção de luz uv-visível, absorção de infravermelho com transformada de Fourier, fluorescência e fluorescência induzida por laser. Além do estudo utilizando técnicas espectroscópicas foram realizados estudos utilizando técnicas de imagem de fluorescência de folhas saudáveis e doentes. Foram coletadas amostras de folhas saudáveis, doentes com a MSC e doentes com o declínio dos citros (DC). A comparação entre estas doenças é primordial visto que no campo os sintomas são muito parecidos, confundindo muito o sistema de avaliação de contaminação. Foram observadas mudanças significativas nos espectros de emissão de fluorescência para os três tipos de amostras e baseados nestas diferenças foi definido um índice capaz de diagnosticar a MSC e o DC. A técnica de imagens de fluorescência também trouxe informações importantes permitindo diferenciar plantas saudáveis e doentes de uma forma muito rápida. A junção da técnica de imagens com as espectroscópicas deu origem a uma nova metodologia de diagnóstico da MSC com potencial de ser muito mais rápida, precisa e não invasiva permitindo análises da folha in natura. / Currently, the diagnosis of citrus sudden death (CSD) is carried out by visual inspection and collection of the rootstock, which causes the method to be inaccurate and allows for much subjectivity, besides demanding much time to examine the infestation data. The present work intends to study changes in the physical and chemical properties resulting in CSD of leaves and rootstock material of sweet orange trees (Citrus (L.) Osbeck), as well as developing a new diagnosis methodology of the disease. Thus, leaves, rootstock and their extracts were analyzed by means of the following spectroscopic techniques: absorption of uv-visible light, absorption of infrared with Fourier transform, fluorescence and laser-induced fluorescence. Besides employing spectroscopic techniques, studies using fluorescence images of healthy and sick leaves were carried out. Samples of healthy leaves, sick leaves with CSD and sick leaves with citrus decline (CD) were collected. Comparison of these diseases is primordial since in the field the symptoms are similar, causing much confusion in the evaluation system of contamination. Significant changes were observed in the spectra of fluorescence emissions for the three types of samples and based on such differences an index capable of diagnosing CSD and CD was defined. The fluorescence image techniques also brought important information, thus allowing to quickly differentiate between healthy and sick leaves. Joining the technique of images with spectroscopy originated a new methodology of CSD, which is potentially much faster, precise and non-invasive, thus allowing in natura analysis of leaves.
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Transformação genética de laranjas \'Pera\' e \'Natal\' (Citrus sinensis L. Osbeck) com o gene atacina A (attA), dirigido por promotores preferencialmente expressos no floema, para resistência a Candidatus Liberibacter spp. / Genetic transformation of oranges \'Pera\' and \'Natal\' (Citrus sinensis L. Osbeck) with the gene attacin A (attA), driven by preferentially expressed in phloem promoters for resistance to Candidatus Liberibacter spp.Carolina Rossi de Oliveira 05 September 2014 (has links)
Atualmente o Brasil ocupa lugar de destaque entre os produtores de citros sendo o maior produtor de laranja doce do mundo. Entretanto, essa produção vem sendo gravemente afetada, por doenças como o huanglongbing (HLB), que tem causado perdas significativas para toda cadeia citrícola. O HLB está associado a bactérias Gram-negativas, restritas ao floema das plantas, denominadas Candidatus Liberibacter spp., que além de reduzir a produção de frutos, podem, em casos mais severos da doença, ocasionar a morte da planta. Uma importante estratégia para controle desta doença é a produção de plantas transgênicas expressando genes, especificamente no local de colonização do patógeno. O objetivo deste trabalho foi a obtenção de plantas transgênicas de Citrus sinensis cvs. \'Pera\' e \'Natal\', contendo o gene atacina A (attA) que codifica um peptídeo antibacteriano, dirigido por promotores preferencialmente expressos no floema: AtSuc2 (transportador de sacarose) ou AtPP2 (proteína de floema 2), clonados de Arabidopsis thaliana, ou CsPP2 (proteína de floema 2) clonado de Citrus sinensis. A identificação de 65 plantas transgênicas foi realizada, por meio da análise de PCR. Foi verificado um número menor de eventos transgênicos, utilizando-se a construção gênica pCAtSuc2/attA em relação ao número de eventos transgênicos obtidos com as construções gênicas pCCsPP2/attA e pCAtPP2/attA. Plantas identificadas como transgênicas pela análise de PCR, foram aclimatizadas e transferidas para casa-devegetação certificada para o cultivo de plantas transgênicas. Análises de Southern blot foram realizadas em plantas aclimatizadas que apresentaram desenvolvimento suficiente, confirmando-se a integração do gene attA. A expressão do gene attA foi confirmada pela análise de RT-qPCR. As plantas transgênicas obtidas neste trabalho, contendo o gene attA dirigido por promotores preferencialmente expressos no floema, serão avaliadas em uma etapa futura para resistência a Candidatus Liberibacter spp. / Currently, Brazil is a major citrus producer and the world\'s largest producer of sweet oranges. However, diseases, such as huanglongbing (HLB) have seriously affected this production, causing significant losses in citrus production chain. HLB is associated with Gram-negative bacterias, restricted to the phloem of plants, called Candidatus Liberibacter spp., which besides reducing fruit production, can lead to plant death. An important strategy to control this disease is the production of transgenic plants expressing genes, specifically at the region of pathogen colonization. The aim of this study was to obtain transgenic plants of Citrus sinensis cv. \'Natal\' and \'Pera\', containing the gene attacin A (attA) that encodes an antibacterial peptide, driven by preferentially expressed in phloem promoters: AtSuc2 (sucrose transporter) or AtPP2 (phloem protein 2), cloned from Arabidopsis thaliana, or CsPP2 (phloem protein 2) cloned from Citrus sinensis. The identification of 65 transgenic plants was performed by PCR analysis. A lower number of transgenic events were verified using the gene construct pCAtSuc2/attA in relation events obtained with the gene constructs pCCsPP2/attA and pCAtPP2/attA. Plants identified as transgenic by PCR analysis were acclimatized and transferred to a greenhouse certified for growing transgenic plants. The Southern blot analyses were performed in acclimatized plants, which had sufficiently developed, confirming the integration of attA gene. The expression of attA gene was confirmed by RT-qPCR analysis. The transgenic plants obtained in this work, containing the gene attA directed by preferentially expressed in phloem promoters, will be further evaluated for resistance to Candidatus Liberibacter spp.
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